Препарат для борьбы с комплексом вредителей растений "фитоверм"

Препарат для борьбы с комплексом вредителей растений "фитоверм"

Реферат

 

Использование: сельское хозяйство, а именно препараты для борьбы с вредителями растений. Сущность: предложен препарат "Фитоверм", действующим веществом которого является этанольный экстракт авермектинов из мицелиальной массы Streptomyces avermetilis штамма ВНИИСХМ-54 или штамма ВНИИСХМ-51. В состав препарата входят также эксплуатационные добавки при определенном соотношении компонентов. 13 з.п. ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к средствам защиты растений биогенного происхождения.

Известен препарат биогенного происхождения "Вертимек" [1] для борьбы против вредителей сельскохозяйственных растений клещей и различных насекомых. Активным компонентом "Вертимека" является абамектин, представляющий собой смесь из 80% авермектина Б_1a (5-0-деметилавермектин А) и 20% авермектина Б_1б (5-0-деметил-25-де)1-метилпропил-25(1-метилэтил)авермектин А). Получают абамектин путем культивирования Streptomyces avermitilis МА 4680 NRRL8165 в глубинных условиях с последующим выделением авермектина В_1а и авермектина В_1в хроматографически на колонках из смеси, состоящей из 8-ми авермектинов.

Препарат "Вертимек" содержит 18 г/л абамектина. Недостатком известного препарата является его высокая токсичность для теплокровных. По данным фирмы-изготовителя "Мерк Шарп энд Дом" острая пероральная ЛД₅₀ для крыс составляет 650 мг/кг [1] Цель изобретения создание нового высокоэффективного препарата для борьбы с комплексом вредителей сельскохозяйственных культур на основе природных авермектинов. Цель достигается тем, что предлагается препарат Стрептовермин. Действующим веществом препарата является этанольный экстракт из мицелия Streptomyces avermetilis-51 (депонирован в коллекции культур ВНИИСХМ г. Санкт-Петербург) или из мицелия его более активного производного Streptomyces avermetilis-493 (проходит процесс депонирования в коллекции культур ВНИИСХМ г. Санкт-Петербург). Дополнительно вводят смачиватель, стабилизатор, прилипатель.

В качестве веществ, повышающих смачиваемость, используются проксанол ЦЛ-3 в концентрации 0,5-2 об. или твин-80 (сорбиталь) в количестве 0,5-2 об. или ПЭГ-9 в количестве 5-30 об.

В качестве стабилизатора действующего вещества используется соевое или оливковое масло в количестве 0,2-2,0 об. или поливинилпирролидон (низкомолекулярный) в количестве 0,2-2 об. или ксантохин в количестве 0,2-2 мас.

В качестве прилипателей используются растительные масла (подсолнечное, хлопковое, рапсовое) или минеральное масло в количестве 0,5-2 об.

Пример 1. Эффективность Стрептовермина против персиковой тли.

Споры штамма Streptomyces avermetilis-51 выращивают на овсяной среде в течение 10 дней при 281^oC. Кусочек агаровой среды (1/8 часть) со спорами вносится в качалочные колбы емкостью 750 мл, содержащие 100 мл посевной среды следующего состава, мас.

Глюкоза 4,0 Кукурузный экстракт (по техническому весу) 0,6 Соевая мука 1,2 Белково-витаминный концентрат (БВК) 0,3 Кальций углекислый 0,6 Вода водопроводная До 100% Значение pН до стерилизации 6,0-6,2.

Глюкозу стерилизуют отдельно при 0,5 ати 30 мин и вносят в колбы в момент засева культуры. Остальные компоненты стерилизуют при 1,2 ати 1 ч.

Колбы устанавливают на качалку с числом оборотов 220 в минуту и выращивают инокулят при температуре 281^oC в течение 48 ч. Затем инокулят в количестве 5% передают в аппарат емкостью 100 л с коэффициентом загрузки 0,5 с ферментационной средой следующего состава, мас.

