Композиция стимуляции секреции и повышения уровня гормона роста в крови животного и способ стимуляции секреции и повышения уровня гормона роста

Композиция стимуляции секреции и повышения уровня гормона роста в крови животного и способ стимуляции секреции и повышения уровня гормона роста

Реферат

 

Использование: ветеринария. Сущность изобретения: способ основан на введении полипептидов, которые выбирают из двух различных групп полипептидов. Способствует стимуляции секреции и повышению уровня гормона роста. 2 с. и 7 з.п. ф-лы, 14 табл.

Описание прототипа Эта заявка является частичным продолжением находящейся в процессе одновременного рассмотрения заявки S.N. 861968, поданной 12 мая 1986 г.

Учеными-специалистами было установлено, что повышение уровней гормона роста у млекопитающих при введении ГР-секретирующих соединений может приводить к повышению веса тела и молочной продуктивности, если при введении достигается достаточно высокий уровень гормона роста (c.f. P.K.Baker et al. J. Fnilnal Science 59 (supplement 1), 220 (1984); W.J.Croom et al. J.Dairy Sci. 67, (supplement 1), 109 (1984); S.N.McCutcheon et.al. J.Dairy Sci. 67 (2881 (1984)). Кроме того, известно, что повышение уровня гормона роста у млекопитающих может быть достигнуто путем применения известных веществ, способствующих освобождению гормона роста, таких как эндогенные гормоны, секретирующие гормон роста (CHPH's, N 144-N 149), которые включены в настоящем изобретении в качестве членов группы, обозначенной как "Соединения группы 1" (c. f. P.Brazeau et al. Proc. Natl. Acad. Sci. 79, 7909 (1982), and M.O.Thorner et al. Lancet 1,24 (1983)). Повышение уровней гормона роста у млекопитающих может также осуществляться при помощи ГР-секретирующих пептидов (ГРП), некоторые из которых были описаны ранее и в настоящем изобретении включены как члены группы, обозначенной как "Соединения группы 2" (c.f.C.Y. Bowers et al. Endocrinology 114, 1537 (1984), F.A.Momany et al. Endocrinology 114,1531 (1984) and C.Y.Bowers, 7th International Congress of Endocrinology Abstract. 464 (1984)). Для повышения ГР-уровней используются также антитела к ингибитору секреции эндогенного ГР-соматостатину. В этом случае уровни гормона роста повышаются путем удаления ингибитора ГР-секреции перед тем, как он достигнет гипофиза, где происходит ингибирование гормона роста (c.f. W.B. Wehrenberg et al. Endocrinology 115, 1218 (1984)). И наконец, было установлено что некоторые соединения, такие как морфин (c.f. C.Rivier et al. Endocrinology 100, 238 (1977)) и другие алкалоиды (c.f. C.Y.Bowers, Endocrinology 117, 1441 (1985)) и DAIa², DLeu⁵- -энкефалинамид (c.f. E.L.Lien et al. Febs Letters 88, 208 (1978)) также выделяют гормон роста путем воздействия на гипоталамус. Описываемые в настоящем изобретении соединения Группы 3 также воздействуют на гипоталамус.

Краткое изложение сущности изобретения Целью настоящего изобретения является получение новых комбинаций из соединений, секретирующих гормон роста, которые прямо или косвенно способствуют повышению уровней гормона роста в крови млекопитающих. По сравнению с ГР-секретирующими соединениями, описанными ранее, комбинации соединений настоящего изобретения обладают повышенными стабильностью, растворимостью, физиохимическими свойствами и биологической активностью.

Еще одной целью настоящего изобретения является получение путем введения комбинации активных ингредиентов, описанных подробно ниже, метода повышения ГР-уровней у животных для использования его в промышленном животноводстве.

Другой целью настоящего изобретения является получение каждого из трех различно действующих соединений, секретирующих гормон роста, любое из которых может быть комбинировано различным образом и являться частью различных композиций, чтобы тем самым иметь возможность оптимизировать состав лекарственного средства для различных целей, таких как усиление роста и увеличение производства молока и шерсти.

Каждая из указанных выше групп компонентов и их аналогов действует в качестве стимулятора секреции гормона роста у животных посредством различных механизмов, и поэтому синергическое действие комбинации соединений, рассматриваемых в настоящем изобретении, которое способствует повышению ГР-уровней in vivo, является необычным и неожиданным по сравнению с действием соединений внутри групп, как описано ниже. Более того, величина синергического ГР-ответа на эффективную дозу комбинации соединений между группами не была получена ни для одного соединения в группе при такой же дозе.

Механизм действия соединений, описанных в настоящем изобретении, приводящий к их исключительному синергическому эффекту, еще не вполне ясен на молекулярном уровне. Очевидно, здесь имеет место аддитивное действие комбинации этих соединений. Однако наиболее важные результаты синергического действия этих соединений и их применения будут ясны при дальнейшем рассмотрении этих соединений. Заявителями обнаружено, что описанные в настоящем изобретении соединения Группы 1, действуя синергически с соединениями Группы 2, стимулируют секрецию гораздо большего количества гормона роста, чем отдельные соединения в группах, взятые изолированно в тех же количествах. Кроме того, было обнаружено, что описанные в настоящем изобретении соединения Группы 1, действуя синергически с соединениями Группы 3, стимулируют секрецию гораздо большего количества гормона роста, чем отдельные соединения в группах, взятые изолированно в тех же количествах. Было также обнаружено, что описанные в настоящем изобретении соединения Группы 2, действуя синергически с соединениями Группы 3, стимулируют секрецию гораздо большего количества гормона роста, чем отдельные соединения в группах, взятые изолированно в тех же количествах. Далее, было показано, что определенные соединения Группы 3, как, например, встречающиеся в природе дерморфины, обозначенные ниже как соединения N 8801 и N 8802, также действуют синергично с соединениями Групп 1 и 2, таким образом, комбинационная смесь соединений всех трех групп является сильнодействующей ГР-секретирующей смесью.

