R (+)-n-пропаргил-1-аминоиндан и его фармацевтически пригодные кислотно-аддитивные соли и фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующей b-форму фермента моноаминооксидазы активностью

R (+)-n-пропаргил-1-аминоиндан и его фармацевтически пригодные кислотно-аддитивные соли и фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующей b-форму фермента моноаминооксидазы активностью

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Использование: в качеаве ингибиторов В-формы фермента моноаминооксидазы Продукт - Р{+)-Ы-пропаргют-1-аминоиндак его фармацевтически пригодные кислотно-аддитивные соли, для хлоргидрата. тт 184 - 185°С. а)+30.90 Реагент 1:Р-{-)-1-аминоиндан Реагент 2: пропаргилхлорид Условия реакции: в среде ацетонтрила в присутствии К СО иомпозция содержащая Р(+ЬМ-тфстартол-Ь-а11Иноиндам в количестве 1 - 20 мг на дозу и фармацевтически приемлемый носитель в форме для орального введения инъекционного раствора, эмульсии свечи. 16 ил, 7 табл.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН

К ПАТЕНТУ

1

ЬЭ

CO

СР

4ь

Комитет Российской Федерации по патентам и товарным знакам (21) 4894485/04 (22) 02.01.91 (46) 30.10.93 Бюп. М 39-40 (71) TEBA Фармасьютикал Индастриз Лтд„Текникон

Рисерч энд Дивелопмент Фаундейшн Лтд

P2) Мойци БХЮдим{1Ц Джон ПМ.Финбергф ); Рут

Леви(К). .Джеффри Стерлинг(Н ); Дэвид Лернер(й );

Тиртсох Бергер-Пасее(Ц Хайли Йеллин(Н ) (73) TFBA Фармасьатикал Индастриз Лтд„Текникон

Рисерч энд Дивелопмент Фаундейшн Лтд (64)

ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, ОВЛАДАНМЦАЯ ИНГИбИРУКИЦЕЙ <8:ФОРМУ (В) RU (1Ц 2001614 Cl (51)5 А61К31 135 С07С21142

ФЕРМЕНТА МОНОАМИНООКСИДАЗЫ АКТИВНОСТЬЮ (57) Использование: в качестве инги бит оров

8-формы фермента моноаминооксидазы Продукт — R(+)-й-пропаргил-1-аминоиндан, его фармацевтически пригодные екпотно-аддитивные соли дпя хлоргидрата, тлю 184 — 185 С, (a}=+30,90.

Реагент 1Я-(-)-1-аминоиндан Реагент 2: пропаргипхпорид, Условия реаарвк в среде ацетонтрила в присутствии К СО иоюозцищ содержащая а

Щ+)-й-пропаргил-т-аминоиидан в количестве 1 —.

20 мг на дозу и фармацевтически приемлемый носитель в форме дпя орального введения, иньекционного раствора, эмульсии свечи 16 ил. 7 табл.

?001(1Л

Изобретение относится к области избирательных необратимых ингиби1оров фер. мента моноаминооксидазы (далее будет называться MAO) и R(+) энантиомера Nпропаргил-1-эминоиндана (далее будет называться PAI), который является иэгирательным необратимым ингибитором В-формы моноаминооксидаэн ого фермента (далее будет называться МАО-B), Изобретение относится также к фармацевтическим композициям, содержащим R(t)PAI который может найти применение для лечения болезни Паркинсона, расстройства памяти и слабоумия типа болезни Алцгеймера (ОАТ), депрессии и гиперфункционального синдрома у детей.

Болезнь Паркинсона, как шиооко изестно, является результатом деградации предсинаптических допаминэргических нейронов в головном мозге с последующим 20 снижением количества нейроперенося щего допамина, который выделяется. Таким образом, неправильное выделение допамина приводит к симптоматическим нарушениям регуляции произвольно сокращающихся мышц или болезни Паркинсона.

Ранее уже существовали различные процедуры для лечения болезни Паркинсона. в настоящее время широко используется, например, ьвод L-gona; месте с декарбоксилазным ингибитором, таким как

1-карбидопа или бенэеразид, Декарбоксилаэный ингибитор защищает молекулу

L-Допа от периферического декарбоксилирования и таким образом гарантирует З5 поглощение L-Äîïà ос авшимися допаминэргическими нейронами в полосатом теле головного мозга. В данном случае L-Допа превращается в допамин, давая в результате повышенные концентрации допамина в "О этих нейронах, В ответ нэ физиолог1 1еские импульсы нейроны способны, таким образом, выделять более высокие каличества допамина. концентрация которых приближается к нормальным требуемь1м концентрациям, <5

Таким образом, такое лечение устраняет симптомы заболеваний и приводит к хорошему состоянию больного.

Однако лечение препаратом 1 Допа имеет свои недостатки, одним из которых является то, что эффективность оптимальна лишь в течение первых нескольких лет после начала лечения. После начально.о периода реакция на препарат снижается и имеют место обратные побочные эффекты, включая дискинезию, переменчи Qc I ь эффективности в течение дня (повышенныйпониженный эффект), и психиатрические симптомы, такие как состояния дизор,it.t! TQции во времени, паранойя и галлюцинации, Этот ослабляющий эффект при лечении LДопа обусловлен рядом факторов, включая естественное прогрессирование заболевания, альтернацию допаминовых рецепторОв вследствие повышенного продуцирования допамина или пониженных концентраций метаболитов допамина, и фармакокинетические проблемы поглощения L-Допа.

