Несольватированный кристаллический 6-гидрокси-2-(4- гидроксифенил)-3-[4-(2-пиперидиноэтокси) бензоил]-бензо-[b]- тиофенгидрохлорид, обладающий антиэстрогенной и антианрогенной активностью, фармацевтическая композиция

Несольватированный кристаллический 6-гидрокси-2-(4- гидроксифенил)-3-[4-(2-пиперидиноэтокси) бензоил]-бензо-[b]- тиофенгидрохлорид, обладающий антиэстрогенной и антианрогенной активностью, фармацевтическая композиция

Реферат

 

Изобретение относится к новой несольватированной кристаллической форме 6-гидрокси-2-(4-гидроксифенил)-3-/4-(2-пиперидиноэтокси)бензоил/бензо[b] тиофенгидрохлорида, которая может применяться в качестве фармацевтически активного агента, фармацевтическая композиция. 3 с. и 1 з.п. ф-лы, 9 табл.

Изобретение относится к новому фармацевтическому продукту. Более конкретно оно относится к новой, несольватированной кристаллической форме 2-арил-6-гидрокси-3-/4-(2-аминоэтокси) бензоил-бензо[b]тиофена.

В патенте США N 4418068 раскрыт 6-гидрокси-2-(4-гидроксифенил)-3-/4- (2-пиперидиноэтокси)бензоил/бензо[b] тиофенгидрохлорид, известный как ралоксифенгидрохлорид, который, как было показано, обладает перспективой применения в качестве фармацевтически активного агента. К сожалению, оказалось, что это соединение чрезвычайно трудно получить в чистом виде. Конкретная проблема связана с примесями за счет растворителя. Так, например, в способе получения ралоксифена, описанном в Journal of Medicinal Chimisiy 27(8), 1057-1066 (1984), серьезным недостатком является то, что получают сольватированное соединение, загрязненное хлорбензолом, который, как известно, является канцерогеном, далее, другие способы, описанные в литературе, используют классическое ацилирование Фриделя-Крафтса с алюминийхлоридным катализатором. Получаемый этими способами продукт содержит примесь алюминия и различные побочные продукты-тиоэфиры, которые трудно поддаются удалению. Кроме того, продукт, описанный в этих литературных ссылках, отличается неприятным запахом тиола или сульфида.

В соответствии с изобретением найдено, что можно получать новую, несольватированную кристаллическую форму ралоксифена, не содержащую, например, таких примесей, как хлорбензол и алюминий, за счет неизвестного до настоящего времени способа синтеза.

Новая кристаллическая форма изобретения демонстрирует дифракционную картину рентгеновских лучей, представленную в табл. 1.

Предпочтительно, чтобы в новой несольватированной форме ралоксифенгидрохлорида количество 6-гидрокси-2-(4-гидроксифенил) -3-/4-(2-пиперидиноэтокси)бензоил/бензо[b] тиофенгидрохлорида, присутствующего в кристаллическом материале, составляло бы по крайней мере 95% по весу /W/W/, предпочтительно по крайней мере 98%, более предпочтительно по крайней мере 99%. Более конкретно эта предпочтительная форма практически не должна содержать хлорбензола. Кроме того, эта предпочтительная форма также предпочтительно не должна содержать солей алюминия или алюминийорганических соединений. Эта предпочтительная форма практически не должна иметь запаха.

Термин "практически не содержит хлорбензола", в том смысле, как он использован в описании, относится к несольватированному кристаллическому 6-гидрокси-2-/4-гидроксифенил/-3-/4-(2-пиперидиноэтокси бензоил/бензо[b] тиофенгидрохлориду, представляющему соединение, содержащее менее 5% хлорбензола в расчете на вес (вес/вес). Предпочтительно, чтобы количество хлорбензола было менее 2%, более предпочтительно менее 1%. И наиболее предпочтительно, чтобы количество хлорбензола в несольватированном кристаллическом материале было менее 0,6%.

Термин "практически не содержит примесей солей алюминий или алюминийорганических соединений", в том смысле, как он использован в описании, относится к несольватированному кристаллическому 6-гидрокси-2- 4-гидроксифенил)-3-/4-(2-пиперидиноэтокси)бензоил/бензо[b] тиофенгидрохлориду и представляет кристаллическое соединение, содержащее менее 5% солей алюминия или алюминийорганических примесей в расчете на вес (вес/вес). Представители солей алюминия включают (хотя и не ограничиваются ими) гидроксид алюминия, алюминийоксиды и их гидратированные формы. Представители алюминийорганических соединений включают (но не ограничиваются ими) алкоксиды алюминия, комплексы алюминия (III) с соединениями формулы I или IV и тиоалюминаты. Предпочтительно, чтобы количество солей алюминия или алюминийорганических соединений в виде примесей было менее чем 2%, более предпочтительно менее чем 1%.

