Липосомальное противовирусное лекарственное средство для перорального применения

Патент 2123328

Авторы

Классы МПК

Реферат

Лекарственное средство предназначено для лечения вирусных инфекций. Средство представляет собой лиофилизат или изотонический раствор. Состав лиофилизата: рекомбинантный интерферон-альфа-2 (2,5-10)10⁵ МЕ, фосфатидилхолин 60-80 мг, холестерин 6-10 мг, альфа-токоферол 6-10 мг, аскорбиновая кислота 1-2 мг, сахароза 40-90 мг. Средство устойчиво в желудочно-кишечном тракте и всасывается в проксимальной части тонкого кишечника. Оно стабильно, не гидролизуется при всасывании, что увеличивает его терапевтическую эффективность при оральном приеме. Отсутствуют побочные действия. 2 табл.

Изобретение относится к медицине, фармацевтической промышленности, в частности к противовирусным препаратам и касается создания новых лекарственных форм, содержащих интерферон.

В клинической практике для лечения вирусных инфекций, в частности гепатита B, широко применяется рекомбинантный альфа-2-интерферон - один из известных субтипов лейкоцитарного интерферона. Известна лекарственная форма рекомбинантного альфа-2-интерферона для инъекций, имеющая следующий состав: 0,05М натрий-фосфатный буфер, человеческий донорский альбумин (0,5%), натрий хлористый. Способы применения: внутримышечно, в очаг или под очаг поражения, субконъюнктивально или местно [1].

Также известен интраназальный путь введения интерферона при ОРВИ, композиции для ректального введения препаратов интерферона, в частности, рекомбинантный альфа-2-интерферон в свечах (виферон), или твердая дозированная форма интерферона, растворимая в слюне [1,2,3].

Инъекционная лекарственная форма рекомбинатного альфа-2-интерферона, применяемая в клинике, в качестве стабилизатора содержит человеческий донорский альбумин, что приводит к возможности инфицирования вирусами (СПИД, гепатит) и развития аллергических состояний у больных, длительно применяющих интерферон. Инъекционный путь введения вызывает пирогенную реакцию, головную боль и другие побочные эффекты, связанные в частности, с необходимостью введения высоких доз интерферона для достижения выраженного терапевтического действия, например, при СПИДе [4]. Пероральное применение инъекционной лекарственной формы рекомбинантного интерферона не обеспечивает выраженного терапевтического эффекта, так как интерферон быстро разрушается под действием физиологических условий желудочно-кишечного тракта (протеазы, pH) и практически не попадает в кровоток.

Ректальный путь введения интерферона в виде микроклизм или свечей не удобен, не гигиеничен и вызывает естественную неприязнь, особенной у детей. Кроме того, при ректальном введении интерферона трудно обеспечить точное дозирование препарата ввиду частичных потерь либо жидкости, либо свечной массы, остающейся на руках или приспособлениях для введения.

Имеются сведения о том, что заключение рекомбинантного альфа-интерферона в липосомы усиливает его антипролиферативную активность в эксперименте на опухолевых клетках [5]. Известно также, что различные способы ассоциации с мембраной липосом в зависимости от состава липидов приводят к измененной фармакокинетике интерфероновых препаратов в эксперименте на мышах [6, 7].

Противовирусный препарат местного действия для внутрикожного введения на основе интерферона-альфа, заключенного в липосомы, является предметом изобретения в международной заявке N 91/01719 [8]. Препарат исследован на экспериментальной модели инфекции герпеса у морских свинок. Липосомы получены из липидов характерных для рогового слоя кожи.

