Бициклические производные карбоновой кислоты, или их геометрические или оптические изомеры, или их фармацевтически приемлемые соли с основаниями, способ их получения и фармацевтическая композиция, обладающая свойствами антагониста лейкотриена в*004

Бициклические производные карбоновой кислоты, или их геометрические или оптические изомеры, или их фармацевтически приемлемые соли с основаниями, способ их получения и фармацевтическая композиция, обладающая свойствами антагониста лейкотриена в*004

Реферат

 

Использование: в медицине в качестве антагониста лейкотриена В4. Сущность изобретения: продукт - бициклические производные карбоновой кислоты ф-лы I где Х это -О- или -СН₂; Y это -O-, -CH₂-CH₂-, -C C- или -ОСН₂C₆H₄-; Z это -СН₂-CH₂-, -СНСН-; R¹ - С₁C₇ алкил, или фенил-С₁-C₇ алкил, А это -В или -О-В-; В это моно - или бициклический ароматический или гетеароматический остаток, выбранный из группы нафталенил, фенил, тиенил, фурил, бензофуранил или хинолил, замещенный группой -СОR², -(O)_t-(W)_s-COR² или -(СНСН)_рСOR², и который может также содержать до 3 дополнительных заместителей, выбранных независимо из группы, состоящей из атома галогена, С₁-C₇ алканоила, -(Q)_k-(W)_s'-E, -(Q)_k-(W)_s"C₆H₄-(W)_s"'-E; при условии, что не более чем один из указанных заместителей это -(Q)_k-(W)_s'-E или -(Q)_k-(W)_s"C₆H₄-(W)_s"'-E; E это COR² или R²; W это -СOR³R⁴; Q это -O- или карбонил; R² это гидроксил, С₁-C₇ алкокси-группа или NR³R⁴; R³ и R⁴, каждый раз, это независимо атом водорода или С₁-C₇ алкил; f,h,k,m и t это независимо 0 и 1; n, s и s' это независимо целое число от 1 до 12; p это целое число от 1 до 2; s'' и s''' это независимо целое число от 0 до 12; и С₆Н₄ это 1,2-, 1,3- или 1,4-фениловые остатки, их геометрические или оптические изомеры и, когда R² это гидрокси, фармацевтически приемлемые их соли с основаниями. Реагент 1: соединения ф-лы II где Х - О или СН₂; R¹-C₁-C₇ алкил, фенил С₁-C₇ алкил, m=0 или 1. Реагент 2: соединение ф-лы III: L-(CH₂)_n-(Z)_h-A, где Z, n и h имеют вышеуказанные значения, А - это - В или -О-В, где В имеют вышеуказанные значения, L - отщепляемая группа, такая как атом галогена, низшая алкилсульфонилоксигруппа, арилсульфонилокси группа, такая как п-толуолсульфонилоксигруппа, и полученное соединение при необходимости омыляют, для получения соединения формулы I, где R² - гидроксигруппа, и последний, при желании, подвергают взаимодействию с амином ф-лы HNR²R⁴, где R³ и R⁴ имеют вышеуказанные значения, или переводят его в фармацевтически приемлемую соль. Эти соединения и способ их получения являются мощными антагонистами лейкотриена В4 и, следовательно, могут быть использованы для лечения воспалительных заболей, таких как псориаз, воспалительные заболевания кишечника, астма, аллергия, артрит, дерматит, подагра, легочные заболевания, ишемические/реперфузионные нарушения и вызванные травмами воспаления, такие как повреждение спинного мозга. 8 табл.

Данное изобретение относится к новым соединениям общей формулы где Х это -О- или -СH₂-; Y это -O-, -CH₂-CH₂-, -C C- или -ОСH₂C₆H₄; Z это -СH₂-CH₂-, -СН=СН-; R¹ С₁-C₇-алкил или фенил-С₁-C₇-алкил; А это -В или -О-В; В это моно- или бициклический ароматический или гетероароматический остаток нафталенил, фенил, тиенил, фурил, бензофуранил, хинолинил, замещенный группой -СOR² или -(О)_t-(W)_s-COR², или -(СН=СН)_pCOR², и который может также содержать до 3 дополнительных заместителей, выбранных независимо из группы, состоящей из галогена, С₁-C₇-алканоила, -(Q)_k(W)_s'-E или -(Q)_k-(W)_s''-C₆H₄-(W)_s'''-E, при условии, что не более чем один из указанных заместителей это -(Q)_k-(W)_s'-E или -(Q)_k-(W)_s''- C₆H₄(W)_s'''-E; E это -COR² или R²; W это -СOR³R⁴; Q это -О- или карбонил; R² это гидроксил, С₁-C₇-алкоксигруппа или NR³R⁴; R³ и R⁴ это независимо водород или С₁-C₇-алкил; f, h, k, m и t это независимо 0 или 1; n, s и s' это независимо целое число от 1 до 12; p это целое число от 1 до 2; s'' и s''' это независимо целое число от 0 до 12; и C₆H₄ это 1,2-, 1,3- или 1,4-фениленовые остатки, их геометрические или оптические изомеры, и когда R² гидрокси, фармацевтически приемлемые их соли с основаниями.