Термин "практически без запаха" в том смысле, как он использован, относится к несольватированному кристаллическому 6-гидрокси-2- (4-гидроксифенил)-3-/4-(2-пиперидиноэтокси)бензоил/бензо [b]тиофенгидрохлориду и характеризует соединение, которое содержит менее 3% примесей меркаптана или сульфида. Предпочтительно, чтобы количество примесей меркаптана или сульфида было менее 2%, более предпочтительно менее 1%. Представители примесей меркаптана или сульфида включают (но не ограничиваются ими) C₁-C₆ алкилтиолы и метил-C₁-C₆алкилсульфиды.

Такой несольватированный кристаллический материал является более чистым, нежели материал, получаемый описанными в литературе способами. Такой материал не содержит примесей алюминия, а также не содержит хлорированных алифатических углеводородных растворителей или ароматических растворителей. Такая несольватированная кристаллическая форма особенно предпочтительна для использования при получении фармацевтических композиций.

Получение такой новой кристаллической формы ралоксифенгидрохлорида требует открытия нового способа, который включает следующие стадии: а) ацилирование бензотиофена формулы где R⁴ - C₁-C₄ алкокси, R⁵ - C₁-C₄ алкил, ацилирующим агентом формулы: где R⁶ - хлор, бром или гидроксил; HX - NCl или HBr; R² и R³ вместе с соседним атомом азота образуют группу пиперидина; в присутствии , где X' представляет хлор или бром; b) деалкилирования фенольных групп продукта ацилирования со стадии a) за счет реакции с дополнительным количеством , где X имеет указанные ранее значения; c) выделения кристаллического сольвата соединения формулы: где R¹ - гидроксил; HX, R² и R³ имеют указанные ранее значения; d) взаимодействия указанного кристаллического сольвата в метаноле или в смеси метанола и воды с примерно одним эквивалентом основания, e) необязательной экстракции раствора со стадии (d) алифатическим углеводородным растворителем, f) добавления примерно одного эквивалента соляной кислоты к метанольному раствору со стадии (d) или (e) и g) выделения несольватированного кристаллического соединения.

В описанном способе предпочтительно, чтобы R⁴ представлял бы метокси, R⁵ - метил, R⁶ - хлор, HX = HCl, = BCl₃, алифатическим углеводородным растворителем был бы гексан или гептан, а в качестве основания - гидроксид натрия.

Термин "молярный эквивалент" в том смысле, как он использован в описании, относится к числу молей реагента тригалоидного соединения бора по отношению к числу молей исходного бензотиофенового соединения. Так, например, три миллимоля треххлористого бора подвергают взаимодействию с одним миллимолем бензотиофенового соединения, что соответствует трем молярным эквивалентам треххлористого бора.

Термин "сольват" означает агрегат, который содержит одну или более из молекул такого растворенного вещества, как соединение формулы I, с молекулой растворителя.

Представительные сольваты образуются с хлорбензолом и 1,2-дихлорэтаном.

В новом способе, который используют для получения новой кристаллической формы изобретения, используют треххлористый бор или трехбромистый бор в качестве катализатора ацилирования вместо алюминийхлорида, как указано в известных из литературы способах получения ралоксифена. С алюминийхлоридом трудно работать, особенно в промышленном масштабе. Кроме того, для ацилирования или деалкилирования необходимо большое количество алюминийхлорида, обычно шесть эквивалентов. Алюминийхлорид образует большое количество побочных продуктов, которые вовлекаются в процесс осаждения продукта и которые затем трудно удалить из фармацевтически активных 2-арил-6-гидрокси-3-/4-(2-аминоэтокси)-бензоил/бензо[b] тиофенов. Реакции, катализируемые алюминийхлоридом, обычно являются реакциями гетерогенной смеси. Описанный способ является гомогенным, и побочные продукты бора являются растворимыми в используемых на дальнейших стадиях растворителях. Далее, деалкилирование, катализируемое алюминийхлоридом, требует добавления меркаптана или сульфида для расщепления алкиларилэфира, что приводит к образованию диалкилсульфидов, которые обладают неприятным запахом. Эти меркаптаны или сульфиды можно удалить за счет перекристаллизации, однако в результате получается растворитель перекристаллизации с пахучими примесями. Новый способ исключает применение алюминия и применение меркаптанов и сульфидов с неприятным запахом. Известными ранее способами получали большое количество родственных соединений и много остаточных солей алюминия в конечном продукте. Примеры родственных веществ включают 6-гидрокси-2-(4-метоксифенил)-3-/4-(2-пиперидиноэтокси)бензоил/бензо [b] тиофен, 2-(4-гидроксифенил)-6-метокси-3-/4-(2-пиперидиноэтокси) бензоил/бензо[b] тиофен, 6-гидрокси-3-(4-гидроксибензоил)-2-(4-гидроксифенил)бензо[b] тиофен, пропил-4-(2-пиперидиноэтокси)тиобензоат, метил-4-(2-пиперидиноэтокси)бензоат, 6-гидрокси-2-(4-гидроксифенил)-3-/4-(2-пиперидиноэтокси)-бензоил/-5-/4-(2-пиперидиноэтокси) бензоил/бензо[b] тиофен и 6-гидрокси-2-(4-гидроксифенил)-3-/4- (2-пиперидиноэтокси)бензоил/-7-/4-(2-пиперидиноэтокси)бензоил/бензо[b] тиофен. Побочные продукты, содержащие бор, легко удалить из конечного продукта. Кроме того, новый способ позволяет избежать удаления отработанных соединений алюминия. Если реакцию ведут в 1,2-дихлорэтане, реакции являются гомогенными, что позволяет использовать более высокие концентрации и получать кристаллические сольваты, которые легко выделять. Соединения формул II и III, исходные материалы изобретения, можно получить, используя известные методы органического синтеза.

