Производное n1-(1,2-цис-2-галогеноциклопропил)-замещенной пиридонкарбоновой кислоты

Производное n1-(1,2-цис-2-галогеноциклопропил)-замещенной пиридонкарбоновой кислоты

Реферат

 

Использование: в медицине в качестве лекарственных средств. Сущность изобретения: продукт - производное N₁-(1,2-цис-2-галогеноциклопропил)замещенной пиридонкарбоновой кислоты формулы I, приведенной в формуле изобретения, где R₁ - аминогруппа, водород, R₂-пирролидинил, который может быть замещен C₁-C₆, аминогруппой, азаспиро -(2,4)-гептанил, A = C-X³ или атом азота, X₁ и X₂ - атом галогена, X₃ - атом водорода или галоген. 9 з.п. ф-лы, 4 табл.

Настоящее изобретение касается антимикробного соединения, полезного в качестве лекарственного средства для человека и животных, лекарства для рыб, сельскохозяйственного химикалия и антисептиков.

Производные хинолона, которые являются синтетическими противомикробными средствами, имеющие скелет конденсированной пиридонкарбоновой кислоты, известны как потенциальные противомикробные соединения при замещении их 1-положения циклопропиловой группой.

Далее известно, что производные 1-циклопропилхинолина, имеющие введенный во 2-положение циклопропиловой группы атом фтора в цис-конфигурации с частью молекулы пиридонкарбоновой кислоты, также проявляют противомикробную активность, как описано в заявке на патент Япония A-62-12760 (термин "IP-A"), использованный в описании, означает "не прошедшая экспертизу опубликованная заявка на патент Японии"). Полагают, что они обладают не только высокой противомикробной активностью, но и повышенной безопасностью. Пример производных хинолона, имеющих цис-фторциклопропиловую группу в 1- положении, представлен ниже: Производные хинолона, имеющие цис-галоидоциклопропиловую группу, включая и цис-фторциклопропиловую группу, в 1-положении, как утверждалось выше, обладают отличными свойствами, касающимися противомикробной активности и надежности. В этих соединениях с заместителем в 7-положении части молекул пиридонкарбоновой кислоты, не проявляющих изомеризма, само галоидоциклопропановое кольцо образует два энантиомера, восходящих к стерическому родству между составляющей пиридонкарбоновую кислоту и атомом галогена по отношению к циклопропановому кольцу, как показано ниже: в которых R¹, R², A, X¹ и X² будут определены ниже. Эти производные хинолона находят применение в качестве лекарственных средств постольку, поскольку они являются рацематами. С другой стороны, если имеет место изомеризм заместителя в 7-положении части молекулы пиридинокарбоновой кислоты, то такие производные хинолона имеют четыре вида стереоизомеров, включающие диастереомеры и энантиомеры. При получении смеси диастереомеров имеются трудности в определении полезных соединений и применении в качестве лекарственных средств. В свете изложенной выше ситуации изобретатели предприняли широкие исследования с целью получения отдельного изомера производных 1-(1,2-цис-2-фторциклопропил)замещенного хинолона, содержащих диастереомеры и добились успеха в получении каждого энантиомера цис-2-фторциклопропиламина в виде чистого изомера. В результате дальнейших исследований им также удалось синтезировать каждый из изомеров-энантиомеров производного хинолона, которые определяются только пространственной конфигурацией фторциклопропанового кольца, используя упомянутый выше амин как исходное соединение.

Успех в получении изомера 2-фторциклопропиламина, полезного в качестве промежуточного соединения, сделал возможным синтез оптически активного производного хинолона, содержащего отдельный единственный диастереомер, путем взаимодействия с отдельным изомером амина для введения циклической аминогруппы в 7-положении. Каждый из этих диастереомеров проявлял более сильную антимикробную активность в сравнении с соответствующими производными хинолона, замещенными простой циклопропиловой группой, и в дополнение к этому имел высокую безопасность с заметно улучшенной избирательной токсичностью. Настоящее изобретение создано на базе этих находок. Это изобретение касается производного N₁-(1,2-цис-2-галоидоциклопропил)замещенной пиридонкарбоновой кислоты, представленного формулой (I): в которой R¹ обозначает аминогруппу или атом водорода, R² представляет пирролидинил, который может иметь более одного заместителя, выбранного из группы, включающей C_1-6 алкил, аминогруппу, аминозамещенный алкил C_1-6; азаспиро/2,4/ гептанил, который может иметь заместитель, выбранный из группы, включающей аминогруппу и гидроксильную группу; азаспиро/3,4/октанил, который может иметь в качестве заместителя амино группу; или пиперазинил; A обозначает C-X³ или атом азота; X¹ и X², которые могут быть одинаковыми или различными, каждый обозначает атом галогена; и X³ обозначает атом галогена, атом водорода, алкильную группу, имеющую от 1 до 6 атомов углерода, или алкокси группу, имеющую от 1 до 6 атомов углерода, при условии, что случай, при котором R¹ обозначает атом водорода, а R² является пиперазином или 4-алкилзамещенным пиперазиновым остатком, исключается; или его хлористоводородная соль.

