Производное 3-оксадиазолил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6- нафтиридина и производное 5,6,7,8-тетрагидро-1,6- нафтиридина

Производное 3-оксадиазолил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6- нафтиридина и производное 5,6,7,8-тетрагидро-1,6- нафтиридина

Реферат

 

Использование: в качестве лекарственного средства. Производные 3-оксадиазолил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридина получают внутримолекулярной циклизацией соответствующих ацилсемикарбазидов или 1,2-ди(R-карбомоил)гидразинов в присутствии дегидратирующего средства. Продукт: 6-бензил-3-(5-метилтио-1,3,4, -оксадиазол-2-ил)-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2(1H)-он, выход 55,5%, т.пл. 215 - 217^oC. 2 с. и 7 з.п.ф-лы, 8 табл.

Изобретение касается 3-оксадиазолил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридинпроизводного, применяемого в медицине, способа его получения и использования его в качестве лекарственного средства и его промежуточного продукта.

Бензодиазепиновые соединения, такие как диазепам, широко используются как противовозбуждающие средства, а также как средства против бессонницы. Однако эти соединения обладают целым рядом побочных действий, таких как расстройство координации движений, сонливость, ослабление мышц, расстройство ориентации или двигательной реакции, кроме того, их применение связано с целым рядом отрицательных моментов, таких как лекарственная устойчивость и лекарственная зависимость, у пациентов. Для решения этих проблем были изучены небензодиазепиновые соединения, имеющие сродство с бензодиазепиновыми в отношении рецепторов мозга.

Одно из таких небезодиазепиновых соединений, имеющее приведенную ниже формулу, было описано в Journal of Medicinal Chemistry 34, стр. 2060 /1991/.

, где R_a - водородный атом, R_b-R_d представляет собой метильную группу и т.д., R_e представляет собой метоксигруппу и т.д.

Однако соединения формулы /I/ настоящего изобретения никогда ранее описаны не были.

Предметом настоящего изобретения является 3-оксадиазолил-5,6-7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридинпроизводный, соответствующий формуле /I/, или фармацевтически приемлемая соль - продукт кислотного присоединения, имеющие сродство с бензодиазепиновым рецептором и применяемые в качестве лекарственного средства.

, где Het представляет собой оксадиазоловое кольцо, R₁ - атом водорода, ацильная группа, низшая алкильная группа или группа с формулой -CH₂R₁ (в которой R₁ есть циклонизшая алкилогруппа, низшая алкенилгруппа, низшая алкинилгруппа, бензильная группа, арилогруппа или гетероароматическая группа), R₂ представляет собой низшую алкилогруппу, циклонизшую алкильную группу, низшую алкенилгруппу, низшую алкинилгруппу, арильную группу, гетероароматическую группу, галоиднизшую алкильную группу, низшую алкоксинизшую алкильную группу, низшую алкоскигруппу, низшую алкенилоксигруппу, низшую алкилтио- или феноксигруппу.

Другим предметом изобретения является представление способа получения соединения формулы /I/.

Кроме того, в предмет изобретения входит представление фармацевтического состава, содержащего указанные соединения в качестве активного ингредиента, а также его использование в медицине.

И далее в предмет изобретения входит представление промежуточного продукта для получения соединения формулы /I/.

Представляемые настоящим изобретение соединения имеют указанную выше формулу /I/, однако более предпочтительными можно считать соединения формулы /I/, в которой Het представляет собой 1,2,4-оксадиазоловое кольцо или 1,3,4-оксадиазоловое кольцо, R₁ представляет собой группу формулы -CH₂R₁, R₁ представляет собой арильную группу или гетероароматическую группу, R₂ является низшей алкильной или циклонизшей алкильной группой, низшей алкенильной, арильной, гетероароматической или низшей алкосксигруппой или же низшей алкоксигруппой. В частности, наиболее предпочтительными соединения формулы /I/, в которых Het представляет собой 1,3,4-оксадиазоловое кольцо, R₁ представляет особой группу формулы: -CH₂R₁, представляет собой фенильную группу или фенильную группу, замещенную на 1-2 атома галогена, R₂ представляет собой алкильную группу с 2-3 C-атомами, цикло-, пропило- или метоксигруппу.