Эти соединения являются мощными антагонистами лейкотриена В₄ и, следовательно, могут использоваться при лечении воспалительных заболеваний, таких как псориаз, воспалительные заболевания кишечника, астма, аллергия, артрит, дерматит, легочные заболевания, ишемические/перфузионные расстройства и вызванные ими воспалительные процессы, такие как повреждения спинного мозга.

Предпочтительными соединениями формулы I являются соединения, где Е - СОR².

Предпочтительной группой соединений формулы I являются также соединения, где Y это -О-, R¹-, C₁-C₇ алкил, n 3-8, а m и f 1.

Особенно предпочтительны соединения формулы I, где Y это -O-, R¹ это C₁-C₇-алкил, h это 0, m и f 1, n 3-8, а А это -О-В, и В это моно- или бициклический ароматический остаток, выбранный из вышеуказанной группы. Еще более предпочтительной группой соединений формулы I являются соединения, где Y это -О-, R¹ это С₁-C₇-алкил или фенил-С₁-C₇-алкил, h 0, m и f 1, n 3-8, и А это В, где В моноциклический ароматический остаток, предпочтительно фенил, замещенный -(O)_t-(W)_s-COR² и (Q)_k(W)_s'-E, где Е - это СОR², Q это -O-, R² гидроксил, t 0, s 2, k 1 и s' от 1 до 12.

Наиболее предпочтительной группой из вышеуказанной группы соединений формулы I являются также соединения, где Х и Y это -O-, R¹ это С₁-C₇-алкил, h 0, m и f 1, n 3-8 и А это -B, где В это моноциклический ароматический остаток, предпочтительно фенил, замещенный -(О)_t-(W)_s-COR² и -(Q)_k-(W)_s'-E, где Е это -СОR², Q это -О-, R² это гидрокси, t 0, s 2, k 1, и s' от 1 до 6.

Наиболее предпочтительными примерами по данному изобретению являются: 2-[(5-карбоксипентил)окси] -6-[6-[(3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил-2Н -1-бензопиран-7-ил)-окси]гексил]бензопропионовая кислота; 2-(4-карбоксибутокси)-6-[6-[(3,4-дигидро4-оксо-8-пропил-2Н-1-бензопиран-7-ил)окси]гексил] бензолпропионовая кислота; 5-(3-карбоксипропокси)-2-[6-[(3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил-2Н-1 -1-бензопиран-7-ил)окси]гексил]бензолпропионовая кислота; 6-(4-карбоксибутокси)-2-[5-[(3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил-2Н -1-бензопиран-7-ил)окси]пентилокси]бензолпропионовая кислота; 2-[(5-карбоксипентил)окси] -6-[6-[(3,4-дигидро-4-оксо-8 -(3-фенилпропил)-2Н-1-бензопиран-7-ил)окси]гексил]бензолпропионовая кислота; (Е) -3-[5-(3-карбоксипропокси)-2-[6-[(3,4-дигидро-4-оксо-8 -пропил-2Н-1-бензопиран-7-ил)окси]гексил]фенил]-2-пропеновая кислота; 2-[(4-карбокси-4-метилпентил)окси] -6-[6-[(3,4-дигидро-4-оксо8-пропил-2Н-1-бензопиран-7-ил)окси]гексил]бензолпропионовая кислота; 3-(2-карбоксиэтил)-4-[5-[(3,4-дигидро -4-оксо-8-пропил-2Н-1- бензопиран-7-ил)окси]пентилокси]бензолвалериановая кислота; 2-(2-карбоксиэтил)-3-[6-[3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил-2Н-1- бензопиран-7-ил)окси]гексил]бензолкапроновая кислота; 2-[6-[3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил-2Н-1-бензопиран-7-ил) окси] гексил]-6-[(5-гидроксипентил)окси]бензолпропионовая кислота; [(5-карбоксипентил)окси] -6-[6-[(5,6,7,8-тетрагидро-5-оксо -1-пропил-2-нафталинил)окси]гексил]бензолпропионовая кислота; 5-[(3-карбоксифенил)карбонил] -2-[5-[(3,4-дигидро-4-оксо -8-пропил-2Н-1-бензопиран-7-ил)окси]пентилокси]бензолпропионовая кислота; 5-[(3-карбоксифенил)карбонил] -2-[6-[(3,4-дигидро-4-оксо-8- -пропил-2Н-1-бензoпиран-7-ил)окси]гексил]бензолпропионовая кислота; 5-[(3-карбоксифенил)карбонил] -2-[6-[(3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил -2Н-1-бензопиран-7-ил)окси]гексилокси]бензолпропионовая кислота; 5-(3-карбоксипропокси)-2-[5-[(3,4-дигидро-4-оксо-8- пропил-2Н-1-бензопиран-7-ил)окси]пентилокси]бензолпропионовая кислота; 5-(4-карбоксибутокси)-2-[5-[(3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил-2Н-1-бензопира- н-7-ил)окси]пентилокси]бензолпропионовой кислоты полугидрат; 5-[(3-карбоксифенил)карбонил] -2-[7-[3,4-дигидро-4-оксо-8- пропил-2Н-1-бензопиран-7-ил)окси]гептилокси]бензолпропионовая кислота; 5-[(3-карбоксифенил)карбонил]-2-[8-[(3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил2Н-1-бе- нзопиран-7-ил)окси]бензолпропионовая кислота; 5-[(4-карбоксифенил)карбонил] -2-[5-[(3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил -2Н-1-бензoпиран-7-ил)окси]пентилокси]бензолпропионовая кислота; 3-(2-карбоксиметил)-4-[5-[(3,4-дигидро-4-оксо -8-пропил-2Н-1-бензопиран-7-ил)окси]пентилокси]--оксобензолмасляная кислота; 5-[2-(2-карбоксифенил)-1-оксоэтил] -2-[5-[(3,4-дигидро -4-оксо-8-пропил-2Н-1-бензопиран-7-ил)окси]пентилокси]бензолпропионовая кислота; 6-(карбоксиметокси)-2-[5-[(3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил-2Н-1- бензопиран-7-ил)оси]пентилокси]-1-нафталинпропионовая кислота; 2-[[3,4-дигидро-4-оксо-8-(3-фенилпропил)-2Н-1-бензопиран-7- ил]окси]пентил]окси]бензолпропионовая кислота; и 2-[6-[(3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил-2Н-1-бензопиран -7-ил)окси] -гексил] бензолпропионовая кислота.

