Производные бис-нафталимидов, их энантиомерные или диастереомерные формы, или их смеси, или их фармацевтически приемлемые соли, противоопухолевая композиция и способ лечения

Производные бис-нафталимидов, их энантиомерные или диастереомерные формы, или их смеси, или их фармацевтически приемлемые соли, противоопухолевая композиция и способ лечения

Реферат

 

Использование: в медицине, т.к. обладают противоопухолевой активностью. Сущность изобретения: продукт - производные биснафталимидов формулы 1 или их энантиомерные или диастереомерные формы или их фармацевтически приемлемые соли, где R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ независимо представляют Н или СН₃, Х и Х' - Н или NO₂, Y и Y' - H или NO₂ при условии что по крайней мере один из X, X', Y, Y' представляет NO₂. Противоопухолевая композиция содержит фармацевтически приемлемый носитель и соединение I в количестве 0,5-95 проц. мол. Формула 1 имеет вид: Для лечения млекопитающих назначают соединение в суточной дозе 5-400 мг/кг веса в 2-4 приема.7 табл.

Данное изобретение относится к бис-нафталимидам, включающим 2,2'-[1-2-этандиилбис[имино(1-метил-2,1-этандиил)]-бис[5-нитро -1Н-бенз/de/изохинолин-1,3/2H/-дион] и 2,2'-[1,2-этандиилбис[имино/2-метил-2,1-этандиил/]-бис[5-нитро -1Н-бенз/de/изохинолин-1,3-/2H/-дион] к способам их получения, фармацевтическим композициям, содержащим их, и к способам использования их для лечения злокачественных опухолей, особенно твердых опухолевых карцином, у животных.

Harnisch и др. патент США 4841052, выданный 20 июня 1989 г. описывают имиды нафталевой кислоты, полезные в качестве веществ, регулирующих заряд в электрофотографических тонерах.

Авторы Brana и др. патент США 4874863, выданный 17 октября 1989 г. раскрывают противораковые соединения формулы: где Х¹, X²,X³ и Х⁴ являются одинаковыми или различными и каждый представляет собой Н, NO₂, NH₂, /1-6C/алкиламино, ди-/1-6C/алкиламино, ОН, /1-6C/алкокси, галоген, тригалоидметил, /1-6C/алкилформил, /1-6C/алкилкарбонил, уреил, /1-6C/алкилуреил и R представляет прямую цепь или разветвленный /4-10C/алкилен, который прерывается в одной или двух точках в цепи вторичной или третичной аминогруппой, где 2 атома азота могут быть дополнительно связаны друг с другом алкиленовой группой, или их соли с физиологически приемлемыми кислотами.

Данное изобретение предоставляет бис-фталимидные соединения, имеющие формулу /1/: или их энантиомерные или диастереомерные формы, или смеси этантиомерных или диастереомерных форм их, или их фармацевтически приемлемые соли, где: R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ независимо представляют собой водород или метил; X и X¹ представляют собой Н или NO₂; и Y и Y¹ представляют Н или NO₂, при условии, что по крайней мере один из Х, Х¹, Y и Y¹ представляет NO₂.

Предпочтительные соединения настоящего изобретения включают те соединения формулы /i/, в которой: R¹ и R⁷ представляют метил; R², R³, R⁴, R⁵ и R⁶ представляют Н; X и X¹ представляют NO₂, где заместитель находится в 3-положении нафталимида /т.е. 5-положение 1Н-бенз/де/изохинолин-1,3/2H/-диона/ и Y и Y¹ представляет Н.

Предпочтительные соединения настоящего изобретения также включают те соединения формулы /i/, в которой: R² и R⁶ представляют метил; R¹, R³, R⁴, R⁵ и R⁷ представляют водород; X и X¹ представляют NO₂, где заместитель находится в 3-положении нафталимида /т.е. 5-положение 1Н-бенз/де/изохинолин-1,3/2H/-диона/; и Y и Y¹ представляют водород.

Особенно предпочтительными соединениями настоящего изобретения являются следующие: /S, S/-2,2¹-[1,2-этандиилбис[имино/1-метил-2,1-этандиил/] -бис[5-нитро-1Н-бенз/de/ихохинолин-1,3/2H/-дион] /Рацемический + Мезо/-2,2¹-[1,2-этандиилбис[имино(1-метил-2,1-этандиил)] -бис[5-нитро-1Н-бенз/de/изохинолин-1,3/2H/-дион] /R, R/-2,2'-[1,2-этандиилбис[имино(1-метил-2,1-этандиил)] -бис[5-нитро-1Н-бенз)de/ихохинолин-1,3/2H/-дион] /Мезо/-2,2'-[1,2-этандиилбис[имино(1-метил-2,1-этандиил)] -бис[5-нитро-1Н-бенз/de/изохинолин-1,3/2H/-дион] /S, S/-2,2'-[1,2-этандиилбис[имино(2-метил-2,1-этандиил)]-бис[5-нитро-1 Н-бенз/de/изохинолин-1,3/2H/-дион] /Рацемический+Мезо/-2,2'-[1,2-этандиилбис[имино(2-метил-2,1-этандиил)] -бис[5-нитро-1Н-бенз/de/изохинолин-1,3/2H/-дион] /R, R/-2,2'-[1,2-этандиилбис[имино(2-метил-2,1-этандиил)]-бис[5-нитро1Н-бенз/de/изохинолин-1,3-/2H/-дион] или /Мезо/-2,2'-[1,2-этандиилбис[имино(2-метил-2,1-этандиил)] -бис-[5-нитро -1Н-бенз/de/изохинолин-1,3/2H/-дион] и их фармацевтически приемлемые соли.

Данным изобретением также охватываются способы получения соединений формулы /i/, фармацевтические композиции, содержащие соединения формулы /i/, и способы использования этих соединений для лечения рака, особенно твердых опухолевых карцином, у млекопитающих.

Синтез. Настоящее изобретение описывает ряд бис-нафталимидов, полезных для лечения злокачественных опухолей, содержащих линкеры, происходящие из восстановленных пептидов. Соединения данного изобретения являются более растворимыми в водных средах, чем известные соединения, не содержащие этих восстановленных пептидных линкеров.

Соединения данного изобретения могут синтезироваться с помощью взаимодействия двух эквивалентов ангидрида формулы /ii/ c одним эквивалентом полиамина формулы /iii/ в инертном растворителе, таком, как этанол или диметилформамид или тетрагидрофуран, например, при температуре в интервале от температуры окружающей среды до температуры кипения растворителя /Схема А/. Получающаяся в результате суспензия может затем фильтроваться, давая свободное основание формулы /i/, или она может подкисляться соответствующей минеральной или органической кислотой, давая фармацевтически приемлемую соль, которая может получаться с помощью фильтрования. Соли свободных оснований могут также получаться с помощью подкисления суспензии свободного основания в этиловом спирте или дихлорметане соответствующей минеральной или органической кислотой и сбора образовавшегося твердого вещества с помощью фильтрования. В некоторых случаях свободное основание формулы /i/ требует очистки с помощью хроматографии на колонке перед тем, как может получаться его соль, как описано выше.

