Аналоги витамина d3, способы из получения, фармацевтическая композиция и способ лечения

Аналоги витамина d3, способы из получения, фармацевтическая композиция и способ лечения

Реферат

 

Изобретение относится к неизвестному до сих пор классу соединений, которые обладают противовоспалительными и иммуномодулирующими действиями, к фармацевтическим препаратам, содержащим эти соединения, к способу лечения и к способу получения вышеуказанных соединений. Соединения формулы (I), где U -группа-(СН₂)_n -У-(СН₂)_m -, n = 0,1 или 2, m = 1 или 2, У - кислород или сера, при этом 22- или 23-метилен может быть заменен кислородом, или 22- или 23-метилен может быть заменен группой -СН = СН-; R¹-метил или этил, а атом углерода, непосредственно связанный с С-25 атомом, может быть замещен одним или несколькими атомами фтора; имеющиеся гидроксигруппы могут быть защищены с помощью групп, способных отщепляться in vivo. Способ получения соединений формулы (I), где гидроксигруппа модифицирована путем взаимодействия с трет-бутилбромацетатом в присутствии основания и катализатора в растворителе с последующим взаимодействием полученного сложного эфира с метил- или этилмагнийгалогенидом с получением соединения, которое подвергают изомеризации в произвольной последовательности при помощи УФ-света в присутствии триплетного активатора и удалению силильных групп тетра-н-бутиламмоний-фторидом или гидрофторидом с образованием соединения формулы (I), где Y и U - кислород. Способ профилактики и лечения патологических состояний D₃-витаминотерапией заключается в введении фармкомпозиции, содержащей эффективное количество соединения формулы (I). 5 с.п. и 3 з.п.ф-лы, 2 табл.

Изобретение относится к неизвестному до сих пор классу соединений, которые обладают противовоспалительным и иммуномодулирующим действиями, а также проявляют сильную активность в стимулировании дифференциации и ингибировании нежелательной пролиферации некоторых клеток, включая раковые клетки и клетки кожи, к фармацевтическим препаратам, содержащим эти соединения, единицам дозировки таких препаратов, и к их применению в лечении и профилактике гиперпаратиреоза, в частности вторичного гиперпаратиреоза, связанного с почечной недостаточностью, ряда состояний заболеваний, включающих диабет, артериальную гипертонию, угри, облысение, старение кожи, дисбаланс иммунной системы, воспалительных заболеваний, таких, как ревматоидный артрит и астма, заболеваний, характеризуемых аномальной клеточной дифференциацией и/или клеточной пролиферацией, таких, как псориаз и рак, профилактике и/или лечении атрофии кожи стероидного происхождения, для улучшения остеогенеза и лечения остеопороза.

Соединениями настоящего изобретения являются производные 1, 25-дигидрокси-20-эпи-витамина D₃, представленные общей формулой I в которой указывает, что этот углерод может быть модифицированным, и группа U, замещающая 24-метилен 1, 25-дигидрокси-20-эпи-витамина D₃, означает (CH₂)_n-Y-(CH₂)_m, где n - 0, 1 или 2, m - 1 или 2, и Y - кислород или сера; и производные, образованные замещением либо 22-метилена, либо 23-метилена кислородом, или замещением 22- и 23- метилена группой -CH=CH-; R¹ - метил или этил; и в которой один или несколько атомов углерода, непосредственно связанные с C-25, могут замещаться одним или несколькими атомами фтора.

В зависимости от характера цепи, связывающей C-20 и C-25, соединения изобретения могут включать несколько изомерных форм (например, R или S конфигурации на асимметричных атомах углерода, E или Z конфигурации двойных связей). Изобретение охватывает все эти диастереоизомеры в чистой форме или в виде диастереоизомерных смесей. Кроме того, производные I, в которых одна или несколько гидроксигрупп замаскированы как группы, которые можно вновь преобразовать в гидроксигруппы ин виво, также входят в объем изобретения.

Соединения I, в которых гидроксильная группа на углероде-25 замещается водородом, представляют собой другой тип пролекарства. Эти соединения относительно неактивны ин витро, но преобразуются в активные соединения I ферментным гидроксилированием после попадания в организм пациента.

Было выявлено, что 1, 25-дигидрокcи-витамин D₃ (1,25 (OH)₂D₃) влияет на действия и/или выработку интерлейкинов (Muller и др., Jmmund. Lett 17, 361-366 (1988)), что указывает на потенциальную возможность использования этого соединения в лечении заболеваний, характеризующихся дисфункцией иммунной системы, например аутоиммунных заболеваний, СПИД, реакций "хозяин против трансплантата", и отторжении трансплантатов или других состояний, характеризующихся аномальной выработкой интерлейкина-1, например воспалительных заболеваний, таких, как ревматоидный артрит и астма.

Также было выявлено, что 1,25(OH)₂D₃ способен стимулировать дифференциацию клеток и тормозить избыточную клеточную пролиферацию (Abe. E. и др., Prac. Natl. Acad. Sci. США, 78, 4990-94 (1981)), и было сделано предположение, что это соединение может быть полезным в лечении заболеваний, характеризующихся аномальной клеточной пролиферацией и/или клеточной дифференциацией, таких, как лейкемия, миелофиброз и псориаз.

