Производные бензо-/с/-фенантридиния, способ их получения, фармацевтическая композиция

Производные бензо-/с/-фенантридиния, способ их получения, фармацевтическая композиция

Реферат

 

Использование: в медицине в качестве лекарственных средств. Сущность изобретения: продукт - производные бензо-[C]-фенантридиния формулы А, где М и N по отдельности гидроксигруппа и низший алкокси либо М и N одновременно представляют собой атом водорода или вместе образуют метилендиоксигруппу, Х^- - кислотный остаток или кислый кислотный остаток, R - низший алкил. Реагент I: соединение формулы С, где Y - атом галогена, W - защитная группа. Реагент 2-оловоорганическое соединение. Условия: инициатор радикальной реакции, органический углеводородный растворитель. Фарм. композиция с использованием соединений A¹. 3 с. и 13 з.п. ф-лы, 8 табл.

Настоящее изобретение относится к новому способу получения производных бензо[c] фенантридиния общей формулы А, которые обладают противоопухолевой активностью и активностью ингибировать агрегацию тромбоцитов, и поэтому их можно считать полезными лекарствами. Изобретение также относится к противоопухолевым средствам, содержащим указанные производные в качестве эффективных составных частей.

В настоящее время алкидирующие реагенты, антагонисты метаболизма нуклеиновых кислот, антибиотики, растительные алкалоиды и т.п. используют в качестве химиотерапевтических лекарств для больных раком.

Известно также, что тромбоз вызывается слипанием и коагуляцией тромбоцитов, и это связано с мозговыми инфарктами, сердечными нарушениями, раковой коагулопатией потребления и т.д. а также с метастазами рака.

2,3-(метилендиокси)-5-метил-7-окси-8-метокси-бензо[c]фенантридиния хлорид или йодид является известным соединением, описанным в Сhem. Pharm. Bull 33, 1763 (1985). Из описаний патентных заявок Японии КОКАI N 2-243628 и 3-184916 известно также, что это соединение обладает активностью ингибировать агрегацию тромбоцитов и имеет противоопухолевую активность. Более того, в Сhem. Pharm. Bull. 33, 1763 (1985) описан способ получения этого соединения, в котором в качестве исходного материала используют берберин, который обрабатывают более, чем в десяти стадиях, чтобы получить целевое соединение.

Кроме того, хлорид или гидроокись 5-метил-7-гидрокси-8-метоксибензо[c] фенантридиния, имеющие общую формулу А, где М и N по отдельности означают атом водорода, а Х представляет собой Сl^- или OН^-, является известным соединением, описанием в J. Org. Сhem. 53, 1708 1713 (1988).

Поэтому нужно обеспечить простой и практически полезный способ получения производных бензо[c]фенантридиния общей формулы А.

Краткое содержание изобретения.

Авторы настоящего изобретения провели обширные исследования по получению производных бензо[c]фенантридиния общей формулы А: где М и N независимо означают гидроксил или группу низшего алкокси, либо М и N одновременно означают атом водорода, либо вместе образуют метилендиокси группу; Х^- представляет собой кислотный остаток или кислый кислотный остаток; и R представляет собой группу низшего алкила.

В результате этих исследований был найдет новый способ получения, который имеет небольшое число стадий и который практически можно осуществить даже в крупном масштабе, чтобы получить целевые соединения с хорошим выходом, причем в качестве исходного использован материал, который отличается от материала, использованного в указанном выше известном способе.

Кроме того, было найдено, что некоторые новые производные бензо[c]фенантридиния, полученные способом по настоящему изобретению, обладают противоопухолевой активностью и активностью ингибировать агрегацию тромбоцитов. Стабильность cоединений по изобретению можно увеличить, превратив их в кислые соли, т.к. такие кислые соли соединений обладают некоторым преимуществом при приготовлении их фармацевтических составов.

Подробное описание изобретения.

Следовательно, настоящее изобретение относится к способу получения производного бензо[c]фенантридиния общей формулы А: где М и N по отдельности представляют собой гидроксил или группу низшего алкокси, либо М и N одновременно означают атом водорода или вместе образуют метилендиокси группу; Х^- означает кислотный остаток или кислый кислотный остаток; и R представляет собой группу низшего алкила, отличающегося тем, что соединение общей формулы С: где М и N по отдельности представляют собой гидроксил или группу низшего алкокси, либо М и N одновременно представляют собой атом водорода, либо вместе образуют метилендиокси группу; Y означает атом галогена; и W представляет собой защитную группу, подвергают реакции замыкания кольца в присутствии оловоорганического соединения, а затем реакции окислительной ароматизации, чтобы получить соединение общей формулы D: где М и N по отдельности означают гидроксил или группу низшего алкокси, или М и N одновременно означают атом водорода, либо вместе образуют метилендиокси группу; и W означает защитную группу, и полученное таким образом соединение D контактируют с N-алкилирующим реагентом, чтобы осуществить N-алкилирование указанного соединения; и полученное таким образом N-алкилированное соединение подвергают стадии удаления защитной группы, и обрабатывают кислотой, чтобы получить целевой продукт в виде соли.