Схема А Исходный ангидрид /ii/ является промышленно доступным или может быть получен согласно процедурам, описанным авторами Hodgsen и др. J. Chem. Soc. стр. 90 /1945/. Восстановленные пептиды формулы /iii/ могут получаться согласно методам, описанным ниже /Схемы I-IV/.

Синтез соединений формулы Va /см. Схему 1 ниже/ может выполняться с помощью реакции т-ВОС /S/-аланина /соединение а/ c 1,1'-карбонилдимидазолом с последующим взаимодействием с этилендиамином в обычных условиях. Кислотный гидролиз т-ВОС /N-трет-бутоксикарбонил/ защитной группы в соединении Ia может проводиться в стандартных условиях, давая соединение IIa. Та же самая процедура используется для получения соединения IIb или IIc, начиная последовательность реакций с соответствующего /R/-аланина (соединение b/ или рацемического аланина /cоединение с/.

Восстановление соединения IIa /дихлоргидратная соль/ дибораном в тетрагидрофуране при температуре дефлегмации давало соединение IIIa. IIIa затем нейтрализовалось этилатом натрия, и чистое свободное основание IVa получалось с помощью перегонки Кугельрора. IVa подвергался реакции с соответствующим нафталевым ангидридом в этаноле или тетрагидрофуране при температуре дефлегмации для получения Va. Соединения Vb и Vc получаются аналогичным образом с помощью использования соответственно соответствующих соединений IVb или IVc.

Схема 1 Бис-нафтамилиды формулы /XIX/, где R¹ R³ R⁴ R⁵ R⁷ H, R² R⁶ CH₃ и Х и Y представляют NO₂ или Н, могут быть получены по схеме III. Реакция /S/-аланин-метилового эфира с оксалилхлоридом в бензоле при температуре дефлегмации давала амид XVa. Амид XVa превращался в амид XVIa c помощью аммиака в метаноле в стандартных условиях. Амид XVIa восстанавливается дибораном в тетрагидрофуране, давая амин XVIIa в виде тетрагидрохлоргидратной соли, которая впоследствии нейтрализовалась этилатом натрия, давая свободный амин XVIIIa. Амин XVIIIa конденсировался с соответствующим нафталевым ангидридом, давая соединение XIXa. Соединения XIXb и XIXc могут получаться аналогично с помощью использования соответствующих соединений XVIIIb и XVIIIc, соответственно. В дополнение к сказанному, соединения XXa, XXVIIIb и XXIXb можно получать с помощью конденсации амина XVIIIb соответствующими нафталевыми ангидридами.

Схема III На схеме III положение Х и Y указывается с использованием нумерации положения в соответствующем нафталевом ангидриде, а не нумерации для 1Н-бенз/de/изохинолин-1,3/2H/-диона.

Для соединений формулы /XXVII/ синтез показан на схеме IV. Реакция т-ВОС/S/-аналина с изобутилхлорформиатом в присутствии N-метилморфолина с последующей реакцией с аминоацетонитрилом /получаемым нейтрализацией его HCl соли N-метилморфолином/, давала XXI.

Данное соединение гидрировалось с использованием гидроокиси палладия в уксусной кислоте, давая XXII. Реакция т-ВОС-/R/-аланина с 1,1'-карбонилдиимидазолом с последующим добавлением соединения XXII в стандартных условиях давала XXIII. Кислотный гидролиз т-ВОС защитной группы соединения XXIII осуществлялся в стандартных условиях, давая XXIV. Последующее восстановление дибераном в дефлегмирующем тетрагидрофуране давало XXV, которое нейтрализовалось этилатом натрия, давая XXVI. Амин XXVI конденсировался с соответствующим нафталевым ангидридом, давая XXVII.

Схема IV Для соединения формулы /XXXX/ синтез показан на схеме V. /т-ВОС/-аланил-аланин подвергался реакции с изобутилхлорформиатом в метиленхлориде при -10^oC-15^oC в присутствии N-метилморфолина с последующим добавлением хлоргидрата метилового эфира /S/-аланина, давая соединение XXXV. Сложный эфир XXXV превращался в его амид XXXVI c помощью барботирования аммиака в метаноле. т-ВОС защитная группа удалялась с помощью кислотного гидролиза, давая XXXVII. Последующее восстановление дибораном трипептидного амида XXXVII в дефлегмирующем тетрагидрофуране давало тетрахлоргидрат полиамина XXXVIII, который нейтрализовался этилатом натрия, давая XXXIX. Амин XXXIX конденсировался с соответствующим нафталевым ангидридом, давая XXXX.

Схема V Асимметрические бис-нафталимиды формулы /XXXXVI/ могут синтезироваться, как показано на схеме VI /ниже/. Реакция XXII c 1,1'-карбонилдиимидазолом с последующим добавлением /R/-бензилоксикарбонилаланина давала XXXXI. Последующая реакция с пятисернистым фосфором в тетрагидрофуране давала соответствующий тиоамид XXXXII. Обработка XXXXII никелем Ренея давала амин XXXXIII. Амин XXXXIII конденсировался с 3-нитро-1,8-нафталевым ангидридом, давая нафталимид XXXXIV. Защитная /т-ВОС/-группа гидролизовалась и в стандартных условиях, давая XXXXV, который в свою очередь конденсировался с еще одним нафталевым ангидридом, давая несимметричные бис-нафталимиды формулы XXXXVI.

Схема VI Данное изобретение можно дополнительно понять, обращаясь к следующим примерам и представленным ниже таблицам.

ПРИМЕР 1. /S,S/-2,2'-[1,2-этандиилбис[имино/-1-метил/-2,1-этандиил]-бис[5-нитро1Н-бенз/de/изохинолин-1,3/2H/-дион]метансульфонат /1:2/ /VIa/ Часть A: /IIIa/ /S, S/-N¹,N²-1,2-этандиилбис[1,2-пропандиамин]тетрахлоргидрат К суспензии соединения IIa /2,75 г, 10 ммолей/ в ТГФ /80 мл/ добавлялось 200 мл 1 М ВН₃, ТГФ комплекса медленно. Смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 1,5 ч, а затем нагревалась на протяжении ночи, образуя светлый раствор. После охлаждения до комнатной температуры раствор осторожно гасился добавлением 100 мл метанола, а затем нагревался с обратным холодильником на протяжении ночи. Растворитель выпаривался, и к оставшейся жидкости добавлялось 20 мл метанола и 5 мл концентрированной HCl. Получающееся в результате более твердое вещество собиралось на фильтре в атмосфере азота, давая 1,92 г /60%/ соединения IIIA; т.пл. 210-215^oC.