Исходное соединение формулы II можно легко получить по схеме синтеза, которая изображена на схеме 1 и проиллюстрирована в примере получения 1: Схема 1 Соединения формулы II, где R⁴ представляет C₁-C₄алкокси, а R⁵ - C₁-C₄алкил, можно получить, вначале подвергая взаимодействию 3-алкоксибензолтиол с 4'-алкоксифенацил бромидом в присутствии сильного основания. Подходящие основания для этого превращения включают (но не ограничиваются ими) гидроксид калия и гидроксид натрия. Реакцию обычно ведут к этаноле или в смеси воды и этанола при температуре около 0 - 50^oC. Следующая стадия является циклизацией 3-алкоксифенилфенацилсульфида. Циклизацию обычно ведут, нагревая 3-алкоксифенилфенацилсульфид в полифосфорной кислоте. Обычно циклизацию ведут при температуре около 80 - 120^oC, предпочтительно 85 - 90^oC. Бензотиофен формулы II обычно очищают за счет перекристаллизации. Так, например, если R⁴ представляет метокси, а R⁵ - метил, соединение формулы II можно перекристаллизовать из этилацетата.

Ацилирующий агент для рассматриваемого способа, соединение формулы III, можно получить, как показано на схеме II, где R², R³, R⁶ и HX имеют указанные ранее значения, а R представляет собой C₁-C₄алкил.

Схема II Обычно C₁-C₄-алкил-4-гидроксибензоат алкилируют 1-/2- хлорэтил/-пиперидином в присутствии неорганического основания и сложноэфирную группу гидролизуют до получения соединений формулы III, где R⁶ представляет собой гидроксил. Подходящие для этого алкилирования основания включают карбонат калия и карбонат натрия. Подходящими для такого алкилирования растворителями являются такие не реакционные полярные органические растворители, как метилэтилкетон и диметилформамид. Сложный эфир гидролизуют, используя стандартные способы синтеза, например реакцию алкилированного промежуточного соединения с водной кислотой или основанием. Так, например, этиловый сложный эфир легко гидролизуется в реакции с 5н. гидроксидом натрия в смешивающемся с водой в органическом растворителе, например метаноле. В результате подкисления реакционной смеси концентрированной соляной кислотой приводит к получению соединения формулы III, где R⁶ представляет гидроксил в виде соли - гидрохлорида.

Соединения формулы III, где R⁶ представляет хлор или бром, можно получить в результате галоидирования соединений формулы III, где R⁶ представляет гидроксил. Подходящие галоидирующие агенты включают оксалилхлорид, тионилхлорид, тионилбромид, трехбромистый фосфор, трифосген и фосген. Предпочтительно, чтобы R⁶ представлял хлор. Подходящие растворители для этой реакции включают метиленхлорид, 1,2-дихлорбензол, хлорбензол и 1,2-дихлорэтан. Предпочтительно вести реакцию галоидирования в том же растворителе, что и последующую реакцию ацилирования. Каталитическое количество диметилформамида, около 0,05 - 0,25 эквивалентов, добавляют в реакционную смесь хлорирования. Если реакцию ведут в 1,2-дихлорэтане, реакция завершается за 2 - 5 ч при температуре около 47^oC. Соединения формулы III, в которых R⁶ представляет хлор, можно хранить либо в твердом виде, либо в растворе, либо в смеси с метиленхлоридом, хлорбензолом, 1,2-дихлорбензолом или 1,2-дихлорэтаном. Предпочтительно вести реакцию хлорирования и ацилирования последовательно в одном и том же реакторе.

2-арил-6-гидрокси-3-/4-(2-аминоэтокси)бензоил[b] тиофены можно получить ацилированием и последующим деалкилированием фенольных групп на двух различных стадиях или последовательно в одном реакторе. Постадийный синтез описывается в следующих пунктах. Ацилированное промежуточное производное бензотиофена, соединение формулы IV, можно получить, как показано на схеме III, где R², R³, R⁴, R⁵, R⁶ и HX имеют указанные ранее значения.

