Рацемические или оптически активные пергидро-1h-пиридо(1,2- а) пиразины или их фармацевтически приемлемые соли и способ их получения

Рацемические или оптически активные пергидро-1h-пиридо(1,2- а) пиразины или их фармацевтически приемлемые соли и способ их получения

Реферат

 

Использование: в медицине для лечения психотических заболеваний. Сущность изобретения: продукты: пергидро-1H-пиридо-[1,2-а] пиразины формулы (1) или их соли, где L и X взяты отдельно, где X - H, L - R(CH₂)_mCO, или L и X, взятые вместе, являются группами формул (2 - 7), R - /C₃-C₇-циклоалкил, фенил или норборнил, R¹, R² и R³ - H или CH₃, Y - O или S, Y¹ - CH₂ или S, Y² и Y³ - H или Y² и Y³ взяты вместе и представляют (CH₂)_g, Z - H или Cl, m = 0, 1, 2 или 3, n = 1, 2, 3 или 4, p = 1 или 2, g = 3, 4 или 5, --- обозначает связь или отсутствие связи. Реагент 1: соединение формулы (8), где Y и n определены выше, D - нуклеофильная отщепляемая группа. Реагент 2 : L-NH(X), в случае, когда L и X образуют вместе с атомом азота производное пиперидина. Условия реакции: в среде инертного органического растворителя. 7 с. и 32 з. п. ф-лы. 3 табл.

Настоящее изобретение относится к некоторым пергидро-IH-пиридо[1,2-а] пиразинам, описываемым формулой (1) и определенных ниже; к фармацевтическим композициям и методам лечения психотических заболеваний с их помощью; а также к некоторым промежуточным соединениям, используемым при их синтезе.

Близкие по структуре пергидро-IH-пиридо[1,2-а]пиразины формулы где X является N или CH и L^a представляет один из радикалов группы, включающей пиразол, триазол тетразол или циклический имид, обладают полезной антиксиолитической активностью, как указано Bright и Desal в Международной заявке PCT N WO 90/08144.

Описан ряд соединений, обладающих нейролептической активностью, которые используются при лечении психотических заболеваний. Они включают производные пиперидина формулы где t обозначает 1 или 2, Ar обозначает нафтил или одну из различных бициклических гетероарильных групп, включающих бензизотиазол, и X^b и Y^b вместе с присоединением фенильным кольцом образуют подобную бициклическую гетероарильную группу (Lowe III et al. US Patent 4831031); и соединения формулы где Q представляет некоторую бициклическую гетероарильную группу, Alk является алкандиилом и X представляет O, S, NH или замещенную NH (Kennis et al. US Patent 4957916).

Настоящее изобретение относится как к рацемическим, так и у оптически активным пергидро-IH-пиридо[1,2-а] пиразинам формулы или их фармацевтически приемлемым аддитивным солям кислоты, где L и H взятые отдельно, где X является H и L является R(CH₂)_mCO, или L и X взятые вместе являются R обозначает C₃-C₇ циклоалкил, фенил или норборнил, R¹, R² и R³ каждый независимо обозначает водород или CH₃; Y является O или S; Y¹ является CH² или S; Y² и Y³ обозначают водород, или Y² и Y³ взяты вместе и являются (CH₂)_q; Z являются H или Cl; m имеет значение 0, 1, 2 или 3; n имеет значение 1, 2, 3 или 4; p имеет значения 1 или 2; q имеет значения 3, 4 или 5; обозначает связь или отсутствие связи.

В этих соединениях группа, присоединенная в 7- или 8-м положении пиридопиразиновой кольцевой системы, может быть либо в цис, либо в транс положении по отношению к 9a-водороду. Когда заместитель находится в 8-положении, что связано с легкостью получения и обычно большей активностью, предпочтительными являются соединения, в основном, имеющие заместитель в 8-положении и 9a-водород в транс-конфигурации по отношению друг к другу, или, иначе говоря, 8- и 9a-водороды находятся в цис по отношению друг к другу. Предпочтительными значениями Y и Z являются обычно кислород и водород. Когда L и X взяты отдельно, предпочтительным значением X является водород и предпочтительным значением L является R(CH₂)_mCO, где R является фенилом или (C₃-C₆) циклоалкилом и m имеет значения 1 или 2. Когда L и X взяты вместе, предпочтительные значения L и X соответствуют вышеуказанному фрагменту формулы (a), в частности, такими соединениями, где Y¹ является CH₂, p имеет значение 1 и Y² и Y³ взяты вместе.

Как ясно любому специалисту в этой области, соединения по настоящему изобретению могут существовать как в рацемической, так и в оптически активной форме. Соединения, в которых водородный заместитель, находящийся в 7-положении, является транс по отношению к 9a-водороду, и имеющие абсолютную стереохимическую формулу обычно более активны, чем энантиомеры (зеркальные изображения). В формуле (1a) стереохимическая структура всегда, без исключения, будет 9aS, тогда как стереохимическая структура в 7-положении будет различной, в зависимости от точного значения n, L и X. Однако, когда n имеет значение 2 в формуле (1a), стереохимическая структура будет всегда неизменно 7S.

Настоящее изобретение относится также к промежуточным продуктам для синтеза соединений формулы (I), описываемых следующей формулой: где по первой альтернативе B является (C₁-C₃)алкоксикарбонилом и X¹ является C O; или по второй альтернативе X¹ является CH₂ и B является HOCH₂.