Глюкоза 7 Соевая мука 1,2 Кукурузный экстракт (по техническому весу) 0,6 Белково-витаминный концентрат (БВК) 0,3 Кальций углекислый 0,6 Калийфосфат двузамещенный 0,05 Вода водопроводная До 100% Значение pН до стерилизации 6,0-6,2, после стерилизации 6,8-7,0. Режим стерилизации среды 1,2 ати 1 ч.

Глюкозу стерилизуют отдельно и подают в аппарат после засева инокулятом.

Ферментацию проводят в течение 168 ч при температуре 281^oC при работающей мешалке 300 оборотов в минуту и подаче воздуха 0,8 объемов на 1,0 объем среды. Культуральную жидкость, содержащую смесь из 8-ми авермектинов, в которой количество авермектинов группы В₁ составляет 30-60% общего содержания авермектинов, фильтруют через нутч-фильтр с бязевой подложкой. Влажный мицелий в количестве 8-10 кг промывают водой с pН 6,0, охлажденной до 10^oC, в количестве 40-100 л. Влажную мицелиальную пасту подвергают обезвоживанию путем высушивания на вихревой сушилке в течение 30 мин при температуре воздуха на входе 801^oC и на выходе 405^oC. Сухую мицелиальную массу увлажняют водопроводной водой в соотношении 3:1 при комнатной температуре в течение 30 мин. Из увлажненной мицелиальной биомассы экстрагируют смесь авермектинов в течение 40 мин четырьмя объемами (по отношению к сухому мицелию) этилового спирта. После отделения этанольного экстракта от мицелия на нутч-фильтре определяют общее содержание авермектинов колориметрическим путем с помощью орцинового реактива [3] К 500 мл спиртового экстракта, содержащего 0,6% авермектинов, вносят в качестве стабилизатора 10 мл соевого масла. В качестве прилипателя добавляют 10 мл подсолнечного масла. Смачивателем служил проксанол ЦЛ-3 в количестве 10 мл. Смесь доводят до 1000 мл техническим этиловым спиртом. После тщательного перемешивания приготовленный препарат испытывают против персиковой тли растений.

В лабораторных условиях на каждое растение редьки черной, растущей в вегетационных сосудах при температуре ночью 16-20^oC, днем 20-33^oC и относительной влажности 55-75% при световом дне не менее 16 ч, подсаживают по 10 особей 2-суточных личинок персиковой тли (Myzodes persical sulf). Через 6 дней проводят учет численности вредителя.

На растении оставляют по 5 листьев, заселенных тлей, остальные удаляют. Листья этикетируют. Затем обрабатывают Стрептовермином в концентрации 1 мл/на 1 л воды из пульверизатора. Учет эффективности Стрептовермина проводят на 3, 6, 8 и 10 дни после обработки. Полученные результаты представлены в табл. 1.

Как видно из табл. 1, Стрептовермин в лабораторных условиях обеспечивает 100% эффект против персиковой тли. Уменьшение содержания авермектинов в Стрептовермине ниже 0,1% в конечной концентрации приводит к снижению эффективности действия на 40-45% а увеличение его выше 1% в конечной концентрации нецелесообразно, так как приводит к значительному расходу действующего вещества без увеличения эффективности.

Пример 2. Эффективность Стрептовермина против паутинного клеща (Tetranynchys urtical Koch).

Препарат получают так, как описано в примере 1. Эффективность препарата изучают на огурцах сорта НИИОХ-412. Растения на 7 дней помещают в разводку паутинного клеща, после чего в их нижней части верхней трети выбирают по 3 листа. Испытание проводят чашечным методом на изолированных листах в 8-кратной повторности. Препарат в количестве 1 мл разводят водопроводной водой до 1 л и разбрызгивают на растения пульверизатором. Учет подвижных стадий клещей проводят до обработки и после на 3, 7, 10 дни. Данные приведены в табл. 2.