В описании изобретения и в пунктах патентной формулы термины "низший алкил", "низший алкоски" и "низший алкилтио" обозначают прямоцепный или разветвленный алкил, алкоски и алкилтио, имеющий соответственно 1-5 С-атомов. Термин "низший алкенил", "низший алкинил" и "низший алкенилокси" подразумевает прямоцепной или разветвленный алкенил, алкенил или алкенилокси, имеющий соответственно 2-5 C-атомов. Термин "циклонизший алкил" представляет циклоалкил с 3-6 C-атомами. Термин "ацил" обозначает прямоцепной или разветвленный алканоил с 1-5 C-атомами, бензоил, нафтоил и т.д. Термин "арило"группа представляет собой, например, фенильную и нафтилогруппу и аналогичные группы, причем эти группы могут иметь от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы атом водорода, низшая алкильная, трифторметильная низшая алкоски- и нитрогруппа. Название "гетероароматическая группа" включает 5-6-членную гетероароматическую группу, содержащую 1-2 гетероатома, выбранных из группы: атом азота, атом кислорода, атом серы, например тиенил, фурил, пиридинил изоксазолил и т.д., и эти гетероароматические группы могут иметь от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы: атом галогена, низшая алкильная группа, трифторметил или низшая алкоксигруппа.

Фармацевтически приемлемые соли-продукты кислотного присоединения формулы /I/, представляют собой, например, соли с неорганическими кислотами /такие как гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, сульфат, фосфат и т.д./ или соли с органическими кислотами /такие как оксалат, малеат, фумарат, малонат, лактат, малат, цитрат, тартрат, бензоат, метансульфонат, тозилат и т.д./.

Представляемые изобретением соединения могут быть получены различными способами, представленными ниже.

Способ 1. Из представленных изобретением соединений /I/ соединение, имеющее формулу /Iа/, , где R₁ имеет указанные выше значения, R₂ представляет собой группы, отличные от низшей алкилтиогруппы, можно получать, подвергая соединение формулы /II/, , в которой R₂ имеет те же значения, что и R₂ за исключением низшей алкилтиогруппы, а R₁ имеет указанные выше значения, внутримолекулярной циклодегидратации.

Такую реакцию циклизации обычно проводят путем обработки соединения /II/ дегидрирующим агентом. Дегидрирующий агент может представлять собой, например, комбинацию фосфорного /III/ соединения /например, трифенилфосфина и т. д./, и диалкилазадикарбоксилата или фосфорного /V/ соединения, такого как полифосфорная кислота, фосфороксихлорид и т.д./, и аналогичные им соединения, однако более предпочтительной можно считать комбинацию /III/-основного фосфорного соединения и диалкилазодикарбоксилата. Реакцию можно проводить в растворителе или без него, однако обычно ее проводят в инертном растворителе, который не оказывает влияния на реакцию. К таким растворителям следует отнести, например, эфиры (тетрагидрофуран, диоксан и т.д.), ароматические углеводороды (бензоил, толуол и т. д. ), галоилированные углеводороды (дихлорметан, хлороформ и т.д.) и другие. Растворители можно использовать как сами по себе, так и смеси двух и более растворителей. Если реакцию проводят при использовании комбинации соединения трехосновного фосфора и диалкилазадикарбоксилата, в этом случае для реакции применяют основание. Под основаниями имеются ввиду органические основания типа триэтиламина, трибутиламина, диизопропиламина, N-метилморфолина, пиридина и т.д. Реакционная температура варьируется в зависимости от исходного соединения, однако обычно она колеблется в пределах от 0 до 110^oC, предпочтительно от 0 до 70^oC. Если для реакции используют соединение формулы (II) можно защитить подходящей защищающей группой, которую можно удалить после реакции циклизации. В качестве защищающей группы могут быть использованы, например, низшая алканоилгруппа (например, группа формила, ацетилгруппа и т.д.), низшая алкоскикарбонильная группа и бензилоксикарбонильная группа. Реакция циклизации с соединением фосфора (III) и диалкилазадикарбоксилатом представляет собой принципиально новую реакцию.

Способ 2. Из представляемых настоящим изобретением соединений (I)соединение формулы (I), где R₂ представляет собой низшую алкилтиогруппу, можно получить по методу, соответствующему приведенной ниже схеме реакции.

, в которой представляет собой низшую алкильную группу, M представляет собой натрий или калий и R₁ имеет указанные выше значения.

Соединение (I) реагирует с дисульфидом углерода в присутствии основания в соответствии с методом, описанным в Journal of Heterocyclic Chemistry т. 19, р. 541 /1982/ с получением соединения (II), после чего соединение (II) взаимодействует с алкилирующим средством (например, низшим алкилгалогенидом и т. д.) по методу, описанному в Journal of Indiaan Chemistry Socicty т.68, р. 108 /1991/с получением соединения формулы /Iа/, представляющей собой соединение (Iа), где R₂ представляет собой соединение (Iа), где R₂ представляет собой низшую алкилтиогруппу. Если в соединении /I/ R_I - представляет собой атом водорода, то его можно защитить подходящей защитной группой, которую можно удалить после окончания реакции по аналогии со способом I.