Настоящее изобретение легко осуществимо, существует ряд различных приемов, которые являются довольно общими, для применения их при получении данных антипсихотических агентов формулы (I).

Довольно широко используемыми исходными продуктами являются соединения формулы где n и Y определены выше и D является нуклеофильной, способной к замещению группой, такой как хлор, бром или метансульфонилокси. Последние, так называемые эфиры мезилата, являются предпочтительными, так как они легко образуются из соответствующего спирта, получение которого детально проиллюстрировано ниже. Когда получаемый продукт формулы (I) имеет L и X взятые вместе, этот метод является предпочтительным, так как требуемые нуклеофильные, способные к замещению группы являются обычно легко доступными. Когда L и X взятые вместе образуют имид или циклический сульфонамид, предпочтительными реагентами являются анионные производные соответствующих имидов, например Когда L и X взятые вместе происходят из простого пиперидинового производного, такого как обычно используют свободный амин, предпочитая его соответствующей анионной форме. Подобные нуклеофильные реакции замещения обычно проводят при избытке одного из реагентов для того, чтобы заставить эту реакцию второго порядка завершиться в пределах приемлемого промежутка времени. Обычно это бывает избыток наиболее доступно реагента, которым в настоящем случае является обычно анион имина или амин. Реакцию обычно проводят в присутствии по крайней мере одного молярного эквивалента избытка основания для того, чтобы нейтрализовать молярный эквивалент кислоты, образующейся как побочный продукт. Это может быть сам аминный реагент или более сильное основание, относительно на нуклеофильное основание, такое как триэтиламин или 2,6-лутидин. Нуклеофильное замещение проводят обычно в реакционно-инертном растворителе, предпочтительно таком, который относительно полярен, для того, чтобы растворить реагенты и обеспечить более быструю реакцию. Температура не является решающим фактором, однако обычно она выше уровня комнатной так, чтобы способствовать приемлемой быстрой скорости реакции, но не должна быть столь высокой, чтобы способствовать нежелательным побочным реакциям и разложению.

Спирты, используемые в препаративном методе, легко доступны из соответствующих эфиров цис- и транс-пиперидиндикарбоновых кислот, как это подробно показано в примерах ниже. Такие спирты способны к разделению путем образования диастереомерных эфиров с оптически активными кислотами. Эти эфиры обычно выделяют, например, известными хроматографическими методами. Разделенные диастереомерные эфиры гидролизуют с получением желаемого оптически активного спирта.

Все клинически эффективные антипсихотические агенты тормозят присоединение допамина к D-2 рецепторам и демонтируют функциональный антогонизм вызванного допамином поведения на животных. Хотя стандартные антипсихотические вещества взаимодействуют с широким рядом нейротрансмиттерных рецепторов, их способность блокирования D-2 связывания является единственной активностью, которая показывает высокую степень коррелирования с их оральной клинической дозировкой (Creese et al. Sciences, 192: 481 483, 1976). Полагают, что клинический эффект является результатом действия мезолимбиновой-мезокортиковой атак на форебраин, специфическое ингибирование допаминовой сверхчувствительности, вызванное возрастанием плотности рецептора, как показано в исследованиях post-mortem на мозге больных шизофренией (Lee et al. Nature, 274: 897, 1978).

Соответствующая способность настоящих соединений формулы (I) замещать связывание у D-2-рецепторов была определена согласно стандартной технике радиолигандного гомогенантного связывания, как указано далее. Взрослые крысы линии Sprague-Dawley (3 на испытание) были обезглавлены, мозг быстро отделен и caudafe-putamen была рассечена. Ткань гомогенизировали в 50 объемах ледяного 50 мМ Трис-HCl буфера, содержащего 100 мМ NaCl и мМ MgCl₂ и доводили до pH 7,2. Эту смесь дважды центрифугировали при 20000 x г в течение 15 мин каждый раз, всплывший продукт каждый раз отбрасывали, а лепешку суспендировали в свежем буфере до гомогенизации. Конечную лепешку вновь суспендировали в буфере до концентрации 5,6 мг/мл. Суспензия ткани затем добавлялась в трубки, содержащие определенную концентрацию 3H-спироперидола /0,2 нМ/ и различные концентрации исследуемого лекарства. Другие трубки содержали только буфер /"полный"/ или насыщенную концентрацию /+/бутакламола /10мМ "пустой"/. Трубки /конечный объем 1,0 мл/ инкубировали при 37^oC в течение 15 мин, затем быстро отфильтровывали под вакуумом через фильтр со стеклянными волокнами и промывали 12 мл ледяного буфера в харвестере клеток Брандела. Фильтры затем отделяли и подсчитывали в сцинтилляторном счетчике, используя 5 мл сцинтилляционной жидкости Beckman Readysafe. Полученные расчеты использованы затем для определения IC₅₀, или экстраполированной концентрации исследуемого лекарства, необходимой для ингибирования связывания наполовину для каждого исследуемого соединения. /Метод Leysen et al. Biochemical Pharuacology, 27: 307-316 /1978/.

