Производное 4-дезокси-4-эпиподофиллотоксина или его фармацевтически приемлемая соль и фармацевтическая композиция на его основе

Производное 4-дезокси-4-эпиподофиллотоксина или его фармацевтически приемлемая соль и фармацевтическая композиция на его основе

Реферат

 

Использование: в медицине в качестве противоопухолевого агента. Сущность изобретения: продукт-производное 4-дезокси-4-эпиподофиллотоксина формулы (I), где R₁ - является Н, метилом, бензилоксикарбонилом, низшим алканоилом, который может иметь один или более атомов галогена или группу формулы Si(Rx)(Ry)(Rz), где радикалы являются одинаковыми или различными и каждый представляет низший алкил, или фенил, R - является низшим алкенилом, низшим алкилом, имеющим по крайней мере одну гидроксильную группу, группой формулы -(CH₂)_mСНО, где m - является целым числом от 0 до 4, низшим алкилом, имеющим кетоальдегидную группу, или группой формулы (CH₂)nNHR₂R₃, где n является целым числом от 1 до 6, а радикалы являются одинаковыми или различными и каждый является атомом Н, циклоалкилом, группой ф-лы -N(Ra)(Rb), где радикалы Ra и Rb являются одинаковыми или различными и каждый является низшим алкилом или фенилом, или радикалы могут быть объединены с образованием замещенной низшим алкилом пиперазиновой группы; или низшим алкилом, который может быть замещен гидроксилом, низшим алкокси, фенилом, 6-членной азотсодержащей гетероциклической группой или группой формулы N(Rc)(Rd), где радикалы Rc и Rd являются одинаковыми или различными и каждый является низшим алкилом R₂ и R₃ могут быть объединены с образованием циклической структуры, которая может необязательно включать дополнительные атомы кислорода и/или азота и может, кроме того, иметь низший алкил, который может быть замещен гидроксилом, или пиперидиновую группу в качестве заместителя, при условии, однако, что когда R₁ является H, R-группой ф-лы (CH_2mCHO или группой ф-лы (CH_2nNH₂R₃, или их фармацевтически приемлемые соли, и фармацевтическая композиция на его основе. Соединение 1 обладает противоопухолевой активностью ED 50 составляет 1,210 в степени минус 7^oC6,310 в степени минус 9. Фармацевтическая композиция включает носитель и активное вещество - соединение ф-лы 1 или его фармацевтически приемлемой соли в дозе 0,1 - 5000 мг/сут. Структура соединения ф-лы 1 2 с. и 7 з.п. ф-лы, 2 табл.

Изобретение относится к новым производным 4-дезокси-4-эпиподофиллотоксина и их фармацевтически приемлемым солям, которые обладают противоопухолевой активностью и могут быть использованы в качестве противоопухолевых агентов.

Давно уже известны производные подофиллотоксина, обладающие противоопухолевой активностью, и среди них этопозид и тенипозид. Однако эти соединения могут вызвать серьезные вредные реакции, включая лейкопению, тромбопению, алопецию, тошноту и рвоту, поэтому они не могут быть допущены для использования в клинике с гарантированной безопасностью. Итак, до сих пор не были обнаружены удовлетворительные соединения.

Отмечая эти проблемы известного уровня техники, автор предлагаемого изобретения с энтузиазмом разрабатывал данную область технологии и обнаружил, что новое производное 4-дезокси-4-эпиподофиллотоксина следующей общей формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль обладают очень высокой противоопухолевой активностью и являются полезными в качестве противоопухолевого агента. Это открытие и легло в основу изобретения.

Итак, предлагаемое изобретение обеспечивает 4-дезокси-4-эпиподофиллотоксиновое производное общей формулы (I) где R₁ является атомом водорода, метилом, бензолоксикарбонилом, низшим алканоилом, который может иметь один или более атомов галоида, или группой формулы Si(R_x)(R_y)(R_z, где R_x, R_y и R_z являются одинаковыми или различными и каждый является низшим алкилом или фенилом; R является низшим алкенилом, низшим алкилом, имеющим по крайней мере одну гидроксильную группу, группой формулы -(CH₂)_mCHO, где m является целым числом от 0 до 4, низшим алкилом, имеющим кетоальдегидную группу, или группой формулы -(NCH₂)_nNR₂R₃, где n является целым числом от 1 до 6; R₂ и R₃ являются одинаковыми или различными и каждый является атомом водорода, циклоалкилом, группой формулы N(R_a)(R_b) где R_a и R_b является одинаковыми или различными и каждый является низшим алкилом или фенилом, или R_a и R_b могут быть объединены с образованием низший алкилзамещенной пиперазиновой группы), или низшим алкилом, который может быть замещен гидроксилом, низшим алкокси, фенилом, 6-тичленной азотсодержащей гетероциклической группой или группой формулы - N(R_c)(R_d), где R_c и R_d являются одинаковыми или различными и каждый является низшим алкилом; R₂ и R₃ могут быть объединены с образованием циклической структуры, которая необязательно может включать дополнительные атомы кислорода и/или азота и может дополнительно иметь низшим алкил, который может быть замещен гидроксилом, или пиперидиновую группу в качестве заместителя, при условии, однако, что когда R₁ является атомом водорода, R является (CH₂)_mCHO или (CH₂)_nN R₂R₃, или его фармацевтически приемлемую соль.

