7-оксабициклогептилзамещенные гетероциклические амиды или их стереоизомеры в качестве антагонистов рецепторов тромбоксана

7-оксабициклогептилзамещенные гетероциклические амиды или их стереоизомеры в качестве антагонистов рецепторов тромбоксана

Реферат

 

Использование: в медицине, в качестве антагонистов рецепторов тромбоксана. Сущность изобретения: продукт: 7-оксабициклогептилзамещенные гетероциклические амиды ф-лы I или их стереоизомеры, где m - 1,2 или 3; n - 0,1,2,3 или 4,Z- CH₂-CH₂ - или CH=CH-, при условии, когда Z- CH=CH-, n не равно 0; R - карбоксил, его соль щелочного металла, карбокси - (C₁-C₈) - алкил, CONHSO₂(C₁-C₈) - алкил, CONHSO₂ - фенил, CONHSO₂ - бензил или CH₂ -5-тетразолил; X - O, S, или NH; R₁-C₁-C₁₆ - алкил, возможно замещенный C₃-C₈ - циклоалкилом или фенилом, который может содержать атом галогена; C₃-C₈ - циклоалкил или фенил, который может быть замещен галогеном; R₂ - H или C₁-C₈ - алкил или R₁ и R₂, взятые вместе с соседним атомом азота, образуют 5-8-членное кольцо. 2 табл., 1 ил. Структура соединения ф-лы 1.

Изобретение относится к 7-оксабициклогептилзамещенным гетероциклическим амидам - аналогам простагландинов, которые являются антагонистами рецептора тромбоксана А₂(ТХА₂) или комбинированными антагонистами рецептора тромбоксана А₂ - (ингибиторами тромбоксансинтазы, и используются, например, при лечении тромботической болезни и/или спазмов сосудов: обладают большой продолжительностью действия. Эти соединения имеют нижеследующую структурную формулу: (I) включая все ее стереоизомеры, где m - 1, 2 или 3; n - 0, 1, 2, 3 или 4; Z обозначает -(СН₂)₂- или -СН=СН-, при условии, что когда Z представляет собой -CH=CH-, n не равно 0; R - карбоксил, его соль щелочного металла, карбокси (С₁-С₈)-алкил, CONHSO₂(C₁-C₈)-алкил, CONHSO₂-фенил; CONHSO₂-бензил или СН₂-5-тетразолил; Х - O, S или NH; R¹ - С₁-С₁₆-алкил, который может быть замещен С₃-С_8-циклоалкилом или фенилом, который может содержать атом галогена; С₃-С₈-циклоалкил; фенил, который может быть замещен галогеном; R² - водород или С₁-С₈-алкил, или R¹ и R², взятые вместе с соседним атомом азота, образуют 5-8-членное кольцо.

Таким образом, соединения формулы I включают соединения следующих типов: IA IB IC Предпочтительными являются те соединения формулы I, в которых Z представляет собой -СН=СН- в цис-конфигурации, m равно 1, n равно 2 или 3, R представляет собой CO₂H, R¹ представляет собой замещенный фенилалкил или циклогексилалкил, а R₂ - водород или метил.

Предлагаемые соединения формулы I, в которых Z представляет собой -СН= СН- или -(СН₂)₂-, могут быть получены следующим образом.

Соединения, в которых Z представляет собой -СН=СН-, предпочтительно в цис-форме, а Х представляет собой O, получают, исходя из оксиметильного соединения (II) (его получают, как описано в патенте США N 4143054), которое подвергают окислению по Джонсу, когда соединение II реагирует с реагентом Джонса (CrO₃, растворенный или суспендированный в водном растворе серной кислоты, приготовляемый, как описано в книге: Физер и Физер, "Реагенты для органического синтеза", т. I, с. 142 (1967)), в присутствии ацетона, в инертной атмосфере, например в аргоне, при температуре от - 10 до 20^оС, с образованием соответствующей карбоновой кислоты (III) Затем в инертном органическом растворителе, например в тетрагидрофуране, проводят реакцию карбодиимидного связывания кислоты III с амидом A --N в присутствии дициклогексилкарбодиимида (DCC) или 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимидгидрохлорида (WSC и 1-оксибензотриазола в инертной атмосфере, например в аргоне, используя мольное отношение A:III от 1,2:1 до 1:1, получая оксибисамид (IV) Оксибисамид IV затем подвергают циклодегидратации, при которой раствор IV в инертном органическом растворителе, например в тетрагидрофуране, ацетонитриле или хлороформе, в инертной атмосфере, например в аргоне, обрабатывают трифенилфосфином и четыреххлористым углеродом в присутствии амина, например триметиламина, получая оксазолин.

