Способ получения производных циклоалкилглутарамида или их фармацевтически приемлемых солей

Способ получения производных циклоалкилглутарамида или их фармацевтически приемлемых солей

Реферат

 

Сущность изобретения: продукт - производные циклоалкилглутарамида , где A - (CH₂)₄ ; R - H, Ru R⁴ - H, C₆H₅CH₂ и др. Y - неразветвл. (C₁-C₃) алкилен; R² - H, C₆H₅ и др или их фармацевтически приемлемые соли. Реагент 1: . Условия реакции: осуществляют удаление одной или обеих защитных групп R¹⁷ и R¹⁸ и удаление любых других защитных групп в радикалах R² и R³ с последующим выделением продукта или переводом его в фармацевтически приемлемую соль.

Изобретение относится к ряду циклоалкилзамещенных производных глутарамида, которые являются гипотензивными агентами, используемыми для лечения различных заболеваний сердечно-сосудистой системы, включая гипертонию и разрыв серца.

Согласно описанию, авторами раскрыты некоторые циклоалкилзамещенные производные глутарамида, которые являются ингибиторами цинкзависимой нейтральной эндопетидазы Е.С.3.4.24.11 и которые, таким образом, могут снижать биологическое действие атриального натриуретического фактора и, в частности, являются нитриуретиками, гипотензивными и диуретическими агентами, ценными для лечения различных заболеваний сердечно-сосудистой системы.

Соединения данного изобретения являются также ингибираторами энзима Е. С. 3.4.24.11, и, кроме того, они также могут ингибировать ангиотензивный конвертирующий энзим, другой энзим, который участвует в процессе регулирования давления крови. Таким образом, данные соединения обладают двойным фармакологическим действием, связанным с ингибированием двух ключевых энзимов, принимающих участие в процессе регулирования давления крови, что делает эти соединения особенно ценными для лечения различных форм гипертонии и связанных заболеваний сердечно-сосудистой системы.

Данные соединения описываются формулой где радикал А означает группу (СН₂)₄; R₁ представляет собой Н; R и R₄ каждый, независимо друг от друга представляют собой Н, 5-инданил, (С₁-С₅)-алкил, который может быть замещен одним или двумя алкилами С₁-С₄ или фенилом или циклоалкилом (С₆-С₇), (С₆-С₇)-циклоалкил, который может быть замещен алкилом С₁-С₄, бензил, фенил, замещенный одним или более алкилом С₁-С₄, триметилсилилэтил, 5-(4-метил-1,3-диоксолен-2-онил) метил; пивалоилоксиметил, 1-(циклогексилкарбокси)этил, 1-(пропионилокси) изобутил, 1-(изобутирилокси) этил и 1-(бензилокси) этил; Y означает неразветвленный (С₁-С₃)-алкилен; R² представляет собой водород, фенил, R⁶CONR⁵ или R⁶NT⁵CO-, где R⁵- H, CH₃ или бензил, R⁶ группа формулы R где R⁹ - H, OH, CH₃, фенил (С₁-С₃), алкил, гидроксиметил, R¹²CONH-, R¹²SO₂NH- или (R¹³)₂N-; R¹⁰ и R¹¹ каждый, независимо друг от друга представляет собой Н или (С₁-С₄)-алкил, или R¹⁰ - H, а R¹¹ - амино(С₁-С₄)-алкил, имидазолилметил, фенил, бензилокси (С₁-С₂)-алкил, 4-гидроксифенил, гидроксиметил или 2-метилтиоэтил, или две группы R¹⁰ и R¹¹ вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют пятичленное насыщенное карбоциклическое кольцо или пирролидиновое, которое может быть замещено аминогруппой или бензоилом; R¹² представляет собой (С₁-С₃)-алкил, циклобутил, фенил, 4-хлорфенил, бензил, 2-фурил или 3-пиридил; R¹³ - H, (C₁-C₂)-алкил, или бензил; R³ - означает группу: CH где R¹⁶ - H, 4-OH, 4-(C₁-C₃)-алкокси, 4-этоксикарбонилокси, 4-циклогексилоксикарбонилокси, 3-метилсульфонамидо; радикал R²⁰ - H, метил, ацетил или хлор, алканоил; или радикал R₃ означает группу формулы или их фармацевтически приемлемые соли и их биопредшественники.

Соединения формулы I могут содержать несколько центров асимметрии и таким образом они могут существовать в виде энантиомеров и диастереомеров. Данное изобретение включает оба отдельных изомера, а также смеси изомеров.

Фармацевтически приемлемыми солями соединений формулы I, содержащими кислотные центры, являются те соли, которые образованы основаниями и являются нетоксичными. Примеры включают соли щелочных и щелочноземельных металлов, такие как натриевые, калиевые или кальциевые соли и соли с аминами, такими как диэтиламин. Соединения, содержащие основной центр, также могут образовывать соли при добавлении фармацевтически приемлемых кислот. Примеры включают гидрохлорид, гидробромид, сульфат или бисульфат, фосфат или кислый фосфат, ацетат, цитрат, фумарат, глюконат, лактат, малеат, сукцинат, тартрат, тозилат и лаурилсульфат.

