Производные уксусной кислоты или их гидраты, или их сольваты, или их фармацевтически приемлемые соли

Производные уксусной кислоты или их гидраты, или их сольваты, или их фармацевтически приемлемые соли

Реферат

 

Использование: в медицине. Сущность изобретения: производные уксусные кислоты ф-лы Н N(NH)C-X-Y-CO-X-CH(Q')COOQ'', где Q' - водород, фенилен, Q'' - водород, фенил-низший алкил, Х - 1,4-фенилен, 2,5-пиридилен, или 1,4-пиперидинилен, при соединенный через углеводородный атом в положении 4 к группе Y. Y-группа ф-лы: -(CH₂)_0-2-COHNHCH(Q³)(CH₂)_1-3-; -CONHCH₂CH(Q⁴), соединение ф-лы 1 или соединение ф-лы 2 или группы 3, 4, Q³ - водород, метил, фенил, -СOOН и -CONH(CH₂)₂COOH, Q⁴ - водород, метил или фенил, Z - 1,4-пиперазинилен, 1,4-пиперидинилен, присоединенный через атом азота в положении 1 к группе CO, или группа ф-лы 5, R' - водород, метил, фенил или СOO низший алкил, R'' - остаток, присоединенный через аминогруппу альфа-аминокарбоновой кислоты, или остаток сложного эфира этой кислоты, или группа ф-лы -NHCH₂CH₂Ar или COR'' - карбамоил или пирролидиноил, Ar - фенил, незамещенный или замещенный карбоксильной группой или группой -O(CH₂)_1-4COOH или их гидраты, или их сольваты, или их фармацевтически приемлемые соли. Структура соединений ф-л 1 - 5.

7 з.п. ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к новым производным уксусной кислоты, их гидратам, сольватам и фармацевтически приемлемым солям, которые могут найти применение в фармацевтической промышленности.

В частности, изобретение относится к производным уксусной кислоты общей формулы H₂N(NH)C-X-Y-CO-Z-CH(Q¹)COOO² (I) где Q¹ водород или фенил, Q² водород или фенил-низший алкил, Х 1,4-фенилен, 2,5-пиридилен или 1,4-пиперидинилен, присоединенный через углеродный атом в положении 4 к группе Y, Y группа формулы -(CH₂)_0-2-CONHCH(Q³)(CH₂)_1-3- (Y¹) -CONHCH₂CH(Q⁴)- (Y²) -(CH₂)₂NHCOCH₂- (Y³) -NHCO(CH₂)₃- (Y⁴) или Q³ водород, метил, фенил, -СOOH или CONH(CH₂)₂COOH, Q⁴ водород, метил или фенил, Z 1,4-пиперазинилен, 1,4-пиперидинилен, присоединенный через атом азота в положении 1 к группе СO, или группа формулы -NHCH(R¹)- или - NHCH(COR²)-, R¹ водород, метил, фенил или -COO-низший алкил, R² остаток присоединенной через аминогруппу альфа-аминокарбоновой кислоты, или остаток сложного эфира этой кислоты, или группа формулы NHCH₂CH₂Ar, или -COR² карбамоил или пирролидиноил, Ar фенил, незамещенный или замещенный карбоксильной группой, или - O(CH₂)_1-4-COOH, или их гидратам, или их сольватам, или их фармацевтически приемлемым солям.

В Chem. Abstr. 175040 описаны кислоты, которые в отличие от предложенных соединений, содержащих амидную группу в группе Y, имеют формулу H₂N(HN)CNHC₆H₄COOC₆H₄-Z-COOH, (II) не содержащую амидный остаток. Кислоты формулы II не относятся к физиологически активным. Амиды I, соответствующие кислотам II и содержащие группу -Z-COOCH₂CON(R¹, R²), считаются ингибиторами трипсина или плазмина и находят применение при лечении острого геморрагического панкреатита.

Предложенные соединения подавляют связывания других белков, например, фибриногена, фибронектина, витронектина, коллагена, ламинина и фактора Виллебранда с соответствующими рецепторами, в результате чего их можно использовать в борьбе с такими заболеваниями, как тромбоз. Поразительная подавляющая активность многих из предложенных соединений подтверждена и показана ниже.

Соединения формулы I относятся к категории мало- и слаботоксичных соединений. Например, продукт примера 1 имеет ЛД₅₀ 250 500 мг/кг (внутривенно) у мышей и примерно 4000 мг/кг (перорально и внутрилегочно) у мышей.

Соединения формулы I могут быть в сольватированном, в частности гидратированном виде, причем гидратация происходит в процессе получения целевого продукта или же она протекает постепенно из-за гигроскопичности безводного соединения I.

Примерами физиологически применяемых солей соединений I являются соли с такими физиологически совместимыми минеральными кислотами, как соляная, серная или фосфорная, либо с такими органическими кислотами, как метансульфоновая, уксусная, трифторуксусная, лимонная, фумаровая, янтарная или салициловая. Соединения I могут также образовывать соли с физиологическими совместимыми основаниями. Примерами таких солей являются соли щелочных или щелочноземельных металлов, аммониевые или алкиламмониевые соли, например, натриевая, калиевая, кальциевая или тетраметиламмониевая соль. Соединения I содержат амидиногруппу и поэтому они могут быть в виде амфионов.

Соединения I, содержащие один или несколько асимметрических атомов С, могут быть в виде энантиомеров, диастереомеров или их смесей, например, рацематов.

В рамках изобретения означают: tBu трет.-бутил, Вос - трет.-бутоксикарбонил, Z бензилоксикарбонил, Cal L-валил, Рhe, L-фенилаланил, Ser L-серил, Gly глицил, Ala L-аланил, Asp - L-альфа-аспаpтил, Leu L-лейцин, Tyr L-тирозин.