Для того чтобы устранить недостатки лечения препаратом L-Допа, были предложены различные способы лечения. в которых L-Допа комбинируется с ингибиторэми

МАО с целью снижения метаболического распада свежеобраэованного допамина.

МАО существует в двух известных формах MAO-A u MAO-Â. которые обладают избирательностью для различных субстратов и ингибиторов, Тэк, например, МЛО-В более эффективно метаболизирует субстраты. такие как 2-фенилэтиламин, и он избирательно и необратимо ингибируется (-,-дефенилом.

Однако следует подчеркнуть, что комбинация L-Допа с ингибитором как МАО-А, так и МАО-В. нежелательно приводит к обратным побочным действиям, связанным с повышенной концентрацией катехоламинов по всей центральной нервной системе. Кроо — îãî. полное ингибирование МАО также н1-.желательно, поскольку оно усиливает действие симпатомиметических аминов. таких KBK тирамин. приводящих к так называемutty "сырному эффекгу".

Поскольку MAO-В, как было показано, является преобладающей формой MAO в головном мозге, TG избирательные ингибиторь этой формы могут рассматриваться кэк воэмо;кный путь снижения разложения допамина. с одной стороны. вместе со снижением до минимума системных эффектов общего ингибирпвания МАО, с другой стороны.

Оди«из этих избирательных MAO-8 ингибитороа (+депренил, был тщательно изу: ен и использован как МАО-В ингибитор для усилен 1 обработки препаратом L-Допа.

Э г обработка (+депренилом обычном благоприятна она не вызывает "сырного эффекта" при дозах, приводящих почти к полному ингибированию МАО-В, Кроме того, введение (-)-депренила в комбинации со смешанным ин ибитором (.-Допа и декарбоксилазы в организм пациентов с болезнью Паркинсона приводит к повышению акинеэии и к общей функциональной емкости. а также к устранен ию изменений типа повь1шения-снижения

Таким образом. (-}-депренил повышает и удли лет эффект 1-Допа и позволяет сни2001614 зить дозу L-Допа, в результате чего ограничиваюся обратные эффекты лечения L-Допа, Однако (-)-депренил сам имеет нежелательные побочные действия, которые включают активацию уже имеющейся язвы желудка и возможные гипертонические явления. Кроме того, (-)-депренил является амфетаминовым производным и метаболизируется. давая в результате амфетамин и метамфетамины, которые могут привести к нежелательным побочным действиям, вызыванным этими веществами, например к повышенной частоте сердцебиения, Известны и другие соединения, которые являются избирательными необратимыми ингибиторами МАО-В, но которые не имеют нежелательных действий, связанных с (+депренилом. Одно такое соединение, а именно N-пропаргил-1-аминоидан. HCI (рацемический РА!.HCI) (патенты Великобритании М 1003686) и N 1037014 и патент США

М 3513244). Это сильнодействующий избирательный необратимый ингибитор МА0-В, не метаболизируется до амфетаминов и не дает нежелательных симпатомиметических эффектов.

В сопоставительных испытаниях на животных рацемический PAI показал значительное преимущество по сравнению с (+депренилом, так, например, рацемический PAI не приводит к значительной тахикардии, не повышает кровяное давление (эффекты, создаваемые дозами 5 мг/кг (+ депренила) и не приводит к сокращению моргательной мембраны и к увеличению частоты сердцебиения при дозах вплоть до 5 мг/кг (эффекты, вызванные (.-)-депренилом при дозах более 0.5 мг/кг). Кроме того, рацемический PAI.ÍÑ(не вызывает усиления действия тирамина на сердечно-сосудистую систему.

Целью изобретения является разделение рацемических РА! соединений и получение энантиомера с ингибирующей активностью МАО-В.

Поскольку депренил имеет такую же структуру, так и PAI, и поскольку. как известно, (+энантиомер депренила, то есть (+депренил значительно более фармацевтически активен, чем(+)-этантиомер, то лишь() этантиомер PAI будет являться активным МАО-В ингибитором.

Однако в противоположность этим эффектам при разделении энантиомеров было найдено, что согласно изобретению (+)-PAI энантиомер является фактически активным

МАО-В ингибитором, в то время как (-) энантиомер обладает черезвычайно низкой МАОВ ингибирующей активностью. Кроме того. (+)РА! энантиомер обладает значительно более высокой степенью избирательности для

МАО-В ингибирования, чем соответствующая рацемическая форма, и может таким образом иметь менее нежелательные по5 бочные действия при лечении укаэанных заболеваний, Эти выводы основаны на экспериментах, проводимых в условиях "ин виво" и "ин витро".

Было показано, что (+)-PAI имеет право10 вращающую R абсолютную конфигурацию.