(V) В другом варианте оксибисамид IV обрабатывают сульфонилхлоридом, например метансульфонилхлоридом, и амином, например триэтиламином, с последующей обработкой карбонатом калия в ацетоне, получая оксазолин V.

Оксазолин V окисляют, обрабатывая диоксидом марганца или пероксидом никеля, предпочтительно последним, получая оксазол IA В другом варианте оксазол IA можно получить из кислоты III карбодиимидным связыванием, как это описано выше, с заменой A на A', получая VI, H₂N - A (VI) где Pro обозначает подходящую защищающую группу.

Оксиамид VI затем подвергают циклодегидратации и окислению, как это описано для IV и V, получая VII.

(VII) Защищающая группа в соединении VII может быть удалена с образованием соответствующей кислоты VIII (VIII) которая при обработке избытком оксалилхлорида в присутствии инертного органического растворителя, например толуола, хлористого метилена или хлороформа, и, возможно, каталитического количества диметилформамида, при перемешивании в инертной атмосфере, например в аргоне, дает неочищенный хлорангидрид IX, (IX) который обрабатывают солянокислой солью амина A" HClHR¹ A" в присутствии органического основания, например триэтиламина, в инертной атмосфере, например в аргоне, используя мольное отношение IX:A" от 0,5:1 до 1:1, предпочтительно от 0,8:1 до 1:1, получая IA'.

I A' Соединения формулы I, в которых Z представляет собой трансизомер-СН= СН-, можно получить, исходя из оксиметильного соединения II, которое содержит двойную связь в цис-форме. Соединение II обрабатывают защищающим соединением, например трет-бутилдиметилсилилхлоридом или другой силильной защищающей группой, как описано выше, в присутствии имидазола или триэтиламина и инертного органического растворителя, например хлористого метилена или тетрагидрофурана, получая защищенное соединение X.

(X) Раствор защищенного спирта Х в инертном органическом растворителе, например хлористом метилене или ацетоне, обрабатывают избытком озона при пониженной температуре от - 78 до - 60^оС, с последующей обработкой избытком диметилсульфида (мольное отношение X:(CH₃)₂S - от 1:100 до 1:5), или трифенилфосфином, получая альдегид XI.

(XI) Для заявляемых соединений, в которых Z представляет собой -СН=СН- в транс-форме, а n = 2, альдегид XI затем обрабатывают смесью бромида или хлорида лития и триметилфосфоноацетата и триэтиламина в инертном органическом растворителе, например, хлористом метилене или хлороформе, получая сложный эфир XII.

(XII) Раствор сложного эфира XII в инертном органическом растворителе, например в тетрагидрофуране, простом эфире или диметоксиэтане, охлаждают до температуры от - 78 до 0^оС, и проводят его реакцию с диизобутилалюминийгидридом в ароматическом растворителе, например толуоле, в течение от 0,5 до 4 ч, получая спирт XIII.

(XIII) Спирт XIII обрабатывают бромтрифенилфосфонийбромидом (получаемым добавлением брома к трифенилфосфину в толуоле или в другом ароматическом растворителе в инертной атмосфере, например аргоне, при пониженной температуре от - 10 до 10^оС) в присутствии пиридина и толуола, при пониженной температуре от - 10 до 10^оС, получая бромид XIV.

(XIV) Алкиловый эфир уксусной кислоты, например трет-бутилацетат или этилацетат, обрабатывают раствором ДАЛ (диизопропиламид лития) в инертном органическом растворителе, например в тетрагидрофуране, при пониженной температуре от - 78 до - 60^оС, в течение от 0,5 до 2 ч, с последующим добавлением раствора бромида XIV в инертном органическом растворителе, например тетрагидрофуране; в результате получают сложный эфир XV (в котором n = 2).