¹H-ЯМР /D₂O/ 3,60 /м. 2Н, 2 СН/, 3,40 /c. 4H, 2 CH₂/, 3,27 /м. 4Н, 2 СН₂ и 1,30 /д. 6Н, I 6,9 Гц, 2 СН₃/. MC /DCl/ м/e 175 /M+1, свободное основание/. //_D 2,31^o /c -0,606, H₂O/.

Раздел В: /IVa/ /S,S/-N¹,N¹-1,2-этандиилбис[1,2-пропандиамин] Натрий /1,03 г, 45 ммолей/ добавлялся к 50 мл безводного этанола и смесь перемешивалась в течение 1,5 ч до тех пор, пока весь натрий не растворялся. К раствору добавлялось 3,2 г /10 ммолей/ соединения IIIa. После перемешивания в течение 2 ч осадок хлорида натрия удалялся с помощью фильтрования; и растворитель в фильтрате выпаривался. Перегонка Кугельрора /120-140^oC при 1,4 мм/ давала 1,29 г /74%/ соединения IVa в виде светлой жидкости.

¹H-ЯМР /CDCl₃/ d 2,96 /м. 2Н, 2 СН/, 2,71 /м. 4Н, 2 СН₂/, 2,60 /м. 2Н, СН₂/, 2,40 /м. 2Н, СН₂/, 1,46 /широкий, 6Н, NH₂ и 2 NH/ и 1,06 /д. 6Н, I 6,2 Гц, 2 СН₃/. MC /DCl м/e 175 /M+1/.

Раздел С: /VA/ /S,S/-2,2'-[1,2-этандиилбис[имино/1-метил-2,1-этандиил/] -бис[5-нитро-1 Н-бенз/de/изохинолин-1,3/2H/-дион]метансульфонат /1:2/.

Смесь 3-нитро-1,8-нафталевого ангидрида /2,43 г, 10 ммолей/ и IVa /0,87 г, 5 ммолей/ перемешивалась при комнатной температуре в течение 4 ч, нагревалась с обратным холодильником в течение 2 ч, а затем охлаждалась до комнатной температуры на протяжении ночи. Растворитель в смеси выпаривался и остаток очищался с помощью хроматографии на колонке, давая 0,87 г /27,9%/ коричневого твердого вещества. К свободному основанию /0,84 г, 1,3 ммоля/ в 70 мл метиленхлорида добавлялось 0,26 г метансульфоновой кислоты. После перемешивания на протяжении ночи при комнатной температуре растворитель в смеси выпаривался, и к остатку добавлялось 45 мл метанола. После нагревания с обратным холодильником в течение 2 ч желтое твердое вещество собиралось на фильтре, сушилось в вакууме при 78^oC в течение 2 ч, давая 0,86 г /81%/ соединения Va; т.пл. 212-213^oC /разлож./.

¹H-ЯМР /DMCO-d₆/ d 9,53 /д. 2Н, I 2,2 Гц, ароматические протоны/, 8,96 /д. 2Н, I 2,2 Гц, ароматические протоны/, 8,83 /д. 2Н, I 7,7 Гц, ароматические протоны/, 8,69 /д. 2Н, I 7,3 Гц, ароматические протоны/, 8,7-8,8 /широкий, 4Н, 2 NH⁺₂/, 8,09 /т. 2Н, I 7,9 Гц, ароматические протоны/, широкий, 4Н, 2 NH⁺₂/, 8,09 /т. 2Н, I 7,9 Гц, ароматические протоны/, 5,46 /м. 2Н, 2 СН/, 3,86 /м. 2Н/, 3,2-3,5 /м. 6Н/, 2,20 /c. 6H, 2 CH₃/ и 1,57 /д. 6Н, I 6,9 Гц, 2 СН₃/, MC /DCl/ м/e 625 /M+1/.

Анализ для С₃₂H₂₈N₆O₈ x 2 CH₃SO₃H /MB 816.81/: Вычислено, C 50,00; H 4,44; N 10,29; S 7,85 Найдено, C 49,88; H 4,39, N 10,14; S 7,86.

Аналогично могут быть получены соединения по примерам 2 и 3 и охарактеризованы.

ПРИМЕР 2. /рацемат + мезо/-2,2'-[1,2-этандиилбис[имино/1-метил-2,1-этандиил/] -бис[5 -нитро-1Н/de/изохинолин-1,3/2H/-дион]метансульфонат /1:2/ /Vc/ Светло-желтое твердое вещество /18% выход/; т.пл. 220-221^oC /разл./ ¹H-ЯМР соединения Vc почти идентичен данным анализа соединения Va за исключением того, что Vc показывает дд. при 1,59 млн. дол. вследствие присутствия d1 пар и мезо. МС /DCl/ м/e 625 /M+1/.

Анализ для С₃₂H₂₈N₆O₈2CH₂SO₃HH ₂O /MB 834.83/: Вычислено, C 48,92; H 4,59; N 10,07; S 7,68 Найдено, C 49,10, 49,01; H 4,45, 4,40; N 10,02, 9,96; S 7,39, 7,45 ПРИМЕР 3. /R,R/-2,2'-[1,2-этандиилбис[имино(1-метил-2,1-этандиил)]-бис [5-нитро-1Н-бенз/de/изохинолин-1,3/2H/-дион]метансульфонат /1:2/ Vb/ Светло-желтое твердое вещество /25% выход/; т.пл. 210-211^oC /разл./.

Данные ¹H-ЯМР соединения Vb идентичны данным соединения Va. MC /DCl/ м/e 625 /M+1/.

Анализ для C₃₂H₂₈N₆O₈2CH₃SO₃H /MB 816.81/: Вычислено, C 50,00; H 4,44; N 10,29; S 7,85 Найдено, C 49,88; H 4,41; N 10,14; S 7,81.

ПРИМЕР 26. /Мезо/-2,2'-[1,2-этандиилбис[имино(1-метил-2,1-этандиил)] -бис[5-нитро-1Н-бенз/de/изохинолин-1,3/2H/-дион]метансульфонат /1:2/ /XXVII/ Раздел А: /XXI/ 1,1-Диметилэтил-/S/-[2-[/Цианометил/амино]-1-метил-2-оксоэтил]карбамат.

Смесь хлоргидрата аминоацетонитрила /9,25 г, 100 ммолей/ и N-метилморфолина /10,1 г, 100 ммолей/ в 100 мл ТГФ перемешивалась в течение 15 минут, N-т-ВОС-/S/-аланин /18,9 г, 100 мл/ и N-метилморфолин /10,1 г, 100 ммолей/ в 100 мл ТГФ перемешивались на соле-ледяной бане. Добавлялся изобутилхлорформиат /12,97 мл, 100 ммолей/ с такой скоростью, чтобы температура смеси не превышала 10^oC, и добавлялась спустя 2 минуты смеси суспензии нитрил-N-метилморфолина.