Кроме того, предлагалось использовать 1,25(OH)₂D₃, или его пролекарство 1-OH-D₃ для лечения артериальной гипертонии (Sind. L. и др., Acta Med. Stand. 222, 42S-427 (1987)) и диабета (Jnomata и др., Bone Mineral, 1, 187-192 (1986)). Другое назначение 1,25(OH)₂D₃ предложено как результат недавнего выявления связи между наследственной устойчивостью к витамину Д и облысением; лечение 1,25(OH)₂D₃ может способствовать росту волос (Editarial, Lancet 4 марта 1989, стр. 478). Кроме того, факт, что местное применение 1,25(OH)₂D₃ снижает размер сальных желез в ушах самцов сирийских хомяков, предполагает, что это соединение может быть полезным для лечения угрей (Malloy, V. L. и др. , Tricontinental Meeting for Investigative Dermatol. Вашингтон, 1989).

Однако терапевтические возможности таких показаний 1,25(OH)₂D₃ сильно ограничены хорошо известным сильным действием этого гормона на обмен кальция; повышенные концентрации в крови будут началом гиперкальциемии. Таким образом, это соединение и его сильнодействующие синтетические аналоги не являются достаточно удовлетворительными для использования в качестве лекарственных средств в лечении, например, псориаза, рака или иммунных заболеваний, которые могут требовать продолжительного назначения лекарства в относительно больших дозах.

Известны многие окса- и тиа-аналоги витамина D₃, включая 24-окса, аналог 24a-гомо- 1 , 25-дигидрокси-витамина D₃ и его 26,27-диалкил производные (Европейская патентная заявка N 450 743A). Окса-соединения настоящего изобретения структурно отличаются от этих соединений тем, что у них атом кислорода расположен в другой позиции, т.е. 24a или 24b, в еще более удлиненной боковой цепи, и/или тем, что они имеют эпи-конфигурацию в 20-позиции. Был описан ряд 23-окса и 23-тиа соединений (Международная патентная заявка N PCT/DK91/00091). И эти соединения также отличаются от соединений настоящего изобретения тем, что они не содержат связующий атом кислорода или серы в позиции 24 или дальше (т.е. 24a или 24b) в боковой цепи.

Полезность аналога витамина Д в указанных случаях зависит не только от высокой активности, демонстрируемой в ин витро тесте на клеточную дифференциацию, но также от метаболического пути соединения в организме.

Теперь выявлено, что соединения настоящего изобретения проявляют благоприятную селективность по отношению к их действиям на клеточную дифференциацию ин витро и их кальцемические действия ин виво и в то же самое время показывают высокую биологическую доступность, а также химическую и метаболическую стабильность.

Селективность соединений иллюстрируется тем фактом, что хотя концентрация, необходимая для индуцирования клеточной дифференциации в моноцитарной опухолевой клеточной линии человека, та же самая или значительно ниже концентрации 1,25(OH)₂D₃ для получения такого же эффекта, у крыс ин виво соединения менее активны, чем 1,25(OH)₂D₃ в индуцировании гиперкальциурии и гиперкальциемии.

Поэтому соединения изобретения особенно пригодны как для местного, так и системного лечения и профилактики нарушений у людей и животных, которые характеризуются 1) аномальной клеточной пролиферацией и/или клеточной дифференциацией, такой, как некоторые дерматологические расстройства, включая псориаз и некоторые формы рака, 2) дисбалансом иммунной системы, например, в аутоиммунных заболеваниях, включая диабет, реакцию "хозяин против трансплантата", и отторжение трансплантатов; и помимо этого, для лечения воспалительных заболеваний, таких, как ревматоидный артрит и астма. Угри, облысение и гипертония - другие состояния, которые можно лечить соединениями изобретения. И наконец, поскольку после местного лечения соединениями изобретения наблюдается утолщение кожи, эти соединения могут быть полезны в лечении или профилактике старения кожи, включая светостарение.

Учитывая низкую тенденцию соединений к образованию гиперкальциемии при продолжительном назначении, они представляют особую ценность в длительном лечении гиперпаратиреоза (особенно вторичного гиперпаратиреоза, связанного с почечной недостаточностью) и в улучшении остеогенеза и лечении остеопороза. По этим показаниям описанные здесь соединения обладают лучшим терапевтическим эффектом, чем соединения известного уровня.

Настоящие соединения можно использовать в комбинации с другими фармацевтическими веществами. В профилактике отторжения трансплантата и реакции "хозяин против трансплантата" лечение настоящими соединениями можно выгодно комбинировать с лечением, например, циклоспорином.

Соединения формулы I можно легко получить из производного I витамина Д (Tetrahedron 43, 4609 (1987)), например, способами, указанными в схеме 1. Способы, используемые для получения ключевых промежуточных соединений II, некоторые из которых являются известными соединениями, не указываются н2а схеме, но некоторые из них показаны в препаратах. Символ " " рядом с атомом углерода (см. формулу I) указывает, что этот метилен может необязательно замещаться радикалом той же валентности, как показано в Препаратах, Таблицах 1 и 2. В формулах II-VIII, n=0, 1 или 2, и символ Q является заменителем атомов 22 и 23, т.е. формулы I или группы, которую можно преобразовать в нее.

