Способ фиксации препарата глаза для гистологического исследования

Способ фиксации препарата глаза для гистологического исследования

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Использование: в области медицины и может применяться для фиксации глазных гистологических препаратов, например склеры глазного яблока. Сущность изобретения: препарат глазного яблока обрабатывают 3-5%-ным раствором диметилфосфита, фиксацию проводят 3-5 ч. Затем объект помещают на 2 ч в 2-3%-ный водно-солевой раствор бишофита для смягчения фиксированного объекта. С препаратов , обработанных предложенным способом, получают качественные гистологические препараты за счет исключения ломкости и крошения, возникающих при нарезке . 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР

ГОСПАТЕНТ СССР) «46) 30.08.93. Бюл. ¹ 32

1) Волгоградский государственный медиинский институт

2) А. M Водовозов, А. К, Брель, Р, П. Самув, Л. С. Кондаурова и О. А, Фишер

3) А, M. Водовозов, А, К, Брель, P. П. Самуев, Л. С. Кондаурова и О. А, Фишер

6) Авторское свидетельство СССР

1515091, кл. G 01 N 1/28, 1989, 54) СПОСОБ ФИКСАЦИИ ПРЕПАРАТА

ЛАЗАДЛЯ ГИСТОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕОВАНИЯ

Изобретение относится к медицине, а менно к фиксаторам для гистологических репаратов. Может применяться для фиксаии глазных гистологических препаратов. апример склеры глазного яблока.

Цель изобретения — получение глазных репаратов более высокого качества за счет сключения ломкости и крошения, возникащих при нарезке.

Для выполнения поставленной цели для иксации берут не более 1х1 см объект и омещают его в 3 — 5%-ные водные растворы иметилфосфита, Фиксацию проводят в теение 3 — 10 ч. Затем объект помещают в 2— водно-солевой раствор бишофита на 2 аса, Объект заключают в парафин, готовят резы и окрашивают гистологическими краителями, Объект, помещенный в водно-солевой аствор бишофита, находится в нем 2 ч и осле этого становится более мягким и эла„, . ЖÄÄ 1838784 А3 (я)5 G 01 N 33/48 // G 01 N 1/28 гистологических препаратов, например склеры глазного яблока. Сущность изобретения: препарат глазного яблока обрабатывают 3 — 5 -ным раствором диметилфосфита, фиксацию проводят 3 — 5 ч.

Затем объект помещают на 2 ч в 2 — 3 -ный водно-солевой раствор бишофита для смягчения фиксированного объекта. С препаратов, обработанных предложенным способом, получают качественные гистологические препараты за счет исключения ломкости и крошения, возникающих при нарезке. 1 табл. стичным, при нарезке не крошится и не ломается.

Приготовление водно-солевого раствора бишофита проводили следующим образом: раствор бишофита, приготовленного фабричным способом в следующих соотношениях компонентов:

Хлорид магния 450 — 460 г/л твердого вещества солей

Бромид магния 4-9 г/л

Сульфат кальция 3 — 4 г/л

Хлорид калия до 4 — 5 г/л

Хлорид натрия до 4-5 г/л

Вода до 100 мас. ч.

Общая минерализация бишофита равна

450 — 460 г/л. По внешнему виду зто прозрачная бесцветная или слегка желтоватая беэ запаха жидкость. Раствор бишофита утвержден начальником управления по внедрению новых лекарственных средств и медицинской техники МЗ СССР Э. Бабаян

18 марта 1985 года. Бишофит применяется

1838784 в качестве добавки в топливо при сжигании сернистых мазутов, для пропитки древесины, изготовления дефолиантов, в бальнеологических целях.

Приготовление водно-солевого раствора бишофита провоДили с расчетом на 100 г/л (5 растворов, см, табл. 1).