Смесь перемешивалась при комнатной температуре на протяжении ночи. Хлоргидрат N-метилморфолина удалялся с помощью фильтрования, а растворитель в фильтрате выпаривался. Оставшаяся жидкость разбавлялась метиленхлоридом /500 мл/, промывалась некоторым количеством карбоната калия /2 x 100 мл/, водой /1 x 100 мл/. Слои разделялись и органический слой сушился над безводным сульфатом магния, фильтровался и выпаривался, давая 15,85 г /69,75%/ неочищенного продукта. Данный продукт очищался с помощью хроматографии на колонке, давая чистое соединение XXI /14,88 г, 65,5%/; т.пл. 99-100^oC.

¹H-ЯМР /CDCl₃/ d 7,32 /широкий, 1Н, NH/, 5,12 /д. 1Н, I 5,8 Гц, NH/, 4,15 /м. 3Н, СН и СН₂/, 1,46 /c. 9H, 3 CH₃/ и 1,39 /д. 3Н, I 7,0 Гц, СН₃/. MC /Cl/ м/e 228 /M+1/.

Раздел В: /XXII/ 1,1-диметилэтил-/S/-[2-[/2-аминоэтил/-амино]-1-метил-2-оксоэтил]карбамат.

Смесь соединения XXI /2,0 г, 8,8 ммоля/ и гидроокиси палладия /0,5 г/ в 15 мл уксусной кислоты гидрировалась /50 фунт/дюйм² /3,515 кг/см²/ во встряхивателе Парра в течение 1,5 ч. Катализатор в смеси удалялся с помощью фильтрования. Уксусная кислота в фильтрате удалялась с помощью перегонки в вакууме, давая светло-желтую вязкую жидкость, к которой добавлялось 15 мл метанола и 1 г бикарбоната натрия. Смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение нескольких часов. Ацетат натрия удалялся с помощью фильтрования и растворитель в фильтрате выпаривался, давая неочищенный продукт. Данный продукт очищался с помощью хроматографии на колонке, давая чистое XXII /0,92 г, 45,2%/, в виде вязкой жидкости.

¹H-ЯМР /CDCl₃/ d 7,08 /широкий, 1Н, NH/, 5,28 /широкий, 1Н, NH/, 3,28-3,26 /м. 2Н, СН₂/, 2,84 /т. 2Н, I 5,9 Гц, СН₂/, 1,41 /c. 9H, 3 CH₃/, и 1,34 /д. 3Н, I 6,9 Гц, СН₃/, MC /Cl/ м/e 232 /M+1/.

Раздел С: /XXIII/ 1,1-Диметилэтил /мезо/-[1,2-этандиилбис[имино/-1-метил-2-оксо-2,1-этандиил/]-бис(карбамат) Смесь N-т-ВОС-/R/-аланина /0,74 г, 3,9 ммоля/ и 1,1'-карбонилдиимидазола /0,64 г, 3,9 ммоля/ в 20 мл метиленхлорида перемешивалась на ледяной бане при охлаждении в течение 1,5 ч. К смеси добавлялось соединение XXII /0,91 г, 3,9 ммоля/ в 10 мл метиленхлорида при охлаждении на ледяной бане. Смесь перемешивалась при температуре окружающей среды в течение ночи. Продукт собирался на фильтре, давая XXIII /1,22 г, 77,9%/ в виде белого твердого вещества.

¹H-ЯМР /DMCO-d₆/ d 7,83 /широкий, 2Н, 2 NH/, 6,85 /м. 2Н, 2 NH/, 3,90 /м. 2Н, 2 СН/, 3,13 /м. 4Н, 2 СН₂/, 1,40 /e, 10H, 6 CH₃/ и 1,18 /д, 6Н, 2 СН₃/. MC /Cl/ м/e 403 /M+1/.

Раздел D: /XXIV/ Дихлоргидрат /мезо/-N,N'-1,2-этандиилбис/2-аминопропанамида/.

Смесь соединения XXIII /1,18 г, 2,9 ммоля/ и 2,7 мл 4,4 норм. HCl в 40 мл диоксана нагревалась до дефлегмации в течение 5 ч, а затем охлаждалась на протяжении ночи до комнатной температуры. Растворитель в смеси выпаривался, давая XXIV /0,75 г, 94%/, в виде белого твердого вещества.

¹H-ЯМР /DMCO-d₆/ d 8,81 /широкий, 2Н, 2 NH/, 8,33 /широкий, 4Н, 2 NH₂/, 3,83 /кв. 2Н, I 6,9 Гц= 2 СН/, 3,21 /широкий, с. 4Н, 2 СН₂/ и 1,37 /д. 6Н, I 6,9 Гц, 2 СН₃/.

Раздел Е: /XXV/ /Мезо/-N¹, N¹-1,2-этандиилбис[1,2-пропандиамин]-тетрахлоргидрат К 30 мл 1 М боран-ТГФ комплекса добавлялось 0,75 г /2,7 ммоля/ XXIV. Cмесь нагревалась с обратным холодильником на протяжении ночи. После охлаждения до комнатной температуры к реакционной смеси медленно добавлялся метанол /15 мл/. Смесь затем нагревалась с обратным холодильником в течение 3 дней. Растворители в смеси выпаривались. К остатку добавлялось 20 мл метанола и 1,5 мл конц. HCl. Смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 4 ч, а затем растворитель и избыток HCl выпаривались, давая XXV /0,81 г, 93,7%/ в виде белого твердого вещества.

¹H-ЯМР /D20/ d 3,66 /м. 2Н/ 3,37 /c. 4H/, 3,24 /м. 4Н/, и 1,29 /д. 6Н, I 7,0 Гц, 2 CH₃/. MC /CD1/ м/e 175 /M+1/.

Раздел F: /XXVI/ /Мезо/-N¹, N^1'-1,2-этандиилбис-/1,2-пропандиамин/ К свежеприготовленному раствору этилата натрия в этаноле /0,26 г натрия в 40 мл этанола/ добавлялось 0,81 г XXV. Смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 1 ч. Хлористый натрий удалялся с помощью фильтрования, а растворитель в фильтрате выпаривался. Продукт отделялся от остатка с помощью перегонки Кугельрора /88-96^oC при 0,4 мм/, давая XXVI /0,32 г, 73,4%/, в виде светлой жидкости.