В этом раскрытии используются следующие стандартные сокращения: Me = метил; Et = этил; Prⁿ = н-пропил; Prⁱ = изопропил; Bu^t = трет-бутил = т-бутил; THP = тетра-гидро-4H-пиран-2-ил; THF = тетрагидрофуран; TS = n-толуолсульфонил; TBA = тетра-(н-бутил)-аммоний; TBDMS = трет-бутилдиметилcилил; DMF = N,N-диметилформамид.

Примечания к Схеме 1 а) Несколько стадий: см. Препараты.

б) Преобразование OH в уходящую группу (например, тозилированием для Z= OTS или бромированием для Z=Br).

в) (i) Нуклеофильное замещение тиоацетатом, (u) гидролиз в щелочной среде.

г) Алкилирование образующим блоком R-Z боковой цепи в присутствии основания (например, NaOH, KOBu^t, NaH или KH), с катализатором или без него (например, 18-Crown-6, ТВА бромид) в безводном растворителе (например, ДМФ или ТГФ), или в условиях перехода фазы (например, толуол-вода).

д) Реакция с блоком, образующим боковую цепь. R-XH в присутствии основания (например, NaOH, KOBu^t, NaH или KH), с катализатором или без него (например, 18-Crown-6, ТВА бромид) в безводном растворителе (например, ДМФ или ТГФ) или в условиях перехода фазы (например, толуол-вода).

е) Возможная модификация функциональной группы в боковой цепи.

ж) Изомеризация с hu-сенсибилизатором триплета, например, антраценом.

з) Снятие защиты TBA⁺F^- или HF.

Хотя показанные промежуточные соединения могут иметь гидроксильные группы, защищенные как трет-бутил-диметилоилил эфиры, объем изобретения не исключает использования альтернативных гидроксильных защитных групп, хорошо известных в области техники (таких, как те, которые описаны у T.W. Greene, 3ащитные группы в органическом синтезе, Wiley, Нью-Йорк, 1981) вместе с альтернативными реакциями для снятия защиты.

Алкилирование II или алкилирование формулы IV для получения VLX = 0 из 11; X = S из IV) достигается обработкой в щелочных условиях блоком образования боковой цепи общей формулы Z-R, в которой Z - уходящая группа, такая, как галоген (Cl, Br или I) или n-толуолсульфонилокси или трифторметаноульфонилокси, и в которой R'- метил или этил, и m = 1 или 2 с тем, чтобы в конечном итоге завершить боковую цепь I (так, что -(CH₂)_n-X-(CH₂)_m- соответствует "V"), или необязательно радикал, который может быть преобразован в это соединение на любой удобной более поздней стадии (или на нескольких стадиях). Таким образом R в соединениях V, VI, VII и VIII не обязательно имеет одно и то же значение на протяжении определенной последовательности синтеза. Преобразование R в -(CH₂)_m-²⁵C(OH)- (R')₂ может вовлекать несколько стадий, а также временную защиту чувствительной системы триена молекулы, например, как цикло-аддукт, образованный с диоксидом серы. Другой вариант включает обработку промежуточного соединения III (Z - уходящая группа, как описано выше) в щелочных условиях блоком образования боковой цепи HX-R, в котором X - кислород или сера и R имеет значение, указанное выше, чтобы получить промежуточное соединение V. Помимо необходимой модификации внутри остатка боковой цепи (R), преобразование V в I включает стадию фотоизомеризации и стадию десилилирования, аналогичные стадиям, используемым на последних этапах синтеза других аналогов витамина D (см. европейский патент N 0227826).

Может быть удобнее изменить порядок реакции алкилирования (г или д) и реакции фотоизомеризации (ж), в этом случае (5Z)-изомер II, III или IV будет промежуточным соединением.

Блоки образования боковой цепи RZ представляют собой либо известные соединения (несколько из них описаны в международной патентной заявке PCT/DK 89/00079), либо их можно получить аналогично соединениям, описанным в PCT/DK 89/00079. R-Z представляет собой обычно Br-(CH₂)_m-²⁵C(OY)-(R)₂, где Y является гидроксильной защитной группой, например, тетрагидропиранилокси или триалкилсилилокси. (Любые такие ТНР эфиры R-Z. которые не описаны в PCT/DK 89/00079, легко получить из соответствующего спирта).

Блоки образования HX-R боковой цепи также соединения известные, или их можно получить способами, аналогичными тем, которые используются для получения таких известных соединений. Синтез новых соединений R-Z или HX-R иллюстрируется в Препаратах. Для случая, где m=1, R-Z может быть Br-CH₂CO₂Bu^t, и HX-R может быть H SCH₂CO₂Et, и сложноэфирная группа преобразуется реакцией, например, с реактивом Гриньяра, в ²⁵C-(R')₂OH.

Как указано в схеме выше, по меньшей мере, для соединений "24-тиа" способ не исключает отнесение алкилирования тиола даже вплоть до последней стадии (например, VIII, R=H->I).

Настоящие изобретения предполагается использовать в фармацевтических композициях, которые полезны в лечении нарушений у людей и животных, как описано выше.

Количество соединения формулы I (далее упоминается как активный ингредиент), необходимое для обеспечения терапевтического эффекта, будет различным в зависимости от конкретного соединения, способа назначения и субъекта лечения. Соединения изобретения могут назначаться парентерально, внутрь сустава, в кишечник или местно. Они очень хорошо всасываются при кишечном назначении и поэтому это предпочтительный способ назначения в лечении системных расстройств. В лечении дерматологических заболеваний, таких, как псориаз, желательны формы для местного или кишечного назначения.