Термин "биопредшественник" в приведенном выше описании означает фармацевтически приемлемое, биологически разлагаемое производное соединений формулы I, которое при введении в организм животного или человека превращается в соединение формулы I. Примеры включают биолабильные сложноэфирные производные и производные амидов или аминокислот соединений формулы I.

Соединения формулы I получают при удалении одной или обеих защитных групп R¹⁷ и R¹⁸ и удалении любых других защитных групп в радикалах R² и R³ в соединении формулы Соединение формулы V получают реакцией соединений формулы III с соединением IV / Реакцию соединений формул (III) и (IV) осуществляют с помощью традиционных методов сочетания амида. Таким образом, в одном способе реакцию осуществляют с помощью реактантов, растворенных в органическом растворителе, например дихлорметане, используя диимидный агент конденсации, например 1-этил-3-(диметиламинопропил)-карбодиимид или N,N'-дициклогексилкарбодиимид, предпочтительно в присутствии 1-оксибензотриазола и органического основания, такого как N-метилморфолин. Реакция обычно завершается в течение 12-24 ч при комнатной температуре, и продукт затем выделяют обычными методами, например, промыванием водой или фильтрованием с целью удаления побочного продукта - мочевины, и выпариванием растворителя. После этого продукт можно очистить кристаллизацией или хроматографически, если в этом есть необходимость.

Далее осуществляют реакцию сложных диэфиров формулы V с получением сложного моноэфира или производных двухосновной кислоты формулы I, где один или оба радикала R и R⁴ представляют собой Н. Условия проведения реакции будут зависеть от природы групп R¹⁷ и R¹⁸ присутствующих в соединении формулы V, и здесь возможны варианты. Так например, когда оба радикала R¹⁷ и R¹⁸ представляют собой бензил, в результате гидрогенизации продукта будет образовываться двуосновная кислота формулы (I), где оба радикала R и R⁴ означают Н. В другом варианте, если один из радикалов R¹⁷ и R¹⁸ означает бензил, а другой - алкил, в результате гидрогенизации будет образовываться сложный моноэфир. Его затем можно подвергнуть гидролизу, если необходимо, и вновь получить двуосновную кислоту. Когда один из радикалов R¹⁷ и R¹⁸ представляют собой трет-бутил, в результате обработки соединения формулы V трифторуксусной кислотой или хлористым водородом образуется соответствующая кислота. Если для радикалов R¹⁷ или R¹⁸ используются другие защитные группы карбоновой кислоты, то для их удаления на конечной стадии должны быть использованы совершенно определенные условия, чтобы получить сложный эфир или двуосновную кислоту формулы I. Например, когда радикал R¹⁷ или R¹⁸ представляет собой триметилсилилэтил, его можно удалить путем обработки фторидом тетрабутиламмония. Любые защитные группы, содержащиеся в R² и R³ также должны быть удалены, и это можно осуществить одновременно с удалением защитных групп, содержащихся в радикалах R¹⁷ и R¹⁸ или на отдельной стадии с помощью методов, соответствующих конкретному типу используемых защитных групп. Так например, когда R² содержит замещенную или защищенную аминогруппу (например, бензиламино, дибензиламино, бензилоксикарбониламино или трет-бутилоксикарбониламиногруппу), то соединения можно превратить в свободные амины путем гидрогенизации или гидролиза.

Кроме удаления любой защитной группы, которую может содержать радикал R², возможно протекание реакций различных химических превращений конечного сложного моноэфира или двухосновной кислоты, как это описано выше. В любом случае целевой продукт может быть получен в виде свободной карбоновой кислоты или она может быть нейтрализована соответствующим основанием и выделена в виде соли.

Соответствующие методики осуществления реакций сочетания и защиты для всех описанных выше стадий и возможные варианты и методики хорошо известны специалистам из соответствующих справочников и будут ясны из приведенных ниже примеров.

Исходные спирозамещенные сложные моноэфиры глутаровой кислоты формулы III можно получить как описано в нашей Европейской патентной заявке 274234. Сложные эфиры аминокислот формулы IV обычно являются хорошо известными соединениями, которые либо производятся в промышленности, либо могут быть получены с помощью стандартных методов, описанных в литературе.