Это было впервые обнаружено на основании структурной аналогии с депренилом и амфетами нами, Отмечена также высокая степень сте15 реоиэбирательности фармакологического действия между R (+)-PAI u S (-)энантиомером. Соединение R (+)-PAI примерно на четыре порядка величины более активно, чем

S (-)энантиомер в соотношении МАО-В инги20 бирования. Это отношение значительно больше, чем то. которое наблюдается между двумя депрениловыми энантиомерами. Кроме того, при осуществлении некоторых физиологических испытаний (+) депренил

25 показал такую же или даже еще более высокую активность, чем (-)энантиомер.

N-Метил-N-пропаргил-1-аминоиндал (MPAI) является более сильным ингибитором действия МАО, но с более низкой изби30 рательностью к MAO-В, чем к А. В этом случае обнаружено лишь небольшое различие относительных активностей двух разделяемых энантиомеров, что еще более подчеркивает замечательный эффект для

35 случая R (+)-PAI (см.табл.1А).

Соединение R (+)PAt, отвечающее данному изобретению. обладает способностью восстанавливать память, благодаря чему оно может использоваться для лечения за40 болеваний, связанных с потерей памяти, слабоумием и особенно полезны для лечения болезни Алцгеймера, для лечения депрессии и гиперактивного синдрома у детей.

45 Изобретение охватывает новое соединение R (+)-энантиомер N-пропаргил-1-аминоиндана (R (+)РА!) формулы I!

"ч-СН -C=(:P

Н 2

Н и его кислотно аддитивные соли, пригодные для фармацевтического использования.

55 Изобретение охватывает также приготовление препарата R (+)PAI, фармацевтических композиций, содержащих соединение R (+)PAI вместе с подходящими носителями, и использование R (+)PAt для лечения людей с болезнью Паркинсона. с потерей памяти, 7

2001614 слабоумием типа болезни Алцгеймера и гиперактивным синдромом. R ()РА! может быть получен путем оптического разделения рацемических смесей R u S-энантиомера PAI. Такое разделение может осуществляться общепринятым способом разделения. Это разделение может осуществляться. например, путем препаративной хроматографии в хиральной колонке.

Другим примером возможного способа разделения является получение диастереоизомерных солей с хиральной кислотой, такой как винная кислота, яблочная кислота, миндальная кислота или N-ацетиловые производные аминокислот, такие как N-ацетиллейцин, с последующей перекристаллизацией для выделения диастереоизомерной соли желаемого R энантиомера.

Рацемическая смесь R u S энантиомеров РА! может быть получена как например, описано в патентах Великобритании N

1003676 и N 1037014. Рацемическая смесь

РА! может быть получена также s результате химического взаимодействия 1-хлориндаиа или 1-броминдана с пропаргиламином. Как другой возможный вариант, раце лат может быть получен путем химического взаимодействия пропар иламина с l-l.. девоном с образованием coOTBBTGTBóàùåãо имина; с последующим восстановлением > глеродоаэотной двойной связи имина c:îoòâåòcòâóющим агентом, таким как боргидоид натрия, Согласно изобретению, R энантиомер

PAI может быть получен также .:епосредственно иэ оптически активного R-энантиомера 1-аминоиндана путем реакции с пропаргилбромидом или пропаргилхлоридом в присутствии органического или неорганического основания и при желании в присутствии подходящего растворителя, Подходящими органическими или неорганическими основаниями для использования в указанной реакции являются, например.триэтиламин. пиридин,карбонаты или бикарбонаты щелочногг> металлэ .I т.д, Если реакция протекает в присутствии растворителя, то этим растворителем может быть. например, толуол, метиленхлорид и ацетонитрил. Предпочтительным способом получения указанного соединения является реакция между R-1-аминоинданом и пропаргилхлоридом с использованием с использованием бикарбоната калия как основания и ацетонитрила как растворителя.

Указанная реакция 1-аминоиндина обычно приводит к образованию смеси непрореагировавшего первичного амина, желаемого вторичного юлина и тр..тично(о

55 амина N, N-бис н ропаргил амина. Желаемый вторичный амин. то есть N-пропаргил-1аминоиндан, может быть выделен из данной смеси общеприняты л способом разделения, таким как хроматография, отгонка, избирательная экстракция и т.д.

Исходный материал R-1-аминоиндан может быть получен известными способами (Европейский патент N. 235590), R-1-Аминоиндан может быть также получен путем разделения рацемической смеси R u S энантиомеров, например путем образования диастереоиэомерных солей с хиральными кислотами, или другими известными способами, Как другой возможный вариант, исходный материал R-1-аминоиндан может быть получен путем реакции 1-инданона с оптически активным амином с последующим восстановлением углеродо-азотной двойной связи полученного имина путем гидрогенизации над подходящим катализатором. таким как палладий на угле, окиси платины, никель Рэкел и т.д, Подходящими оптически активными аминами являются, например, один из антиподов фенетиламина или сложного эфира аминокислоты. такой как валин или:! енилаланин. Далее бензиловая N-С связь может быть расщеплена путем гидрогенизации в условиях неинтенсивного перемешивания.

