Способ получения производных трифторметилмеркаптана

Способ получения производных трифторметилмеркаптана

Реферат

 

Использование: в химии сероорганических веществ, в частности в синтезе нейтрального ингибитора эндопептидазы. Сущность изобретения: продукт - производные трифторметилмеркаптана ф-лы 1: , где X - низший алкил, возможно замещенный гидроксифенилом или тетразолом, карбокси-низший алкил, возможно замещенный нафталеном, карбокси-низший-циклоалкил, 1-тетразолил-2-индолилэтил или остаток аминокислоты. Реагент 1: хлорангидрид кислоты ф-лы 2: . Реагент 2: амин ф-лы 3: H₂N-X . Условия реакции: в присутствии амина или в растворимом в воде карбодиимиде. Промежуточный продукт-соединение ф-лы 4: . Реагент 4: основание. 1 табл.

В изобретении предлагаются новые нейтральные ингибиторы эндопептидазы и способы их использования. Соединения согласно изобретению полезны, например, в качестве сердечно-сосудистых агентов общей формулы I R₃-S-CHNH-X где Х представляет собой --COOH, -(CH₂)₂-COOH, -(CH₂)OH, -(CH₂) , -, - или OH- , R₁ представляет собой прямой или разветвленный низший алкил, содеpжащий 1-4 атома углерода -CH , -CHOH, -CHOH , -CH, -CH , -CH₂-COOH или -CH ; R₃ представляет собой водород; n = 0.

Это изобретение в самом широком аспекте касается нейтральных ингибиторов эндопептидазы формулы I и способов лечения застойной сердечной недостаточности, пониженного кровяного давления и формирования диуреза и мочеиспускания путем введения фармацевтической композиции, содержащей эти ингибиторы.

Неожиданно было обнаружено, что трифторметилзамещенные соединения формулы I значительно более активны в качестве нейтральных ингибиторов эндопептидазы, чем меркаптан и меркаптоалканоильные соединения, не включающие трифторметила.

Термин низший алкил, использованный для определения различных символов, относится к радикалам с прямолинейными или разветвленными цепями, имеющими до 7 атомов углерода, кроме специально заявленных. Предпочтительными низшими алкильными группами являются радикалы с прямолинейными или разветвленными цепями, содержащие до 4 атомов углерода.

Соединения формулы I могут быть получены путем взаимодействия карбоновой кислоты формулы II: R₃-S-CHOH с аминопромежуточным соединением формулы III: H₂N - X Промежуточное соединение формулы III может быть использовано в качестве свободного основания или соли гидрохлорида. Карбоновая кислота формулы II является предпочтительной, легко превращаемой в активированную форму, например, в хлорангидрид кислоты, смешанный ангидрид и т.д.

Предпочтительно, чтобы аминопромежуточное соединение формулы III вначале обрабатывалось бис(триметилсилил) трифторацетамидом или бис(триметилсилил)ацетамидом в апротоновом растворителе, например, тетрагидрофуране или ацетонитриле с последующим добавлением соединения формулы II, например, хлорангидрида кислоты.

Альтернативно реакцию предпочтительно проводить в присутствии органического основания, например, триэтиламина. В качестве и реагента, и основания могут быть использованы два эквивалента аминопромежуточного соединения формулы III.

В тех случаях, когда аминопромежуточное соединение III не содержит свободной карбоновой кислоты, реакция взаимодействия кислоты II и амина III может быть проведена с растворимым в воде карбодиимидом, например, [1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид гидрохлорид].

Полученные продукты, где Х содержит -COR₂, который является сложным эфиром, могут быть гидролизованы путем обработки основанием, например, гидроокисью натрия для получения соединения, где R₂ является гидроксигруппой и R₃ - водород, поскольку имеет место сопутствующий гидролиз существующей ацетилтиогруппы. Производные S-ацила формулы I могут быть обработаны основанием, например, гидрохлоридом аммония, гидроксиамином, гидроксилинатрием и т.п. для получения производных меркаптана (т.е. соединения формулы I, где R³ = H) известными способами.

Предпочтительными соединениями формулы I в настоящем изобретении являются соединения, в которых Х представляет -H - -(CH₂)₂-COOH, - -H, -(CH₂) - или - ; R₃ = H и n = 0 Как показано выше, соединения формулы I содержат асимметричные центры, как указано знаком в формуле I. Дополнительный асимметричный центр присутствует в эфирных продуктах.

Таким образом, соединения формулы I могут существовать в зеркальной изомерной или диастереомерной форме или в виде их смеси. В указанных процессах в качестве исходных материалов могут использоваться рацематы, изомеры или диастереомеры. При получении диастереомерных продуктов они могут выделяться либо традиционными способами, либо хроматографией, либо фракционной кристаллизацией.

Соединения формулы I ингибируют активность нейтральной эндопептидазы (ЕС 3.4.24.11) и мембраносвязанной цинковой металлопептидазы, обнаруженной во многих тканях, включая мозг и почки. Нейтральная эндопептидаза гидролизует пептидные связи, которые находятся на аминном конце гидрофобных аминокислотных остатков.