В соответствии с данным изобретением соединения формулы I, где Y это -О-, f=1, R² в значении А С₁-C₇-алкоксигруппа, а остальные значения радикалов, как указано выше, можно получить взаимодействием соединения формулы II где, Х, R¹ и m как указано выше, с соединением общей формулы L (CH₂)_n (Z)_h-A' III где Z, h и n как описано выше, А' это B' или -O-B', где B' это моно- или бициклический ароматический или гетероароматический остаток - нафталенил, фенил, тиенил, фурил, бензофуранил, хинолинил, замещенный группой -СОR^2', -(O)_t(W)_sCOR^2' или -(СН=CH)_pСОR^2', и который может также содержать до трех дополнительных заместителей, независимо выбранных из группы, состоящей из галогена, С₁-C₇-алканоила, -(Q)_k-(W)_s'-E' или -(Q)_k-(W)_s"-C₆H₄-(W)_s'''-E', при условии, что не более чем один из указанных заместителей это (Q_k-(W)_s'-E' или -(Q)k-(W)_s"-C₆H₄-(W)_s'''-E', где Е' это -СOR^2' или R^2', и R^2' это С₁-C₇-алкокси, а Q, W, C₆H₄, k, p, s, s', s", s''' и t как описано выше; а L это отщепляемая группа, такая, как атом галогена или низшая алкилсульфонилоксигруппа, такая как метилсульфонилокси или трифторметилсульфонилоксигруппа, или арилсульфонилоксигруппа, такая как паратолуолсульфонилоксигруппа.

При необходимости полученные соединения подвергают омылению для получения соединений, где R² в значении радикала А гидроксигруппа; последние при желании подвергают взаимодействию с амином общей формулы НNR³R⁴ или переводят в фармацевтически приемлемую соль.

Реакцию осуществляют по следующей схеме: Реакцию 1 соединения формулы II, которое представляет собой известное соединение, полученное известными методами или по описанной в описании методике, с соединением формулы III, которое также является известным соединением и получено либо известным методом, либо по описанной в описании методике, проводят в присутствии основания, например, карбоната щелочного металла, как карбонат натрия или калия при температуре в интервале от примерно 25^oC до примерно 110^oC, в полярном апротонном растворителе, как ацетонитрил, N,N-диметилформамид, 2-бутанон, диметилсульфоксид.

Можно также использовать методику патента США 4931574. В этом случае соединения формул II и III вводят в реакцию в присутствии карбоната щелочного металла, предпочтительно карбоната калия, и катализатора переноса фаз, предпочтительно трис[2-(2-метоксиэтокси)этил] амина (ТDA-1), в ароматическом углеводородном растворителе, предпочтительно толуоле, при температуре в диапазоне от 80 до 110^oC.

Полученное соединение Ia можно выделить традиционными методами, такими как хроматография или перекристаллизация, и можно превратить омылением, используя гидроксид щелочного металла, такой как гидроксид лития, натрия или калия, в смеси растворителей воды и смешивающегося с водой растворителя, такого как метанол, этанол или тетрагидрофуран, при температуре в диапазоне от примерно 25 до примерно 60^oС, в соответствующую кислоту Ib. Соединения формулы Ib можно очистить традиционными методами, такими как перекристаллизация, хроматография.

По схеме реакции 2 кислоту формулы Io превращают в соответствующий амид формулы Ip по реакции с амином R³R⁴NH. Эту реакцию можно проводить по любому из стандартных методов получения амидов из кислот. К ним относятся обработка кислоты 1,1'-карбонилдиимидазолом и амином или действие на кислоту основания, карбодиимида и аминa. Понятно, что, если в исходной кислоте присутствует более одного карбоксильного остатка, то все такие группы будут превращаться в соответствующие амидные связи. Предпочтительно осуществлять реакцию амидирования путем обработки кислоты формулы Io 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлоридом, 1-гидроксибензотриазолом, триэтиламином и амином R³R⁴NH в растворе в дихлорметане при комнатной температуре. Амид формулы Ip выделяют хроматографией или перекристаллизацией.

Изобретение также относится к солям соединений формулы I, если они содержат кислотную функциональную группу, которая участвует в образовании солей с основаниями. Соли соединений формулы I, которые содержат карбоксильную группу (R²-OH), получают по реакции с основанием, содержащем нетоксичный, фармакологически приемлемый катион. Можно использовать любое основание, которое будет образовывать соль с карбоновой кислотой и фармакологические свойства которого не будут вызывать неблагоприятного физиологического эффекта.