Способ 3. Из представляемых изобретением соединений (I) соединение формулы (Ib): , где R₂ не является низшей алкоксигруппой, низшей алкенилоксигруппой, феноксигруппой, низшей алкилтиогруппой R_I имеет указанные выше значения, можно получить, подвергая соединение формулы (III), где также не является низшей алкоксигруппой, низшей алкенилоксигруппой, фенокси и низшей алкилтиогруппой, а R₂ и R_I имеют указанные выше значения, внутримолекулярной циклодегидратации.

Кроме тог, из представляемых настоящим изобретением соединений (I) соединение формулы (Ic) , в которой R₂ не является низшей алкокси-, низшей алкенилокси-, фенокси и низшей алкилтиогруппой, а R_I имеет указанные выше значения, можно получить, подвергая соединение формулы (IV) , где R_I и имеют указанные выше значения, внутримолекулярной циклодегидратации.

Реакцию циклизации соединения (III) и соединения (IV) можно проводить путем обработки указанного соединения дегидрирующим средством обычно при нагревании в подходящем растворителе, который не оказывает влияния на реакцию. В качестве растворителя можно использовать, например, ароматические углеводороды, такие как бензол, толуол, ксилен, и т.д., эфиры, например тетрагидрофуран, диоксан и т.д. Растворители можно брать сами по себе или использовать смесь одного или более растворителей. Реакционная температура варьируется в зависимости от типа исходного вещества, но обычно она составляет от 5 до 150^oC, предпочтительно от 80 до 120^oC. Если для реакции используют соединение (III) и соединение (IV), в которых R_I представляет собой атом водорода, эти соединения могут быть защищены подходящими защитными группами, которые можно удалить после окончания циклизации. Защищающие группы - это, например, низшая алканоилгруппа (формил, ацетил и т.д.), низшая алкоксикарбонил- и бензилоксикарбонилгруппа.

Способ 4. Из представляемых в изобретении соединений (I) соединение формулы (Ib), где R₂ представляет собой низшую алкокси-, низшую алкилтиогруппу, а R_I имеет указанные выше значения, можно получить путем реакции соединения формулы (V) , в которой представляет собой низшую алкенилокси-, алкокси-, фенокси- или низшую алкилтиогруппу, а R_I имеет указанные выше значения, с гидроксиламином в соответствии со способом, описанным в Journal of Heterocyclic Chemistry т. 18, стр.1197, 1981.

Реакцию обычно проводят в подходящем растворителе, например в спиртах, таких как метанол, этанол и т. д. , воде и т.п. Реакционная температура варьируется в зависимости от типа исходного соединения, но обычно составляет от 50 до 90^oC.

Способ 5. Из соединений, представляемых настоящим изобретением, соединение формулы (Iс), где R₂ представляет собой низшую алкокси-, низшую алкенилокси-, фенокси- или низшую алкилтиогруппу, а R_I представляет собой те же группы, что были описаны выше, можно получить в соответствии со способом, описанным в Synthesis стр. 843 /1986/, т.е. подвергая соединение формулы /VI/ , в которой R_I и имеют указанные выше значения, а Ph представляет собой фенильную группу, внутримолекулярной циклизации.

Реакцию циклизации проводят при нагревании в подходящем растворителе, например ароматических углеводородах (таких как бензол, толуол и т.д.) и эфирах (тетрагидрофуран, диоксан и т.д.). Реакционная температура варьируется в зависимости от типа исходного соединения, но обычно составляет от 50 до 150^oC, предпочтительно 80-120^oC.

Представляемые изобретением соединения (I), полученные по описанным выше способам 1-5, выделяют и очищают с применением традиционных методов, таких как хроматография, повторная кристаллизация, переосаждение и т.д. \ Представляемые изобретением соединения получают в свободном виде или же в форме солей-продуктов кислотного присоединения в зависимости от типа исходного соединения, условий реакции и т. д. Соли-продукты присоединения кислоты, преобразуют в свободные основания, используя для этой цели традиционные методы, такие как, например, обработка их основаниями, такими как карбонаты щелочных и щелочноземельных металлов, гидроокиси щелочных и щелочноземельных металлов и т.д. Свободные основания можно преобразовывать в их соли-продукты кислотного присоединения, используя традиционные методы, такие как обработка их традиционные методы, такие как обработка их неорганическими или органическими кислотами.

