Патент ссср 189528
Иллюстрации
Реферат
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Соеетскиз
Социалистическик
Республик
Зависимое от авт. свидетельства №
Кл. 301т, 14
Заявлено 15.IV.1965 (№ 1001599/31-16) с присоединением заявки ¹
Приоритет
Опубликовано ЗО.Х1.1966. Бюллетень № 24
Дата опубликования описания 1.1.1967
МПК С 12k
Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров
СССР
УДК 61:576.8.095.22:
576 8 093 4 576 8 .097.29 (088.8) Авторы изобретения М. P. Нечаевская, Г. П. Черкас, Н. Ф. Калиниченко, С. В. Бирюкова и Л. Я, Бережковская
Заявитель Харьковский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток имени И. И. Мечникова
СПОСОБ ОТБОРА ТОКСИГЕН
ГАЗОВОЙ ГАН
Отбор посевных культур с помощью биологического контроля пе позволяет достаточно точно определять токсигепную активность бактерий.
В предлагаемом способе для определения токсигенпой активности бактерий их колонии на плотной питательной среде окрашивают акридип-оранжем и отбирают культуры, имеющие зеленый цвет при люминесцентном микроскопировапии.
Для отбора токсигенных возбудителей газовой гангрены из маточных культур, выращенных на мясной или казеиповой питательных средах в течение 12 — 24 час производят мазки на предметные стекла, без фиксации окрашивают акридин-оранжем (1: 10000), накрывают покровным стеклом и просматривают в люминесцентном микроскопе, Если в окрашенных препаратах отмечается люминесценция отдельных палочек красным, желтым или близкими оттенками этих цветов, или отмечается окраска фрагментов клетки или ее оболочки, то указанную культуру рассевают на агаре, приготовленном па мартеновском бульоне, к которому добавлено 3 j бараньей или лошадиной крови. Чашки с посевами помещают в термостат и при 37" С выращивают
18 — 24 час. Через указанный период из части выросшей отдельной колонии производят мазки на предметные стекла, окрашивают акридин-оранжем и просматривают в люминесцентном микроскопе. В каждом мазке просматривают 5 — 10 полей зрения. Отбирают те колонии, в которых палочки люминесцируют только зеленым цветом. Отобранные колонии снимают иглой и переносят уколом в полужидкий агар с 0,5% глюкозы. Посевы помещагот на 18 — 24 час в термостат при 37=С, после чего пересевают культуры во флаконы со средой, предназначенной для выращивания маточной культуры (мясной или казеиноDoé) . Одновременно засевают культуру на скошенный агар для контроля стерильности в отношении аэробных микроорганизмов. Че15 рез 12 — 24 час из флаконов производят мазки культуры, которые окрашивают акрпдичоранжем и просматривают в люминесцентном микроскопе. Посев в питательную среду, предназначенную для получения токси <а, 20 производят ку.тьтурами, люминесцирующпми только зеленым цветом.
Предмет изобретения
Способ отбора токсигенных возбудителей
25 газовой гангрены, от.гичагощийся тем, что, с целью определения токсигенной активности бактерий, их колонии на плотной питательной среде окрашивают акридин-оран:кем и отбирают культуры, имеющие зеленый цвет при
ЗО люминесцентном микроскопировании,