Соединение общей формулы (I) согласно изобретению обладает отличной противоопухолевой активностью и является эффективным при лечении различных опухолей.

Следовательно, изобретение обеспечивает противоопухолевую композицию, содержащую эффективное количество соединения указанной выше формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемый носитель.

Кроме того, изобретение обеспечивает способ лечения опухолей у млекопитающих животных, который заключается во введении соединения указанной выше формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли млекопитающим животным.

Ссылаясь на указанную выше общей формулы (I), низшая алканоильная группа R₁ включает С_2-5-алканоильную группу с прямой или разветвленной цепью, такую как ацетил пропионил, бутирил изобутирил, валерил, озовалерил, пивалоил и т. п. и атомом галоида может быть, например, фтор, хор, бром или иод. Низшая алкильная группа, как обозначено R_x, R_y, R_z, R₂, R₃, R_a, R_b, R_c и R_d, включают С_1-16-алкил с прямой или разветвленной цепью, такой как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор. бутил, трет. бутил, пентил, неопентил, гексил и т. п. Низшая алкенильная группа R включает С_2-6-алкенил с прямой или разветвленной цепью, такой как винил, 1-пропенил, изопропенил, аллил, 2-бутенил, 2-метил-2-бутенил, 3-пентенил 4-гексенил и т. п. Низший алкил, имеющий гидроксильную группу, включает С_1-6-алкил имеющий 1 или 2 гидроксильные группы, такой как оксиметил, 2-оксиэтил, 2-оксипропил, 3-оксипропил, 2,3-диоксипропил, 2,3-диоксибутил, 2,3-диоксипентил, 2,3-диоксигексил и т. п. Низший алкил имеющий кетоальдегидную группу, включает С_1-6-алкил, имеющий альфа- или бета-кетоальдегидную группу, такой как 2-окси-2-формил-1-этил, 2-оксо-3-формил-1-пропил, 3-оксо-3-формил-1-пропил, 3-оксо-4-формил-1-бутил и т.п.

Кроме того, ссылаясь на приведенную выше общую формулу (1), низшая алкоксигруппа, в определении R₂ и R₃, включает С_1-6-алкоксигруппу с прямой или разветвленной цепью, такую как метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, изобутокси, втор.бутокси, трет.бутокси, понтилокси, гексилокси и т. п. Циклоалкильная группа включает С_3-6-циклоалкил, такой как циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и т.п. Содержащая азот 6-тичленная гетероциклическая группа включает такие гетероциклические группы, как пиридил, пиперидино, морфолино и т.п. Циклическая структура, которую могут совместно образовывать R₂ и R₃ и которая, кроме того, может содержать дополнительный атом кислорода и/или азота, включает пирролидин, пиперидин, морфолин, пиперазин и т. п.

Фармацевтически приемлемая соль производного 4-дезокси-4-эпиподофиллотоксина согласно изобретению включает соответствующие соли различных органических кислот, таких как муравьиная, уксусная, пропионовая, трифторуксусная, винная, молочная, малеиновая, фумаровая, янтарная, щавелевая и др.кислоты и различных неорганических кислот, таких как соляная, бромистоводородная, серная, фосфорная и т. п. кислоты.

Предпочтительными соединениями общей формулы (I) являются соединения, у которых R₁ является атомом водорода или бензилоксикарбонильной группой, а R является группой формулы -(CH₂)_nNR₂R₃.

Наиболее желательными являются те соединения, у которых R₁ является атомом водорода и R является группой формулы -(CH₂)_nNR₂R₃, где n равно 2 или 3, R₂ и R₃ являются одинаковыми или различными и каждый является атомом водорода, группой формулы N (R_a) (R_b)), где R_a и R_b являются одинаковыми или различными и каждый является низшим алкилом или R_a и R_a вместе могут образовывать замещенную низшим алкилом пиперазиновую группу (или низшим алкилом, который может быт замещен 6-тичленной азотсодержащей группой или группой формулы -N(R_c)(R_d) где R_c и R_d являются одинаковыми или различными и каждый является низшим алкилом, или R₂ и R₃ могут быть объединены с образованием циклической структуры, которая может включать дополнительные атомы кислорода и/или азота и может быть замещена низшим алкилом или пиперидиновой группой.