Настоящее изобретение позволяет получить комбинации, имеющие синергичное действие, способствующее выделению ГР. Комбинации, описанные в настоящем изобретении, могут быть использованы для повышения ГР-уровней в крови животных, увеличения молочной продуктивности коров, усиления роста млекопитающих, как, например, человека, овец, коров и свиней, а также рыб, домашней птицы и ракообразных, и увеличения производства шерсти и/или меха. Рост тела животного зависит от его пола и возраста, а также от качестве и чистоты вводимого ГР-секретирующего соединения и способа этого введения.

Подробное описание изобретения Настоящее изобретение относится к новым комбинациям полипептидов, действующих синергически, для стимуляции секреции гормонов роста и повышения его уровня в крови животных. Это изобретение относится также к методам использования этих новых композиций.

В наиболее широком объеме настоящее изобретение направлено на получение эффективной комбинации соединений, способствующей выделению и повышению уровня гормона роста в крови животных и содержащей эффективное количество полипептидов, отобранных по меньшей мере из двух различных групп: полипептидов Группы 1, полипептидов Группы 2 или полипептидов Группы 3, описанных подробно ниже.

В самом широком объеме изобретения понятие "полипептиды Группы 1" включает встречающиеся в природе ГР-секретирующие гормоны, как, например, человеческие, коровьи, свиные, овечьи и крысиные гормоны; такие, как приведенные ниже соединения N 144 N 148 и их функциональные аналоги. Эти пептиды действуют в качестве рецепторов гормонов, способствующих секреции гормонов роста у млекопитающих и других позвоночных, ракообразных и т.п. Характерными пептидами, соответствующими этому определению, являются пептиды, отобранные из любых полипептидов: (а) имеющих следующие аминокислотные последовательности в положениях 1-44 (пронумерованных от N-конца до С-конца): (N 144) YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGESNQERGARARL X, (N 145) YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGERNQERGARVRL X, (N 146) YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMNRQQGERNQERGARVRL X, (N 148) YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMNRQQGERNQERGARVRL X, (N 149) HADAIFTSSYRRILGQLYARKLLHEIMNRQQGERNQEQRSRFM X, где С-концевая аминокислота имеет следующую усеченную основную формулу: где каждый R' независимо является заместителем отдельных аминокислотных остатков, например, заместителями водорода, алкила, арила, амино или кислот; X обозначает С-концевую группу и выбирается из -CONH₂, -СОOH, -СOOR, -СОNRR -СН₂ОН и -CH₂OR, где R является алкильной группой, имеющей 1-6 атомов углерода, или ароматическим кольцом, имеющим до 12 атомов углерода. Приведенные выше аббревиатуры аминокислотных остатков используются в соответствии со стандартной номенклатурой пептидов: G Glу (Глицин) У Туr (Тирозин) I1 Ilе (L-Изолейцин) Е Glu (L-Глутаминовая кислота) Т Тhr (L-Треонин) F Phe (L-Фенилаланин) A Ala (L-Аланин) К Lys (L-Лизни) D Asp (L-Аспарагиновая кислота) С Сys (L-Цистеин) R Arg (L-Аргинин) Q GIn (L-Глутамин) Р Рrо (L-Пролин) I Leu (L-Лейцин) М Met (L-Метионин) S Ser (L-Серин) N Аsn (L-Аспарагин) Н Нis (L-Гистидин) W Тrp (L-Триптофан) V Val (L-Валик), в которой буква "D", предшествующая трем основным буквам аббревиатуры означает D конфигурацию аминокислотного остатка.