Выражение "низший" обозначает группы с числом атомов C 1 6, предпочтительно 1 4. Примерами низших алкильных групп являются метил, этил, пропил, изопропил и н-, симм. или трет.-бутил. Примерами расщепляемых в физиологических условиях низших алкильных групп являются первичные и вторичные низшие алкильные группы.

Примерами присоединенных через аминогруппу остатков альфа-аминокарбоновых кислот являются Val, Phe, Ser, Leu, Tyr и соответствующие их низшие алкиловые и фенил-низшие-алкиловые эфиры, амиды и моно- или ди-низшие алкиламиды.

Предпочтительны производные уксусной кислоты формулы I-А H₂N(HN)C-X-Y^a-CONHCH(R¹¹)CH₂COOH где Х 1,4-фенилен или 1,4-пиперидинилен, присоединенный к группе Y^a через атом С в положении 4, Y^a группа формулы -(CH₂)0-1-CONHCH(Q^a)(CH₂)_1-2- (Y¹_a) -(CH₂)₂NHCOCH₂- (Y³_a) -NHCO(CH₂)₃- (Y⁴_a) или Q^a водород или фенил, R¹¹ водород иди -COR²², R²² остаток присоединенной через аминогруппу альфа-аминокарбоновой кислоты или остаток сложного эфира этой кислоты, а также их гидраты или сольваты и физиологически совместимые соли.

Особенно предпочтительны производные уксусной кислоты формулы I, где Х, Z, Q¹ и Q² имеют указанное выше значение и Y означает группы формулы Y¹, в частности группу формулы: -CONH(CH₂)_2-4- -CH₂CONH(CH₂)₂- -CONHCH(C₆H₅)CH₂- -CONHCH(CONHCH₂CH₂COOH)CH₂- -CONHCH(COOH)CH₂- -CHNHCH(CH₃)CH₂- Также предпочтительны соединения формулы I, где Х, Y, Q¹, Q² имеют значение, указанное выше, а Z означает группу формулы: -NHCH₂-, -NHCH(CH₃)-, -NHCH(C₆H₅)-, -NHCH(COO-изобутил)-, -NHCH(CO-Val)-, -NHCH(CO-Phe)-, -NHCH(CO-Tyr)-, -NHCH(CO-Ser-OC₂H₅)-, -NHCH(CO-Leu-O-изопропил)-, -NHCH(CONHCH₂CH₂C₆H₄OCH₃)-, -NHCH(CONHCH₂CH₂C₆H₄COOH)-, -NHCH(пирролидиноил)-.

В частности, к указанным предпочтительным соединениям относятся производные уксусной кислоты, выбранные из группы N-[N-[4-(п-амидинобензамидо)бутирил]-L-альфа -аспартил]-L-валин.

N-[N-(п-амидинобензоил)-альфа-аланил]-альфа-аланин и, в частности, N-[N-[N-(п-амидинобензоил)-бета-аланил)-L-альфа -аспартил]-3-фенил-L-аланин; или производные уксусной кислоты из следующей группы: N-[N-[N[(1-амидино-4-пиперидинилкарбонил)-бета-аланин] -L- альфа-аспартил]-3-фенил-L-аланин, N-[N-[N-(п-амидинофенилацетил)-бета-аланил] -L-альфа -аспартил] -3-фенил-L-аланин, N-[N-[4[(п-амидинофенилкарбамоил)бутирил] -L-альфа -аспартил]-3-фенил-L-аланин, N-[N-[(п-амидиноыфенилкарбамоил)ацетил]-L-альфа -аспартил]-3-фенил-L-аланин, рац-N-[1[(п-амидинобензоил)-3-пиперидинилкарбонил]-бета-аланин, N-[4-(п-амидинобензамидо)бутирил]-бета-аланин и N-[(DL)-N-(п-амидинобензоил)-3-фенил-бета-аланил]-бета-аланин; или соединения из следующей группы: N-[N-[N-(п-амидинобензоил)-бета-аланил]-L-альфа -аспартил]-L-лейцинизопропиловый эфир, N-[N-[N[(п-амидинобензоил)-бета-аланил]-L-альфа-аспартил]-L-валин, N-[N-[N-(п-амидинобензоил)-бета-аланил]-L-альфа -аспартил]-3-(п-оксифенил)-L-аланин, N-[N-[5-(п-амидинобензамидо)валерил] -L-альфа -аспартил]-3-фенил-L-аланин, изобутиловый эфир N-[5-(п-амидинобензамидо)валерил]-L-аспаригиновой кислоты, N-[N-[N-(п-амидинобензоил)-бета-аланил] -L-альфа -аспартил]-L-серинэтиловый эфир, и N-[N-[[(R)-1-(п-амидинобензоил)-3-пирролидинил] карбонил]-L -альфа-аспартил]-3-фенил-L-аланин; а также соединения из следующей группы: N-[5-(п-амидинобензамидо)валерил]-бета-аланин, N,N -[[(S)-(п-амидинобензамидо)этилен]дикарбонил]ди-бета-аланин, N-2-(п-амидинобензоил)-N-4-(2-карбоксиэтил)-L-аспарагин, рац-N-[[1-(3-(1-амидино-4-пиперидинил)пропионил] -3 -пиперидинил]карбонил]-бета-аланин, N-[[(S)-1-(п-амидинобензоил)-2-пирролидинил]ацетил]-бета-аланин, DL-N-[N-(п-амидинобензоил)-бета-аланил]-2-фенил-бета-аланин, (S)-3-[(N-(п-амидинобензоил)-бета -аланил] амино-3-[(п-метоксифенэтил)карбамоил]пропионовая кислота, N-[[(R)-1-(п-амидинобензоил)-3-пирролидинил]карбонил]-бета-аланин, альфа-амид-N-[N-(п-амидинобензоил)-2-метил-бета -аланил]-L-аспарагиновой кислоты, N-[N-[(п-амидинофенил)ацетил]-бета-аланил]-бета-аланин, рац-N-[[(1-(п-амидинофенил)ацетил)-3-пиперидинил] карбонил] - бета-аланинбензиловый эфир, рац-N-[[1-[(п-амидинофенил)ацетил]-3-пиперидинил]карбонил] бета-аланин, N-[N-[N-[3-(1-амидино-4-пиперидинил)пропионил] -бета -аланил]-L-альфа-аспартил]-3-фенил-L-аланин, (S)-бета-[[DL-N-(п-амидинобензоил)-3-метил-бета -аланил]амино]-гамма-оксо-1-пирролидинмасляная кислота, DL-N-[N-(п-амидинобензоил)-бета-аланил]-3-метил-бета-аланин, N-[Dl-N-(п-амидинобензоил)-2-фенил-бета-аланил]-бета-аланин, DL-N-[N-(п-амидинобензоил)-бета-аланил]-2-метил-бета-аланин, п-(2-[[N-[N-(п-амидинобензоил)-бета-аланил] -L-альфа -аспартил] -амино] этил]бензойная кислота, DL-N-[N-(п-амидинобензоил)-бета-аланил-3-фенил-бета-аланин, [п-[2-[[N-[N-(п-амидинобензоил)-бета-аланил] -L-альфа -аспартил] амино] этил]фенокси]уксусная кислота, 1-[N-(п-амидинобензоил)-бета-аланил]-4-пиперидинуксусная кислота, 4-[N-(п-амидинобензоил)-бета-аланил]-1-пиперазинуксусная кислота, и N-[N-[N-(5-амидино-2-пиридил)карбонил-бета-аланил] -L-альфа -аспартил]-3-фенил-L-аланин.

