Триазолилзамещенное соединение третичного амина и фармацевтическая композиция

Триазолилзамещенное соединение третичного амина и фармацевтическая композиция

Реферат

 

Изобретение относится к новым триазолилзамещенным третичного амина формулы I, где A - простая связь или низшая алкиленовая группа; B - низший алкил, группа (a), нафтил, пиридил, тиенил, тиазолил, бензотриазолил, хинолил, бензофуразанил или бензотиазолил, возможно замещенные галогеном или алкилом; D - кольцо группа (б) или бензофуразанил; Е - кольцо - 4Н-1,2,4-триазолил или 1Н-1,2,4-триазолил; R¹ - H, галоген, циано-, нитрогруппа, CF₃, низший алкил или алкокси; R² - водород или галоген; R³ - галоген, циано-, нитро-, CF₃ или аминогруппа, при условии, что если оба R¹ и R² являются атомами хлора, то А - метилен. Соединение I или его соль проявляют ингибирующую ароматазу активность. 3 с. и 5 з.п.ф-лы, 5 табл.

и

Настоящее изобретение относится к новым триазолилзамещенным третичным аминным соединениям, обладающим ингибирующей ароматазу активностью и полезным в качестве медицинских средств.

Известно, что фермент ароматаза принимает участие в осуществлении последней стадии пути биосинтеза эстрогена в живом организме. Ароматаза ароматизирует A цикл стероида, используя в качестве субстрата андроген с получением эстрогена. Поэтому путем ингибирования активности этого фермента возможно предотвращение и лечение различных заболеваний, вызванных эстрогеном как обостряющим фактором.

На этом основании ранее было предложено несколько соединений, ингибирующих ароматазу. В качестве их типичного примера можно упомянуть имидазолил- или триазолил- или пиридилзамещенные метильные соединения (Европейские патенты laid-open NN 236,940 и 293,978).

Однако соединения, предусмотренные настоящим изобретением, определенно отличаются от известных соединений по своей структуре тем, что имеют триазолилзамещенную третичную аминогруппу. Такие соединения, имеющие триазолилзамещенную третичную аминогруппу, не были получены до настоящего времени. В частности, не было известно ни одного эффективного способа прямого алкилирования, особенно арилирования, концевой аминогруппы триазолила.

Согласно настоящему изобретению, предложены новые триазолилзамещенные соединения третичного амина, которые отличаются по структуре от любых ранее известных соединений, и оптимальный способ их получения. Более того, обнаружено, что указанные новые соединения обладают высокой активностью ингибирования ароматазы. На основании этих находок и было совершено настоящее изобретение.

Согласно данному изобретению, предложено триазолилзамещенное соединение третичного амина общей формулы (I): , в которой A представляет собой простую связь или низшую алкиленовую группу; В обозначает низший алкил, группу формулы - , нафтил, пиридил, тиенил, тиазолил, бензотриазолил, хинолил, бензофуразанил или бензотиазолил, возможно замещенные одним или несколькими атомами галогена или низшими алкильными группами; D кольцо представляет собой группу формулы или бензофуразанил; E кольцо обозначает 4H-1,2,4-триазольную группу или 1H-1,2,4-триазольную группу; R¹ обозначает атом водорода, атом галогена, цианогруппу, нитрогруппу, трифторметил, низший алкил или низшую алкоксигруппу; R² обозначает атом водорода или атом галогена; R³ обозначает атом галогена, цианогруппу, нитрогруппу, трифторметил или аминогруппу, при условии, что если оба R¹ и R² являются атомами хлора, то A представляет собой метилен; или его фармацевтически приемлемая соль.

Предпочтительно соединение формулы (I) или его соль, в котором В представляет собой группу формулы и D кольцо представляет собой группу формулы ; особенно, когда R² в нем является атомом водорода; еще более предпочтительно, чтобы R¹ являлся атомом галогена, цианогруппой или нитрогруппой, а R³ являлся цианогруппой или нитрогруппой.

Предпочтителен 4-[N-(4-бромбензил)-N-(4-цианофенил)амино]-4H-1,2,4- триазол или его соль и 4-[N-(4-бромбензил)-N-(4-нитрофенил)амино]- 4H-1,2,4-триазол или его соль.

Согласно данному изобретению, предложено указанное выше триазолилзамещенное соединение третичного амина, соответствующее общей формуле (I), или же его соль в качестве ингибитора ароматазы.