Конкретные соединения формулы I представляют собой: 7-[3-(S)-амино -1-пирролидинил]-6-фтор-1-(1,2-цис-2-фторциклопропил)-4 - оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновую кислоту, 7-[3-(S)-амино-1-пирролидинил] -8 хлор-6-фтор-1-(1,2-цис-2-фторциклопропил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3 - карбоновую кислоту; 7-[7-амино-5-азаспиро[2,4] гептан-5-ил] -8-хлор-6 - фтор-1-(1,2-цис-2-фторциклопропил)-4-оксо-1,4-спдигидрохинолин-3-карбоновую кислоту; 5-амино-7 - [3-(S)-амино-1-пирролидинил]-6,8-дифтор-1-(1,2-цис-2-фторциклопропил)- -4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновую кислоту, 7-[4-(S)-амино-2-(S)-метил-1-пирролидинил] -6-фтор -1-(1,2-цис-фторциклопропил)-4-оксо-1,4-дигидро-1,8-нафтиридин-3 карбоновую кислоту; 7-[3-(R)-[1-(S)-аминоэтил] -1-пирролидинил] -8-хлор -6-фтор-1(1,2-цис-2-фторциклопропил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3 карбоновую кислоту; 7-[4 -(S)-амино-2-(S)-метил-1-пирролидинил] -6-фтор-1-(1,2-цис-2 - фторциклопропил)-8-метил-4-оксо-1,4-дигдирохинолин-3-карбоновую кислоту, 5-амино-7-[7-амино-5-азаспиро[2,4]гептан5-ил] -6,8-дифтор-1-(1,2-цис-2 - фторциклопропил)4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновую кислоту; 7-[8-амино-6-азаспиро[3,4] октан-6-ил]-8-хлор-6-фтор-1-(1,2-цис -2-фторциклопропил)-4-оксо-1,4-дигдирохинолин-3-карбоновую кислоту; 7-[4-амино-3,3-диметил-1-пирролидинил]-8-хлор-6-фтор-1-(1,2-цис -2-фторциклопропил)-4-оксохинолин-3-карбоновую кислоту; 7-[4-(S)-амино3-3-(S)-метил-1-пирролидинил] -6-фтор-1-(1,2,-цис -2-фторциклопропил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновую кислоту, 7-[7-амино-5-азаспиро[2,4] -гептан-5-ил] -8-хлор-6-фтор-1-(1,2-цис-2 - фторциклопропил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновую кислоту или соль этих соединений.

Производные пиридонкарбоновой кислоты согласно настоящему изобретению включают соответствующие свободные кислоты, кислотно-аддитивные соли включают соли неорганической кислоты, т.е. гидрохлориды, сульфаты, нитраты, гидробромиды, гидроиодиды и фосфаты, и соли органических кислот, т.е. ацетаты, метансульфонаты, бензолсульфонаты, толуолсульфонаты, цитраты, малеаты, фумараты и лактаты.

Соли при карбоксильной группе могут быть органическими или неорганическими и включают соли щелочных металлов, т.е. соли лития, соли натрия и соли калия; соли щелочноземельных металлов, т.е. соли магния, и соли кальция; соли аммония, N-метилглюкаматы и соли трио-(оксиметил)-аминометана.

Некоторые из этих свободных кислот и солей существуют в гидратной форме.

Этерификация части молекулы карбоновой кислоты производных пиридонкарбоновой кислоты формулы (I) дает соединения, полезные в качестве промежуточных соединений для синтеза или пролекарства. Например, сложные алкиловые эфиры, сложные бензиловые эфиры, сложные алкоксикарбонильные эфиры и фениловые эфиры полезны как промежуточные соединения для синтеза. Сложные эфиры, которые легко отщепляются в организме с образованием свободных карбоновых кислот полезны в качестве пролекарств. Примерами таких сложных эфиров являются ацетоксиметиловые эфиры, пивалоилоксиметиловые эфиры, этоксикарбонилоксиэфиры, холиновые эфиры, диметиламиноэтиловые эфиры, 5-индалиловые эфиры, фталидиниловые эфиры 5-инданиловые эфиры, фталидиниловые эфиры и оксоалиловые эфиры (т. е. 5-замещенные-2 - оксо-1,3-диоксол-4-илметиловые сложные эфиры и 3-ацетокси-2-оксобутиловые сложные эфиры).

Способ синтезирования производных пиридонкарбоновой кислоты формулы (I) представлен ниже на примере получения соединения, в котором A C-H, R¹ H; X¹ X² F и R³ эт (этильная группа, в дальнейшем то же): где R⁴ имеет такие же значения, что и R² или является циклической аминогруппой, имеющей такое же строение, что и R², но защищенной.