Схема III Обычно бензотиофеновое производное II ацилируют соединением формулы III, используя треххлористый бор или трехбромистый бор в качестве катализатора ацилирования. Реакцию ведут в таком органическом растворителе, как хлорбензол, метиленхлорид, 1,2-дихлорэтан, 1,2-дихлорбензол, бромбензол, хлороформ, 1,1,2,2-тетрахлорэтан, 1,2,3-трихлорпропан или фторбензол. Предпочтительно вести ацилирование в метиленхлориде, хлорбензоле или 1,2-дихлорэтане. Более предпочтительно проводить стадию ацилирования в метиленхлориде. Скорость ацилирования соединения формулы II и скорость деалкилирования фенольных эфиров формул II и IV меняются в зависимости от выбора растворителя, температуры реакции и выбора тригалоида бора. Так как соединения формулы II содержат одну или более из незащищенных фенольных групп, их нелегко ацилировать в таких условиях, и степень деалкилирования следует свести к минимуму. Так как трехбромистый бор наиболее предпочтителен для деалкилирования фенольных эфиров, предпочтительным тригалоидом бора для катализа ацилирования является треххлористый бор. Для реакций с катализатором треххлористым бором в метиленхлориде реакцию ацилирования можно вести при комнатной температуре, с минимальным деалкилированием соединений формулы II и IV. В других растворителях реакцию ацилирования ведут при более низких температурах, таких, как --10^oC - +10^oC, для того, чтобы свести к минимуму степень деалкилирования в реакции исходных материалов и продукта. Если R⁶ представляет хлор, для реакции ацилирования необходимы по крайней мере 2 молярных эквивалента такого реагента, как тригалоид бора. Если в качестве ацилирующего агента используют бензойную кислоту (R⁶=OH), тогда обычно используют пять эквивалентов тригалоида бора. Соединение формулы IV можно выделить в виде соли - гидробромида или гидрохлорида или в виде свободного основания.

В постадийном способе ацилированное промежуточное соединение (соединение формулы IV) деалкилируют до получения соединения формулы I, как показано на схеме IV, где R¹, R², R³, R⁴, R⁵ и HX имеют указанные ранее значения.

Схема IV Соединение формулы 1 можно получить при взаимодействии гидрохлоридной или гидробромидной соли соединения формулы IV с трехбромистым бором или треххлористым бором. Предпочтительным тригалоидом бора для деалкилирования является трехбромистый бор. Такую реакцию деалкилирования можно вести в различных органических растворителях, таких, как метиленхлорид. 1,2-дихлорэтан, хлороформ, 1,1,2,2-тетрахлорэтан, 1,2,3-трихлорпропан, 1,2-дихлорбензол или фторбензол. Предпочтительным растворителем является 1,2-дихлорэтан. Если в качестве исходного соединения используют соль присоединения кислоты, количество побочного продукта, образующегося при деалкилировании аминоэтильной группы, сводится к минимуму. Если в качестве растворителя используют метиленхлорид, а реагентом бора является треххлористый бор, реакцию обычно ведут при температуре около 55 - 75^oC, получая соединение формулы I без заметного отщепления аминоэтильной группы. В таких других растворителях, как хлороформ, 1,2-дихлорэтан, 1,2-дихлорбензол или фторбензол, деалкилирование происходит легко при комнатной температуре. Так, например, если растворителем является 1,2-дихлорэтан, реакцию обычно ведут при 25-35^oC без заметного отщепления аминоэтильной группы. Для завершения реакции в разумное время обычно используют четыре эквивалента реагента -тригалоида бора.

Предпочтительно получать соединения формулы I в реакции "в одном реакторе", синтезируя их из соединений формул II и III, как представлено на схеме V, где R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶ и XH имеют указанные ранее значения.

Схема V Бензотиофен соединения формулы II ацилируют соединением формулы III в присутствии треххлористого бора или треххромистого бора; треххлористый бор предпочтителен для способа "в одном реакторе". Реакцию можно вести в таких различных органических растворителях, как хлороформ, метиленхлорид, 1,2-дихлорэтан, 1,2,3-дихлорпропан, 1,1,2,2-тетрахлорэтан, 1,2-дихлорбензол или фторбензол. Предпочтительным растворителем для этого синтеза является 1,2-дихлорэтан. Реакцию ведут при температуре от около -10^oC до около 10^oC, предпочтительно при 0^oC. Реакцию лучше вести при концентрациях бензотиофенового соединения формулы II от около 0,2M до около 1,0M. Реакция ацилирования обычно завершается примерно через 2 - 8 ч.