Известны противовирусные препараты на основе рекомбинантного бета-интерферона, заключенного в липосомы, предназначенные для местного или парентерального (подкожного, внутримышечного) применения [9]. Лекарственная композиция, в частности, для парентерального применения, содержит: Рекомбинантный бета-интерферон, ME - 210⁸ Человеческий сывороточный альбумин, г - 1,25 Декстроза, г - 1,25 Смесь диарахидоилфосфатидилхолина и дипальмитоилфосфатидилглицерина (7: 3), ммоль - 2,0 Солевой раствор (0,9%), мл - 100 Недостатком их является содержание в композиции человеческого сывороточного альбумина, что приводит к возможному развитию аллергических состояний у больных, длительно применяющих интерферон. Кроме того, метод получения данной композиции предусматривает предварительное растворение липидов, образующих липосому, в органических растворителях, например таких как пропанол, бутанол, циклогексан. Несмотря на последующую лиофилизацию липидной смеси следовые количества этих растворителей могут присутствовать в итоговой лекарственной композиции, вызывая нежелательные побочные эффекты у больных, применяющих препарат. Дополнительным недостатком данной композиции на наш взгляд является отсутствие в ее составе антиоксидантов, таких как альфа-токоферол и витамин C, что приводит к ускоренному перекисному окислению липидов композиции. Кроме того, состав данной композиции не обеспечивает возможность получения лиофильно высушенного биологически активного лекарственного средства, пригодного для длительного хранения, что значительно уменьшает возможность применения препарата в медицинских целях. Важным отличием заявляемого лекарственного средства является возможность перорального применения, отсутствующая у аналога и обеспечивающая уменьшение побочных эффектов, свойственных парентеральному пути введения препарата.

В патенте США N 5503828 имеются сведения о липосомальной лекарственной форме для перорального применения, содержащей человеческий альфа-интерферон. Однако конкретный состав лекарственной формы не указан.

Задачей предлагаемого изобретения является создание лекарственного средства, обеспечивающего проявление биологической активности, свойственной интерферону-альфа-2, при пероральном пути введения препарата и достижение терапевтического эффекта от применения этой новой лекарственной формы без проявления побочных эффектов, сопровождающих парентеральный способ введения интерферона.

Указанная задача решается путем создания липосомального противовирусного лекарственного средства для перорального применения, содержащего биологически активный компонент - рекомбинантный интерферон-альфа-2, компоненты, формирующие липосомы - фосфатидилхолин и холестерин, стабилизатор - сахарозу, антиоксиданты - альфа-токоферол и аскорбиновую кислоту, представляющего собой лиофилизат или изотонический раствор, при следующем соотношении компонентов лиофилизата, мг: Рекомбинантный интерферон-альфа-2, ME - (2,5-10) 10⁵ Фосфатидилхолин - 60-80 Холестерин - 6-10 альфа-Токоферол - 6-10 Витамин С - 1-2 Сахароза - 40-90 Лекарственное средство получают следующим образом: суспензию, содержащую компоненты в асептических условиях разливают по 1 мл во флаконы и лиофильно высушивают. Перед употреблением во флакон с препаратом добавляют 1 мл дистиллированной воды и встряхивают до образования однородной суспензии молочно-белого цвета.

Существенными признаками изобретения являются количественные соотношения компонентов, обеспечивающие возможность получения стабильного целевого продукта и получение терапевтического эффекта при его пероральном применении, не уступающего по выраженности терапевтическим эффектам равных доз традиционно применяемых лекарственных форм интерферона. Наличие в липосомальной мембране холестерина и витамина E в заявленных соотношениях обеспечивают относительную стабильность липосом в желудочно-кишечном тракте до места всасывания липидов (проксимальная часть тонкого кишечника), и, соответственно, сохранение биологической активности интерферона, заключенного в них. Витамин C, присутствующий в липосомах в заявленных соотношениях, оказывает в свою очередь антиокислительные и стабилизирующие эффекты на интерферон и витамин E. Из литературы известно, что в тонком кишечнике возможно частичное всасывание жировых капелек в комплексе с солями желчных кислот без предварительного гидролиза, если величина этих капелек не превышает 0,5 мкм [10]. Средний размер липосом, полученных модифицированным нами методом экструзии мультиламеллярных везикул через поликарбонатные мембраны и имеющих заявляемый состав, составляет 0,3 мкм, поэтому их всасывание также может частично происходить без гидролиза и соответственно без деградации интерферона, что способствует увеличению его терапевтической эффективности при оральном приеме. Возможно, что под влиянием желчи в кишечнике происходит преобразование липосомальной структуры препарата в мицеллярную и уже комплекс мицелла-интерферон переносится к всасывающей поверхности кишечного эпителия, обеспечивая так называемую мицеллярную диффузию. Кроме того, у пациентов, применяющих препарат, возможна индукция эндогенного интерферона, что также увеличивает терапевтическую эффектность заявляемого лекарственного средства.