Оптически активный этиловый эфир 1-(1,2-цис-2 - фторциклопропил)-6,7-дифтор-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоновой кислоты (соединение 6a или 6b) гидролизуют в кислых или щелочных условиях с получением производного свободной карбоновой кислоты формулы 7a или 7b. Свободная кислота (7a) или (7b) взаимодействует с циклическим амином R⁴-H с получением желаемого соединения (IIIa) или (IIIb). Если необходимо, то защитную группу удаляют из полученного соединения при подходящих условиях, выбранных в зависимости от защитной группы, и получают соединение (IVa) или (IVb).

Реакция замещения циклическим амином может быть проведена в растворителе (т. е. диметилсульфоксид, пиридин, ацетонитрил, 3-метоксибутанол) при температуре от комнатной температуры до 150^oC, предпочтительно от 40 до 120^oC в течение времени от 0,5 до 5 ч, обычно от 0,5 до 2 ч.

По выбору соединение (6a) или (6b) подвергают взаимодействию с циклическим амином при тех же условиях, что и перечисленные выше, и полученное соединение (IIa) или (IIb) гидролизуют затем в кислотных или щелочных условиях и, если необходимо, удаляют защитную группу, чтобы получить желаемое соединение (IIIa) или (IIIb), или (IVa), или (IVb).

Оптически активный цис-фторциклопропиламин можно синтезировать следующим образом. 2-Фторциклопропанкарбоновую кислоту подвергают реакции с (R)-(+)--метилбензиламином с получением N-/1-(R)-фенилэтил/-1,2-цис-2 - фторциклопропанкарбоксамида. Реакция может быть проведена в тетрагидрофуране в присутствии N,N-карбонилдиимидазола. Реакция может быть также осуществлена в соответствии с процессом использования смешанного ангидрида кислоты, при котором карбоновую кислоту растворяют в апротонном растворителе и подвергают взаимодействию со сложным эфиром галоидомуравьиной кислоты в присутствии основания при низких температурах и затем взаимодействию с бензиламином для получения карбоксамида. Полученный карбоксамид может быть разделен на каждый энантиомер методом хроматографии.

Апротонный растворитель, используемый в процессе получения смешанного ангидрида кислоты, особенно не ограничен и включает простые эфиры, например диэтиловый эфир, диизопропиловый эфир, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан и 1,2-диметоксиэтан; галогенизированные углеводороды, т.е. дихлорметан, хлороформ, 1,2-дихлорэтан и 1,1,2,2-тетрахлорэтан; ароматические углеводороды, например бензол, толуол, и ксилол и алифатические углеводороды, например пентан, гексан, гептан и циклогексан. Из них обычно используют тетрагидрофуран или хлороформ. Воду, содержащуюся в используемом растворителе, обычно удаляют заранее.

Галогеном в сложном эфире галоидомуравьиной кислоты нормально является атом хлора. Сложный эфир галоидомуравьиной кислоты включает метиловый, этиловый, 2,2,2-трихлорэтиловый, фениловый, пара-нитрофениловый и бензиловый эфиры.

Используемое основание может быть либо органическим, либо неорганическим. Неорганическое основание включает гидроокись щелочного металла, карбонаты или кислые карбонаты, т.е. гидроокись лития, гидроокись натрия, гидроокись калия, карбонат лития, карбонат натрия, карбонат калия, кислый карбонат натрия и кислый карбонат калия. Органическое основание включает триалкиламины, например триэтиламин, трипропиламин, трибутиламин, N, N-диизопропилэтиламин; диалкиланилины, например диэтиланилин и диметиланилин и ароматические соединения, например N-метилморфолин, пиридин и N, N-диметиламинопиридин.

Разделение карбоксамида на оптические изомеры может быть осуществлено известными методами, такими как хроматография на силикагеле при нормальном давлении или при пониженном давлении, препаративная тонкослойная хроматография и высокопроизводительная жидкостная хроматография. Разделение на оптические изомеры может быть также проведено другими методами разделения, обычно применяемые при этом, такими как перекристаллизации, переосаждение.

Разделенный таким образом оптически активный карбоксамид может быть введен в оптически активную цис-2-фторциклопропанкарбоновую кислоту тепловой обработкой в кислых условиях. Реакция может быть проведена растворением карбоксамида, например, в концентрированной хлористоводородной кислоте с последующим нагреванием. Хлористоводородная кислоты может быть заменена серной кислотой или азотной кислотой. Может быть использован растворитель, такой как уксусная кислота и низший спирт.

Полученная карбоновая кислота может быть защищена сразу реакцией Курциуса в присутствии трет-бутанола с получением цис-1 - (трет-бутоксикарбониламино)-2-фторциклопропана. Реакция может быть проведена традиционно с использованием дифенилфосфорплазида, но синтез промежуточного азидного соединения не ограничивается этим методом и могут быть применены общие методы синтеза.