Cоединение общей формулы (I) согласно изобретению может быть получено в соответствии со следующей реакционной схемой 1, приведенной в конце описания (в приведенных выше формулах R₄ является метилом, бензилоксикарбонилом, низшим алканоилом, который может иметь один или более атомов галоида или группой формулы -Si(R_x)(R_y)(R_z), где R_x, R_y и R_z имеют указанные выше значения) R₅ является низшим алкенилом; R₆ является гидроксилсодержащим алкилом; R₇ является группой формулы -CH₂)_mCHO, где m имеет указанные ранее значения или низшим алкилом, имеющим кетоальдегидную группу; R₈ является группой формулы -(CH₂)_mCHO; R₉ является метилом, бензилоксикарбонилом, низшим алканоилом, который может иметь атом, галоида или группу формулы -Si(R_x)(R_y)(R_z), где R_x, R_y и R_z имеют указанные ранее значения); R₂, R₃ и n соответственно имеют указанные ранее значения при условии, что, однако, R₄ и R₉ не являются одинаковыми.

Теперь объясняется каждый из процессов, схематически показанных выше.

Процесс А.

Известный 4-эпиподофиллотоксин общей формулы (II) вводят в реакцию с низшим алкенилсиланом общей формулы (III) в присутствии кислоты Льюиса в соответствующем растворителе, чтобы получить желаемое производное общей формулы (Ia) которое соответствует общей формуле (I), где R является низшим алкенилом. Растворитель специально не ограничивается, поскольку он не принимает участия в реакции. Полезные растворители включают, например, такие апротонные растворители, как галоидированные углеводороды, например, дихлорметан, хлороформ, 1,2-дихлорэтан и т. п. и простые эфиры, например, тетрагидрофуран, диоксан и т. п. Может быть использована кислота Льюиса, включая, например, четыреххлористый титан, триметилсилилтрифторметансульфонат, бромид цинка, эфират (этилового эфира) трехфтористого бора и т. п. Для этой реакции соединение общей формулы (III) предпочтительно используют в пропорции 1-5 мольных эквивалентов, считая на соединение общей формулы (II), а кислоту Льюиса предпочтительно используют в пропорции 0,5 3-мольных эквивалента, считая на соединение общей формулы (II). Температура реакции обычно равна от -100 до 100^oC, а предпочтительно от -20 до 20^oC.

Процесс В.

Производное общей формулы (Ia), полученное в Процессе А, окисляют в инертном растворителе для получения целевого производного общей формулы (Iв), которое соответствует общей формуле (I), в которой R является гидроксилсодержащим алкилом. В качестве растворителя могут быть использованы четыреххлористый углерод, ацетонитрил, уксусная кислота, вода, пиридин и т. п. один или в сочетании. Окисляющим агентом может быть, например, оксид рутения, периодат натрия или тетраоксид осмия. Для этой реакции окисляющий агент предпочтительно используют в пропорции 0,1 2 мольных эквивалента по отношению к соединению общей формулы (Ia). Температура реакции равна от -10 до 80^oC, предпочтительно 0 20^oC.

Процесс С.

Производное общей формулы (Ia), полученное в Процессе А, подвергают одновременно окислению и восстановлению в инертном растворителе для получения целевого соединения общей формулы (Ic), которая соответствует указанной формуле (I), в которой R является группой формулы -(CH₂)_mCHO или низшей алкильной группой, имеющей кетоальдегидную группу. В качестве растворителя могут быть использованы четыреххлористый углерод, метиленхлорид, уксусная кислота, вода, тетрагидрофуран, пиридин и т.п. индивидуально или в сочетании. Восстанавливающим агентом может быть, например, боран-диметилсульфид, триамилборан-диметилсульфид или подобный, тогда как в качестве окисляющего агента может быть, например, использована хромовая кислота или пиридинийхлорхромат. Для этой реакции восстанавливающий агент предпочтительно используют в пропорции 0,5 2-мольных эквивалента, а окисляющий агент в пропорции 1 3-мольных эквивалента, оба считая на соединений общей формулы (Ia). Температура реакции равна от -10 до 50^oC, предпочтительно 0 20^oC.

Процесс Д.

Целевые производные общей формулы (Ic), соответствующей общей формуле (I), в которой R является группой формулы -(CH₂)_mCHO или низшим алкилом, имеющим кетоальдегидную группу, также могут быть получены при окислении в инертном растворителе производного общей формулы (Iв), полученного в процессе В. В качестве растворителя могут быть использованы четыреххлористый углерод, метиленхлорид, уксусная кислота, тетрагидрофуран, диэтиловый эфир, бензол и т. п. индивидуально или в сочетании. Окисляющим агентом может быть, например, перманганат калия, тетраацетат свинца, пиридинийхлорхромат и т.п. Для этой реакции окисляющий агент предпочтительно используют в пропорции 0,8 3-мольных эквивалента к соединению общей формулы (Ib). Температура реакции равна 0 50^oC, а предпочтительно 0 20^oC.

Процесс Е.