(XV) В случае предлагаемых соединений, в которых Z представляет собой -СН= СН- в транс-форме, а n равно 1,3 или 4, проводят реакцию альдегида XI с фосфониевой солью формулы Р.

(C₆H₅)H₂)_n+1-CH₂-OH (P) В присутствии сильного основания, например трет-амилата калия в толуоле или NaH/диметилсульфоксида, получая XIII', (XIII') который окисляют и этерифицируют, используя способы, известные специалистам в данной области техники, получая сложный эфир XV (где n = 1,3 или 4).

Затем со сложного эфира XV снимают защиту, обрабатывая XV в метаноле в инертной атмосфере, например аргоне, соляной кислотой в метаноле (получаемой добавлением ацетилхлорида к метанолу), получая спирт XVI (XVI) XVI можно затем использовать вместо II в качестве исходного вещества, следуя вышеописанному способу, получить кислоту IIIA, (III A) и затем получить заявляемое соединение IA" в транс-конфигурации.

(IA'') Заявляемые соединения IB, где Z представляет собой -СН= СН-, а Х представляет собой S, можно получить, исходя из кислоты III или IIIA, следующим образом.

Проводят реакцию кислоты III или IIIA с оксалилхлоридом, возможно, в присутствии каталитических количеств диметилформамида, в хлористом метилене, с получением соответствующего хлорангидрида кислоты, который амидируют, проводя реакцию с аммиаком, получая амид XVII (XVII) В другом варианте проводят реакцию кислоты III или IIIA с алкилхлорформиатом в присутствии амина, например триэтиламина, получая смешанный ангидрид, который амидируют, проводя реакцию с раствором аммиака в метаноле или с концентрированным водным раствором аммиака, получая амид XVII.

Затем амид XVII обрабатывают пентасульфидом фосфора или реагентом Лавессона [2,4-бис(4-метоксифенил)-1,3-дитиа-2,4-дифос- фэтан-2,4-дисульфид], получая соответствующий тиоамид XVIII, (XVIII) который обрабатывают бромпировиноградной кислотой (Br-CH₂--CO₂H) в полярном растворителе, например диметилформамиде, в присутствии слабого основания, например K₂CO₃, используя мольное отношение XVIII: бромпировиноградная кислота от 1:1 до 1:1,5, получая тиазолин XIX (XIX) Затем тиазолин XIX дегидратируют, обрабатывая сульфонилхлоридом, например метансульфонилхлоридом, в присутствии основания, например триэтиламина, получая тиазоловую кислоту XX; (XX) Затем проводят реакцию карбодиимидного связывания этой кислоты с амином HR¹ (A''') в присутствии DCC или WSC в инертной атмосфере, например аргоне, используя мольное отношение A''':XX от 1:1 до 2:1, получая амид IB_a IB_a Предлагаемые соединения IC, в которых Х представляет собой Н, получают, исходя из кислоты III или IIIA, проводя реакцию связывания этой кислоты с амином B, H₂NCH₂-COOPrO (B) где BOC представляет собой трет-бутилоксикарбонил, а PrO представляет собой защищающую группу, например, предпочтительно, -CH₂CH₂Si(CH₃)₃, в присутствии связывающего агента, например 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимидгидрохлорида, 1-оксибензотриазола (ОВТ) и хлористого метилена, используя мольное отношение III или IIIA: B от 1,2:1 до 1:1, в течение от 12 до 90 ч. Полученный амид подвергают реакции тионирования, обрабатывая его реагентом Лавессона в присутствии бензола при температуре от 50 до около 75^оС в течение от 1 до 4 ч, получая сложный эфир XXI.

(XXI) Эфир XXI подвергают циклизации обработкой раствора XXI в инертном растворителе, например ацетонитриле, хлороформе или тетрагидрофуране, трифенилфосфином (используя мольное отношение XXI:трифенилфосфин от 0,8:1 до 1: 1) и четыреххлористым углеродом в присутствии амина, например триэтиламина или диизопропилэтиламина, получая имидазолин XXII.

(XXII) Затем с имидазолина XXII снимают защиту, удаляя защищающую группу Pro, для чего используют соответствующие способы, например обработку трифторуксусной кислотой в присутствии хлористого метилена, и получают кислоту XXIII.

