Биологически активное средство, способ его получения и препарат, содержащий указанное средство, и способ использования препарата

Биологически активное средство, способ его получения и препарат, содержащий указанное средство, и способ использования препарата

Реферат

 

Биологически активное средство (БАС), обладающее иммуномодулирующим свойством, на основе представленных органическими соединениями компонентов клеточных мембран (ККМ) гомогенизированной животной ткани, содержит в своем составе термостабильные, низкомолекулярные модифицированные компоненты клеточных мембран с антигенной структурой, модифицированной при процессах эмбриогенеза и/или пролиферации, и/или дифференцировки клеток, и/или патологии, предшествовавшей или сопутствовавшей регенерации и/или репарации ткани. Способ получения БАС, при котором сырье из животной ткани измельчают и гомогенизируют, а из гомогената выделяют содержащий клеточные мембраны (КМ) осадок, из которого после ресуспендирования получают ККМ. В качестве сырья используют модифицированную животную ткань, гомогенат которой очищают от неразрушенных элементов ткани путем фильтрации и/или центрифугирования при ускорении 150 250 g в течение 10 15 мин и выделяют осадок, содержащий КМ, который подвергают гидролизу. Продукты гидролиза фильтруют и/или центрифугируют при ускорении свыше 1 500 g в течение 20 40 мин с выделением супернатанта продуктов гидролиза, содержащих ККМ, в качестве целевого продукта. Препарат для нормализации физиологического состояния организма человека и животных, содержащий БАС на основе представленных органическими соединениями ККМ животной ткани, и наполнитель, в качестве БАС содержит в своем составе термостабильные, низкомолекулярные модифицированные ККМ, при его содержании в препарате 0,001 85,0 мас. остальное наполнитель. Способ нормализации физиологического состояния человека и животных, предусматривающий введение в организм препарата на основе органических соединений ККМ животной ткани, в качестве препарата используют композицию из 0,001 - 85,0 мас. БАС, содержащего в своем составе модифицированные ККМ, и 15,0 99,999 мас. наполнителя. 4 с. и 36 з.п. ф-лы, 1 ил. 8 табл.

Группа изобретений относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к области получения биологически активных средств, обладающих иммуномодулирующим действием, для использования в медицине и ветеринарии с целью нормализации физиологического состояния организма человека и животных, в частности, для восстановления функциональной активности органов и тканей.

Биологически активное средство, в соответствии с изобретением, относится к веществам животного происхождения и включает в себя органические соединения.

Различного рода патологические нарушения в организме человека и животных вызывают отклонения от нормы параметров физиологического состояния. В этих случаях лечебное воздействие на организм, в том числе профилактическое воздействие, заключается в стабилизации, то есть поддержании в норме указанных параметров либо (при отклонениях их от нормы) в таком воздействии на организм, при котором эти параметры нормализуются.

Группа изобретений касается биологически активного средства, способа его получения и препарата на основе биологически активного средства, используемого для нормализации физиологического состояния организма.

Нормализацию физиологического состояния организма человека и животных можно осуществлять по двум направлениям: во-первых, путем непосредственного воздействия на патологию и, во-вторых, путем опосредованного воздействия на системы, органы и ткани организма, отвечающие за поддержание в норме параметров гомеостаза.

Введение гормональных препаратов, медиаторов, ростовых факторов, химиотерапия и тому подобные средства обеспечивают непосредственное воздействие на клетки-мишени путем рецепции. Например, при лечении диабета вводят инсулин, восполняющий функциональный недостаток поджелудочной железы; при нарушениях функциональной активности нервной системы вводят нейромедиаторы, способствующие нормализации пороговой чувствительности нейронов и, соответственно, улучшению передачи нервных импульсов; при нарушениях функциональной активности иммуной системы организма используют иммуномедиаторы, коррелирующие иммунный ответ, и так далее.

При опосредованном воздействии на организм лечение заболеваний обеспечивается за счет мобилизации внутренних ресурсов организма. Так, при протекании процессов, связанных с регенерацией органов и тканей, с их реабилитацией или восстановлением их функций, а также при воспалительных и инфекционных процессах стимулируют иммунную систему организма. Благодаря этому обеспечивают улучшение иммунологического и, как следствие, общего состояния организма.