Как показывают результаты опытов, максимальная эффективность Стрептовермина наступает на 10 день и достигает 97,9% Пример 3. Эффективность Стрептовермина против тепличной белокрылки (Trialends vaporarium Westwood).

Препарат получают так, как описано в примере 1. Эффективность изучают на растениях огурца. Растения помещают в разводку белокрылки на 3 дня, затем после освобождения их от имаго переносят в изолированное помещение. Через 12 дней проводят обработку растений препаратами из пульверизатора в концентрации 4 мл на 1 л водопроводной воды. Действие препаратов оценивают на 7 и 10 дни после обработки путем учета личиночных стадий белокрылки на 3-х модельных листьях каждого растения в четырехкратной повторности.

Как показывают результаты, эффективность Стрептовермина против белокрылки составляет 87,2% Пример 4. Эффективность Стрептовермина, полученного на основе штамма Streptomyces avermetilis-493, против персиковой тли.

Споры штамма Streptomyces avermetilis-493 выращивают на минеральном агаре N 1 (Гаузе 1) в течение 10 дней при 281^oC. Далее поступают так, как описано в примере 1.

После отделения этанольного экстракта от мицелия на нутч-фильтре определяют общее содержание авермектинов колориметрическим путем с помощью орцинового реактива [3] К 300 мл спиртового экстракта, содержащего 1% авермектинов, вносят в качестве стабилизатора 10 мл соевого масла. Смачивателем служит проксанол ЦЛ-3 в количестве 10 мл. Смесь доводят до 1000 мл техническим этиловым спиртом. После тщательного перемешивания препарат испытывают против экзопаразитов растений. Далее поступают так, как описано в примере 1.

Эффективность Стрептовермина, полученного на штамме Streptomyces avermetilis-493, против персиковой тли равна 100% Уменьшение содержания авермектинов в Стрептовермине, полученном на штамме Streptomyces avermetilis-493, ниже 0,05% и увеличение свыше 0,5% нецелесообразно, так как в первом случае снижается эффективность более чем на 30% а во втором - увеличивается расход действующего вещества без значимого улучшения технических характеристик препарата.

Пример 5. Эффективность Стрептовермина с различным содержанием соевого масла в качестве стабилизатора против персиковой тли.

Препарат получают и испытывают так, как описано в примере 1 за исключением того, что добавляют не 10, а 2 мл соевого масла в в качестве стабилизатора. Приготовленный таким образом препарат Стрептовермин обеспечивает 100% эффективность. Однако, срок его годности сокращается с 16 до 12 мес. По этой причине дальнейшее уменьшение стабилизатора нецелесообразно, увеличение соевого масла выше 20 мл также нецелесообразно, так как не приводит к увеличению сроков годности препарата.

Пример 6. Эффективность Стрептовермина, содержащего разное количество проксанола ЦЛ-3 в качестве смачивателя, против персиковой тли.

Препарат получают и испытывают так, как описано в примере 1, за исключением того, что вместо 10 мл добавляют 5 мл проксанола ЦЛ-3. Стрептовермин показывает эффективность на уровне 85-90% Дальнейшее уменьшение проксанола ЦЛ-3 нецелесообразно. По причине повышения себестоимости препарата также нецелесообразно увеличение проксанола ЦЛ-3 выше 20 мл.

Пример 7. Эффективность Стрептовермина, содержащего разные количества подсолнечного масла в качестве прилипателя, против персиковой тли.

Препарат получают и испытывают так, как описано в примере 1, за исключением того, что вместо 10 мл добавляют 5 мл подсолнечного масла. Фиксируют 90% эффективность препарата. Следовательно, дальнейшее снижение количества подсолнечного масла нецелесообразно.

Вносить подсолнечное масло выше 20 мл не рентабельно, так как при этом увеличивается себестоимость Стрептовермина, без улучшения его технических характеристик.