Как отмечалось выше, соединения данного изобретения являются эффективными ингибиторами нейтральной эндопептидазы. Этот энзим участвует в разрушении ряда пептидных гормонов, включая, в частности, разрушение атриального натриуретического фактора (АНФ). Таким образом, соединения данного изобретения, предотвращая разрушение АНФ под действием эндопептидазы Е.С. 3.4.24.11, могут усиливать его биологическое действие и являются таким образом диуретиками, натриуретиками и гипотензивными агентами, которые могут использоваться при ряде заболеваний, в том числе гипертонии, сердечной недостаточности, ангине, почечной недостаточности, предменструальном синдроме, циклических отеках, болезни Меньереса, гиперальдостеронеизме (первичном и вторичном) и гиперкальциурии. Кроме того, вследствие своей способности усиливать действие АНФ соединения данного изобретения могут быть использованы для лечения глаукомы. Другим следствием их способности ингибировать нейтральную эндопептидазу Е.С.3.4.24.11 является эффективность соединений данного изобретения в других областях терапии, включая, например, лечение астмы, воспалительных заболеваний, болей, эпилепсии, болезненных расстройств, слабоумии и гериатрическом смешении, ожирении и болезней желудочно-кишечного тракта (особенно диаррей и воспалительном синдроме кишечника), снижении секреции желудочного сока и лечении гиперрениамии.

Активность против нейтральной эндопептидазы Е.С.3.4.24.11 оценивается по методике, основанной на пробе, описанной J.T. Gafford, R.A. Skidgel, E. C. Erdos, L.B. Hersh. Biochemistry, 1983, 32, 3265-3271.

Этот метод предусматривает определение концентрации соединения, необходимой для снижения на 50% скорости выделения радиомеченной гиппуровой кислоты из гиппурил-L-фенилаланил-L-аргинина под действием препарата нейтральной эндопептидазы из почки крысы.

В отличие от соединений, указанных в описании к европатенту 0274234, соединения настоящего изобретения являются не только активными ингибиторами энзимнейтральной эндопептидазы (НЭП), но также и энзимангиотензинконвертирующего энзима (АКЭ). Это достоинство и сильное двойное действие, проиллюстрированные в прилагаемой табл. 1 с данными действия в лабораторных условиях, не свойственны соединениям европатента 0274234.

Как указано выше, соединения данного изобретения являются также ингибиторами ангиотензивного конвертирующего энзима. Как таковые они могут быть использованы при лечении других различных состояний, для которых используют ингибиторы АСЕ, включая ограничение ишемического поражения миокардом, защита почек от повреждения гиперфильтрации, предотвращение обратимой левой вентикулярной гипертонии, улучшение памяти, контроль познавательной функции, слабоумие и предотвращение реокклюзии с последующей коронарной ангиопластомией или операцией обходной коронарной артерии. Их действие против этого энзима оценивают с помощью модифицированной методики, основанной на пробе, описанной Rohrbach M.S., Aual. Biochem., 1978, 84, 272. Этот метод предусматривает определение концентрации соединения, необходимой для снижения на 50% степени выделения радиомеченной гиппуровой кислоты из гиппурил-L-гистидил-L-лейцина под действием ангиотензивного конвертирующего энзима, выделенного из крысиных почек.

Ингибирующую активность измеряют также in vivo после внутривенного вливания в организм анастезированных крыс, используя методы, описанные I.L. Natoff et al. Journal of pharmacological Methods, 1981, 5, 305, и D.M. Gross et al. J., pharmacol. Exp. Ther., 1981, 216, 552.

Определяют дозировку ингибитора, необходимого для снижения отклина, вызванного внутривенными вливаниями ангиотензина 1 (50 нг пищевой массы) на 50%.

Активность соединений данного изобретения как диуретиков определяется путем измерения их способности увеличивать выход мочи и ионов натрия из организма мышей, насыщенного солевым раствором. В этом опыте самцы мышей (Charles River CDl, 22-28 г) выдерживают без пищи в течение ночи в клетках. Мышам вводят внутривенно через хвостовую вену испытуемое соединение, растворенное в объеме солевого раствора, эквивалентном 2,5% массы тела. Пробы мочи собирают каждый час в течение 2 ч в предварительно взвешенные пробирки и анализируют их на концентрацию электролита. Объем мочи и концентрацию ионов натрия у подопытных животных сравнивают с контрольной группой, которая получала только солевой раствор.

Гипотензивное действие данных соединений оценивается путем измерения падения кровяного давления после орального или внутривенного введения в организм обессоленных, подвергнутых воздействию диуретика крыс с самопроизвольным повышением давления, обессоленных собак с почечно-индуцированной гипертонией или крыс с индуцированной ДОСА/соль гипертонией.

Для введения в организм человека для лечения или профилактики гипертонии, острой сердечной недостаточности или почечной недостаточности, дозировки для орального введения обычно будут составлять от 3 до 1500 мг ежедневно для пациента среднего возраста (70 кг). Таким образом, для взрослого пациента отдельные таблетки или капсулы содержат от 1 до 500 мг активно действующего соединения, в соответствующем фармацевтически приемлемом носителе или паковке для введения в виде единичной или множественной дозы, один или несколько раз в день. Дозировки для внутривенного введения обычно будут лежать в пределах 1-500 мг на дозу. На практике врач определит действующую дозировку, которая будет наилучшим образом соответствовать конкретному пациенту и зависеть от возраста, массы и отклика конкретного пациента. Вышеназванные дозировки являются примерами среднего случая и, безусловно, в конкретных случаях могут быть выше или ниже, и такие дозировки также входят в объем притязаний изобретения.