В лечении респираторных заболеваний, таких, как астма, предпочтительны аэрозоли.

Хота активный ингредиент можно назначать в чистом виде, как химическое соединение, все же желательно, чтобы он входил в состав фармацевтического препарата. Наиболее пригодно, если активный ингредиент включен в количестве от 1 части на миллион до 0,1% по весу от препарата.

Под термином "единица дозировки" понимается унифицированная, т.е. разовая доза, которую можно назначать пациенту и которую можно упаковать, так что она будет сохранять химическую и физическую стабильность и содержать активный материал в чистом виде или в виде смеси с твердыми или жидкими фармацевтическими разбавителями или носителями.

Поэтому препараты как для ветеринарного использования, так и для лечения людей включают активный ингредиент вместе с фармацевтически приемлемым носителем, а возможно и другими терапевтическими ингредиентами. Носитель(и) должны быть "приемлемыми" в смысле совместимости с другими ингредиентами препаратов и быть безвредными для пациента.

Препараты имеют форму, приемлемую для орального, ректального, парентерального (включая подкожное, внутримышечное и внутривенное), внутрисуставного и местного назначения.

Препараты могут готовиться в форме единиц дозировки любым из способов, хорошо известных в области фармацевтики. Все способы включают стадию смешивания активного ингредиента с носителем, который включает один или несколько дополнительных ингредиентов. Как правило, препараты готовятся непосредственным и однородным смешиванием активного ингредиента с жидким носителем или мелко измельченным твердым носителем, либо и тем и другим, и затем, при необходимости формованием продукта в нужный препарат.

Препараты настоящего изобретения, пригодные для орального назначения, могут быть в форме отдельных единиц дозировки, таких, как капсулы, пакетики, таблетки или пастилки, каждая с содержанием определенного количества активного ингредиента; в форме порошка или гранул; в форме раствора или суспензии в водной жидкости или неводной жидкости; или в форме эмульсии масло-в-воде или вода-в-масле. Активный ингредиент может также назначаться в форме шариков, электуария или пасты.

Таблетки могут готовиться прессованием или формованием активного ингредиента с одним или несколькими дополнительными ингредиентами. Прессованные таблетки готовятся прессованием в соответствующей машине активного ингредиента в свободно-текучей форме, такой, как порошок или гранулы с возможным введением связующего, смазывающего веществ, инертного разбавителя, поверхностно-активного или диспергирующего агента. Формованные таблетки готовятся формованием в соответствующей для этого машине смеси порошкового активного ингредиента и подходящего носителя, увлажненного инертным жидким разбавителем.

Препараты для ректального назначения могут быть в форме суппозиториев, включающих активный ингредиент и носитель, такой, как масло какао, или в форме клизмы.

Препараты для парентерального назначения обычно содержат стерильный маслянистый или водный препарат с активным ингредиентом, который изотоничен по отношению к крови пациента.

Препараты для назначения внутрь сустава могут быть в форме стерильного водного препарата активного ингредиента, который имеет микрокристаллическую форму, например, в форме водной микрокристаллической суспензии. Липосомные препараты или полимерные системы со способностью биораспада могут также использоваться для назначения активного ингредиента внутрь сустава и для офтальмологического применения.

Препараты для местного назначения, включая местное назначение в глаза, представляют собой жидкие или полужидкие препараты, такие, как линименты, лосьоны, аппликанты, эмульсии масло-в-воде или вода-в-масле, такие, как кремы, мази или пасты; или растворы и суспензии, такие, как капли.

Для лечения астмы можно использовать ингаляции порошка, самораспыляющиеся препараты или спреи, с дозированным распылением из флакона. В таких препаратах размер частиц предпочтительно составляет диапазон от 10 до 100 мкм.

Лучше всего, если такие препараты будут в форме мелко измельченного порошка для назначения в легкие из ингаляциодного устройства или дозирующего закона с распылением. В случае использования самораспыляющегося раствора и спреев эффекта можно достичь либо выбором клапана с нужными характеристиками распыления (т.е. способного дать струю с нужным размером частиц) либо включением активного ингредиента в виде суспендированного порошка с контролируемым размером частиц. Эти самораспыляющиеся препараты могут быть препаратами с выбросом порошка или с выбросом активного ингредиента в виде микрокапель раствора или суспензии.

Самораспыляющиеся препараты с выбросом порошка обычно включают диспергированные частицы твердых активных ингредиентов и жидкое реактивное вещество о температурой кипения ниже 18^oC при атмосферном давлении. Жидкое реактивное вещество может быть веществом, пригодным для медицинских целей и включать одно или несколько C₁-C₆-алкил углеводородов или галогенированных C₁-C₆-алкил углеводородов или их смесей; при этом особенно предпочтительны хлорированные и фторированные C₁-C₆-алкил углеводороды. Обычно реактивное вещество включено в препарат в количестве 45-99,9% вес/вес, а активный ингредиент - количество от 1 части/милл до 0,1% вес/вес.

Помимо указанных ингредиентов препараты по изобретению могут включать один или несколько дополнительных ингредиентов, таких, как разбавители, буферы, ароматизирующие агенты, связующие вещества, поверхностно-активные агенты, сгустители, смазывающие вещества, консерванты, например, метил гидроксибензоат (включая антиокислители), эмульгирующие агенты и другие. Кроме этого композиции могут включать и другие терапевтически активные соединения, используемые обычно в лечении вышеупомянутых патологических состояний.