Не ограничивая объема изобретения до специальной теории или механизма взаимодействия, заявители указывают, что ингибирование нейтральной эндопептидазы, по их мнению, снижает инактивацию экзогенно-введенных или эндогенных предсердных натрийуретных пептидов. Таким образом, соединения формулы I полезны при лечении гипертензии (артериальной гипертонии), сердечной недостаточности, почечной недостаточности или цирроза печени.

Диурез, натрийурез и снижение кровяного давления происходят в организме млекопитающего, например, человека, путем введения от около 1 до около 100 мг на кг массы тела в день, предпочтительно от около 1 до около 50 на кг массы тела в день одного или более ингибиторов нейтральной эндопептидазы формулы I или фармацевтически приемлемых солей. Ингибиторы нейтральной эндопептидазы формулы I предпочтительно вводятся перрорально, но могут вводиться парентерально, например, подкожно, внутримышечно и внутривенно. Ежедневная доза может вводиться единовременно или 2 или 4 раза в день.

Ингибиторы нейтральной эндопептидазы формулы I могут вводиться в комбинации с другими агентами, снижающими кровяное давление. Например, ингибиторы нейтральной эндопептидазы формулы I могут быть объединены для двойного введения с ингибитором ангиотензивного трансформируемого энзима АТЭ, таким как каптоприл, эофеноприл, фозиноприл, аналаприл, лизинопропил и т.д. Такие комбинации используют при массовом отношении пептидазы к АТЭ от около 1:10 до около 10:1.

Нейтральные ингибиторы эндопептидазы формулы I могут вводиться в комбинации с человеческим ANF (антинуклеарный фактор) 99-126. Такая комбинация содержала бы ингибитор формулы I в количестве 1-100 мг/кг массы тела и человеческий ANF 99-126 в количестве 0,001-0,1 мг на кг массы.

Нейтральные ингибиторы эндопептидазы формулы I или их формацевтически приемлемые соли могут вводиться также млекопитающим, например, человеку для ингибирования разложения эндогенной опиодид пентапептидазы [Met^5-] энкефалин [Tyr-Gly-Gly-Phe-Met] и [Leu⁵] энкефалин [Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu] в головном мозге или в периферических тканях.

По этой причине соединения, согласно изобретению, полезны в терапии, например, астмы, воспалений, боли, эпилепсии, эффективных расстройств, слабоумия и старческой спутанности сознания, ожирения и желудочно-кишечных расстройств (в частности, диареи и синдрома легко возбудимого кишечника), модуляции секреции желудочной кислоты и лечения гиперренинаемии и лейкемии. Соединения согласно изобретению и их фармацевтически приемлемые соли могут вводиться пациентам перрорально или парентерально в эффективном количестве при ежедневной дозе в количестве от 0,1 до 25 мг соединения на кг массы пациента. Введение может быть одноразовым или в 2-4 приема в день.

Кроме того, соединения формулы I, где Х представляет --COOH , также проявляют свойство ингибирования активности ангиотензивного измененного энзима. Поэтому эти соединения формулы I являются двойными ингибиторами и могут быть использованы в терапии, когда известна полезность ингибиторов ангиотензивного измененного энзима, например каптоприла [1]. Сюда может относиться сердечно-сосудистая терапия, например лечение гипертензии, сердечной недостаточности, снижение пред- и постишемической аритмии миокарда и фибрилляции и т.д., а также улучшение познавательной функции, лечение депрессии и тревоги и т.д.

Ингибиторы формулы I и другие фармацевтически приемлемые ингредиенты могут быть объединены для описанного фармацевтического использования. Приемлемые композиции для перрорального введения могут быть в виде таблеток, капсул, эликсиров, а для парентерального введения - в виде стерильных растворов и суспензий. Около 10-50 мг активного ингредиента соединяется с физиологически приемлемым носителем, наполнителем, связующим, консервантом, стабилизатором, корригентом и т.д. в единичной дозе, причем приемлемым в фармацевтической практике способом.

Ниже приведены примеры, иллюстрирующие изобретение, температура указана по стоградусной шкале.

П р и м е р 1. 1-[3,3,3-Трифтор-2-(меркаптометил)-1-оксопропил]-L-аланин.

А. N-[2-[ацетилтио)метил]-3,3,3-трифтор-1-оксопропил]-L-аланин.

Аланин в количестве 445 мг, 5 ммоля суспендировался в 5 мл метиленхлорида, добавлялось 4 мл бис(триметилсилил)трифторацетамида и полученный раствор перемешивался в течение 3 ч при комнатной температуре. Добавлялось 4 мл диметилформамида и смесь перемешивалась всю ночь. Весь материал переходил в раствор. Затем добавлялся 1 г (4,26 ммоля) 2-трифторметил-3-ацетилтиопропионилхлорида и 2 мл тетрагидрофурана и смесь перемешивалась всю ночь при комнатной температуре. Затем реакционная смесь концентрировалась на вращающемся испарителе. Остаток распределялся между этилацетатом и 5%-ным тисульфатом калия. Этилацетатный раствор промывался 5%-ным бисульфатом калия и рассолом и концентрировался на 400 мл колонне Мерке с силикагелем с использованием смеси 40:1:1 метиленхлорида:метанола:уксусной кислоты в качестве элюента, в результате получали соединение А, указанное в названии, в виде желтого масла в количестве 960 мг. При тонкослойной хроматографии R_f = 0,45 (20:1:1 метиленхлорид:метанол:уксусная кислота).