Производное общей формулы (Ic), полученное в Процессе С или Д, каталитически восстанавливают в присутствии катализатора в инертном растворителе, чтобы получить целевое соединение общей формулы (Id), которая соответствует общей формуле (I), в которой R является группой формулы -(CH₂)_mCHO. Растворитель специально не ограничивается, поскольку он не участвует в реакции. В качестве растворителя, например, могут быть использованы этилацетат, метанол, тетрагидрофуран и т.п. индивидуально или в сочетании. Катализатором может быть, например, палладиевая чернь, платина и т. п. Давление водорода может составлять 1 3 атм, а предпочтительно 1 2 атм. Температура реакции равна 0 40^oC, предпочтительно комнатной температуре.

Процесс F.

Производное общей формулы (I d), полученное в процессе Е, вводят в реакцию с ацилирующим агентом или силилирующим агентом в присутствии основания в инертном растворителе, чтобы получить целевое соединение общей формулы (Ie). Растворитель специально не ограничивается, поскольку он не участвует в реакции, могут быть использованы четыреххлористый углерод, метиленхлорид, тетрагидрофуран, бензол, диметилформамид, диметилацетамид и т. п.( индивидуально или в сочетании). Основанием может быть, например, пиридин, диметиламинопиридин, имидазол и т.п. Ацилирующий агент включает, например, ангидриды кислот, такие как уксусный ангидрид, изомасляный ангидрид, пропионовый ангидрид, масляный ангидрид, ангидрид валериановой кислоты, хлоруксусный ангидрид и т. п. и галоидангидриды кислот, такие как ацетилхлорид, пропионилхлорид н-гексаноилхлорид, хлорацетилхлорид, дихлорацетилхлорид, трихлорацетилхлорид, бензилоксикарбонилхлорид и т. п. Силилирующий агент включает трет.бутилдиметилсилилхлорид, триизопропилоилилхлорид, трет. бутилдифенилсилилхлорид и т. п. Для этой реакции основание предпочтительно используют в пропорции 0,01-7 мольных эквивалентов, а ацилирующий агент или силилирующий агент предпочтительно используют в пропорции 1 5-мольных эквивалентов, оба считая на соединение общей формулы (Id). Температура реакции равна 0 50^oC, предпочтительно 0 20^oC.

Процесс G.

Производное общей формулы (Ic), полученное в Процессе С или Д, подвергают восстановительному аминированию аминосоединением общей формулы (IV) в инертном растворителе, чтобы получить целевое соединение общей формулы (If), которая соответствует общей формуле (I), в которой R является группой формулы (CH₂)_nNR₂R₃. Растворитель специально не ограничивается, поскольку он не участвует в реакции. Так, например, могут быть использованы спирты, такие как метанол, этанол и т. п. простые эфиры, такие как тетрагидрофуран, диоксан и т. п. органические кислоты, такие как уксусная кислота, муравьиная кислота и т.п. вода и т. д. индивидуально или в сочетании. Восстанавливающим агентом может быть, например, боргидрид натрия, цианоборгидрид натрия или т. п. Для этой реакции аминосоединение общей формулы (IV) предпочтительно используют в пропорции 0,9 3-мольных эквивалента, а восстанавливающий агент предпочтительно используют в пропорции 1 3-мольных эквивалента, оба считая на соединение общей формулы (Ic). Температура реакции равна 0 50^oC, предпочтительно 0 20^oC.

Процесс Н.

Производное общей формулы (If), полученное в Процессе G, каталитически восстанавливают в присутствии катализатора в инертном растворителе, чтобы получить желаемое производное общей формулы (Ig). Растворитель специально не ограничивается, поскольку он не участвует в реакции. Так могут быть, например, использованы этилацетат, метанол, тетрагидрофуран, ацетонитрил индивидуально или в сочетании. Катализатором может быть, например, палладиевая чернь, платина и т.п. Давление водорода может быть 1-3 атмосферы, предпочтительно 1-2 атмосферы. Температура реакции равна 0-40^oC, предпочтительно комнатной.

Соединение изобретения, полученное по любой из приведенных выше реакций, может быть превращено в соли по известным методикам, например, при взаимодействии его с указанной органической кислотой или неорганической кислотой в растворителе, таком как метиленхлорид, 1,2-дихлорэтан, тетрагидрофуран, этилацетат и т. п. при температуре около комнатной.

Соединение (Ia), (Ib), (Ic), (Id), (Ie), (If) и (Ig), полученные выше, могут быть выделены и очищены по процедурам, используемым обычно в этой области техники, таким как концентрирование, фильтрация, перекристаллизация, различные типы хроматографии и т. п.

Для использования в качестве терапевтического лекарства для лечение опухолей у млекопитающих, включая человека, соединение настоящего изобретения может быть предусмотрено в различных фармацевтических препаратах, таких как оральные препараты для инъекций, суппозитории и т.п. каждый из которых может быть приготовлен по установленной фармацевтической процедуре.