(XXIII) Затем проводят реакцию связывания кислоты XXIII с амином A''' в присутствии амина, например пиридина или триметиламина, в инертной атмосфере, например аргоне, в присутствии связывающего агента, например WSC и ОБТ, и хлороформа, используя мольное отношение A''':XXIII от 0,8:1 до 1,2:1, получая амид XXIV.

(XXIV) Амид XXIV окисляют, обрабатывая окислителем, например диоксидом марганца, в присутствии инертного растворителя, например хлороформа, получая сложный эфир IC_a.

IC_a Сложные эфиры IA', IA", IB_a и IС_a можно превратить в соответствующие кислоты, а именно в I¹, (I¹) обрабатывая эти эфиры основанием, например гидроксидом лития, гидроксидом натрия или гидроксидом калия, получая соответствующие соли щелочных металлов, с последующей нейтрализацией кислотой, например разбавленной соляной или щавелевой кислотой, получая в результате предлагаемые кислотные соединения.

Соединения формулы I, в которых Z представляет собой -(СН₂)₂-, можно получить из кислоты I¹, подвергнув ее гидрированию, с использованием для этой цели, например, катализатора гидрирования, такого как, например, палладий или древесный уголь, в присутствии инертного органического растворителя, например этилацетата (EtOAc) или уксусной кислоты (AcOH), получая в результате заявляемую кислоту I².

I² Заявляемые соединения, в которых R представляет собой CONHSO₂R³, а именно I³, I³ получают, обрабатывая кислоту I¹ или I² сульфонамидом формулы С H₂N-R³ (C) в присутствии связывающего агента, например карбонилдиимидазола или WSC, в присутствии амина, например 4-диметиламинопиридина, в инертной атмосфере, например аргоне, используя мольное отношение C:I¹ или I² от 0,8:1 до 1,2:1, получая в результате сульфонамид I³.

Кислоты I¹ или I² можно превратить в соответствующие сложные эфиры, обрабатывая кислоты I¹ и I² соответствующими спиртами в присутствии кислотного катализатора с получением сложных эфиров.

Заявляемые соединения, в которых R представляет собой -СН₂-5-тетразолил, а Z представляет собой -(СН₂)₂-, т.е. I⁴, I⁴ получают, подвергая сложные эфиры IA',IA",IB_a и IC_a, или сложные эфиры кислоты I¹, восстановлению гидридным реагентом, например боргидридом лития или боргидридом натрия, получая спирт XXV (XXV) который затем превращают в бромид обработкой трифенилфосфонийбромидом в инертном растворителе, например толуоле. Затем бромид превращают в нитрил XXVI обработкой цианидом щелочного металла в полярном растворителе, например смеси метанол/вода.

(XXVI) Затем нитрил XXVI подвергают реакции циклоприсоединения, обрабатывая XXVIазидом натрия в присутствии хлорида аммония, диметилформамида и хлорида лития при температуре от 100 до 130^оС, получая в результате I⁴.

Предлагаемые соединения, в которых R представляет собой -CH₂-5-тетразолил, а Z - -CH=CH-, т.е. I⁵, I⁵ получают, обрабатывая полуацеталь D (по-лученную, как это описано в патенте США N 4654356) (D) реагентом Виттига формулы Е (C₆H₅)CH₂) (E) в присутствии основания, например трет-бутоксида натрия или гидрида натрия - диметилсульфоксида, используя мольное отношение D:E от 1:1 до 0,2:1, получая оксиметильное соединение XXVII, (XXVII) которое обрабатывают защищающим соединением F, где Pro-галоид, например бромметилметиловым эфиром, в присутствии основания, получая защищенный тетразол XXVIII, (XXVIII) Защищенный тетразол XXVIII можно затем использовать вместо оксиметильного соединения II для получения различных соединений формулы XXIX, где Х представляет собой O,S или NH, (XXIX) в котором защиту снимают обработкой водным раствором кислоты, например водным раствором соляной кислоты, получая предлагаемые соединения I^5. Соединения формулы I, в которых R представляет собой CONHR^3a, где R^3a не является атомом водорода, можно получить из соответствующей кислоты I⁶, I⁶ обрабатывая кислоту I⁶(1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимидгидрохлори- дом в присутствии диметилформамида, 1-оксобензотриазола и органического основания, например триэтиламина, и амина G HNHR^3a (G) с образованием амида I⁷ (I⁷) где R^3a представляет собой низкий алкил, арил или аралкил.