В. 1-[3,3,3-Трифтор-2-(меркаптометил)-1-оксопропил]-L-аланин.

Соединение А, указанное в названии, в количестве 960 мг (3,3 ммоля) перемешивалось при 0^оС в атмосфере аргона с 2,2 мл концентрированного гидрохлорида аммония и 4,7 мл воды в течение 10 мин, а затем добавлялся 5%-ный бисульфат калия (100 мл).

Полученный раствор экстрагировался этилацетатом. Общий этилацетатный экстракт промывался 5% -ным тисульфатом калия и рассолом, высушивался над сульфатом магния и концентрировался до получения масла, которое затем хроматографировалось на 200 мл колонне Мерка с силикагелем с использованием смеси 40: 1: 1 метиленхлорид:метанол:уксусная кислота в качестве элюента с получением смеси диастереомеров соединения А, указанного в названии, в виде белого твердого продукта в количестве 720 мг с точкой плавления 106-107^оС. При тонкослойной хроматографии R_f - 0,40 (20:1:1 метиленхлорид:метанол:уксусная кислота), []_D = -27,1^o (C = 0,73, метанол).

Вычислено, %: C 34,28; H 4,11; N 5,71; F 23,24; S 13,07; SH 13,49.

C₇H₁₀.

Найдено, %: C 34,52; H 4,25; N 5,76; F 23,20; S 12,76; SH 13,74.

П р и м е р 2. N-[2-[(Ацетилтио)метил]-3,3,3-трифтор-1-оксопропил]-L-фенилала-нин, изомер А.

Перемешанная суспензия L-фенилаланина в количестве 7,60 г (46 ммоля) в 45 мл сухого ацетонитрила охлаждалась в атмосфере аргона до 0^оС и к ней добавлялось 24,7 мл, 82 ммолей бис(триметилоилил)трифторацетамида. Реакционная смесь перемешивалась и медленно нагревалась до комнатной температуры.

После 4 ч практически вся аминокислота переходила в раствор, который был светло-желтого цвета. По каплям в течение 45 мин при 5^оС к раствору добавлялся растворенный в 10 мл ацетонитрила 2-трифторметил-3-ацетилтиопропионилхлорид в количестве 4,69 г (20 ммоля), после чего реакционная смесь нагревалась до комнатной температуры и перемешивалась всю ночь. Затем смесь выпаривалась при разряжении с получением светло-желтого масла. Масло распределялось между водой (75 мл) и этилацетатом (100 мл). Вся смесь отфильтровывалась для удаления белого осадка (фенилаланина) и органический слой отделялся. Водная фаза еще раз экстрагировалась 50 мл этилацетата. Объединенный этилацетатный экстракт промывался рассолом, высушивался над безводным сульфатом магния и выпаривался с получением неочищенной смеси диастереомеров в виде светло-желтого порошка. 2 г продукта подвергалось тонкослойной хроматографии на силикагеле (125:1 силикагель:соединение) с использованием в качестве элюента смеси этилацетат:гексаны:уксусная кислота при соотношении 100:100:1, при этом выход составил: 0,370 г быстроэлюирующего диастереомера (изомер В).

Оставшиеся 18,1 г неочищенного материала подвергались тонкой хроматографии аналогичным образом, при этом выход составил: 2,67 г изомера А и 2,92 г изомера В. Общий выход изомера А составил 3,04 г в виде белого кристаллического порошка с точкой плавления 183-185^оС, при тонкослойной хроматографии R_f = 0,30 (200:100:1 этилацетат:гексаны:уксусная кислота). []_D = -98,8^o (C = 1,00, метанол).

Вычислено, %: С 49,58; H 4,44; N 3,86; F 15,69; S 8,82.

C₁₅H₁₆F₃NO₄S.

Найдено, %: C 49,63; H 4,35; N 3,70; F 15,35; S 8,81.

П р и м е р 3. N-[2-[(Ацетилтио)метил]-3,3,3-трифтор-1-оксопропил]-L-фенилала- нин, изомер В.

Неочищенная смесь диастереомеров, полученных в примере 3, в количестве 20,1 г повергалась тонкослойной хроматографии на силикагеле (125:1 силикагель:соединение) с использованием в качестве элюента смеси:этилацетат:гексаны: уксусная кислота при соотношении 100:100:1 с получением медленно элюирующего изомера (изомер В) в количестве 0,38 г и 2,92 г.

Указанные 2,92 г измельчались в порошок, посредством гексанов, содержащих 10% этилацетата, затем белый кристаллический порошок отфильтровывался с получением 0,72 г материала. Фильтрат концентрировался с получением 2,1 г материала, который подвергался тонкослойной хроматографии, как указано выше, с получением приблизительно 1,3 г материала, который соединялся с 0,38 г и 0,72 г и выпаривался из метанола с получением 2,20 г изомера В в виде белого кристаллического порошка с точкой плавления 134-136^оС, при тонкослойной хроматографии R_f = 0,14 (200:100:1 этилацетат:гексаны:уксусная кислота), []_D = +118^o (c = 1,00, метанол).