При формулировании твердых препаратов для орального введения соединение изобретения формулируется с экципиентом и (при необходимости) связующим, дезинтегратором, смазывающим веществом, окрашивающим агентом, модификатором фармацевтических веществ, отдушкой и т. п. и перерабатывается в таблетки, покрытые таблетки, гранулы, порошки, капсулы и т.п. обычным образом. Добавки являются такими, какие обычно используются в этой области. Например, экципиент включает лактозу, сахарозу, хлорид натрия, глюкозу, крахмал, карбонат кальция, каолин, микрокристаллическую целлюлозу, кремниевую кислоту и т. п. Связующее включает воду, этанол, пропанол, простой сироп, раствор глюкозы, раствор крахмала, раствор желатины, карбоксиметилцеллюлозу, оксипропилцеллюлозу, оксипропилкрахмал, метилцеллюлозу, этилцеллюлозу, шеллак, фосфат кальция, поливинилпирролидон и т.п. Дезинтегратор включает сухой крахмал, альгинат натрия, агаровый порошок, кислый карбонат натрия, карбонат кальция, лаурилсульфат натрия, стеарилмоноглицерид, лактозу и т. п. Смазывающее вещество включает очищенный тальк, если стеариновой кислоты, боракс, полиэтиленгликоль и т. п. Модификатор включает сахарозу, апельсиновую цедру, лимонную кислоту, винную кислоту и т. п.

Для формулирования жидких препаратов для орального введения соединение изобретения может быть сформулировано с модификатором, буфером, стабилизатором, отдушкой и/или т. п. а полученная в результате композиция может быть переработана в растворы для орального применения, сиропы, эликсиры и т. п. обычным образом. Модификатор для этой цели может быть любым из упомянутых выше. Буфером может быть, например, цитрат натрия, а стабилизатором может быть например, трагакант, гуммиарабик, желатина или т. п.

Для формулирования препаратов для инъекций соединение изобретения может быть сформулировано с регулирующим рН агентом, буфером, стабилизатором, изотоническим агентом, местным анестетиком и т. п. и переработано для подкожных внутримышечных и внутривенных инъекций. Регулирующий рН агент и буфер, которые могут быть использованы, включают цитрат натрия, ацетат натрия, фосфат натрия и т. п. Стабилизатор включает пиросульфит натрия, ЭДТА, тиогликолевую кислоту, тиомолочную кислоту и т. п. Местный анестетик включает прокаин гидрохлорид, лидокаин гидрохлорид и т. п.

Для формулирования суппозиториев соединение изобретения может быть сформулировано с фармакологическим носителем, хорошо известным на данном уровне техники, таким как полиэтиленгликоль, ланолин, какао масло, триглицериды жирных кислот, Вайтерсол (торговое название) и т. п. и при необходимости с таким поверхностно-активным веществом, как Твин (торговое название); полученную в результате композицию перерабатывают в суппозитории обычным образом.

Количество соединения предлагаемого изобретения в любой из приведенных выше форм дозы зависит от клинического состояния пациента, которому назначено лечение, и от конкретно выбранной формы дозы. Однако обычно предпочтительное количество на единицу дозы составляет примерно 1 1000 мг для оральных препаратов, примерно 0,1 500 мг для препаратов для инъекций и примерно 5 1000 мг для суппозиториев. Ежедневная дозировка любого фармацевтического препарата, упомянутого выше также зависит от состояния пациента, массы тела, возраста, пола и других факторов, но обычно рекомендуется вводить примерно 0,1 5000 мг, предпочтительно 1 1000 мг в день для взрослого пациента или в одной дозе, или 2 4 раздельных дозах.

Следующие примеры, фармакологические испытания и примеры препаратов далее иллюстрируют изобретение.

Пример 1. Синтез 4-дезокси-4'-диметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4-аллил-4-эпиподофиллотоксин (Соединение I).

К раствору 1 г (1,87 ммоль) 4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4-эпиподофиллотоксина в 15 мл дихлорметана прибавляют 426 мг (3,73 ммоль) триметилаллисилана и смесь охлаждают до -10^o 0^oC. К этому раствору прибавляют 0,6 мл эфирата этилового эфира трехфтористого бора и смесь перемешивают 1 ч. После окончания реакции прибавляют 0,6 мл пиридина и смесь выливают в холодную разбавленную соляную кислоту и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат и перегоняют, остаток очищают хроматографией на колонке (оксид кремния 50 г, элюент-хлороформ). Элюат концентрируют и кристаллизуют из эфира, получают 1 г (выход 95,7) 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4-аллил-4-эпиподофиллото- ксина (Соединение I).

Пример 2. Синтез 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4- (2,3-диокси-1-пропил)- 4- эпиподофиллотоксина (Соединение 2).