Способ получения исходного соединения.

Соединения, используемые в вышеуказанном способе I, представляют собой принципиально новые соединения и могут быть получены в соответствии со следующей схемой реакции.

, где R представляет собой атом водорода или низшую алкильную группу и R₁ и R₂ имеют указанные выше значения.

Синтез соединения (II) из соединения (III) проводят путем реакции соединения (III) или его реакционноспособного производного у карбоксильной группы с гидразидом формулы (где имеет указанные выше значения) по обычной методике.

Или же соединения (II) можно получить двустадийным способом, а именно путем реакции соединения (III) или его реакционноспособного производного у карбоксильной группы с гидразином по традиционной методике с последующим ацилированием продукта производным карбоновой кислоты формулы .

Соединение (III) получают по методу, описанному в Arkiv foer kemi 26/41/, стр. 489-495 Chemical Abstract, 67, 3261/1967/ или в соответствии с различными другими способами, описанными ниже. описанными ниже.

Используемые в способе 3 соединения (III) представляют собой принципиально новые соединения, получаемые в соответствии с приведенной ниже схемой реакционного процесса.

, где R₁ и имеют указанные выше значения.

Соединение (III) получают путем реакции соединения (IV) или его реакционноспособного производного у карбоксильной группы с амидооксимом по традиционной методике. Если в соединении (IV) R₁ представляет собой атом водорода, соединение (IV) можно защитить защищающей группой, как указано ниже.

Соединения (IV), получаемые в соответствии со способом 3, также представляют собой новые соединения, которые могут быть получены в соответствии с приведенной ниже схемой реакционного процесса.

, где R₁ и имеют указанные выше значения.

Соединение (IV) реагирует с гидроксиламином обычным способом с получением соединения (VII), которое в дальнейшем вступает во взаимодействие с реакционноспособным производным у карбоксильной группы карбоновой кислоты, формулы где имеет указанные выше значения в присутствии основания с образованием соединения (IV).

В случае использования соединения (VII), где R₁ представляет собой атом водорода, К₁ группу можно защитить защищающей группой, как указано ниже.

Используемое в способе 4 соединение (V) получают по указанной выше схеме, где R₁ и имеют приведенные выше значения.

.

Соединение (IV) или его реакционноспособное производное у карбоксильной группы реагирует с солью щелочного металла или аммониевой солью тиоциановой кислоты в подходящем растворителе с получением соединения (VIII), которое в дальнейшем подвергают алкоголизму или обрабатывают низшим алкилтиолом или его солью щелочного металла в подходящем растворителе с образованием соединения (V). При использовании соединения (VIII), где R₁ представляет собой атом водорода, R₁ - группу можно защитить защищающей группой, как указано ниже.

Используемое в способе 5 соединение (VI) представляет собой новое соединение, получаемое в соответствии с приведенной ниже схемой реакции, где R, R₁ и имеют указанные ранее значения, а Ph представляет собой фенильную группу.

Соединение (III) восстанавливают восстановителем, например боргидридом натрия, тетрабутиламмонийборгидридом, литийалюминийгидридом, в подходящем растворителе, не оказывающим влияния на реакцию, с получением соединения (IX), которое в дальнейшем подвергают окислению активной двуокисью магния в подходящем растворителе с получением соединения (X).

Соединение (X) реагирует с гидроксиламином в условиях, традиционных для образования оксимов, с получением соединения (II), которое вступает во взаимодействие с N-хлорсукцинимидом по методу, описанному в Journal of Organic Chemistry. т. 45, стр. 3916/1980 с образованием соединения (XII).

Соединение (XII) реагирует с азидом натрия в подходящем растворителе по методу, описанному в Synthesis, стр. 102/ 1979/ образованием соединения (XIII).

Соединение (XIII) реагирует с эфиром галомуравьиной кислоты или реакционноспособным производным эфира S - алкилтиокарбоновой кислоты в подходящем растворителе по методу, описанному в Synthesis cnh/ 843 /1986/, с получени6м соединения (XIV), которое в дальнейшем реагирует с трифенилфосфином с образованием соединения (VI).

Соединение (XII) можно также получить по способу, описанному в Syntesis стр. 102 /1079/, по реакционной схеме, приведенной ниже , где R₁ имеет указанные выше значения.