Предусмотренные настоящим изобретением соединения будут далее рассмотрены более подробно. Используемое здесь понятие "низший" соответствует линейной или разветвленной углеродной цепи, содержащей от 1 до 6 атомов углерода, за исключением особо оговоренных случаев.

Таким образом, понятие "низшая алкильная группа" включает в себя конкретно, например, метильную группу, этильную группу, пропильную группу, изопропильную группу, бутильную группу, изобутильную группу, втор-бутильную группу, трет-бутильную группу, пентильную (амильную) группу, изопентильную группу, неопентильную группу, трет-пентильную группу, 1-метилбутильную группу, 2-метилбутильную группу, 1,2-диметилпропильную группу, гексильную группу, изогексильную группу, 1-метилпентильную группу, 2- метилпентильную группу, 3-метилпентильную группу, 1,1-диметилбутильную группу, 1,2-диметилбутильную группу, 2,2-диметилбутильную группу, 1,3-диметилбутильную группу, 2,3- диметилбутильную группу, 3,3-диметилбутильную группу, 1-этилбутильную группу, 2-этилбутильную группу, 1,1,2-триметилпропильную группу, 1,2,2-триметилпропильную группу, 1-этил-1-метилпропильную группу и 1-этил-2-метилпропильную группу. Среди них предпочтительными являются метильная группа, этильная группа, пропильная группа, изопропильная группа и бутильная группа.

"Низшая алкенильная группа" представляет собой линейную или разветвленную углеродную цепь, состоящую из от 1 до 6 атомов углерода, включая конкретно, например, метиленовую группу, этиленовую группу, пропиленовую группу, тетраметиленовую группу, 2-метилтриметиленовую группу, 1-этилэтиленовую группу, пентаметиленовую группу и 1,2-диэтилэтиленовую группу. Среди них предпочтительными являются метиленовая группа и этиленовая группа.

"Арильная группа" в случае В или D кольца включает в себя, например, фенильную группу, нафтильную группу, антраценильную группу и фенантренильную группу, а "5- или 6- членная гетероциклическая группа, содержащая от 1 до 3 гетероатомов кислорода, серы и/или атомов азота" в случае кольца включает в себя, например, фурильную группу, тиенильную группу, тиазолильную группу, тиадиазолильную группу, оксазолильную группу, имидазолильную группу, триазолильную группу, пирролоильную группу, пиридильную группу, пиримидинильную группу и пирадинильную группу.

"Бициклическая соединенная гетероциклическая группа, состоящая из вышеуказанного гетерокольца и бензольного кольца," включает в себя, например, бензотиазольную группу, бензоксазолильную группу, хинолильную группу, изохинолильную группу, бензотриазолильную группу и бензофуразанильную группу.

Каждая вышеупомянутая "арильная группа", "5- или 6-членная гетероциклическая группа, содержащая от 1 до 3 гетероатомов кислорода, серы и/или атомов азота", а также "бициклическая соединенная гетероциклическая группа, состоящая из вышеуказанного гетерокольца и бензольного кольца," может нести один или более, предпочтительно 1 или 2, заместителя.

В качестве примеров заместителей в группах подразумевают атом галогена, цианогруппу, нитрогруппу, трифторметильную группу, гидроксильную группу, аминогруппу, моно- или ди-низшую алкиламиногруппу, низшую алкильную группу, низшую алкоксильную группу, карбоксильную группу, низшую алкоксикарбонильную группу, низшую алканоильную группу, низшую алканоилоксигруппу, низшую алканоиламиногруппу, ароильную группу, ароилоксигруппу, карбамоильную группу, моно- или ди-низшую алкиламинокарбонильную группу, сульфогруппу, низшую алкилсульфонильную группу, сульфамоильную группу, а также моно- или ди-низшую алкилсульфамоильную группу. Среди них предпочтительными являются атом галогена, цианогруппа, нитрогруппа, трифторметильная группа, гидроксильная группа, аминогруппа, низшая алкильная группа, низшая алкоксильная группа, карбоксильная группа, низшая алкоксикарбонильная группа, а также низшая алканоиламиногруппа. Более предпочтительными являются атом галогена, цианогруппа и нитрогруппа.