Антипсихотическая активность настоящих соединений показана также на нейролептической активности с использованием методов, основных на стандартных приемах. По одному методу взрослые крысы линии Sprague-Dawley предварительно обрабатываются подходящими дозами испытуемого соединения путем подкожных инъекций. Спустя полчаса всем крысам вводят внутрижелудочно 1 мг/кг гидрохлорида апоморфина, растворенного в 0,1% растворе аскорбата. Крысы имеют поведенческий коэффициент, согласно следующей стандартной шкале, через 5, 15, 25, 35 и 45 мин после апоморфиновой инъекции: 0 настороженные, но неподвижные, 1 двигающиеся в клетке, 2 прерывисто фыркающее сопящее поведение, 3= продолжительное фырканье с прерывистыми движениями рта и 4 продолжительное облизывание и жевательные движения. Соединения с нейролептической активностью будут понижать полную стандартную оценку групп, подвергнутых обработке лекарством, относительно необработанных контрольных крыс, в зависимости от их /соединений/ антагонистической силы воздействия на допаминовый рецептор.

Биологическая активность соединений по настоящему изобретению делает их полезными для лечения психотических заболеваний у людей. Например, эти соединения используются при лечении психотических заболеваний шизофренического типа, в частности соединения полезны для избавления или улучшения таких симптомов, как тревога, волнение, чрезмерная агрессивность, напряжение и общественная или эмоциональная замкнутость у психотических пациентов.

Соединение формулы (1) или его фармацевтически приемлемая соль назначается больному как индивидуально, так и в комбинации с фармацевтически приемлемыми носителями или разбавителями, в виде фармацевтической композиции, в соответствии с общепринятой фармацевтической практикой. Эти соединения назначаются орально или парентерально. Парентеральное назначение включает в себя особенно внутривенное и внутримышечное введение. Кроме того, в фармацевтической композиции, включающей соединение формулы (1) или его фармацевтически приемлемую соль, весовое отношение активного ингредиента, к носителю будет нормальным от 1:6 до 2:1, и предпочтительно 1:4 до 1:1. Однако в некоторых случаях выбранное соотношение зависит от растворимости активного компонента, необходимой дозировки и определенного метода лечения.

Для орального использования нейролептического агента по настоящему изобретению соединения назначаются, например, в форме таблеток или капсул, или в виде водных растворов или суспензий. В случае таблеток для орального применения носитель, который может быть использован, включает лактозу и кукурузный крахмал, а также могут быть добавлены смазывающие агенты, такие как стеарат магния. Для орального введения в виде капсул используемыми разбавителями являются лактоза и высушенный кукурузный крахмал. Когда требуются водные суспензии для орального применения, активный ингредиент может быть соединен с эмульгирующими или суспендирующими агентами. Если желательно, могут быть добавлены некоторые подслащивающие или ароматизирующие агенты. Для внутримышечного и внутривенного применения могут быть приготовлены стерильные растворы активного ингредиента, а pH растворов устанавливается подходящим и буферируется. Для внутреннего применения контролируется общая концентрация растворов для получения изотонического препарата.

Когда агент по настоящему изобретению используется для лечения психотического заболевания на человеке, дневная дозировка обычно определяется предписанием врача. Однако доза будет варьироваться в зависимости от возраста, веса и восприимчивости индивидуального пациента, а также степени симптомов у пациента. Однако в большинстве примеров эффективное количество для лечения психотического заболевания будет составлять дневную дозу от около 1 до 500 мг, предпочтительно около 5 до 100 мг, в единичной или раздробленной дозе, орально или парентерально. В некоторых случаях может быть необходимым использовать дозировку и выше этих ограничений.

Следующие примеры предусмотрены исключительно с целью дальнейшей иллюстрации. Используемая здесь номенклатура, включающая обозначения относительной стереохимии /R^*, S ^*/ и абсолютной стереохимии /R, S/, находится в соответствии с Rigaudi et al. IUPAC Nomenclature of Organic Chemistry, 1979 Edition, Pergamon Press, New York.

Пример 1 Рацемический диметил транс-1-(2-фталимидо)-этил/пипоридин -1,5-дикарбоксилат К хорошо перемешиваемой двухфазной смеси, содержащей карбонат натрия /500 г, 4,72 моль/ в воде /3 л/ и транс-2,5-пиперидин дикарбоксилат диметиловый эфир гидрохлорид /280 г, 1,18 моль/ в метиленхлориде /4,5 л/, добавляют постоянным потоком раствор 2-фталимидоэтил трифталат /417 г, 1,29 моль/ в метиленхлориде /3 л/ в течение более 3-часового периода. Органический слой отделяют, а водный экстрагируют свежим метиленхлоридом /3 л/. Объединенные органические экстракты промывают водой /3 л/, затем рассолом /3 л/, высушивают над безводным сульфатом магния и, наконец, концентрируют в вакууме до твердого остатка. Весь остаток растирают в порошок при кипячении с обратным холодильником в эфире /3 л/ при энергичном перемешивании в течение 15 мин. После охлаждения до комнатной температуры раствор выливают в гексан /3 л/ и полученную смесь перемешивают в течение 18 ч. Полученный бесцветный осадок собирают фильтрацией, а лепешку, остающуюся на фильтре, промывают гексаном /1 л/. Высушивание в вакууме дает 437,3 г /выход 99,1%/ указанного в заголовке соединения в виде бесцветного твердого продукта. TCX Rf (этилацетат/метиленхлорид 1:1 по объему, обрызгивание йодоплатинатом) 0,5.