Закладка объекта проводилась на 0,5, 1, 2, 3, 4, 5 ч, исследовали свойства гистологических препаратов после закладки объекта вначале в раствор бишофита до закладки в водный раствор диметилфосфита, Затем исследовали свойства гистологических препаратов приготовленных: вначале закладывали в раствор диметилфосфита, затем в водно-солевой раствор бишофита.

Как показали исследования; оптимальным временем для закладки обьекта в водно-солевой раствор бишофита было 2 ч, оптимальный раствордля закладкибыл 2 — 3, что соответствовало 2-3 г фабричного бишофита .к 98 — 97 г дистиллированной воды (2-3% раствор водного бишофита). Глазные гистологические препараты, например препарат склеры глазного яблока, были высокого качества и легко проводилась нарезка после того, как объект 3-10 ч находился в

3-5% водном растворе диметилфосфита, хорошо зафиксированный, он несколько размягчался в 2-3% водно-солевом раствора бишофита s течение 2 ч. После этого кусочек склеры, заключенный в парафин, хорошо резался на микротоме. Далее проводили окраску гистологическими красителями, Пример 1. Кусочек склеры глазного яблока размером 1х1 см погружали в.20 мл

3%-ного водного раствора диметилфосфита. Фиксацию проводили в течение 10 часов.

Затем склеру переносили. в 2% водно-солевой раствор бишофита на 2 ч, Проводили нарезку {при приготовлении их нет разрывов, склера не крошится, нет деформаций), Срезы окрашивали гематоксилин-эозином.

Эластические волокна склеры хорошо сохранены, имеют обычную окраску.

П.р и м е р 2. Кусочек склеры глазного яблока размером 1Х1 см погружали в 20 мл

5%-ного водного раствора диметилфосфита на 3 ч. Затем склеру переносили в 3% водно-солевой раствор бишофита на 2 ч. Затем готовили срезы (при приготовлении их нет разрывов, склера не крошится. легко.режится, без деформаций. артефактов). Срезы окрашивали гематоксилин-эоэином. Эластические волокна склеры и собственное вещество хорошо сохранены. имеют обычную окраску, При использовании 0,5%, 1% растворов водно-солевого бишофита наблюдалась недостаточная мягкость склеры для приготовления срезов, склера продолжала крошится, 10 ломаться. При использовании 4% водно-солевого раствора бишофита склера сильно разволокнялась, менялась структура склеры. В связи с перечисленными недостатками использование растворов 0,5, 1 и 4%

15 водно-солевого раствора бишофита представляется нецелесообразным. Кроме того. проводилось исследование на выявление оптимального времени закладки в раствор бишофита. Недостатками в режиме работы

20 0,5 и 1 ч были: недостаточная мягкость склеры, ломкость, При режиме работы 3, 4 и 5 ч наблюдалась деформация эластических волокон склеры, их разволокнение.

Наилучшие результаты получены при использовании вначале раствора диметилфосфита и далее водно-солевого раствора бишофита. В полученных микропрепаратах при таком способе фиксации склеры и режиме фиксации была сохранена эластическая

30 структура склеры, нет разрывов, артефактов, деформаций.

При использовании в качестве фиксатора только одного водно-солевого раствора бишофита наблюдались недостатки: склера

35 была набухшей; плохо резалась, гистологические препараты недостаточно окрашивались, наблюдалась деформация эластических волокон склеры.

При использовании сначала водно-со40 левого раствора бишофита, затем водного раствора диметилфосфита также отмечались недостатки в полученных микропрепаратах; разрывы, дефекты, деформации эластических волокон склеры.

Формула изобретения

Способ фиксации препарата глаза для гистологического исследования, включающий его обработку 3-5%-ным водным рас50 твором диметилфосфита,отличающийся тем, что, с целью повышения качества препарата, дополнительно препарат обрабатывают 2 — 3%-ным водно-солевым раствором бишофита в течение 2 ч.

1838784

Составитель Л. Кондаурова

Редактор С. Кулакова Техред М.Моргентал Корректор M.Шмакова

Заказ 2924 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва. Ж-35. Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101