Хотя на протяжении всего описания изобретения речь идет, главным образом, о стереохимически чистых D и L аминокислотах, следует иметь в виду, что смесь стереоизомеров D/L является также операбельной, однако некоторое снижение уровня биологической активности в зависимости от относительного количества точно не установленной конфигурации все же имеет место. В настоящем описании изобретения встречаются также следующие аббревиатуры дополнительных аминокислот и пептидов: Аbu альфа-Аминомасляная кислота Аib альфа-Аминоизомасляная кислота Аrg (NO₂) 1-Нитро-L-Аргинин (beta ) Аlа бэта-Аланин (т.е. 3-Аминопропионовая кислота) Dab 2,4-Диаминомасляная кислота DOPA 3,4-Дигидроксифенилаланин GIy-O1 2-Аминоэтанол Hyp транс-4-Гидрокси-L-Пролин Met (О) Метионинсульфоксид Met (0)-01 Спирт метионинсульфоксида Nle L-Норлейцин Pal 3-Пиридил Аланин Pgl Фенилглицин Sar Саркозин Sar-01 Саркозиновый спирт Thz L-Тиазолидин-4-карбоновая кислота либо Дермофины Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH₂ (N 8801) либо Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH₂ (N 8802) (b) любой один из приведенных выше (а) полипептидов, имеющих следующие заместители аминокислот: положение 1 (N 144- N 148) занимает DТуr или His положение 1 (N 149) занимает Tyr или DHis положение 2 (N 144 N 149) занимает (NМе) DAla или Аib или DAla, положение 3 (N 144 N 149) занимает DASp, положение 4 (N 144 N 149) занимает DAla и положение 1 + 2 (N 144 N 149) занимает DTyr¹+DAla², DTyr¹+(NMe)DAla² или DTyr¹+Aib²; (с) любой из вышеприведенных (а) или (b) полипептидов, имеющих заместитель Nle для Met в положении 27; (d) любой из вышеприведенных (а), (b) или (с) полипептидов, в котором N-конец NH₂ замещается -NHCOR и в котором R является алкильной группой, имеющей 1-6 атомов углерода или ароматическим кольцом, имеющим до 12 атомов углерода; (е) фрагменты любого из вышеприведенных (а), (b), (с) или ( d ) полипептидов, которые содержат, по меньшей мере, аминокислотные остатки в положениях 1 29; (f) имеющих следующие аминокислотные последовательности в положениях 1-29 (пронумерованных от N-конца до С-конца): YADAIFTNSYRKVLQQLAARKLLQDIMSR X, YADAIFTNSYRKVLQQLLARKLLQDIMSR X, YSDAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR X, YADAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR X, YADAIFSSAYRRLLAQLASSRLLQELLAR X, YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR X (линейный дитиол), и YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR X (циклический дисульфид), где С концевая аминокислота и X определены выше, и модификация любого из соединений этих групп (f) соответствует модификациям, предложенным в (b), (с) и (d), и (с) органические или неорганические аддитивные соли любого из вышеприведенных в (а), (b), (с), (d), (е) или (f) полипептидов Группы 1.

Полипептидами Группы 2, рассматриваемыми в широком объеме изобретения являются пептиды, отобранные из любых полипептидов, имеющих структуру: Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Cly-Tyr-NH₂; Ala-His-(формил)DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; (DTrp формилируется у индолазота) Ala-His-DTrp-Ser-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Cys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Cys-NH₂ (циклический дисульфид) Cys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Cys-NH₂ (свободный дитиол) DoPA-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Cys-NH₂; His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Ala-Tyr-NH₂; Lis-Ala-His-Trp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Lis-His-DTrp-Ala-Trp-Asp-NH₂; Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Tyr-Ala-Gly-Thr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Tyr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Gly-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Tyr-DAla-Gly-Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Ala-His-XTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂ (^*XTrp выбирается из группы, состоящей из всех N-монометилированных Тrр-изомеров, т.е. (NMe)Trp, (NMe)DTrp (индол NMe)Trр и (индол NМе)DТrр); Z-His-DTrр-Al а-Trp-DPhe-Lys-NH₂; где Z выбирается из группы, состоящей из всех встречающихся в природе L-аминокислот, Met (0), DОРА и Аbu; и органические и неорганические аддитивные соли любого из вышеуказанных полипептидов группы 2.

Полипептиды Группы 3, рассматриваемые в широком объеме изобретения, отбираются из любых полипептидов, имеющих структуру: Tyr-DArg-Phe-NH₂; Tyr-DAla-Phe-NH₂; Tyr-DArg(NO₂)-Phe-NH₂; Tyr-DMet(0)-Phe-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Gly-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Gly-NH₂; Tyr-DThr-Phe-Gly-NH₂; Phe-DArg-Phe-Gly-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Sar; Tyr-DAla-Gly-Phe-NH₂; Tyr-DArg-Gly-Trp-NH₂; Tyr-DArg(NO₂)-Phe-Gly-NH₂; Tyr-DMet(0)-Phe-Gly-NH₂; (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Gly-ol; Tyr-DArg-Gly-(NMe)Phe-NH₂; Try-DArg-Phe-Sar-ol; Tyr-DAla-Phe-Saf-ol; Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-NH₂; Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH₂; Tyr-DThr-Gly-Phe-Thz-NH₂; Gly-Tyr-DAla-Phe-Gly-NH₂; Tyr-DAla-Phe-GJy-ol; Tyr-DAla-Gly-(HMe)Phe-Gly-ol; Tyr-DArg-Phe-Sar-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Sar-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Sar; Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-NH₂; Sar-Tyr-DArg-Phe-Sar-NH₂; Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH₂ (циклический дисульфид); Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH₂ (свободный дитиол) Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH₂ (циклический дисульфид); Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH₂ (свободный дитиол); Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Pro-Ser-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Hyp-Ser-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH₂; Tyr-DArq-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH₂ и органические или неорганические аддитивные соли любого из вышеприведенных полипептидов Группы 3.

Для лучшего осуществления настоящего изобретения ниже предлагается эффективная комбинация, выделяющая и повышающая гормон роста в крови млекопитающих и содержащая эффективное количество полипептидов, отобранных по меньшей мере из двух различных групп: полипептидов Группы 1, Группы 2 или Группы 3.

