Способ получения иммуносорбентов
Патент 210336
Классы МПК
Способ получения иммуносорбентов
Иллюстрации
Реферат
ОП ИСАН И Е
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
2I0336
Союэ COBBTCKMl
Социалистических
Республик
Зависимое от авт. свидетельства №
Кл. 30h, 6
Заявлено 26.1.1967 (№ 1129229/30-15) с присоединением заявки №
Приоритет
Опубликовано 06.II.1968. Бюллетень № 6
Дата опубликования описания З.IV.1968
МПК А 61k
3 Д К 615.373.34.002.2 (088.8) Комитет по делам иаооретеиий и открытий при Совете Министров
СССР
Авторы изобретения
К. Л. Шаханина и Н. И. Манько
Заявитель
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОСОРБЕНТОВ
Известные способы получения иммуносорбентов путем пространственной поликонденсации молекул антигена не обеспечивают приготовления поликонденсационных иммуиосорбентов из полисахаридных антигенов.
Предлагаемый способ получения иммуносорбентов отличается тем, что в качестве конденсирующего агента используют диизоцианаты, например, гексаметилендиизоцианат, м- и
Il-ксилилендиизоцианаты.
Это отличие позволяет приготовлять поликонденсационные иммуносорбенты не только из белковых, но и из полисахаридных антиге,!! îâ.
Сущность описываемого .способа получения иммуносорбентов наглядно видна из следую:цих примеров.
Пример 1. В гомогенизатор помещают
12 мл 2%-,ного раствора гаммаглобулина быка и 1 2 мл 0,5 М боратного буфера с рН 7,4—
7,6, после чего добавляют при энергичном растирании в тонком слое 25 мг гексаметилендиизоцианата и продолжают растирание в гомогенизаторе еще 1 час. Образовавшуюся суспензию переносят в:склянку емкостью
250 л л, ополаскивают гомогенизатор 25—
50 мл физраствора, который переносят в ту же склянку. К полученной смеси добавляют
5 мл 1%-ного раствора углекислого аммония и встряхивают смесь на механической качалке при температуре +2 +4 С в течение 6 ча ..
Осадок отделяют центрифугпрованием, промывая при этом физраствором с рН 7,2 — 7,4 до исчезновения в надосадочной жидкости ионов аммония и растворимых белков. Готовый иммуносорбент хранят I103, слоем физраствора при температуре 2 — 4 С.
Пример 2. В колбу с мешалкой и капельной воронкой помещают 40 мл 2% -ного
10 раствора гаммаглобулина белка и 40 мл
0,15 М боратного буфера с рН 7,4 — 7,6. При энергичном перемешивании в течение 20 мин добавляют из капельной воронки 80 мг раствора гексаметилендиизоцианата в 40 лтл
15 хлороформа, не содержащего спирта, Смесь продолжают перемешивать в течение 2 час, затем добавляют 15 мл 1%-ного раствора углекислого аммония и перемешивают еще в течение 1 час. Все перечисленные операции
20 проводятся при комнатной температуре.
Реакционную;смесь переносят в перегонную колбу и о1гоняют хлороформ и часть во,jbl в вакууме водостройного насоса при температуре 25 — 30 С.
25 Полученный остаток обрабатывают, как описано выше.
Пример 3. В колбу с мешалкой и капельной воронкой помещают 40 мл 2%-ного раствора гаммаглобулина быка и 40 мл
30 0,15 М боратного буфера с рН 7,6 — 7,8. Смесь
210336
Составитель П. Мурый
Текред Л. Я. Бриннер
Редактор В. С. Сорокин
Корректоры: Е. Н. Гудзона и В. В. Крылова
Заказ 571/!9 Тираж 530 Подписное
ЦИИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР
Москва, Центр, пр. Серова, д, 4
Типография, пр. Сапунова, 2 перемешивают, охлаждают до 4 С и добавляют к ней по каплям при,непрерывном перемешивании 10 лл диоксана, не содержащего перекисей. В течение 2 час при перемешивании прикапывают 90,ил раствора м-ксилилендиизоцианата в 10 мл диоксана. Смесь перемешивают cpm температуре 4 С в течение
6 час, отделяют образовавшийся осадок центрифугированием, смешивают с 40 мл физраствора и 10 ил 1о7о-ного раствора углекислого аммония и оставляют при комнатной температуре на 1 час, затем центрифугируют. Надосадочную жидкость отбрасывают, а обработку осадка ведут как и в примере 1.
Свойства иммуносорбентов, получаемых описываемым способом, можно менять, изменяя соотношение между количествами антигена и конденсирующего агента.
5 Предмет изобретения
Способ получения,иммуносорбентов путем пространственной поликонденсации молекул антигена, отличающийся тем, что, с целью
10 приготовления поликонденсационных иммуносорбентов из белковых и полисахаридных антигенов, в качестве конденоирующего агента используют диизоцианаты, например, гексаметилендиизоцианат, м- и п-ксилилендиизоци15 анаты.