¹H-ЯМР /CDCl₃/ d 2,88 /м. 2Н: 2 CH/, 2,63 /м. 4Н, 2 СН₂/, 2,48 /м. 2Н, СН₂/, 2,29 /м. 2Н, СН/₂/, 1,54 /широкий с. 6Н, 2 NH₂ и 2 NH/ и 0,96 /д. 6Н, I 6,2 Гц, 2 СН₃/. MC /C1/ м/e 175 /M+1/.

Раздел G: /XXVII/ /Мезо-2,2'-[1,2-этандиилбис[имино/1-метил-2,1-этандиил/]-бис[5-нитро-1H- бенз/de/изохинолин-1,3/2H/-дион]метансульфонат /1:2/ Смесь 3-нитро-1,8-нафталевого ангидрида /0,78 г, 3,2 ммоля/ и соединения XXVI /0,28 г, 1,6 ммоля/ в 26 мл этанола перемешивалась при комнатной температуре на протяжении ночи, а затем нагревалась до температуры дефлегмации в течение 2 и 2/3 ч. Растворитель в смеси выпаривался, давая неочищенные продукты. Полученное вещество очищалось с помощью хроматографии на колонке, давая чистый продукт /0,39 г, 39%/ в виде его свободного основания. Данное вещество превращалось в его метансульфонатную соль XXVII: /0,33 г, 25,3%/; т.пл. 243-244,5^oC /разл./ ¹H-ЯМР /DMCO-d₆/ d 9,53 /c. 2H, ароматические протоны/, 8,96 /c. 2H, ароматические протоны/, 8,82 /д. 2Н, I 8,0 Гц, ароматические протоны/, 8,77, 8,74 /широкий, 4Н, 2 NH⁺₂/, 8,70 /д. 2Н, I 6,9 Гц, ароматические протоны/, 8,09 /т. 2Н, I 7,7 Гц, ароматические протоны/, 5,47 /м. 2Н, 2 СН/, 3,87 /м. 2Н/, 3,43 /м. 2Н/, 3,27 /широкий, 4Н/, 2,20 /c. 6H, 2 CH₃SO₃H/ и 1,58 /д. 6Н, I 6,6 Гц, 2 CH₃/. ИК /KBг/ 3445 /NH/, 1770, 1668 /C=O/ см^-1. MC /DC1/ м/e 625 /M+1/.

Анализ для С₃₂H₂₈N₆O₈2СH₃SO₃1/2 H₂O /MB 826,53/: Вычислено, C 49,41; H 4,60; N 10,17; S 7,76 Найдено, C 49,45, 49,41; H 4,33, 4,29; N 10, 10,21; S 7,50, 7,58.

ПРИМЕР 27. /S,S/-2,2'-[1,2-этандиилбис[имино(2-метил-2,1-этандиил)] -бис[5-нитро-1Н-бенз/de/изохинолин-1,3/2H/-дион]метансульфонат /1:2/ /XIXa/ Раздел A: /XVy/ Диметил N,N'-1,2-диоксо-1,2-этандиил/бис/S-аланин/ Смесь хлоргидрата метилового эфира /S/-аланина /14 г, 100 ммолей/ и оксалилхлорида /4,9 мл, 55 ммолей/ в 150 мл бензола нагревалась на протяжении ночи с обратным холодильником. После охлаждения до комнатной температуры на фильтре собиралось белое твердое вещество, давая 12,36 г /95%/ соединения XVa; т.пл. 167-170^oC.

¹H-ЯМР /DMCO-d₆/ 9,15 /д. 2Н, 2 NH/, 4,40 /квинтет, 2Е, 2 СH/, 3,67 /c. 6H, 2 OCH₃/ и 1,40 /д. 6Н, 2 СН₃/. MC /DC1/ м/e 261 /M+1/ /a/^Д-65,32^o /c 1,012, AcOH/.

Раздел B: /XVIa/ /S,S/-N,N'-бис/2-имино-1-метил-2-оксоэтил/этандиамин.

Соединение XVa /5,21 г, 20 ммолей/ добавлялось к метанольному раствору, насыщенному аммиаком, при охлаждении на ледяной бане. Смесь затем дополнительно подвергалось барботированию через нее аммиака в течение 1 ч, а затем перемешивалась при комнатной температуре на протяжении ночи. Белое твердое вещество собиралось на фильтре, давая 3,65 Гц, /79%/ соединения XVIa.

¹H-ЯМР /DMCO-d₆/ d 8,50 /д. 2Н, I 7,7 Гц, 2 NH/, 7,50 /c. 2H, NH₂/, 7,21 /c. 2H, NH₂/, 4,25 /квинтет, 2Н, I 7,3 Гц, 2 СН/, и 1,31 /д. 6Н, I 7,3 Гц, 2 СН₃/. MC /DC1/ м/e 231 /M+1/ /a/_Д + 69,14^o /c 0,418 ДМФ/.

Раздел С: /XVIIa/ /S, S/-N², N^2'-1,2-этандиилбис/-1,2/-пропандиамин/ тетрахлоргидрат.

К смеси соединения XVIa /3,5 г, 15,2 ммоля/ в 100 мл ТГФ добавлялось 150 мл 1 М BH₃ ТГФ комплекса. После нагревания с обратным холодильником на протяжении ночи реакционная смесь охлаждалась до комнатной температуры, и медленно добавлялось 80 мл метанола. Смесь нагревалась с обратным холодильником на протяжении ночи, и небольшое количество присутствующего осадка удалялось с помощью фильтрования. Растворители в фильтрате выпаривались, и к оставшейся жидкости добавлялось 30 мл метанола и 7,5 мл конц. HCl при охлаждении на ледяной бане. После перемешивания в течение 1,5 ч смесь растиралась с этиловым эфиром, и на фильтре собирался продукт, давая 3,92 г /81%/ соединения XVIIa.

¹H-ЯМР /D₂O/ d 3,54 /м. 2Н, 2 СН/, 3,31 /м. 6Н/, 3,06 /м. 2Н/ и 1,28 /д. 6Н, I 6,6 Гц, 2 СН₃/. MC /DC1 м/e 175 /M+1, свободное основание/ /a/_Д + 8,39^o /c 0,632, H₂O/.

Раздел D: /XVIIIa/ /S,S/-N²,N^2'-1,2-этандиилбис/1,2-пропандиамин/.

Соединение XVIIa /3,2 г, 10 ммолей/ добавлялось к свежеприготовленному раствору этилата натрия в этаноле /1,03 г натрия в 50 мл этанола/. После перемешивания при комнатной температуре на протяжении ночи хлористый натрий из смеси удалялся фильтрованием, а растворитель в фильтрате выпаривался. Оставшаяся смесь очищалась с помощью перегонки Кугельрора /110-124^oC при 0,7 мм/, давая 1,43 /82%/ соединения XVIIIa в виде светлой жидкости.