Перечисленные выше соединения формулы I могут быть получены следующим образом: а) удалением защитной группы у соединения формулы X'-Y-CO-Z'-CH(Q¹)-COO-Q⁵ (II) где Q¹ и Y имеют вышеуказанное значение, X' замещенный защищенной или незащищенной амидиногруппой фенил или 4-пиперидинил, Z' и Q⁵ имеют значение, указанное выше соответственно для Z и Q², причем удаляют мининимум одну защитную группу; или б) переводом в нитриле формулы нитрильной группы в амидиногруппу с последующим, при желании, переводом соединения формулы I в физиологически совместимую соль или же переводом соли соединения формулы I в свободную кислоту или основание.

Примерами защитных групп соединений II являются бензил или низшие алкильные группы, например, трет.-бутил, в сложноэфирных группах, например, бензил-OCO- или трет. -бутил-OCO, а также защитные группы амидиногрупп, например, Z и Вос. Примерами защищенных амидиногрупп являются -C(NH)NH-Z-, -C(NH)NH-Boc и -C(N-Boc)-NH-Boc.

Сложноэфирные защитные группы можно удалить известными приемами, например, путем омыления с помощью таких оснований, как гидроокиси щелочных металлов, например, гидроокиси натрия, в растворителе, например, метаноле. Бензиловые эфиры можно расщепить путем гидрирования в присутствии катализатора благородного металла, например, палладия на угле, в растворителе, например, метаноле, этаноле, муравьиной или уксусной кислоте, при температуре до около 40^oС, предпочтительно при комнатной температуре. При этом одновременно отщепляется содержащаяся в группе X' защитная группа амидиногруппы, например, группа Z.

Сложноэфирные защитные группы, например, трет. -бутил, или защитная группа амидиногруппы, например, Вос, можно расщепить, например, с помощью такой кислоты, как муравьиная или трифторуксусная, причем, если желательно, в растворителе, например, дихлорметане, при температуре до 40^oС, предпочтительно при комнатной температуре.

Соединения формулы II являются новыми. Их можно получить исходя из известных соединений с помощью известных методов, например, нижеуказанных: Так, на первой стадии по известным из химии пептидов методам сочетают амин формулы H-Z'CH(Q¹COO-Q²² (IV) с кислотой формулы R⁵-NHCH(Q³¹)(CH₂)_1-3-COOH (Va) R⁵-NHCH₂CO(Q⁴)-COOH (Vb) 1 или где Q²² легко отщепляемая алкильная группа, Q³¹ водород, метил, фенил, -COO- низший алкил или -CONH(CH₂)₂-COO- низший алкил, R⁵ аминозащитная группа, например, Z или Вос, n 0 и p 3 или n 2 и p 1, с образованием амидной группы.

Реакцию соединения IV с кислотой Va, Vb или VI осуществляют, например, в тетрагидрофуране (ТГФ) при температуре от -10^oС до комнатной в атмосфере аргона в присутствии О-бензотриазол-1-ил-N,N,N',N'-тетраметилуронийгексафторфосфата (HBTU). Реакцию сочетания соединения IV с кислотой Vc, Vd или Ve осуществляют, например, так, что кислоту Vc, Vd или Ve сначала активируют в ТГФ с помощью хлордиметокситриазина и N-метилморфолина, а затем подвергают реакции взаимодействия с п-толуолсульфонатом амина IV и N-метилморфолином.

Затем от полученного продукта избирательно можно отщепить содержащуюся в нем аминозащитную группу R⁵, например, группу Z или Вос, например, вышеописанным каталитическим гидрированием или с помощью трифторуксусной кислоты.

Потом полученный в результате реакции амина IV с кислотой Vа амин формулы H₂NCH(Q³¹)(CH₂)_1-3-CO-Z' -CH(Q¹COO-Q²² (VIII) можно обработать 4-цианобензойной или 4-цианофенилуксусной кислотой с получением нитрила, например, формулы III, в условиях, как это, например, описано для реакции амина IV с кислотой Va.