Пример 2 Рацемический метод (7R^*, 9aS^*) 4, 6, 7, 8, 9a-гексагидро-2H,3H-пиридо/1,2-а/-пиразин-1-он-7-карбоксилат К хорошо перемешиваемой суспензии указанного в заголовке примера 1 соединения /194 г, 0,52 моль/ в метаноле /3 л/ добавляют гидразин моногидрат /57,1 г, 1,14 моль/. Реакционную смесь затем перемешивают 18 ч при комнатной температуре. Добавляют метиленхлорид /2 л/ и полученную смесь энергично перемешивают в течение 1 ч. Образующийся белый осадок отфильтровывают, а перед тем как растереть в порошок, лепешку на фильтре промывают метиленхлоридом /1 л/. Концентрирование фильтрата в вакууме дает бесцветный осадок, который гранулируют и затем энергично перемешивают при кипячении с обратным холодильником в метиленхлориде /3 л/ в течение 10 мин. Охлажденную смесь отфильтровывают и полученный фильтрат концентрируют в вакууме с получением указанного в заголовке соединения /выход 89,4 г, 81,6%/ в виде твердого продукта цвета слоновой кости, TCX Pf (метиленхлорид/метанол 9:1 по объему; обрызгивание йодоплатинатом) 0,38.

Пример 3 Рацемический /7R^*, 9aS^*/-пергидро-7-(гидроксиметил)-1H-пиридо-[1,2-a] пиразин К перемешиваемой взвеси амидоэфира, указанного в названии примера 2 /244 г, 1,15 моль/ в безводном тетрагидрофуране /ТГФ, 5,5 л/ прибавляют по каплям в токе азота 1,0 М раствор литийалюминийгидрата /2,33 л, 2,33 моль/, поддерживая температуру реакционной смеси ниже 40^oC. Затем смесь кипятят с обратным холодильником в течение 18 ч. После осторожного добавления по каплям воды /90 мл/ к реакции (охлаждение до комнатной температуры) последующего добавления 15% -ного водного гидроксида натрия /90 мл/ и в заключение еще воды /270 мл/ смесь перемешивают в течение 1 ч. Нерастворимые неорганические соли отделяют фильтрацией, а полученный фильтрат концентрируют в вакууме и получают легкий желтый твердый остаток /выход 179,4 г, 90,6%/, достаточно чистый для использования в следующей стадии без дополнительной очистки. TCX Rf (метиленхлорид/метанол/концентрированный водный аммиак 3 1 0,1 по объему; обрызгивание йодопластиатом) 0,19.

Пример 4 Рацемический /7R^*, 9aS^*/-2- (бензо[d] изоксазол-3-ил)-пергидро-7-(гидроксиметил)-1H-пиридо[1,2-a]пиразин Перемешиваемый раствор спиртоамида, указанного в заголовке примера 3 /179,4 г, 1,05 моль/, 3-хлор-1,2-бензо[d]изоксазол /194,2 г, 1,26 моль/ и 1,8-диазабицикло/5,4,0/ундец-7-ена /ДБУ, 197,9 г, 1,30 моль/ в пиридине /400 мл/ нагревают при 100^oC в течение 18 ч. После охлаждения до 35^oC добавляют воду /3 л/, метиленхлорид /2,5 л/ и, наконец, насыщенный водный раствор карбоната натрия /2 л/, а полученную двухфазную смесь энергично перемешивают в течение 3 ч. Рыжевато-коричневый твердый осадок, образовавшийся во время перемешивания, отфильтровывают, лепешку на фильтре промывают сначала водой и затем гексаном /по 1 л каждого/ прежде чем высушить в вакууме. Растирание в порошок всего образца /216 г/ с изопропиловым спиртом /630 мл/ с последующей фильтрацией и высушиванием в вакууме дает представленное в заголовке соединение /выход 154,5 г, 51%/ в виде легкого рыжевато-коричневого порошка, достаточно чистого для использования в следующей стадии без дополнительной очистки. TCX Rf (метиленхлорид/метанол 9 1 по объему; обрызгивание йодоплатинатом) 0,50. ¹³C ЯМР (CDCl₃) дельта (164.0, 161.1, 129.5, 122.3, 122.1, 116.2, 110.5, 66.3, 60.3, 58.7, 54.3, 53.7, 48.3, 39.1, 29.0, 26.7.