Согласно настоящему изобретению понятие "полипептиды Группы 1" включает встречающиеся в природе ГР-секретирующие гормоны, как, например, человеческие, свиные, коровьи, овечьи и крысиные гормоны; такие, как приведенные ниже соединения N 144 N 148 и их функциональные аналоги, которые действуют в качестве рецепторов гормонов, способствующих секреции гормонов роста у млекопитающих и других позвоночных. Соединения, соответствующие этому определению, могут быть любыми из следующих полипептидов: (а) имеющих следующие аминокислотные последовательности в положениях 1-44 (пронумерованных от N-конца до С-конца): (N 144) YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGESNQERGARARL - CONH₂(hGHRH), (N 145) YADAIFNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGERNQEQGARVRL CONH₂(pGHRH), (N 146) YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMNRQQGERNQEQGAKVRL - CONH₂(bGHRH), (N 148) YADAIFTNSYRKILGQLSARKLLQDIMNRQQGERNQEQGAKVRL CONH₂(oGHRH) и (N 149) YADAIFTSSYRRILGQLYARKLLHEIMNRQQCERNQEQRSRFN (rGHRH); где значения букв аббревиатуры и определение С-концевых остатков аминокислот приведены выше: (b) любой из приведенных выше (а), имеющий следующие заместители аминокислот: положение 1 (N 144 N 148) занимает DTуr или His, положение 1 (N 149) занимает Туr, положение 2 (N 144 N 149) занимает (NMe) DAla или Аib или Dalа, положение 3 (N 144 N 149) занимает DAsp, положение 4 (N 144 N 149) занимает DAla, положение 1 + 2 (N 144 N 149) занимает DTyr¹ + DAla²; (с) любой из вышеприведенных (а) или ( b) полипептидов, имевших заместитель Nle для Met в положении 27; (d) любой из вышеприведенных (а), (b) или (с) полипептидов, в которых N-конец -NH₂ замещается -NHCOCH₃; (е) фрагменты любого из вышеприведенных (а), (b), (с) или (d) полипептидов, которые содержат, по меньшей мере, аминокислотные остатки в положениях 1 29; (f) имеющих следующие аминокислотные последовательности в положениях 1 - 29 (пронумерованных от N-конца до С-конца): YADAIFTNSYRKVLQQLAARKLLQDIMSR-X, YADAIFTNSYRKVLQQLLARKLLQDIMSR-X, YSDAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, YADAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, YADAIFSSAYRRLLAQLASRRLLQELLAR-X, YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X (линейный дитиол) и YADAIFTMCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X (циклический дисульфид), где С-концевая аминокислота и X определены выше, и модификация любого из соединений этой группы (f) соответствует модификациям, предложенным в (b), (с) и (d), и (q) органические или неорганические аддитивные соли любого из вышеприведенных в (a), (b), (c), (d) или (f) полипептидов Группы 1.

Полипептиды Группы 2, рассматриваемые в предпочтительном объеме, отбираются из любых полипептидов, имеющих структуру: His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; DOPA-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Ala-Tyr-NH₂; Lys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Tyr-Ala-His-DTrp-Ala-TrP-DPhe-Lys-NH₂; Ala-His-(fofmyl)DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂ (DTrp формилируется у индолазота) Ala-His-DTrp-Ser-Trp-DPhe-Lys-NH₂: Lys-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Asp-NH₂ and Z-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂, где Z выбирается из группы, состоящей из всех встречающихся в природе L-аминокислот, Met(0), DОРА и Аbu; и органические и неорганические аддитивные соли любого из вышеуказанных полипептидов Группы 2, и Полипептиды Группы 3 для предпочтительного объема изобретения отбираются из любых полипептидов, имеющих структуру: Tyr-DArg-Phe-NH₂; Tyr-DArg(NO₂)-Phe-NH₂; Tyr-DMet(0)-Phe-NH₂; Tyr-Dala-Phe-Gly-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Gly-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Sar; Tyr-Dala-Gly-Phe-NH₂; Tyr-Dala-Cly-(NMe)Phe-Gly-ol; Tyr-Dala-Phe-Sar-NH₂; Tyr-Dala-Phe-Sar-NH₂; Tyr-Darg(NO₂)-Phe-Gly-NH₂; Tyr-DMet(O)-Phe-Gly-NH₂; (NМе)Туr-DArg-Рhe-Sar-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Gly-ol; Tyr-Dala-Phe-Gly-Tyr-NH₂; Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH₂; Gly-Tyr-DAla-Phe-Gly-NH₂; Sar-Tyr-DArg-Phe-Sar-NH₂; Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH₂ (циклический дисульфид); Туr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH₂ (свободный дитиол); Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH₂ (циклический дисульфид); Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH₂ (свободный дитиол); Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH₂; Туr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH₂; Tyr-Dala-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH₂; Туr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH₂ и органические или неорганические аддитивные соли любого их вышеприведенных полипептидов Группы 3.

Для наилучшего осуществления настоящего изобретения ниже предлагается эффективная комбинация, выделяющая и повышающая гормон роста в крови млекопитающих и содержащая эффективное количество полипептидов, отобранных по меньшей мере из двух различных групп: полипептидов Группы 1, Группы 2 и Группы 3.