"Атом галогена" включает в себя атом фтора, атом хлора, атом брома и атом иода. "Низшая алкоксильная группа" включает в себя метоксигруппу, этоксигруппу, пропоксигруппу, изопропоксигруппу, бутоксигруппу, изобутоксигруппу, втор-бутоксигруппу, трет-бутоксигруппу, пентилокси-(амилокси-) группу, изопентилоксигруппу, трет-пентилоксигруппу, неопентилоксигруппу, 2-метилбутилоксигруппу, 1,2- диметилпропоксигруппу, 1-этилпропоксигруппу, а также гексилоксигруппу. Среди них предпочтительными являются метоксигруппа и этоксигруппа.

"Низшая алкоксикарбонильная группа" включает в себя метоксикарбонильную группу, этоксикарбонильную группу, пропоксикарбонильную группу, бутоксикарбонильную группу, трет- бутоксикарбонильную группу, а также пентилоксикарбонильную группу; "низшая алканоильная (алканоилокси-) группа" включает в себя ацетильную (ацетилокси-) группу, пропионильную (пропионилокси-) группу, бутирильную (бутирилокси-) группу, валерильную (валерилокси-) группу, а также изовалерильную (изовалерилокси-) группу; "низшая алканоиламиногруппа" включает в себя ацетиламиногруппу, пропиониламиногруппу, бутириламиногруппу, валериламиногруппу, а также изовалериламиногруппу.

"Ароильная группа" или "ароилоксигруппа" включает в себя бензоильную (бензоилокси-) группу, 1- нафтилкарбонильную (1- нафтилкарбонилокси-) группу, 2-нафтилкарбонильную (2-нафтилкарбонилокси-) группу, тиеноильную (тиеноилокси-) группу, пирролоильную (пирролоилокси-) группу, а также 2-, 3- или 4-пиридилкарбонильную (2-, 3- или 4-пиридилкарбонилокси-) группу.

Значение использованного выше понятия "низшая алкильная группа" следует применять по отношению к низшей алкильной части "моно- или ди-низшей алкиламинокарбонильной группы", либо "моно- или ди-низшей алкилсульфамоильной группы". Типичными примерами такого рода групп являются метиламинокарбонильная группа, диметиламинокарбонильная группа, диэтиламинокарбонильная группа, пропиламинокарбонильная группа, метилсульфамоильная группа, диметилсульфамоильная группа, а также диэтиламиносульфамоильная группа.

"Низшая алкилсульфонильная группа" включает в себя метилсульфонильную группу, этилсульфонильную группу, пропилсульфонильную группу, изопропилсульфонильную группу, бутилсульфонильную группу, изобутилсульфонильную группу, втор-бутилсульфонильную группу, трет-бутилсульфонильную группу, пентилсульфонильную группу, а также гексилсульфонильную группу.

Предусмотренные настоящим изобретением соединения могут с легкостью образовывать соли с неорганическими кислотами и органическими кислотами, причем эти соли также обладают ингибирующей ароматазу активностью, как и соответствующие свободные основания. В качестве предпочтительных солей, например, подразумевают соли неорганической кислоты, такие как гидрохлориды, гидробромиды, сульфаты, нитраты и фосфаты; а также соли органической кислоты, такие как оксалаты, фумараты и тартараты.

В зависимости от типа заместителей в составе соединений, эти соединения также могут образовывать фармацевтически приемлемые соли со щелочными металлами или щелочно-земельными металлами (например, соли натрия, калия, магния или кальция) или образовывать соли с органическими аминами, такими как аммиак или триэтиламин.

В зависимости от типа заместителей в составе соединений, эти соединения могут содержать асимметричный атом углерода и включают все изомеры, такие как оптические изомеры и диастереоизомеры, основанные на асимметричном атоме углерода.

Кроме того, возможны случаи различных гидратов, растворов и таутомеров соединений, предусмотренных настоящим изобретением. Настоящее изобретение также включает выделенные гидраты, растворы и таутомеры, как и их смеси.

Предусмотренные настоящим изобретением соединения могут быть получены с помощью различных способов, на основании характеристик их основного скелета, а также используемых заместителей. Некоторые типичные способы приведены ниже.

Первый способ получения: где X представляет собой атом галогена, арилсульфонилоксигруппу или низшую алкилсульфонилоксигруппу.

Получение искомого соединения (I) из N-аминотриазола (II) может быть осуществлено с помощью двух вышеуказанных путей. На каждой стадии этих путей реакция представляет собой алкилирование или ацилирование аминогруппы, что может быть проведено сходным образом.