Вычислено, %: C 49,58; H 4,44; N 3,86; F 15,69; S 8,82.

Найдено, %: C 49,58; H 4,33; N 3,78; F 15,44; S 8,54.

В примерах 5 и 6 описаны способы получения единичных диастереомеров, изомеров А и В, относящихся к смеси диастереомеров, указанных в примере 1.

П р и м е р 4. N-[3,3,3-Трифтор-2-(меркаптометил)-1-оксопропил]-L-фенилаланин, изомер А.

Суспензия соединения изомера А, указанного в названии, например из примера 3, в количестве 500 мг, 1,37 ммоля в 0,9 мл концентрированного гидрохлорида аммония и 2 мл воды перемешивалась при комнатной температуре в атмосфере аргона в течение 5-6 мин, в течение этого времени получали прозрачный раствор. Затем раствор обрабатывался 50 мл 5%-ного раствора гидросульфата калия и полученный водный раствор экстрагировался четырьмя 25 мл порциями этилацетата. Весь этилацетатный экстракт высушивался над безводным сульфатом магния и выпаривался с получением 0,43 г неочищенного продукта.

Тонкослойной хроматографией на силикагеле (125:1 силикагель:соединение) с CH₂Cl₂:CH₃OH:HOA с при соотношении 40:1:1 получалось 370 мг продукта.

Аналогично другие 2,3 г (6,3 ммоля) изомера А соединения из примера 3 диацетилировались и очищались тонкослойной хроматографией с выходом 2,00 г продукта. Эти два продукта объединялись и полученный твердый продукт измельчался в порошок при помощи гексанов и нескольких капель эфира. Растворитель сливался, а твердый продукт высушивался в вакууме с получением 1,79 г изомера в виде белого кристаллического порошка с т.пл. 133-134,5^оС, при тонкослойной хроматографии R_f = 0,30 (40:1:1 метиленхлорид:метанол:уксусная кислота): []_D = -8,1^o (C = 1,00, метанол).

Вычислено, %: C 48,59; H 4,39; N 4,36; F 17,74; S 9,98; SH 10,29.

C₁₃H₁₄F₃NO₃S.

Найдено, %: C 48,47; H 4,26; N 4,30; F 17,49; S 10,34; SH 10,57.

П р и м е р 5. N-[3,3,3-Трифтор-2-(меркаптометил)-1-оксопропил]-L-фенилаланин, изомер В.

Суспензия указанного в названии изомера В соединения из примера 4 в количестве 2,05 г, 5,64 ммоля в 3,6 мл концентрированного гидрохлорида аммония и 8,0 мл воды перемешивалась в атмосфере аргона в течение 7-10 мин. Прозрачный светло-желтый раствор подкислялся водным 5% гидросульфатом калия до рН 2 и экстрагировался четырьмя порциями по 50 мл этилацетата. Весь органический экстракт промывался 50 мл рассола, высушивался над безводным сульфатом магния и растворитель удалялся при пониженном давлении с получением 1,87 г желтого твердого продукта на силикагеле (130:1 силикагель:соединение) с использованием в качестве элюента CH₂Cl₂:CH₃OH:HOA при соотношении 50: 1:1 получалось 1,7 г изомера В в виде белого твердого с т.пл. 148-150^оС при тонкослойной хроматографии Rf = 0,29 (40:1:1 метиленхлорида:метанол:уксусная кислота), []_D = +49,2^o (C = 1,00, метанол).

Вычислено, %: C 48,59; H 4,39; N 4,36; F 17,74; S 9,98; SH 10,29.

C₁₃H₁₄F₃NO₃S.

Найдено, %: C 48,43; H 4,10; N 4,21; F 17,42; S 10,27; SH10,09.

П р и м е р 6. N-[2-[(Ацетилтио)метил]-3,3,3-трифтор-1-оксопропил]-L-триптофан, изомер А.

Перемешанная суспензия L-триптофана (4,8 г, 20 ммоля) в 50 мл сухого ацетонитрила в атмосфере аргона охлаждалась до 0-5^оС и затем к ней добавлялся бис(триметилсилил)трифторацетамид (5,3 мл, 20 ммол). Реакционная смесь перемешивалась и нагревалась до комнатной температуры. Через 3 ч раствор охлаждался до 5^оС и через 45 мин постепенно добавлялся раствор 2-трифторметил-3-ацетилтиопропионилхло-рида в количестве 4,69 г, 20 ммоля в 7 мл ацетонитрила. Реакционная смесь перемешивалась всю ночь, постепенно нагреваясь до комнатной температуры. Растворитель выпаривался и желтый маслянистый осадок распределялся между этилацетатом (50 мл) и водой (35 мл). Затем водная фаза экстрагировалась этилацетатом (3х50 мл) и объединенный этилацетатный экстракт промывался рассолом, высушивался MgSO₄ и выпаривался с получением желтого маслянистого остатка в количестве 14,15 г. Часть продукта в количестве 12,25 г подвергалась тонкослойной хроматографии на силикагеле (120:1 силикагель:соединение) с использованием смеси этилацетат:гексаны:уксусная кислота при соотношении 150:100:1 с получением быстроэлюирующего диастереомера (изомер А) в количестве 1,9 г 4,2 г обоих диастереомеров и 1,5 г медленноэлюирующего диастереомера (изомер В). При дальнейшем элюировании смесью этилацетат:гексаны:уксусная кислота при соотношении 200:100:1 дополнительно получалось 170 мг изомера В. Смешанные фракции еще раз подвергались хроматографии при тех же условиях с получением 1,65 г изомера А и 1,76 г изомера В.