К таким образованиям относятся, например, гидроксиды щелочных или щелочно-земельных металлов, карбонаты и т.п. например, гидроксид кальция, гидроксид натрия, карбонат натрия, карбонат калия, а также аммиак, первичные, вторичные и третичные амины, такие как моноалкиламины, диалкиламины, триалкиламины, например, метиламин, диэтиламин, триэтиламин и т.п. азотсодержащие гетероциклические амины, например пиперидин и т.п.

Полезные свойства соединений формулы I в качестве антагонистов лейкотриена B₄ можно продемонстрировать следующим образом.

Методика испытаний.

Испытания на связывание рецептора LTB₄.

Испытания на связывание проводят в микротитровальных ячейках. Выделенные нейтрофилы человека в растворе соли Грея выдерживают на льду в течение 45 минут с 0,5М ³Н-LTB₄ в присутствии испытываемых соединений или без них. Испытания заканчивают добавлением 12 мл ледяного 50 мМ Трис (pН 7,4), после чего быстро отфильтровывают под вакуумом через фильтры GF/C. Радиоактивность определяют подсчетом сцинтилляций. Неспецифическое связывание определяют как связывание, незамещенное 100-кратным избытком немеченого LTB₄. Специфическое связывание определяют как разность между общим связыванием и неспецифическим связыванием. Нелинейный анализ данных по связыванию проводят с помощью LIGAND (Munson and Rodbard, 1980). Величины К (константа ингибирования) определяют по соотношению Cheng-Prusoff (Cheng and Prusoff, 1973).

Полученные результаты приведены в таблице 1 с указанием ингибирования связывания ³H-LTB₄.

Выделение интактных нейтрофилов.

Нейтрофилы человека готовят из крови, обработанной лимонной кислотой или гепарином. Кровь разбавляют 1: 1 сбалансированным солевым раствором Ханка (НBSS), не содержащим кальция и магния, и вносят в 10 мл среды для отделения лимфоцитов (Organon Teknika), после чего центрифугируют при 500 х г в течение 30 минут при комнатной температуре. Супернатант удаляют для получения лепешки из красных кровяных телец. Добавляют НBSS, не содержащий кальций и магний, до объема 25 мл. Затем добавляют 25 мл 6% декстрана в 0,85% NaCl. Пробы перемешивают и выдерживают в течение 20 минут пари комнатной температуре. Удаляют супернатант и центрифугируют при 500 х г в течение 5 мин при 4^oС. Лепешки повторно суспендируют в 20 мл 0,2% физиологического раствора в течение 20 с, после чего добавляют 20 мл 1,6% физиологического раствора. Образцы центрифугируют при 500 х г в течение 5 мин при 4^oС. Лизис повторяют и клетки (90-95% нейтрофилов) повторно суспендируют в концентрации 2х10⁶ клеток/мл в солевом растворе Гея.

Испытания на выделение кальция.

Изменения во внутриклеточной концентрации кальция под действием LTB₄ измеряли с помощью нейтрофилов человека, меченных Fura2. Клетки в концентрации 2-5 х 10⁶ метят 5 мкМ Fura2 в течение 30 мин в сбалансированном солевом растворе Ханка без кальция и магния. Клетки промывают и повторно суспендируют до конечной концентрации 1-2 х 10⁷ клеток/мл в растворе Гея. Выделение кальция инициируют добавлением 2,4 нM LTB₄. Испытываемые соединения в соответствующих концентрациях добавляют к клеткам непосредственно перед добавлением LTB₄. Величины IC₅₀ определяют как концентрацию соединения, необходимую до 50% подавления выделения кальция под действием LTB₄. Измеряют флуоресценцию с помощью спектрофлуориметра фирмы Perkin-Elmer модели LS-5В при фиксированной температуре 37^oС. Концентрацию кальция определяют, используя относительный метод (отношение флуоресценции клеток к флуоресценции среды).

При испытании соединений, являющихся примерами соединений формулы I по данному изобретению, получают результаты, приведенные в таблице 1 и 2, которые выражают подавление выделения кальция в нейтрофилах человека, вызываемое LTB₄.

Вызванное LTB₄ воспаление кожи.

Воспаление кожи вызывают у безволосых морских свинок внутрикожной инъекцией 50 мкл раствора соли Гея/10% ДМСО, содержащего 120 нг LTB₄. Инъекции осуществляют вдоль кожи спинной части животных. Соединения вводят через различные промежутки времени путем соинъекции, внутривенно или перорально. Испытываемые животные умерщвляют через 4-6 часов после инъекции LTB₄ и из мест инъекций готовят однородные срезы кожи. Срезы гомогенизируют в 0,5% бромиде гексадецилтриметиламмония в течение 1 минуты и центрифугируют в течение 20 минут при 14000 х г. Накопление лейкоцитов измеряют испытанием на активность миелопероксидазы в кинетических испытаниях с использованием диметоксибензидина в качестве субстрата. Нормальная кожа показывает титр миелопероксидазы 0,02-0,04 Ед/срез. Кожа, в которую сделана инъекция 120 нг LTB₄, дает титр миелопероксидазы 0,30-0,40 Ед/срез. Вызванное LTB₄ накопление лейкоцитов подтверждают гистологически на средах, окрашенных гематоксилин/эозином. Величины ID₅₀ определяют как дозу испытываемого соединения, необходимую для 50% подавления вызванного LTB₄ воспаления кожи.