Конкретнее, в соответствии с приведенной выше реакцией, необходимые для реакции количества исходных соединений приводят в контакт друг с другом, например, в нейтральном по отношению к реакции растворителе, таком как диметилформамид, диметилсульфоксид, тетрагидрофуран, диметоксиэтан, ацетон или метил-этил-кетон, в присутствии основания. Приемлемыми в качестве основания являются, например, гидрид натрия, амид натрия, н-бутил литий, т-бутоксид калия, натрий, метоксид натрия, этоксид натрия, гидроксид натрия и гидроксид калия. Реакция с легкостью может быть осуществлена при комнатной температуре.

В данном случае арилсульфонилоксигруппа включает в себя, например, фенилсульфонилоксигруппу и бензилсульфонилоксигруппу; низшая алкилсульфонилоксигруппа представляет собой сульфонилоксигруппу, замещенную низшей алкильной группой, включая, например, метилсульфонилоксигруппу. этилсульфонилоксигруппу и пропилсульфонилоксигруппу.

Второй способ получения: где A¹ представляет собой низшую алкиленовую группу, в которой количество метиленовых групп на одну меньше, чем в A. Такое же обозначение использовано и далее.

В соответствии с этим способом, N-аминотриазол (II) приводят во взаимодействие с альдегидным соединением (VII ) с получением соответствующего основания Шиффа (IX), которое восстанавливают с получением соединения (XI), а соединение (XI) алкилируют или ацилируют таким же образом, как это описано в первом способе получения с образованием искомого продукта (Ia). Реакцию получения основания Шиффа проводят с помощью азеотропного дегидрирования или сходных методов в растворителе, таком как метанол, этанол или подобный им спирт, либо бензол или толуол, в присутствии кислого катализатора. Восстановление может быть осуществлено с помощью стандартного метода, использующего, например, борогидрид натрия, борогидрид лития или гидрид бороцианида. Пригодным в качестве реакционного растворителя является спирт, такой как метанол или этанол, либо органический растворитель, такой как уксусная кислота или вода, либо растворитель, представляющий собой их смесь. По мере восстановления можно не выделять образующееся основание Шиффа, а добавлять восстанавливающий агент к содержащему основание Шиффа реакционному раствору для осуществления восстановления.

Третий способ получения: где R¹ представляет собой аминозащищающую группу, Y обозначает атом галогена, В¹ и D¹ каждый представляет собой арильную группу, 5- или 6-членную гетероциклическую группу или бициклическую соединенную группу, состоящую из указанного выше гетероцикла и бензольного кольца, которая замещена нитрогруппой, В² обозначает арильную группу, 5- или 6-членную гетероциклическую группу или бициклическую соединенную группу, состоящую из указанного выше гетероцикла и бензольного кольца, которая замещена аминогруппой, В³ представляет собой арильную группу, 5- или 6-членную гетероциклическую группу или бициклическую соединенную группу, состоящую из указанного выше гетероцикла и бензольного кольца, которая замещена атомом галогена. Эти же обозначения использованы и далее.

В соответствии с этим способом получают галогензамещенные соединения, отвечающие общей формуле (Ib) или (Ic).

Таким образом, соединение, описываемое общей формулой (XIII) или (XVI), восстанавливают с получением аминного соединения, соответствующего общей формуле (XIV) или (XVII), указанное аминное соединение подвергают реакции Сандмейера, в результате которой происходит включение атома галогена и удаление защитной группы, с получением соединения, отвечающего общей формуле (XV) или (XVIII), после чего это соединение приводят во взаимодействие с соединением (V) или (III) с получением искомого соединения, описываемого формулой (Ib) или (Ic) соответственно.

Восстановление соединения, отвечающего формуле (XIII), производят с использованием стандартного метода химического восстановления или каталитического восстановления.

Пригодными в качестве восстанавливающего агента при химическом восстановлении являются металлы, такие как олово, цинк или железо. В случае каталитического восстановления используют традиционные катализаторы, включая, например, платиновый катализатор, такой как платина или оксид платины, палладиевый катализатор, такой как черный палладий или оксид палладия, а также никелевый катализатор, такой как никель Рэнея.