Изобретением также является фармацевтическая композиция предназначенная для использования как противоопухолевое средство, содержащая в качестве эффективного составляющего новое производное бензо[c]фенантридиния общей формулы A': где М и N по отдельности представляют собой гидроксил или группу низшего алкокси, либо М и N одновременно означают атом водорода, либо вместе они образуют метилендиокси группу; Х^- представляет собой кислотный остаток или кислый кислотный остаток; и R представляет собой группу низшего алкила, при условии, что если М и N одновременно означают атом водорода, либо вместе они образуют метилендиокси группу, то тогда R представляет собой группу низшего алкила, отличную от метильной группы.

Кислые соли соединений по изобретению обладают отличной стабильностью, и поэтому они имеют преимущество при приготовлении из них фармацевтических препаратов.

В качестве групп низшего алкокси здесь можно упомянуть группу С₁-C₅ алкокси, такие как метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, изобутокси, трет-бутокси и пентокси группы и т.п. Предпочтительными являются группы С₁-C₃ алкокси, такие как метокси, этокси, н-пропокси и изопропокси группы. Примерами групп низшего алкила являются группы С₁-C₅ алкила, такие как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил и пентильная группы и т. д. Предпочтительными являются С₁-C₃ алкильные группы, такие как метил, этил, н-пропил и изопропильная группы.

Кислотный остаток означает нормальные солеобразующие кислотные остатки, включая галогенидные ионы, такие как хлоридный ион Сl^-, бромидный ион Br^-, йодидный ион I^-, фторидный ион F^- и т.д. и также включает сульфатный ион SO²₄^-, нитритный ион NO^-₃, n-толуолсульфонатный ион ТSO^- и т.д. а кислый кислотный остаток означает кислые солеобразующие кислотные остатки, которые имеют один или два атома водорода, например, бисульфат-ион , двухпротонный фосфатный ион H₂PO^-₄ и т.п. Для того, чтобы увеличить стабильность соединений по настоящему изобретению, предпочтительно использовать кислые солеобразующие кислотные остатки, представленные формулой HnX^-_a (n означает 1 или 2, X^-_a означает SO^-₄ или PO^-_4/ , включая, например, бисульфат-ион, двухпротонный фосфатный ион и т.п.

Соединения общей формулы С являются новыми соединениями, и их можно получить, например, способом, показанным ниже.

Исходным материалом является 2,3-дигидрокси-5-нитронафталин, который представляет собой известное соединение (Сollection Czeehoslovak. Сhem. Commun. 53, 3184 (1988)). Исходный материал превращают в нитронафталиновое соединение формулы F: где М и N по отдельности представляют собой гидроксил или группу низшего алкокси, либо М и N вместе образуют метилендиокси группу.

Затем соединение формулы F восстанавливают в соединение формулы B: М и N независимо представляют собой гидроксил или группу низшего алкокси, либо М и N одновременно означают атом водорода, или они вместе образуют метилендиокси группу. 5-Аминонафталин, соединение формулы В, является известным соединением и оно коммерчески доступно (Merk Index 10, 6250).

Нафталамин формулы B конденсируют с 2-(защищенный гидрокси)-3-метокси-6-галогенобензальдегидом в условиях дегидратации, чтобы получить продукт конденсации, который представляет собой Шиффово основание селективно восстанавливают с тем, чтобы получить соединение формулы С.

Далее идет более подробное объяснение указанного выше способа.

1. Синтез соединений общей формулы F Соединения общей формулы F, где М и N вместе образуют метилендиокси группу, можно получить способом, в котором 2,3-дигидрокси-5-нитронафталин растворяют в безводном полярном растворителе, в таком как диметилформамид или т.п. а затем подвергают реакции при нагревании при температуре от 60 до 110^oC c дигалогенометаном, предпочтительно с дихлорметаном или с дибромометаном, в присутствии фтористой соли, предпочтительно фторида цезия или фторида калия, в качестве катализатора, чтобы получить 2,3-(метилендиокси)-5-нитронафталин (соединение I).

В случае соединений общей формулы F, где М и N по отдельности означают гидроксил или группу низшего алкокси, такие соединения можно получить с помощью способа, в котором 2,3-дигидрокси-5-нитронафталин растворяют в безводном полярном растворителе, в таком как диметилформамид или т.п. а затем алкилируют посредством реакции с галоидалкилом, с таким как метилйодид, этилйодид, изопропилбромид и т.п. в присутствии щелочного катализатора, например, Li₂CO₃ или K₂CO₃, при температуре от 50 до 100^oC в течение от 10 до 20 часов. Если 1 моль галоидалкила контактируют с 2,3-дигидрокси-5-нитронафталином, то можно получить два вида моноалкокси соединений. Для получения диалкокси соединений предпочтительно нужно использовать не менее 2 молей галоидалкила. Если нужно получить соединение, замещенное низшим алкоксилом, где N и М отличны друг от друга, то тогда можно провести способ, в котором выделенное с помощью фракционирования моноалкоксильное соединение подвергают последующей реакции с галоидалкилом.