5-[(3-Карбоксифенил)карбонил] -2-[5-[(3,4-дигидро-4-оксо-8 -пропил-2Н-1-бензопиран-7-ил)окси] пентилокси]бензолпропионовая кислота (пример 20) показывает величину ID₅₀, равную 100 нг, при совместной инъекции с LTB₄, внутривенное введение 6 мг/кг во время внутридермальной инъекции LTB₄ и пероральное введение 30 мг/кг.

5-(3-Карбоксипропокси)-2-[6-[(3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил-2Н-1-бензопир- ан-7-ил)окси]гексил]пропионовая кислота (пример 54) дает величину ID₅₀ 10 нг при совместной инъекции с LTB₄ и введении 5 мг/кг перорально.

3-(2-Карбоксиэтил)-4-[5-[(3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил-2Н-1-бензопиран -7-ил)окси] пентилокси] ----оксобензолвалериановая кислота (пример 87) дает величину ID₅₀ 20 нг при совместной инъекции.

6-(4-Карбоксибутокси)-2-[5-[(3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил-2Н-1- бензопиран-7-ил)окси]пентилокси]бензолпропионовая кислота (примерно 63) дает величину ID₅₀ 35 нг при совместной инъекции.

5-[(3-Карбоксифенил)карбонил] -2-[6-[(3,4- дигидро-4-оксо-8-пропил-2Н-1-бензопиран-7-ил)окси] гексил] бензолпропионовая кислота (пример 99) дает величину ID₅₀ 20 нг при совместной инъекции.

Бронхоконстрикция у морских свинок (in vivo).

Самцам морских свинок (линия Хартли) весом от 300 до 500 г вводят внутрибрюшинно (для анестезии) уретан (2 г/кг) и вводят в яремную вену полиэтиленовую канюлю для введения лекарства. Давление внутри трахеи регистрируют с помощью канюли, введенной в трахею и присоединенной к датчику давления Goukd P23ID. После хирургического препарирования животных выдерживают некоторое время для стабилизации легочных функций. Испытываемые соединения вводят внутривенно за 5 минут до введения лейкотриена B₄, в соответствии со следующей методикой. Животных парализуют действием сукцинилхолина (1,2 мк/кг i. v.) и механически делают искусственное дыхание (респиратор для грызунов Harvard 40 вздохов в минуту и объем обмена воздуха 2,5 см³). Затем вводят внутривенно пропанолол (0,1 мг/кг) за 1 минуту до введения лейкотриена В₄. Затем животным вводят внутривенно дозу лейкотриена B₄ (1 мкг/кг), вызывающую промежуточную конструкцию.

Изменение (см H₂О) между исходной и пиковой величиной давления вентиляции усредняют для пяти контрольных животных и пяти обработанных лекарством животных. Процент ингибирования вычисляют по формуле: [(Контроль Лекарственная обработка)/Контроль] х 100 При испытании различных концентраций лекарств процент ингибирования при каждой концентрации наносят на график зависимости log концентрации (абсцисса) от процента ингибирования (ордината), а величину ID₅₀ определяют по линейному регрессионному анализу как дозу испытываемого соединения, обеспечивающую 50% подавление бронхоконстpикции, вызываемой LTB₄.

При испытании примеров соединений формулы I по данному изобретению получают следующие результаты (см. таблицу 3).

Уксусно-кислый колит.

Самцов крыс Wistar весом 175-225 г перед проведением оценки на колит предварительно обрабатывают испытываемым соединением при дозировке 10 мг/кг дважды в день в течение 3 дней (72 час). Колит вызывают через 2 дня (48 час) клизмой 2 мл 3,5% уксусной кислоты, через 10 секунд уксусную кислоту нейтрализуют 3 мл забуференного фосфатами физиологического раствора, pН 7,4. Через 3 дня (72 часа) животных убивают и определяют активность миелопероксидазы в соскребах слизистой, как было описано для имитации воспаления кожи. Титр миелопероксидазы представляют как Units/mg слизи.

Ниже представлены результаты, полученные в этих испытаниях.

Уксусная кислота 46,8+/-7,4, N 10 Kонтроль 6,8+/-0,9, N 10.

5-(3-(Kарбоксипропокси)-2-[6-[(3,4-дигидро -4-оксо-8-пропил-2Н-1-бензопиран-7-ил)окси]гексил] бензопропионовая кислота (пример 54) 19,5 +/- 3,9, N 10 (68% подавление).

Ссылки: Сheng, Y. and Prusoff, W.H. (1973) Relationship between the ingibition constant (K₁) and concentration of inhibitor which causes 50% inhibition (I₅₀) of an enzymatic reaction, Biochem. Pharmacol. 22, 3099-3108.

Munson, P. J. and Rodbard, D. (1980) LICAND: A versatile computerized abbroach for the characterization of bigand binding systems, Anal. Biochem. 107, 220-239.