Настоящее изобретение далее касается метода лечения пациентов, страдающих от одного из указанных состояний, этот метод заключается в назначении нуждающемуся в лечении пациенту эффективного количества одного или нескольких соединений формулы I, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими терапевтическими активными соединениями, применяемыми обычно в лечении упомянутых патологических состоянии. Лечение настоящими соединениями или другими терапевтически активными агентами может проводиться одновременно или с интервалами.

При лечении системных нарушений ежедневные дозы соединения формулы I назначаются в количестве от 0,1 до 100 мкг, предпочтительно от 0,2 до 25 мкг. При местном применении в лечении дерматологических нарушений назначаются мази, кремы или лосьоны, содержащие 0,1-500 мкг/г, предпочтительно 1-100 мкг/г соединения формулы I. Оральные композиции назначаются в препаратах, таких как таблетки, капсулы или капли, содержащих 0,05-50 мкг, предпочтительно 0,1-25 мкг соединения формулы I на единицу дозировки.

Далее изобретение будет описано в следующих Препаратах и Примерах, которые не следует рассматривать как ограничивающие его.

Препараты и Примеры Общие сведения Приведенные в качестве примеров соединения 1 даются в Таблице 1. Промежуточные соединения Схемы 1, на которые дается ссылка в Препаратах, следует соотносить по номерам с соответствующими формулами в Таблице 2. Они используются для иллюстрации типичного синтеза данных в Примерах соединений 1.

Для спектра ядерно-магнитного резонанса (300 МГц) величины химического смещения (б) указаны в част/милл. для растворов дейтериохлороформа (если не указано иначе) относительно к внутреннему тетраметилсилану ( = 0) или хлороформу ( = 7,25). Величина для мультиплета, определенного (дуплет (д), триплет (т), квартет (кв. )), или не определенного (м) на приблизительной средней точке дается, если не указан диапазон (с = синглет, шир. = широкий). Константы сочетания даются в Герцах и иногда приближены к наиближайшей единице.

Эфиром является диэтиловый эфир и высушивается над натрием. ТГФ высушивался над натрий-бензофеноном. Петролеиный эфир относится к фракции пентана. Если не указано иначе, % означает об./об.%. Если не оговорено иначе, реакции проводились при комнатной температуре. Рабочая процедура включает разбавление конкретным, растворителем (либо органическим растворителем), экстракцию водой и затем соляным раствором, высушивание над безводным MgSO₄, и концентрацию в вакууме до получения остатка. Хроматография проводилась на силикагеле.

Общая процедура 1 A: Преобразование тозилата в нитрил с последующим B: Восстановлением до альдегида, и затем C: Восстановление до спирта формулы II (Препараты 1-3) A: К раствору тозилата (7,50 мМ) в ДМФ (80 мл) при комнатной температуре был добавлен цианид калия (4,97 г, 76,2 мМ) и 18-Crown-6 (0,50 г, 1,89 мМ). После перемешивания в течение 5 часов при 50^oC реакционная смесь выливалась в воду и дважды экстрагировалась этилацетатом. Соединенные органические слои промывались несколько раз водой, высушивались над MgSO₄ и концентрировались. Остаток очищался хроматографией (75 г силикагеля; 5% EtOAc в петролейном эфире в качестве элюанта) для получения нитрила.

B: К раствору нитрила из Части A (7 мМ) в сухом эфире (30 мл) при -78^oC добавлялся 1,0 М раствор гидрида диизобутилалюминия в толуоле (9,0 мл). Реакционная смесь нагревалась до 0^oC. После 2 часов добавлялся еще гидрид диизобутилалюминия (6,0 мл) и смесь перемешивалась еще один час при 0^oC. Смесь быстро охлаждалась насыщенным водным NH₄Cl (5 мл) и метанолом (5 мл) и экстрагировалась этилацетатом. Органическая фаза промывалась водой (дважды) и соляным раствором, затем высушивалась над MgSO₄ и концентрировалась в вакууме. После флэш хроматографии (75 г силикагеля; 5% EtOAc в петролейном эфире) был получен альдегид.

C: Перемешанный охлажденный льдом раствор альдегида со стадии B (3,22 мМ) в ТГФ (10 мл) и этаноле (35 мл) обрабатывался боргидридом натрия (0,14 г, 3,54 мМ). После 30 минут реакционная смесь разделялась между этилацетатом и водой, и органический слой промывался соляным раствором и высушивался. После концентрации в вакууме получен спирт формулы II.

Препарат 1A 1(S), 3(E)-бис-трет-бутилдиметилсилилокси-20(S)-цианометил-9,10- секопрегна-5(E),7(E),10(19)-триен(Соединение 2) Используемым тозилатом является 1(S), 3(R)-бис- третбутилдиметилсилилокси-20(R)-(n-толуолсульфонилоксиметил)- 9,10-секопрегна-5(E), 7(E), 10(19)-триен (5,47 г). Соединение 2: 0,05 (м, 12H), 0,54 (с, 3H), 0,85 (с, 9H), 0,89 (с, 9H), 1,09 (д, 3H), 1,00-2,03 (м, 13H), 2,08 (шт. 1H), 2,31 (ш. о, 1H), 2,43 (м, 2H), 2,54 (дд, 1H), 2,88 (м, 1H), 4,21 (м, 1H), 4,52 (м, 1H), 4,94 (м, 1H), 4,98 (м, 1H), 5,82 (д, 1H), 6,43 (д. 1H).