Полученный таким образом нитрил или полученный в результате реакции IV с VI нитрил, например, путем взаимодействия с сероводородом и триэтиламином в пиридине можно перевести в тиоамид с последующими метилированием продукта метилйодидом в ацетоне и реакцией с ацетатом аммония в метаноле перевести в соединение II, где Х' содержит свободную амидиногруппу. Аналогично нитрил III можно перевести в соответствующее соединение I.

Амин VIII с помощью 1-амидино-4-пиперидинкарбоновой кислоты, п-амидинофенацетилхлорида или п-амидинобензоилхлорида можно перевести в соединение II, где Х' означает 1-амидино-4-пиперидинил или п-амидинофенил.

Амин формулы VIII или амин, полученный из соединения IV и кислоты одной из формул Va-Ve, в метиленхлориде и водном растворе бикарбоната натрия реакцией с п-амидинобензоилхлоридом, а затем в присутствии карбоната натрия - с бензиловым эфиром хлормуравьиной кислоты или ди-трет.-бутилдикарбонатом можно перевести в соединение II, где Х' означает защищенный группой Z или Вос-п-амидинофенил.

Соединения IV-VI известны или их можно получить аналогично известным соединениям или методами, описанными в нижеследующих примерах.

Так, нитрил VI можно получить ацилированием соответствующего амина формулы NCC₆H₄(CH₂)_n-NH₂ соответствующей кислотой формулы HOOC(CH₂)_р-COOQ², например, аналогично реакции амина IV с кислотой V, с последующим отщеплением эфирной группы Q²².

Для получения соединения II, где Х' означает 4-пиперидинил, замещенный в положении 4 защищенной амидиногруппой, соединение формулы в трет. -бутаноле и растворе едкого натра сначала, например, реакцией с N, N'-бис(трет.-бутоксикарбонил)-S-метилизотиомочевиной переводят в соединение формулы которым затем ацилируют, например, соединением формулы H₂NCH(Q³¹)(CH₂)_1-3 -CONHCH₂CH₂COOCH₂C₆H₅ (ХIа) H₂NCH₂CH(Q⁴)CONHCH₂CH₂ COOCH₂C₆H₅ (ХIb) где Q³¹ Н, метил, фенил, -COO-низший алкил или -CONH-(CH₂)₂-COO- низший алкил.

Соединение II, где Х' означает замещенный в положении 4 защищенной аминогруппой фенил или 4-пиперидинил, можно также получить путем взаимодействия кислоты формулы Х'-Y-COOH с амином IV.

Соединения формулы I, их сольваты и соли подавляют связывание фибриногена, фибронектина и фактора Виллебранда с рецептором фибриногена тромбоцитов (гликопротеин IIb/IIIa), а также связывание последних и других адгезивных белков, например, витронектина, коллагена и ламинина, с соответствующими рецепторами на поверхности различных типов клеток. Итак, предлагаемые соединения влияют на процессы взаимодействия между клетками, а также между клетками и матрицей. Они, в частности, предотвращают возникновение тромбов, вызываемых тромбоцитами, в результате чего их можно использовать в борьбе с такими заболеваниями, как тромбоз, апоплексия, инфаркт миокарда, воспаления, атеросклероз. Эти соединения воздействуют на опухолевые клетки, подавляя процесс метастазирования. Эти соединения можно использовать также в качестве противоопухолевых средств. Кроме того, они ускоряют заживление ран.

Подавление связывания фибриногена с рецептором последнего (гликопротеин IIb/IIIa) можно доказать следующим образом: Гликопротеин IIb/IIIa можно выделить из экстрактов тритона (Triton Х-100) человеческих тромбоцитов и очистить его афинной хроматографией на основе лектина (Analytical Biochemistry 151, 1985, 169 177) и хроматографией с использованием афинной колонки на основе Arg-Gly-Asp-Ser (Science 231, 1986, 1559-62). Затем полученный таким образом рецепторный белок связывают с микротитровальными пластинками. Специфическую связь фибриногена с иммобилизованным рецептором определяют в помощью системы ELISA-SISTEMS ("enzyme-linked immunosorbent assay"). Значения IC₅₀, соответствующие концентрации испытуемого вещества, необходимой для 50-ного подавления связывания фибриногена с иммобилизованным рецептором, представлены в табл.1.

Используя одно или несколько предложенных согласно изобретению соединений формулы I и при желании дополнительно одно или несколько других терапевтически ценных веществ можно приготовить галеновые препараты. Лекарства вводятся энтерально, например орально в виде таблеток, лаковых таблеток, драже, твердых и мягких желатиновых капсул, растворов, эмульсий или суспензий, или ректально, например в виде суппозиториев, или в виде аэрозоля. Однако ввод может быть осуществлен и парентерально, например, в виде растворов для инъекций.

В целях получения таблеток, лаковых таблеток, драже и твердых желатиновых капсул действующее начало можно смешивать с фармацевтически инертными, неорганическими или органическими носителями. Пригодными носителями для получения таблеток, драже и твердых желатиновых капсул являются, например, лактоза, кукурузный крахмал или его производные, тальк, стеариновая кислота или ее соли. Пригодными носителями для мягких желатиновых капсул являются, например, растительные масла, воски, жиры, полутвердые и жидкие полиолы; в зависимости от консистентности действующего начала для приготовления мягких желатиновых капсул вообще не нужно применять носителей. Для получения растворов и сиропов в качестве носителей подходят, например, вода, полиолы, сахароза, инвертный сахар, глюкоза, для получения впрыскиваемых растворов - например, вода, спирты, полиолы, глицерин, растительные масла, для суппозиториев например, естественные или отвержденные масла, воски, жиры, полужидкие и жидкие полиолы. Кроме того, фармацевтические препараты могут содержать еще и консерванты, содействующие растворению препаратов, стабилизаторы, смачиватели, эмульгаторы, подслащивающие вещества, красители, ароматизирующие вещества, соли, изменяющие осмотическое давление, буферы, покрывающие вещества или противоокислители.