При реализации изобретения доза соединения формулы I или его соли, которую требуется ввести, и частота введения будет зависеть от мощности и продолжительности действия конкретного вводимого соединения формулы I или его соли, а также от серьезности и природы состояния и возраста млекопитающего, которое требуется лечить, и от других причин. Пероральные дозы соединения формулы I или его соли, пригодные для использования при реализации изобретения, могут колебаться от 2 мг до примерно 2 г в день, предпочтительно от примерно 2 мг до примерно 1 г в день, либо в виде единичной дозы, либо в виде нескольких доз.

Нижеследующие примеры иллюстрируют изобретение.

Соединение формулы I или его соль, или композиция, содержащая терапевтически активное количество соединения формулы I, его энантиомер или рацемат, или соль можно вводить методами, которые хорошо известны. Соединение формулы I или его соль можно вводить либо по отдельности, либо вместе с другими фармацевтическими агентами, например, с антигистаминными агентами, ингибиторами медиаторов выделения, метилксантинами, бета-агонистами или антиастматическими стероидами, такими как преднизолон и преднизон, перорально, парентерально, ректально или в виде ингаляций, например, в виде аэрозоля, микропорошка или суспензий. Для перорального введения их можно вводить в виде таблеток, капсул, например, в виде смеси с тальком, крахмалом, лактозой или другим инертным ингредиентом, то есть с фармацевтически приемлемыми носителями, или в виде новых растворов, суспензий, эликсиров или водно-спиртовых растворов, например, в смеси с сахаром или другими подслащивающими агентами, отдушками, красителями, загустителями и другими традиционными фармацевтическими эксципиентами. Парентерально их можно вводить в виде растворов или суспензий, например, в виде водного раствора или раствора либо суспензии в арахисовом масле, используя эксципиенты и носители, традиционные для этого виде применения. Для введения в виде аэрозолей их можно растворять в подходящем фармацевтически приемлемом растворителе, например, в этиловом спирте или комбинации смешиваемых растворителей и смешивать с фармацевтически приемлемым пропеллентом. Такие аэрозольные композиции упаковывают для использования в герметичном контейнере под давлением, снабженном аэрозольным клапаном для вывода композиции. Предпочтителен аэрозольный клапан мерный клапан, то есть такой, который при активировании выделяет заданную эффективную дозу аэрозольной композиции.

Cледует понимать, что формула I, как она здесь используется, включает геометрические изомеры, когда Z CH CH-. Геометрические изомеры можно разделить на соответствующие Е- и Z-изомеры по известным методикам, примеры которых будут приведены ниже.

Кроме того, поскольку соединения формулы I по данному изобретению могут содержать асимметричный атом углерода, их обычно получают в виде рацемических смесей, а также в виде энантиомеров и диастереомеров. Разделение рацематов на оптически активные изомеры можно осуществить известными методами. Некоторые рацемические смеси можно осадить в виде эвтектик и разделить. Предпочтительно, однако, химическое разделение. По этой методике диастереомеры получают из рацемической смеси соединения формулы I с помощью оптически активного разделяющего агента. Образовавшиеся диастереомеры разделяют избирательной кристаллизацией или хроматографией и превращают в соответствующие оптические изомеры. Таким образом, изобретение охватывает рацематы соединений формулы I, а также их оптически активные изомеры (энантиомеры).

В нижеследующих примерах "обычная процедура" обработки включает три экстракции определенным растворителем. Органические экстракты объединяют, промывают водой и насыщенным раствором соли, высушивают над безводным сульфатом магния, отфильтровывают и концентрируют под давлением водяного насоса. Остаток высушивают до постоянного веса при 45^oС в высоком вакууме. Все реакции, за исключением гидрирования, проводят в инертной атмосфере азота или аргона. Все температуры даны в градусах Цельсия.

Пример 1. Получение 7-(фенилметокси)-8-пропил-4Н-бензопиран-4-она.

Смесь 3,09 г (10,88 ммолей) 1-[2-гидрокси-4-(фенилметокси)-3-пропилфенил] этанона, 1,55 г (14 ммолей) диметилформамид-диметилацеталя и 2,7 мл ксилола перемешивают и нагревают на масляной бане, нагретой до 120-130^oС, с одновременной отгонкой с помощью колонны Вигро в течение 2 часов. Затем температуру бани повышают до 150-160^oС и перемешивают реакционную смесь при этой температуре еще в течение 30 минут. Смесь охлаждают и концентрируют в условиях 60^oC (высокий вакуум). К вязкому красно-коричневому маслянистому остатку добавляют 2,48 г (13 ммолей) моногидрата пара-толуолсульфоновой кислоты и 25 мл этанола. Полученный раствор перемешивают и нагревают с дефлегмацией в течение 1,5 часов, затем охлаждают и разбавляют 100 мл воды. Обработка эфиром по обычной методике дает сырой продукт, который очищают пленочной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью гексан:эфир состава 1: 1. Получают 2,8 г (87,5%) 7-(дифенилметокси)-8-пропил-4Н-1-бензопиран-4-она в виде твердого вещества бежевого цвета. Образец для анализа получают в другом эксперименте перекристаллизацией из смеси этилацетат-гексан в виде бесцветного твердого вещества, т.пл. 87,5-89^oС.

Анализ для С₁₉H₁₈O₃.

Рассчитано, C 77,53; Н 6,16.

Найдено, С 77,34; Н 6,06.

Пример 2. Получение 2,3-дигидро-7-гидрокси-8-пропил-4Н-1-бензопиран-4-она.