Для использования в медицинской практике соединения формулы I можно вводить отдельно, но обычно их вводят в смеси с фармацевтическим носителем, выбираемым в зависимости от предполагаемого способа введения и стандартной фармацевтической практики. Например, они могут вводиться орально в виде таблеток, содержащих такие ингредиенты как крахмал или лактоза, или в капсулах, либо самостоятельно, либо в смеси с ингредиентами, или же в виде эликсиров или суспензий, содержащих отдушки или окрашивающие добавки. Их можно вводить парэнтерально, например внутривенно, внутримышечно или подкожно. Для парэнтерального введения их лучше всего использовать в виде стерильного водного раствора, который может содержать другие вещества, например достаточное количество солей или глюкозу, обеспечивающее изотоничность раствора с кровью.

Соединения данного изобретения можно вводить совместно с другими агентами, что может быть необходимо для регулирования кровяного давления при лечении сердечного состояния или легочной недостаточности. Так, например, их можно вводить совместно с дигиталисом или другим стимулирующим сердечную деятельность препаратом, либо с -блокатором, -блокатором, эксогенным АНФ или с калиевым канальным активатором, или другим диуретиком, что определит врач для конкретного пациента или степени заболевания.

Таким образом, в другом аспекте данное изобретение касается фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы I или II или его фармацевтически приемлемую соль, или его биопредшественник, вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.

Данное изобретение также включает соединения формулы I или II или их фармацевтически приемлемые соли или их биопредшественники, предназначенные для использования в медицине, в частности для лечения гипертонии, острой сердечной недостаточности или легочной недостаточности.

Способы получения соединений данного изобретения и промежуточных соединений, используемых при их получении, проиллюстрированы следующими примерами.

П р и м е р 1. N-[1-(2-трет-бутилоксикарбонил-3-дибензиламинопропил)-1-циклоп-ентакарбонил] -O-тет-бутиловый сложный эфир.

К охлажденному льдом раствору 1-(2-трет-бутилоксикарбонил-3-дибензилами- нопропил)-1-циклопентанкарбоновой кислоты (12,7 г, 27 ммоль) в сухом дихлорметане (100 мл) добавили 1-оксибензтриазол (4,2 г, 31 ммоль) и 1-этил-3-(диметиламинопропил)-карбодиимид (7 г, 36 ммоль) и полученный раствор перемешивали при 0^оС в течение 30 мин. К этому раствору добавили (О-трет-бутилтирозин трет-бутиловый сложный эфир (8,4 г, 28,6 ммоль) и N-метилморфолин (5,25 г, 52 ммоль) и раствор оставили стоять в течение ночи при комнатной температуре. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и оставшееся жидкое масло растворили в хлористом метилене и промыли водой (2х),2М соляной кислотой и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (1х), осушили (MgSO₄), раствор отфильтровали и выпарили, в результате чего получили сырой целевой продукт в виде смолы. После перекристаллизации из н-гексана получили указанное соединение в виде кристаллического вещества (13 г, 69%), т. пл. 82-87^оС. Другую партию материала получили после выпаривания верхних фракций и дальнейшей перекристаллизации.

Найдено, %: C 74,12; H 3,69; N 3,87.

C₄₅H₆₂N₂O₆.

Вычислено, %: C 74,34; H 8,59; N 3,85.

П р и м е р ы 2-38. По общей методике, описанной в примере 1, получили следующие соединения, используя в качестве исходных материалов соответствующую карбоновую кислоту и осуществляя реакцию сочетания с соответствующим сложным эфиром аминокислоты. За исключением специально оговоренных случаев, группа -NHCH(R³)CO₂R⁴ является производной из встречающихся в природе аминокислот, имеющих S-стереохимию. Результаты представлены в табл. 2.

Соединения примеров 33-35 являются отдельными изомерами, имеющими S, S-стереохимию.

П р и м е р 39. 1-(2-Бензилоксикарбонилпентил)-1-циклопентанкарбонил-3-мет- ансульфонамид-(R,S)-фенилаланин бензиловый сложный эфир.

А. Смесь 1-(2-бензилоксикарбонилпентил)-1-циклопентакарбонил-3-нитро-(R, S)-фенилалани н бензилового сложного эфира (3 г, 499 ммоль), цинкового порошка (7 г, 107 ммоль) и хлорида аммония (7 г, 131 ммоль) в метаноле (200 мл) кипятили в течение 24 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении, остаток подщелачивали до рН 12 путем добавления 2н.раствора гидроксида натрия и полученную смесь проэкстрагировали этилацетатом (3 х 75 мл). Объединенные экстракты промыли крепким раствором соли, осушили (MgSO₄) и растворитель выпаривали, в результате чего получили 1(2-бензилоксикарбонилпентил)-1-циклопент- анкарбонил-3-амино-(R, S)-фенилаланин бензиловый сложный эфир в виде масла (2,36 г).