¹H-ЯМР /CDCl₃/ d 2,8-2,4 /м. 10Н, 4 СН₂ и 2 СН/, 1,57 /широкий, 6Н, 2 NH₂ и 2 NH/ и 0,91 /д. 6Н, I 5,9 Гц, 2 CH₃/ /a/_Д + 120^o /c 0,310 бензол/.

Раздел E: /XIXa/ /S,S/-2,2'-[1,2-этандиилбис[имино/-2-метил-2,1-этандиил)]-бис[5-нитро-1Н -бенз/de/изохинолил-1,3/2H/-дион]метансульфонат /1:2/.

Смесь 3-нитро-1,8-нафталевого ангидрида /1,46 г, 6,0 ммолей/ и XVIIIa /0,52 г, 3 ммоля/ в 30 мл этанола перемешивалась при комнатной температуре на протяжении ночи. К смеси добавлялось 0,63 г метансульфоновой кислоты. После перемешивания на протяжении ночи продукт выделялся с помощью фильтрования и очищался путем нагревания в 50 мл метанола на протяжении ночи, давая 1,37 г /55%/ соединения XIXa; т.пл. 254-255^oC /разл./ ¹H-ЯМР /DMCO-d₆/ d 9,55 /д. 2Н, I 1,9 Гц, ароматические протоны/, 9,0 /д. 2Н, I 1,9 Гц, ароматические протоны/, 8,85 /д. 2Н, I 8,1 Гц, ароматические протоны/, 8,73 /д. 2Н, I 7,0 Гц, ароматические протоны/, 8,11 /т. 2Н, I 7,9 Гц, ароматические протоны/, 4,39-4,27 /м. 4Н, 2 CH₂/, 3,75 /м. 2Н, 2 СН/, 2,26 /c. 6H, 2 CH₃/, и 1,35 /д. 6Н, I 5,9 Гц, 2 СН₃/. MC /DC1/ м/e 625 /M+1/.

Анализ для C₃₂H₂₈N₆O₈2CH₃SO₃H H₂O /MB 834,83/: Вычислено, C 48,92; H 4,59; N 10,07; S 7,68 Найдено, C 48,97, 48,84; H 4,43, 4,46; N 10,16, 10,13; S 7,83, 7,84 ПРИМЕР 28. /S,S/-2,2'-[1,2-этандиилбис-[имино(2метил-2,1 -этандиил)]-бис[1H-бенз/de/изохинолин-1,3/2H/-дион]метансульфонат /1:2/ /XXa/ C помощью замены 3-нитро-1,8-нафталевого ангидрида 1,8-нафталевым ангидридом может быть получено соединение XXa.

Белое твердое вещество /78% выход/; т.пл. 289-290^oC /разл./ ¹H-ЯМР-/DMCO-d₆/ d 8,96 /широкий, 2Н, NH⁺₂/, 8,80 /широкий, 2Н, NH⁺₂/, 8,57-8,53 /м. 8Н, ароматические протоны/, 7,94 /т. 4Н, I 7,7 Гц, ароматические протоны, 4,45-4,23 /м. 4Н, 2 СН₂/, 3,81 /м. 2Н, 2 СН/, 2,28 /c. 6H, 2 CH₃/ и 1,36 /д. 6Н, I 6,6 Гц, 2 CH₃/. MC /DC1/ м/e 535 /M+1/, свободное основание/.

Анализ для С₃₂H₃₀N₄O₄2CH₃SO₃H H₂O /MB 744,83/: Вычислено, C 54,83; H 5,41; N 7,42; S 8,61 Найдено, C 55,18, 55,29; H 5,17, 5,24; N 7,42, 7,47; S 8,66, 8,64.

ПРИМЕР 29. /R,R/-2,2'-[1,2-этандиилбис[имино(2-метил)-2,1-этандиил)] -бис[5-нитро-1Н-бенз/de/изохинолин-1,3/2H/-дион]-метансульфонат /1:2/ /XIXb/ Светло-коричневое твердое вещество /34,5% выход/; т.пл. 248-251^oC /разл. /.

¹H-ЯМР /DMCO-d₆/ 9,54 /д. 2Н, I 2,2 Гц, ароматические протоны/, 8,99 /д. 2Н, I 1,9 Гц, ароматические протоны/, 8,83 /д. 2Н, I 8,0 Гц, ароматические протоны/, 8,72 /д. 2Н, I 6,9 Гц, ароматические протоны/, 8,10 /т. 2Н, I 7,9 Гц, ароматические протоны/, 4,33-4,18 /м. 4Н, 2 СН₂/, 3,46 /м. 6Н/, 2,28 /c. 6H, 2 CH₃/ и 1,28 /c. 6H, 2 CH₃/. MC /C1/ м/e 625 /M+1/.

Анализ для C₃₂H₂₈N₆O₈2CH₃SO₃H /MB 716,81/ Вычислено, C 50,00; H 4,44; N 10,09; S 7,85 Найдено, C 50,16; H 4,34; N 10,19; S 7,62 ПРИМЕР 30. /Рацемический + Мезо/-2,2'-[1,2-этандиилбис[имино[-2-метил-2,1-этандиил] -бис[5-нитро-1Н -бенз/de/изохинолин-1,3/2H/-/дион]-метансульфонат /1:2/ /XIXc/ Желтое твердое вещество /18,9% выход/; т.пл. 278-281^oC /разл./ ¹H-ЯМР /DMCO-d₆/ d 9,58 /д. 2Н, ароматические протоны/, 9,0 /д. 2Н, ароматические протоны/, 8,85 /д. 2Н, ароматические протоны/, 4,50-4,25 /м. 4Н, 2 CH₂/, 3,80 /м. 2Н, 2 СН/, 3,40 /м. 4Н, 2 СН₂/, 2,30 /c. 6H, 2 CH₃/ и 1,38 /д. 6Н, 2 СН₃/. MC /C1/ м/e 625 /M+1/ Анализ для C₃₂H₂₈N₆O₈2CH₃SO₃H /MB 816,81/: Вычислено, C 50,00; H 4,44; N 10,09; S 7,85 Найдено, C 49,62; H 4,42; N 10,07; S 7,80 ПРИМЕР 31. /R,R/-2,2' -[1,2-этандиилбис[имино[2-метил-2,1-этандиил]-бис[6-нитро-1Н -бенз/de/изозинолин-1,3/2H/-дион]метансульфонат /1:2/ /XXVIIIb/ Желтое твердое вещество /17,0% выход/; т.пл. 230-233^oC /разл./ ¹H-ЯМР /DMCO-d₆/ d 9,03 /широкий, 2Н, NH⁺₂/, 8,93 /широкий, 2Н, NH⁺₂/ 8,76 /д. 2Н, I 8,8 Гц, ароматические протоны/, 8,68-8,57 /м. 6Н, ароматические протоны/, 8,13 /т. 2Н, I 7,7 Гц, ароматические протоны/, 4,37-4,26 /м. 4Н, 2 CH₂/, 3,77 /м. 2Н, 2 СН/, 3,36 /c. 4H, 2 CH₂/, 2,25 /c, 5,4 H, 1,8 CH₃SO₃H/ и 1,35 /д. 6Н, 2СН₃/. MC /C1/ м/e 625 /M+1/.