Пример 8. Эффективность Стрептовермина, содержащего оливковое масло в качестве стабилизатора, против персиковой тли.

Поступают так, как описано в примере 1, только вместо соевого масла вносят 10 мл оливкового масла. Эффективность препарата составляет 100% Снижение количества оливкового масла до 2 мл не влияет на эффективность препарата, но приводит к сокращению срока хранения препарата с 12 до 10 мес. Увеличение количества оливкового масла до 20 мл не увеличивает срок годности препарата, однако увеличивает его себестоимость.

Пример 9. Эффективность Стрептовермина, содержащего в качестве стабилизатора ксантохин, против персиковой тли.

Поступают так, как описано в примере 1, только вместо соевого масла вносят ксантохин в количестве 10 г. Полученный таким образом препарат показывает 100% эффективность против персиковой тли. Уменьшение содержания ксантохина в препарате до 2 г не влияет на его эффективность, но уменьшает срок годности с 12 до 10 мес. Увеличение количества ксантохина в препарате до 20 г не увеличивает срока годности препарата, но увеличивает его себестоимость. Исходя из этого концентрационные пределы для ксантохина в стрептовермине находятся на уровне 2-20 г в литре.

Пример 10. Эффективность Стрептовермина, содержащего низкомолекулярный поливинилпирролидон в качестве стабилизатора, против персиковой тли.

Поступают так, как описано в примере 1, только вместо соевого масла в качестве стабилизатора используют низкомолекулярный поливинилпирролидон в количестве 10 мл 50%-го раствора. Препарат с поливинилпирролидоном в качестве стабилизатора показывает эффективность на уровне 100% Введение в препарат низкомолекулярного поливинилпирролидона в количестве 2 мл не отражается на его эффективности, однако, снижает сроки его хранения. Введение большего количества поливинилпирролидона (до 20 мл) в препарат стрептовермин не приводит к увеличению сроков хранения препарата, но повышает его себестоимость. Поэтому концентрационные пределы для поливинилпирролидона находятся на уровне 2-20 мл.

Пример 11. Эффективность Стрептовермина, содержащего твин-80 (сорбиталь) в качестве смачивателя, против персиковой тли.

Поступают так, как описано в примере 1, только вместо проксанола ЦЛ-3 используют твин-80 в качестве смачивателя в количестве 10 мл. Получают 100% эффективность препарата при обработке им черной редьки, зараженной персиковой тлей. Уменьшение твина-80 в препарате до 5 мл приводит к уменьшению эффективности на 15% а увеличение его до 20 мл, хотя не сказывается на улучшении технических характеристик препарата, но приводит к удорожанию препарата. Из этого следует, что добавление твина-80 ниже и выше указанных величин в препарате нецелесообразно.

Пример 12. Эффективность Стрептовермина, содержащего полиэтиленгликоль-400 (ПЭГ-9) в качестве смачивателя, против персиковой тли.

Поступают так, как описано в примере 1, только вместо подсолнечного масла в качестве смачивателя используют ПЭГ-9 в количестве 100 мл. Эффективность препарата равняется 100% Уменьшение ПЭГ-9 в препарате до 50 мл сказывается на его эффективности. Она не превышает 90% Увеличение ПЭГ-9 в препарате до 300 мл не приводит к улучшению его технических характеристик, но препарат становится значительно дороже. Следовательно, внесение ПЭГ-9 в Стрептовермин меньше 50 мл и больше 300 мл нецелесообразно.

Пример 13. Эффективность Стрептовермина, содержащего хлопковое масло в качестве прилипателя, против персиковой тли.

Поступают так, как описано в примере 1, за исключением того, что в качестве прилипателя используют хлопковое масло в количестве 10 мл. В результате применения приготовленного Стрептовермина получают 100% эффект при его действии на персиковую тлю. Снижение количества хлопкового масла ниже 5 мл и увеличение выше 20 мл нецелесообразно, так как в первом случае снижается эффективность препарата на 10-15% а во втором случае значительно увеличивается его себестоимость без улучшения технических характеристик препарата.