б) Метансульфонилхлорид (0,56 г, 0,49 ммоль) и пиридин (0,039 г, 0,49 ммоль) добавили к раствору амина из части (А), описанной выше (0,236 г, 0,41 ммоль) в дихлорметане (5 мл) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Раствор разбавили дихлорметаном (50 мл), промыли лимонной кислотой (1Н, 3 х 5 мл), насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (3 х 5 мл) и водой, осушили и растворитель выпарили при пониженном давлении. Полученное масло пропустили через хроматографическую колонку с силикагелем, элюируя дихлорметаном, а затем смесью дихлорметана и метанола (98/3), в результате чего получили указанный продукт в виде вязкого масла (0,17 г).

П р и м е р 40. 1-(2-трет-Бутилоксикарбонил-3-дибензиламинопропил)-1- циклопентакарбонил-3-метансульфона- мидо-(R,S)-фенилаланин этиловый сложный эфир.

Использовали методику, описанную в примере 39, взяв в качестве исходного соединения 1-(2-трет-бутилоксикарбонил-3-дибензиламинопропил)-1-циклопентанкарбонил-3-н итро-(R,S)-фенилаланин этиловый сложный эфир (из примера 5), и получили указанное соединение в виде масла (3,17 г, 72%).

П р и м е р 41. 1-(2-Карбоксипентил)-1-циклопентанкарбонил-3-метансульфонам-ид-(R,S)-фенилан анин Раствор 1-(2-бензилоксикарбонилпентил)-1-циклопентанкарбонил-3-метансуль-фонамидо-(R ,S)-бензилового сложного эфира (0,16 г) в этаноле (5 мл) и воде (1 мл) гидрировали над палладиевым катализатором на активированном угле (10% , 0,016 мг) при давлении 2,1 кг/см² и комнатной температуре в течение 3 ч. Катализатор отфильтровывали и растворитель выпарили, в результате чего получили пенистый продукт. Этот продукт растерли с диэтиловым эфиром, а затем высушили под вакуумом и получили указанный продукт в виде аморфного вещества (0,45 г).

Найдено, %: C 55,37; H 6,97; N 5,69.

C₂₂H₃₂N₂O₇ 0,5H₂O Вычислено, %: С 55,36; Н 6,96; N 5,87.

П р и м е р ы 42-47. Следующие соединения получили путем каталитического гидрирования соответствующего сложного бензилового эфира по методике, описанной в примере 41.

Результаты представлены в табл. 3.

П р и м е р 47. N-[1-(2-Карбокси-4-фенилбутил)-1-циклопентанкарбонил] -(S)-ти- розин.

Раствор N-[1-(2-бензилоксикарбонил-4-фенилбутил)-1-циклопентакарбонил)-(S)-ти- розин метилового сложного эфира (0,8 г, 1,47 ммоль) в метаноле (8 мл) гидрировали над 10%-ным палладием на активированном угле (100 мл) под атмосферой водорода (1,8 кг/см²) при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь профильтровали через воронку с "arbacel" и выпаривали досуха. Остаток повторно растворили в водном растворе гидроксида натрия (0,5 ммоль, 10 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь промыли диэтиловым эфиром и подкислили до рН1 с помощью соляной кислоты (10%-ной). Водную фазу проэкстрагировали диэтиловым эфиром (х2) и объединенные органические фазы сушили (Na₂SO₄) и выпарили, в результате чего получили указанный продукт в виде пенистого вещества (0,27 г, 40%).

Найдено, %: C 67,24; H 6,85; N 3,26.

C₂₆H₃₁NO₆0,25H₂O Вычислено, %: C 67,54; H 6,97; N 3,03.

П р и м е р ы 48-55. Следующие соединения получили методом металлического гидрирования с последующим гидролизом образующегося сложного моноэфира по методике, описанной в примере 47.

CHCHONH-CH Результаты представлены в табл. 4.

П р и м е р 56. N-[1-(3-аминопропил-2-(S)-трет-бутилоксикарбонил)-1-циклопентанкарбонил] -O-т рет-бутил-(S)-тирозин-трет-бутиловый сложный эфир. N-[1-(2-трет-бутилоксикарбонил-3-диб-ензиламинопропил)-1-циклопентанкарбон- ил] -O-трет-бутил-(S)-тирозин-трет-бутилов- ый сложный эфир (из примера 1, 19 г) растворили в смеси этанол: вода (8:1, 300 мл) и гидрировали под атмосферой водорода (4,2 кг/см²) при комнатной температуре над 20%-ным гидроксидом палладия на активированном угле (2 г). Через 24 ч раствор профильтровали через воронку с "solkafloc" и фильтрат выпаривали, в результате чего получили масло, которое кристаллизовалось. Его растерли с гексаном, охладили и профильтровали, в результате чего получили чистый энантиомер указанного соединения в виде кристаллического вещества (6 г, 42%); т. пл. 122-127^оС.

Найдено, %: C 67,90; H 9,33; N 5,08.

C₃₁H₅₀N₂O₆.

Вычислено, %: C 68,09; H 9,22; N 5,12.