1,9 г и 1,65 г изомера А объединялись и перекристаллизовывались из толуола с получением 2,8 г не совсем белого кристаллического порошка. Дополнительные 360 мг изомера А) из тонкослойной хроматографии 1,5 г неочищенного продукта), перекристаллизовывались из толуола с получением 260 г белого кристаллического порошка; общий выход изомера А составил 3,06 г, точка плавления 140-143^оС при тонкослойной хроматографии R_f = 0,46 (300:100:1 этилацетат:гексаны:уксусная кислота) []_D = -96,0^o (C = 1,00, метанол).

Вычислено, %: C 50,74; H 4,26; N 6,96; F 14,16; S 7,97.

C₁₇H₁₇F₃N₂O₄S.

Найдено, %: C 50,47; H 4,04; N 6,86; F 13,82; S 8,18.

П р и м е р 7. N-[2-[(Ацетилтио)метил]-3,3,3-трифтор-1-оксопропил]-L-триптофан, изомер В.

3,62 г объединенного изомера В из примера 7 перекристаллизовывалось из толуола с получением 2,56 г изомера В в виде порошка белого цвета с точкой плавления 148-151^оС, при тонкослойной хроматографии R_f = 0,35 (300:100:1 этилацетат:гексаны:уксусная кислота), []_D = +110,6^o (C = 1,00, метанол).

Вычислено, %: С 50,51; H 4,29; N 6,93; F 14,10; S 7,93.

C₁₇H₁₇F₃N₂O₄S 0,1H₂O.

Найдено, %: C 50,67; H 4,08; N 6,62; F 13,72; S 7,82.

П р и м е р 8. N-[3,3,3-Трифтор-2-(меркаптометил)-1-оксопропил]-L-триптофан, изомер А.

Суспензия продукта из примера 7 в количестве 2,6 г, 6,5 ммоля в 4,25 мл концентрированной гидроокиси аммония и 9,3 мл воды перемешивались при комнатной температуре в атмосфере аргона в течение 12-15 мин. Полученный раствор подкислялся 200 мл 5% бисульфата калия и экстрагировался этилацетатом (5х50 мл). Весь этилацетатный экстракт промывался рассолом, высушивался (MgSO₄) и выпаривался с получением 2,4 г светло-желтого порошка. Этот материал объединялся с дополнительным количество 80 мг соединения и подвергался тонкослойной хроматографии на 300 г силикагеля с использованием смеси метиленхлорид: метанол:уксусная кислота при соотношении 40:1:1 с получением 2,3 г белого твердого продукта. Этот твердый продукт превращался в порошок при помощи толуола, содержащего приблизительно 5% этилацетата, при этом при фильтрации собиралось 1,25 г белого кристаллического порошка, фильтрат выпаривался до полного высушивания и остаток измельчался аналогичным образом с получением дополнительного количества 560 г материала, который объединялся с первоначальным количеством 1,25 г с получением 1,81 г изомера А в виде белого кристаллического порошка с температурой плавления 148,5-150,5^оС, при тонкослойной хроматографии R_f = 0,48 (300:100:1 этилацетат:гексаны:уксусная кислота), []_D = -10,3^o (C = 1,00, метанол).

Вычислено, %: C 49,99; H 4,20; N 7,78; F 15,82; S 8,90; SН 9,18.

C₁₅H₁₅F₃N₂O₃S.

Найдено, %: С 49,98; H 3,97; N 7,54; F 15,42; S 9,12; SH 9,38.

П р и м е р 9. N-[3,3,3-Трифтор-2-(меркаптометил)-1-оксопропил]-L-триптофан, изомер В.

Суспензия продукта из примера 8 в количестве 2,41 г 5,99 ммоля и 3,75 мл концентрированного гидрохлорида аммония и 8,25 мл воды перемешивались при комнатной температуре и атмосфере аргона в течение 12-15 мин. Полученный раствор подкислялся 200 мл 5%-ного бисульфата калия и экстрагировался этилацетатом (5х50 мл). Объединенный этилацетатный экстракт промывался рассолом, высушивался (MgSO₄) и выпаривался с получением 2,3 г желтого смолистого твердого вещества. Проводилась тонкослойная хроматография на 315 г силикагеля с использованием смеси метиленхлорид:метанол:уксусная кислота при соотношении 40:1:1 с получением 2,1 г светло-желтого стекловидного остатка, который измельчался в порошок посредством толуола, содержащего приблизительно 5% этилацетата с получением 1,55 г изомера В, указанного в названии в виде белого кристаллического порошка с т.пл. 144-147^оС, при тонкослойной хроматографии R_f = 0,44 (300:100:1 этилацетат:гексаны:уксусная кислота []_D = +35,8^o (C = 1,00, метанол).