2. Синтез соединений, имеющих общую формулу B Соединения общей формулы В можно получить путем восстановления нитрогруппы соединений, имеющих формулы F, в аминогруппу. Для осуществления этой реакции можно использовать любой восстановитель, обычно используемый для восстановления нитрогруппы в аминогруппу. Предпочтительный способ содержит нагревание реагента в этаноле в присутствии 5 или 10% палладированного угля в качестве катализатора, при нагревании с обратным холодильником.

2,3-Метилендиокси-5-аминонафталин можно также получить известным способом, описанным в J. Org. Сhem. 53, 1708 (1988), хотя указанный известный способ содержит много стадий и дает целевое соединение с низким выходом.

3. Синтез соединений общей формулы С Для этого синтеза нафтиламинные соединения общей формулы B контактируют с 2-(защищенный окси)-3-метокси-6-галогенобензальдегидом (который можно получить известным способом, описанным, например, в J.С.S. Perkin I, 1221 (1976) и J. Org. Chem. 53, 1708 (1988)) при нагревании реагентов в толуоле или в бензоле при температуре от 80 до 110^oC в течение 1 3 часов с последующим концентрированием реакционной смеси таким образом, чтобы воду, побочно образующуюся при конденсации аминогруппы с альдегидом группой, эффективно удалить из реакционной системы путем азеотропной перегонки с толуолом или бензолом. Предпочтительно, чтобы после концентрирования полученный остаток смешали со свежим толуолом или бензолом, а затем опять подвергли стадии нагревания/концентрирования. Повторяя 2 4 раза стадию нагревания/концентрирования, можно получить обезвоженный продукт конденсации (Шиффово основание) по существу с количественным выходом.

Затем двойную связь конденсированной части обезвоженного продукта конденсации подвергают реакции восстановления, чтобы получить целевые соединения общей формулы С. При осуществлении реакции восстановления можно использовать любые восстановители, которые способны восстанавливать двойную связь СN. Предпочтительно эту реакцию проводить в присутствии цианоборогидрида натрия или диметиламин бора, в качестве восстановителя, при низкой реакционной температуре от -10 до 40^oC.

Ниже подробно объяснены способы по настоящему изобретению.

А. Синтез соединений общей формулы D Cоединение общей формулы С подвергают реакции замыкания кольца (реакция конденсации при элиминировании галоидоводорода) в присутствии оловоорганических гидридов в органическом растворителе. Предпочтительными оловоорганическими гидридами являются гидриды три-углеводород (С₁-C₆ олова, например гидрид трифенилолова, гидрид три-н-бутилолова, гидрид триэтилолова или гидрид триметилолова, либо гидриды ди-углеводород (С₁-C₆) олова, например гидрид дифенилолова или гидрид ди-н-бутилолова. Как правило, наиболее предпочтителен гидрид три-н-бутилолова, и обычно используют его. При осуществлении этой реакции 1 - 6 эквивалентов, предпочтительно 2 3 эквивалента гидрида органического олова растворяют в органическом растворителе, предпочтительно в С₆ C₁₀ углеводородном растворителе, например в толуоле, в ксилоле или в бензоле, и предпочтительно примешивают инициатор радикальной реакции, такой как 2,2'-азобис(изобутиронитрил), 2,2'-азобис(2-метиббутиронитрил), 2,2'-азобис(2,4-диметилвалеронитрил), перекись бензоила или т.п. Реакционную смесь нагревают до температуры от 60 до 150^oC, предпочтительно от 80 до 130^oC в течение от 2 минут до 4 часов, предпочтительно от 5 минут до 1 часа, чтобы осуществить реакцию замыкания кольца. После этого, предпочтительно без выделения продукта конденсации из реакционной смеси осуществляют реакцию окислительной ароматизации замкнутого кольца в присутствии окислителя при температуре от 0 до 100^oC, предпочтительно от 10 до 40^oC в течение от 1 до 120 минут, предпочтительно от 5 до 50 минут, чтобы получить соединение общей формулы D.

Для этой реакции можно использовать различные окислители, и они включают, например, двуокись марганца, тетраацетат свинца, ацетат ртути и дихлородицианобензохинон, причем предпочтительной является двуокись марганца.

С помощью вышеуказанных реакций могут быть получены скелетные структуры бензо[c]фенантридина.

В качестве атома галогена в общей формуле С обычно используют атом брома. Относительно защитных групп W в общих формулах С и D, можно использовать любые виды защитных групп для гидроксильных групп без каких-либо особых ограничений, например, ацильные (С₂ C₈) группы, такие как ацетил и бензоил, и С₁ C₆ алкилкарбонильные и С₃ C₁₀ углеводородные группы, такие как разветвленные (С₃ C₆) алкильные группы и замещенный или незамещенный бензил. Предпочтительными защитными группами являются защитные группы бензильного ряда, такие как замещенные или незамещенные бензильные группы, либо разветвленные алкильные (С₃ C₅) группы.