Известно биологически активное средство на основе зародышевой ткани, обладающее иммуномодулирующим свойством, восстанавливающее физиологическое состояние организма и регулирующее обмен клеток (FR-А-2413912). Указанное биологически активное средство (далее по тексту БАС) выполнено на основе ингредиентов измельченной и гомогенизированной животной ткани, выделенной из зародыша, в смеси с физиологической сывороткой.

Вследствие наличия в составе данного средства иммуномодулирующего фактора оно обладает сравнительно высоким иммуномодулирующим свойством, благодаря чему его использование обеспечивает нормализацию физиологического состояния организма, в том числе лечение, и повышение продуктивности животных на 5-15% по сравнению с контрольной группой.

Эффективность известного БАС все же недостаточна вследствие того, что наряду с иммуномодулирующими факторами оно содержит в своем составе иммунодепрессанты, которые препятствуют полному проявлению иммуномодулирующего эффекта. Иммуномодулирующее свойство указанного средства, по сути дела, является суммарным результатом, который обеспечивается одновременным присутствием в нем иммуностимулирующих факторов и депрессантов. Таким образом, фактически специфическая активность известного БАС, зависящая от соотношения концентраций иммуностимулирующих факторов и депрессантов, сравнительно невелика вследствие значительной концентрации депрессантов в его составе.

Другим недостатком указанного БАС является повышенное содержание в его составе высокомолекулярных соединений, являющихся иммуногенами, приводящее к появлению побочных иммунных реакций (аллергия, гиперчувствительность замедленного типа и тому подобное).

В значительной степени недостатки вышеописанного БАС зависят от способа его получения, в котором технологический процесс заканчивается операцией измельчения и гомогенизации сырья из животной ткани, что приводит к обязательному присутствию значительного количества депрессантов и высокомолекулярных соединений в его составе.

Известно также БАС, обладающее иммуномодулирующим свойством, для нормализации физиологического состояния организма, выполненное на основе продуктов гидролиза ингредиентов измельченного сырья животного происхождения, взятого предпочтительно от недоразвитых животных, способы его получения и применения для заживления травмированных участков тела (US-А-4455302). В его состав входят растворимые полипептиды, аминокислоты и минеральные вещества, полученные в результате гидролиза ткани.

Данное БАС обладает высокой эффективностью в отношении нормализации параметров физиологического состояния организма. Это объясняется тем, что известное БАС характеризуется высоким соотношением эффектов иммуностимуляции и иммуноингибирования, с одной стороны, в связи с более высоким содержанием в его составе иммуностимулирующих факторов за счет присутствия продуктов гидролиза, а с другой, в связи со значительным уменьшением количества высокомолекулярных соединений в ходе того же процесса гидролиза.

Однако эффективность известного БАС все же недостаточна из-за содержания в его составе относительно большого количества балластных веществ и иммунодепрессантов. Кроме того, известное БАС также может вызывать побочные эффекты, проявляющиеся при его использовании (аллергия и другие) вследствие того, что в его составе также присутствуют высокомолекулярные соединения, которые являются иммуногенами и молекулярная масса которых превышает 10,0 кДа.

Недостатком известного БАС является и то, что состав получаемого целевого продукта непостоянен и колеблется от партии к партии, вследствие чего затруднена его стандартизация.

Свойства известного БАС, прежде всего его иммуномодулирующая активность, прямо связаны со способом его получения, который включает гидролиз ингредиентов промытого измельченного сырья животного происхождения, центрифугирование гидролизата, фильтрацию и выделение целевого продукта, причем гидролиз проводят в растворе разбавленной слабой органической кислоты при рН 3,6-6,5 и температуре около 68^оС, а в качестве сырья используют ноги недоразвитой домашней птицы не более чем 9-недельного возраста.

Целевой продукт выделяют в виде порошка или геля, который при использовании накладывают на поврежденные участки тела.

Использование в качестве сырья животной ткани, содержащей в своем составе сравнительно большое количество иммунодепрессантов и невозможность улучшить состав целевого продукта с помощью выполняемых в известном способе операций, существенно снижает эффективность получаемого БАС.