Пример 5 Рацемический (7R^*, 9aS^*)-2-(бензо[d] изоксазол-3-ил)-пергидро-7-(метансульфонилоксиметил)-1H-пиридо[1,2-a]пиразин К холодной /5^oC/ и перемешиваемой суспензии спирта, указанного в заголовке примера 4 /154,0 г 0,54 моль/, и триэтиламина /81,76 мл, 59,6 г, 0,589 моль/ в метиленхлориде /3 л/ добавляют по каплям раствор метансульфонилхлорида /43,55 мл, 64,5 г, 0,563 моль/ в метиленхлориде /350 мл/ в течение более 30 мин. Контроль с помощью ТСХ (метиленхлорид/метанол 9:1 по объему; обрызгивание йодоплатинатом) реакционной смеси после дополнительного получасового перемешивания свидетельствует о не полном завершении реакции. Полностью реакция осуществляется в течении 1/2 ч после добавления второй порции триэтиламина /8,23 мл, 6,0 г, 59,3 ммоль/ и метансульфонилхлорида /4,32 мл, 6,4 г, 55,9 ммоль/, добавленного по каплям в растворе метиленхлорида /20 мл/. Добавляют воду /3 л/ и метиленхлорид /1,5 л/ и двухфазную смесь энергично перемешивают перед тем, как разделить органическую и водную фазы. Водную часть затем экстрагируют свежим метиленхлоридом /1,5 л/. Органические экстракты затем объединяют, промывают рассолом /дважды по 2 литровым порциям/ и высушивают над безводным сульфатом натрия. Концентрирование в вакууме дает рыжевато-коричневый твердый продукт /178,0 г, 90,2% выход/ TCX Rf (метиленхлорид/метанол 9:1 по объему; обрызгивание йодоплатинатом): 0,24. MC m/z 365,1 (M, C₁₇H₂₃N₃O₄S).

¹³C ЯМР (CDCl₃) дельта 164.0, 160.9, 129.6, 122.4, 122.1, 116.0, 110.5, 71.9, 59.9, 57.7, 54.0, 53.3, 48.1, 37.4, 35.9, 28.4, 26.2.

Пример 6 Рацемический (7S^*, 9аS^*)-2-(бензо[d] изосказол-3-ил)-7-(цианометил)пергидро-IH-пиридо/1,2-а/пиразин Перемешиваемый раствор мезилата, указанного в заголовке примера 5 /177,5 г, 0,486 моль/ и цианида натрия /35,7 г, 0,729 моль/в N,N-диметилформамиде /3,0 л/ нагревают при 110^oC в течении 18 ч. Растворитель удаляют в вакууме, полученный рыжевато-коричневый твердый остаток растворяют в водно-метиленхлоридной /2,5 л каждого/ двухфазной смеси, pH хорошо перемешиваемой смеси устанавливают 10 /насыщенный водный раствор карбоната натрия/. Затем слои разделяют и водную фазу экстрагируют порцией свежеперегнанного метиленхлорида /1,5 л/. Объединенные органические экстракты промывают рассолом /две 1-литровые порции/, высушивают над безводным сульфатом натрия и концентрируют в вакууме с получением указанного в заголовке продукта в виде рыжевато-коричневого осадка /выход 137,3 г, 95,3%/. TCX Rf (этилацетат/гексан 1 1 по объему; обрызгивание йодоплатинатом) 0,20.

¹³C (CDCl₃) дельта 164.0, 161. 129.6, 122.4, 122.0, 117.9, 116.0, 110.5, 59.9, 59.5, 53.9, 53.3, 48.1, 32.9, 29.6, 28.7, 22.1. В этом продукте 7,9а водороды все еще транс.

Тем же способом мезилат продукта, указанного в заголовке примера 24, преобразуют в соответствующий нитрил, рацемический /7R^*, 9аS^* /-2-(бензо[d] изоксазол-3-ил)-7-(3-цианопропил)пергидро-IH-пиридо[1,2-а]пиразин, также имеющий 7 и 9а водороды в положении транс.

Пример 7 Рацемический /7S^*, 9аS^*/-7-(2-аминоэтил)-2-(бензо [d] изоксазол-3-ил)пергидро-IH-пиридо[1,2-а]пиразин К перемешиваемому нитрилу, указанному в заголовке примера 6, /136,9 г, 0,462 моль/ в безводном тетрагидрофуране /3,5 л/ добавляют по каплям 1,0 М раствора литийалюминийгида /ЛАГ/ в тетрагидрофуране /693 мл, 0,693 моль/ в течение 1 ч. Реакционную смесь кипятят с обратным кипятильником в течение 6 ч, затем перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч и, наконец, погашают осторожным добавлением по каплям воды/тетрагидрофурана (26 мл и 30 мл соответственно), 15% -ного водного раствора гидроксида натрия /26 мл/ и воды /80 мл/. Смесь перемешивают в течение 0,5 ч. Добавляют безводный сульфат натрия /400 г/ и отфильтровывают неорганические соли. Лепешку на фильтре промывают тетрагидрофураном /800 мл/и метиленхлоридом /1 л/. Промывание жидкости объединяют с фильтратом, полученный раствор концентрируют в вакууме с получением представленного в заголовке соединения в виде желтого твердого продукта /выход 131,9 г, 95%/. TCX Rf (метиленхлорид/метанол/концентрированный водный аммиак 9 1 0,1 по объему; обрызгивание йодплатинатом):0,28.

¹³C ЯМР/CDCl₃/ дельта 164.0, 161.1, 129.4, 122.2, 122.1, 116.2, 110.4, 61.7, 60.2, 54.2, 53.8, 48.3, 39.7, 38.7, 33.9, 30.7, 29.4.

Тем же способом 3-дианопропилзамещенный продукт предшествующего примера преобразуют в соответствующее 4-аминобутилпроизводное, которое обратно преобразуют в соответствующие имидные производные способами по примерам 10 - 12.

