Способ получения транспортной рибонуклеиновойкислоты
Патент 187033
Классы МПК
Способ получения транспортной рибонуклеиновойкислоты
Иллюстрации
Реферат
ОП ИСАН ИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Ееаз Советеиив
Социалистические
Республик
Зависимое от авт. свидетельства №
Заявлено 21 VI.1965 (№ 1014882/23-4) с присоединением заявки №
Приоритет
Опубликовано 11.Х.1966. Бюллетень ¹ 20
Кл. 12q, 6/01
МПК, C 07с
УДК 547.963.32.07 (088.8) Комитет по делам изобретений и отнрыткй при Совета Министров
СССР
Дата опубликования описания З.XII.19áá
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТРАНСПОРТНОЙ РИБОНУКЛЕИНОВОЙ
КИСЛОТЫ
Предмет изобретения
Известен способ получения транспортной рибонуклеиновой кислоты (т-РНК), заключающийся в том, что биологический источник обрабатывают смесью воды и фенола, причем т-РНТ экстрагируется в водную фазу, водный слой отделяют центрифугированием, т-РНК очищается сорбцией из водных растворов на целлюлозном ионообменнике — диэтиламиноэтилцеллюлозе, элюируется растворами солей и осаждается спиртом.
С целью получения продукта высокой степени чистоты, предлагается в качестве аминоалкилцеллюлозы применять аминоэтилцеллюлозу и сорбцию вести непосредственно из водного раствора, полученного после фенольной экстракции. Предлагаемый способ заключается в том, что биологический источник обрабатывают смесью воды и фенола, суспензию центрифугируют и водный слой пропускают через колонку, содержащую аминоэтилцеллюлозу, элюируют т-РНК растворами солей и осаждают из раствора спиртом, Пример, 50 кг пекарских дрожжей, 50 л воды и 50 л 80%-ного водного фенола переме= шивают в течение 2 «пс. Суспензию цетрифу|ируют, и водный слой пропускают через колонку, содержащую 2 кг аминоэтилцеллюлозы. Колонку промывают 40 л воды, 40 л I,ОМ хлористого натрия и т-РНК элюируют 2,0 М хлористым натрием. Злюат, содержащий т-РНК, смешивают с двумя объемами спирта, осадок отделяют центрифугированием н промывают спиртом. Осадок суспендируют и
1,0 М ацетатном буфере рН 5, и суспензию центрифугируют. К надосадочной жидкости
5 добавляют 1,0 л спирта, и осадок отделяют центрифугированием. К осадку т-РНК добавляют 0,3 л 0,1 М карбонат-бикарбонатного бу(;ера рН 10. Раствор выдерживают 1 «ас прн температуре 37 С, подкисляют до рН 5, н
10 т-РНК выделяют осаждением спиртом. Осадок промывают спиртом и лиофильно высушивают. Весь процесс, за исключением процедуры сушки, проводят при температуре 20в
25 С.
15 Получают препарат т-РНК со следующими характеристиками: 2:о",1.: = 20 — 22 ед. оптической плотности; константа седиментации
S2o„= 4,0; акцепторная активность для ряда аминокислот 1,5 — 2,0 ллк лоль на 1 мг т-РНК. Выход 300 — 500 лг/кг дрожжей, 25 Способ получения транспортной рибонуклеиновой кислоты из биологических источников путем экстракцни водно-фенольной смесью, c0p0L:и:I на ионообменнике — аминоалкилцеллюлозе, элюции растворами солей и
30 осаждения спиртом, отличающийся тем, что, с целью получения продукта высокой степени
187033
Составитель Л. М. Иоффе
Ред;иктор Н. П. Белявская Техред А. А. Камышникоза Корректоры: л1. П. Ромашовй и В, Е. Соколова
Заказ 3397/7 Тираж 675 Формат бум. 60Х90 /з Объем 0,1 изд. л. Подписное
ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР
Москва, Центр, пр. Серова, д. 4
Типография, пр. Сапунова, 2 чистоты, в качестве аминоалкилцеллюлозы применяют аминоэтилцеллюлозу и сорбцию ведут непосредственно из водного раствора, полученного после фенольной экстракции.