В. Синтез соединений общей формулы А Бензо[c] фенантридиновое соединение общей формулы D подвергают реакции N-алкилирования, затем защитные группы удаляют из соединения, а после этого осуществляют кислотную обработку, чтобы получить производное бензо[c]фенантридиния общей формулы А.

При осуществлении N-алкилирования соединение общей формулы D и алкилирующий реагент можно растворить в органическом растворителе, например в С₆ C₁₀ углеводородном растворителе, в таком как безводный толуол, безводный бензол, безводный ксилол или т.п. либо стадию можно проводить в отсутствии каких-либо растворителей. Эти реагенты нагревают в отсутствии катализаторов или в присутствии солей, таких как галогениды или карбонаты щелочных металлов, предпочтительно таких как бромид калия, безводный карбонат калия, безводный карбонат натрия и т.п.

Реакционная температура обычно составляет от 50^o до 180^oC, предпочтительно от 100 до 150^oC. Время реакции обычно составляет 1 24 часа, предпочтительно от 2 до 10 часов.

В качестве алкилирующих реагентов для вышеуказанной реакции можно использовать любые обычные реагенты, применяемые всегда для реакций N-алкилирования пиридиновых колец. Примеры предпочтительных алкилирующих реагентов включают сульфонаты низших (С₁ C₄) алкилов, которые используют для алкилирования, такие как низший алкил замещенные бензолсульфонаты (например, низший алкил n-толуолсульфонаты, и более реакционные реагенты, такие как низший алкил 2,4-динитробензолсульфонаты и низший алкил 2-нитробензолсульфонаты) или низший алкил тригалоидометансульфонаты. Алкилирующими реагентами являются, например, метил n-толуолсульфонат, этил 2,4-динитробензолсульфонат, метил 2-нитробензолсульфонат, н-пропил 2-нитробензолсульфонат и метилтрифторметансульфонат.

Cтадию удаления защитной группы осуществляют в зависимости от вида защитных групп, которые нужно удалить. Например, в случае бензильного ряда защитных групп или изопропильной группы, такие группы можно удалить путем нагревания при температуре от 60 до 150^oC, предпочтительно от 80 до 120^oC, в кислотных условиях, например, в присутствии концентрированной соляной кислоты. Время реакции обычно составляет от 0,1 до 10 часов, предпочтительно от 0,5 до 3 часов.

После того, как защитная группы удалены из соединения, проводят кислотную обработку соединения, например, способом, в котором соединение растворяют в небольшом количестве полярного растворителя, такого как метанол или т. п. а затем смешивают с кислотой, например, с соляной кислотой, серной кислотой или с n-толуолсульфокислотой, разбавленной водой. Величина рН раствора должна быть ниже рН 4. Количество кислоты обычно составляет примерно от 1 до 3 молей на 1 моль соединения. Более того, к реакционному раствору добавляют органический растворитель, такой как ацетон, который хорошо смешивается с водой, чтобы получить соли в виде осадка, и реакционный раствор высушивают с тем, чтобы получить соединение общей формулы А в виде желтого порошка.

Если Х^- представляет собой кислотный ион, имеющий валентность не менее двух, например, является сульфатным ионом, то необходимо уменьшить количество добавляемой серной кислоты. Если серную кислоту используют в молярном количестве в 1,0 2,5 раз большем, чем расчетное количество, то тогда будет образовываться кислая сульфатная соль (где Х^- представляет собой HSO^-₄. Если серную кислоту используют в половинном количестве, то тогда будет образовываться нормальная сульфатная соль (где Х^- представляет собой 1/2 SO²₄^-).

Соединения по изобретению имеют описанные ниже характеристические химические свойства. Если производные бензо[с] фенантридиния общей формулы А обработать основанием, то соединение выделит 1 эквивалент кислоты из молекулы. Поэтому, считают, что соединение может также иметь внутримолекулярную цвиттерионную структуру, представленную следующей формулой Е: где М и N независимо представляют собой гидроксил или группу низшего алкила, либо М и N одновременно означают атом водорода, либо вместе образуют метилендиокси группу; а R представляет собой группу низшего алкила, при условии, что если М и N одновременно означают атом водорода или образуют метилендиоксигруппу, то тогда R представляет собой группу низшего алкила, отличную от метильной группы.

Альтернативно, соединения общей формулы Е можно также обработать кислотами, чтобы превратить их в соединения общей формулы А. Структура четвертичной соли, представленная общей формулой А, присутствует в растворе при рН ниже примерно 4, в то время как структура внутримолекулярной соли, представленная общей формулой Е, присутствует в растворе при значении рН выше примерно 4. Поэтому соединение формулы А можно получить, когда соединение осаждают из раствора, значение рН которого ниже примерно 4.