Другим способом получения R-1-аминоиндана яяьляется гидрогенизация оксимовых простых эфиров индан-1-она, где алкильная группа эфира имеет оптически чистый хиральный центр. Согласно другому возможному варианту, нехиральное производное индан-1-она, содержащее углеродо-азотную двойную связь. например амин или оксим, может быть восстановлено восстановителем хирального соединения. таким как комплексное соединение гидрид лития-алюминия и эфедрин. Для получения фармацевтически пригодных кислотно-аддитивных солей соединения R ()РА! свободное основание может химически взаимодействовать с желаемыми кислотами в присутствии подходящего растворителя подходящ ми способами. Аналогичным образом кислотно-аддитивная соль может быть превращена в форму свободного основания известным образом.

Согласно изобретению, соединение R (+)PA! может быть приготовлено в форме композиции, Такие композиции могут включать соединения R (+)PAI или его кислотно аддити в н ые фарм а цевтически пригодные соли вместе с фармацевтически пригодными носителями и/или эксцепиентами. Наппи лер, эти композиции могут быть

2001614

5

20 приготовлены в виде форм для приема орально, парэнтерально, через прямую кишку или трансдермально, Подходящими формами препарата для орального ввода являются таблетки. спрессованные или с нанесенными покрытиями пилюли, драже, лепешки, твердые или мягкие желатиkîâûå капсулы, предьяэычные таблетки, сиропы и суспензии; для парзнтерального ввода согласно данному изобретению предусматриваются ампулы или флаконы, содержащие водный или не водный раствор или эмульсию, для ввода через прямую кишку предусматриваются свечи с гидрофильными или гидрофобными носителями; и для локального нанесения в виде мазей и для трансдермального ввода предусматриваются специальные средства ввода, известные в данной области.

Указанные композиции могут использоваться как таковые для лечения болезни

Паркинсона, заболевания Алцгеймера или депрессии, или же в случае болезни Паркинсона они могут использоваться в сочетании с обычными процедурами лечения препаратом 1 -Допа.

Предпочтительные дозы активного ингредиента. то есть соединений R-PAI B указанных композициях, находятся в следующих пределах: для орального ввода или ввода в виде свечей: 2-20 мг на единичную дозу, вводимую ежедневно, и более предпочтительно 5-10 мг на единичную дозу, вводимую ежедневно; для инъекционно вводимых препаратов. 1-10 мгlмл на единичную дозу, вводимую ежедневно, и более предпочтительно 2-5 мгlмл на единичную дозу, вводимую ежедневно.

На фиг. 1-3 показано графическое воспроизведение результатов согласно примеру

19; на фиг. 4-11 — то же, по примеру 20; на фиг. 12-15 — то же, согласно примеру 21; на фиг. 16 — то же. согласно примеру 22.

Пример 1. Рацемический хлоргидрат

N-пропаргил-1-аминоиндана.

Рацемический 1-аминоиндан (10,0 г) и

10,4 r карбоната калия вводят в 75 мл ацетонитрила. Полученная суспензия нагревается до 60 С и вводятся по каплям 4,5 г пропаргилхлорида.

Смесь перемешивается при 60"С в течение 16 ч. после наибольшая часть летучих веществ удаляется путем отгонки в вакууме.

Остаток от отгонки распределяется между

10 -ным вводным раствором гидрата окиси натрия и метиленхлоридом. Органическая фаза высушивается, растворитель удаляется путем отгонки. Остаточный продукт подвергается испарительной хроматографии на силикагеле с использованием для элюиро25

55 вания сл",еси 40"-,ь этилацетат и 60 гексана.

Фракции, содержащие желаемое соединение в виде свободного основания, соединяются и элюант вытесняется простым эфиром. Эфирный раствор обрабатывается газообразной HCI, образующийся осадок извлекается путем фильтрации с отсосом и перекристаллизовывается из изопропанола с образованием 7,3 r желаемого конечного соединения с т-рой плавления

182-184 С.

Данные хроматографического и спектроскопического анализа соответствуют опубликованным в литературе данным (CLIJA N. 3513244) и аутентиому образцу.

ЯМР (д, СОС!з): 2,45 (2Н, м), 2,60 (1Н, т), 2,90 (1 Н, м), 3,45 (1 Н, м), 3,70 (2 Н, д), 4,95 (1 Н, т), 7,5 (4Н, м) ч/млн.

Пример 2. Хлоргидрат S (+N-Пропаргил-эминоиндана.

Указанное желаемое соединение в форме свободного основания извлекается путем разделения рацемической смеси свободного основания из примера 1 на Хирацеле OJ (целлюлозо-трис(пара-метилбензоат)) в колонке препаративной жидкостной хроматографии высокого разрешения при элюировании смесью 10% изопропанола/

/90 гексана и с извлечением первого элюированного основного пика. Полученное масло превращается в конечное желаемое соединение (хлоргидрат) путем обработки

10 -ного диэтилэфирного раствора данного масла газообразным HCI, полученный осадок извлекается путем фильтрации с отсосом. ()n = -29,2 (1, этианол). T-pa плавления 182-184 С. Другие данные хроматографического и спектроскопического анализа идентичны данным для хлоргидратной соли соединения иэ примера 1.

Пример 3. Хлоргидрат R-(+)-N-Пропаргил-1-аминоиндана.