Соединения формулы I, в которых R представляет собой CONH₂ можно получить из соответствующей кислоты I⁶, используя вышеописанный способ для получения амида I⁷, за исключением того, что для получения амида I⁸вместо амина G используют хлорид аммония, I⁸ Соединения формулы I, в которых R представляет собой CH₂OH, можно получить из соответствующего сложного эфира I⁹, I⁹ который обрабатывают восстановителем, например боргидридом лития (LiBH₄) в инертном растворителе, например диэтиловом эфире или тетрагидрофуране, получая спирт I¹⁰.

(I¹⁰) Предлагаемые соединения имеют четыре асимметрических центра, которые в формуле I отмечены звездочками. Вместе с тем, должно быть очевидно, что каждая из вышеприведенных формул, не содержащая звездочек, также представляет все возможные стереоизомеры соответствующих соединений. Все различные стереоизомерные формы включены в объем изобретения.

Различные стереоизомерные формы заявляемых соединений, а именно цис-экзо, цис-эндо, все транс-формы и стереоизомерные пары, можно получить, используя исходные соединения и следуя способам, описанным в патенте США N 4143054. Примеры таких стереоизомеров приведены ниже.

(Ia) (Ib) (Ic) (Id) В каждом из заявляемых соединений ядро из соображений удобства изображено следующим образом: Следует также учитывать, что ядро заявляемых соединений можно изобразить и следующим образом: Заявляемые соединения являются антагонистами рецептора тромбоксана, и поэтому могут использоваться в качестве ингибиторов процессов, опосредуемых рецептором тромбоксана. Термин "антагонист рецептора тромбоксана" включает в себя соединения, которые являются так называемыми антагонистами рецептора тромбоксана A₂, антагонистами тромбоксана A₂, антагонистами тромбоксана A₂/эндопероксида простагландинов, антагонистами ТР-рецептора или антагонистами тромбоксана.

Заявляемые соединения являются также ингибиторами синтазы тромбоксана, и поэтому могут использоваться в качестве ингибиторов выработки тромбоксана.

Предлагаемые соединения могут использоваться в качестве ингибиторов функции тромбоцитов, т. е. для профилактики и лечения тромбоза сосудов, как полного, так и частичного, например тромбоза артерий, включая тромбоз коронарных артерий, артерий головного мозга, глазных артерий, артерий печени, брюшины, почек, периферических артерий или трансплантатов сосудов или органов, для профилактики и лечения острой стенокардии, приступов ишемической болезни, или перемежающейся хромоты. Они могут использоваться для профилактики тромбоза, вызванного повреждениями сосудов, нанесенными в ходе диагностических или терапевтических процедур, таких как, например, эндартеректомия или ангиография. Эти соединения могут использоваться для лечения или профилактики нарушений, связанных с расходом и/или активацией тромбоцитов, включая активацию тромбоцитов, их дисфункцию и/или потерю при экстракорпоральной циркуляции, использовании радиографических контрастных веществ, при тромботической тромбоцитопенической пурпуре, диссеминированной внутрисосудистой коагуляции, молниеносной пурпуре, при нарушениях, связанных с переливанием крови, или при гемолитическом уремическом синдроме, системной волчанке, вызванной циклоспорином почечной токсичности, легочной гипертензии, при побочных действиях диализа или при лечении аневризмы брюшной аорты. Эти соединения могут быть использованы при лечении тромбоза или закупорки вен, включая закупорку легочных вен, тромбоз глубоких вен, тромбоз вен печени и тромбоз вен почек.

Предлагаемые соединения можно использовать в качестве ингибиторов сужения артерий или вен. Соответственно, их можно использовать для профилактики сужения сосудов, связанного с острой стенокардией, хронической стенокардией и ее разновидностей, стенокардией Принцметаля, синдромом Рейнода, мигренью, спазмом коронарных артерий, артерий головного мозга, глаза, печени, брюшины, печени, периферических артерий или трансплантатов сосудов, а также с повреждениями сосудов в результате хирургического вмешательства или травмы. Гипертензия беременности, гепаторенальный синдром, а также легочная гипертензия являются дополнительными примерами связанных с сужением сосудов заболеваний, которые могут быть вылечены с применением заявляемых соединений.