К раствору 1 г (1,79 ммоль) 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил -4-аллил-4 -эпиподофиллотоксина, полученного в примере 1, в 2 мл пиридина прибавляют 455 мг (1,79 ммоль) тетраоксида осмия и смесь перемешивают при комнатной температуре 1 ч. По окончании реакции прибавляют раствор 0,8 г кислого сульфита натрия в водном пиридине и смесь перемешивают еще 30 мин. Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом и экстракт промывают разбавленной соляной кислотой и водой и сушат. Органический слой концентрируют и очищают остаток хроматографией на колонке (50 г кремния, элюент хлороформ метанол 20:1). Элюат концентрируют и кристаллизуют остаток из эфира, получают 1,0 г (выход 94,2) 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4 -(2,3-диокси-1 -пропил) 4-эпиподофиллотоксина (Соединение 2).

Пример 3. Синтез 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4-формилметил-4 -эпиподофиллотоксина (Соединение 3).

К раствору 1 г (1,69 ммоль) 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4-(2,3-дигидрокси-1 -пропил)4-эпиподофиллотоксина, полученного в примере 2, в 80 мл бензола прибавляют 795 мг (1,79 ммоль) тетраацетата свинца и перемешивают смесь 30 минут при комнатной температуре. Затем реакционную смесь фильтруют и концентрируют фильтрат. Остаток очищают хроматографией на колонке (70 г оксида кремния, элюент хлороформ-метанол 20:1) и кристаллизуют из эфира, получают 934 мг (выход 98,7) 4-дезотокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4-формилметил -4-эпиподофиллотоксина (Соединение 3).

Пример 4. Синтез 4-дезокси-4'-деметил-4'-0 -бензилоксикарбонил-4- -(2-формил-1-этил)-4-эпиподофиллотоксина (Соединение 4) К раствору 4 г (7,17 ммоль) 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4-аллил-4-эпиподофиллото- ксина, полученного в примере 1, в 40 мл тетрагидрофурана прибавляют 4,3 мл (8,6 ммоль) 2 М-раствора боран-диметилсульфида в тетрагидрофуране по каплям при охлаждении льдом и затем смесь оставляют реагировать при комнатной температуре на 1 ч. Реакционную смесь концентрируют и остаток растворяют в 80 мл метиленхлорида, затем добавляют 3,0 г (13,9 ммоль) пиридинийхлорхромата. Смесь перемешивают при комнатной температуре. После реакции прибавляют 100 мл этилацетата и отфильтровывают нерастворимый материал с помощью флорисила. Фильтрат концентрируют и остаток очищают хроматографией на колонке (50 г оксида кремния, элюент гексанэтилацетат 1:1) и кристаллизуют из эфира, получают 1,85 г (выход 44,9) 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4-(2-формил-1-этил)- -4-эпиподофиллотоксина (Соединение 4) Пример 5. Синтез 4-дезокси-4'-деметил-4-формилметил-4-эпиподофиллотоксина (Соединение 5) К раствору 100 мг (0,178 ммоль) 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4-формилметил-4 -эпиподофиллотоксина, полученного в примере 3, в 10 мл этилацетата-метанола (1: 1) прибавляют 30 мг 5-ного палладия на угле и проводят каталитическое восстановление в токе водорода (при атмосферном давлении). После этой реакции отфильтровывают 5-ный палладий на угле и концентрируют фильтрат при пониженном давлении. Остаток кристаллизуют из эфира, получают 75 мг (выход 98,9) 4-дезокси-4'-деметил-4-формилметил-4-эпиподофиллотоксина (Соединение 5).

Пример 6 Синтез 4-дезокси-4'-деметил-4'-0 -бензилоксикарбонил-4- (-2-оксо-2-формил-1-этил)-4-эпиподофиллотоксина (Соединение 6).

К раствору 100 мг (0,17 ммоль) 4-дезокси-4' -деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4-(2,3-дигидрокси-1-пропил)- -4-эпиподофиллотоксина, полученного в примере 2, в 5 мл метиленхлорида прибавляют 73 мг (0,34 ммоль) пиридинийхлорхромата и смесь перемешивают при комнатной температуре 1 ч. После реакции прибавляют этилацетат и органический слой промывают холодной разбавленной соляной кислотой и насыщенным раствором хлорида натрия и сушат над сульфатом магния. Отгоняют растворитель и остаток очищают хроматографией на колонке (20 г оксида кремния, элюент хлороформ-метанол 20:1) и кристаллизуют из эфира, получают 45 мг (выход 45,0) 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4- (2-оксо-2-формил-1-этил(-4-эпиподофиллотоксина (Соединение 6).

Пример 7. Синтез 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-хлорацетил-4- формилметил-4-эпиподофиллотоксина (Соединение 7).