Конечное желаемое соединение получают таким же образом, как описано в примере 2, с той разницей, что извлекается второй элюированный пик из колонки препаративной жидкостной хроматографии высокого разрешения: (ск)о = 29,1 (0,87, этанол), т-ра плавления 179-181ОC. Другие данные хроматографического и спектроскопического анализа идентичны этим данным для хлоргидратной соли соединения из примера 1.

Пример 4. Хлоргидрат R-(+)-N-пропарГил-1-дминоиндднд.

R-(-)-1-аминоиндан (12,4 г) и 12.9 г карбоната калия вводят в 95 мл ацетонитрила, Полученная суспензия нагревается до 60 С

2001614

12 и вводится по каплям 5,6 г пропаргилхлорида. Смесь перемешивается при 60 С в течение 16 ч. после чего наибольшая часть летучих удаляется путем отгонки в вакууме.

Остаточный продукт отгонки распреде.яется между 10,-ным водным раствором гидрата окиси натрия и метиленхлоридом.

Органическая фаза высушивается и растворитель удаляется в вакууме, полученный в остатке продукт подвергается испарительной хроматографии на силикагеле при злюировании смесью 40о этилацетата (607,) гексана. Фракции, содержащие свободное основание конечного желаемого соединения, соединяются, растворитель вытесняется простым эфиром. Эфирный раствор обрабатывается газообразным HCI << полученный осадок извлекается путем фильтрации с отсосом и пеоекристаллизовывается из изопропанола, в результате получается 6,8 г конечного желаемого соединения, т-ра плавления 183-135 С, (а )и

+30,90 (2, этанол). Данные спектрального анализа идентичны данным для соединения из примера 1.

Пример 5. Хлоргидрат 8-(-)-N-пропаргил-1-аминоиндана.

Данное желаемое соединение получают способом, описанным в примере 4, с той разницей, что в качестве исхо,,<гого матсриала используется S-(<-)-1-аминочндан. Данный продукт имеет значение (сг )n -30,3 (2 у- . этанол), т-ра плавления составляет 183185 С. Данные спектрального а< aë«за идентичны этим данным для соединения из примера 1.

Пример 6. Ди(В-(+)-N-пропаргил-1аминоиндан) (-тартарат.

В раствор L-тартаровой кислоты (4,4 г) в

48 мл кипящего метанола вводят раствор

В-(+)-N-пропаргил-1- аминоинданового свободного основания (5.0 г) в мета< ог<е (48 мл).

Раствор нагревается с обратнь<. < .:олодильником и в него вводится 284 мл трет-бутилметилового простого эфира «т<. <".н,< 20 мин, Смесь нагревается дополня .;:гено в течение 30 мин, охлаждается, - < лученный осажденный продукт извлекает"л путем фильтрации с отсосом, в результате полу <ается 6.7 г конечного желаемого с<единения.

Т-ра плавления 175-177 C. (а)р (1,5, Н О) =+34,3; Данны" элементарного анализа: Рассчитано для

СгвНз20с<чр, : С 68,26: Н 6,56; И 5, 9. Найдено, : С 68,76: Н 6,57; N 5,61

Пример 7. Хлоргидрат Р-l -"! метилN ïðîïàðãèë-1-аминои <дана

R-(+)-N-пропаргил-1-аминоиндан в форме свободного основания из примера

4 (1.2 r). карбонат калия (0,97 г) и метилио45

20,0 мг:

Хлоргидрат R(+)-N-пропаргил-1-аминоиндана

1,0 дид(1 <) вводят в 15 мл ацетона, полученная суспензия нагревается с обратным холодильником s атмосфере азота в течение 8 ч, После этого летучие вещества удаляются

5 при пониженном давлении, остаточный продукт распределяется между 10 -ным водным раствором гидрата окиси натрия (30 мл) и метиленхлоридом (30 мл), Органическая фаза высушивается и растворитель удаля10 ется в вакууме, Остаток этого удаления подвергается испарительному хроматографическсму разделению на силикагеле с элюированием смесью 40 этилацетата /60 гексана. С>ракции, содержащие конечное

15 желаемое соединение в форме свободного основания, соединяются и растворитель вытесняется простым диэтиловым эфиром.

Эфирный раствор обрабатывается газообр;» .<ым HCI, летучие вещества удаляются в

20 ьакуу<<е <1 остаточный продукт первкристаллизовывается из изопропанола, в результате получается 400 мг конечного желаемого соединения в виде белого кристаллического тг,ердого вещества с т-рой плавления 13425 136 С (ri )о +31,40 (зтанол), RCP (д СОС1з):

2,55(2(-1, м.), 2,7(1Н, ш,с); 2,8(ЗН, с); 3,0(1Н, м), 3.4 (1 Н, м); 3,9 (2Н, ш.с.); 5,05 (1Н, м); 7,7

l4<-i m, ??>

Ii р и .< е р 8. Хлоргидрат S (+N-метил30 N пропаргил-1-аминоиндана.

Указанное желаемое соединение получается так же. как и в примере 7, с той разницей .то в качестве исходного материала используется S-(-)-N-пропаргил-1-ами35 ноиндзн (в форме свободного основания) из примера 5. Все данные физического и спектрального анализа данного конечного соединения идентичны данным соединения из примера 7, за исключением того, что

40 (а jg == -3 1,9 (этанол).