Препарат 1B 1(S), 3(R)-бис-трет-бутилдиметилсилилокси-20(S)-формилметил-9,10- секопрегна-5(E),7(E),10(19)-триен (Соединение 3) Используемым нитрилом является соединение 2 (4,06 г). Соединение 3: 0,05 (м, 12H), 0,57 (с, 3H), 0,86 (с, 9H), 0,89 (с, 9H), 0,94 (д, 3H), 1,10-2,12 (м, 14H), 2,17-2,37 (м, 2H), 2,55 (дд, 1H), 2,65 (дд, 1H), 2,87 (дд, 1H), 4,21 (м, 1H), 4,53 (м, 1H), 4,93 (м, 1H), 4,98 (м, 1H), 5,83 (д, 1H), 6,44 (д, 1H), 9,74 (дд, 1H).

Препарат 1C I(S), 3(R)-бис-трет-бутилдиметилсилилокси-20(S)- (2-гидроксиэтид)-9,10-секопоегна-5(E),7(E),10(19)-триен (Соединение 4) Используемым альдегидом является соединение 3 (1,89 г). Соединение 4: 0,05 (м, 12H), 0,56 (с, 3H), 0,85 (с, 9H), 0,89 (с, 9H), 0,86 (д, 3H), 1,10-2,10 (м, 17H), 2,30 (ш.д. 1H), 2,55 (дд, 1H), 2,87 (м, 1H), 3,55-3,80 (м, 2H), 4,21 (м, 1H), 4,53 (м, 1H), 4,93 (м, 1H), 4,98 (м, 1H), 5,82 (д, 1H), 6,45 (д, 1H).

Препарат 2A I(S), 3(R)-бис-трет-бутилдиметилсилилокси-20(S)-(2'- цианоэтил-9,10-оекопрегна-5(E),7(E),10(19)триен (Соединение 5) Используемый тозилат представляет собой 1(S),3(S)- бис-трет-бутилдиметилсилилокси-20(S)-(2'-n-толуолсульфонилоксиэтил) -9,10-секопрегна-5(E), 7(E),10(19)-триен (Соединение 12, препарат 4), (5,57 г).

Препарат 2B I(S), 3(R)-бис-трет-бутилдиметилсилилокси-20(S)-(2'-формилэтил) -9,10-секопрегна-5(E),7(E),10(19)-триен (Соединение 6) Используемый нитрил представляет собой соединение 5 (4,16 г). Соединение 6: 0,05 (ш.с, 12H), 0,55 (с, 3H), 0,85 (д, 3H), 0,85 (с, 9H), 0,88 (с, 9H), 1,20 - 2,05 (м, 16H), 2,25-2,80 (м, 4H), 2,87 (дд, 1H), 4,20 (м, 1H). 4,52 (м, 1H), 4,93 (м, 1H), 4,97 (м, 1H), 5,81 (д, 1H), 6,44 (д, 1H), 9,77 (т, 1H).

Препарат 2C 1(S), 3(R)-бис-трет-бутилдиметилсилилокси-20(S)-(3'-гидрокси-1' -пропил)-9,10-секопрегна-5(E),7(E),10(19)-триен (Соединение 7) Используемым альдегидом является соединение 6 (1,94 г). Соединение 7: 0,05 (м, 12H), 0,53 (с, 3H), 0,85 (с, 9H), 0,89 (с, 9H), 0,86 (д, 3H), 1,15-2,05 (м, 19H), 2,30 (шд, 1H), 2,55 (дд, 1H), 2,87 (м, 1H), 3,55-3,70 (м, 2H), 4,21 (м, 1H), 4,53 (м, 1H), 4,93 (м, 1H), 4,98 (м, 1H), 5,82 (д. 1H), 6,45 (д, 1H).

Препарат 3A 1(3), 3(R)-бис-трет-бутилдиметилсилилокои-20(S)-(3'-циано-1 -пропил)-9,10-секопрегна-5(E),7(E),10(19)-триен Соединение 8) Используемый тозилат представляет собой 1(S)3(S)- бис-трет-бутилдиметилсилилокси-20(S)-(3'-n-толуолсульфонилокси-1 -пропил)-9,10-оекопрегна-5(E),7(E),10(19)-триен (Соединение 13, Препарат 5) (5,68 г).

Препарат 3B 1(S), 3(R)-био-трет-бутилдиметилсилилокои-20(S)-(3'-формил-1- пропил)-9,10-секопрегна-5(E),7(E),10(19)-триен (Соединение 9) Используемым нитрилом является соединение 8 (4,26 г). Соединение 9: 0,05 (ш. с, 12H), 0,55 (с, 3H), 0,85 (д, 3H), 0,85 (с, 9H), 0,88 (с, 9H), 1,05-2,05 (м, 18H), 2,35 (ш.д, 1H), 2,40 (м, 2H), 2,55 (дд, 1H). 2,87 (дд, 1H), 2,87 (дд, 1H), 4,20 (м, 1H), 4,52 (м, 1H), 4,93 (м, 1H), 4,97 (м, 1H), 5,81 (д, 1H), 6,44 (д, 1H), 9,77 (т, 1H).