К раствору 50 мг (0,117 ммоля) 4-дезокси-4'-деметил-4-формил-4-эпиподофиллотоксина, полученного в примере 5, в 5 мл тетрагидрофурана пpибавляют 50 мг (0,292 ммоль) хлорацетилангидрида и 10 мг (0,081 ммоль) диметиламинопиридина и смесь перемешивают при комнатной температуре всю ночь. После реакции растворитель отгоняют и очищают остаток препаративной тонкослойной хроматографией (элюент хлороформ-метанол 30:1). Остаток, полученный при экстракции, кристаллизуют из этилацетата-Н-гексана и отфильтровывают кристаллы, получают 50 мг (выход 90,0) 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-хлорацетил-4 -формилметил-4-эпиподофиллотоксина (Соединение 7).

Пример 8. Синтез 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-трихлорацетил-4-формил-4- эпиподофиллотоксина (Соединение 8) К раствору 4,26 г (10 ммоль) 4-дезокси-4'-деметил-4-формилметил-4-эпиподофиллотоксина, полученного в примере 5, в 50 мл метиленхлорида прибавляют 2,36 г (13 ммоль) трихлоруксусного ангидрида и 1,58 г (13 ммоль) диметиламинопиридина и перемешивают смесь при комнатной температуре всю ночь. После реакции отгоняют растворитель и очищают остаток хроматографией на колонке (элюент этилацетат-н-гексан 1:1). Элюат кристаллизуют из метанола и собирают кристаллы фильтрованием, получают 4,10 г (выход 71,7) 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-трихлорацетил-4-формилметил-4-эпиподофиллот- оксина (Соединение 8).

Пример 9. Синтез 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-ацетил-4- формилметил- 4-эпиподофиллотоксина (Соединение 9).

К раствору 50 мг (0,117 ммоль) 4-дезокси-4'-деметил-4-формил-метил-4- эпиподофиллотоксина, полученного в примере 5, в 5 мл тетрагидрофурана прибавляют 50 мг (0,49 ммоль) уксусного ангидрида и 10 мг (0,081 ммоль) диметиламинопиридина и перемешивают смесь всю ночь при комнатной температуре. После реакции отгоняют растворитель и очищают остаток препаративной тонкослойной хроматографией (элюент хлороформ-метанол 30:1). Остаток, полученный при экстракции, кристаллизуют из н-гексана и собирают кристаллы фильтрованием, получают 40 мг (выход 73,0) 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-ацетил-4- формилметил-4-эпиподофиллотоксина (Соединение 9) Пример 10. Синтез 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-трет- бутилдифенилсилил-4-формилметил-4-эпиподофиллотоксина (Соединение 10).

К раствору 50 мг (0,117 ммоль) 4-дезокси-4'-деметил-4- формил-метил-4-эпиподофиллотоксина, полученного в примере 5, в 5 мл диметилформамида прибавляют 33 мг (0,12 ммоль) трет-бутилдифенилсилилхлорида и 79 мг (0,64 ммоль) диметиламинопиридина и перемешивают смесь при комнатной температуре всю ночь. Затем реакционную смесь экстрагируют этилацетатом - водой и сушат. Затем отгоняют растворитель и остаток очищают препаративной тонкослойной хроматографией (элюент хлороформ-метанол 30:1). Остаток, полученный экстракцией, сушат при пониженном давлении, получают 35 мг (выход 37,4) 4-дезокси-4'-деметил-4'-0- трет. бутилдифенилсилил-4 -формилметил-4-эпиподофиллотоксина (Соединение 10).

Пример 11. Синтез 4-дезокси-4-формилметил-4-эпиподофиллотоксина (Соединение 11) К раствору 500 мг (1,2 ммоль) 4-эпиподофиллотоксина в 10 мл дихлорметана прибавляют 274 мг (2,4 ммоль) триметилаллилсилана и охлаждают смесь до -10^o 0^oC. К этому раствору прибавляют 0,35 мл этилового эфирата трехфтористого бора и перемешивают смесь 4 ч. После прибавления 0,35 мл пиридина экстрагируют реакционную смесь этилацетатом. Сушат органический слой и перегоняют, остаток очищают хроматографией на колонке (50 г оксида кремния, элюент этилацетат-гексан 1:2). Элюат кристаллизуют из эфира-гексана и собирают кристаллы фильтрованием, получают 450 мг (выход 81,1) 4-дезокси-4-аллил-4-эпиподофиллотоксина. Затем к раствору 200 мг (0,46 ммоль) этого соединения в 4 мл пиридина прибавляют 116 мг (0,46 ммоль) тетраоксида осмия и перемешивают смесь при комнатной температуре 1 ч. После реакции прибавляют раствор 0,1 г кислого сульфита натрия в водном пиридине и смесь перемешивают 30 мин. Эту реакционную смесь экстрагируют этилацетатом и промывают экстракт разбавленной соляной кислотой и водой и сушат. Органический слой концентрируют и остаток очищают хроматографией на колонке (50 г оксида кремния, элюент хлороформ-метанол 20: 1). Элюат концентрируют и затем кристаллизуют из эфира-гексана, получают 194 мг (выход 89,3) 4-дезокси-4-(2,3-дигидрокси-1-пропил)-4-эпиподофиллотоксина.