В качестве растворителя для реакции восстановления можно использовать любой традиционный растворитель, включая, например, метанол, этанол, пропанол, этил ацетат и уксусную кислоту. Защиту атома азота в соединении, соответствующем формуле (XIII) или (XVI), осуществляют с помощью традиционной ацилзащитной группы, такой как ацетильная или бензоильная группа. Введение защитной группы может быть достигнуто с использованием реакции соединения с уксусным ангидридом, ацетил хлоридом или бензоил хлоридом в присутствии основания, такого как ацетат натрия, пиридин, пиколин, лютидин, триметиламин или триэтиламин. В качестве растворителя для реакции пригодны дихлорметан, дихлорэтан, хлороформ, бензол и толуол. Реакцию также можно осуществлять и в отсутствие растворителя.

В дальнейшем полученное таким образом соединение (XIV) или (XVII) подвергают реакции Сандмейера так, что атом галогена вводится в соединение, а защитная группа удаляется из него, с образованием соединения (XV) или (XVIII). Реакцию Сандмейера можно проводить с помощью любого обычного метода, например, с использованием хлорида меди, бромида меди или иодида меди, а также соляной кислоты, бромоводородной кислоты, иодоводородной кислоты или серной кислоты. В качестве растворителя для реакции приемлемы вода, ацетон, диоксан и тетрагидрофуран. Удаление защитной группы может быть достигнуто посредством кислого гидролиза с использованием разведенной соляной кислоты или разведенной серной кислоты. Для реакции между полученным таким образом соединением (XV) и соединением (V) или (III) можно использовать тот же путь, который предусмотрен первым способом получения или вторым способом получения. Другие способы получения: 1. Если предусмотренные настоящим изобретением соединения содержат аминогруппу в качестве заместителя, они могут быть получены посредством восстановления предусмотренного настоящим изобретением соединения, несущего соответствующую нитрогруппу. Реакция представляет собой конверсию заместителя, по отношению к которой можно использовать тот же путь восстановления, который описан в третьем способе.

2. Если предусмотренные настоящим изобретением соединения содержат низшую алканоиламиногруппу в качестве заместителя, они могут быть получены посредством взаимодействия предусмотренного настоящим изобретением соединения, несущего соответствующую аминогруппу, с уксусным ангидридом или подобным ему агентом с помощью обычного метода.

3. Если предусмотренные настоящим изобретением соединения содержат бензотриазольную группу в качестве заместителя В или в качестве кольца D, они могут быть получены посредством восстановления предусмотренного настоящим изобретением соединения, несущего аминогруппу (или монозамещенную аминогруппу) и нитрогруппу в качестве соседних заместителей фенильной группы, с превращением нитрогруппы в аминогруппу, с последующим взаимодействием восстановленного соединения с нитритом натрия, нитритом калия или подобным им агентом для замыкания кольца с образованием бензотриазольной группы в этом соединении.

Полученные таким образом соединения, предусмотренные настоящим изобретением, могут быть выделены или очищены с помощью любых традиционных методов, например путем экстракции, осаждения, фракционной хроматографии, фракционной кристаллизации, перекристаллизации и подобных им методов. Соли предусмотренных настоящим изобретением соединений могут быть получены посредством использования свободного основания в обычной солеобразующей реакции с получением его ожидаемой соли.

Предусмотренные настоящим изобретением соединения обладают способностью ингибировать ароматазу, которая принимает участие в биосинтезе эстрогена из андрогена. В связи с этим предусмотренные настоящим изобретением соединения пригодны для лечения заболеваний, при которых эстроген является обостряющим фактором таких заболеваний, как рак груди, мастопатия, эндометриоз, простатомегалия, гистеромиома, а также рак матки.

Фармакологические эффекты, производимые предусмотренными настоящим изобретением соединениями, были выявлены с использованием перечисленных ниже методов.

1. Ингибирование ароматазы in vitro.

а. Ингибирование ароматазы, выделенной из яичника крысы. Активность ароматазы измеряли в соответствии с известным методом.

Величину IC₅₀, показывающую влияние тестируемого соединения на ингибирование ароматазы, определяли по подавлению освобождения ³H₂O из [1,2-³H] андростендиона в микросомах яичника крыс.

6. Ингибирование ароматазы, выделенной из плаценты человека.

Активность ароматазы измеряли в соответствии с известным методом.

Ингибирующую активность соединения определяли по подавлению освобождения ³H₂O из [1,2-³H] андростендиона в микросомах плаценты человека.

2. Ингибирование активности ароматазы in vivo.