Согласно наилучшему осуществлению изобретения "полипептиды Группы 1" означают встречающиеся в природе ГР-секретирующие гормоны, как, например, человеческие, свиные, коровьи, овечьи и крысиные гормоны; такие как приведенные ниже соединения N 144- N 148 и их функциональные аналоги, которые действуют в качестве рецепторов, способствующих секреции гормонов роста у млекопитающих. Соединения, соответствующие этому определению, могут быть любыми из следующих полипептидов: (а) имеющих следующие аминокислотные последовательности в положениях 1 - 44 (пронумерованных от N-конца до С-конца): (N 144) YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-SMQERGARARL-CONH₂ (hGHRH), (N 145) YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-RNQEQGARVRL-CONH₂ (pGHRH), (N 146) YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMNRQQGE-RNQEQGAKVRL-CONH₂ (bGHRH), (N 148) YADAIFTNSYRKILGQLSARKLLQDIMNRQQGE-RNQEQGAKVRL-CONH₂ (oGHRH), и (N 149) HADAIFTSSYRRILGQLYARKLLHEIMNRQQGE-RNQEQRSRFN-COOH (rGHRH); где значения букв аббревиатуры и определение С-концевых остатков аминокислот приведены выше; (b) любой из вышеприведенных (а) полипептидов, имеющих заместители Nle для Met в положении 27, (с) любой из вышеприведенных (а) или ( b) полипептидов, в которых N-конец NH₂ замещается NHCOCH₃, (d) фрагменты любого из вышеприведенных (а), (b) и (с) полипептидов, которые содержат, по меньшей мере, аминокислотные остатки в положениях 1 29, (е) имеющих следующие аминокислотные поcледовательности в положениях 1 - 29 (пронумерованных от N-конца до С-конца): YADAIFTNSYRKVLQQLAARKLLQDIMSR X, YADAIFTNSYRKVLQQLLARKLLQDIMSR X, YSDAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMOR X, YADAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMOR X, YADAIFSSAYRRLLAQLASRRLLQELLAR X YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR X (линейный дитиол) YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR X (циклический дисульфид), где С концевая аминокислота и X определены выше, и модификация любого из соединений группы (е) соответствует модификациям, предложенным в (b), (с) и (d), и (f) органические или неорганические аддитивные соли любого из вышеприведенных в (а), (b), (с), (d) или (е) полипептидов Группы 1, рассматриваемые в наиболее предпочтительном осуществлении настоящего изобретения, отбираются из любых полипептидов, имеющих структуру: His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; DOPA-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Ala-Tyr-NH₂; Lys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Tyr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-Dphe-Lys-NH₂; Z-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂ где Z выбирается из группы, содержащей Ala, Val, Dopa, Trp, Met, Lys, Asp, Met (O), Lee, Abu, и Arg, и органические и неорганические аддитивные соли любого из вышеуказанных полипептидов Группы 2, и Полипептиды Группы 3, рассматриваемые в наиболее предпочтительном осуществлении настоящего изобретения, отбираются из любых полипептидов, имеющих структуру: Tyr-DArg-Phe-NH₂, Tyr-DAla-Phe-Gly-NH₂, Tyr-DArg-Phe-Gly-NH₂, Tyr-DArg-Phe-Sar, Tyr-DAla-Gly-Phe-NH₂, Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-oI, Tyr-DArg-Phe-Sar-NH₂, Tyr-DAla-Phe-Sar-NH₂, Tyr-DAla-Phe-Gly-NH₂, Tyr-DArg-(NO₂)-Phe-Gly-NH₂, Tyr-DMet-(O)-Phe-Gly-NH₂, (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH₂, Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH₂, Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH₂, Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH₂, Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH₂, Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH₂, Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Plo-Ser-NH₂, Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyr-Ser-NH₂ и органические и неорганические аддитивные соли любого из этих полипептидов Группы 3.

Данное изобретение также относится к методу, способствующему секреции и повышению уровня гормона роста в крови животных и заключающемуся в введении эффективной дозы композиции, содержащей полипептиды, выбранные по меньшей мере из двух различных групп: полипептидов Группы 1, Группы 2 или Группы 3.

При осуществлении настоящего изобретения в его широком объеме понятие "полипептиды Группы 1" включает встречающиеся в природе ГР-секретирующие гормоны, как, например, человеческие, свиные, коровьи, овечьи и крысиные гормоны, такие как приведенные ниже соединения и их функциональные аналоги. Такие соединения действуют в качестве рецепторов гормона, способствующего секреции гормонов роста у млекопитающих и других позвоночных и ракообразных. Пептиды, соответствующие этому определению, могут быть любыми из следующих полипептидов: (а) имеющих следующие аминокислотные последовательности в положениях 1-44 (пронумерованных от N-конца до C-конца): (N 144) YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGESNQERGARARL X, (N 145) YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGERNQEQGARVRL X, (N 146) YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMNRQQGERNQEQGAKVRL X, (N 148) YADAIFTNSYRKILGQLSARKLLQDIMNRQQGERNQEQGAKVRL X, (N 149) HADAIFTSSYRRILGQLYARKLLHEIMNRQQGERNQEQRSRFN X, где С-концевая аминокислота имеет следующую усеченную основную формулу: где каждый R' независимо является заместителем аминокислотных остатков, например заместителем водорода, алкила, арила, амино или кислот; X обозначает С-концевую группу и выбирается из -CONH₂, -ОСОH, -COOR, CONRR -CH₂OH и -CH₂OR, где R является алкильной группой, имеющей 1-6 атомов углерода или ароматическим кольцом, имеющим до 12 атомов углерода; (b ) любой из приведенных выше (а) полипептидов, имеющих следующие заместители аминокислот: положение 1 (N 144 N 148) занимает DTyr или Нis, положение 1 (N 149) занимает Туr или DHis, положение 2 (N 144 N 149) занимает (NMe DALа или Аib или DАla, положение 3 (N 144 N 149) занимает DASp, положение 4 (N 144 N 149) занимает Dala и положение 1 + 2 (N 144 N 149) занимает Tyr¹ + Аla², Тyr¹ + (NMe) Dalа² или DTyr¹ + Аib²; (с) любой из вышеприведенных (а) или (b) полипептидов, имеющих заместитель Nle для Met в положении 27, (d ) любой из вышеприведенных (а), (b) или (с) полипептидов, в котором N-конец NH₂ замещается NНСОR и в котором R является алкильной группой, имеющей 1-6 атомов углерода, или ароматическим кольцом, имеющим до 12 атомов углерода; (е) фрагменты любого из вышеприведенных в (а), (b), (с) или (d) полипептидов, которые содержат, по меньшей мере, аминокислотные остатки в положениях 1-29, (f) имеющих следующие аминокислотные последовательности в положениях 1 - 29 (пронумерованных от N-конца до С-конца): YADAIFTNSYRKVLQQLAARKLLQDIMSR X, YADAIFTNSYRKVLQQLLARKLLQDIMSR X, YSDAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, YADAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR-X, YADAIFSSAYRRLLAQLASRRLLQELLAR-X, YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X (линейный дитиол) и YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR-X (циклический дисульфид), где С-концевая аминокислота и X определены выше, и модификация любого из соединений этих групп (f) соответствует модификациям, предложенным в (b), (с) и (d), и (g) органические и неорганические аддитивные соли любого из вышеприведенных в (a), (b), (c), (d), (c) или (f) полипептидов Группы 1.