Для лечения или предотвращения возникновения вышеназванных болезней можно варьировать дозировку действующего начала в очень широких пределах в зависимости от индивидуальных возможностей пациента. При оральном введении пригодная суточная доза для взрослого, как правило, составляет примерно 0,1 20 мг/кг, предпочтительно примерно 0,5 4 мг/кг, причем, если окажется целесообразно, верхний предел может быть и выше.

Пример 1. К взвеси 100 мг гидройодида N-[N-[N-(п-амидинобензоил)-бета-аланил] -3(трет. -бутоксикарбонил) -L-аланил]-3-фенил-L-аланин-трет.-бутилового эфира в 10 мл дихлорметана добавляют 15 мл трифторуксусной кислоты. После 3-часовой реакции при комнатной температуре упаривают растворители и полученный остаток выкристаллизовывают диэтиловым эфиром. После перекристаллизации из смеси метанола и этилацетата получают 32 мг трифторацетата N-[N-[N-(п-амидинобензоил)-бета-аланил]-L-альфа -аспартил]-3-фенил-L-аланина с т.пл. 216 220^oС (с разл.).

Исходное вещество получают следующим образом: а) К раствору 446 мг Z-бета-Ala-OH и 785 мг H-Asp(O-tBu)-Phe-O-tBu, полученного в результате конденсации Z-Asp(O-tBu)-OH с H-Phe-O-tBu с последующим гидрогенолизом, в 15 мл ТГФ в атмосфере аргона при 0^oC добавляют 834 мг НВТU и 0,24 мл N-метилморфолина. Через 5 ч полученный продукт концентрируют и остаток расслаивают с помощью смеси этилацетата и 5-ного раствора бикарбоната натрия. Потом промывают продукт водой в 1М раствором бисульфата калия. Затем высушивают органические экстракты, фильтруют и концентрируют их. Полученный остаток перекристаллизовывают из смеси этилацетата и диизопропилового эфира, в результате чего получают 552 мг Z-бета-Ala-Asp(O-tBu)-Phe-O-tBu с т.пл. 138 139^oС.

б) В результате каталитического гидрирования 550 мг промежуточного продукта в этаноле в присутствии 10-ного Рd/С после хроматографии на силикагеле с помощью смеси этилацетата и метанола (4:1 -> 1:1) получают 417 мг Н-бета-Ala-Asp(O-tBu)-Phe-O-tBu.

Масс спектр: 464 (М+Н)⁺.

в) После сочетания 350 мг продукта стадии б) со 125 мг 4-циоанобензойной кислоты методом, описанным в примере 1а) после хроматографии на силикагеле с помощью этилацетата выделяют 293 мг N-[3-(трет.-бутоксикарбонил)-N-[N-(п-цианобензоил)-бета -аланил]-L-аланил]-3-фенил-L-аланин-трет.-бутилового эфира с т.пл. 74 - 76^oС.

г) Раствор 270 мг промежуточного продукта в смеси пиридина и триэтиламина (15:1) насыщают сероводородом. Через 24 ч упаривают растворители и остаток разделяют по слоям смесью этилацетата и 5-ного раствора бикарбоната натрия. Органические экстракты промывают водой и 1 М раствором бисульфата калия, а затем их высушивают и концентрируют. После хроматографии остатка на силикагеле этилацетатом и перекристаллизации из гексана получают 230 мг N-[3-(трет.-бутоксикарбонил)-N-[N-(п-тиокарбамоилбензоил)-бета -аланил]-L-аланил]-3-фенил-L-аланин-трет.-бутилового эфира с т.пл. 101 - 103^oС.

д) К раствору 200 мг промежуточного продукта в 15 мл ацетона добавляют 2 мл метилйодида. После 3-часовой реакции при температуре кипения охлаждают до комнатной температуры и осаждают продукт диэтиловым эфиром. В результате получают 226 мг гидройодида N-[3-(трет.-бутоксикарбонил)-N-[N[п-(1-метилтил)формимидоил] бензоил]- бета-аланил]-L-аланил]-3-фенил-L-аланин-трет.-бутилового эфира с т.пл. 139 - 140^oС.

е) К раствору 160 мг промежуточного продукта в 10 мл метанола добавляют 32 мг ацетата аммония. Затем реакционную смесь выдерживают 4 ч при температуре кипения. После охлаждения до комнатной температуры раствор фильтруют, концентрируют и к нему добавляют диэтиловый эфир. Выпавший продукт фильтруют и высушивают. В результате получают 135 мг гидройодида N-[N-[N-(п-амидинобензоил)-бета-аланил] -3-(трет.-бутоксикарбонил) -L-аланил]-3-фенил-L-аланин-трет.-бутилового эфира с т.пл. 162 163^oС.

Пример 2. Из 60 мг N-[N-[N-(1-амидино-4-пиперидинилкарбонил)-бета-аланил] -3-(трет. -бутоксикарбонил)-L-аланил]-3-фенил-L-аланин-трет.-бутилового эфира обработкой трифторуксусной кислотой в метиленхлориде, как описано в примере 1, после кристаллизации из смеси метанола и диэтилового эфира получают 26 мг N-[N-[N-(1-амидино-4-пиперидинилкарбонил)-бета-аланил]-L-альфа -аспартил]-3-фенил-L-аланин-трифторацетата (2:3) с т.пл. 127 130^oС.