Вычислено, %: C 49,74; H 4,23; N 7,74; F 15,74; S 8,85; SH 9,13.

C₁₅H₁₅F₃N₂O₃S0,1H₂O.

Найдено, %: C 50,05; H 3,99; N 7,45; F 15,36; S 9,07; SH 9,34.

П р и м е р 10. 3-[[2-[(Ацетилтио)метил]-3,3,3-трифтор-1-оксопропил] амино]-пропио- новая кислота.

Перемешанная суспензия -аланина (1,34 г, 15 ммоля) в 30 мл сухого ацетонитрила в атмосфере аргона охлаждалась до 0-5^оС и к ней добавлялось 8,0 мл, 30 ммоля бис(триметилсилил)трифторацетамида. Реакционная смесь постепенно нагревалась до 6-7^оС в течение часа, за это время вся аминокислота переходила в раствор. Затем 3,52 г, 15 ммоль 2-трифторметил-3-ацетилтиопропионилхлорида растворялось в 6 мл ацетонитрила и по каплям добавлялось к смеси при 5^оС в течение 45 мин, после чего реакционная смесь перемешивалась и нагревалась до комнатной температуры. Через 1,5 ч растворитель выпаривался, остаток в виде желтой жидкости распределялся между водой (50 мл) и этилацетатом (50 мл) и органический слой отделялся. Водная фаза затем экстрагировалась этилацетатом (3х40 мл) и объединенный этилацетатный экстракт промывался рассолом, высушивался над безводным сульфатом магния и выпаривался с получением 6,7 г желтого твердого вещества. Тонкослойной хроматографией на силикагеле (100:1 силикагель:соединение) с использованием смеси метиленхлорид:метанол:уксусная кислота при соотношении 40:1 в качестве элюента получали 1,62 г материала, который гомогенизировался тонкослойной хроматографией, также как 0,65 г материала, который был почти гомогенный, и 1,16 г материала, который не очищался, не содержит в большей степени требуемый продукт. 0,65 г и 1,62 г продукта измельчались в порошок посредством смеси гексаны:этилацетат (4:1) 2,21 г рацемического продукта в виде белого кристаллического порошка с температурой плавления 114-116^оС, при тонкослойной хроматографии R_f = 8,44 (20:1:1 метиленхлорид:метанол:уксусная кислота).

C9H13F3NO4S.

Вычислено, %: C 37,63; H 4,21; N 4,88; F 19,84; S 11,66.

Найдено, %: C 37,62; H 4,12; N 4,83; F 19,79; S 11,38.

П р и м е р 11. [3-[[2-(Меркаптометил)-3,3,3-трифтор-I-оксопропил]амино]-пропионовая кислота.

Суспензия соединения, указанного в названии примера 11, в количестве 2,08 г 7,24 ммоль в 4,2 мл концентрированной гидроокиси аммония и 9,3 мл воды перемешивалась при комнатной температуре в атмосфере аргона в течение 7-10 мин, за это время образовывался прозрачный раствор. Затем раствор подкислялся до рН 2 приблизительно 200 мл 5% гидросульфата калия и экстрагировался этилацетатом (5х50 мл). Объединенный этилацетатный экстракт промывался 50 мл рассола, высушивался над безводным сульфатом магния и выпаривался с получением 1,74 г не совсем белого твердого вещества.

Тонкослойной хроматографией на силикагеле (120:1 силикагель:соединение) с использованием смеси метиленхлорид:метанол:уксусная кислота при соотношении 40: 1: 1 в качестве элюента получалась 1,5 г соединения. Аналогично из 1,2 неочищенной фракции того же исходного материала (номинально 4,2 ммоля) деацилированием и тонкослойной хроматографией получалось еще 0,45 г требуемого продукта. Две фракции продукта объединялись с получением 1,95 г соединения, указанного в названии, рацемического соединения в виде белого кристаллического порошка с т.пл. 108-110^оС, при тонкослойной хроматографии R_f = 0,40 (20:1:1 метиленхлорид:метанол:уксусная кислота).

Вычислено, %: C 34,28; H 4,11; N 5,71; F 23,24; S 13,07; SH 13,49.

C₇H₁₀F₃NO₃S.

Найдено, %: C 34,36; H 4,04; N 5,58; F 22,94; S 13,07; SH 13,64.

П р и м е р 12. N-[3,3,3-Трифтор-2-(меркаптометил)-1-оксопропил]-L-аспарагино-вая кислота.

а) N-[2-[(ацетилтио)метил]-3,3,3-трифтор-1-оксопропил]-L-аспарагиновая кислота.