Полипептиды Группы 2, рассматриваемые в широком объеме осуществления настоящего изобретения отбираются из любых полипептидов, имеющих структуру: Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Gly-Tyr-NH₂; Ala-His-DTrp-Ser-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Alа-His-(formyl)DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂ (DTrp формилируется у индолазота) Cys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Cys-NH₂ (циклический дисульфид) Суs-Ala-Нis-DТrр-Ala-Тrр-DРhе-Lys-Суs-NH₂ (свободный дитиол) DOPA-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Ala-Tyr-NH₂; His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Lys-Нis-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Asp-NH₂; Lys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Tyr-Ala-Gly-Thr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Tyr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Tyr-DAla-Gly-Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe- -Lys-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Gly-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe- -Lys-NH₂; Ala-His-XTrp^*-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂ (^*XTrp отбирается из группы, состоящей из всех N-монометилированных Тrр изомеров, т.е. (NMe)Trp, (NMe)DTrp, (индол NМe)Тrр и (индол NМe)DТrр; Z-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; где Z выбирается из группы, состоящей из всех встречающихся в природе L-аминокислот, Met(0), DOPA и Аbu; и органические или неорганические аддитивные соли любого из вышеуказанных полипептидов Группы 2; и Полипептиды Группы 3, рассматриваемые в широком объеме осуществления настоящего изобретения, отбираются из любых полипептидов, имеющих структуру: Tyr-DArg-Phe-NH₂; Tyr-DAla-Phe-NH₂; Tyr-DArg(NO₂)-Phe-NH₂; Тyr-DMet(0)-Phe-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Gly-NH₂; Туr-DArg-Phe-Gly-NH₂; Туr-DThr-Phe-Gly-NH₂; Рhe-DArg-Phe-Gly-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Sar; Tyr-DAla-Gly-Phe-NH₂; Tyr-DArg-Gly-Trp-NH₂; Tyr-DArg(NO₂)-Phe-Gly-NH₂; Туr-DMet(0)-Phe-Gly-NH₂; (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Gly-ol; Tyr-DArg-Gly-(NMe)Phe-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Sar-ol; Tyr-DAla-Phe-Sar-ol; Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-NH₂; Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH₂; Tyr-DThr-Gly-Phe-Thz-NH₂; Gly-Tyr-DAla-Phe-Gly-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Gly-ol; Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol; Tyr-DArg-Phe-Sar-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Sar-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Sar; Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-NH₂; Sar-Tyr-DArg-Phe-Sar-NH₂; Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH₂ (циклический дисульфид); Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH₂ (свободный дитиол); Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH₂ (циклический дисульфид); Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH₂ (свободный дитиол); Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Pro-Ser-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Hyp-Ser-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH₂; Tyr-DArq-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH₂; органические или неорганические аддитивные соли любого из вышеприведенных полипептидов Группы 3.

В наиболее предпочтительном осуществлении настоящего изобретения метод, способствующий секреции и повышению уровня гормона роста в крови животных и заключающийся в введении эффективной дозы композиции, содержащей полипептиды, выбранные по меньшей мере из двух различных групп: полипептидов Группы 1, Группы 2 или Группы 3.