Следует учитывать, что содержащиеся в тканевых препаратах компоненты экстрракта в значительной степени являются стимуляторами функциональной активности органов и тканей, воздействие которых в основном является однонаправленным, то есть действие БАС зависит лишь от его концентррации в организме и не зависит от физиологического статуса организма. Это требует строгого соблюдения дозировок лекарственного препарата на основе известного БАС в процессе лечения.

Указанные недостатки частично устранены в известных БАС, эффект воздействия которых коррелирует с физиологическим статусом организма и в случае его нормализации действие такого БАС прекращается, то есть проявляется эффект двусторонней связи. Поэтому представляют большой интерес извесные БАС на основе компонентов клеточных мембран животных тканей, которые способны реагировать на изменение параметров гомеостаза организма (SU-А-1412596; ЕР-А-0106285; ЕР-А-0157427).

В этих препаратах, полученных в виде вакцин, использованы специфические антигены, появляющиеся на поверхности клеток при некоторых процессах патологии, а именно при процессах неоплазии, в связи с чем использование вакцин направлено на элиминацию этой патологии. Эффективность действия указанных лекарственных препаратов на основе БАС прямо зависит от количества представленных в организме антигенов, то есть от их концентрации в организме, и прекращается при элиминации неоплазии, что указаывает на наличие саморегулирующей двусторонней связи.

Недостатком известных лекарственных препаратов является их высокая специфичность к исходной патологии, то есть весьма узкий спектр действия, и вследствие этого они принципиально не могут иметь широкий спектр действия для восстановления (нормализации) параметров физиологического состояния организма.

Другим их недостатком является то, что эти вакцины применяются только для элиминации патологии и лишь косвенным путем направлены на нормализацию физиологического состояния организма. Кроме того, недостатком является и то, что известные БАС не активируют регенераторные и восстановительные процессы. Такие БАС должны удовлетворять повышенным требованиям к степени чистоты (гомогенности) получаемого антигена во избежание возникновения побочных эффектов.

Известные БАС получают известным способом, согласно которому животное сырье измельчают и гомогенизируют с последующим выделением из гомогената клеточных мембран животных тканей, из которых после солюбилизации получают компоненты клеточных мембран в виде гликопротеинов (SU-А-1412596; ЕР-А-0106285; ЕР-А-0157427).

Достоинством известного способа является то, что он позволяет получать высокоспецифические углеводсодержащие компоненты клеточных мембран, способные вызывать ответную реакцию иммунной системы организма на присутствие опухолевоспецифического антигена.

К преимуществам известного способа следует отнести также и то, что он позволяет выделять углеводсодержащие компоненты клеточных мембран с помощью специфических лектинов, способных связываться с определенными концевыми углеводными остатками.

Однако при реализации операций известного способа клеточные мембраны подвергают солюбилизации с помощью детергентов, обычно неионной природы, например детергента Тритон Х-100, от которых трудно избавиться в последующих операциях способа и которые сами по себе вызывают побочные эффекты при использовании средства в клинике.

Недостатком известного способа является и то, что он сравнительно мало производителен и весьма трудоемок, а также зависит от наличия специфических раковых тканей, используемых в качестве исходного сырья.

Наиболее близким к предлагаемому является БАС, обладающие иммуномодулирующим свойством, для нормализации физиологического состояния организма, на основе представленных органическими соединениями компонентов клеточных мембран измельченной и гомогенизированной животной ткани (ЕР-А-0318030).

По сравнению с вышеуказанными средствами-аналогами известное лекарственное средство обладает еще большей эффективностью, характеризуемой повышением на 62% киллерной активности по отношению к специфическим опухолевым клеткам в сравнении с контролем. Это объясняется тем, что БАС аналог является маркером роста злокачественных клеток и специфически активирует киллерную активность, направленную на элиминацию таких клеток.

Однако известное БАС сохраняет все перечисленные выше недостатки, характерные для аналогов, а именно: высокую специфтичность к исходной патологии (неоплазии), то есть узкий спектр лечебного воздействия этого средства; наличие только киллерной активности; высокий уровень опасности возникновения побочных эффектов, связанный с тем, что известное БАС является высокомолекулярным соединением.