Пример 14. Эффективность Стрептовермина, содержащего рапсовое масло в качестве прилипателя, против персиковой тли.

Поступают так, как описано в примере 1, за исключением того, что вместо подсолнечного масла в качестве прилипателя используют рапсовое масло в количестве 10 мл. Препарат вызывает 100% гибель персиковой тли. При добавлении рапсового масла в препарат ниже 5 мл отмечается уменьшение эффективности Стрептовермина на 10% Добавление рапсового масла в препарат более 20 мл не приводит к улучшению технических характеристик препарата. Исходя из этого можно считать, что предельное количество рапсового масла в Стрептовермине находится на уровне 5-20 мл.

Пример 15. Эффективность Стрептовермина, содержащего минеральное масло в качестве прилипателя, против персиковой тли.

Поступают так, как описано в примере 1, только вместо подсолнечного масла в качестве прилипателя используют минеральное масло в количестве 10 мл. Применяя препарат Стрептовермин, полученный таким образом, получают 100% эффективность. Снижение количества минерального масла до 5 мл приводит к уменьшению эффекта на 10-20% а увеличение его количества более 20 мл увеличивает себестоимость препарата. По указанным причинам использование минерального масла ниже и выше указанных количеств в Стрептовермине нецелесообразно.

Формула изобретения

1. Препарат для борьбы с комплексом вредителей растений, содержащий действующее вещество на основе авермектинов из мицелия гриба Streptomyces avermetilis и растворитель, отличающийся тем, что в качестве действующего вещества он содержит этанольный экстракт авермектинов, выделенный из мицелия штамма ВНИИСХМ N 51 или штамма ВНИИСХМ N 54, и дополнительно стабилизатор, смачиватель и прилипатель.

2. Препарат по п. 1, отличающийся тем, что в качестве действующего вещества содержит 0,1 1% этанольный экстракт авермектинов в количестве 50 об.

3. Препарат по п. 1, отличающийся тем, что в качестве стабилизатора он содержит соевое масло в количестве 0,2 2,0 об.

4. Препарат по п. 1, отличающийся тем, что в качестве стабилизатора он содержит оливковое масло в количестве 0,2 2,0 об.

5. Препарат по п. 1, отличающийся тем, что в качестве стабилизатора он содержит низкомолекулярный поливинилпирролидон в количестве 0,2 2,0 об.

6. Препарат по п. 1, отличающийся тем, что в качестве стабилизатора он содержит ксантохин в количестве 0,2 2,0 мас.

7. Препарат по п. 1, отличающийся тем, что в качестве смачивателя он содержит проксанол ЦЛ-3 в количестве 0,5 2,0 об.

8. Препарат по п. 1, отличающийся тем, что в качестве смачивателя он содержит твин-80 (сорбиталь) в количестве 0,5 2,0 об.

9. Препарат по п. 1, отличающийся тем, что в качестве смачивателя он содержит полиэтиленгликоль-400 (ПЭГ-9) в количестве 0,5 30 об.

10. Препарат по п. 1, отличающийся тем, что в качестве прилипателя он содержит подсолнечное масло в количестве 0,5 2,0 об.

11. Препарат по п. 1, отличающийся тем, что в качестве прилипателя он содержит рапсовое масло в количестве 0,5 2,0 об.

12. Препарат по п. 1, отличающийся тем, что в качестве прилипателя он содержит хлопковое масло в количестве 0,5 2,0 об.

13. Препарат по п. 1, отличающийся тем, что в качестве прилипателя он содержит минеральное масло в количестве 0,5 2,0 об.

14. Препарат по п. 1, отличающийся тем, что в качестве растворителя он содержит спирт этиловый технический в количестве до 100 об.

РИСУНКИ

Рисунок 1

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 09.10.2003

Извещение опубликовано: 27.10.2004        БИ: 30/2004