Препарат 3C 1(S), 3(R)-бис-трет-бутилдиметилсилилокси-20(S)-(4'- гидрокси-1'-бутил)-9,10-секопрегна-5(E),7(E),10(19)-триен (Соединение 10) Используемый альдегид представляет собой соединение 9 (1,98 г). Соединение 10: 0,05 (м, 12H), 0,53 (с, 3H), 0,85 (с, 9H), 0,89 (с, 9H), 0,84 (д, 3H), 1,05-2,05 (м, 21H), 2,30 (ш.д 1H), 2,55 (дд, 1H), 2,87 (м, 1H), 3,64 (т, 2H), 4,21 (м, 1H), 4,53 (м, 1H), 4,93 (м, 1H), 4,98 (м, 1H), 5,82 (д, 1H), 6,45 (д, 1H).

Общая процедура 2 Преобразование спирта формулы II в тозилат формулы III (Препараты N 4 и 5) Спирт (1,19 мм) растворяют в дихлорметане (20 мл) и пиридине (1 мл), и раствор перемешивают и охлаждают льдом во время добавления n-толуолсульфонилхлорида (0,81 г, 4,25 мМ). Реакционную смесь выстаивают при комнатной температуре вою новь до разделения между этилацетатом и водой. Органический слой последовательно промывался насыщенным раствором сульфата меди (дважды), водой, 5%-ым бикарбонатом натрия, и рассолом, а затем высушивался и концентрировался в вакууме, флэш хроматографией (50 г силикагеля, 2%-5% этил ацетата в петролейном эфире в качестве элюанта) был получен тозилат.

Препарат 4 1(S), 3(R)-бис-трет-бутилдиметилсилилокси-20(S)-(2'- n-толуолоульфонилоксиэтил)-9,10-секопрегна-5(E),7(E),10(19)-триен (Соединение 12) Используемый спирт представляет собой соединение 4 (0,70 г). Соединение 12: 0,05 (м, 12H), 0,47 (с, 3H), 0,77 (д, 3H), 0,85 (с, 9H), 1,10-2,05 (м, 16H), 2,29 (ш. д, 1H), 2,43 (с, 3H), 2,54 (дд, 1H), 2,85 (д, 1H), 4,08 (м, 2H), 4,20 (м, 1H), 4,52 (м, 1H), 4,93 (м, 1H), 4,97 (м, 1H), 5,80 (д, 1H), 6,43 (д, 1H), 7,33 (д, 2H), 7,78 (д, 2H).

Препарат 5 1(S), 3(R)-био-трет-бутилдиметилсилилокси-20(S)-(3'- n-толуолсульфонилокси-1-пропил)-9,10-секопрегна-5(E),7(E),10(19)- триен (Соединение 13) Используемый спирт представляет собой соединение 7 (0,72 г).

Общая процедура 3 O-алкилирование соединений II для получения соединения Y (Препараты 6, 7 и 27) Смесь спирта II (2,55 мм), т-бутил бромацетата (1,15 мл, 7,65 мМ) и каталитического количества (200 мг) тетра-н-бутиламмоний бромида энергично перемешивалась всю ночь при комнатной температуре в толуоле (40 мл) NaOH (водный, 20%, 30 мл), реакционная смесь разделялась между этилацетатом и водой, и органический слой промывался рассолом, высушивался над MgSO₄, и выпаривался в вакууме. Очистка остатка хроматографией (50% силикагеля, 5% EtOAc в петролейном эфире в качестве элюанта) дала соединение V.

Препарат 6 - Соединение 14 Используемый спирт представляет собой соединение 4 (1,50 г). Соединение 14: 0,05 (м, 12H), 0,55 (с, 3H), 0.85 (с, 9H), 0,89 (с. 9H), 0,82-0,92 (д, 3H), 1,47 (с, 9H), 1,00-2,10 (м, 16H), 2,30 (шд, 1H), 2,55 (дд, 1H), 2,86 (м, 1H), 3,53 (м, 2H), 3,93 (м, 2H), 4,21 (м, 1H), 4,53 (м, 1H), 4,93 (м, 1H), 4,97 (м, 1H), 5,81 (д, 1H), 6,44 (д, 1H).

Препарат 7 - Соединение 19 Используемым спиртом является соединение 11 (1,53 г). Соединение 19: 0,05(м, 12H), 0,51 (с, 3H), 0,86 (с, 9H), 0,88 (с, 9H), 1,11 (д, 3H), 1,47 (с, 9H), 1,05-2,15 (м, 14H), 2,30 (шд, 1H), 2,55 (дд, 1H), 2,85 (м, 1H), 3,92 (с, 2H), 4,02 (м. 2H), 4,21 (м, 1H), 4,52 (м, 1H), 4,93 (м, 1H), 4,97 (м, 1H), 5,47 (м, 1H), 5,60 (дд, 1H), 5,80 (д, 1H), 6,44 (д, 1H).