Как и в указанных выше случаях, свойства известного БАС, прежде всего его специфическая активность, прямо связаны со способом его получения, включающим измельчение и гомогенизацию животного сырья, его последующее ультрацентрифугирование и выделение из гомогената, содержащего клеточные мембраны, осадка, из которого после ресуспендирования и солюбилизации получают компоненты клеточных мембран, которые используют в качестве целевого продукта (ЕР-А-0318030).

По сравнению с вышеуказанными способами получения БАС известный способ обладает тем преимуществом, что он позволяет получать еще более высокоспецифические углеводсодержащие компоненты клеточных мембран, способные вызвать ответную реакцию иммунной системы организма на присутствие опухолевоспецифического антигена.

Кроме того, преимуществом известного способа является более высокая эффективность выделения углеводсодержащих компонентов.

Однако известному способу присущи перечисленные выше недостатки, а именно: необходимость использовать детергенты, от которых впоследствии трудно избавиться и наличие которых вызывает отрицательные побочные эффекты при клиническом использовании этого средства; сравнительно низкая производительностоь известного способа и высокая его трудоемкость; зависимость от наличия специфических раковых тканей в качестве исходного сырья.

Известен лекарственный препарат для нормализации физиологического состояния организма человека и животных на основе представленных органическими соединениями компонентов клеточных мембран (ЕР-А-0318030). Препаррат вводится в организм в течение длительного времени путем ежедневных внутривенных или внутримышечных инъекций в дозе 0,001-1000 мкг, которая зависит от возраста, пола, стадии заболевания пациента.

При внутривенном введении в качестве наполнителя используется физиологический раствор натрия хлористого, или буферный раствор.

Основным действующим началом данного препарата является БАС в виде опухолеспецифического антигена, вызывающего иммунную реакцию организма. Для усиления такой реакции и пролонгирования эффекта выделенный антиген встраивают в липосомы. При внутримышечных инъекциях наполнителями в препарате являютсчя различные адъюванты, состоящие в основном из масел, в которых суспендируется полученное БАС.

Недостатком известного лекарственного препарата является то, что он обеспечивает высокоспецифическую стимуляцию иммунной системы организма, которая направлена на уничтожение определенной патологии (конкретного вида неоплазии) и из-за присутствия высокомолекулярных соединений сопровождается проявлением ряда нежелательных побочных явлений, нарушающих другие параметры гомеостаза. В частности, при внутримышечном или подкожном введении возникает локальное, при внутривенном введении генерализованное воспаление, а также аллергия, гиперчувствительность замедленного типа и другие являния.

Известен препарат для нормализации физиологического состояния организма человека и животных, содержащий биологически активное средство на основе представленных органическими соединениями компонентов клеточных мембран животной ткани, и наполнитель, который накладывают на пораженные участки тела (US-А-4455302).

Недостатком известного лекарственного препарата является то, что стимуляция иммунной системы организма возможна только путем локальной его аппликации на травмированные участки тела. Поэтому эффективность такого препарата сравнительно невелика.

Указанные недостатки частично устранены в аналогичном препарате, обладающем иммуномодулирующим действием, для нормализации физиологического состояния организма животного (SU-А-904707), который вводится в организм путем внутримышечной инъекции в дозе 0,75-1,0 мл/кг массы тела с интервалом 3 дня и, таким образом, используется не локально.

Недостатком этого препарата является его сравнительно невысокая эффективность вследствие наличия в нем иммунодепрессантов, а также то, что его использование вызывает побочные эффекты из-за присутствия в его составе иммуногенов, вызывающих аллергию, гиперчувствительность замедленного типа и другое.

Использование в качестве сырья животной ткани, содержащей сравнительно большое количество иммунодепрессантов, и невозможностью улучшить состав БАС, на основе которого выполняется лекарственный препарат, с помощью выполняемых в известном способе операций, существенно снижает эффективность известного БАС и перпарата на его основе.

Существенным недостатком известного препарата является и то, что для обеспечения достаточной эффекутивности он содержит в своем составе большое количество различных биологически активных веществ, что обуславливает с одной стороны опасность перредозировок, возникновения побочных эффектов, а с другой увеличивает стоимость препарата.