Исходный продукт получают следующим образом: В результате сочетания 86 мг 1-амидино-4-пиперидинкарбоновой кислоты (патент Бельгии 893282, Nippon Chemiphar Co. Ltd.) со 119 мг Н-бета-Ala-Asp(O-tBu)-Phe-O-tBu) по примеру 1б) в диоксане в присутствии 58 мг пиридинийгидрохлорида методом, описанным в примере 1а), после хроматографии на силикагеле со смесью метиленхлорида и метанола (1:1) получают 71 мг N-[N-[N-(1-амидино-4-пиперидинилкарбонил)-бета-аланил] -3-(трет. -бутоксикарбонил)-L-аланил]-2-фенил-L-аланил-трет.-бутилового эфира.

Масс спектр: 617 (М+Н)⁺.

Пример 3. Из 50 мг гидройодида N-[N-[N-[п-амидинофенилацетил)-бета-аланил] -3-(трет. -бутоксикарбонил)-L-аланил]-3-фенил-L-ананин-трет.-бутилового эфира обработкой трифторуксусной кислотой по примеру 1 получают 36 мг трифторацетата N-[N-[N-(п-амидинофенилацетил)-бета-аланил]-L-альфа-аспартил] -3 -фенил-L-аланина с т.пл. 218 220^oС (из диэтилового эфира).

Исходный продукт получают следующим образом: а) В результате сочетания 142 мг 4-цианофенилуксусной кислоты с 371 мг Н-бета-Ala-Asp(O-tBu)-Phe-O-tBu (по примеру 1б) методом, описанным в примере 1а), после хроматографии на силикагеле смесью этилацетата и метанола получают 250 мг N-[N-[N-(п-цианофенилацетил)-бета-аланил]-3-трет.-бутоксикарбонил-L -аланил]-3-фенил-L-аланин-трет.-бутилового эфира с т.пл. 93 94^oС.

б) Тионированием 230 мг промежуточного продукта в соответствии с примером 1г) после хроматографии на силикагеле с помощью этилацетата получают 160 мг N-[N-[N-(п-тиокарбамоилфенилацетил)-бета-аланил] -3-трет. -бутоксикарбонил-L-аланил] -3-фенил-L-аланин-трет. -бутилового эфира. Масс спектр: 607 (М+Н)⁺.

в) В результате метилирования 120 мг промежуточного продукта по примеру 1д) после кристаллизации получают 100 мг гидройодида N-[N-[N-(п-метилтиоформимидоил)фенил] ацетил] -бета-аланил] -3 -трет.бутоксиркабонил-L-аланил]-3-фенил-L-аланин-трет. -бутилового эфира с т.пл. 103 104^oС (из смеси ацетона и диэтилового эфира).

г) В результате реакции 90 мг промежуточного продукта с ацетатом аммония по примеру 1е) получают 62 мг гидройодида N-[N-[N-(п-амидинофенилацетил)-бета-аланил] -3-трет. -бутоксикарбонил-L-аланил]-3-фенил-L-аланин-трет.-бутилового эфира с т.пл. 152^oС (из смеси метанола и диэтилового эфира).

Пример 4. Обработкой 55 мг гидройодида N-[N-[4-(п-амидинофенилкарбамоил)бутирил] -3-(трет. -бутоксикарбонил) -L-аланин-трет. -бутилового эфира трифторуксусной кислотой по примеру 1 после кристаллизации из смеси этанола и диэтилового эфира получают 31 мг N-[N-[4-(п-амидинофенилкарбамоил)бутирил] -L-альфа -аспартил]-3-фенил-L-аланин-трифторацетата (5:4) с т.пл. 159 161^oC.

Исходный продукт получают следующим образом: а) Сочетанием 1,18 г 4-аминобензонитрила с 1,25 мл монометилглутарата по примеру 1а) после перекристаллизации из этилацетата получают 1,83 г 4-[(п-цианофенил)карбамоил]-бутирата с т.пл. 126 127^oС.

б) К раствору 1 г промежуточного продукта в 10 мл метанола добавляют 6 мл 1 н раствора едкого натра. Через 7 ч полученную реакционную смесь концентрируют, экстрагируют этилацетатом и нейтрализуют 1 н. соляной кислотой. Полученный остаток фильтруют, промывают водой и высушивают. В результате получают 575 мг 4-[(п-цианофенил)карбамоил]-масляной кислоты с т.пл. 200 - 201^oС.

в) Сочетанием 464 мг промежуточного продукта с 863 мг Н-Asp(O-tBu)-Phe-O-tBu в соответствии с примером 1а) после хроматографии на силикагеле этилацетатом с последующим перемешиванием в гексане получают 701 мг N-[3-(трет. -бутоксикарбонил)-N-[4-(п-цианофенилкарбамоил)бутирил] -L-аланил]-3-фенил-L-аланин-трет.-бутилового эфира с т.пл. 64 66^oС.

г) Реакцией 350 мг промежуточного продукта с сероводородом по примеру 1г) после перекристаллизации из этилацетата получают 304 мг N-[3-(трет.-бутоксикарбонил)-N-[4-(п-тиокарбамоилфенли)бутирил] -L-аланил]-3-фенил-L-аланин-трет.-бутилового эфира с т.пл. 178-179^oС.

д) В результате метилирования 150 мг промежуточного продукта по примеру 1д) после кристаллизации диэтиловым эфиром получают 175 мг гидройодида N-[3-(трет. -бутоксикарбонил)-N-[4-[[п-[1-(метилтио)-формимидоил] фенил]карбамоил] бутирил] -L-аланил]-3-фенил-L-аланин-трет.-бутилового эфира (1:1) с т. пл. 127 128^oС.