Важно, что применение новой липосомальной лекарственной формы рекомбинантного альфа-2-интерферона позволяет достигать терапевтических целей без побочных эффектов, свойственных другим лекарственным формам интерферона и без риска инфицирования при проведении инъекций, что очень актуально в наше время.

В клинической практике при гепатипе B рекомбинантный альфа-2-интерферон применяют внутримышечно по 1 млн. ME 2 раза в сутки. Для лечения детей больных гломерулонефритом, ассоциированным с персистирующими вирусными инфекциями (гепатит B) на основании ректального введения инъекционной лекарственной формы альфа-2-интерферона отработаны следующие эффективные дозы: для детей до 7 лет - по 250 тыс.ME 2 раза в сутки, а у более старших больных - 500 тыс. ME 2 раза в сутки [1]. В соответствии с применяемыми в клинической практике при лечении гепатита B дозировками рекомбинантного альфа-2-интерферона нами был выбран заявляемый диапазон его концентраций в препарате. При несоблюдении предложенных соотношений ингредиентов средства, а именно при использовании интерферона в количестве менее 250 тыс.ME выявляется недостаточная клиническая эффективность заявляемой лекарственной формы при пероральном приеме, а увеличение количества интерферона в разовой дозе более 1 млн. ME нецелесообразно, так как не приводит к дальнейшему усилению терапевтического эффекта препарата и может вызвать нежелательные побочные эффекты, характерные для высоких доз интерферона. Специальные исследования показали, что уменьшение концентрации фосфатидилхолина менее 60 мг/мл приводит к резкому падению степени включения интерферона в липосомы, а увеличение более 80 мг/мл нецелесообразно, так как степень включения интерферона в липосомы увеличивается незначительно даже при увеличении концентрации липида до 200 мг/мл.

Уменьшение массового соотношения между количеством фосфатидилхолина, с одной стороны, и суммарным количеством холестерина и токоферола, с другой, до менее чем 4:1, ведет к ухудшению образования липосом, вплоть до невозможности их образования вообще, а увеличение этого соотношения более, чем 5:1, приводит к получению липосомальной формы интерферона, нестабильной при хранении. Содержание витамина C в препарате менее 1 мг/мл ведет к ускоренному перекисному окислению альфа-токоферола и липидов препарата при хранении, а увеличение его концентрации более 2 мг/мл нецелесообразно, так как не приводит к дальнейшему улучшению качества лекарственного средства. Содержание сахарозы менее 0,6 мг/мл липидной композиции приводит к нарушению липосомальной мембраны в процессе лиофилизации, а ее содержание более 1 мг/мл по нашим данным не дает дополнительных преимуществ.

Липосомы заявленного состава получают модифицированным методом экструзии мультиламеллярных везикул через поликарбонатные мембраны.

Пример 1. В круглодонную колбу (V=2л) вносят 60 г яичного лецитина в виде 10%-ного спиртового раствора, 6 г холестирина, растворенного в следовых количествах хлороформа, и 6 г альфа-токоферола в виде 20% масляного раствора, и выпаривают под вакуумом до получения сухой липидной пленки на стенках колбы. После выпаривания продувают липидную пленку инертным газом для предотвращения окисления липидов. Добавляют в колбу полуфабрикат рекомбинантного интерферона-альфа-2 в буферном растворе фосфата из расчета 500 тыс. ME/мл получаемой суспензии, 1 г витамина C в физиологическом растворе и доводят объем физиологическим раствором до 900 мл. Далее колбу подвергают механическому встряхиванию при температуре 22^oC до полной гидратации липидной пленки, после чего к полученной суспензии добавляют сахарозу в физиологическом растворе (концентрация 0,6 мг/мг липида, объем 100 мл) и тщательно перемешивают в течение 30 мин. Грубую липосомальную суспензию подвергают последовательной формирующей и стерилизующей фильтрации через поликарбонатные мембраны фирмы "Nuclepore" (диаметр пор 1-0,2 мкм) под давлением инертного газа (азот, аргон). При анализе липосомальной суспензии (антивирусная активность) установлено, что не более 25-30% интерферона остается не инкапсулированным. Поэтому в терапевтических целях липосомальную суспензию можно использовать без отделения невключившегося материала. В асептических условиях разливают по 1 мл суспензии во флаконы, замораживают при -35^oC и проводят лиофильную (сублимационную) сушку препарата, постепенно повышая температуру в течение 36-48 ч до достижения остаточной влажности (21) мас.%. Сразу после сушки флаконы с препаратом герметично укупоривают в атмосфере инертного газа в асептических условиях. Перед употреблением к лиофильно высушенному препарату добавляют 1,0 мл дистиллированной воды и встряхивают до получения однородной суспензии молочно-белого цвета.