Самкам крыс линии Wister, весящим 60 г каждая, (неполовозрелым) подкожно вводили сыворотку гонадотропина кобылы (PMSG) в концентрации 100 IU на крысу. Через 72 часа крысе применяли тестируемое соединение, растворенное в 0,5 мл 20%-ного водного раствора полиэтиленгликоля. В качестве контроля использовали 20%-ный водный раствор полиэтиленгликоля. Через три часа после введения тестируемого соединения крыс умерщвляли путем декапитации и потери крови, удаляли их яичники и с помощью радиоиммунного анализа (РИА) измеряли содержание эстрадиола в яичниках.

3. Противораковая активность.

Противораковую активность тестируемого соединения по отношению к карциноме груди измеряли на модели вызванного диметилбензантраценом (DMBA) рака у самок крыс линии Sprague-Dawlay.

4. Ингибирование продукции альдостерона in vitro и in vivo.

а. Ингибирование продукции альдостерона in vitro.

Активность измеряли в соответствии с известным методом. Ингибирующую активность тестируемого соединения определяли на основании подавления продукции альдостерона, вызванной у первого поколения культивируемых клеток надпочечников крысы под действием стимуляции адренокортикотропным гормоном (АКТГ). Количество альдостерона измеряли с использованием РИА.

б. Ингибирование продукции альдостерона у крыс in vivo.

Ингибирующую активность измеряли в соответствии с известным методом. Ингибирующую активность тестируемого соединения определяли на основании подавления вызванного АКТГ роста концентрации альдостерона в крови у крыс. Количество альдостерона измеряли с использованием РИА.

5. Ингибирование продукции кортизола in vitro.

Ингибирующую активность измеряли в соответствии с известным методом. Ингибирующую активность тестируемого соединения определяли на основании подавления продукции кортизола, вызванной у первого поколения культивируемых клеток надпочечников крысы под действием стимуляции АКТГ. Количество кортизола измеряли с использованием РИА.

Результаты перечисленных выше экспериментов представлены далее.

1. Ингибирование ароматазы in vitro в микросомах плаценты человека.

Значение IC₅₀ по ингибированию ароматазы из микросом плаценты человека ex vivo определяли в соответствии с указанным выше экспериментальным методом 1.б., полученные результаты представлены в табл. 1.

Контрольное соединение: соединение из примера 20 б. Это же соединение будет использовано и ниже.

Как видно из представленных выше результатов, соединения, предусмотренные настоящим изобретением, проявляют существенно более высокое ингибирование ароматазы in vitro в микросомах плаценты человека, нежели контрольное соединение.

2. Селективность ингибирования ароматазы из яичника крысы in vitro и продукции альдостерона у крыс in vitro.

Значения IC₅₀ по ингибированию ароматазы крыс in vitro и подавлению продукции альдостерона крыс ex vivo измеряли с помощью перечисленных выше экспериментальных методов 1. а. и 4.а. соответственно. Селективность была определена с помощью подсчета и приведена в табл. 2. Селективность показывает отношение значения IC₅₀ для продукции альдостерона крыс к значению IC₅₀ для активности ароматазы крыс.

Как видно из представленных выше данных, предусмотренные настоящим изобретением соединения также обладают существенно более высокой ингибирующей активностью по отношению к ароматазе крыс in vitro, нежели контрольное соединение. Кроме того, оба соединения проявляют почти одинаковую ингибирующую активность по отношению к продукции альдостерона крыс in vitro.

В связи с этим селективность ингибирующей ароматазу активности in vitro по сравнению с активностью, ингибирующей продукцию альдостерона in vitro, (В/А) равна 6100 для соединения из примера 15, в то время как для контрольного соединения соответствующее значение равно 1700. Этот факт означает, что предусмотренное настоящим изобретением соединение оказывает чрезвычайно слабое влияние на систему продукции альдостерона, а потому является высокоселективным ингибитором ароматазы.

Альдостерон, известный как минеральный кортикоид, обладает рядом биологических эффектов. Показано, что ингибирование продукции альдостерона приводит к вредным побочным последствиям, таким как понижение кровяного давления и ортостатичное снижение тургора вследствие уменьшения количества жидкости в организме, а также ненормального электролитического баланса, возникающего за счет вымывания из организма ионов калия. В соответствии с этим, так как предусмотренное настоящим изобретением соединение представляет собой ингибитор ароматазы, характеризующийся высокой энзиматической специфичностью и меньшей ингибирующей активностью по отношению к продукции альдостерона, предполагают, что это соединение окажется более безопасным и будет обладать незначительными побочными эффектами.

3. Ингибирование продукции альдостерона у крыс in vivo.