Что касается стабильности солевых форм соединений по изобретению, то кислотные соли (т.е. кислые соли: Х^- представляет собой кислый кислотный остаток), которые все еще содержат протоны (атомы водорода), обладают резистентностью к чужеродным основным материалам. Поэтому кислые соли являются более стабильными, чем нормальные соли, не содержащие протонов.

Например, даже в случае 2,3-(метилендиокси)-5-метил-7-гидрокси-8-метокси-бензо[c]фенантридиния хлорида, который, по-видимому, обладает сравнительно хорошими свойствами (стабильностью), существует проблема в том, что при длительном хранении при комнатной температуре он постепенно разлагается. Это соединение представляет собой порошковый материал, имеющий желтоватый цвет непосредственно сразу после его получения. Он постепенно изменяет свой цвет на коричневый. Через 3 месяца после получения соединение имеет черно-коричневый цвет, а также обладает свойствами отличными от тех, которые были вначале. Это происходит потому, что во время хранения соединения образовался продукт разложения, который труднорастворим в воде. Поэтому нельзя считать, что соединение обладает свойствами, пригодными для включения его в рецептуру фармацевтического препарата.

Бисульфат 2,3-(метилендиокси)-5-метил-7-гидрокси-8-метокси-бензо[c] фенантридиния (соединение А О), где кислотным остатком является бисульфат ион , представляет собой соединение по изобретению, и его можно получить в виде желтого порошка. Когда это соединение хранят при комнатной температуре в течение 1 месяца, то не происходит изменение его цвета, и, поэтому, соединение по существу отличается в этом качестве от вышеуказанного хлоридного соединения, где кислотный остаток Х^- представляет собой ион хлорида Сl^-. Более того, не наблюдается изменения цвета и никакого разложения в случае соединения по изобретению, имеющего форму желтого порошка, даже после хранения его в течение 3 месяцев после его получения. Водный раствор 0,5 микромоль/л 2,3-(метилендиокси)-5-метил-7-гидрокси-8-метокси-бензо[c]фенантридиния хлорида, где кислотным остатком Х^- является хлоридный ион Сl^-, имеет значение рН равное 4,3. С другой стороны, водный раствор 0,5 микромоль/л 2,3-(метилендиокси)-5-метил-7-гидрокси-8-метокси-бензо[c] фенантридиния бисульфата по изобретению, где кислотным остатком Х^- является бисульфат ион HSO^-₄, имеет рН 3,9. Таким образом, бисульфатная соль соединения имеет более низкое значение рН, и поэтому считается, что указанное соединение обладает большей стойкостью к чужеродным основным материалам и, соответственно, является более стабильным. Никаких недостатков в фармацевтической активности у таких соединений нет, когда они имеют форму кислых солей, таких как бисульфатные соли. Поэтому кислые соли соединений являются практически полезными в качестве лекарств, учитывая их повышенную стабильность.

Далее показательные примеры производных бензо[c]фенантрилиния общей формулы А показаны в таблице 1. Однако следует отметить, что соединения по изобретению не ограничены только теми, которые приведены в таблице.

Показательные примеры промежуточных соединений, имеющих общую формулу D, приведены в таблице 2.

Показательные примеры промежуточных соединений, имеющих общую формулу С, приведены в таблице 3.

Испытание.

Здесь приведены примеры фармацевтических испытаний. Производные бензо[с] фенантридиния по изобретению обладают активностью ингибировать рост различных культивируемых опухолевых клеток, как показано ниже. Более того, производные также обладают активностью ингибировать агрегацию тромбоцитов, вызванную факторами активации тромбоцитов.

1. Активность ингибировать рост опухолевых клеток Различные опухолевые клетки выращивали при 37^oC в течение 24 часов в 5% газообразном углекислом газе, а затем подвергали действию испытываемого лекарства в течение 2 4 дней. После этого клетки подкрашивали 0,05% Метиленовым голубым. Пигмент экстрагировали из окрашенных клеток. Скорость ингибирования роста клеток определяли на основании поглощения экстрагированного пигмента при 660 нм, и рассчитывали концентрацию 50% ингибирования роста (IC₅₀). Результаты испытания приведены в таблице 4.

В этой таблице приведены сокращенные названия следующих опухолевых клеток: НеLa S3 карцинома сolli; MMI рак яичника. SHIN-3 рак яичника; N-231 мелкоклеточный рак легкого; Lu-130 мелкоклеточный рак легкого; Nakajima рак желудка; и выражение "n. t." означает "не испытывали". Эти испытания были проведены в соответствии с одновременным сравнительным методом испытания, за исключением случая HeLaS3.