Пример 2. Все операции проводят аналогично примеру 1, за исключением того, что объем суспензии до необходимого доводят вместо физиологического раствора фосфатно-солевым буферным раствором.

Пример 3. все операции проводят аналогично примеру 1, за исключением того, что перед получением липосомальной суспензии предварительно гидратируют сухую липидную пленку изотоническим раствором хлористого натрия 0,5 мас.% в течение 1 ч.

Пример 4. Для тестирования in vitro антивирусной активности липосомальной формы интерферона, полученной как указано в примерах 1-3, используют метод подавления цитопатогенного действия вируса везикулярного стоматита (BBC) штамм "Индиана" в культуре диплоидных фибробластов легкого эмбриона человека (Л-68), выращенной в монослое в 96 - луночных микропланшетах фирмы "Linbro" [11]. Предварительно BBC пассируют на куриных эмбрионах по ТУ 42-14-97-79, не менее 3-х пассажей (заражающая доза 10² - 10³ ТЦД₅₀/0,1 мл при инфекционной активности 10⁵-10⁶ ТЦД₅₀/ 0,1 мл). Для контроля степени окисленности липидов используют метод, основанный на измерении концентрации продуктов перекисного окисления липидов по реакции с тиобарбитуровой кислотой [12].

Перед определением антивирусной активности липосомальную суспензию инкубируют (202) мин при температуре (221^oC) в присутствии 1% (V/V) тритона X-100 для разрушения липосом. Для определения активности готовят двукратные разведения (выше и ниже предполагаемого титра) исследуемых препаратов и ОСО активности (активность которого выражена в международных единицах - ME-OCO активности, ФС 42-28-90-87) в среде 199 или Игла с 2%-ной сыворотки плодов коров по ФС 42-7 BC-85 (поддерживающая среда) и антибиотиками. На каждое разведение используют не менее 4-х лунок с монослоем культуры клеток. Из лунок удаляют среду и вносят по 0,1 мл предполагаемых разведений липосомального интерферона. 4 лунки с культурой клеток оставляют в качестве контрольных. Кроме того, 16 лунок оставляют для контроля дозы индикаторного вируса. В эти лунки вносят по 0,1 мл поддерживающей среды. Инокулированные и контрольные культуры инкубируют в течение 1 сут при (371)^oC а атмосфере с (5,0 0,5)%CO₂, после чего в каждую с испытываемыми материалами вносят определенную заранее дозу BBC, соответствующую 100 ТЦД₅₀ в 0,1 мл. Одновременно осуществляют контроль взятой дозы вируса на предназначенных для этой цели 16 лунках с культурой. Используют по 4 лунки на каждое разведение вируса, начиная с разведения, соответствующего 100 ТЦД50, до разведения, соответствующего 0,1 ТЦД₅₀, с коэффициентом разведения, равным 10. После внесения индикаторного вируса и титрования его дозы, культуру клеток инкубируют на протяжении 2-х суток при температуре, равной (371)^oC, в атмосфере с (5,01)% CO₂, под контролем дозы вируса.