Пример 8 Оптически активный /7S, 9aS/-7-(2-аминоэтил)-2-(бензо[d]изоксазол-3-ил)пергидро-IH-пиридо[1,2-а]пиразин Рацемический амин, указанный в заголовке примера 7 /131,5 г, 0,438 моль/ растворяют в этаноле /2,4 л/ при кипячении с обратным холодильником. Добавляют -/+/- миндальную кислоту /66,6 г, 0,438 моль/, получая прозрачный раствор, которому дают остыть и оставляют при комнатной температуре на 18 ч. Бесцветный кристаллический осадок отфильтровывают, лепешку промывают дважды порциями по 300 мл диэтилового эфира. Высушивание в вакууме дает 92,6 г бесцветной кристаллической /частично разрушенные/ соли т. пл. 205 210^oC. Весь образец затем кипятят с обратным холодильником в этаноле /1,8 л в течение 1 ч, получая раствор-суспензию, которую отфильтровывают после того, как дают ей охладиться до комнатной температуры. Промывают лепешку на фильтре двумя 300 мл порциями диэтилового эфира, и далее высушивание в вакууме дает 75,6 г бесцветной кристаллической соли: т.пл. 214 217^oC, которую затем подвергают оптическому разделению и выделению 2S, 9aS /-/ -энантиомера в виде его соли -/+/- миндальной кислоты. Вновь весь образец кипятят с обратным холодильником в этаноле (1,0 л) в течение 0,5 ч, охлаждают до комнатной температуры и оставляют на 18 ч фильтрование с последующими промывками лепешки на фильтре эфиром и высушиванием в вакууме дают 66,3 г бесцветных кристаллов; т.пл. 216 218^oC. Только что описанную процедуру кристаллизации с использованием 1 л этанола в качестве растворителя для кристаллизации повторяют еще пять раз с получением 45,1 г разделенной соли -/+/- миндальной кислоты 7S, 9aS-/-/-энантиомера; т.пл. 223 224^oC. Весь образец растворяют в двухфазной смеси метиленхлорид (2,5 л) / вода (1,4 л) с доведением pH до 9 (насыщенный водный раствор карбоната натрия). Слои разделяют и водную часть экстрагируют 2 л свежего метиленхлорида. Концентрирование в вакууме высушенных безводным сульфатом натрия объединенных органических экстрактов дает указанное в заголовке соединение, имеющее 7,9а-водородные заместители в транс-положении (выход 29,9 г, 45,4%) в виде бесцветного аморфного продукта. []²_D⁰ -8,65^o (с 3,73, метиленхлорид). ¹³C ЯМР /CDCl₃/ дельта идентичны указанным для рацемического амина.

Оптическое разделение рацемического //-амина до настоящего 7S,9aS-/-/-амина подтверждено сравнительным исследованием ¹⁹F ЯМР их хирального амидного производного Мошера с соответствующими производными 7R, 9aR-/+/- пары (продукт примера 9). Отдельное исследование кристаллической дифракции X-лучей указанного производного амида Мошера установило абсолютно идентичную стереохимию с представленными в заголовке примера 9 и настоящим продуктами.

Пример 9 Оптически активный /7R, 9aR/-7-(2-аминоэтил) -2-(бензо[d]изоксазол-3-ил)пергидро-IH-пиридо[1,2-a]пиразин Раствор указанного в заголовке примера 7 рацемического амина /1,40 г, 3,79 ммоль/ и R -/-/- миндальной кислоты /577 мг, 3,79 ммоль/ в этаноле /24 мл/ оставляют стоять при комнатной температуре в течение 18 ч, в течение этого времени образуется тяжелая кристаллическая масса. Кристаллическая твердая масса отфильтровывается, промывается диэтиловым эфиром и высушивается в вакууме /270 мг/. Весь образец растворяют в горячем этаноле /5 мл/. Раствор концентрируют в вакууме до объема 4 мл и оставляют стоять при комнатной температуре в течение 18 ч до полной кристаллизации. Кристаллическую массу отфильтровывают, промывают диэтиловым эфиром и высушивают в вакууме с получением соли R-/-/-миндальной кислоты представленного 7R,9aR-/+/-амина, 107 мг /выход 12,5%/; т. пл. 218 222^oC; []²_D⁰ 19,6^o (c 0,56, метанол).

Весь образец растворяют в хорошо перемешиваемой метиленхлоридной /водной (8 мл и 4 мл соответственно) смеси с установлением pH 9,5 (насыщенный водный раствор карбоната натрия). Отделенный органический экстракт промывают равным объемом воды, сушат /безводный сульфат натрия/ и концентрируют в вакууме с получением разделенного правовращающего амина /51 мл, 7,3% полный выход/ в виде бесцветного аморфного твердого продукта. TCX Rf (метиленхлорид/метанол/ концентрированный водный раствор аммиака 9 1 0,1 по объему; обрызгивание йодоплатинатом) 0,28; []²_D⁰ + 7,86^o (с 1,22, метиленхлорид).