Пример 9. Таблеточная композиция, <"; r.

Хлоргидрат R (+)-N-пропаргил- < -аминоиндана 5,0

Предварительно желатинизирс «анный крахмал 47,0

Водная лдктоза 66.0 У1икрокристаллическая целлюлоза

50 Гликолят натриевого крахмала 3,0

Тальк 1,5

Ст<.зрат магния 0,7

Очи<ценная вода. вводимая согласно

55 требо«ани<о для гранулирования.

I p < м е р 10. Таблеточная композиция, 13

2001614

Хлоргидрат R(+)-N-пропаргил-1-аминоиндана

Сахароза

Натрийсахарин

Метилпарабен

Пропилпарабен

Вкусовое вещество

Глицерин USP

Спирт 957ь-ный, USP

Очищенная вода согласно до 5 мл.

5,0

2250.0

5,0

6,0

1,0

20,0

200 требованию

Водная лактоза 50,0

Предварительно желатинированный крахмал 36.0

Микрокристаллическая целлюлоза 14,0

Гликолят натрийкрахмала 2,2

Тальк 1,0

Стеарат магния 0,5

Очищенная вода, вводимая согласно требованию для гранулирования.

Пример 11. Капсульная композиция, мг

Хлоргидрат Я(+)-й-пропаргил-1-аминоиндана 5,0

Предварительно желатинированный крахмал 10,0

Крахмал 44,0

Микрокристаллическая целлюлоза 25,0

Этил целлюлоза 1.0

Тальк 1.5

Очищенная вода. вводимая согласно требованию для гранулирования.

Пример 12. Иньекционная композиция, мг:

Хло ргидрат R(+)-N-п ропа рГил-1-аминоинданд 5,0

Безводная декстроза 41,0

HCI, вводимый до величины рН 5

Очищенная вода. вводимая согласно требованию для 1 мл

Пример I3 Иньекционная композиция, мг:

Хлоргидрат Й(+)-й-пропаргил-1-аминоиндана 1,0

Хлорид натрия 8,9

НС1, вводимый до величины рН 5

Очищенная вода, вводимая согласно требованию для 1 мл.

Пример 14, Иньекционная композиция. мг:

Хлоргидрат В(+)-М-пропаргил1-аминоиндана 2.0

Хлорид натрия 8.9

HCI, вводимый до величины рН 5

Очищенная вода. вводимая согласо требованию для 1 мл.

П р и и е р 15. Сиропная композиция, мг

П р v, м е р 16. Подьязычные таблетки.

Хлоргидрат R(+)-N-пропаргил-1-аминоиндана

Микрокристаллическая целлюлоза

Водная лактоза

Предварительно желатинированный крахмал

Повидон

Окрашивающее вещество

2.5

20,0

5.0

15.0

100.0

25,0

3.0

10 0,3

Незначительное количество

15 Вкусовое вещество То же

Подслащивающий «гент

Тальк 0,3

Смешивают эксципиенты и активный ингредиент и осуществляют гранулирова20 ние вместе с этанольным раствором Повидона. После сушки и взвешивания осуществляется перемешивание с тальком и прессование.

Пример 17. Подьязычные таблетки

25 PAI. мг:

Хлоргидрат R(+)-N-пропаргил-1-аминоиндана 5,0

Микрокристаллическая целлюлоза

30 Предварительно желатинированный крахмал 12,0

Этилцеллюлоза 0,3

Тальк 0,3

Очищенная вода, вводимая согласно

35 требованию для гранулирования.

Пример 18. Таблеточная композиция, мг;

Хлоргидрат R(+)-N-пропаргил-1-аминоиндана 5.0

40 Леводопа (-)-3-3,4-диоксифенилаланин

Карбидопа

Предварительно желатинированный крахмал 24,0

45 Крахмал 40,0

Микрокристаллическая целлюлоза 49.5

Краситель D и С желтый М 10 0,5

Краситель D и С желтый N. 6 0,02

50 Спирт USP, вводимый по согласно требованию для гранулирования, Приведенные ниже примеры, таблицы и рисунки относятся к биологическим экспериментам. осуществляемым согласно иэо55 бретению.

Пример 19, Ангибирование действия

МАО в условиях."ин витро", Процедура эксперимента.

Источником фермента MAO является гомогенат головного мозга крысы в 0,3 мол

2001!. 4 сахароза, которая центрифугируется с ускорением 600g в течение 15 мин. Поверхностный слой разбавляется примерно о 0,05 мол, буферном растворе фосфата и предварительно инкубируется с последователь«ыми разбавлениями соедине«ий общей формулы I: R (+)-РА1, S (-)-РА! и улцемическим -PAI в течение 20 мин при 37 С, Затем вводятся моченые С субстрэты (2-фенилзтилэмин, та далее будет называться РЕА; 5 — охситриптамин, далее будет называться 5-HT), и инкубирование продолжается еще в тече«ие

20 мин (РЕА) или в течение 30-45 мин (5-HT), Используемые концентрации субстрата составляют 50 мкмол (РЕА) и 1 ммол (5-НТ). В случае РЕА концентрация фермента выбирается таким образом, чтобы входе протекания, реакции метаболизировалось «е более чем 101ь субстрата. Затем реакция прекращается путем ввода трэн лципромина (до конечной концентрэцтл ; 1 ммол), и инкубат фильтруется через «большую колонку с Амберлитом СС-50, доводится до буферного раствора с величиной р1-! 6,3.