Известен способ нормализации физиологического состояния человека и животных при заболеваниях, вызванных преимущественно функциональной недостаточностью органов и тканей, предусматривающий введение в организм препарата на основе органических соединений компонентов клеточных мембран животной ткани (SU-А-904707).

Известный способ малоэффективен вследствие наличия описанных выше недостатков препарата, в том числе из-за того, что при его использовании требуется введение больших доз, содержащих до 10 мг биологически активного средства на 1 кг массы тела, что вызывает опасность передозировок и возникновения побочных эффектов.

Указанные недостатки устранены в предлагаемом биологически активном средстве, обладающем иммуномодулирующим свойством. В предлагаемом способе получения этого БАС и препарате на его основе, а также в способе его использования для нормализации физиологического состояния организма.

Анализ известных БАС и известных способов их получения, совокупность признаков которых определяет технический уровень в данной области, позволил сформулировать задачу создания БАС с широким спектром иммуномодулирующего действия, с высокой степенью эффективности, лишенного при этом недостатков, связанных с наличием побочных эффектов, возникающих при применении известных БАС и выражающихcя, например, в аллергии и так далее.

Решение этой задачи, которая не могла быть решена в известных изобретениях, положено в основу предлагаемой группы изобретений. Оно заключается в том, что БАС, обладающее иммуномодулирующим свойством и предназначенное для нормализации физиологического состояния организма, в том числе для восстановления функциональной активности органов и тканей, на основе представленных органическими соединениями компонентов клеточных мембран гомогенизированной животной ткани, содержит термостабильные, низкомолекулярные модифицированные компоненты клеточных мембран с антигенной структурой, модифицированной при процессах эмбриогенеза, и/или пролиферации, и/или дифференцировки клеток, и/или патологии, предшествовавшей и/или сопутствовавшей регерации и/или репарации ткани.

Задача решается также и тем, что БАС содержит модифицированные компоненты плазматических клеточных мембран с антигенной структурой модифицированной, при процессах эмбриогенеза и/или пролиферрации и/или дифференцировки клеток, и/или патологии, предшествовавшей и/или сопутствовавшей регенерации и/или репарации ткани.

При этом БАС может содержать модифицированные компоненты клеточных мембран в виде термостабильных при температуре Т_н < 120^оС компонентов, а также в виде низкомолекулярных компоненнтов с молекулярной массой М 0,8-10,0 кДа и в виде углеводсодержащих компонентов.

Средство содержит органические соединения в следующем соотношении, мас. Пептиды 28,0-60,0 Аминокислоты 0,5-31,5 Углеводы 16,0-70,0 Липиды, нуклеотиды и другие органические соединения 0,5-17,0 БАС содержит углеводы в составе органических соединений в следующем соотношении, мас. в составе высокомо- лекулярных соединений, имеющих молекулярную массу М_ув > 10,0 кДа до 3,0, низкомолекулярных соединений, имеющих молекулярную массу М_ун 0,8-10,0 кДа 11,5-57,9, свободных мономеров М_ум < 0,8 кДа 3,5-17,0.

В БАС соотношение массовых содержаний углеводов и пептидов в составе органических соединений с молекулярной массой М_ун 0,8-10,0 кДа лежит в пределах G 0,6-2,0.

БАС содержит также органические соединения в соотношении, мас. Пептиды 40,0-60,0 Аминокислоты 12,9-17,1 Углеводы 16,0-32,8 Липиды, нуклеотиды и другие органические соединения 4,4-10,6.