т.ал. 144-145^oC (()²_D⁰ 73,42^o (с, 0,52 CHCl₃).

Затем к раствору 100 мг (0,21 ммоль) этого соединения в 10 мл бензола прибавляют 113 мг (0,25 ммоль) тетраацетата свинца и перемешивают смесь при комнатной температуре в течение 20 мин. Затем реакционную смесь фильтруют и концентрируют фильтрат. Остаток очищают хроматографией на колонке (20 г оксида кремния, элюент хлороформ-метанол 20:1) и кристаллизуют из эфира-гексана (1: 1), получают 90 мг (выход 97,4) 4-дезокси-4-формилметил-4-эпиподофиллотоксина (Соединение 11).

Пример 12. Синтез 4-дезокси-4'-деметил-4'-0- бензилоксикарбонил -4-(3-диметиламино -1-пропил)-4-эпиподофиллотоксин (Соединение 12).

К смеси 0,1 мл 50-ного водного раствора диметиламина и 3 мл метанола прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты и 35 мг (0,56 ммоль) цианборгидрида натрия, затем прибавляют 300 мг (0,52 ммоль) 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4-(2-формил-1-этил)- -4-эпиподофиллотоксина, полученного в примере 4. Смесь реагирует при комнатной температуре 1 ч. Затем после прибавления 30 мл хлороформа реакционную смесь промывают насыщенным водным раствором кислого карбоната натрия и сушат над сульфатом магния. Затем раствор перегоняют в остаток очищают хроматографией на колонке (20 г оксида кремния, элюент хлороформ-метанол 20:1), получают 245 мг (выход 78) 4-дезокси- 4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4-(3-N, N-диметиламино-1-пропил)-4-- эпиподофиллотоксина (Соединение 12).

Пример 13. Синтез 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4- (-3-N, N-диметиламино-1-этил)4-эпиподофиллотоксина (Соединение 13).

К смеси 15 мг (0,167 ммоль) 50-ного водного раствора диметиламина и 5 мл метанола прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты и 10 мг (0,19 ммоль) цианоборгидрида натрия, затем прибавляют 100 мг (0,178 ммоль) 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4 -формилметил-4-эпиподофиллотоксина, полученного в примере 3, смесь оставляют взаимодействовать при комнатной температуре 1 ч. Потом после прибавления 100 мл этилацетата реакционную смесь промывают насыщенным раствором кислого карбоната натрия и водой и сушат над сульфатом магния. Затем отгоняют растворитель и остаток очищают тонкослойной хроматографией (элюент хлороформ-метанол 5:1 получают 60 мг (выход 57,2) 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4- -(3-N, N-диметиламино-1-этил)-4-эпиподофиллотоксина (Соединение 13).

Пример 14. Синтез 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4- (2-N-метил-N-циклогексиламино-1-этил)-4-эпиподофиллотоксина (Соединение 14).

К раствору 180 мг (1,81 ммоль) циклогексиламина в 10 мл метанола прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты и 85 мг (1,35 ммоль) цианоборгидрида натрия, затем прибавляют 500 мг (0,9 ммоль) 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4-формилметил- 4-эпиподофиллотоксина, полученного в примере 3, смесь оставляют реагировать на 1 ч при комнатной температуре. К этой реакционной смеси прибавляют 0,1 мл 37-ного формалина и реакционную смесь снова оставляют при комнатной температуре на 1 час. Реакционную смесь разбавляют хлороформом, промывают насыщенным водным раствором кислого карбоната натрия и водой и сушат над сульфатом магния. Затем отгоняют растворитель и очищают остаток хроматографией на колонке (20 г оксида кремния, элюент хлороформ-метанол 20: 1), получают 470 мг (выход 79) 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4-(2-N-метил-N -циклогексиламино-1-этил)-4-эпиподофиллотоксина (Соединение 14).

Пример 15. Синтез 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4- -(2-N, N-диэтиламино-1-этил)-4-эпиподофиллотоксина (Соединение 15).

К смеси 38 мг (0,53 ммоль) диэтиламина и 10 мл метанола прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты и 52 мг (0,82 ммоль) цианоборгидрида натрия, затем прибавляют 300 мг (0,53 ммоль) 4-дезокси-4'-деметил-4'-0-бензилоксикарбонил-4-формилметил -4-эпиподофиллотоксина, полученного в примере 3, смесь оставляют реагировать при комнатной температуре на 1 ч. Реакционную смесь разбавляют хлороформом, промывают насыщенным водным раствором кислого карбоната натрия и водой и сушат над сульфатом магния. Затем отгоняют растворитель и очищают остаток хроматографией на колонке