Ингибирующую активность по отношению к продукции альдостерона у крыс in vivo измеряли с помощью указанного выше экспериментального метода 4.б. Если тестируемое соединение применяли для каждой из пяти крыс в концентрации 10 мг/кг, ингибирование продукции альдостерона составляла у крыс 37%, что является существенным при сопоставлении с контролем.

Между тем, если каждой из пяти крыс, используемых в качестве экспериментальной группы, применяли каждое из предусмотренных настоящим изобретением соединений из примеров 10, 12 и 15 в концентрации 100 мг/кг (в 10 раз выше, чем в предыдущем случае), ингибирование продукции альдостерона было недостоверным. Статистическую достоверность значений анализировали с помощью одномерного вариационного анализа. Полученные результаты свидетельствуют о том, что предусмотренные настоящим изобретением соединения являются высоко безопасными веществами, обладающими незначительными вредными побочными эффектами также и в тестах in vivo.

4. Ингибирование продукции кортизола у кролика in vitro.

Значения IC₅₀, характерные для соединений в плане ингибирования продукции кортизола, определяли с помощью указанного выше экспериментального метода 5, результаты представлены в табл. 3.

Как видно из приведенных выше результатов, отмечено, что предусмотренные настоящим изобретением соединения проявляют существенно более низкую активность, ингибирующую продукцию кортизола у кролика in vitro, нежели контрольное соединение. Известно, что подавление продукции кортизола приводит к различным вредным побочным эффектам, таким как понижение концентрации сахара в крови, нарушения функции нервной системы, усиление стресса и усиление воспалительного процесса. В соответствии с этим, так как предусмотренные настоящим изобретением соединения проявляют слабую активность, ингибирующую продукцию кортизола, предполагают, что эти соединения будут обладать менее вредными побочными эффектами, нежели контрольное соединение.

5. Ингибирование активности ароматазы in vivo.

Ингибирующую активность по отношению к ароматазе крыс измеряли с помощью указанного выше экспериментального метода 2. Минимальная эффективная доза соединения, предусмотренного настоящим изобретением, составляла 0,001 мг/кг.

6. Противораковая активность.

В соответствии с указанным выше экспериментальным методом 3, предусмотренные настоящим изобретением соединения вызывают подавление или регрессию существующих опухолей при ежедневном оральном применении в дозах примерно от 0,04 до 1,0 мг/кг.

7. Метаболизм.

Если испытуемым крысам орально применяли предусмотренное настоящим изобретением соединение из примера 15 в дозе 3 мг/кг, максимальное значение (C_max) концентрации неизмененного соединения в плазме составляло 2,88 мкг/мл, а время его полужизни (T_1/2) равнялось 11 часам. Из этих результатов понятно, что предусмотренное настоящим изобретением соединение характеризуется превосходной оральной поглощаемостью, а эффект поглощенного соединения продолжается долго. Таким образом, указанное соединение обладает хорошими показателями в качестве медикамента.

Если соединения, соответствующие формуле (I), и их нетоксичные соли или гидраты используют для перечисленных выше объектов, эти соединения, как правило, применяют орально или внутрибрюшинно. Их количество в дозе варьирует в зависимости от возраста, веса тела и состояния пациентов, а также от лечебного эффекта, пути применения и времени лечения данными соединениями. Как правило, количество соединения в дозе составляет от 0,1 до 100 мг /на взрослого/ в сутки, предпочтительно от 1 до 10 мг /на взрослого/ в сутки в случае орального применения в виде единой дозы или ее частей, предназначенных для нескольких приемов в течение суток; или же от 0,1 до 100 мг /на взрослого/ в сутки в случае внутрибрюшинного применения в виде единой дозы или ее частей, предназначенных для нескольких приемов в течение суток или же для постоянной внутривенной инъекции в течение от 1 до 24 часов в сутки. Так как количество предусмотренного настоящим изобретением соединения варьирует в дозе в зависимости от различных условий, меньшие дозы, нежели приведенный выше уровень, в некоторых случаях часто также могли бы быть удовлетворительными.

Согласно данному изобретению, предложена ингибирующая ароматазу фармацевтическая композиция, включающая в себя эффективное количество активного ингредиента и фармацевтически приемлемый носитель, характеризующаяся тем, что активный ингредиент представляет собой триазолилзамещенное соединение третичного амина формулы (I) или его соль.