Пример 10 Совокупный метод А Рацемический /7S^*, 9aS ^* /-2-(бензо[d] изоксазол-3-ил)-пергидро-7-(2-(3,3-тетраметиленглутаримидо)-этил)-1H-пиридо[1,2-a]пиразин Смесь, содержащую рацемический амин, указанный в заголовке примера 7, /465 мг, 1,54 моль/ и 3,3-тетраметиленглутаровый альдегид /290 мг, 1,70 ммоль, Aldrich Chemical Co/. В ксилолах (6 мл, уровень кипения 139 - 144^oC)интенсивно кипятят с обратным холодильником в течение 18 ч. Ксилольный раствор осторожно декантируют от нерастворимой смолы, образовавшейся в процессе реакции; и смолу затем полностью экстрагируют со свежей порцией ксилола /4 мл/. Объединенные ксилольные порции концентрируют в вакууме до масла /0,65 г/. Флэш хроматография всего образца (20 г силикагеля, 32 63 меш; элюирование сначала этилацетатом / гексаном 1:1; снижение содержания гексана в элюирующей системе в процессе хроматографирования, приводящее к элюированию чистым этилацетатом при завершении) дает указанное в заголовке соединение /выход 75 мг, 10,8%/ в виде бесцветного аморфного твердого продукта. TCX Rf (элюирование этилацетатом, обрызгивание перманганатом калия): 0,25.

Пример 11 Совокупный метод B Рацемический /7S^*, 9aS^* /2 -(бензо[d]изоксазол-3-ил)-пергидро-7-(2-(3,3-триметиленглутаримидо)-этил)-1H-пиридо[1,2 -a]пиразин Смесь, содержащую рацемический амин по примеру 7 /98 мг, 0,326 ммоль/ и 3,3-тетраметиленглутаровый ангидрид /55 мг, 0,359 ммоль/ в "ксилолах" (4,0 мл, уровень кипения 139 144^oC), перемешивают и нагревают при 150^oC в течение 15 мин. Ксилольный растворитель осторожно удаляют в вакууме /имеет место значительное вспенивание/ с получением сырого нециклизованного промежуточного продукта, кислотоамида в виде янтарного твердого продукта. Проводят дегидратную циклизацию всего образца в уксусном ангидриде /1,0 мл/ путем нагревания реакционной смеси при 100 110^oC в течение 2,5 ч. Концентрирование смеси в вакууме дает твердый остаток, который кристаллизуют из изопропанола с получением 48,0 мг /выход 33,7%/ указанного в заголовке соединения: т. пл. 163,9 165,3^oC ¹³C ЯМР (CDCl₃) дельта 171.7, 164.0, 161.0, 129.5, 122.2(2), 116.0, 110.5, 61.3, 60.2, 54.2, 53.7, 48.2, 44.9, 37.4, 35.1, 34.7, 31.1, 32.1, 30.4, 29.3, 14.7.

Пример 12.

Совокупный метод B Оптически активный /7S, 9aS/-2-(бензо[d]изоксазол-3-ил)пергидро-7-(2-3,3-тетраметиленглутаримидо)-этил)-1H-пиридо[1,2-а] пиразин Смесь, содержащую 7S, 9aS(- (-) -амин, указанный в заголовке примера 8, /1,53 г, 5,09 ммоль/ и 3,3-тетраметиленглутаровый ангидрид /0,94 г, 5,59 ммоль, Aldrich Chemical Co/ в ксилолах /60 мл, уровень кипения 139 - 144^oC/ перемешивают и нагревают при 150^oC в течение 15 мин. Ксилолы осторожно удаляют в вакууме /имеет место значительное вспенивание/ с получением сырого нециклизованного амида кислоты в виде янтарного твердого продукта [TCX Rf (метиленхлорид/ метанол 9:1 по объему; обрызгивание йодоплатинатом) 0,45] достаточно чистого для получения имида без очистки. Весь образец перемешивают и нагревают в уксусном ангидриде /42 мл/ при 100 - 110^oC в течение 2,5 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме с получением твердого остатка, который размельчают в хорошо перемешиваемой смеси метиленхлорид/вода /60 мл и 50 мл соответственно/ при установлении pH 9,5 /насыщенный водный раствор карбоната натрия/. Фазы разделяют и водную фазу экстрагируют с равным объемом свежего метиленхлорида. Концентрирование в вакууме объединенных органических экстрактов дает желтый твердый продукт. Флэш-хроматография всего образца (30 г силикагеля, 32 63 меш); элюирование сначала метиленхлоридом с добавлением затем метанола для повышения полярности элюирующей системы до отношения метиленхлорид/метанол в конце равным 97:3 по объему дает чистый (TCX контроль в различных элюирующих системах; обрызгивание перманганатом калия) продукт, указанный в заголовке, в виде бесцветного аморфного твердого продукта /выход 1,40 г, 61% /. []²_D⁰ 4,6^o /c 2,3, метиленхлорид/. TCX Rf /этилацетат, обрызгивание перманганатом калия/: 0,25. HPM S m/z 450.2639 (M, C₂₆H₃₄O₃N₄). ¹³ЯМР (CDCl₃ дельта 172.1, 164.0, 161.1, 129.5, 122.2(2), 116.2, 110.5, 61.3, 60.2, 54.2, 53.7, 48.2, 44.9, 39.5, 37.5, 37.4, 34.2, 32.6, 30.4, 29.3, 24.2.