В самом предпочтительном осуществлении настоящего изобретения применительно к методу, способствующему выделению и повышению ГР в крови млекопитающих, понятие "полипептиды Группы 1" включает встречающиеся в природе ГР-секретирующие гормоны, как, например, человеческие, свиные, коровьи, овечьи и крысиные гормоны, такие как приведенные ниже соединения N 144-148, и их функциональные аналоги. Эти полипептиды действуют как рецепторы гормона, способствующего секреции гормона роста у млекопитающих и других позвоночных. Соединения, соответствующие этому определению, могут быть любыми из следующих полипептидов: (а) имеющих следующие аминокислотные последовательности в положениях 1-44 (пронумерованных от N-конца до С-конца): (N 144) YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-SNQEKGARARL-CONH₂ (hGHRH), (N 145) YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGE-RNQEQGARVRL-CONH₂ (pGHRH), (N 146) YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMNRQQGE-RNQEQGAKVRL-CONH₂ (bGHRH), (N 148) YADAIFTNSYRKILGQLSARKLLQDIMNRQQGE-RNQEQGAKVRL-CONH₂ (oGHRH) и (N 149) HADAIFTSSYRRILGQLYARKLLHEIMNRQQGE-RNQEQRSRFN-COOH (rGHRH), где значения букв аббревиатуры аминокислотных остатков, включая С-концевой аминокислотный остаток, приведены выше; (b) Любой из вышеприведенных в (а) полипептидов, имеющих следующие заместители аминокислот: положение 1 (N 144 N 149) занимает DTyr или His, положение 1 (N 149) занимает Туr, положение 2 (N 144 N 149) занимает (NMe) Dala или Aib или Dala, положение 3 (N 144 N 149) занимает Dasp, положение 4 (N 144 N 149) занимает Dalа, положение 1 + 2 (N 144 N 149) занимает DTy¹ + Аlа², (c) любой из вышеприведенных в (а) или (b) полипептидов, имеющих заместитель Nle для Met в положении 27, (d) любой из вышеприведенных (а), (b) или (с) полипептидов, в котором N-конец NH₂ замещается -NHCOCH₃, и (е) фрагменты любого из вышеприведенных в (а), (b), (с) или (d) полипептидов, которые содержат, по меньшей мере, аминокислотные остатки в положениях 1 29, (f) имеющих следующие аминокислотные последовательности в положениях 1-29 (пронумерованных от N-конца до С-конца): VADAIFTNSYRKVLQQLAARKLLQDIMSR X, YADAIFTNSYRKVLQQLLARKLLQDIMSR X, YSDAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR X, YADAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR X, YADAIFSSAYRRLLAQLASRRLLQELLAR X, (линейный дитиол), и YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR X (циклический дисульфид), где С-концевая аминокислота и X определены выше, и модификация любого из соединений этих групп (f) соответствует модификациям, предложенным в (b), (с) и (d), и (g) органические или неорганические аддитивные соли любого из вышеприведенных в (а), (b), (с), (d), (е) или (f) полипептидов Группы 1.

Полипептиды Группы 2, рассматриваемые в настоящем изобретении при его предпочтительном осуществлении, отбираются из любых полипептидов, имеющих структуру: His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂, His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Ala-Tyr-NH₂, Lys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂, Tyr-Ala-His-DTrp-ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂, DOPA-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂, Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂, Ala-His- (формил) DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂, (DTrp формилируется у индолазота) Ala-His-DTrp-Ser-Trp-DPhe-Lys-NH₂, Lys-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Asp-NH₂, Z-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂ где Z выбирается из группы, состоящей из всех встречающихся в природе L-аминокислот, Met (O), DOPa и Abu, и органические или неорганические аддитивные соли любого из вышеуказанных полипептидов Группы 2; и Полипептиды Группы 3, рассматриваемые при предпочтительном осуществлении настоящего изобретения, относящегося к методу, отбирается из любых полипептидом, имеющих структуру: Tyr-DArg-Phe-NH₂; Tyr-DArg(NO₂)-Phe-NH₂; Туr-DMet(O)-Phe-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Gly-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Gly-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Sar; Tyr-DAla-Gly-Phe-NH₂; Туr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol; Туr-DAla-Phe-Sar-NH₂; Туr-DAla-Phe-Sar-NH₂; Туr-DArg(NO₂)-Phe-Gly-NH₂; Туr-DMet(O)-Phe-Gly-NH₂; (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH₂; Туr-DAla-Phe-Gly-ol; Туr-DAla-Phe-Gly-Tyr-NH₂; Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH₂; Gly-Tyr-DAla-Phe-Gly-NH₂; Sar-Tyr-DArg-Phe-Sar-NH₂; Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH₂ (циклический дисульфид); Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH₂ (свободный дитиол); Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH₂ (циклический дисульфид); Туr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH₂ (свободный дитиол); Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Sef-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH₂, и органические или неорганические аддитивные соли любого из вышеуказанных полипептидов Группы 3.

В наиболее предпочтительном своем осуществлении данное изобретение дает метод, способствующий секреции и повышению уровня гормона роста в крови млекопитающих и включающий введение эффективной дозы композиции, содержащей полипептиды, выбранные по меньшей мере из двух различных Групп: полипептидов Группы 1, Группы 2 или Группы 3, предлагающихся ниже.

Согласно наиболее предпочтительному осуществлению настоящего изобретения применительно к методу, способствующему выделению и повышению ГР в крови млекопитающих, понятие "полипептиды Группы 1" включает встречающиеся в природе ГР-секретирующие гормоны, как, например, человеческие, свиные, коровьи, овечьи и крысиные гормоны, такие как приведенные ниже соединения N 144 148 и их функциональные аналоги, которые действуют как рецепторы гормона, способствующего секреции гормона роста у млекопитающих. Соединения, соответствующие этому определению, могут быть любыми из следующих полипептидов: (а) имеющих следующие аминокислотные последовательности в положениях 1 - 44 (пронумерованных от N-конца до С-конца): (N 144) YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGESMQERGARARL-CONH₂ (hGHRH), (N 145) YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLQDIMSRQQGERNQEQGARVRL-CONH₂ (pGHRH), (N 146) YADAIFTNSYRKVLGQLSARKLLDIMNRQQGERNQEQGAKVRL-CONH₂ (bGHRH), (N 148) YADAIFTNSYRKILGQLSARKLLDIMNRQQGERNQEQGAKVRL-CONH₂ (oGHRH), и (N 149) HADAIFTSSYRRILGQLYARKLLHEIMSRQQGERNQEQRSRFN-COOH (rGHRH), где значения букв аббревиатуры аминокислотных остатков, включая С-концевой аминокислотный остаток, определены выше; (b) любой из вышеприведенных в (а) полипептидов, имеющих заместитель Nle для Met в положении 27; (с) любой из вышеприведенных в (а) или (b) полипептидов, в которых N-конец NH₂ замещается на -NHCOCH₃; (d) фрагменты любого из вышеприведенных в (а), (b) или (с) полипептидов, которые содержат, по меньшей мере, аминокислотные остатки в положениях 1-29, (е) имеющих следующие аминокислотные последовательности в положениях 1-29 (пронумерованных от N-конца до С-конца): YADAIFTNSYRKVLQQLAARKLLQDIMSR X, YADAIFTNSYRKVLQQLLARKLLQDIMSR X, YSDAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR X, YADAIFSNAYRKILQQLLARKLLQDIMQR X, YADAIFSSSAYRRLLAQLASSRLLQELLAR X, YADAIFTNCYRKVLCQLSARKLLQDIMSR X (линейный дитиол) и YADAIFTNCYRKVLGQLSARKLLQDIMSR X (циклический дисульфид), где С-концевая аминокислота и X определены выше и модификация любого из соединений этих групп (е) соответствует модификациям, предложенным в (b ), (с) и (d) выше; (f) органические или неорганические аддитивные соли любого из вышеприведенных в (а), (b), (с), (d) или (е) полипептидов Группы 1.