В качестве твердых составов, предназначенных для применения настоящего изобретения, приемлемыми являются таблетки, порошок, а также гранулы. В твердых составах этого типа одно или более активное вещество смешивают с по меньшей мере одним инертным наполнителем, таким как лактоза, маннитол, глюкоза, гидроксипропил целлюлоза, высокоочищенная кристаллическая целлюлоза, крахмал, поливинил пирролидон и метасиликат алюмината магния. Подобный состав с помощью стандартногo метода может в необязательном порядке включать другие добавки, отличные от инертных наполнителей, например смазочный материал, такой как стеарат магния, дезинтегрирующий агент, такой как кальций гликолат целлюлоза, стабилизирующий агент, такой как лактоза, а также агент, способствующий растворению, такой как глютаминовая кислота или аспарагиновая кислота. Таблетки и пилюли могут в необязательном порядке быть покрыты пленкой из растворимого в желудке или растворимого во внутренней полости вещества, такого как сахароза, желатин, гидроксипропил целлюлоза или фталат гидроксипропилметил целлюлозы.

Жидкий состав, предназначенный для орального применения настоящего изобретения, включает фармацевтически приемлемую эмульсию, раствор, сироп или эликсир, а также содержит традиционный растворяющий агент, такой как чистая вода или этанол. Кроме того, в добавление к инертному растворяющему агенту подобный состав может содержать другие вспомогательные агенты, такие как увлажняющий агент или суспендирующий агент, а также подсластитель, пахучее вещество, ароматизатор и антисептический агент.

Инъекция, предназначенная для внутреннего применения настоящего изобретения, включает в себя простерилизованный водный или неводный раствор, суспензию или эмульсию. Водный раствор и суспензия содержат, например, предназначенную для инъекций дистиллированную воду, а также физиологический солевой раствор. Неводный раствор и суспензия содержат, например, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла, такие как оливковое масло, спирты, такие как этанол, полисорбат 80 и т.д. Кроме того, подобный состав может содержать другие вспомогательные добавки, такие как антисептический агент, увлажняющий агент, эмулизатор, диспергирующий агент, стабилизирующий агент (например, лактоза), способствующий растворению агент (например, глутаминовая кислота, аспарагиновая кислота) и т.д. Указанный состав стерилизуют, например, посредством фильтрации через не пропускающий бактерии фильтр, путем введения в состав агента, убивающего микробы, или с помощью светового облучения. В некоторых случаях в первую очередь приготавливают стерильный твердый состав, который перед использованием может быть растворен в стерильной воде или же в стерильном растворителе, предназначенном для инъекций, с получением инъекции.

Наилучший способ для использования изобретения.

В следующем разделе суть настоящего изобретения будет объяснена более подробно с помощью приведенных ниже примеров. Получение исходных соединений, предназначенных для использования в этих примерах, описано в справочных примерах.

Справочный пример 1 80 мл бензола добавили к 8,4 г 4-амино-1,2,4-триазола, 13,1 г п- цианобензальдегида и 1,9 г моногидрата п-толуолсульфоновой кислоты и нагревали полученную смесь при дефлегмации в течение 4 часов в условиях азеотропного дегидрирования. Кристаллы, выпавшие в осадок после охлаждения смеси, отобрали с помощью фильтрации с количественным получением 4-[(4-цианобензилиден)амино]-4H-1,2,4- триазола.

Масс-спектрометрия (m/z): 198 (М⁺+1) Справочный пример 2 2,52 г 4-амино-1,2,4-триазола маленькими порциями добавили при комнатной температуре к диметилсульфоксидной суспензии 1,2 г гидрида натрия. После перемешивания в течение 3 часов при комнатной температуре к смеси добавили 1,21 г 4-фторбензонитрила в виде одной порции и продолжали перемешивание в течение еще одного часа. К реакционному раствору добавили воду, после чего экстрагировали полученную смесь этилацетатом. Органический слой просушили над безводным сульфатом магния и удалили растворитель посредством перегонки при пониженном давлении. Образовавшиеся кристаллы промыли этилацетатом с получением 1,09 г 4-[(4-цианофенил)амино]-4H-1,2,4- триазола.

Спектр ядерного магнитного резонанса (DMSO-d₆, TMS внутренний стандарт) : 6,57 (2H, d, J=9 Гц), 7,69 (2H, d, J=9 Гц), 8,83 (2H, s).

Масс-спектрометрия (m/z): 185 (М⁺).

Справочный пример 3 Осуществляли так же, как описано в справочном приме