Соединение (IX) реагирует с соединением фосфора (например, треххлористым фосфором, оксихлоридом фосфора и т. д. ) или тионилхлоридом в подходящем растворителе с образованием соединения (XV), с последующим взаимодействием его с алкилнитрилом в присутствии кислоты в подходящем растворителе с образованием соединения (XII).

Соединение (III), соединение (IV) и соединение (VI), преобразуемые в соединении (II) 0 (VI), получают в соответствии со способом, описанным Arkiv foer Kemi 26/41/, 489-495/1967// Chemical Abstract. т. 67, 32611 z /1967/, или по приведенной ниже схеме реакции , где V представляет собой атом галогена, низшую алкоксигруппу или динизшую алкиламиногруппу, W и Z имеют одинаковое или различное значение и каждая представляют собой циано- или низшую алкоксикарбонильную группу. R¹-низший алкил, n представляет собой число 1-3 и R₁ имеет указанные выше значения.

Исходное соединение (XVI) в реакционной схеме, указанной выше, можно получить в соответствии со способом, описанным в Journal of American Chemical т. 85, стр. 207 /1963/. Кроме того, соединение (XVI) получают путем реакции с соединением (XVII) в растворителе, например спиртах таких как метанол, этанол и т. д., эфирах, например тетрагидрофуране, диоксане и т.д., ароматических углеводородах (например бензоле, толуоле и т.д., при температуре от 0 до 120^oC с получением соединения (XVIII), которое в дальнейшем вступает во взаимодействие с аммиаком или солью аммония (например, ацетатом аммония) в растворителях, таких как спирты, например метанол, этанол и т.д., эфирах (например, тетрагидрофуране, диоксане и т.д.) и ацетонитриле при температуре от 0 до 100^oC с образованием соединения (XIX).

В случае, если W и Z в соединении (XIX) представляют собой низшие алкоксикарбонильные группы, соединение (XIX) нагревают в растворителе, например спиртах, в частности метаноле, этаноле и т.д., эфирах, например тетрагидрофуране, диоксане и т.д. и ароматических углеводородах, например бензоле, толуоле, ксилене и т.д. при температуре от 50 до 120^oC с получением соединения (III'), которое далее гидролизуют в щелочных или кислых условиях традиционными методами с получением соединения (IV).

В случае, если Z в соединении (XIX) представляет собой цианогруппу, соединение (XIX) обрабатывают в присутствии основания в подходящем растворителе, например спиртах, таких как метанол, этанол и т.д., эфирах (например, тетрагидрофуране, диоксане и т.д.) и им подобных соединениях при температуре от 0 до 100^oC с получением соединения (XIX), которое в последующем вступает во взаимодействие с нитратом в кислых условиях, например в 5 - 10%-ном водном растворе хлористоводородной кислоты или 5-20%-ном водном растворе серной кислоты при температуре от 0 до 20^oC с получением соединения (III') в случае, если W в соединении (XX) представляет собой эфирную группу или соединение (VI), если W в соединении (XX) представляет собой цианогруппу.

Соединение (VI) получают путем реакции соединения (XXI) с дегидрирующим агентом (например, тионилхлоридом, пятихлористым фосфором фосфороксихлоридом, полифосфорной кислотой и т.д.) в растворителе, например эфирах: тетрагидрофуране, диоксане и т.д. в ароматических углеводородах, например бензоле, толуоле и т.д., галоидированных углеводородах, например дихлорметане, хлороформе, 1,2-дихлорметане и т.д. Указанное соединение (XXI) получают путем реакции реакционноспособного производного карбоксильной группы соединения (IV) с аммиаком традиционным способом.

Соединение (III) можно получать также в соответствии с приведенной ниже схемой реакции.

, где представляет собой низший алкил, бензил, низшую алкоксикарбонильную или бензилоксикарбонильную группу, не является атомом водорода и ацильной группой, как в R₁ и R имеет указанные выше значения.

Заместитель R₁ в соединении (III'') и заместитель в соединении (III''') могут быть преобразованы друг в друга через соединение (XXII). Соединение (III''), где R₁ представляет собой низшую алкильную или бензильную группу, можно преобразовать в соединение (XXII) при обработке его 1-хлорэтилкарбоксилатом по методу, описанному в Journal Organic Chemistry т. 49, стр. 2081 /1984/.

Соединение (III''), где представляет собой бензильную или бензилоксикарбонильную группу, преобразуют в соединение (XXII) путем обработки его водородом в присутствии катализатора (например, никеля Ренея, палладия на угле и т.д.) при нормальном давлении или под давлением при температуре от 25 до 80^oC в подходящем растворителе, например воде, метаноле, этаноле, уксусной кислоте, диоксане, этилацетате и т.д.