Колонка промывается 1,5 мл воды, злюаты сливаются, методом жидкостной сцинтилляционной спектрометрии определяетсч степен. Оадиакгивнос и, rtoc!.or!„I!y аминовые субстраты полностью охрэняюгся в колонке, радиоактивность элюгнrа пз азывает продуцирование нейтрал ь«ых и х,тслотных метэболитов, обив .уемых кэк результат действия MAO. Дейл-.впе ЫАО в образце выражается как процент кс«троп; ной активности при огсут: тат«:лнгиб«торов после вычитания соотеетствутощих зн чений холостой пробы Такое действие, которое определяется с использованием РЕЛ как субстрата. относится к MAO-В, действие, которое определяется с лспользовл«ием 5-НТ, относится к МАО-А, Результаты, И „учается по огдельности в уг ови:I; ин витро ингибирующее действие R (-<-PAI, S (+PAI и рацемических — PAi с I."ин .ний формулы I, vl результаты типи >I l по, -,-;денных экспериментов показаны «э; «I. 1 и

2. Весь эксперитлен т повторяе тса:;и,;азл.

Концентрация ингибитора, дэюще, о 50/,ное ингибирование метаболизма,;5c ;:!-тэ (1С-50), рассчитывается по крит;ы л т, r, пирования, и представле«э в табл ", .1, этих данных видно, что: (а) R (+)-РА! в два раза актив«:е рацемлта для ингибирования МАО-В; (Ь) R (+)-PAI в 29 раз активнее,пi! и«г;,— бирования МАО-В, чем MAO-А; (с) S (-)-PAI составляет лишь i/II il00 пт активности R (+)-PAI для ингибирс,,зния

МАО-B и проявляет небольшую или совсем

1G

25 ,50

4 } лг

: i ll

5т не проав т"-.ет избирательности между МАОВ и MAO-й.

В таил. 1А представлены результаты этоггт же эксперимента с использованием

Б(+) и S(-)Ã,!Р 1(N-метил-N-пропаргил-1-ами«оиндэнэ). Каждый из знантиомеров MPAI менее из" ирателей между ингибированием

МАО-В и tAi!О-А, чем R (+)PAI, Кроме того, R (-)МРЛ! лишь 8 пять раз более антивен, чем

S (-)MP>,! в отношении ингибирования МАОВ в прот«воположность R (+)PAI, который примерно в 7000 рэз более активен, чем S (-)PAt в дэт-:«ом испытании.

Прогтодились также некоторые экспери .енты с Koртикальными тканями человеческого головного мозга, взятыми через 6 ч по.ле смерти, обработэнными как описано о ше. Реву i .Tàòû такого эксперимента привг день нэ фиг, 3 (где R(>)PAI, S(-)PAt и раце-! I«Iec!< I А! соединения — это соединения. зкв«валентные формуле l, Пример 20. Ингибирование действия

MAO в услоииях ин виво: неотложное лечение Г1роцедурэ эксперимента.

Крь:сы (самцы разности SpragueDawley) тлэссой 250+20 г обрабатываются здн;;I из знлнтиомеров или рацемической

l4oр;ло т РА! .утетл внутрибр ошиннОй инъек-!

;ALII (Ip! т и орлльного ввода путем подачи ерг з згнд- (рс) и обсзглаоливаются соотз Ic Ia.".н <о через 1 ч или через 2 ч, определ-;.тся действие МЛО в гоговном мозге и в пе-они тз.,итл укззанным способом. Колиас гво белл» г ри каждом инкубировании опр =целлет с- . "тетодом Follr!-Lowry, активность фермента рассчитывается как нмол метаболиз.трован ого субстрата на час инкубации для кэх,т .го мг белка, Действие МА0 в ткаI:ях живо,. ых, обработанных ингибитора ;;I, выражается как процент фермвнтного дейг гв. я и группе контрольных животных, с введи«ным носителем (вода для орального в. ода; l 9 .",-ный солевой раствор для внутр«бо ош., -; юй иньекции, Ip) и которые умерг ал. ю,,- :. клк указано.

Ре, i ь га ы, 1-! «;д н из дозированных концентрац. й, иепг льзуемых с лекэрс" вами ингибитора ли, « . длвала каких-либо явных

«ии з Гтоведении.