Ацилированный бензотиофен соединения формулы IV превращают в соединение формулы I без выделения. Это превращение осуществляют, добавляя дополнительное количество тригалоида бора и нагревая реакционную смесь. Предпочтительно добавлять от двух до пяти эквивалентов треххлористого бора к реакционной смеси, более предпочтительно три молярных эквивалента. Эту реакцию ведут при температуре около 25-40^oC, предпочтительно при 35^oC. Обычно реакция завершается спустя 4 - 48 ч. Реакцию ацилирования/деалкилирования гасят спиртом или смесью спиртов. Подходящие для целей гашения реакции спирты включают метанол, этанол и изопропанол. Предпочтительно реакционную смесь ацилирования/деалкилирования добавлять к 95:5 смеси этанола и метанола (3A). 3A этанол может быть комнатной температуры или может быть нагрет до кипения с обратным холодильником, предпочтительно при кипении с обратным холодильником. Если реакцию гасят таким образом, соединение формулы I легко кристаллизуется из полученной спиртовой смеси. Обычно используют 1,25-3,75 мл спирта на миллимоль исходного бензотиофена.

Если используют BCl₃, кристаллический продукт этого процесса "в одном реакторе" выделяют в виде сольвата гидрохлоридной соли. Такие кристаллические сольваты получают в различных условиях. Обычно форма продукта, получаемого таким способом, определяется выбором растворителя ацилирования/деалкилирования, тригалоида бора и условий обработки. Так, например, если растворителем ацилирования/деалкилирования служит 1,2-дихлорэтан, 1,2,3-трихлорпропан или фторбензол, выделяемый продукт представляет собой кристаллический сольват, содержащий 1,2-дихлорэтан, 1,2,3-трихлорпропан или фторбензол соответственно.

Наиболее подходящим сольватом соединения формулы I является сольват 1,2-дихлорэтана. Этот сольват получают, проводя процесс ацилирования/деалкилирования "в одном реакторе" в 1,2-дихлорэтапе. Если R¹ представляет гидроксид, R² и R³ вместе с соседним атом азота образуют группу пиперидина, а HX представляет HCl, тогда сольват 1,2-дихлорэтана может существовать в двух различных формах. Одна форма кристаллического сольвата, называемая кристаллической формой 1, получается, когда катализируемую треххлористым бором реакцию ацилирования/деалкилирования гасят этанолом. Предпочтительно использовать смесь этанола и метанола (95:5) при получении этой кристаллической формы. Такой конкретный кристалл характеризуется дифракционной картиной рентгеновских лучей, представленной в табл. 2.

Количество 6-гидрокси-2-[4-гидроксифетил] -3-/4-[2-пиперидиноэтокси] бензоил/бензо[b]тиофенгидрохлорида, находящееся в этом кристаллическом материале, составляет около 87,1% по данным жидкостной хроматографии высокого разрешения (ЖХВР), что раскрыто далее. Количество 1,2-дихлорэтана, присутствующее в этом кристаллическом материале, составляет около 0,55 молярных эквивалентов по данным спектроскопии ядерного магнитного резонанса.

Крупный, аналитически чистый отдельный кристалл формы 1 сольвата 1,2-дихлорэтана получают для анализа дифракции рентгеновских лучей отдельного кристалла. Такой отдельный кристалл получают, помещая насыщенный метанольный раствор 6-гидрокси-2-(4-гидроксифенил)-3-/4-(2-пиперидиноэтокси)бензоил/бензо[b] тиофенгидрохлорида в атмосферу, насыщенную 1,2-дихлорэтаном (см. пример 6). Получают всего 8419 рефлексов для 20 менее 116^oC, и их используют для определения структуры. По данным дифракции рентгеновских лучей четко видно, что кристаллический материал представляет собой сольват 1,2-дихлорэтана с отношением числа молекул растворителя к растворенному материалу 1: 2. Теоретический спектр дифракции рентгеновских лучей порошка, рассчитанный на основании данных для дифракционной картины отдельного кристалла, идентичен тому, который представлен в табл. 2, что свидетельствует об идентичности обоих сольватов.

Новая, несольватированная кристаллическая форма 6-гидрокси-2-(4-гидроксифенил)-3-/4-(2-пиперидиноэтокси) бензоил/бензо[b] тиофенгидрохлорида, представленная в изобретении, предпочтительна для применения в фармацевтических композициях, так как в ней отсутствует растворитель, который может оказать вредное воздействие на пациента. Эту кристаллическую форму можно получить в результате перекристаллизации сольватированной гидрохлоридной соли, получаемой в процессе ацилирования/деалкилирования, и катализируемого треххлористым бором. Обычно сольватированную гидрохлоридную соль добавляют к раствору гидроксида натрия в метаноле или в смеси метанола и воды. Используют по крайней мере один эквивалент основания для растворения и для обеспечения того, чтобы гидрохлоридная соль была бы превращена в свободное основание. Необязательно добавляют активированный уголь к полученному раствору, чтобы облегчить удаление примесей. Полученную смесь фильтруют для удаления активированного угля, если он присутствует, а также всех нерастворимых примесей. Полученный фильтрат необязательно экстрагируют алифатическим углеводородным растворителем, таким, как гексан или гептан, для удаления части оставшегося растворителя, который был использован в реакции ацилирования/деалкилирования. Стадия экстракции необходима, если реакцию ацилирования/деалкилирования ведут в таких ароматических растворителях, как о-дихлорбензол. Метанольный раствор подкисляют соляной кислотой, например газообразной или водной соляной кислотой, вызывая кристаллизацию 6-гидрокси-2-(4-гидроксифенил)-3-/4- (2-пиперидиноэтокси)бензоил/бензо[b] тиофена в виде несольватированной гидрохлоридной соли. Полученную кристаллическую суспензию предпочтительно перемешивают при комнатной температуре в течение 1-2 ч, чтобы обеспечить завершение кристаллизации. Несольватированную кристаллическую форму выделяют фильтрованием с последующей сушкой в вакууме.