Полученное производное оптически активного цис-2-фторциклопропиламино может быть далее использовано для получения хинолинового производного, имеющего цис-фторциклопропиловую группу в 1-положении как единственного изомера. Производное хинолина согласно настоящему изобретению затем может быть получено взаимодействием этого изомера с циклическим амином, как описано выше.

Производные пиридонкарбоновой кислоты согласно изобретению проявляют потенциальную противомикробную активность и таким образом могут быть использованы в качестве лечебных средств в медицине и ветеринарии, для лечения рыб, в качестве сельскохозяйственных химикатов и в консервации продуктов питания.

Доза производных пиридонкарбоновой кислоты для использования в лечебных целях составляет от 50 мг до 1,0 г, предпочтительно от 100 мг до 300 мг в день для взрослого человека. Доза для использования в лечебных целях в ветеринарии составляет от 1 мг до 200 мг, предпочтительно от 5 до 100 мг на кг веса тела в день, хотя возможно большее или меньшее варьирование в зависимости от цели введения (терапевтическое или профилактическое использование и так далее), вида и размера животного, вида патогенных организмов и симптомов. Дневная доза, указанная выше, может быть разделена на 2-4 дозы в день. Если необходимо, то дневная доза иногда может отклоняться от указанного интервала.

Производные пиридонкарбоновой кислоты согласно изобретению активны против разнообразных микроорганизмов, вызывающих различные инфекционные заболевания, и могут излечивать или смягчать боли и/или предотвращать болезни, вызванные этими патогенами.

Наглядными примерами бактерий или похожих на бактерий микроорганизмов, против которых производные пиридонкарбоновой кислоты эффективны, являются Staphylococus sp. Streptococus pyogenes, Streptococus haemolyticus, entrococci, Streptococcus pneumoniae, Petrostreptococcus sp. Neisseria gonorihoeae, Escherichia coli, Citobacter spp. Slugella sp. Klebsiella pneumoniae, Enferobacter sp. Serroctia sp. Pirofeus sp. Pseudomonas aeryginosa, Hemophilus influenzae, Acinetobacter sp. Campylobacter sp. и Chlamidiae.

Примеры заболеваний, вызванных этими патогенными микроорганизмами, являются: фолликулиты, фурункул, карбункул, рожистое воспаление, флегмона, лимфангиит/лимфаденит, гнойное воспаление подушечки пальцев, подкожный абсцесс, гидраценит, шаровидные угри, инфекционная атерома, внутрианальный абсцесс, мастит, поверхностные вторичные инфекции после травмы, ожоговая или хирургическая травма, фаринголярингит, острый бронхит, тонзиллит, хронический бронхит, бронхоэктаз, диффузный панбронхиолит, вторичные инфекции после хронических распираторных заболеваний, пневмония, гидронефрит, киста, простатит, эпидидимит, гонококковый уретрит, негонококковый уретрит, холецистит, холангит, бактериальная дизентерия, энтерит, аднексит, внутриматочные инфекции, бартолинит, блефарит, ячмень, декриоцистит, тарзаденит, изъявление роговицы, воспаление среднего уха, синусит, парадентит, эндокардит, заражение крови, менингит и кожные инфекции.

Примеры подверженных воздействию микроорганизмов, вызывающих болезни инфекционных животных, включая заболевания домашней птицы, включают такие микроорганизмы, как Escherichia sp. Salmonella sp. Pasteurella sp. Kalmophilus sp. Bordetella sp. Staphyloccocus sp. и Mycoplasma sp.

Конкретные примеры ветеринарных заболеваний, вызванных этими микроорганизмами, включают коли-бактериоз, заболевание цыплят, птичий паратиф, холеру домашней птицы, инфекционный ринит, стафилококковые инфекции, микаплазменные инфекции; болезни крупного рогатого скота, такие как коли-бактериоз, сальмонеллез, заражение крови, микоплазменные болезни, инфекционная плевропневмония коров и мастит коров; инфекционные болезни свиней, такие как коли-бактериоз, сальмонеллез, геморрагическая септицемия, гемофильная инфекция, атрофический ринит, эксудативный эпидермит и микоплазменные болезни; инфекционные болезни собак, такие как заражение бактериями, относящимися к кишечной группе, сальмонеллез, геморрагическая септицемия, пиометра и цистит; инфекционные болезни кошек, такие как геморрагический плеврит, цистит, хронический ринит, гемофильная инфекция, диарея котят, и микоплазменные болезни.

Соединение согласно настоящему изобретению может быть приготовлено в виде противомикробных препаратов в подходящей дозной форме в соответствии с путем введения, выбранным при традиционных методах приготовления лекарственных препаратов. Дозная форма для перорального введения включает таблетки, порошки, гранулы, капсулы, растворы, сиропы, эликсиры и масляные или водные суспензии. Инъекции могут содержать в дополнение в активному ингредиенту стабилизаторы, антисептики и повышающие растворимость агенты. Раствор, который может содержать такие наполнители, помещают в контейнер и далее раствор может быть подвергнут лиофилизации или подобному воздействию для получения твердых препаратов, которые могут быть растворены перед использованием. Контейнер может содержать либо разовую дозу или несколько доз.