П р и м е р ы 57-78. Следующие соединения получили из соответствующего дибензиламинопропилового исходного материала по методике, описанной в примере 56.

Результаты представлены в табл. 5.

П р и м е р 79. N-[1-(2-(S)-трет-бутилоксикарбонил-3-N-метиламинопропил)-1-цик- лопентанкарбонил)-О-трет-бутил-(S)-тироз- ин-трет-бутиловый сложный эфир.

а) Раствор N-[1-(3-амино-пропил-2-(S)-трет-бутилоксикарбонил)-1-циклопентанка -рбонил] -O-трет-бутил-(S)-тирозин-трет-бути- лового сложного эфира (2,0 г, 1 экв.) и N-метилморфолина 30,55 г, 1,5 экв.) в сухом дихлорметане (17 мл) при перемешивании охладили на льду и по каплям, в течение 20 мин добавили трифторуксусный ангидрид (1,0 г, 1,3 экв.) в дихлорметане (3 мл). Раствор перемешивали в течение 30 мин и в этот период добавили еще одну аликвоту трифторуксусного ангидрида (0,5 г) и раствор перемешивали еще в течение 30 мин. Реакционную смесь разбавили диэтиловым эфиром (10 мл), промыли водой (2 х 10 мл), разбавили соляной кислотой (2 х 10 мл), осушили (MgSO₄), отфильтровали и растворитель выпарили, в результате чего получили N-[1-2-(S)-трет-бутилоксикарбонил-3-триф-торацетамидопропил)-1-циклопентанка рб- онил] -О-трет-бутил-(S)-тирозин-трет-бутил- овый сложный эфир в виде желтой смолы (2,2 г, 94%).

б) Сухой карбонат калия (1 г, 2,0 экв.) добавили к охлажденному, перемешиваемому раствору вышеназванного продукта (2,2 г, 1,0 экв.) и метилйодида (2,0 г, 0,9 мл, 4,0 экв.) в сухом диметилформамиде (10 мл), и смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали ее в течение ночи. Реакционную смесь разбавили этилацетатом (20 мл) и промывали водой (10 мл), разбавленной соляной кислотой (5 х 5 мл), осушили (MgSO₄), отфильтровали и растворитель выпарили, в результате чего получили 3-N-метилтрифторацетамидное производное в виде желтой смолы (1,95 г, 87%).

в) Гидроксид натрия (0,14 г, 1,2 экв.) добавили к охлажденному льдом, перемешиваемому раствору вышеназванного трифторацетамид (1,94 г, 1,0 экв.) в этаноле (10 мл), реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры в течение 1 ч. Реакционную смесь сконцентрировали путем выпаривания растворителя при пониженном давлении и разбавили смесью этилацетата (20 мл) и воды (5 мл). Органическую фазу отделили, а водную фазу повторно экстрагировали этилацетатом (10 мл). Объединенные органические осушили (MgSO₄), отфильтровали и растворитель выпарили, в результате чего получили масло, которое при стоянии закристаллизовалось. После перекристаллизации из гексана получили указанный продукт (1,24 г, 75%); т.пл. 105-109^оС.

Найдено, %: C 68,85; H 9,41; N 4,90.

C₃₂H₅₂N₂O₆.

Вычислено, %: C 68,54; H 9,35; N 4,99.

П р и м е р 80. N-[1-(3-карбокси-2-(R,S)-трет-бутилоксикарбонилпропил)-1-циклоп-ентакарбонил ]-O-иловый сложный эфир.

а) Раствор 1-(3-бензилоксикарбонил-2-трет-бутилоксикарбонилпропил)-1-циклоп-ентакарбоно вой кислоты (2,55 г, 6,53 ммоль) в сухом дихлорметане (40 мл) охладили до 0^оС, обработали 1-гидроксибензтриазолом (0,97 г, 7,18 ммоль), N-метилморфолином (0,86 г, 8,32 ммоль) и 1-этил-(3)-диметиламино-пропил/карбодиимидом (1,64 г, 8,32 ммоль) и смесь перемешивали при 0^оС в течение 10 мин. Добавили О-трет-бутил-(S)-тирозинэтиловый сложный эфир (1,73 г, 6,53 ммоль), реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали ее в течение ночи. Затем из реакционной смеси удалили растворитель при пониженном давлении и полученную смолу оставили стоять еще на 48 ч при комнатной температуре. Затем реакционную смесь обработали этилацетатом (100 мл) и водой (50 мл). Органический слой отделили и промыли водой (2 х 30 мл), насыщенным раствором соли (30 мл), осушили (MgSO₄), отфильтровали и растворитель выпарили, в результате чего получили сырой продукт в виде масла. После хроматографирования на силикагеле с использованием в качестве элюента смеси гексана и диэтилового эфира получили -N-[1-(3-бензилоксикарбонил-2-(R, S)-трет-бутило- ксикарбонилпропил)-1-циклопентан] -карбо- нил-О-трет-бутил-(S)-тирозин этиловый сложный эфир в виде желтого масла (2,56 г, 60%).