Следующие примеры не предназначены для того, чтобы ограничить объем изобретения каким-либо образом. Все эксперименты по ацилированию и деалкилированию ведут при положительном давлении сухого азота. Все растворители и реагенты используют сразу по получении. Проценты обычно выражаются как весовые проценты (вес/вес), за исключением растворителей ЖХВР, которые рассчитывают в расчете на объем (объем/объем). Данные протонного магнитного ядерного резонанса (¹H-ЯМР) получены на спектрометре Bruker AC-300 FTNMR с рабочей частотой 300,135 МгГц. Температуры плавления определяют с помощью дифференциального сканирующего калориметра (DSC) в ТА приборе DCB 2920, используя закрытую кювету при скорости нагревания 2^oC/мин. Дифракционный спектр рентгеновских лучей для порошков получают на рентгеновском порошковом дифрактометре Siemeuns D5000, используя излучение меди и Si(Li) детектор.

За окончанием реакции обычно следят с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения (ЖХВР). За реакцией получения хлорангидрида соединения формулы III, где R⁶ представляет хлор, следят с помощью Zorbax RX-C8 колонки (25 см х 4,6 мм вн.д., 5 мкм размер частиц), элюируя смесью 60 мМ фосфата (KH₂PO₄) и 10 мМ октансульфоната (pH 2,0) (ацетонитрила (60:40)). Соединение формулы III обрабатывают метанолом и анализируют, используя в качестве стандарта для сравнения метиловый сложный эфир. Реакцию контролируют, добавляя около 0,3 мл раствора хлорангидрида к 1 мл метанола ВЭЖХ степени чистоты. Полученную смесь интенсивно встряхивают и оставляют реагировать. Через 30 мин добавляют 6 мл ацетонитрила, а затем разбавляют до 100 мл указанным ранее элюентом.

За завершением реакций ацилирования, деалкилирования или ацилирования/деалкилирования следят с помощью ВЭЖХ. Образцы реакционной смеси анализируют, используя колонку Zorbax RX-C8 (25 см х 4,6 мм вн.д., 5 мкм размер частиц), используя в качестве элюента градиент системы растворителей, представленный в табл. 3.

Реакционную смесь анализируют, разбавляя 0,1-0,2 мл образец до объема 50 мл смесью 60:40 A/B. Аналогично маточный раствор перекристаллизаций исследуют, отбирая образцы.

Количество (в процентах) 6-гидрокси-2-(4-гидроксифенил)-3-/4-(2-пиперидиноэтокси)бензоил/бекзо[b] тиофенгидрохлорида в кристаллическом материале (степень чистоты) определяют следующим способом. Образец кристаллического твердого вещества (5 мг) взвешивают в 100 мл мерной колбе и растворяют в смеси 70/30 75 мм буфера фосфата калия (pH 2,0) и ацетонитрила. Аликвот этого раствора (10 мкл) анализируют с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения, используя колонку Zorbax RX-C8 (25 см х 4,6 мм вн.д, размер частиц 5 мкм) и детектор УФ (280 нм). При этом используют градиент системы растворителей, представленный в табл. 4.

Процентное содержание 6-гидрокси-2-(4-гидроксифенил)-3-/4-(2-пиперидиноэтокси)бензоил[b]тиофенгидрохлорида в образце рассчитывают, используя площадь пика, наклон (m) и отсекаемый отрезок (b) калибровочной кривой со следующим уравнением: Процентное содержание растворителя, такого, как метанол, этанол или 1,2-дихлорэтан, присутствующее в кристаллическом материале, определяют с помощью газовой хроматографии. Твердый кристаллический образец (50 мг) взвешивают в 10 мл мерной колбе и растворяют в растворе 2-бутанола (0,025 мг/мл) и диметилсульфоксида. Образец этого раствора анализируют с помощью газовой хроматографии, используя колонку DB Wax (30 м х 0,53 мм вн.д., размер частиц 1 мк), при скорости потока 10 мл/мин с пламенно-ионизационным детектором. Температуру колонки повышают с 35^oC до 230^oC за 12 мин. Количество растворителя определяют по сравнению с внутренним стандартом (2-бутанолом), используя следующую формулу: где C - отношение растворителя в образце, D -среднее отношение стандарта для конкретного растворителя, E - средний вес стандарта, F - вес образца (мг), G - объем образца (10 мл), H - объем стандарта (10 000 мл) J - чистота стандарта (%).