Смесь 3,99 г (13,57 ммолей) 7-(фенилметокси)-8-пропил-4Н-1- бензопиран-4-она, 0,8 г 10% палладия на угле и 300 мл смеси 1:1 метанолэтилацетата перемешивают в атмосфере водорода. Процесс гидрирования контролируют с помощью ТСХ. Смесь фильтруют с отсосом через цеолитную подушку и промывают отфильтрованную лепешку этилацетатом. Концентрирование соединенных фильтратов и промывных растворов в вакууме дает 2,78 г твердого вещества бежевого цвета. Пленочная хроматография на силикагеле, элюирование смесью (1:1) гексан-эфир, дает 1,7 г (60,8%) 2,3-дигидро-7-гидрокси-8-пропил-4Н-1-бензопиран-4-она. Образец кристаллизуют из смеси гексан-этилацетат и получают бесцветное твердое вещество, т.пл. 126-129^oC.

Анализ для С₁₂H₁₄O₃.

Рассчитано, C 69,89; Н 6,84.

Найдено, С 69,69; Н 6,92.

Пример 3. Получение 2-[(5-бромпентил)окси] бензолпропионовой кислоты метилового эфира.

Смесь 3,6 г (20 ммоль) 2-гидроксибензолпропионовой кислоты метилового эфира, 22 мл (160 ммоль) 1,5-дибромпентана, 8,73 г (63,3 ммоль) безводного гранулированного карбоната калия и 145 мл ацетонитрила перемешивают и нагревают с дефлегмацией в течение 24 часов. Полученную суспензию охлаждают и разбавляют 300 мл эфира. Твердые продукты удаляют фильтрацией с отсасыванием и хорошо промывают фильтрованную лепешку эфиром. Фильтрат и промывные растворы соединяют и концентрируют в вакууме, что дает 38,59 г коричневого масла, которое хроматографируют на 200 г силикагеля, элюируя смесями гексан: эфир 49:1 и 19:1. Фракции, содержащие желаемый продукт, объединяют и концентрируют, получая 5,86 г масла, которое растворяют в 50 мл метанола, содержащего 0,2 г п-толуолсульфоновой кислоты моногидрата. Раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 17 часов и нагревают с дефлегмацией, после чего охлаждают и концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в эфире, промывают раствор насыщенным раствором бикарбоната натрия и обрабатывают обычным образом. Маслянистый остаток хроматографируют на 100 г силикагеля. В результате элюирования смесь (19:1) гексан-эфир получают 4,85 г (73,7%) 2-[(5-бромпентил)окси] бензолпропионовой кислоты метилового эфира в виде бесцветного масла.

Пример 4. Получение 2-[5-[(3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил-2Н-1-бензопиран-7-ил) окси] пентилокси]бензолпропионовой кислоты.

Смесь 0,43 г (2,1 ммоль) 2,3-дигидро-7-гидрокси-8-пропил-4Н-1-бензопиран-4-она, 0,66 г (2,0 ммоль) 2-[(5-бромпентил)окси]бензолпропионовой кислоты метилового эфира, 1,0 г (7,25 ммоль) безводного гранулированного карбоната калия, 8,4 мл безводного N,N-диметилформамида и 16,8 мл ацетона перемешивают и нагревают с дефлегмацией в течение 5 часов. Полученную суспензию отфильтровывают с отсасыванием и хорошо промывают твердые продукты ацетоном. Фильтрат и промывные растворы концентрируют в вакууме, а остаток растворяют в эфире и обрабатывают обычным образом, получая 0,9 г желтого масла. Этот материал очищают сначала пленочной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью гексан-эфир 1:1, а затем обычной хроматографией на 150 г силикагеля, элюируя смесью толуолэтилацетат (9:1), что дает 0,63 г (69,4%) 2-[5-[(3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил-2Н-1-бензопиран-7-ил) окси] пентилокси]бензолпропионовой кислоты метилового эфира в виде вязкого масла. Этот продукт растворяют в 15 мл тетрагидрофурана и добавляют 1,4 мл 3н. водного раствора гидроксида лития. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 60 часов, затем разбавляют водой и экстрагируют дважды эфиром (эфирные экстракты отбрасывают). Водные щелочные растворы подкисляют 3н. водной хлористоводородной кислотой и обрабатывают эфиром обычным образом, получив в результате вязкое масло, которое закристаллизовывается. Перекристаллизация из смеси гексан-этилацетат дает 0,32 г (52,4%) 2-[5-[(3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил-2Н-1-бензопиран -7-ил)окси]пентил-окси]бензолпропионовой кислоты в виде бесцветного твердого вещества, т.пл. 82-85^oС.

Анализ для С₂₀H₃₂O₆.

Рассчитано, С 70,89; Н 7,32.

Найдено, С 70,65; Н 7,28.

Пример 5. Получение 2-(5-гидрокси-1-пентинил)бензальдегида.