2. Активность ингибирования агрегации тромбоцитов Богатую тромбоцитами плазму собрали из японских белых кроликов (весом 3-4 кг). В качестве средства, индуцирующего агрегацию тромбоцитов, использовали фактор активации тромбоцитов (PAF) в конечной концентрации 10^-7 моль/л. Испытываемое лекарство добавляли к богатой тромбоцитами плазме. После инкубиpования в течение определенного периода времени добавили PAF, чтобы вызвать реакцию агрегации тромбоцитов. Реакцию останавливали с помощью ЭДТА. После центрифугирования удалили поверхностный слой, чтобы получить тромбоцитный осадок. К тромбоцитному осадку добавили дистиллированную воду, чтобы таким способом провести реакцию оставшегося в тромбоцитах серотонина с ортофталальдегидным реагентом и получить конденсат серотонина-ортофталальдегида. Конденсат измеряли при длине волны возбуждения 360 нм и при длине волны измерения 475 нм. Анти-PAF активность испытываемого лекарства определяли с помощью следующего уравнения.

Степень ингибирования выделения серотонина (%) В уравнении выражение "величина" означает "величина серотонина".

Результаты испытаний нескольких соединений приведены в таблице 5.

Как видно из таблицы 5, испытываемые лекарства проявляют действенную активность ингибировать агрегацию тромбоцитов.

3. Острая токсичность В испытании острой токсичности соединения по изобретению внутривенно вводили в самок мышей СDF₁ в возрасте 6 недель. Мыши выживали при дозе 100 мг/кг без проявлений летальной токсичности.

Если производные бензо[c] фенантридиния общей формулы А по изобретению используют в качестве лекарств, то эти соединения можно включить в рецептуру фармацевтических препаратов, и такие препараты можно использовать различными известными способами. Таким образом, препараты можно использовать парентерально, орально, внутриректально и т.д. Препараты могут иметь форму препарата для инъекций, форму порошка, гранул, таблеток, суппозиториев и т.д. При получении фармацевтических композиций можно использовать разнообразные вспомогательные реагенты для лекарств, в частности, носитель и другие компоненты, например стабилизаторы, антисептики, болеутоляющие средства, эмульгаторы и т.д. если они нужны или желательны.

В фармацевтических композициях содержание производных бензо[c]фенантридиния общей формулы А может изменяться в широких пределах в зависимости от формы препаратов. Обычно композиции могут содержать производные общей формулы А в количестве от 0,01 до 100% по весу, предпочтительно от 0,1 до 50% по весу. Остальное составляет носитель или другие вспомогательные реагенты, обычно используемые для известных фармацевтических композиций.

Доза производных бензо[c]фенантридиния общей формулы А изменяется в зависимости от состояния больных, но как правило, она составляет примерно от 50 до 500 мг в день для взрослого.

Из приведенных выше результатов испытаний можно сказать, что производные бензо[c] фенантридиния общей формулы А по настоящему изобретению обладают не только противоопухолевой активностью против различных опухолевых клеток, но также и активностью ингибировать агрегацию тромбоцитов, причем последняя активность считается связанной с активностью ингибировать метастаз рака. Поэтому считается, что соединения по изобретению можно эффективно использовать в качестве лекарств для лечения рака. Если соединения по изобретению используют в виде солей, то выгодно использовать кислые соли соединений по тем причинам, что кислые соли соединений способствуют увеличению стабильности фармацевтических препаратов, содержащих соединения.

Теперь будет приведено подробное объяснение получения различных показательных производных бензо[c]фенантридиния общей формулы А с помощью показанных ниже примеров. Однако следует отметить, что объем изобретения не ограничен только этими примерами.

Пример 1.

Синтез 2,3-(метилендиокси)-5-нитронафталина (соединение I).

19,3 г (0,094 моль) 2,3-(дигидрокси)-5-нитронафталина, в качестве исходного материала, и 71,5 г (0,47 моль) фторида цезия добавляли к 290 мл безводного диметилформамида. Полученную смесь перемешивали, чтобы получить раствор. Раствор смешивали с 6,63 мл (0,103 моль) дихлорметана и нагревали до 110^oC. После этого стадию добавления такого же количества дихлорометана повторяли четыре раза с интервалом 1 час, а затем реакционную смесь нагревали в течение 2 часов, чтобы завершить реакцию. После охлаждения реакционную смесь разбавили водой и экстрагировали диэтиловым эфиром. Раствор экстракта сушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и cконцентрировали. Полученный остаток перекристаллизовали из этилацетата, получив при этом 10,7 г первых кристаллов и 1,82 г вторых кристаллов. Далее маточный раствор сконцентрировали и очищали хроматографией на колонке силикагеля, где использовали в качестве элюента смесь петролейного эфира-этилацетата (9:1), получив при этом 2,00 г кристаллического материала. Общее количество полученного соединения 1 было 14,55 г (выход: 71%).

Соединение I: желтый порошок.

¹Н-ЯMP (200 МГц), DMCO-d₆, ppм: 6,26 (С. 2Н), 7,52 (Т. J 8,0 Гц, 1Н), 7,58 (с. 1Н), 7,74 (с. 1Н), 8,55 (шир. д. J 8,0 Гц, 2Н).

Пример 2.

Синтез 2,3-(метилендиокси)-5-нафтиламина (соединение 2).