Анализ для C₃₂H₂₈N₆O₈1,8 CH₃SO₃H /MB 797,59/ Вычислено, C 50,90; H 4,45; N 10,54; S 7,24 Найдено, C 50,90, 50,56; H 4,36; N 10,22, 10,18; S 6,96, 6,96.

ПРИМЕР 32. /R, R/-2,2'-[1,2-этандиилбис[имино/2метил-2,1-этандиил)]-бис[5,8-динитро -1Н-бенз/de/изохинолин-1,3/2H/-дион] метансульфонат /1: 2/ /XXIXb/ Светло-коричневое твердое вещество /21,1% выход/; т.пл. 227-230^oC /разл. / ¹H-ЯМР /DMCO-d₆/ 9,84 /д. 4Н, I 1,5 Гц, 4 ароматических протона/, 9,13 /д. 4Н, I 1,4 Гц, ароматические протоны/, 9,02 /широкий, 2H, NH⁺₂/, 8,86 /широкий, 2Н, NH⁺₂/, 4,50-4,25 /м. 4Н, 2 СН₂/, 3,81 /м. 2Н, 2 СН/, 3,34 /широкий, 4Н, 2 СH₂/, 2,24 /c. 6H, 2 CH₃/ и 1,39 /д. 6Н, I 4,7 Гц, 2 CH₃/. Анализ для C₃₂H₂₈N₆O₁₂2CH₃SO₃H /MB 906,80/: Вычислено, C 45,03; H 3,75; N 12,36; S 7,06 Найдено, C 44,75; H 3,69; N 12,21; S 6,87 ПРИМЕР 42. /Рацемический/-2,2'-[1,2-этандиилбис[имино[-2-метил-2,1-этандиил] -бис[5 -нитро-1Н-бенз/de/изохинолин-2-1,3/2H/-дион] метансульфонат /1:2/ /XXXIV/ Данное соединение получалось с помощью смешения равных количеств соответствующих /S,S/ и /R,R/ этантиомеров /т.е. XIXa, и XIXb, соответственно/. Светло-коричневое твердое вещество /90% выход/; т.пл. 254-255^oC /разл./. ЯМР-спектр идентичен с данными спектра соединения XIXa и XIXb.

Анализ для C₃₂H₂₈N₆O₈2CH₃SO₃H /MB 816,81/ Вычислено, C 50,00; H 4,44; N 10,29; S 7,85 Найдено, C 49,69; H 4,21; N 10,19; S 7,66 ПРИМЕР 43. S, S, S/-5-нитро-2-[2-[[2-[[2 -(5-нитро-1,3-диоксо-1Н-бенз/de/изохинолин-2/3H/-ил)-1-метилэтил] амино] -1-метилэтил]амино]-1-метилэтил]-1H-бенз/de/изохинолин-1,3/2H/ -дион]метансульфонат /1:2/ /XXXX/ Раздел A: /XXXV/ Метил N-[N-[N-[/1,1-диметилэтокси)карбонил]-L-аланил] -L-аланил]-L-аланин.

К ТГФ раствору /50 мл/ /т-ВОС/-Ala-Ala-OH /5,0 г, 19,2 ммоля/ и N-метилморфолина /3,88 г, 38,4 ммоля/ добавлялся изобутилхлорформиат /2,62 г, 19,2 г ммоля/ по каплям для поддержания температуры между 10-15^oC. После того как добавление завершалось, реакционная смесь перемешивалась еще в течение 15 минут. К смеси добавлялось 2,68 г /19,2 ммоля/ хлоргидрата метилового эфира /S/ аланина". После перемешивания при комнатной температуре на протяжении ночи с помощью фильтрования удалялся хлоргидрат N-метилморфолина, а растворитель в фильтрате выпаривался. Оставшаяся жидкость разбавлялась метиленхлоридом /350 мл/, промывалась 5% бикарбонатом натрия /2 x 150 мл/, водой /1 x 150 мл/, 0,1 норм. HCl /1 x 150 мл/, водой /1 x 150 мл/, cолевым раствором /1 x 100 мл/, сушилась над безводным сульфатом магния, фильтровалась и выпаривалась, давая 4,32 г белого твердого вещества XXXV /65,1% выход/; т.пл. 168-172^oC.

¹H-ЯМР /CDCl₃/ 6,70 /м. 2Н, 2 NH/, 4,98 /широкий, 1Н/, 4,48 /м. 2Н, 2 СН/, 3,70 /c. 3H, CH₃/, 1,38 /c. 18H, 6 CH₃/, и 1,30 /м. 6Н, 2 СH₃/. MC /C1/ м/e 346 /M+1/. ИК /KBг/ 3391, 3319, 3275 /NH/, 1742, 1710, 1674, 1638 /C=O/ см^-1. ()²_D⁵ 50,33^o /C 0,600, CH₂Cl₂/.

Раздел B: /XXXVI/ N-[(1,1-диметилэтокси)карбонил]-L-аланил-L-аланил-L-аланинамид.

К 80 мл метанола, насыщенного аммиаком, добавлялось 2,75 г /7,96 ммоля/ соединения XXXV. Реакционная смесь охлаждалась с помощью ледяной бани, а затем подвергалось дополнительно реакции с аммиаком в течение 10 минут, реакционная смесь перемешивалась при температуре окружающей среды на протяжении ночи. Растворитель в растворитель выпаривался, давая желтое твердое вещество, XXXVI /2,45 г, 93% выход/; т.пл. 202-208^oC.

¹H-ЯМР /DMCO-d₆/ 7,83-7,95 /м. 2Н, 2 NH/, 7,25 /широкий, 1Н, NH/, 7,01 /широкий, 2Н, NH₂/, 4,2 /м. 2Н, 2 СН/, 3,83 /м. 1Н, СН/, 1,38 /c. 9H. 3 CH₃/ и 1,20 /м. 9Н, 3 CH₃/. MC /DC1/ м/e 331 /M+1/. ()²_D⁵ 66,00^o /c 0,0600, DMCO/.

Раздел С: /XXXVII/ L-аланил-L-аланил-L-аланинамид хлоргидрат.