Соединение (III''), где представляет собой низшую алкоксикарбонильную группу или бензилоксикарбонильную группу, можно также преобразовать в соединение (XXII) путем обработки его кислотой или основанием в подходящем растворителе. Например, соединение (III''), где - третичная бутоксикарбонильная группа, обрабатывают трифторуксусной кислотой при температуре от 25 до 80^oC в растворителе, например, дихлорметане, хлороформе и т.д. с получением соединения (XXII).

Полученное таким образом соединение (XXII) превращают в соединение (III''') путем реакции соединения (XXII) с алкилирующим агентом соответственно , где представляет собой, например, низший алкил, аллил, пропаргил, бензил, нафталинметил или гетероароматическую метильную группу, в присутствии основного соединения, например неорганических солей, таких как гидроокиси щелочных металлов (гидроокись натрия и калия и т.д.), карбонаты щелочных металлов (карбонаты натрия, калия и т.д.) и кислые карбонаты щелочных металлов (кислый карбонат натрия, кислый карбонат калия и т.д.) или органических оснований, например пиридина, триэтиламина и т.д., в подходящем растворителе, например ацетоне, метилэтилкетоне, диэтилкетоне, диметилформамиде, бензоле, толуоле, ацетонитриле и им подобным, при температуре от 25 до 100^oC. В качестве алкилирующего средства может быть использован, например, алкилгалогенид.

Фармакологические свойства представляемых изобретением соединений /1/ иллюстрируются данными следующих экспериментов.

Опыт 1. Испытание на связывание бензодиазепиновых рецепторов.

В соответствии со способом, представленном в Life Science, т 20, стр. 2101, 1977, проводят испытание на связывание бензодиазепиновых рецепторов.

Необработанную фракцию синаптосомольной оболочки, выделенную из головного мозга крыс Винстера (возраст 7-8 недель), суспендируют в 15 ммоль трис-HCl-буфера (pH 7,4), содержащего 118 ммоль хлористого натрия, 4,8 ммоль хлористого калия, 1,28 ммоль хлористого кальция и 1,2 ммоль сульфата магния, в концентрации 1 г сырого (веса) мозга на 20 мл буфера, получая источник оболочки рецептора. (³H) - диапазон используют как меченный лиганд.

Исследуемое соединение (известное количество), ³H-диазепам (конечная концентрация 1,5 нмоль), оболочку рецептора и указанный выше буфер добавляют в пробирку (конечный объем 1 мл). Реакция начинается при добавлении оболочки рецептора. Пробирку выдерживают при 0^oC в течение 20 минут, после чего реакционную смесь быстро фильтруют через фильтр из стекловолокна GF/B Whatmann, соединений с устройством для сбора клеток производства Brandell. Собранную меченую оболочку рецептора трижды промывают ледяным 50 мМ трис-HCl-буфером (pH 7,7, по 5 мл). Радиоактивность на фильтре измеряют жидкостным сцинтиляционным счетчиком, определяя количество конечного (³H)-диазепама в оболочке рецептора (общее связывание). Отдельно повторяют ту же самую процедуру, за исключением того, что добавляют 1 мкммоль диазепама, и измеряют количество ³H-диазепама связанного в оболочке рецептора (неспецифическое связывание). Величину неспецифического связывания вычитают из общего связывания и получают специфическое связывание. На основании специфического связывания определяют ингибирующую активность ИК₅₀ (IC₅₀) исследуемых соединений. Значение IC₅₀ представляет собой концентрацию исследуемого соединения, необходимого для снижения специфического связывания меченного лиганда на 50%. Полученные результаты представлены в таблице 1.

Опыт 2. Действие на клоническую конвульсию, вызванную пентилентетразолом (анти-ПТЗ-активность).

Испытывают действие исследуемых соединений на клоническую конвульсию, вызванную пентилентетразолом по методу Е.А.Swinyard (of Anticonvulsant Drugs, J. Mercier, изд. стр. 47-65, Пергамон Пресс, Нью-Йорк, 1973. В этом испытании противоэпилептические средства, предназначенные для лечения легких форм эпилепсии, и большинство бензодиазепиновых средств показывают положительные результаты.