Аргон барботируют через перемешиваемую смесь 11,1 г (60 ммоль) 2-бромбензальдегида, 6,5 г (77 ммоль 4-пентил-1-ола, 450 мг безводного иодида меди (I) и добавляют 240 мл сухого триэтиламина и 840 мг дихлорбис(трифенилфосфин)палладия (II). Смесь нагревают до 90^oС и перемешивают при этой температуре в течение 3 часов, в результате чего образуется плотный осадок и появляется черное окрашивание. Реакционную смесь охлаждают и выливают в смесь льда и 3н. хлористоводородной кислоты. Экстракционную обработку дихлорметаном проводят по обычной методике, что дает 12,7 г красно-коричневого масла. Этот материал очищают пленочной хроматографией на силикагеле со смесью (2:1) гексан-этилацетат. Получают 5,4 г (48%) 2-(5-гидрокси-1-пентинил)бензальдегида в виде масла.

Пример 6. Получение 2-(5-гидроксипентил)бензолпропионовой кислоты метилового эфира.

Cмесь 2,4 г (12,7 ммоль) 2-(5-гидрокси-1-пентинил)бензальдегида, 5,0 г (15 ммоль) метил(трифенилфосфоранилиден)ацетата и 200 мл толуола перемешивают и нагревают с дефлегмацией в течение 4 часов, а затем выдерживают в течение ночи при комнатной температуре. Полученный раствор концентрируют в вакууме. Остаток (9,2 г) соединяют с 9,9 г неочищенного материала, полученного подобным образом в отдельном эксперименте, и подвергают пленочной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью (2:1) толуол-этилацетат. Получают 4,9 г бледно-желтого масла. Это вещество растворяют в 200 мл метанола и обрабатывают раствор 1 г 10% палладия на угле. Затем смесь перемешивают в атмосфере водорода при комнатной температуре в течение 5,5 часов, в результате чего был поглощен теоретический объем водорода. Катализатор удаляют фильтрацией с отсосом и концентрируют фильтрат в вакууме, получая 4,87 г (75,8%) 2-(5-гидроксипентил)-бензолпропионовой кислоты метилового эфира в виде бесцветного масла.

Пример 7. Получение 2-(5-йодопентил)бензолпропионовой кислоты метилового эфира.

Раствор 4,87 г (19,48 ммоль) 2-(5-гидроксипентил)бензолпропионовой кислоты метилового эфира из примера 6, 4,15 мл пиридина и 18 мл хлороформа перемешивают при охлаждении на ледяной бане и добавляют за один прием 5,07 г (26,6 ммоль) п-толуолсульфонилхлорида. Смесь перемешивают при 0-5^oС в течение 1 часа и затем выдерживают при этой температуре в течение ночи, после чего выливают в насыщенный раствор бикарбоната натрия. Обработка дихлорметаном обычным образом дает бесцветный маслянистый тозилат, который обрабатывают 4,5 г (30 ммоль) йодида натрия и 50 мл ацетона. Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов, выдерживают при 0-5^oС в течение ночи и, наконец, нагревают с дефлегмацией в течение 5 часов после добавления 100 мл ацетона. Смесь выливают в воду и обрабатывают эфиром по обычной методике (эфирный раствор дополнительно промывают водным раствором тиосульфата натрия) и получают желтое масло. Пленочная хроматография на силикагеле, элюирование смесью гексан-этилацетат состава 10:1 дает 5,75 г (82% ) 2-(5-йодпентил)бензолпропионовой кислоты метилового эфира в виде бесцветного масла.

Пример 8. Получение 2-[5-[(3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил-2Н-1-бензопиран-7-ил)окси]пентил] бензолпропионовой кислоты.

Используя методику примера 4, получают 2-[5-[(3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил-2Н-1-бензопиран-7 -ил)окси] пентил] бензолпропионовой кислоты метиловый эфир с выходом 67,5% и 0,35 г (1,69 ммоль) 2,3-дигидро-7-гидрокси-8-пропил-4Н-1-бензопиран-4-она и 0,54 г (1,5 ммоль) 2-(5-йодпентил)бензолпропионовой кислоты метилового эфира. Образец этого эфира весом 0,5 г (1,14 ммоль) обрабатывают 20 мл метанола и 3 мл водного 1н. раствора гидроксида натрия. Смесь перемешивают и нагревают с дефлегмацией в течение 2,5 часов, после чего удаляют растворитель в вакууме. Остаток разбавляют водой, подкисляют и обрабатывают эфиром по обычной методике. Продукт перекристаллизовывают из смеси гексан-этилацетат, получая 2-[5-[(3,4-дигидро-4-оксо-8-пропил-2Н-1-бензопиран-7 -ил)окси] пентил]бензолпропионовую кислоту в виде бесцветного твердого вещества, т.пл. 94-96^oС, с общим выходом 58,2% Анализ для С₂₆Н₃₂O₅.

Рассчитано. C 73,56; Н 7,60.

Найдено, С 73,21; Н 7,66.

Пример 9. Получение 6-гидрокси-5-пропил-1,2,3,4-тетрагидронафталин-1-она.

1,78 г (8,81 ммоль) 6-(2-пропенилокси)-1,2,3,4-тетрагидронафталин-1-она нагревают при 180-195^oС в течение 1,5 часов и при 215^oС в течение 1,5 часов. Полученное темно-коричневое масло охлаждают и растворяют в теплом этилацетате. Теплый раствор обрабатывают Norit-A и отфильтровывают смесь отсасывают через цеолитовую подушку. Отфильтрованную лепешку хорошо промывают этилацетатом, а затем фильтрат и промывные растворы соединяют и концентрирую при пониженном давлении. Остаток сушат при 45^oС в высо