Найдено, %: C 69,31; H 8,49; N 2,49.

C₃₇H₅₁NO₈.

Вычислено, %: C 69,67; H 8,06; N 2,20.

б) Полученный выше продукт (2,48 г, 3,89 ммоль) растворили в этанол: водной смеси (9:1, 66 мл) и гидрировали при комнатной температуре под атмосферой водорода (4,2 кг/см²) над 10% палладием на активированном угле (250 мг) в течение 5 ч. Реакционную смесь профильтровали через воронку с "solkaflok", фильтрат выпарили досуха. Из остатка приготовили азеотропную смесь с дихлорметаном (3х) и получили сырой продукт в виде белого вспененного вещества. После хроматографирования на силикагеле и элюирования смесью гексана с этилацетатом получили указанное соединение в виде белого вспененного вещества (1,83 г, 86%).

Найдено, %: C 65,48; H 8,33; N 1,92.

C₃₀N₄₅NO₈.

Вычислено, %: C 65,79; H 8,28; N 2,56.

П р и м е р 81. N-{1-[3-(N²,N⁶-дибензилоксикарбонил-(S)-дизиламино)-2-(S)-трет-бутилоксикарб онилкарбонил} -O-трет-бутил-(S)-тирозин-трет- бутиловый сложный эфир.

Раствор N-[1-(3-аминопропил-2-(S)-трет-бутилоксикарбонил)-1-циклопентакар- бонил]-O-трет-бутил-(S)-тирозин-трет-бути- лового сложного эфира (из примера 56,04 г, 0,73 ммоль) в сухом дихлорметане (10 мл) охладили до 0^оС, обработали 1-оксибензтриазолом (0,13 г, 0,88 ммоль) и 1-этил-(3-диметиламинопропил)-карбодиимидом (0,21 г, 0,88 ммоль), и смесь перемешивали при 0^оС в течение 30 мин. Добавили N²,N⁶-дибензилоксикарбонил-(S)-лизин (0,33 г, 0,80 ммоль) и реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали ее в течение ночи. Реакционную смесь разбавили хлористым метиленом (5 мл) и промыли водой (2 х 10 мл), разбавленной соляной кислотой (1М, 2 х 10 мл), водным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и насыщенным раствором соли (10 мл), осушили (MgSO₄), профильтровали и растворитель выпарили, в результате чего получили сырой продукт в виде масла. После хроматографирования на силикагеле и элюирования смесью гексана с этилацетатом получили указанное соединение в виде вспененного материала (0,55 г, 85%).

Найдено, %: C 67,47; H 7,99; N 5,74.

C₅₃H₁₄N₄O₁₁.

Вычислено, %: C 67,49; H 7,91; N 5,94.

П р и м е р ы 82-141. Следующие соединения получили по методике, описанной в примере 81, используя соответствующие амины из примеров 56-79 и осуществляли реакцию сочетания с соответствующей аминокислотой. Символ Z означает бензилоксикарбонил-N-защитную группу и символ ВОС означает трет-бутилоксикарбонильную группу. Если специально не указано, то радикалы R² и R³ являются производными встречающихся в природе аминокислот, имеющих S-стереохимию.

При осуществлении примеров 85-90, 106, 107, 117-138 и 140 использовали соответствующие амины формулы (VI) из примеров 76-78, имеющие S-стерео- химию.

П р и м е р ы 142-143. Следующие соединения были получены по методике, описанной в примере 81, при использовании в качестве исходного соединения N-метиламина из примера 79.

HHCH Результаты представлены в табл. 7.

П р и м е р ы 144-147. Следующие соединения (см. табл. 8) были получены по методике, описанной в примере 81, при использовании в качестве исходного соединения кислоты из примера 80 и осуществлении реакции сочетания с соответствующим амином.

OC(CH₃)₃ П р и м е р 148. N-{ 1-[3-(N²-метансульфонил-N⁶-трет-бутилокси-карбонил-(S)-лиз- иламино)-2-(R,S)-триметилсилилэтоксикар-бонилпропил]-1-циклопентанкарбонил}- O-трсложный эфир.

Раствор N-{1-[3-(N⁶-трет-бутилоксикарбонил-(S)-лизиламино-2-(R,S)-триметилсил- илэтоксикарбонилпропил)-1-циклопентанка- рбонил)-O-трет-бутил-(S)-тирозин-трет-бут- илового сложного эфира (2,5 г, 3,1 ммоль) в охлажденном на льду дихлорметане (50 мл) обработали пиридином (1,25 г, 15,8 ммоль) и метансульфонилхлоридом (860 мг, 7,5 ммоль) и перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Растворители удалили при пониженном давлении и остаток обработали этилацетатом и разбавленной лимонной кислотой. Объединенные экстракты промыли разбавленным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором соли, осушили и выпарили, в результате чего получили желтое вспененное вещество, которое после хроматографирования на силикагеле и элюировании смесью гексана, этилацетат и метанол (80:20:5) позволило получить указанное соединение в виде бесцветного вспененного вещества (1,92 г, 69%).