Дозированная форма для наружного употребления включает растворы, суспензии, эмульсии, мази, гели, кремы, лосьоны и аэрозоли.

При приготовлении твердых препаратов активный ингредиент может быть смешан с подходяще выбранными фармацевтически приемлемыми носителями, такими как наполнители, добавками, связующими, диспергирующими средствами, ускорителями растворения, смачивающими агентами и смазками. Жидкие препараты включают растворы, суспензии и эмульсии. Они могут содержать наполнители, такие как стабилизаторы суспензии и эмульгаторы.

Соединение согласно изобретению может быть введено животным через рот либо как таковое или в смеси с кормом, или его раствор может быть введен непосредственно или смешан с питьевой водой или кормом. Соединение может быть введено также и не перорально, например инъекцией. Соединение согласно изобретению может быть приготовлено в качестве препаратов для животных, таких как порошки, мелкие гранулы, растворяющиеся порошки, сиропы, растворы и инъекции в соответствии с обычными методами приготовления лекарственных форм. Ссылочные примеры описывают синтез оптически активных скелетов из оптически активной цис-2-фторциклопропанкарбоновой кислоты.

Противомикробную активность оптически активных соединений, полученных в примерах, оценивали стандартным методом, установленным Nippon kapakeviyoho Jakkai и результаты выражены в единицах минимальной ингибирующей концентрации (МИК, микрограмм/мл) и представлены в табл. 1 и 2.

Используемыми сравнительными соединениями являются: Европатент N 0268053: ципрофлаксацин (CPFX) и метилципрофлоксацин (Me-CPFX). (В данной ссылке хотя и описан этилципрофлоксации, Me-CPFX используют вместо него).

Европатент N 0153163: соединение примера 44 и соединение примера 46. Европатент N 0132845: соединение примера 1 данной ссылки.

Из прилагаемых сравнительных данных можно видеть, что: (1) CPFX и Me-CPFX Европатента N 0268053 являются более лучшими в отношении противобактериальной активности против грамположительных бактерий.

(2) Соединение примера 44 и соединение примера 46 Европатента N 0153168 являются более лучшими в отношении противобактериальной активности против Ser, или Ps.

(3) Соединение (пример 1) Европатента N 0132845 является более лучшим в отношении противобактериальной активности против грамположительной бактерии.

С другой стороны, соединения в соответствии с настоящим изобретением, в частности соединения 13a, 13b, 18a, 18b, 26bb и 56b, проявляют высокую противобактериальную активность.

Как указывалось ранее, структурный признак соединения в соответствии с настоящим изобретением заключается в наличии 1,2-цис-2-фторциклопропила в качестве заместителя в положении 1. Доказано, что согласно структурному признаку соединение настоящего изобретения, кроме сильной антимикробной активности, обладает слабой цитотоксичностью и, следовательно, имеет другое замечательное и неожиданное свойство, о котором не говорится и не предполагается в ссылке.

Известно, что хинолоны подавляют гиразу ДНК бактерий так же, как и топоизомеразу II. Обнаружено также, что сила подавления топоизомеразы II и сила цитотоксичности сопоставимы и что хинолоны, обладающие большой силой подавления топоизомеразы II, имеют сильную цитотоксичность.

Считается, что хинолоны демонстрируют свою антимикробноную активность на основе их избирательной цитотоксичности и, с этой точки зрения, специалистам данной области может быть ясно, что соединение с меньшей цитотоксичностью более желательно для медицины.

Как показано в табл. 3, сила ингибирования топоизомеразы II соединения 26 bb (DU-6859) составляет не менее, чем 1600 мкг/мл в ИК₅₀, тогда как сила ингибирования соединения (DU-6688), которое имеет тот же заместитель и позиция 1 которого представлена просто циклопропильной группой, составляет 434 мкг/ мл, то есть налицо почти четырехкратная разница. Более того, в соединении, где 2-аминолпирролидин является заместителем в позиции 7, сила подавления составляет 973 или 729 мкг/мл с фторциклопропиловой группой в положении 1, тогда как сила подавления соединения с циклопропильной группой в положении 1 равна 230 мгк/мл, что составляет разницу в 3,2 4,2 раза. Очевидно также, что избирательность CPFX ниже по сравнению с соединением изобретения. Следовательно, соединение настоящего изобретения отличается слабой цитотоксичностью в отличии от самого близкого соединения ссылка, само собой разумеется, что эти замечательные свойства обусловлены заместителем в положении 1.

Изобретение иллюстрируется более детально с помощью следующих ниже примеров и ссылочных примеров.

Ссылочный пример 1. N-[1-(R)-фенилэтил]-1,2-цис-2-фторциклопропанкабоксамид, соединение (2a, 2b).

1-1. Карбонилдиимидазольный метод.