Р...,таты представлены на фиг. 4-11.

rior;!Ie а утрибрюшин«ого ввода соедине«н«!т (- )-РА давало 907-ное ингибирован т» действия MAO-В при дозе 0,5 мг/кг. Та же сэмл: доза давала лишь 20 -ное ингибировэ«ие действие MAO-А. В случае оральНОГО Лт.еда та Л<Е дОЗа R (+)-PAI даеаЛа т30,—;Ioe инг :1}ирование МАО-В без замет«ото и«гт биpования МАО-А, В Основном получены nj., тнэковые результаты для инги17

20016! 4

5

15

25

55 бирования печеночного MAQ как и для мозгового МАО, Обеспечиваемое укаэанными дозами 50 -ное ингибирование МАО-А и

МАО-В (1С-50) рассчитывалось по кривым ингибирования и показано в табл. 2. Эти данные показывают: (а) что ингибирующее действие соединения R (+)PAI на МАО сохраняется в организме крыс в условиях "ин виво", (б) что в условиях "ин виво" сохраняется избирательность ингибирования МАО-В, а не МАО-А соединением R (+)-PAI, (с) что в условиях "ин виво" сохраняется значительно более высокая активность действия (+)-энантиомера по сравнению c (+ энантиомером, (4) что денные соединения эффективно поглощаются после их орального ввода в организм, (е) что данные соединения эффективно проходят через гематоэнцефалический барьер и эффективно ингибируют МАО мозга. Тот факт, что R (+)-PAI примерно в два раза активнее рацемического соединения в отношении ингибирования МАО-В является показателем черезвычайно низкой активности $(-)-PAI в отношении ингибирования

МАО-В.

П р и и е р 21. Ингибирование действия

МАО в условиях "ин виво": длительное лечение.

Процедура эксперимента.

Крысы (те же. что в примере 20: по 4 животных на каждую дозированную порцию) подвергаются обработке соединением й(+)-PAI или рацемической формой тремя дозированными порциями (0,05; 0,1 и 0,5 мг/кг) путем орального ввода, по одной дозе в день в течение 21 дня, затем их обезглавливают через 2 ч после ввода последней дозированной порции. Действие МАО типов

А и В определяется в головном мозге и в печени как описано в примере 20.

Результаты.

Соединение R(+)-PA!. вводимое дозой

0.1 мг/кг, ежедневно дает хорошую степень избирательного ингибирования МА0, составляющую более чем 80 для МАО-В в головном мозге и 207; и менее для МАО-А в головном мозге. При более высокой дозе, составляющей 0,5 мг/кr в день, МАО-А все еще ингибруется менее чем на 507, (фиг, 12 и 13). Печеночный МАО показывает аналогичную степень избирательного ингибирования (фиг,14 и 15). Соединение R(+)-PAI также является более сильным, чем рацемический, форма ингибитора примерно в два раза.

В случае МАО головного мозга: й(+)-PAI имеет более высокую степень избирательного ингибирующего действия на МАО-В, чем рацемическая форма соединения.

Эти результаты показывают, что после длительного лечения данными соединениями избирательность ингибирования МАО-В может сохраняться. Как и в случае других необратимых ингибиторов. степень ингибирования фермента больше при длительных лечениях, чем после ввода единичной дозы лекарства. Соединение R(+)-PA! имеет более высокую степень избирательности ингибирования МАО-В головного мозга, чем рацемическое соединение.

Пример 22. Необратимый характер ингибирования MAO.

Процедура эксперимента.

В организм крыс, по четыре крысы в каждой группе, вводится одиночная доза соединения й(+)-PAI (1 мг/кг), животные умерщвляются через 2. 6, 18, 24, 48 и 72 ч.

Действие МАО-В определяется на всех тканях головного мозга, как описано выше.

Результаты, Результаты представлены на фиг. 16.

Максимальное ингибирдвание МАО-В достигается через 6 ч после инъекции. Действие MAO доходит лишь до 30о контрольного действия через 72 ч после инъекции. Данный эксперимент показывает необратимый характер ингибирования МАО соединением R(+)-PAI.

Пример 23. Усиление сосудосуживающего эффекта тирамина у находящихся в сознании крыс. Процедура эксперимента.

В организм крыс вводится смесь пентобарбиталя (30 мг/кг) и хлоральгидрате (1200 мг/кг) путем внутрибрюшинной инъекции. Левая сонная артерия и яремная вена каннюлируются посредством тонкой полиэтиленовой трубки (сонная артерия) или тонкой трубки из силиконовой резины, подсоединенной к полиэтиленовой трубке (вена), периферический конец которой подводится под кожу к фиксирующей точке позади шеи. Трубка заполняется гепариниэированным солевым раствором. закупоривается тонким стальным стержнем, Животные подвергаются обработке 20 мг хлорамфеникола путем внутримышечной инъекции и затем им дают выздороветь после этой операции в течение ночи. На следующий день крыс помещают в емкость с высокими стенками для воэможности их свободного передвижения. Артериальный катетер подсоединяется к датчику давления через наполненную солевым раствором полиэтиленовую трубку длиной 100 см с узким отверстием. венный катетер подсоединяется к шприцу (1 мл) через трубку такой же длины, которая вместе со шприцем содер19

2001C14

20 жит раствор хлоргидрата тирамина s физиологическом растворе (1 мг/мл).

После периода уравновешивания, составляющего 30-40 мин. осуществля«отся инъекции тирамина (50 или 100 мкг) и замеряются значения кровяного давления.

Продолжительность времени между инъекциями составляет не менее чем 15 мин после доведения кровяного давления до контрольных