БАС содержит также органические соединения в соотношении, мас. Пептиды 34,0-50,1 Аминокислоты 16,6-22,6 Углеводы 22,7-34,2 Липиды, нуклеотиды и другие органические соединения 5,4-10,6 БАС содержит также органические соединения в соотношении, мас. Пептиды 28,0-33,6 Аминокислоты 16,5-31,5 Углеводы 26,9-37,9 Липиды, нуклеотиды и другие органические соединения 8,6-17,0 БАС содержит также органические соединения в соотношении, мас. Пептиды 29,0-36,3 Аминокислоты менее 0,5 Углеводы 57,7-70,0 Липиды, нуклеотиды и другие органические соединения 0,5-5,5 Поставленная в изобретении задача решается и тем, что в способе получения БАС, обладающего иммуномодулирующим свойством, при котором сырье из животной ткани измельчают и гомогенизируют, а из гомогената выделяют содержащий клеточные мембраны осадок, из которого после ресуспендирования получают компоненты клеточных мембран, в качестве сырья используют животную ткань, модифицированную при процессах эмбриогенеза, и/или пролиферации, и/или дифференцировки клеток, и/или патологии, предшествовавшей и/или сопутствовавшей регенерации и/или репарации ткани, гомогенат которой очищают от неразрушенных элементов ткани путем фильтрации и/или центрифугирования при ускорении 150-250 g в течение 10-15 мин и выделяют осадок, содержащий клеточные мембраны, который подвергают гидролизу, продукты гидролиза фильтруют и/или центрифугируют при ускорении свыше 1500 g в течение 20-40 мин с выделением супернатанта продуктов гидролиза, содержащих компоненты клеточных мембран в качестве целевого продукта.

В качестве сырья используют ткань, выбираемую из ряда: эмбриональная ткань, ткань дифференцирующихся тимоцитов тимуса, cперматогонии и cперматоциты cеменни-ков, плацентарная ткань, эпителиальная ткань кишечника, клетки костного мозга, регенерирующая кожная ткань, ткань регенерирующей печени, ткань регенерирующих конечностей земноводных, патологически измененная ткань, взятая до стадии регенерации.

При этом осадок, содержащий клеточные мембраны, выделяют из очищенного гомогената центрифугированием при ускорении 1500-90000 g и/или фильтрацией через фильтр с характерным размером пор F < 1 мкм c последующей промывкой путем ресуспендирования и повторного центрифугирования и/или фильтрации до получения осадка, содержащего клеточные мембраны в количестве не менее 60 мас. от представленных в осадке органических соединений.

Кроме того, осадок, содержащий клеточные мембраны, перед гидролизом дополнительно центрифугируют при ускорении 20000-100000 g в градиенте плотности в течение 1-2 ч с выделением плазматических клеточных мембран.

Гидролиз проводят при температуре Т_р 4-45^оС. При этом он может осуществляться в присутствии консерванта.

Поставленная задача решается также и тем, что продукты гидролиза, содержащие компоненты клеточных мембран, подвергают термообработке при температуре Т_н60-120^оС до полной денатурации термолабильных соединений и дополнительным фильтрованием и/или центрифугированием с ускорением свыше 1500 g в течение 20-40 мин выделяют супернатант, содержащий термостабильные компоненты клеточных мембран, в качестве целевого продукта.

Кроме того, содержащие компоненты клеточных мембран супернатант или продукты гидролиза, подвергают фракционированию путем диализа через полупро- ницаемую пленку, и/или ультрафильтрации, и/или гельфильтрации с выделением фракции, содержащей низкомолекулярные компоненты с молекулярной массой М 10,0 кДа, в качестве целевого продукта.

Низкомолекулярную фракцию продуктов гидролиза, содержащую компоненты клеточных мембран, подвергают аффинной хроматографии на лектинах с выделением фракции, которая содержит углеводсодержащие компоненты, в качестве целевого продукта.

Поставленная в изобретении задача решается и тем, что известный препарат для нормализации физиологического состояния организма человека и животных, содержащий биологически активное средство на основе представленных органическими соединениями компонентов клеточных мембран животной ткани, и наполнитель, в качестве биологичсеки активного средства содержит в своем составе термостабильные, низкомолекулярные модифицированные компоненты клеточных мембран с антигенной структурой, модифицированной при поцессах эмбриогенеза, и/или пролиферации, и/или дифференцировки клеток, и/или патологии, предшествовавшей и/или сопутствовавшей регенерации и/или репарации ткани, при его содержании в препарате 0,001-85,0 мас. остальное наполнитель.