Один грамм цис-2-фторциклопропанкарбоновой кислоты растворяют в 30 мл тетрагидрофурана и к раствору добавляют 1,78 г N,N-карбонилдиимидазола, и смесь перемешивают при комнатной температуре один час. К раствору добавляли 1,45 г (R)-(+)--метилбензиламина и перемешивание продолжали два часа. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток экстрагировали хлороформом. Экстракт последовательно промывали водным раствором 10%-ной лимонной кислоты и водой и сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Из остаточного маслянистого вязкого вещества выделяли каждый стереоизомер методом высокопроизводительной жидкостной хроматографии при условиях, указанных ниже. Каждый изомер перекристаллизации из диизопропилового эфира для получения целевого соединения (2а) или (2b), указанного в названии примера.

Условия проведения жидкостной хроматографии высокого давления: колонка-нуклеосил 50-5 (20 мм внутренний диаметр и длина 250 мм) (Senshu Pack SSC Silica, 182-IN поставлена Senshu Kayaku); растворитель: смесь этилацетата и тетрагидрофурана в соотношении 9:1 по объему; скорость потока: 9,0 мл/мин; время удерживания: 11 мин для соединения (2а), 13 мин для соединения (2b).

Соединение (2а): точка плавления 108^oC.

Элементный анализ для C₁₂H₁₄FNO.

Bычислено, C 69,55; H 6,81; N 6,76.

Hайдено, C 69,31; H 7,01; N 6,65.

()_D: +61,96^o (c=0,965, хлороформ) ЯМР-спектр на ¹H (CDCl₃) млн.доли: 1,50 (3Н, д), J=7 Гц), 1,50-1,96 (1Н, м), 4,68 (1Н, дм, J=64 Гц), 5,14 (1Н, м), 7,40 (5Н, с).

Физико-химические свойства соединения (2b): точка плавления: 102^oC.

Элементный анализ для C₁₂H₁₄FNO: Вычислено, C 69,55; H 6,81; N 6,76.

Hайдено, C 69,45; H 6,86; N 6,70.

()_D: +143,61^o (c=0,830, хлороформ); ¹H-ЯМР (CDCl₃) мл. доли: 0,98-1,34 (2Н, м). 1,52 (3Н, д, J=7Гц,), 1,64-1,96 (1Н, м), 4,58 (1Н, дм, J=6 Гц), 5,24 (1Н, м), 7,40 (5Н, м).

1-2. Метод смешанного ангидрида.

В 50 мл тетрагидрофурана растворяли 4,19 г 2-фторциклопропанкарбоновой кислоты (смесь цис-транс-изомеров) и 4,07 г траэтиламина и раствор охлаждали до -10^oC. К этому раствору добавляли 4,73 г этилового эфира хлормуравьиной кислоты в 20 мл тетрагидрофурана и смесь перемешивали 10 мин. К раствору добавляли по каплям раствор 4,88 г (R)-(+)-a-метилбензиламина в 30 мл тетрагидрофурана при этой температуре и смесь перемешивали при комнатной температуре 15 ч. Растворитель удаляли при пониженном давлении и экстрагировали бензолом. Экстракт последовательно промывали водным раствором 10%-ной лимонной кислоты, 1 н. водным раствором гидроокиси натрия и водой и сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении и оставшееся бледно-желтое маслянистое вещество очищали на колонке силикагеля хроматографическим методом, используя смесь растворителей бензол-этилацетат в качестве элюента и получали каждое из целевых соединений (2а) и (2b).

Ссылочный пример 2.

(+)-цис-2-фторциклопропанкарбоновая кислотa (3а).

В 15 мл концентрированной хлористоводородной кислоты растворяли 530 мг амидного соединения формулы (2А), полученного по примеру для ссылки 1, и раствор нагревали при 100-110^oC 5 ч при помешивании. К реакционной смеси добавляли 20 мл воды и смесь экстрагировали этилацетатов. Затем экстракт экстрагировали водным раствором кислого карбоната натрия и водный экстракт промывали этилацетатом. Концентрированной хлористоводородной кислотой устанавливали pН водного экстракта 5,0 и экстрагировали этилацетатом. Экстракт сушили над безводным сульфатом натрия и растворитель удаляли при пониженном давлении для получения целевого соединения формулы (3а) в виде бледно-желтого масла.

()_D: -23,13^o (с=1,020 хлороформ); ¹Н-ЯМР (CDCl₃) млн.доли: 1,0 1,42 (1H, м), 1,60 - 2,10 (2H, м), 4,82 (1H, м, J=65 Гц), 12,0 (1Н, с).

Ссылочный пример 3.

(-)-цис-2-фторциклопропанкарбоновая кислота формулы (3b).

В 30 мл концентрированной хлористоводородной кислоты растворяли 1,65 г амидного соединения формулы (2b), полученного по ссылочному примеру 1, и раствор нагревали при 100 110^oC 5 ч при помешивании, pH реакицонной смеси поддерживали между 8,0 и 9,0 кислым карбонатом натрия и затем промывали хлороформом. Концентрированной хлористоводородной кислотой устанавливали pH водного слоя 4,0 и экструдировали этилацетатом. Экстракт сушили над безводным сульфатом натрия, растворитель удаляли при пониженном давлении и получали целевое соединение (3b) в виде бледно-желтого масла.