230 мг образца аморфного продукта дважды кристаллизуют из изопропанола /2 мл порции/ с получением 150 мг /выход 65,2%/ бесцветных кристаллов; т. пл. 157 158^oC. Спектроскопические свойства и оптическое вращение аморфного и кристаллического материала идентичны. Энантиселективное, количественное исследование высокоразрешающей жидкостной хроматографией /БРЖХ/ было осуществлено с использованием колонки хирального типа АГП (₁-глюкопротеин) (подвижная фаза: 0,01 М водный дигидрофосфат калия/диметилоктиламин 900:100: 0,2; скорость потока: 0,9 мл/ мин; ультрафиолетовый БРЖХ-детектор при длине волны 215 нм. Определенная этим исследованием оптическая чистота указанного в заголовке продукта составляет 95% Пример 13 Соль мезилата 69,6 мг /0,154 ммоль/ аморфного указанного в заголовке примера 12 продукта растворяют в этилацетате /1 мл/. Добавляют метансульфоновую кислоту /16,6 мг, 0,170 ммоль; 98% Aldrich Chemical Co/, полученный раствор перемешивают 2 ч при комнатной температуре, в течение которых происходит образование тяжелой кристаллической массы. Продукт отфильтровывают, промывают диэтиловым эфиром и высушивают в вакууме с получением мономезилатной соли продукта, указанного в заголовке примера 12, в виде бесцветных игл, 54 мг /выход 63,9% /; т.пл. 211 212^oC []²_D⁰ 3,7^o/ /c 2,1, метиленхлорид/, ¹³C ЯМР /CDCl₃/дельта 172.5, 164.2, 159.7, 130.2, 123.1, 121.4, 115.3, 110.7, 61.4, 59.6, 52.3, 56.5, 45.7, 44.6, 39.6, 37.5, 36.6, 31.4, 31.1, 28.6, 26.1, 24.2.

Эксперимент повторяют с большим количеством образца /468 мг, 1,04 ммоль/, получая идентичный кристаллический продукт /500 мг/ с 88% выходом.

Оптическая чистота этой мономезилатной соли определяется количественными энантиоселективными исследованиями ВРЖХ, описанными в примере 12, и составляет 98% Пример 14 Оптически активный /7R, 9aR/-2-(бензо[d]изоксазол-3-ил)пергидро-7-(2-(3,3-тетраметиленглутаримидо)этил)-1H-пиридо[1,2-a]пиразин Методом, описанным в примере 12, декстравращающий амин примера 9 /25 мг, 0,083 ммоль/ превращают в указанный в заголовке продукт /15 мг, выход 40%/, выделяемый в виде бесцветного аморфного твердого продукта. TCX Rf /этилацетат, обрызгивание перманганатом калия/: 0,25. []²_D⁰ + 3,63^o /o 0,77, метиленхлорид/. Оптическая чистота определена как 95% путем исследования с помощью энантиомерной ВРЖХ, как это описано в примере 12.

Пример 15 Рацемический /7S^*, 9aS^*/-2-(бензо[d] изоксазол-3-ил)-пергидро-7-(2-(циклогексилметилкарбониламино)-этил-1H-пиридо[1,2-a]пиразин К хорошо перемешиваемому раствору циклогексилуксусной кислоты /35 мг, 0,25 ммоль, Aldrich Chemical Co./ в безводном метиленхлориде /2 мл/ добавляют 1-гидроксибензотриазол (37 мг, 0,25 ммоль), 1-циклогексил-3-(2-морфолиноэтил)карбодиимид мето-п-толуолсульфонат (145 мг, 0,34 ммоль, Aldrich Chemical Co.) и амин, указанный в заголовке примера 7, (51 мг, 0,17 ммоль), и полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель удаляют в вакууме, остаток размельчают в хорошо перемешиваемой смеси метиленхлорид/вода (10 мл каждого) при установлении pH 9 (насыщенный водный раствор карбоната натрия). Отделенную органическую фазу концентрируют в вакууме до твердого продукта. Флэш-хроматография всего образца (2,0 силикагеля, 32 63 меш; элюирование метиленхлоридом/метанолом 97:3 по объему) дает указанное в заголовке соединение в виде бесцветного аморфного твердого продукта, 12 мг /выход 17%/. TCX Rf(метиленхлорид/метанол 9:1 по объему, обрызгивание перманганатом калия): 0,40. HRMS m/z 424.2854 (M, C₂₅H₃₆O₂N₄).

Пример 16 Рацемический /7S^*, 9aS^*/-2-(бензо[d]изоксазол-3-ил)пергидро-7-(2-теноиламино)-этил)-1H- пиридо[1,2-a]пиразин Раствор, содержащий амин, указанный в заголовке примера 7, /100 мг, 0,33 ммоль/, триэтиламин /0,051 мл, 37,2 мг, 0,37 ммоль/ и 2-теноилхлорид /0,039 мл, 53,5 мг, 0,37 ммоль, Aldrich Chemical Co/, в безводном метиленхлориде /5,0 мл/ перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляют равное количество воды, pH хорошо перемешанной смеси устанавливают равным 9,5 /водный насыщенный раствор карбоната натрия/. Фазы разделяют и водную часть экстрагируют равным объемом свежего метиленхлорида. Объединенные органические экстракты промывают водой /10 мл/, высушивают /безводный сульфат натрия/ и концентрируют в вакууме до твердого продукта. Флэш-хроматография всего образца /3,8 г силикагеля, 32 63 меш; элюирование этилацетатом/ дает указанное в заголовке соединение в виде бесцветного твердог