Учет результатов противовирусной активности липосомального интерферона осуществляют, когда доза внесенного вируса соответствует 100 ТЦД₅₀. Если дозу вируса, соответствующую 100 ТЦД₅₀, рассчитывают на основании учета результатов через 24 ч после заражения, то и учет титрования препарата осуществляют через 24 ч. Учет результатов опыта возможен, если нет признаков дегенерации в контрольной культуре. За титр липосомального интерферона принимают величину, обратную разведению препарата, при котором клеточная культура в 50% лунок оказывается полностью защищенной от цитопатического действия вируса. Пересчет активности в МЕ осуществляют по формуле Как известно, фармацевтически приемлемым является срок хранения лекарственного средства не менее 6 месяцев, предпочтительнее не менее 1 года. Для подтверждения стабильности лиофильно высушенной липосомальной лекарственной формы рекомбинантного альфа-2-интерферона заявленного состава нами в течение 12 месяцев исследовались противовирусная активность и степень накопления перекисей липидов препарата. Препарат хранился в рефрижераторе при температуре 4^oC. Как показали наши исследования, в течение указанного срока хранения не обнаружено снижения противовирусной активности заявляемого лекарственного средства, а также не обнаружено значимого накопления продуктов перекисного окисления липидов, что свидетельствует о стабильности лекарственного средства (см. таблицу).

Для подтверждения клинической эффективности заявляемого лекарственного средства нами проведены открытые сравнительные исследования эффективности лиофильно высушенной липосомальной лекарственной формы интерферона-альфа-2 для перорального применения и широко используемой в клинической практике инъекционной лекарственной формы, применяемой ректально или внутримышечно в комплексной терапии больных гломерулонефритом, ассоциированным с НВ - вирусной инфекцией.

В качестве иллюстрации эффективности липосомальной лекарственной формы рекомбинатного альфа-2-интерферона заявляемого состава, применяемой перорально, приводим 4 клинических примера. Эти примеры иллюстрируют, но не ограничивают применение препарата в клинической практике.

Пример 5. Больной К.Д., 1988 года рождения (и.б. N 4300 за 1994 год) находился на лечении в отделе нефрологии МНИИ педиатрии и детской хирургии Минздравмедпрома с 24.11.1994 г. с диагнозом: гломерулонефрит, нефротическая форма, в фазе клинико-лабораторной ремиссии, ПНI. Хронический вирусный гепатит B, активная фаза.

Диагноз хронического вирусного гепатита B был поставлен на основании данных анамнеза: в течение 3 лет наблюдается по поводу патологии печени, которая проявляется в виде увеличения размеров печени, повышения активности трансаминаз и обнаружения маркеров вируса B (ВГВ).

При поступлении печень не увеличена, билирубин (прямой и непрямой) - в пределах нормы, аланиновая трансаминаза повышена - 136 нмоль/(лс) (норма до 40 нмоль/(лс), выявляются маркеры ВГВ: HBsAg, HBeAg, анти-HBc суммарные. Остальные маркеры вирусного гепатита B: анти-HBs, анти-HBc IgM и анти-HBe - были отрицательными.

Ребенок получал липосомальную форму рекомбинантного альфа-2-интерферона в течение 4 недель в дозе 500 тыс. Ед х 2 р.в.д. 10 дней ежедневно, затем через день на ночь до 4 недель per os.

В результате лечения снизилась активность трансаминаз вдвое до 62 нмоль/(лс), произошла сероконверсия - HBeAg в анти-HBe и HBsAg в анти-HBs.

Таким образом, использование липосомальной формы рекомбинантного альфа-2-интерферона у ребенка с хроническим вирусным гепатитом В привело к снижению активности воспалительного процесса и прекращению активной репликации вируса гепатита B.

Пример 6. Больной П. Р., 1980 года рождения (и.б. N 4627 за 1994 год) находился на лечении в отделе нефрологии МНИИ педиатрии и детской хирургии Минздравмедпрома с 20.12.1994 г. с диагнозом: мезангиопролиферативный гломерулонефрит с тубулоинтерстициальным компонентом на фоне дизэмбриогенеза почечной ткани, активность II, ПН2а. HB - вирусная инфекция. HB - вирусная инфекция была диагностирована на основе выявления маркеров гепатита B (HBsAg, анти- HBeAg, анти-HBc суммарные) при отсутствии признаков активного воспалительного процесса в печени: печень не увеличена, билирубин (прямой и непрямой) - в пределах нормы, аланиновая трансминаза не повышена.

В результате лечения произошла сероконверсия - HBsAg в анти-HBs, что косвенно свидетельствует об улучшении иммунного ответа на вирусные антигены.

Таким образом, использование липосомальной формы рекомбинантного альфа-2-интерферона у ребенка с HB - вирусной инфекцией привело к сероконверсии, что позволило провести ребенку иммуносупрессивную терапию азатиоприном по поводу основного заболевания.