Задача решается и тем, что в препарате биологически активное средство содержит в составе модифированных компонентов клеточных мембран органические соединения в следующем соотношении, мас. Пептиды 28,0-60,0 Аминокислоты 0,5-31,5 Углеводы 16,0-70,0 Липиды, нуклеотиды и другие органические соединения 0,5-17,0 Задача решается и тем, что биологически активное средство содержит органические соединения в соотношении, мас. Пептиды 40,0-60,0 Аминокислоты 12,9-17,1 Углеводы 16,0-32,8 Липиды, нуклеотиды и другие органические соединения 4,4-10,6 Задача решается и тем, что биологически активное средство содержит органические соединения в соотношении, мас. Пептиды 34,0-50,1 Аминокислоты 16,6-22,6 Углеводы 22,7-34,2 Липиды, нуклеотиды и другие органические соединения 5,4-10,6 Задача решается и тем, что биологически активное средство содержит органические соединения в соотношении, мас. Пептиды 28,0-33,6 Аминокислоты 16,5-31,5 Углеводы 26,9-37,9 Липиды, нуклеотиды и другие органические соединения 8,6-17,0 Задача решается и тем, что биологически активное средство содержит органические соединения в соотношении, мас. Пептиды 29,0-36,3 Аминокислоты менее 0,5 Углеводы 57,7-70,0 Липиды, нуклеотиды и другие органические соединения 0,5-5,5 Препарат в качестве наполнителя может содержать физиологический раствор натрия хлористого, и/или солевой буферный раствор, и/или углеводные соединения, и/или жиры минерального, животного, растительного или синтетического происхождения и их смеси.

Препарат может дополнительно содержать консервант.

Поставленная задача решается и тем, что в известном способе нормализации физиологического состояния человека и животных при заболеваниях, вызванных преимущественно функциональной недостаточностью органов и тканей, предусматривающем введение в организм препарата на основе органических соединений компонентов клеточных мембран животной ткани. В качестве препарата используют композицию из 0,001-85,0 мас. биологически активного средства, содержащего в своем составе модифицированные компоненты клеточных мембран с антигенной структурой, модифицированной при процессах эмбриогенеза, и/или пролиферации, и/или дифференцировки клеток, и/или патологии, предшествовавшей регенерации и/или репарации ткани, и 15,0-99,999 мас. наполнителя, а введение препарата в организм осуществляют путем внутримышечных инъекций в дозе 0,005-0,5 мг упомянутого средства на кг массы тела с интервалом между ингаляциями 4-48 ч и/или сублингвального введения в дозе 0,012-0,12 мг средства на кг массы тела с интервалом между введениями 4-48 ч и/или выпаивания в дозе 0,02-1,0 мг средства на кг массы тела с интервалом между выпаиваниями 1-10 дней и/или интерального введения в пилюлях в дозе 0,02-1,0 мг средства на кг массы тела с интервалом между введениями 1-10 дней, и/или интраназального введения в суточной дозе 0,001-0,05 мг средства на кг массы тела с интервалом между введениями 2-24 ч, и/или аппликации на слизистую или раневую поверхность в виде компрессов, свечей, присыпок, мазей и гелей с интервалами между применениями 1-10 дней, до нормализации параметров физиологического состояния.

При этом нормализацию физиологического состояния человека и животных осуществляют путем стимуляции иммунной системы, преимущественно активацией ретикулоэндотелиальной системы, Т-, В-систем, нейтрофилов и/или популяции естественных киллеров.

Установлено, что практическая эффективность БАС, полученного предлагаемым способом, заключается в его высокой биологическиой активности, и прежде всего в повышенном иммуномодулирующем эффекте (свойстве).

Сопоставительный анализ свойств известных и предлагаемых БАС показывает, что в то время как указанные выше известные БАС обладают узконаправленным иммуномодулирующим действием с недостаточной общебиологической эффективностью, вызывают отрицательные побочные эффекты и требуют точности в определении дозы при их использовании, предлагаемое БАС обладает широким спектром действия, высокоэффективно, некритично к передозировке и не обладает побочными эффектами.