Найдено, %: C 58,64; H 8,50; N 6,01.

C₄₄H₇₆N₄O₁₁SSi Вычислено, %: C 58,89; H 8,54; N 6,24.

П р и м е р 149. Полностью разделенный продукт получили аналогично тому, как описано выше в примере, используя в качестве исходного S,S,S-изомер, и получили N-{1-[3-(N²-метансульфонил-N⁶-трет-бутоксикарбо- нил-(S)-лизиламино)-2-(S)-триметилсилилэ-токсикарбонилпропил] -1-циклопентанк ар-бловый сложный эфир.

Найдено, %: C 59,20; H 86,60; N 6,23.

П р и м е р 150. N-{1-[3-(N⁶-бензилоксикарбонил-N²-метансульфонил-(S)-лизилам- ино-2-(R, S)-этоксикарбонилпропил] -1-цикл- опентанкарбонил}-(S)-тирозин этиловый сложный эфир.

Использовали описанную выше методику, использовав в качестве исходного соединения, соответствующее N⁶-бензилоксикарбонильное производное, в результате чего получили указанный продукт.

Найдено, %: C 56,61; H 6,80; N 6,67.

C₃₈H₅₄N₄O₁₁S (0,75 CH₂Cl₂): Вычислено, %: C 55,50; H 6,67; N 6,88.

П р и м е р 151. N-{1-[3-(N⁶-трет-бутоксикарбонил-N²-ацетил-(S)-лилиламино)-2- (S)-триметилсилилэтоксикарбонилпропил]--1-циклопентанкарбонил} -3-метансульфо н- амидо-(S)-фенилаланин-трет-бутиловый сложный эфир.

Использовали методику, описанную в примере 148, использовав соответствующий сложный диэфир и осуществив реакцию с ацетилхлоридом вместо метансульфонилхлорида, в результате чего получили указанное N²-ацетильное производное в виде бесцветного вспененного вещества.

П р и м е р 152. N-{1-[3-(N²-метансульфонил-N⁶-трет-бутилоксикарбонил-(S)-лиз- иламино-2-(R,S)-карбоксипропил]-1-цикло- пентанкарбонил}-O-трет-бутил-(S)-тирозин- трет-бутиловый сложный эфир.

Раствор N-{ 1-[N-(N²-метансульфонил-N⁶-трет-бутоксикарбонил-(S)-лизиламино--2-(R, S)-т риметилсилилэтоксикарбонилпро- пил)-1-циклопентанкарбонил} -O-трет-бутил -(S)-тирозинтрет-бутилового сложного эфира (1,80, 2,0 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) обработали раствором фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (1М, 3 мл, 3,0 ммоль) и нагревали до 60^оС под атмосферой азота. Растворитель удалили при пониженном давлении, остаток обработали этилацетатом и разбавленной лимонной кислотой, объединенные экстракты промыли насыщенным раствором соли, осушили и растворитель выпарили, в результате чего получили вспененное вещество, которое после хроматографирования на силикагеле и элюирования этилацетатом, метанолом, гексаном (4:1:5) позволило получить указанный продукт в виде вспененного вещества (1,17 г, 74%).

Найдено, %: C 57,49; H 7,89; N 6,93.

C₃₉H₆₄N₄O₁₁S; H₂O Вычислено, %: C 57,46; H 8,16; N 6,87.

П р и м е р 153. Полностью разделенный материал получили аналогично тому, как описано выше из S,S,S-изомера, полученного в примере 149, в результате чего образовался N-{1-[3-(N²-метансульфонил-N⁶-трет-буток- сикарбонил-(S)-лизиламино-2-(S)-карбоксип- ропил]-1-циклопентанкарбонил}-O-трет- бутил-(S)-тирозин-трет-бутиловый сложный эфир.

Найдено, %: C 59,01; H 8,21; N 6,87.

C₃₉H₆₄N₄O₁₁S Вычислено, %: C 58,77; H 8,09; N 7,03.

П р и м е р 154. N-{1-[3-(N²-метансульфонил-N⁶-трет-бутилоксикарбонил-(S)-лизи- ламино)-2-(R,S)-трет-бутилоксикарбонилпр- опил]-1-циклопентанкарбонил}-O-трет-бут- ил-(S)-тирозин.

N-{ 1-[3-(N²-метансульфонил-N⁶-трет-бу- тилоксикарбонил-(S)-лизиламино)-2-(R, S)- трет-бутилоксикарбонилпропил]-1-циклоп- ентанкарбонил}-O-трет-бутил-(S)-тирозин-этиловый сложный эфир (2,21 г, 2,68 ммоль) растворили в ацетоне (5,5 мл), а затем добавили 1Н водный раствор гидроксида натрия (5,36 мл, 5,38 ммоль). После перемешивания в течение 10 мин при комнатной температуре раствор подкислили до рН 4 с помощью водного раствора лимонной кислоты (10% ). Затем ацетон удалили на ротационном испарителе и остаток экстрагировали этилацет