Пример 7. Больная Л.Л., 1980 года рождения (и.б. N 382 за 1995 год) находилась на лечении в отделе нефрологии МНИИ педиатрии и детской хирургии Минздравмедпрома с 26.01.1995 г. с диагнозом: гломерулонефрит, смешанная форма на фоне аплазии правой почки, активность I, ПН2а, хронический вирусный гепатит B, активная фаза; тромбоцитопеническая пурпура аутоиммунного генеза в фазе ремиссии. Диагноз хронического вирусного гепатита B был поставлен на основании данных анамнеза: в течение 2 лет наблюдается по поводу патологии печени, которая проявляется в виде увеличения размеров печени, повышения активности трансаминаз и обнаружения маркеров вируса гепатита B (ВГВ).

При поступлении печень увеличена до 1,5 см, плотная, билирубин (прямой и непрямой) - в пределах нормы, аланиновая трансаминаза повышена - 72,5 нмоль/(лс) (норма до 40 нмоль/(лс), выявляются маркеры ВГВ: HBsAg, анти-HBeAg, анти-HBc суммарные. Остальные маркеры ВГВ (анти-HBs, анти-HBc IgM и анти-HBe), анти-HCV, анти-дельта-суммарные и анти-дельта IgM - были отрицательными.

В результате лечения сократилась печень, нормализовались трансаминазы и произошла сероконверсия - HBsAg в анти-HBs, что косвенно свидетельствует об улучшении иммунного ответа на вирусные антигены.

Таким образом, использование липосомальной формы рекомбинантного альфа-2-интерферона у ребенка с хроническим вирусом гепатита B привело к снижению активности воспалительного процесса и сероконверсии. При этом не наблюдалось никаких побочных явлений терапии, в том числе и в отношении манифестации тромбоцитопенической пурпуры.

Пример 8. Больной С.А., 1982 года рождения (и.б. N 4186 за 1994 год) находился на лечении в отделе нефрологии МНИИ педиатрии и детской хирургии Минздравмедпрома с 15.11.1994 г. с диагнозом: гломерулонефрит, гематурическая форма, активность I, ПНI; хронический вирусный гепатит B, активная фаза.

Диагноз хронического вирусного гепатита B был поставлен на основании данных анамнеза: в течение 4 лет наблюдается по поводу патологии печени, которая проявляется в виде увеличения размеров печени, повышения активности трансаминаз и обнаружения маркера вируса гепатита B (ВГВ).

При поступлении печень не увеличена, билирубин (прямой и непрямой) - в пределах нормы, аланиновая трансаминаза повышена - 61,5 нмоль/(лс) (норма до 40 нмоль/(лс), выявляются маркеры ВГВ: HBsAg, анти-HBeAg, анти-HBc суммарные. Остальные маркеры ВГВ - были отрицательными.

В результате лечения нормализовалась аланиновая трансаминаза и произошла сероконверсия - HBsAg в анти-HBs, что косвенно свидетельствует об улучшении иммунного ответа на вирусные антигены.

Таким образом, использование липосомальной формы рекомбинантного альфа-2-интерферона у ребенка с хроническим вирусным гепатитом B привело к снижению активности воспалительного процесса и сероконверсии. При этом не наблюдалось никаких побочных явлений терапии, более того на фоне терапии уменьшилась выраженность гематурии. Вероятно, нефрит патогенически связан с HB-вирусной инфекцией.

Полученные в результате проведенных клинических испытаний данные свидетельствуют о том, что липосомальная лекарственная форма рекомбинантного альфа-2-интерферона заявляемого состава обладает противовирусной активностью при пероральном применении, ее применение не сопровождается побочными эффектами и поэтому она может применяться для медицинских целей в нефрологической практике в случае ассоциации гломерулонефрита с HB-вирусной инфекцией и при любых других заболеваниях, при которых показано применение интерферона.

Промышленная применимость.