Смесь соединения XXXVI /1,95 г, 5,9 ммоля/ и 4,4 М HCl /2,68 мл/ в диоксане добавлялась в 40 мл диоксана при 0^oC в течение 2 ч, а затем подогревалась до комнатной температуры на протяжении ночи. Растворитель в смеси выпаривался досуха, давая 1,77 г соединения XXXVII в виде не совсем белого твердого вещества; т.пл. 237-240^oC /разл./ ¹H-ЯМР /D₂O/ 4,2-4,05 /м. 2Н, 2 CH/, 2,95-3,85 /м. 1Н, СН/, и 1,25 /м. 9Н, 3 СН₃/. MC /C1/ м/e 231 /M+1/. ИК /KBг/ 3438, 3294 /NH₂/, 1676, 1639 /C= O/ см^-1. ()²_D⁵ 19,96^o /C 0,606, метанол/.

Раздел D: /XXXVIII/ /S, /S, S/-N¹-/2-амино-1-метилэтил/-N²-/2-амино-пропил/ -1,2-пропандиамин тетрахлоргидрат.

К смеси XXXVII /1,70 г, 6,37 ммоля/ в 150 мл ТГФ добавлялось 58 мл 1 М комплекса BH₃ТГФ. Смесь нагревалась с обратным холодильником на протяжении ночи, превращаясь в прозрачный раствор. Раствор охлаждался на ледяной бане и гасился добавлением по каплям 50 мл метанола. Раствор нагревался с обратным холодильником на протяжении ночи. Растворители в реакционном растворе удалялись с помощью вращательного испарения. К оставшейся жидкости добавлялся метанол /50 мл/ и жидкость снова выпаривалась для удаления триметилбората. Жидкость разбавлялась метанолом /25 мл/ с последующим добавлением 4,0 мл конц. HCl. После перемешивания в течение 2 ч реакционная масса растиралась с этиловым эфиром, фильтровалась, давая 1,10 г /51,7% выход/ cоединения XXXVIII в виде белого твердого вещества; т.пл. 277-278^oC /разл./. MC /DC1/ м/e 189 /M+1/. ИК /KBг 3436 /NH, NH₂/, cм^-1.

Раздел E: /XXXIX/ /S,S,S/-N¹-/2-амино-1-метилэтил/-N²-/2-амино-пропил/ -1,2-пропандиамин.

К свежеприготовленному раствору этилата натрия /0,32 г натрия и 20 мл этанола/ добавлялось 1,05 г /3,1 ммоля/ соединения XXXVIII. Смесь перемешивалась при комнатной температуре на протяжении ночи. Хлористый натрий удалялся с помощью фильтрования, и растворитель в фильтрате выпаривался. Оставшаяся жидкость очищалась с помощью перегонки Кугельрора /0,4 мм, 94-104^oC/, давая 0,41 г соединения XXXIX в виде светло-желтой жидкости /70,2% выход/.

¹H-ЯМР /CDCl₃/ 2,90 /м. 1Н, СН/, 2,80 /м. 2Н, 2 СН/, 2,53-2,30 /м. 6Н, 3 СН₂/, 1,58 /широкий, 6Н, NH₂ и 2 NH/ и 0,98 /м. 9Н, 3 CH₃/.

Раздел F: /XXXX/ /S,S,S/-5-нитро-2-[2-[[2-[[2-(5-нитро-1,3-диоксо-1Н-бенз/de/изохинолин -2(3Н)-ил)-1-метилэтил]амино]1-метил-этил]амино]-1-метилэтил]-1H-бенз /de/изохинолин-1,3/2H/-дион]метансульфонат /1:2/ Смесь 3-нитро-1,8-нафталевого ангидрида /1,06 г, 4,4 ммоля/ и соединения XXXIX /0,41 г, 2,2 ммоля/ в 25 мл этанола перемешивалась при комнатной температуре на протяжении ночи, а затем нагревалась до температуры дефлегмации в течение 1 и 1/4 ч. Растворитель в смеси выпаривался, и оставшийся темный осадок очищался c помощью хроматографии на колонке, давая 0,83 г свободного основания в виде светло-коричневого твердого вещества /59,1% выход/, которое затем превращалось в его метансульфонат, XXXX /0,65 г, 35,6% выход/; т.пл. 189-192^oC /сморщивается/.

¹H-ЯМР /CDCl₃/ d 9,28 /д. 1Н, I 1,9 Гц, ароматический протон/, 9,25 /д. 1Н, I 2,2 Гц, ароматический протон/, 9,15 /д. 1Н, I 2,2 Гц, ароматический протон/, 9,12 /д. 1Н, I 2,2 Гц, ароматический протон/, 8,81 /д. 1Н, I 7,3 Гц, ароматический протон/, 8,76 /д. 1Н, I 7,3 Гц, ароматический протон/, 8,46 /д. 1Н, I 8,1 Гц, ароматический протон/, 8,42 /д. 1Н, I 8,4 Гц, ароматический протон/, 7,98 /т. 1Н, I 7,7 Гц, ароматический протон/ 7,94 /т. 1Н, I 7,92 Гц, ароматический протон/, 5,76 /м. 1Н, СН/, 4,59 /м. 1Н/, 4,36 /м. 2Н/, 4,04 /м. 1Н/, 3,91 /м. 1Н/, 3,96 /м. 1Н/, 3,39 /м. 2Н/, 1,99 /c. 6H, 2 CH₃/ 1,64 /д. 3Н, I 7,0 Гц, СН₃/, 1,54 /д. 3Н, I 6,6 Гц, СН₃/ и 1,48 /д. 3Н, I 6,6 Гц, СН₃/. MC /ДСЙ/ м/e 639 /M+1/.

Анализ для C₃₃H₃₀N₆O₈2 CH₃SO₃H /MB 830,44/: Вычислено, C 50,60; H 4,61; N 10,12; S 7,72 Найдено, C 50,70; H 4,61; N 9,98; S 7,69.

В таблице 1 положение Х и Y указывается с использованием нумерации положения в соответствующем нафталевом ангидриде, а не нумерация для 1Н-бенз/de/изохинолин-1,3/2H/-диона.

В таблице 2 положение Х и Y показано с использованием нумерации положения в соответствующем нафталевом ангидриде, а не нумерация для 1Н бенз /de/изохинолин-1,3/2H/-диона.

Полезность. Активность по ингибированию роста in vitro.

Клетки L 1210 выдерживались в RPMI-1640 среде с добавкой 10% инактивированной теплом зародышевой бычьей сыворотки и 50 мл меркаптоэтанола /литр среды/ RPMI-L/. Клетки В16 выдерживались в RPMI-1640 среде с добавкой 15% инактивированной теплом зародышевой бычьей сыворотки и антибиотиков /RPMI-C/.

Экспонентно растущие белковолейкозные клетки L 1210 /1 x 10³ клеток/ в 0,1 мл среды высевались в 0 день на пластину микротитратора с 96 ячейками. В 1 день количество 0,1 мкл среды, содержащей градиентные концентрации испытываемых аналогов, добавлялось к