Перемешанная суспензия L-аспарагиновой кислоты в количестве 2,66 г, 20 ммоля в 35 мл сухого ацетонитрила в атмосфере аргона охлаждалась до 0^оС и затем добавлялся бис(триметилсилил)трифторацетамид в количестве 10,62 мл, 40 ммоля. Реакционная смесь перемешивалась и постепенно нагревалась до комнатной температуры всю ночь, затем 5 мл диметилформамида добавлялось к смеси и она перемешивалась в течение 2 ч. Полученный прозрачный светло-желтый раствор охлаждался до 50^oС и к нему по каплям добавлялось 4,69 г, 20 ммоль 2-трифторметил-3-ацетилтиопропионилхлорида, растворенного в 6 мл ацетонитрила. Реакционная смесь перемешивалась и нагревалась до комнатной температуры всю ночь, а затем растворитель выпаривался. Желтый, имеющий консистенцию сиропа, остаток распределялся между водой (50 мл) и этилацетатом (50 мл) и органический слой отделялся. Затем водная фаза экстрагировалась этилацетатом (3х50 мл) и объединенный этилацетатный экстракт промывался рассолом, высушивался и выпаривался с выходом 12,2 г светло-желтого остатка. Тонкослойной хроматографией на силикагеле (125:1 силикагель:соединение) с использованием в качестве элюента смеси этилацетат:уксусная кислота при соотношении 15: 1 получалось 5,25 г основной фракции, которая была в виде светло-желтого липкого твердого продукта, и 0,63 г фракции, которая практически гомогенизировалась при тонкослойной хроматографии, общего количества 5,88 г соединения, указанного в названии, в виде смеси диастереомеров.

в) N-[3,3,3-трифтор-2-(меркаптометил)-1-оксопропил]-L-аспарагиновая кислота.

Суспензия продукта, полученного в разделе а/ в количестве 4,68 г, 14,1 ммоль в 8,25 мл концентрированной гидроокиси аммония и 20,6 мл воды перемешивалось при комнатной температуре в атмосфере аргона приблизительно в течение 10 мин. Полученный раствор подкислялся 400 мл 5%-ного гидросульфата калия и экстрагировался этилацетатом (4х75 мл). Объединенный этилацетатный экстракт промывался рассолом, высушивался (MgSO₄) и выпаривался с получением 3,41 г светло-желтого твердого продукта. Тонкослойной хроматографией на 350 г силикагеля элюированием смесью метиленхлорид:метанол:уксусная кислота при соотношении 15:1:1 получали 2,4 г светло-желтого твердого продукта, который измельчался в порошок метиленхлоридом, содержащим несколько капель этилацетата и метанола, и получалось 2,1 г соединения, указанного в названии (приблизительно 1:1 смесь диастереомеров) в виде белого кристаллического порошка с т.пл. 180-183^оС, при тонкослойной хроматографии R_f = 0,31 (10:1:1 метиленхлорид:метанол:уксусная кислота), []_D = -1,9^o (C = 1,00, метанол).

Вычислено, %: C 32,70; H 3,60; N 4,77; F 19,40; S 10,92; SH 11,26.

С₈Н₁₀F₃NO₅S0,25H₂O.

Найдено, %: C 32,64; H 3,20; N 4,70; F 19,23; S 10,85; SH 11,15.

П р и м е р 13. N-[2-[(Ацетилтио)метил]-3,3,3-трифтор-1-оксопропил]-L-( )-нафтиилаланин, изомер А.

Перемешанная суспензия L-нафтилаланина в количестве 1,92 г, 8,92 мл в 50 мл ацетонитрила охлаждалась в атмосфере аргона до 0-5^оС и к ней добавлялся бис(триметилсилил)трифторацетамид (4,75 мл, 17,84 ммол). Реакционная смесь перемешивалась и медленно нагревалась до комнатной температуры. Через 1,5 ч к ней добавлялось дополнительно 2,3 мл бис(триметилсилил)трифторацетамида (8,7 ммоля), в результате получался прозрачный раствор. Реакционная смесь охлаждалась до 5^оС, и по каплям добавлялся 2-трифторметил-3-ацетилтиопропионилхлорид (2,09 г, 8,92 ммоль), растворенный в 6 мл ацетонитрила, затем смесь медленно нагревалась до комнатной температуры. Через час реакционная смесь выпаривалась с образованием желтого твердого остатка, распределенного между водой (50 мл) и этилацетатом (75 мл), и органический слой сепарировался.

Водный слой экстрагировался дополнительным количеством этилацетата (3х45 мл), после чего общий этилацетатный экстракт промывался рассолом, высушивался (MgSO₄) и этилацетат удалялся под вакуумом, с получением светло-желтого твердого остатка. Этот неочищенный материал подвергался тонкослойной хроматографии на 700 г силикагеля и элюированием смесью этилацетат: гексаны: уксусная кислота при соотношении 100:100:1, получалось 1,58 г быстроизолирующего изомера А и 1,56 г медленноэлюирующего изомера В. 300 мг изомера А кристаллизовалось из смеси гексаны:этилацетат (2:1) с выходом 160 мг указанного в названии изомера в виде белых длинных игольчатых кристаллов, температура плавления 162-164^оС, при тонкослойной хроматографии R_f = 0,29 (100: 50: 1 этилацетат: гексан:уксусная кислота), []_D = -79,2^o (C = 1,00, метанол).

Вычислено, %: C 55,20; H 4,39; N 3,39; F 13,79; S 7,76.

C₁₉H₁₈F₃NO₄S.

Найдено, %: C 55,02; H 4,15; N 3,29; F 13,60; S 7,54.