Такие соединения могут использоваться в качестве ингибиторов бронхоспазма, т. е. повышенной реактивности дыхательных путей, аллергического бронхоспазма, астмы, а также бронхоспазматических реакций на воздействия окружающей среды, инфекций, ядов и на механические воздействия.

Предлагаемые соединения могут быть также использованы как ингибиторы ишемических и реперфузионных нарушений в различных тканях, включая сердечную мышцу, кожу, мозг, желчный пузырь, почку; при этом они могут быть использованы или в чистом виде, или в сочетании с другими веществами, способными восстанавливать кровоток. Например, эти соединения можно использовать для улучшения постишемической функции миокарда и для уменьшения размера инфаркта миокарда. Ишемия, вызванная пониженным кровотоком в процессе диагностических или терапевтических процедур, может быть устранена применением этих соединений; например, они ускоряют восстановление функций миокарда после шунтирования. Кроме того, они могут применяться при вызванных ушибами повреждениях тканей.

Заявляемые соединения могут использоваться для профилактики и лечения других состояний, включая ожоги, диабетическую ретиопатию, опухолевые метастазы и позднюю дискинезию. Эти соединения могут быть использованы для усиления действий диуретиков.

Кроме того, заявляемые антагонисты рецептора тромбоксана могут быть использованы с тромболитическими агентами, например t-PA, стрептокиназой, урокиназой, проурокиназой или анизоулированным активатором-комплексом плазминоген-стрептокиназа (APSAC) в течение первых 6 ч инфаркта миокарда. В таком случае тромболитический агент можно использовать в обычно применяемых количествах, например указанных в настольном врачебном справочнике для уменьшения постишемического повреждения миокарда.

Заявляемые соединения можно вводить оральным или парентеральным путем различным видам млекопитающих, подверженных указанным заболеваниям, например людям, кошкам, собакам и т.п., в эффективном количестве в пределах диапазона доз от 0,1 до 100 мг/кг, предпочтительно от 0,2 до 50 мг/кг, более предпочтительно от около 0,5 до 25 мг/кг (или от 1 до 2500 мг, предпочтительно от 5 до 2000 мг) один раз или 2-4 раза в день.

Заявляемые производные оксазола, а именно соединения формулы I, в которых Х представляет собой кислород, обладают особенно большой продолжительностью действия; эти соединения, если желательно, можно вводить в вышеуказанных дозах один раз в день, один раз в два дня или, если желательно, один раз в день дважды в неделю.

В табл. 1 представлены показатели активности в отношении ингибирования агрегации тромбоцитов при сравнении действия представителей известных соединений и заявленного, обозначенного как SQ 33 640. Результаты свидетельствуют об очевидном 10-кратном превышении активности последнего.

Кроме того, на чертеже показан график сравнения продолжительности действия для соединений SQ 33 640 и известного SQ 31 491, которое проявляет наиболее близкие свойства. Даже в том случае, когда доза SQ 33 640 составляла 1/50 дозы SQ 31 491 (0,2 мг/кг против 10 мг/кг). SQ 33 640 показало лучшую защиту от внезапного летального исхода (см.чертеж).

Описание методик испытания приведено ниже.

Агрегация человеческих тромбоцитов.

Венозную кровь отбирали из антикубитальной (локтевой) вены человека, не принимающего никаких лекарств в течение 2 недель. Кровь собирали во флаконы вместимостью 150 л, содержащие в качестве антикоагулянта цитрат натрия. PRP готовили центрифугированием крови, содержащей цитрат, в режиме 200g в течение 10 мин при 25^оС. PRP определили центрифугированием PRP в течение 3 мин при 25^оС.

Скопление тромбоцитов PRP изучали фотометрическим методом с использованием агрегометра Хронолог с линейным самописцем. 10 мм метанольного стандартного раствора пробы растворили в 0,5 мл PRP и проводили преинкубирование в течение 2,5 мин при 37^оС до внесения агрегатора, а затем в течение 3 мин регистрировали величину оптического пропускания. Скорость увеличения последнего, которая в свою очередь является мерой скорости агрегации, определяли по наклону крутого участка кривой агрегации.

Летальный исход, вызываемый U - 46 619 у мышей.

Настоящий эффект определяли с помощью модифицированной методики Кохлера.