В результате проведенных клинических испытаний установлено, что липосомальная лекарственная форма рекомбинантного альфа-2-интерферона для перорального применения заявленного состава не уступает по эффективности традиционно применяемой инъекционной лекарственной форме рекомбинантного интерферона при использовании ее внутримышечно или ректально. Побочных эффектов при применении липосомальной формы рекомбинантного интерферона не отмечено. Пероральный способ применения препарата, хорошо переносится больными, исключает возможные нежелательные побочные эффекты, связанные с парентеральным способом применения интерферона (пирогенные реакции, кожные высыпания, лейко- и тромбоцитопения), а также риск инфицирования при проведении инъекций.

Изобретение может быть использовано в комплексной терапии заболеваний вирусной этиологии и в любых других случаях, при которых показано применение препаратов интерферона.

Литература 1. Денисов Л.А. Применение рекомбинантного альфа-интерферона. В сб. Методические основы применения реаферона - человеческого рекомбинантного интерферона-альфа-2В-белка.- Кольцово: 1993, с. 22.

2. Патент РФ N 2024253, 1994.

3. ЕП, заявка, 341258, 1990.

4. ЕП, заявка, 266940, 1988.

5. Eppstein D.A., Stewart W.E. Altered Pharmacological Properties of Liposome-Associated Human Interferon-Alpha. J. Virology, 1982, vol. 41, N 2, p. 575-582.

6. Killion J.J., Fan D., Bucana C.D., Frangos D.N., Price J.E., Fidler I. J. Augmentation of Antiproliferative Activity of Interferon Alfa Against Human Bladder Tumor Cell Lines by Encapsulation of Interferon Alta Within Liposomes. J. of the Nat. Cancer Inst, 1989, vol.81, N 18 p. 1387-1392.

7. ЕР, заявка 331635, 1989.

8. PCT N 91/01719, 1991.

9. ЕР, заявка, 172007, 1986.

10. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биохимия. -М.: Медицина, 1990.

11. Реаферон для инъекций сухой. Фармакопейная статья. ВФС-42-227ВС-89.

12. Yagi K.-Lipid peroxidation. Assay for blood plasma and serum. Methods Enzymol, 1984, vol. 105, p. 328-333.

Формула изобретения

Липосомальное противовирусное лекарственное средство для перорального применения, включающее интерферон, отличающееся тем, что оно содержит рекомбинантный интерферон-альфа-2 и дополнительно фосфатидилохолин, холестерин, сахарозу, альфа-токоферол и аскорбиновую кислоту, при этом оно представляет собой лиофилизат или изотонический раствор при следующем содержании компонентов лиофилизата, мг: Рекомбинантный интерферон-альфа-2, ME - (2,5 - 10) 10⁵ Фосфатидилхолин - 60 - 80 Холестерин - 6 - 10 альфа-Токоферол - 6 - 10 Аскорбиновая кислота - 1 - 2 Сахароза - 40 - 90д

РИСУНКИ

Рисунок 1

PD4A - Изменение наименования обладателя патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение

(73) Новое наименование патентообладателя:Федеральное государственное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (RU)

Адрес для переписки:630559, Новосибирская обл., Новосибирский р-н, р.п. Кольцово, ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора

Извещение опубликовано: 27.02.2009 БИ: 06/2009

QZ4A - Регистрация изменений (дополнений) лицензионного договора на использование изобретения

Лицензиар(ы): Федеральное государственное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "ВЕКТОР" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

Вид лицензии*: ИЛ

Лицензиат(ы): Закрытое акционерное общество "Вектор-Медика"

Характер внесенных изменений (дополнений):Уточнен расчет лицензионного вознаграждения.

Дата и номер государственной регистрации договора, в который внесены изменения: 31.05.2000 № 10549

Извещение опубликовано: 27.08.2010 БИ: 24/2010

* ИЛ - исключительная лицензия НИЛ - неисключительная лицензия

QZ4A - Регистрация изменений (дополнений) лицензионного договора на использование изобретения

Лицензиар(ы): Федеральное государственное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

Вид лицензии*: ИЛ

Лицензиат(ы): Закрытое акционерное общество "ВЕКТОР - МЕДИКА"

Характер внесенных изменений (дополнений):Изменения касаются даты фактического возникновения обязательств по договору РД0067467

Дата и номер государственной регистрации договора, в который внесены изменения: 31.05.2000 № 10549

Извещение опубликовано: 27.12.2010 БИ: 36/2010

* ИЛ - исключительная лицензия НИЛ - неисключительная лицензия