е) Из 90 мг промежуточного продукта по примеру 1е) получают 60 мг гидройодида N-[N-[4-(п-амидинофенилкарбамоил)бутирил] -3-(трет. -бутоксикарбонил)-L-аланил]-3-фенил-L-аланин-трет.-бутилового эфира с т.пл. 130 132^oС.

Пример 5. Реакцией 100 мг гидройодида N-[N-[(п-амидинофенэтилкарбамоил)ацетил] -3-(трет. -бутоксикарбонил) -L-аланил]-3-фенил-L-аланин-трет.-бутилового эфира с трифторуксусной кислотой по примеру 1 после кристаллизации диэтиловым эфиром получают 69 мг N-[N-[(п-амидинофенэтилкарбамоил)ацетил]-L-альфа-аспартил]-3-фенил -L-аланин-трифторацетата с т.пл. 141 143^oС.

Исходный продукт получают следующим образом: а) Из 876 мг п-цианогидрокоричной кислоты (Pharmazie 28, 1973, 724) в результате проведения известной последовательности реакций получают 370 мг п-(2-аминоэтил)-бензонитрила.

Масс спектр: 147 (М+Н)⁺.

б) К раствору 731 мг п-(2-аминоэтил)бензонитрила и 1,39 мг триэтиламина в 10 мл ТГФ при -10^oС по каплям добавляют раствор 0,59 мл метилового эфира хлорида малоновой кислоты в 5 мл ТГФ. Затем полученную смесь нагревают до комнатной температуры, выливают ее в ледяную воду и доводят до значения pH 2 1н. соляной кислотой. Затем упаривают ТГФ и водные экстракты экстрагируют этилацетатом. Наконец, в результате высушивания и концентрирования получают 380 мг метил-(п-цианофенэтил)малонамата с т.пл. 125^oС.

в) Аналогично примеру 4б) в результате омыления 755 мг продукта стадии б) получают 365 мг N-(п-цианофенэтил)малонаминной кислоты с т.пл. 137 - 139^oС.

г) Аналогично примеру 1а) взаимодействием 300 мг промежуточного продукта с 507 мг Н-Asp(O-tBu)-Phe-O-tBu после хроматографии на силикагеле этилацетатом получают 352 мг N-[3-(трет.-бутоксикарбонил)-N-[(п-цианофенэтилкарбамоил) -ацетил]-L-аланил]-3-фенил-L-аланин-трет.-бутилового эфира.

Масс-спектр: 607(М+Н)⁺ д) Аналогично примерам 1 г), д), е) в результате проведения той же последовательности реакций с 308 мг продукта по г) после кристаллизации диизопропиловым эфиром получают 152 мг гидройодида N-[N-[(п-амидино-фенэтилкарбамоил)ацетил] -3-(трет. -бутоксикарбонил) -L-аланил]-3-фенил-L-аланин-трет.-бутилового эфира с т.пл. 91 93^oС (с разл.).

Пример 6. Из 200 мг гидройодида N-[N-[4-(п-амидинобензамидо)бутирил]-3-(трет. -бутоксикарбонил) -L-аланил]-L-валин-трет.-бутилового эфира аналогично примеру 1 после кристаллизации из смеси этанола и диэтилового эфира получают 119 мг трифторацетата N-[N-[4-(п-амидинобензамидо)бутирил]-L-альфа-аспартил]-L-валина с т.пл. 174^oС (с разл.).

Исходный продукт получают следующим образом: а) Взаимодействием 783 мг Z-4-аминомасляной кислоты с 1 г Н-Asp-(O-tBu)-Val-O-tBu, полученного в результате конденсации Z-Asp(O-tBu)-OH с Н-Val-O-tBu с последующим гидрогенолизом, по примеру 1а) после хроматографии на силикагеле этилацетатом и кристаллизации гексаном получают 1,17 г трет. -бутилового эфира N-[N-[4-[1-(бензилокси)формамидо]-бутирамидо]-3-(трет. -бутоксикарбонил)-L-валина с т.пл. 64 65^oС.

б) Гидрогенолизом 1,1 г продукта по примеру 1б) получают 1г трет.-бутилового эфира N-[N-(4-аминобутирил)-3-(трет.-бутоксикарбонил)-L-аланил]-L-валина с т.пл. 99 100^oС.

в) К раствору 324 мг 4-цианобензойной кислоты, 352 мг 2-хлор-4,6-диметокси-1,3,5-триазина и 0,24 мл N-метилморфолина в 10 мл ДМФ по истечении 2 ч при 0^oС добавляют раствор 859 мг продукта б). Затем полученную смесь нагревают до комнатной температуры. После переработки по примеру 1г) и хроматографии на силикагеле этилацетатом получают 772 мг трет.-бутилового эфира N-[N-[4-(п-цианобензамидо)бутирил] -3-(трет.-бутоксикарбонил)-L -аланил]-L-валина.

Масс-спектр: 559 (М+Н)⁺.

д) Аналогично примерам 1 г), д), е) в результате проведения той же последовательности реакций с 760 мг продукта по в) после кристаллизации с диизопропиловым эфиром получают 444 мг гидройодида N-[N-[4-(п-амидинобензамидо)бутирил]-3-(трет.-бутоксикарбонил)-L -аланил-L-валин-трет.-бутилового эфира с т.пл. 105 107^oС (с разл.).

Пример 7. 1,09 г рац-N-1-[[[п-[N-(бензилоксикарбонил)амидино]бензоил]-3 -пиперидинил] карбонил] -бета-аланинбензилового эфира и 0,25 г Рd/С перемешивают в 20 мл уксусной кислоты в атмосфере водорода. Затем катализатор фильтруют и фильтрат выпаривают. Полученный остаток перемешивают с водой и выпаривают. Осадок взвешивают в метаноле, аммиаком доводят до значения рН=8, перемешивают, отсасывают на нутч-фильтре, промывают метанолом и высушивают. Получают 530 мг рац-N-[[1-(п-амидинобензоил)-3-пиперидинил]-карбонил]-бета -аланина в виде гидрата (2:1) с т.пл. >265^oС.