Самцам массой 20-25 г после предварительного суточного ограничения в пище вводили либо испытуемые соединения, либо растворитель (10%-ный этанол в солевом растворе) за 30 мин до обработки животных с применением U - 46 619 (2 мг/кг) внутривенно.

В указанных концентрациях летальный исход наблюдали у всех подопытных экземпляров. Продолжительность действия изучалась на животных, предварительно подвергнутых воздействию испытуемых соединений в концентрации 0,2 мг/кг, перорально перед противоопытом с применением U - 46619 (2 мг/кг) внутривенно в указанные промежутки времени.

Активное соединение можно применять в виде таблетки, капсулы, раствора или суспензии, содержащих от около 5 до около 500 мг на единицу дозировки соединения или смеси соединений формулы I, или применять наружным путем для заживления ран (0,01-5% по массе соединения формулы I, от 1 до 5 раз в день). Эти соединения можно смешивать обычными способами с физиологически пригодным наполнителем или носителем, связующим веществом, консервантом, стабилизатором, коpригентом и т.д., или с носителем для наружных препаратов, таким как, например, Plastibase (минеральное масло, загущенное полиэтиленом), как предусмотрено распространенной фармацевтической практикой. Кроме того, как следует из вышесказанного, определенные члены перечисленной группы вдобавок являются интермедиатами для других членов группы.

Заявляемые соединения можно также применять наружно для лечения заболеваний периферических сосудов; в этом случае они могут быть приготовлены в виде крема или мази.

Нижеследующие примеры иллюстрируют предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения. Если не оговорено особо, все значения температуры даны в градусах Цельсия.

П р и м е р 1. {1S-[1 ,2 (Z),3 ,4 ]}- 6-{3-[4-(4-циклогексилбутил)амино] карбо- нил-2-оксазолил}-7- оксабицикло[2.2.1-гептил-2]-4-гексеновая кислота A.[1,1-диметилэтокси)карбонил]-N-(4- циклогексилбутил)-L-серинамид К раствору 575 мг гидрохлорида 4-циклогексилбутиламина (3,0 ммоль), 615 мг трет-бутоксикарбонил-L-серина (3,0 ммоль, 1 экв.), 405 мг 1-оксибензотриазолгидрата (3,0 ммоль, 1,0 экв. ) и 387 мг диизопропилэтиламина (3,0 ммоль, 1 экв. ) в 10 мл сухого тетрагидрофурана (ТГФ) при перемешивании в атмосфере аргона при 0^оС добавляют 618 мг 1,3-дициклогексилкарбодиимида (3,0 ммоль, 1,0 экв.) в виде одной порции. Медленно происходит образование осадка. По истечении одного часа смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 4 ч. После разбавления этилацетатом смесь фильтруют, и фильтрат промывают солевым раствором с рН = 1 (получен смешением воды, рассола и 1М водного раствора HCl). Затем дважды промывают 1М раствором NaHCO₃, сушат над Na₂SO₄ и выпаривают, получая 1,1 г неочищенного целевого амида.

Тонкослойная хроматография (ТХ) (10%-ный водный NH₃ в CH₃OH, в CH₂Cl₂ - анизальдегид): Солянокислый цикло- гексилбутиламин 0,27 Целевой амид 0,47 B. N-(4-циклогексилбутил)-L-серинамид К раствору 1,1 г неочищенного амида (раздел A) в 4 мл CH₂Cl₂ при комнатной температуре добавляют 4 мл трифторуксусной кислоты. Смесь перемешивают в течение 4 ч. После выпаривания растворителя оставшуюся трифторуксусную кислоту удаляют в виде азеотропа с CHCl₃ на роторном испарителе. Импульсная хроматография (150 г д иокси- да кремния, 10% [10%-ный водный NH₃ в CH₃OH] в CH₂Cl₂) дает, после азеотропной отгонки с толуолом и вакууми- рования, 495 мг чистого целевого амина в виде твердого белого вещества, Выход целевого амина составляет 68% в пересчете на гидрохлорид 4-циклогексилбутиламина.