Испытываемые соединения вводят орально самцам мышей Std-ddI весом 20-25 г (по пять мышей в группе). Через 2 часа подкожно вводят пентилентетразол (85 мг/кг), после чего сразу же животных помещают в пластмассовую клетку и в течение 30 минут наблюдают проявление клонической конвульсии. При отсутствии клонической конвульсии устанавливают, что исследуемое соединение обладает антагонистической активностью. Результаты наблюдений представлены в таблице 2.

Как показывают приведенные выше результаты, представляемые изобретением соединения проявляют внешнее сродство с бензодиазепиновым рецептором и, кроме того, проявляют ярко выраженную антагонистическую активность в отношении клонической конвульсии, вызванной пентилентетразолом. Из этого можно сделать вывод, что представляемые изобретением соединения могут быть использованы как агонисты бензодиазепиновых рецепторов, например как противовозбуждающие средства, средства против эпилепсии и снотворные.

Фармацевтическое использование представляемых изобретением соединений.

А случае использования в качестве антагонистов бензодиазепиновых рецепторов представляемые изобретением соединения можно вводить орально, парэнтерально или ректально, однако оральное введение более предпочтительно. Дозировка соединения при этом варьируется в зависимости от способа введения, состояния здоровья пациента, его возраста, назначения проводимого лечения (профилактика или лечение) и т.д., однако обычно доза составляет от 0,01 до 10 мг/кг/день, предпочтительно 0,02-5 мг/кг/день.

Представляемые изобретением соединения вводят в форме традиционных фармацевтических составов в смеси с обычными фармацевтически приемлемыми наполнителями или разбавителями. Фармацевтически приемлемые наполнители и разбавители могут представлять собой традиционные вещества, используемые в фармацевтической промышленности, не вступающие во взаимодействие с патентуемым соединением, например такие как лактоза, глюкоза, маннит, декстран, крахмал, белый сахар, магнийалюминитсиликат, синтетический силикат алюминия, кристаллическая целлюлоза, Na-карбоксиметилцеллюлоза, Ca-карбоксиметилцеллюлоза, ионообменные смолы, метилцеллюлоза, желатин, гуммиарабик, гидроксипропилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, низкозамещенная гидроксипропилцеллюлоза, поливинилпиролидон, поливиниловый спирт, стеарат магния, тальк, карбоксивинилполимер, окись титана, сорбит, лаурилсульфат натрия, глицерин, очищенный ланолин, глицерожелатин, полисорбат, макрогол, растительные масла, воск, жидкий парафин, белый петролат, нейонные поверхностно-активные вещества, пропиленгликоль, вода и т.д.

Фармацевтические составы выпускаются в виде таблеток, капсул, гранул, порошков, сиропов, суспензий, свечей, гелей, составов для инъекций и т.д. Для приготовления составов используют традиционные способы. Чтобы приготовить жидкую форму лекарственного препарата сначала его готовят в твердом виде, предназначенном для последующего растворения или суспендирования в воде. Таблетки или гранулы также покрывают, используя традиционные способы, а состав для инъекций могут быть приготовлены путем растворения патентуемого соединения или его соли - продукта кислотного присоединения, в дистиллированной воде или физическом растворе хлористого натрия с последующим растворителем, в случае необходимости, в изотоническом растворе и добавлением pH-регулятора, буферного раствора и консерванта.

Такие фармацевтические составы могут содержать патентуемое соединение в количестве более 0,01 % на вес, предпочтительно 0,05-70 мас.%, и могут иметь в своем составе несколько физиологически активных компонентов.

Более подробно настоящее изобретение иллюстрируется приведенными ниже примерами и контрольными примерами, но не ограничивается ими.

Пример 1. Полученные этил-6-бензил-5,6,7,8-тетрагидро-2(1H)- оксо-1,6-нафтиридин-3-карбоксилата.

1) Раствор 1-бензил-4-пиперидона (19г, 0,1 моль) и пирролидина (10,7 г, 0,15 моль) в толуоле (200 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 5 часов, образующуюся воду удаляют путем выпаривания. Реакционный раствор концентрируют досуха при пониженном давлении и к остатку добавляют безводный толуол (200 мл). К смеси добавляют по каплям раствора этилэтоксиметиленцианацетата (17 г, 0,1 моль) в безводном толуоле (50 мл) при охлаждении льдом. Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение ночи, затем добавляют по каплям концентрированную хлористоводородную кислоту (13 мл) при охлаждении льдом. Полученный гидрохлорид собирают методом фильтрования, тщательно промывают этилацетатом и изопропиловым эфиром. Гидрохлорид растворяют в этилене (300 мл) и продувают в смесь при охлаждении льдом газообразный аммиак до насыщения. Смесь нагревают до комнатной температуры, выдерживают в течение ночи, после чего концентрируют досуха при пониженном давлении. К образующемуся остатку добавляют изопропанол, а выпадающие в осадок кристаллы выделяют путем фильтрования, сушат, получая необработанный кристаллический продукт (10 г).