Полипептиды Группы 2, рассматриваемые в настоящем изобретении при наиболее предпочтительном его осуществлении, отбираются из любых полипептидов, имеющих структуру: His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-Ala-Tyr-NH₂; Lys-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Tyr-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; DОPA-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Phe-Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; Z-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH₂; где Z выбирается из группы, состоящей из Ala, Val, DOPA, Trp, Met, Lys, Asp, Met(O), Leu и Arg, и органические или неорганические соли любого из вышеуказанных полипептидов группы 2; и Полипептиды Группы 3, рассматриваемые в наиболее предпочтительном осуществлении настоящего изобретения, относящегося к методу, отбираются из любых полипептидов, имеющих структуру: Tyr-DArg-Phe-NH₂; Туr-DAla-Phe-Gly-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Gly-NH₂; Туr-DArg-Phe-Sar; Туr-DAla-Gly-Phe-NH₂; Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol; Туr-DArg-Phe-Sar-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Sar-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Gly-ol; Tyr-DArg(NO₂)-Phe-Gly-NH₂; Tyr-DMet(O)-Phe-Gly-NH₂; (HMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH₂; Gly-Tyr-Arg-Phe-Gly-NH₂; Туr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pfo-Ser-NH₂; Tyr-DAla-Phe-Cly-Tyr-Hyp-Ser-NH₂; Туr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH₂; Туr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH₂; Tyr-DArg-Phe-Cly-Tyr-Pfo-Ser-NH₂; Tyr-DAr9-Phe-Cly-Tyr-Hyp-Ser-NH₂; и органические или неорганические аддитивные соли любого из вышеуказанных полипептидов Группы 3.

Данное изобретение, кроме того, предусматривает специфические комбинации полипептидов и методы использования таких комбинаций.

Изготовление cоединений Вещества, описанные в настоящем изобретении, могут быть синтезированы обычными методами растворения и твердофазного пептидного синтеза или обычными классическими методами, известными специалистам. Твердофазный синтез начинается с С-концевого аминокислотного остатка пептида. Соответствующее исходное вещество может быть получено, например, путем присоединения нужной защищенной -аминокислоты к хлорометилированной смоле, гидроксиметиловой смоле, бензгидриламиновой смоле (BHA) или пара-метил-бензолгидриламиновой смоле (р-Ме-ВНA). Хлорметиловая смола продается Bio Rad Laboratories, Ричмонд Калифорния под товарным знаком BIOBEADS Х-1. Изготовление гидроксиметиловой смолы описано Bodansky et al. Chem.Ynd. (London) 38, 1597 (1966). Смола ВНA описана Pietta и Marshall, Chem.Commn. 650 (1970) и практически может быть получена от Penninsula Laboratories Jnc. Бальмонт, Калифорния или Beckman Ynstruments, Jnc. Palo Alto, Калифорния, в ее хлористоводородной форме (ВНA.НСl).

После начального присоединения альфа-амино защитная группа может быть удалена путем подкисляющих реагентов, содержащих растворы трифторуксусной кислоты (TFA) или соляной кислоты (НСl) в органических растворителях, при комнатной температуре. После удаления альфа-амино защитной группы оставшиеся защищенные аминокислоты могут быть присоединены поэтапно в любом желаемом порядке. Каждая защищенная аминокислота может реагировать свыше 3 раз при использовании в качестве активатора соответствующей карбоксильной группы, такой как дициклогексикарбодиимид (DCC) в растворе, например в метиленхлориде (CH₂Cl₂) или диметилформамиде (DМF) и их смесях.

После получения нужной аминокислотной последовательности пептид может быть очищен от смолы путем обработки реагентом, как, например, фтороводород (HF), который не только очищает пептид от смолы, но и также очищает обычно используемые боковые защитные группы. При использовании хлорметиловой или гидроксиметиловой смолы НF-обработка приводит к образованию свободной пептидной кислоты. При использовании ВНA или р-Ме-ВНA-смолы, НF-обработка приводит к образованию непосредственно свободных пептидных амидов. Описанный выше твердофазный синтез хорошо известен специалистам и описывается Stewart u Young, Solid Phase Peptide Synthesis: (Freeman u lo. San Francissco, (1969).

В настоящем изобретении может быть испо