Масс-спектр: 347 (96, М+Н).

Исходное вещество получают следующим образом: а) рац-N-(трет. -бутоксикарбонил)пиперидин-3-карбоновую кислоту (Can.J. Physiol. Pharmacol. 57, 1979, 763) активируют в ТГФ хлордиметокситриазином и N-метилморфолином, а затем сочетают с п-толуолсульфонатом бета-аланинбензилового эфира (J. Org. Chem. 17- 1952- 1564) и N-метилморфолином до рац-N-[[1-(трет. -бутоксикарбонил)-3-пиперидинил]карбонил]-бета -аланинбензилового эфира с т.пл. 57 59^oС.

б) Расщеплением этого продукта трифторуксусной кислотой получают трифторацетат рац-(3-пиперидинилкарбонил)-бета-аланинбензилового эфира.

в) Вышеназванный продукт в смеси метиленхлорида и водного раствора бикарбоната натрия подвергают реакции взаимодействия с n-амидинобензоил-хлоридом и затем в присутствии карбоната натрия с бензиловым эфиром хлормуравьиной кислоты, в результате чего получают рац-N-1-[[[п-[N-(бензилоксикарбонил)амидино] бензоил] -3 -пиперидинил]карбонил]-бета-аланинбензиловый эфир.

МС: 571 (10, М+Н).

Пример 8. 512 мг N-[4-[п-[N-(бензилоксикарбонил)амидино]бензамидо]бутирил] -бета -аланинбензилового эфира и 170 мг Рd/С перемешивают в 10 мл уксусной кислоты в атмосфере водорода. Катализатор отфильтровывают, а фильтрат выпаривают. Остаток растворяют в воде и выпаривают. Остаток взвешивают в воде, затем с помощью аммиака доводят значение рН взвеси до 7, фильтруют на нутч-фильтре, промывают водой и высушивают. Получают 239 мг N-[4-(п-амидинобензамидо)бутирил]-бета-аланина, т.пл. > 250^oС.

МС: 321 (12, М+Н).

Исходное вещество получают следующим образом: а) 4-(трет. -бутоксикарбониламино)масляную кислоту активируют хлордиметокситразином и N-метилморфолином в ТГФ и подвергают реакции c п-толуолсульфонатом бета-аланинбензилового эфира в присутствии N-метил-морфолина с получением N-[4-(1-трет.-бутоксиформамидо)бутирил]-бета-аланинбензилового эфира с т.пл. 54 55^oС.

б) В трифторуксусной кислоте из вышеназванного продукта получают трифторацетат N-(4-аминобутирил)-бета-аланинбензилового эфира.

в) Вышеназванный продукт в смеси метиленхлорида, воды и бикарбоната натрия подвергают реакции взаимодействия с n-амидинобензоилхлоридом и затем в присутствии карбоната натрия с бензиловым эфиром хлормуравьиной кислоты, в результате чего получают N-4-[п-[N-(бензилоксикарбонил)амидино]бензамидо] бутирил]-бета -аланинбензиловый эфир. Т.пл. 173 183^oС.

Пример 9. Аналогично примеру 8 из N-[N-[п-[N-(бензилоксикарбонил)амидино] бензоил] -бета-аланил] - бета-аланинбензилового эфира получают N-[N-(п-амидинобензоил)-бета-аланил] -бета-аланин с т.пл. > 250^oС.

МС: 307 (6, М+Н), в виде гидрата (2:1).

Исходное вещество получают следующим образом: а) N-(трет. -бутоксикарбонил)-бета-аланин и бета-аланинбензиловый эфир сочетают аналогично вышеуказанным примерам до N-[N-(трет.-бутоксикарбонил)-бета-аланил]-бета-аланинбензилового эфира с т.пл. 84 85^oС.

б) В трифторуксусной кислоте из вышеназванного продукта получают трифторацетат (бета-аланил)-бета-аланинбензилового эфира.

в) Вышеназванный продукт подвергают реакции с п амидинобензоилхлоридом и затем с бензиловым эфиром хлормуравьиной кислоты, в результате чего получают N-[N-[п [N-(бензилоксикарбонил)амидино]бензоил]-бета-аланил]- бета-аланинбензиловый эфир. Т.пл. 165 166^oС.

Пример 10. Аналогично примеру 8 из N-[(DL)-N-[п-[N-(бензилоксикарбонил)амидино]бензоил]-3-фенил-бета -аланил]-бета-аланинбензилового эфира получают N-[(DL)-N-(п-амидинобензоил)-3-фенил-бета-аланил]-бета-аланин в виде гидрата (3:1), т.пл. > 250^oС.

МС: 383 (62, М+Н).

Исходное вещество получают следующим образом: а) DL-N-(трет.-бутоксикарбонил)-3-фенил-бета-аланин и бета-аланинбензиловый эфир сочетают аналогично вышеуказанным примерам до N-[(DL)-N-(трет.-бутоксикарбонил)-3-фенил-бета-аланил] -бета -аланинбензилового эфира с т.пл. 143 144^oС.

б) В трифторуксусной кислоте из вышеназванного продукта получают трифторацетат [(DL)-3-фенил-бета-аланил]-бета-аланинбензилового эфира.

в) Вышеназванный продукт подвергают реакции с п-амидинобензоилхлоридом и затем с бензиловым эфиром хлормуравьиной кислоты, в результате чего получают N-[(DL)-N-[п-[N-(бензилоксикарбонил)амидино] бензоил] -3-фенил-бета -аланил] -бет