Общая Процедура 4 Преобразование Соединений III в Соединения V (Препараты 8, 9, 18, 19 и 22) Способ A (X=0) К раствору блока образования боковой цепи R-XH (0,372 мM), добавляется соединение III, гидрид калия (0,187 мл, 20% суспензия в масле) и 18-Crown-6 (98 мг) в сухом ТГФ (6 мл). Смесь перемешивалась при комнатной температуре всю ночь, разбавлялась этилацетатом и экстрагировалась дважды водой и рассолом. После высушивания над MgSO₄ и удаления растворителя в вакууме продукт очищался хроматографией (30 г силикагеля; 10% EtOAc в петролейном эфире в качестве элюанта) для получения соединения V.

Способ B (X=S) Дисперсия гидрида натрия (55% в масле, 60 мг) промывалась петролейным эфиром (3 х 2 мл) в атмосфере аргона. Добавлялся раствор R-XH (0,82 мМ) в ДМФ (высушенный над молекулярными силами (2 мл), с последующим добавлением Соединения III (около 0,5 мМ) в ДМФ (1 мл). После 30 минут реакционная смесь обрабатывалась эфиром (60 мл). Остаток очищался хроматографией с получением соединения V.

Препарат 8 - Соединение 17 С использованием способа A блок R-XH образования боковой цепи представляет собой 3-этил-1,3-пентандиол (91 мг), и соединение III - соединение 12 (139 мг). Соединение 17: 0,05 (с, 12H), 0,54 (с, 3H). 0,85 (с, 9H), 0,89 (с, 9H), 0,80-0,90 (м, 9H), 1,51 (м, 4H), 1,71 (т, 2H), 0,75-2,10 (м, 16H), 2,30 (шир.д, 1H), 2,55 (дд, 1H), 2,86 (м, 1H), 3,22 (с, 1H), 3,44 (м, 2H), 3,62 (м, 2H), 4,21 (м, 1H), 4,52 (м, 1H), 4,93 (м, 1H), 4,97 (м, 1H), 5,81 (м, 1H), 6,44 (д, 1H).

4,4-Дифторо-3-этил-3-триметилсилилокси-5-гексен Гетерогенный раствор промытого кислотой цинкового порошка (4,74 г, 72,5 мМ), 3-пентанона (3,84 мл, 36,4 мМ), и сухой ТГФ (25 мл) охлаждались до 0^oC в бане воды со льдом и медленно добавлялась смесь 3-бром-3,3-дифторпропена (6,00 г, 38,2 мМ) в сухом ТГФ (10 мл). Реакционная смесь выстаивалась при комнатной температуре всю ночь. Затем к реакционной смеси добавлялась водная хлористоводородная кислота (5%, 30 мл) и она перемешивалась 5 минут. Избыток цинка удалялся фильтрацией и промывался эфиром. Органическая фаза промывалась насыщенным раствором бикарбоната натрия, водой (дважды), высушивалась над MgSO₄ и концентрировалась. Это масло растворялось в дихлорметане (50 мл), и добавлялись триэтиламин (7,05 мл), 50,8 мМ и 4-(N,N-диметиламино)-пиридин (250 мл). Реакционная смесь охлаждалась до 0^oC и по каплям добавлялся хлорид триметилсилила (6,42 мл, 50,8 мМ). Смесь перемешивалась при комнатной температуре всю ночь. Реакционная смесь выливалась в воду и дважды экстрагировалась эфиром. Соединенные органические слои несколько раз промывались водой, высушивались над MgSO₄, и выпаривались в вакууме. Остаток очищался хроматографией (50 г силикагеля; 2% EtOAc в петролейном эфире в качестве элюанта) с получением соединения в виде бесцветного масла, 0,13 (с, 9H), 0,89 (м, 6H), 1,5-1,8 (м, 4H), 5,43 (м, 1H), 5,63 (м, 1H), 5,92-8,13 (м, 1H).

2,2-Дифтор-3-этил-3-триметилсилилокси-пентанал 4,4-Дифторо-3-этил-3-триметилсилилокси-5-гексен (2,00 г, 8,88 мМ) растворялся в дихлорметане (80 мл), и раствор охлаждался до -78^oC. Газообразная смесь O₃ в O₂ пропускалась в раствор, пока он не стал голубым. Азот барботировался через раствор, чтобы удалить избыточный озон, добавлялся диметилсульфид (3 мл), и раствор медленно доводился до комнатной температуры. После разложения озонида добавлялся дихлорметан и органический слой промывался водой (дважды), высушивался над CaCl₂ и концентрировался при пониженном давлении. Флэш хроматография (50 г силикагеля; 5% EtOAc в петролейном эфире в качестве элюанта) дала искомое соединение в виде бледно-желтого масла, 0,14 (с, 9H), 0,91 (м, 6H), 1,54 (м, 2H), 1,85 (м, 2H), 9,55 (т, 1H).

2,2-Дифтор-3-этил-3-триметилсилилокси-пентан-1-ол Перемешанный охлажденный льдом раствор 2,2-дифтор-3-этил-3-триметилсилилокси-пентанала (1,45 г, 6,08 мМ) в ТГФ (5 мл) и этаноле (15 мл) обрабатывался борогидридом натрия (2,76 мг, 7,30 мМ). После 30 минут реакционная смесь разделялась между этилацетатом и водой и органический слой промывался рассолом, высушивался над MgSO₄ и концентрировался. После флэш хроматографии (50 г силикагеля; 10% Et OAc в петролейном эфире в качестве элюанта) было получено искомое соединение в виде бесцветного масла,