ТХ (10% [10% -ный водный NH₃ в CH₃OH] в CH₂Cl₂ - анизальдегид): амид (раздел A) 0,47 целевой амид 0,17 13С ЯМР (67,8 МГц в CDCl₃): 173,4, 64,6, 56,3, 39,1, 37,3, 36,9, 33,1, 29,6, 26,5, 26,2, 24,0.

С.[1S-[1 , 2 (Z), 3 , 4 ]]-6-[3-(оксиметил)-7-оксабицикло[2.2.1]гептил-2]-4-гексе-новая кислота, метиловый эфир К раствору 36,27 г (4аR-[4a , 5, 8, 8 )]-октагидро-5,8-эпокси-1Н-2-бензопиран-3-ола (полученного, как описано в патенте США N 4143054) (0,23 моль) и 3-карбоксипропилтрифенилфосфонийбро-мида (127,34 г, 0,37 моль) в 600 мл сухого ТГФ в атмосфере аргона при 3^оС при механическом перемешивании по каплям добавляют в течение 1 ч раствор 370,6 мл трет-амилата калия (0,68 моль 1,8М толуольного раствора). Сначала температура реакции достигает максимального значения 8^оС, затем ее снижают до 4^оС для добавления остатка основания. После этого реакцию проводят при комнатной температуре в течение 90 мин. Реакционную емкость помещают в ледяную баню (0^оС), и останавливают реакцию добавлением в течение 30 мин 152 мл ледяной уксусной кислоты. В вакууме удаляют растворители (в виде азеотропа с толуолом). Добавляют воду (640 мл) и 50 мл концентрированной HCl при рН 2,6. Разбавляют смесь 640 мл этилацетата, добавляют 149 г NaCl и несколько кристаллов 3-карбоксипропилтрифенилфосфонийбро-мида (затравка), затем интенсивно перемешивают в течение 15 мин. Осадок отделяют фильтрованием и промывают двумя порциями этилацетата (каждая порция - 320 мл). Отделяют этилацетатный слой, водный слой экстрагируют этилацетатом (2 раза по 200 мл); собранные этилацетатные слои сушат над MgSO₄ и концентрируют. Добавляют 507 мл 5%-ного K₂CO₃, затем интенсивно перемешивают в течение 1 ч. Образования осадка не наблюдается. Реакционную смесь концентрируют до пастообразного состояния и суспендируют в 508 мл воды. При интенсивном перемешивании в течение нескольких часов образования осадка не происходит. Воду декантируют и остаток суспендируют в 200 мл 5% -ного водного раствора K₂CO₃. После интенсивного перемешивания взвесь твердого вещества отделя- ют фильтрованием и несколько раз промывают водой. Собранные водные слои 5 раз экстрагируют смесью толуол/эфир (1: 1, 230 мл на одну экстракцию). После охлаждения собранных водных слоев в ледяной бане до 0^оС, добавляют концентрированную HCl до рН 2,5, затем экстрагируют один раз 460 мл и 2 раза 230 мл этилацетата. Собранные этилацетатные слои сушат над MgSO₄ и выпаривают в вакууме, получая 49,74 г масла янтарного цвета. Растиранием с 330 мл эфира (комнатная температура, на протяжении ночи) удаляют из масла фосфорсодержащие побочные продукты. Эфирный раствор декантируют с темно-красного масла в делительную воронку, из которой сливают масло, захваченное при декантации (1,56 г). Упаривание эфирного раствора дает 43,08 г [1S-[1 ,2 (Z),3 ,4 ]]-6-(3-оксиметил)-7-оксабицикло[2.2.1]гептил-]-4-гексеновой кислоты в виде вязкого желтого масла.

ЯМР 1Н показывает, что мольное отношение продукт:трифенилфосфиноксид: эфир составляет 23:1:1,8 (в мас.%: 93:4,7-2,2). Отбрасывание эфира и трифенилфосфиноксида дает выход, равный 72,5% (40,06 г).

При комнатной температуре в атмосфере аргона к 80 мл метанола по каплям добавляют ацетилхлорид (5,20 мл, 0,073 ммоль). Раствор ацетилхлорида в метаноле добавляют (однократным добавлением) к раствору 42,98 г (0,18 моль) в 700 мл метанола. Перемешивают смесь в течение 3 ч. Добавляют триэтиламин (0,09 моль, 12,21 мл), в вакууме удаляют метанол и остаток разделяют между 300 мл этилацетата и