П р и м е р 14. N-[2-[(Ацетилтио)метил)-3,3,3-трифтор-1-оксопропил]-L-( )-нафтилаланин, изомер В.

Изомер В продукта из примера 14 вновь подвергался тонкослойной хроматографии с использованием смеси этилацетат:уксусная кислота (200:1,5) и этилацетат: гексаны:уксусная кислота (100:50:1), в качестве элюента для удаления изомера А, являющегося примесью, и получения 1,4 г указанного в названии изомера В в виде белого твердого продукта с т.пл. 166-169^оС, при тонкослойной хроматографии R_f = 0,15 (100:50:1 этилацетат:гексан:уксусная кислота), []_D = +116,3^o (C = 1,00, метанол).

Вычислено, %: С 55,20; H 4,39; N 3,39; F 13,76; S 7,76.

C₁₉H₁₈F₃NO₄S.

Найдено, %: C 54,96; H 4,39; N 3,35; F 13,75; S 7,83.

П р и м е р 15. (S)--[[3,3,3-Трифтор-2-(меркаптометил)-]-оксопропил] амино]-2- нафталенпропионовая кислота, изомер А.

Суспензия продукта из примера 14 (2,01 г, 4,86 ммоль) в 3,2 мл концентрированного гидроксида аммония и 8,0 мл воды перемешивалась при комнатной температуре в атмосфере аргона в течение 8 мин. Прозрачный раствор подкислялся 5%-ным бисульфатом калия до рН около 2 и экстрагировался этилацетатом (4х50 мл). Общий этилацетатный экстракт промывался рассолом, высушивался (MgSO₄) и выпаривался с получением 1,72 г светло-желтого воскообразного твердого продукта. Очистку продукта производили тонкослойной хроматографией на силикагеле (150:1 силикагель:вещество) с элюированием смесью этилацетат: гексаны: уксусная кислота (100:50:1) с получением 1,42 г белого кристаллического продукта, после обработки которого толуолом и высушивании в вакууме получилось 1,24 г указанного в названии изомера в виде белого твердого продукта с температурой плавления 165-167^оС, при тонкослойной хроматографии R_f = 0,26 (100:50:1 этилацетат:гексан:уксусная кислота), []_D = +31,9^o (C = 1,00, метанол).

Вычислено, %: C 54,98; H 4,34; N 3,77; F 15,35; S 8,63; SH 8,90.

C₁₇H₁₆F₃NO₃S.

Найдено, %: C 55,17; H 4,29; N 3,63; F 15,42; S 8,68; SH 9,18.

П р и м е р 16. (S)--[[3,3,3-трифтор-2-(меркаптометил)-метоксопропил] амино]-2-нафталенпропи оновкислота, изомер В.

Раствор продукта из примера 15 в 10 мл метанола обрабатывался раствором гидроксиламингидрохлорида (0,552 г, 7,94 ммоль) в 7,9 мл 1н. гидроокиси натрия и перемешивался при комнатной температуре. Реакция завершалась через 35 мин, судя по тонкослойной хроматографии. Реакционная смесь выпаривалась, полученное белое твердое вещество помещалось в 25 мл воды и экстрагировалось этилацетатом (4х35 мл). Общий органический экстракт промывался 50 мл рассола, высушивался (MgSO₄) и выпаривался с получением 1,4 г белого твердого продукта. Тонкослойной хроматографией проводили очистку продукта на силикагеле (180: 1 силикагель:соединение), элюируя смесью этилацетат:гексаны: уксусная кислота (100:50:1) с получением 1,24 г указанного в названии изомера В в виде белого кристаллического порошка с т.пл. 172-179^оС при тонкослойной хроматографии R_f = 0,19 (100:50:1 этилацетат:гексан:уксусная кислота), []_D = +71,3^o (C = 1,00, метанол).

Вычислено, %: C 54,98; H 4,34; N 3,77; F 15,35; S 8,63; SH 8,90.

C₁₇H₁₆F₃NO₃S.

Найдено, %: C 55,02; H 4,30; N 3,55; F 15,18; S 8,64; SH 9,09.

П р и м е р 17. N-[2-[Ацетилтио метил]-3,3,3-трифтор-1-оксопропил]-L-лейцин, изомер А.

Перемешанная суспензия L-лейцина (2,62 г, 20 ммоль) в 35 мл сухого ацетонитрила в атмосфере аргона охлаждалась до 0-5^оС и к ней добавлялся бис(триметилсилил)-трифторацетамид (10,62 мл, 40 ммоль). Реакционная смесь перемешивания медленно нагревалась до комнатной температуры. Через 2 ч добавлялось еще 3,5 мл (13 ммоль) бис(триметилсилил)трифторацетамида, в результате получался прозрачный раствор лимонного цвета после дополнительного перемешивания в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем реакционная смесь охлаждалась до 0-5^оС и к ней через 45 мин по каплям добавлялся 2-трифторметил-3-ацетилтиопропионилхлорид (4,69 г, 20 ммоль), растворенный в 8 мл ацетонитрила. После перемешивания в течение 1,5 ч при 0-5^оС до комнатной температуры тонкослойная хроматография показала завершение реакции. Реакционная смесь выпаривалась при пониженном давлении с получением желтого маслян