()_D: +21,56^o (c=1,113, хлороформ). ¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃) мл.доли: 1,0 1,42 (1H, м), 1,56 1,98 (2H, м), 4,76 (1H, м, J=66 Гц), 11,32 (1H, c).

Ссылочный пример 4.

(+)-цис-1-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фторциклопропан, соединение формулы (4а).

В 5 мл трет-бутанола растворяли 200 мг карбоновой кислоты формулы (3a), полученной в ссылочном примере 2, 603 мг дифенилфосфорилазида и 203 мг триэтиламина и раствор нагревали с обратным холодильником 4,5 ч. После удаления растворителя при пониженном давлении остаток экстрагировали хлороформом. Экстракт последовательно промывали 10%-ным водным раствором лимонной кислоты, 2%-ным водным раствором гидроокиси натрия и водой и сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении, остаток подвергали хроматографии на колонке силикагеля, используя хлороформ в качестве элюента и получали целевое соединение (4a) в виде бесцветных кристаллов.

Точка плавления 73^oC: ()_D: +65,75^o (c=0,610, хлороформ); ¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃) мл. доли: 0,6 1,3 (2H, м), 1,46 (9H, с), 2,48 2,74 (1H, м), 4,62 (1H, м, J=65 Гц), 4,6 5,1 (1H, широкий сигнал).

Ссылочный пример 5.

(-)-цис-1-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фторциклопропан, соединение формулы (4b).

6 мл трет-бутанола добавляли 265 мг карбоновой кислоты формулы (3b), полученной в ссылочном примере 3, 800 мг дифенилфосфорилазида и 270 мг триэтиламина. Раствор оставляли для взаимодействия и обрабатывали таким же образом, что и в ссылочном примере 4 и получали целевое соединение (4b).

Точка плавления: 63^oC.

/()_D/: -60,27^o (c=0,740, хлороформ). ¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃) млн.доли: 0,66 1,3 (2H, м), 1,46 (95, с) 2,48 2,74 (1H, м), 4,58 (1H, м, J=65 Гц), 4,6 5,1 (1H, широкий сигнал).

Ссылочный пример 6.

(-)-Этиловый эфир 2-[(1,1-цис-2 фторциклопропан-1-ил)-аминометилен]-3-оксо-(2,4,5-трифторфенил)-пропионовой кислоты, соединение формулы (5a).

Этиловый эфир 2,4,5-трифторбензоилуксусной кислоты (234 мг), 2 мл этилового эфира орто-муравьиной кислоты и 4 мл уксусного ангидрида смешивали и смесь нагревали при 110 120^oC 2 ч при помешивании. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток растворяли в 10 мл дихлорметана.

Соединение (4a), полученное в ссылочном примере 4, (167 мг) и 5 мл трифторуксусной кислоты смешивали и смесь перемешивали при комнатной температуре 20 мин и концентрировали досуха при пониженном давлении (полученный трифторацетат амина использовали без очистки). Остаток растворяли в 10 мл дихлорметана и охлаждали до -10^oC. В раствор по каплям добавляли раствор 230 мг триэтиламина в 10 мл трихлорметана. После добавления по каплям приготовленного выше дихлорметанового раствора в смесь, ее оставляли на ночь при перемешивании при комнатной температуре. Растворитель выпаривали досуха при пониженном давлении и остаток подвергали хроматографии на колонке силикагеля, используя смешанный растворитель бензол-этилацетат в соотношении 2:1 по объему в качестве элюента. Из элюента после удаления растворителя получали желтое маслянистое вещество. Продукт перекристаллизовывали из смеси диизопропиловый эфир-н-гексан и получали целевое соединение, указанное в названии примера (соединение 5a) в виде бесцветных кристаллов. Точка плавления 69-70^oC.

()_D: -10,29^o (c=1,088, хлороформ).

Ссылочный пример 7.

(+)-Этиловый эфир 2-[(1,2-цис-фторциклопропан-1-ил)-аминометилен]-3-оксо -3-(2,4,5-трифторфенил)-пропионовой кислоты, соединение формулы (5b).