4,687 г (0,0216 моль) соединения I растворили в 200 мл этанола. Полученный раствор смешивали с 10 мл гидразингидрата и с 1 г каталитического 5% палладированного угля, и смесь нагревали с обратным холодильником в течение 80 минут. После охлаждения каталитический палладированный уголь отфильтровали и фильтрат сконцентрировали. Полученный таким образом неочищенный кристаллический материал очищали хроматографией на колонке силикагеля, где использовали в качестве элюанта смесь петролейного эфира-этилацетата (1:2), получив 3,566 г соединения 2 (выход: 88%).

Соединение 2: светло-желтовато-коричневый порошок.

¹Н-ЯMP (200 МГц), DMCO-d₆, ppм: 6,07 (с. 2Н), 5,44 (шир. с. 2Н), 6,54 (дд, J 7,2, и 1,5 Гц, 1Н), 6,92 (шир. д. J 8,0 Гц, 1Н), 7,02 (дд, J 8,0 и 7,2 Гц, 1Н), 7,12 (с. 1Н), 7,47 (с. 1Н).

Пример 3.

Cинтез N-[(2'-бензилокси)-3'-метокси-6'-бромобензил]-6,7- (метилендиокси)-1-нафтиламина (соединение С-1).

3,548 г (18,95 миллимоль) соединения 2 и 6,304 г (19,63 миллимоль) 2-(бензилокси)-3-метокси-6-бромобензальдегида растворяли в 100 мл толуола. Полученный раствор нагревали до 110 ^oC в течение 1 часа, а затем концентрировали под пониженным давлением в роторном испарителе. Полученный таким образом остаток смешали с 80 мл свежего толуола, и полученную смесь нагревали в течение 1 часа, а затем сконцентрировали под пониженным давлением таким же образом, как указано выше. Полученный остаток (Шиффово основание) смешали с 50 мл толуола и охлаждали в бане с ледяной водой. Затем раствор 1,31 г (20,85 миллимоль) цианоборогидрида натрия в 50 мл метанола добавляли по каплям к охлажденному раствору при перемешивании в течение 45 минут. Через 1 час реакционную смесь разбавили водой и экстрагировали хлороформом. Органический слой высушили над безводным сульфатом натрия, затем отфильтровали и после этого сконцентрировали. Полученный остаток растворили в небольшом количестве хлороформа, а затем добавили по порциям такое же количество петролейного эфира, чтобы осадить кристаллический материал, который затем отделили фильтрованием и высушили, получив таким образом 5,674 г соединения С-I. Маточный раствор сконцентрировали и очищали с помощью хроматографии на колонке силикагеля, где использовали в качестве элюанта смесь петролейного эфира-хлороформа-этилацетата (16:4:1), получив таким образом, 1,415 г соединения С-1. Полное количество соединения С-1, которое получили, составляло 7,089 г (выход: 76%).

Соединение С-1: белый порошок.

¹Н-ЯMP (200 МГц), СDCl₃, (ppм): 3,90 (с. 3Н) 4,37 (шир. 1Н) 4,48 (с. 2Н), 5,04 (с. 2Н), 5,99 (с. 2Н), 6,74 (дд, J 7,4 и 1,2 Гц, 1Н, 6,82 (д. J 8,8 Гц, 1Н), 7,05 (с. 1Н), 7,07 (с. 1Н), 7,07 (с. 1Н), 7,11 (шир. д. J 8,0 Гц, 1Н), 7,33 (д, J 8,8 Гц, 1Н), 7,18 7,37 (м. 6Н).

ИК-спектр (КBг), (см^-1): 3396, 3096, 3064, 3038, 2998, 2944, 2906, 2845, 1621, 1603, 1573, 1538 (сильн.), 1501, 1464 (очень сильный), 1435, 1400, 1393, 1371, 1316, 1285 (сильн.), 1271 (сильн.), 1251 (сильн.), 1218, 1202, 1194, 1173, 1144, 1131, 1099, 1072, 1040 (сильн.), 993, 990, 948, 916, 907, 862, 831, 795, 778, 757, 739, 687.

Пример 4 Синтез N-[(2'-бензилокси)-3'-метокси-6'-бромобензил] -6-метокси-7-изопропокси-1-нафтиламина (cоединение С-3).

463 мг 2-метокси-3-изопропокси-5-нафтиламина и 707 мг 2-(бензилокси)-3-метокси-6-бромобензальдегида подвергали стадии реакции способом аналогичным тому, который показан в примере 3. Получили 970 мг соединения С-3 с выходом 90% Соединение С-3: белый порошок.

¹Н-ЯМP (200 МГц), СDCl₃, (ppм): 1,36 (д. J 6. 0 Гц, 6Н), 3,88 (с. 3Н), 3,94 (с. 3Н), 4,53 (с. 2Н), 4,57 (септет, J 6,0 Гц, 1Н), 4,58 (шир. 1Н), 5,03 (с. 2Н), 6,75 (дд. J 7,5 1,0 Гц, 1Н), 6,80 (д. J 9,0 Гц, 1Н), 7,08 (с. 1Н), 7,09 (с, 1Н), 7,13 (шир, д. J 7,5 Гц, 1Н), 7,22 (т, J 7,5 Гц, 1Н), 7,24 7,31 (м, 3Н), 7,32 (д, J 9,0 Гц, 1Н), 7,34 7,41 (м. 2Н).