Экспериментально установлено, что практическая эффективность БАС, полученного предлагаемым способом, заключается в его высокой биологической активности, и прежде всего в повышенном иммуномодулирующем и регенераторном эффектах (свойствах), что обеспечивает при введении в организм: а) повышенную стимуляцию регенераторных процессов, как-то: восстановление функциональной активности печеночной ткани при гепатите и регенерацию печени после гепатэктомии, заживление язв, ран и кожного покрова при ранениях и травмах, восстановление формулы крови при кровопотерях и в других случаях; б) проявление лечебного эффекта при лечении острых респираторных заболеваний (ОРЗ), а также воспалительных процессов (воспалении легких, маститах, эндометритах и других); в) лечение инфекционных заболеваний животных (парагрипп и других), при котором выздоровление молодняка крупного рогатого скота наблюдалось в среднем не менее, чем в 88% случаев, в то время как при использовании известных БАС в тех же условиях выздоровление наблюдалось в среднем не более, чем в 70% случаев, а при спонтанном излечивании в контроле в пределах 58-67% случаев; г) повышенную резистентность животных к инфекционным заболеваниям и вследствие этого снижение уровня падежа поголовья скота; д) улучшение общебиологического состояния животных, что благоприятно сказывается на увеличении их продуктивности.

Практическое применение БАС подтвердило его нетоксичность и отсутствие побочных явлений (аллергии, гиперчувст- вительности замедленного типа и тому подобного).

Указанные результаты достигнуты благодаря особым свойствам БАС, проявление которых обеспечено наличием в его составе модифицированных компонентов выделенных из клеточных мембран с модицифированной антигенной структурой. Следует отметить, что изменение в физиологическом статусе клеток ткани находит свое отражение в модификации антигенной структуры клеточных мембран, сопровождающейся модификацией компонентов клеточных мембран и изменением иммуногенности ткани, а следовательно, и реакцией иммунной системы организма.

Степень такой модификации антигенной структуры клеточных мембран и соответственно степень реакции иммунной системы зависит от степени изменения физиологического статуса клеток ткани.

Установлено, что повышение иммуногенности модифицированной антигенной структуры клеточных, и прежде всего плазматических клеточных мембран, обеспечивается животными тканями на стадии протекания в них указанных выше процессов эмбриогенеза, и/или пролиферации, и/или дифференцировки клеток, и/или патологических процессов, которые предшествовали и/или сопутствовали регенерации и/или репарации ткани.

Таковыми тканями, например, являются: дифференцирующиеся тимоциты тимуса (процесс дифференцировки клеток); сперматогонии и сперматоциты семенников, клетки костного мозга, эпителиальная ткань кишечника (процессы пролиферации и дифференцировки клеток); эмбриональная ткань, плацентарная ткань (процессы пролиферации, дифференцировки, эмбриогенеза); ткани регенерирующих конечностей земноводных, регенерирующая печень крыс после частичной гепатэктомии или генерирующая кожная ткань, а также ткань с патологией в ней, например, при гангрене, химическом или термическом поражении (комбинация в различном сочетании вышеперечисленных процессов).

Использование описанных животных тканей в качестве сырья в заявляемом способе изготовления обеспечивает получение БАС с ожидаемыми свойствами.

Установлено также, что характерной особенностью перечисленных выше разновидностей тканей является изменение в них иммуногенной структуры клеточных мембран, сопровождающееся модификацией компонентов клеточных мембран ткани, позволяющее отдифференцировать их от интактных или покоящихся клеток тканей взрослых особей. Эта особенность модифицированных компонентов клеточных мембран указанных тканей позволяет использовать их в заявленном БАС, при введении которого в организм животного или человека обеспечивается возможность стимулирования направленной ответной реакции организма на патологию. Ключевую роль в этом процессе играет иммунная система организма.

Материальными носителями информации в перечисленных выше процессах и/или отклонениях от нормы в указанных тканях являются специфические компоненты клеточных мембран. Заявленное БАС содержит модифицированные компоненты клеточных мембран с модифицированной антигенной структурой, что позволяет при его использовании стимулировать указанную выше ответную реакцию организма.

Ответная реакция организма существенно усиливается при введении БАС, которое содержит в своем составе модифицированные компоненты клеточных мембран в виде термостабильных компонентов, то есть стабильных при температуре нагревания Т_н 120^оС, в виде низкомолекулярных компонентов, то есть с молекулярной массой М 0,8-10,0 кДа, а также в виде углеводсодержащих компонентов клеточных мембран, преимущественно в виде гликопептидов, гликолипидов, олигоуглеводов, нуклеотидов и/или свободных моноуглеводов.

При этом, благодаря высокой статической и динамической