Полученные кристаллы растворяют в этаноле (100 мл) и добавляют пот каплям 10%-ный водный раствор гидроокиси натрия при охлаждении льдом. Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 30 минут, затем к полученной смеси при охлаждении льдом добавляют воду (100 мл). Выпадающие в осадок кристаллы удаляют путем фильтрования, промывают водой и перекристаллизуют из изопропанола с получением этил-2-амино-6-бензил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин- 3-карбоксилата (8,5 г, в виде бесцветного твердого вещества. Выход 27,3%, т.пл. 141-143^oC.

2). К раствору указанного выше эфирного соединения (10 г, 32 ммоль) в 10%-ном растворе серной кислоту (100 мл) добавляют по каплям постепенно раствор нитрата натрия (4,5 г, 65 ммоль) в воде (20 мл) при охлаждении льдом. После окончания добавления смесь перемешивают в течение 2 часов. Продолжая перемешивание и используя ледяное охлаждение, смесь подщелачивают 20% водным раствором гидроокиси натрия, после чего экстрагируют хлороформом. Экстракт сушат над безводным сульфатом магния и выпаривают при пониженном давлении с целью удаления растворителя. Образующиеся кристаллы перекристаллизуют из пзопропана с получением бесцветного твердого вещества (6,8 г). Выход 68%, т.пл. 168-170^oC.

Пример 2. Получение гидрохлорида 6-бензил-5,6,7,8-тетрагидро- 2(1H)-оксо-1,6-нафтиридин-3-карбоновой кислоты.

1). Смесь этил-6-бензил-5,6,7,8-тетрагидро-2(1H)-оксо-1,6- нафтиридин-3-карбоксилата (6,8 г, 22 ммоль) и 20%-ного водного раствора хлористоводородной кислоты (70 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 3 часов. После охлаждения осаждающиеся кристаллы удаляют путем фильтрования, промывают водой и перекристаллизуют из смеси метанол/вода, получая желаемое соединение (7,0 г) в виде бесцветного твердого вещества. Выход 99,2%, т.пл. 260-263^oC.

2). Раствор 1-бензил-4-пиперидона /100 г, 0,53 моль/ и пирролидина (70 мл, 0,795 моль) в толуоле (1,5 л) кипятят с обратным холодильником в течение 5 часов с отгонкой воды. Смесь концентрируют досуха при пониженном давлении и к образовавшемуся остатку добавляют диоксан (1 л). При охлаждении льдом к смеси добавляют диэтилэтоксиметиленмалонат (126 г, 0,58 моль), и смесь кипятят с обратным холодильником в течение 6 часов. Смесь охлаждают до комнатной температуры, после чего добавляют ацетат аммония (82 г, 1,06 моль) 82 г, 1,06 моль) и кипятят при перемешивании с обратным холодильником в течение 1 часа. Реакционный раствор концентрируют досуха при пониженном давлении, получая этил-6-бензил-5,6,7,8-тетрагидро-2(1H)-оксо-1,6-нафтиридин-3-карбокси- лат, который используют на последующей стадии без выделения или дальнейшей очистки.

К указанному выше этиловому эфиру добавляют 20%-ный водный раствор хлористоводородной кислоты /600 мл/, и полученную смесь кипятят в обратным холодильником в течение 3 часов. После охлаждения осаждающиеся кристаллы отфильтровывают, перекристаллизуют из смеси метанол/вода получением желаемого соединения в виде бесцветного твердого вещества (105 г). Выход 61,9%, т. п.л. 260-263^oC.

Пример 3. Получение этид-5,6,7,8-тетрагидро-2(1H)-оксо-1,6- нафтиридин-3-карбоксилатацетата.

К раствору этил-6-бензил-5,6,7,8-тетрагидро-2(1H)-оксо-1,6- нафтиридин-3-карбоксилата (8 г) в ледяной уксусной кислоте (360 ил) добавляют 10% катализатора палладия на угле (200 мг), после чего смесь подвергают каталитической гидрогенизации при комнатной температуре в атмосфере водорода. После того, как теоретическое количество водорода будет израсходовано, катализатор удаляют путем фильтрования. Фильтрат концентрируют досуха при пониженном давлении. Остаток разба