Пример 5.

Синтез N-[(2'-бензилокси)-3'-метокси-6'-бромобензил]-6- изопропокси-7-метокси-1-нафтиламина (cоединение C-4).

463 мг 2-изопропокси-7-метокси-5-нафтиламина и 481 мг 2-(бензилокси)-3-метокси-6-бромобензальдегида подвергали стадии реакции способом аналогичным способу примера 3, получив 800 мг соединения С-4 (выход: 99%).

Соединение С-4: белый порошок.

¹Н-ЯMP (200 МГц), СDCl₃, (ppм): 1,43 (д, J 6,0 Гц, 6Н), 3,84 (с, 3Н), 3,89 (с, 3Н), 4,54 (с, 2Н), 4,60 (шир. 1Н), 4,69 (септет, J 6,0 Гц, 1Н), 5,04 (с. 2Н), 6,76 (дд. J 7,5 1,0 Гц, 1Н), 6,81 (д. J 9,0 Гц, 1Н), 6,97 (с. 1Н), 7,105 (с. 1Н), 7,113 (шир.д. J 7,5 Гц, 1Н), 7,22 (т. J 7,5 Гц, 1Н), 7,24 7,30 (м, 3Н), 7,33 (д, J 9,0 Гц, 1Н), 7,32 - 7,41 (м. 2Н).

Пример 6.

Синтез N-[(2'-бензилокси)-3'-метокси-6'-бромобензил] -6,7-диизопропокси-1-нафтиламина (соединение С-6) 406 мг 2,3-диизопропокси-5-нафтиламина и 707 мг 2-(бензилокси)-3-метокси-6-бромобензальдегида контактировали в cтадии реакции аналогично тому, как описано в примере 3, получив 756 мг соединения С-6 (выход: 89%).

Соединение С-6: белый порошок.

¹Н-ЯMP (200 МГц), CDCl₃, (ppм): 1,32 (д, J 6,1 Гц, 6Н), 1,39 (д, J 6,1 Гц, 6Н), 3,88 (с, 3Н), 4,49 (септет, J 6,1 Гц, 1Н), 4,51 (с. 2Н), 4,55 (шир. 1Н), 4,61 (септет, J 6,1 Гц, 1Н), 5,03 (с. 2Н), 6,72 (дд, J 7,5 1,1 Гц, 1Н), 6,80 (д, J 8,8 Гц, 1Н), 7,08 7,40 (м. 10Н).

ИК-спектр (KBг), (см^-1): 3420, 2978, 2936, 1626, 1595, 1581, 1522, 1468 (сильн. ), 1437, 1383, 1334, 1277, 1253 (сильн.), 1215, 1182, 1159, 1139, 1112, 1079, 1022, 982, 954, 925, 860, 840, 800, 773, 735, 695.

Пример 7.

Синтез N-[(2'-бензилокси)-3'-метокси-6'-бромобензил] -1-нафтиламина (соединение С-7).

1,718 г 5-нафтиламина и 4,239 г 2-(бензилокси)-3-метокси-6-бромобензальдегида контактировали в стадии реакции аналогично тому, как описано в примере 3, получив 3,71 г соединения С-7 (выход: 62,7%).

Соединение С-7: белый порошок.

¹Н-ЯMP (200 МГц), СDCl₃, (ppм): 3,90 (с. 3Н), 4,52 (с. 2Н), 4,80 (шир. 1Н), 5,06 (с. 2Н), 6,80 6,85 (м. 2Н), 7,22 7,47 (м. 10Н), 7,68 7,81 (м. 2Н) ИК-спектр (KBг), (см^-1): 3999 (сильн.), 3070, 2944, 2856, 1626, 1581 (сильн. ), 1531, 1481, 1467 (сильн.), 1432, 1410, 1372, 1355, 1336, 1296, 1272 (сильн.), 1227, 1215, 1200, 1178, 1144, 1109, 1088, 1073 (сильн.), 983, 959, 911, 865, 795, 783, 764 (сильн.), 741, 690.

Пример 8.

Синтез 2,3-(метилендиоки)-7-бензилокси-8-метокси- бензо[c] фенатридина (соединение D-1).

1,968 г (4 миллимония) соединения C-I и 2,91 г (10 миллимоль) гидрида трибутилолова растворяли в 100 мл толуола, и полученный раствор нагреватели до 110^oC. К этому раствору добавляли 0,8 г 2,2'-азобис(изобутиронитрила). Через 30 минут реакционный раствор охладили до комнатной температуры, затем смешали с 2 г активной двуокиси марганца и перемешивали в течение 20 минут. Затем соединение марганца отделили фильтрованием, и фильтрат сконцентрировали под пониженным давлением. Полученный таки