Пример получения 1. 6-метокси-2-/4-метоксифенил/бензо[b]тиофен Раствор З-метоксибензолтиола (100 г) и гидроксида калия (39,1 г) в 300 мл воды добавляют к денатурированному этанолу (750 мл), и полученную смесь охлаждают примерно до 0^oC. Эту холодную смесь обрабатывают 4'-метоксифенацилбромидом (164 г) несколькими небольшими порциями. После завершения добавления полученную смесь охлаждают еще 10 мин, затем дают ей нагреться до комнатной температуры. Через три часа эту смесь концентрируют в вакууме, а остаток обрабатывают водой (200 мл). Полученную смесь обрабатывают этилацетатом и фазы разделяют. Органическую фазу промывают дважды водой, раствором бикарбоната натрия тоже дважды и дважды раствором хлорида натрия. Органическую фазу сушат над сульфатом магния, фильтруют и выпаривают досуха в вакууме до получения 202 г -(3-метоксифенилтио)-4-метоксиацетофенона. Неочищенный продукт кристаллизуют из метанола и промывают гексаном до получения 158 г вещества. Т. плавления 53^oC.

930 г полифосфорной кислоты нагревают до 85^oC и обрабатывают промежуточным продуктом, полученным ранее (124 г) небольшими порциями за 30 мин. После завершения добавления полученную смесь перемешивают при 90^oC. Еще спустя 45 мин реакционной смеси дают остыть до комнатной температуры. Полученную смесь обрабатывают измельченным льдом, охлаждая смесь на ледяной бане. Полученную смесь обрабатывают водой (100 мл), в результате чего образуется светло-розовый осадок. Этот осадок выделяют фильтрованием, промывают водой и метанолом и сушат в вакууме при 40^oC до получения 119 г 6-метокси-2-/4-метоксифенил/бензо[b] тиофена. Этот неочищенный продукт суспендируют в горячем метаноле, фильтруют и промывают холодным метанолом. Полученный твердый материал перекристаллизовывают из этилацетата (4 л), фильтруют, промывают гексаном и сушат в вакууме до получения 68 г указанного в заглавии соединения. Т. плавления 187-190,5^oC.

Пример получения 2. Этил-4-/2-пиперидиноэтокси/бензоат Смесь этил-4-гидроксибензоата (8,31 г), 1-(2-хлорэтил)пиперидинмоногидрохлорида (10,13 г), карбоната калия (16,5 9 г) и 60 мл метилэтилкетона нагревают до 80^oC. Спустя один час полученную смесь охлаждают до 55^oC и обрабатывают дополнительным количеством 1-(2-хлорэтил)пиперидинмоногидрохлорида (0,92 г). Полученную смесь нагревают до 80^oC. За реакцией следят с помощью тонкослойной хроматографии (TCX), используя пластины силикагеля и смесь этилацетат(ацетонитрил)триэтиламин (10: 6:1 объем/объем). Добавляют дополнительную порцию 1-/2-хлорэтил)/пиперидингидрохлорида до исчерпания исходного 4-гидроксибензоатного сложного эфира. После завершения реакции реакционную смесь обрабатывают водой (60 мл) и оставляют остывать до комнатной температуры. Водный слой сливают, а органический слой концентрируют в вакууме при 40^oC и 40 мм рт.ст. Полученное масло используют на следующей стадии без дополнительной очистки.

Пример получения 3. 4-(2-пиперидиноэтокси)бензойной кислоты гидрохлорид Раствор соединения, полученного в примере 2 (около 13,87 г) в 30 мл метанола обрабатывают 5н. гидроксидом натрия (15 мл) и нагревают до 40^oC. Спустя 4,5 ч добавляют 40 мл воды. Полученную смесь охлаждают до 5-10^oC и медленно добавляют концентрированную соляную кислоту (18 мл). В процессе подкисления кристаллизуется указанное в заглавии соединение. Кристаллический продукт собирают фильтрованием и сушат в вакууме при 40-50^oC до получения 83% выхода указанного в заглавии соединения. Т. плавления 270-271^oC.

Пример получения 4. 4-/2-пиперидиноэтокси/бензоилхлорида гидрохлорид Раствор соединения, полученного по способу получения примера 3, (30,01 г) и 2 мл диметилформамида в 500 мл метиленхлорида обрабатывают оксалилхлоридом (10,5 мл) в течение 30-35 мин. После перемешивания в течение примерно 18 ч реакционную смесь анализируют на предмет завершения реакции с помощью ВЭЖУ. Если в смеси еще присутствует исходная карбоновая кислота, добавляют дополнительно оксалилхлорид. После завершения реакции реакционный раствор выпаривают досуха в вакууме. Остаток растворяют в 200 мл метиленхлорида и полученный раствор выпаривают досуха. Эту процедуру растворения/выпаривания повторяют до получения указанного в заглавии соединения в виде твердого вещества. Указанное в заглавии соединение можно хранить в виде твердого вещества или в виде 0,2M раствора в 500 мл метиленхлорида.