Этиловый эфир 2,4,5-трифторбензоилуксусной кислоты (337 мг), 2 мл этилового эфира орто-муравьиной кислоты и 4 мл уксусного ангидрида смешивали и смесь нагревали при 110 120^oC 2 ч при перемешивании. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток растворяли в 10 мл дихлорметана. Соединение формулы (4b), полученное в ссылочном примере 5, (240 мг) и 5 мл трифторуксусной кислоты смешивали и смесь перемешивали при комнатной температуре 1 ч с последующим концентрированием при пониженном давлении (трифторацетат амина использовали без очистки). Остаток растворяли в 10 мл дихлорэтана и раствор охлаждали до -10^oC. В него по каплям добавляли раствор 230 мг триэтиламина в 10 мл дихлорметана с последующим оставлением смеси на ночь при перемешивании при комнатной температуре. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток подвергали хроматографии на колонке силикагеле, используя смешанный растворитель бензол-этилацетат в coотношении 2:1 по объему в качестве элюента. После удаления растворителя из элюента получали желтое маслянистое вещество. Перекристаллизация из смеси диизопропиловый эфир-н-гексан давали целевое соединение (5b) в виде бесцветных кристаллов. Точка плавления 69 70^oC.

()_D: +12,09 (c=0,645, хлороформ).

Ссылочный пример 8.

(+)-6,7-Дифтор-1-(1,2-цис-2-фторциклопропил9-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3- карбоксилат, соединение формулы (6a).

В 15 мл безводного диоксана растворяли 180 мг соединения (5a), полученного в ссылочном примере 5, и 200 мг 60% гидрида натрия добавляли в раствор с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение двух дней. Реакционную смесь добавляли к 10% водному раствору лимонной кислоты с последующим концентрированием при пониженном давлении. Остаток экстрагировали хлороформом и экстракт сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной тонкослойной хроматографией на силикагеле с использованием смеси бензол-этилацетат в отношении 1:2 по объему в качестве проявляющего растворителя и получали целевое соединение (6a) в виде бесцветных кристаллов. Точка плавления: 231 - 232^oC.

()_D: +27,20^o (c=0,610, хлороформ), ¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃), млн.доли: 1,20 (3H, т, J= 7 Гц), 1,6 1,9 (2H, м), 3,28 3,56 (1H, м), 4,42 (2H, кв, J=7 Гц), 5,11 (1H, д, J=6 Гц), 7,60 (1H, дд, J= 11 и 7 Гц), 8,28 (1H, дд, J=10 Гц и 11 Гц), 8,58 (1H, с).

Ссылочный пример 9.

(-)-Этиловый эфир 6,7-дифтор-1-(1,2-цис-2-фторциклопропил)-4-оксо-1,4 - дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты, соединение формулы (6b).

В 15 мл безводного диоксана растворяли 267 мг соединения (5b), полученного в ссылочном примере 7, и туда добавляли 200 мг 60%-ного гидрида натрия и смесь перемешивали при комнатной температуре два дня. Реакционную смесь добавляли к 10% водному раствору лимонной кислоты с последующим концентрированием при пониженном давлении. Остаток экстрагировали хлороформом и сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении, остаток очищали препаративной тонкослойной хроматографией на силикагеле с использованием смеси бензол этилацетат в соотношении 1:2 по объему в качестве проявляющего растворителя и получали целевое соединение формулы (6b) в виде бесцветных кристаллов. Точка плавления 226 227^oC.

()_D: -31,36^o (c=0,510, хлороформ).

¹Н-ЯМР спектр (CDCl₃) млн.доли: 1,22 (3H, т, J=7 Гц), 1,5 1,9 (2H, м), 3,26 3,52 (1H, м), 4,40 (2H, кв, J=7 Гц), 5,10 (1H, м, J=63 Гц), 7,58 (1H, дд, J=11 Гц и 7 Гц), 8,26 (1H, дд, J=10 Гц и 7,00 Гц), 8,26 (1H, дд, J=10 Гц и 11 Гц), 8,55 (1H, с).

Ссылочный пример 10.

(+)-6,7-Дифтор-1-(1,2-цис-2-фторциклопропил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3- карбоновая кислота, соединение (7a).

В 15 мл концентрированной хлористоводородной кислоты растворяли 106 мг сложного эфира (соединение формулы 6a), полученного как описано в ссылочном примере 8, и раствор нагревали при 100 110^oC 2 ч при помешивании. К реакционной смеси добавляли 15 мл воды, выпавший осадок собирали фильтрацией и получали целевое соединение (7a) в виде бесцветный кристаллов. Точка плавления 265 270^oC.

()_D: +3,66^o (c=0,383, уксусная кислота).

¹H-ЯМР спектр (CDCI₃) млн.доли: 1,75 1,95 (2Н, м), 3,58 (1Н,м), 5,18 (1H, дм, J= 64Гц), 7,82 (1Н,дд,J=12 Гц и 7 Гц), 8,37 (1Н,дд. J=18 и 8 Гц), 8,94 (1Н,с).

Ссылочный пример 11.

(-)-6,7-Дифтор-1-(1,2-цис-2-фторциклопропил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3- карбоновая кислота, соединение (7b).

В 10 мл концентрированной хлористоводородной кислоты растворяли 150 мг сложного эфира формулы (6b), полученного по ссылочному примеру 9, и раствор нагревали при 110^oC 2 ч при помешивании. К реакционной смеси добавляли 20 мл воды и смесь экстрагировали хлороформом. Экстракт сушили над безводным сульфатом