Пример 1. 6-метокси-2-(4-метоксифенил)-3-/4-(2-пиперидиноэтокси) бензоил/-бензо[b]тиофенгидрохлорид Смесь соединения, полученного по способу примера получения 1 (8,46 г), и хлорангидрида, полученного по способу примера получения 3 (10,0 г), в 350 мл метиленхлорида охлаждают примерно до 20-25^oC. Полученную смесь обрабатывают треххлористым бором (2,6 мл) и все это механически перемешивают. За реакцией следят с помощью ВЭЖХ, используя указанный ранее анализ. Спустя 85 мин по данным ВЭЖХ ин ситу выход в расчете на 6-метокси-2-(4-метоксифенил)-3-/4-(2-пиперидиноэтокси) бензоил/бензо[b]тиофеновый стандарт составляет 88%.

Пример 2. 6-гидрокси-2-(4-гидроксифенил)-3-/4-(2-пиперидиноэтокси) бензоил/-бензо[b] тиофенгидрохлорида 1,2 дихлорэтановый сольват (Кристаллическая форма 1) Раствор 6-метокси-2-(4-метоксифенил)-3-/4-(2-пиперидиноэтокси)-бензоил/бензо[b] тиофенгидрохлорида (2,0 г) в 20 мл 1,2-дихлорэтана обрабатывают треххлористым бором (2,0 мл). Полученную смесь перемешивают при 35^oC в течение 18 ч. Смесь этанола и метанола (10 мл 95:5, ЗА) обрабатывают полученной реакционной смесью, что приводит к кипению с обратным холодильником спиртовой смеси. После завершения добавления образовавшуюся кристаллическую суспензию перемешивают при 25^oC. Спустя час кристаллический продукт отфильтровывают, промывают холодным этанолом (10 мл) и сушат при 40^oC в вакууме до получения 1,78 г указанного в заглавии соединения. Дифракционная картина рентгеновских лучей порошка идентична картине, приведенной в табл. 1. Температура плавления 255^oC. Степень чистоты: 80,2%.

1,2-дихлорэтан: 7,5% (по данным газовой хроматографии).

Пример 3. 6-гидрокси-2-(4-гидроксифенил)-3-/4-(2-пиперидиноэтокси) бензоил/-бензо[b]тиофенгидрохлорида 1,2-дихлорэтановый сольват (Кристаллическая форма 1) Смесь соединения, полученного, как указано в примере получения 2, (15 г) и диметилформамида (0,2 мл) в 250 мл 1,2-дихлорэтана охлаждают до 0^oC, 8,25 мл фосгена конденсируют в холодной воронке (снабженной рубашкой) (-10^o) и добавляют к холодной смеси за 2 мин. Полученную смесь нагревают примерно до 47^oC. Спустя два с половиной часа реакционную смесь анализируют с помощью ВЭЖХ. Для завершения реакции может понадобиться добавление дополнительно фосгена. Избыток фосгена удаляют вакуумной перегонкой при 30-32^oC и давлении 105-110 мм рт.ст.

Спустя 3 - 4 ч реакционный раствор обрабатывают соединением, полученным, как указано в примере получения 1 (13,52 г). Полученный раствор охлаждают до 0^oC. Треххлористый бор (12,8 мл) конденсируют в мерном цилиндре и добавляют к холодной реакционной смеси. Спустя 8 ч при 0^oC реакционный раствор обрабатывают дополнительным количеством треххлористого бора (12,8 мл). Полученный раствор нагревают до 30^oC. Через 15 ч реакционную смесь контролируют с помощью ЖХВР.

Смесь этанола и метанола (125 мл, 95:5, 3A) нагревают до кипения с обратным холодильником и обрабатывают реакционным раствором, полученным ранее, в течение 60 мин. После завершения добавления колбу для реакции ацилирования/деметилирования промывают дополнительным количеством этанола (30 мл). Полученную суспензию оставляют охлаждаться до комнатной температуры при перемешивании. Через час при комнатной температуре отфильтровывают кристаллический продукт, промывают его этанолом (75 мл) и сушат при 40^oC в вакууме до получения 25,9 г указанного в заглавии соединения, дифракционная картина рентгеновских лучей порошка представлена в табл. 1. Температура плавления 261^oC. Степень чистоты: 87,1%.

1,2-дихлорэтан: 0,55 молярных эквивалентов (¹H-ЯМР).

Пример 4. 6-гидрокси-2-(4-гидроксифенил)-3-/4-(2-пиперидиноэтокси) бензоил/-бензо[b] тиофенгидрохлорида 1,2-дихлорэтановый сольват (Кристаллическая форма 11) Смес