Биопрепарат-субтикол для профилактики и лечения инфекционных болезней
Реферат
Изобретение предназначено для профилактики и лечения инфекционных болезней. Биопрепарат-cубтикол содержит штаммы E.coli M-17, B.subtilis 3 и B.licheniformis 31 в эффективном количестве и стабилизатор. Биопрепарат-субтикол изготовлен на основе сочетания двух известных биопрепаратов колибактерина и биоспорина, проявляющих синергитический эффект. Биопрепарат-субтикол характеризуется высокой адгезивной активностью к различным отделам кишечника и более широким спектром антагонической активности в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов Shigella spp., Salmonella spp., Klebsiella spp. , Proteus spp., Staphylococcus aureus, candida spp., в сравнении с известными препаратами (колибактерин и биоспорин). 2 з.п.ф-лы, 2 табл.
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к биопрепаратам, нормализующим микрофлору и ингибирующим развитие патогенных микроорганизмов.
В настоящее время имеются биопрепараты, нормализующие микрофлору: лактобактерин, ацилакт, бифидумбактерин, колибактерин, бификол, биоспорин, споробактерин (Воробьев А.А. и др. Дисбактериозы - актуальная проблема медицины/ Вестник РАМН - 1997. -N 3.-С. 3-5). Наиболее близким является колибактерин, представляющий собой микробную массу Escherichia coli М-17 (Перетц Л.Г. Значение нормальной микрофлоры для организма человека/ М. - Медицина. -1965. 280 с.). Препарат характеризуется высокой степенью адгезивности к колоноцитам кишечника и выраженным антагонизмом в отношении Shigella spp., Salmonella spp., Klebsiella spp., Serratia spp.. Однако не характеризуется адгезивностью к энтероцитам кишечника в зоне пейеровых бляшек (Осипова И.Г. Некоторые аспекты механизма защитного действия колибактерина и споровых эубиотиков и новые методы их контроля/ Автореф. Канд. дисс. - 1997. - 25 с.). Известен также препарат биоспорин, содержащий в своей основе живые клетки Bacillus subtilis 3 и В. licheniformis 31 (Патент РФ N 1722502). Этот препарат меньше адгезирует к колоноцитам и больше к энтероцитам, а также высокой антагонистической активностью к Proteus spp., Staphilococcus aureus, Candida spp. и меньшей, чем у колибактерина активностью в отношении Salmonella spp., Klebsiella spp. (Осипова И.Г. Некоторые аспекты механизма защитного действия колибактерина и споровых эубиотиков и новые методы их контроля/ Автореф. Канд. дисс. - 1997. - 25 с.). Целью изобретения является создание комплексного биопрепарата, характеризующегося высокой адгезивной активностью к различным отделам кишечника и более широким спектром антагонистической активности в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов - Shigella spp., Salmonella spp., Klebsiella spp., Proteus spp., Staphylococcus aureus, Candida spp. в сравнении с известными препаратами. Оказалось, что сочетание колибактерина и биоспорина обеспечивает синергический эффект, т.е. в механизме защитного действия нового биопрепарата ведущим свойством является более высокая адгезивная и антагонистическая активности, обеспечивающие колонизацию кишечника и вытеснение патогенов. Сущность изобретения заключается в следующем: биопрепарат субтикол содержит штаммы Е. coli М-17, В. subtilis 3, В. licheniformis 31, взятые в эффективном количестве. В частности, препарат содержит указанные штаммы в равных соотношениях по количеству живых микробных клеток. Например, препарат содержит каждый из указанных штаммов в количестве 109 - 1011 живых микробных клеток в 1 дозе. Изобретение характеризуется следующими примерами: Пример 1. Выращивают культуру штамма Е. coli М-17 на питательной среде при 37oC. Затем готовят ее разведение в концентрации 109 живых микробных клеток в 1 мл. Аналогично выращивают культуры штаммов В. subtilis 3 и В. licheniformis 31 и также готовят суспензии этих культур с концентрацией живых микробных клеток 109 в 1 мл. Затем смешивают все три микробные культуры в равных соотношениях по объему. К полученной смеси добавляют стабилизатор, разливают в ампулы (флаконы) и лиофильно высушивают. Пример 2. Выращивают штаммы бактерий аналогично примеру 1, но получают суспензии с концентрацией 1010 живых микробных клеток в одной дозе. Затем получают лиофильно высушенный препарат аналогично описанному в примере 1. Пример 3. Выращивают штаммы бактерий аналогично примеру 1, но получают суспензии с концентрацией 1011 живых микробных клеток в одной дозе. Затем получают лиофильно высушенный препарат аналогично описанному в примере 1. Пример 4. Оценку полученных по примерам 1-3 серий препарата "Субтикол" проводят в сравнении с колибактерином и биоспорином по антагонистической активности к широкому спектру патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, а также по адгезивной активности к эпителиальным клеткам тонкого и толстого кишечника крыс. Результаты исследования приведены в табл.1 и 2. Как видно из представленных таблиц, препарат субтикол характеризуется более выраженной адгезивной активностью, чем отдельные препараты в различных отделах кишечника и более широким спектром антигонистической активности в отношении патогенных и условно патогенных микроорганизмов. Таким образом, установлено преимущество субтикола перед биоспорином и колибактерином. Экспериментально подтверждены такие количественные характеристики составляющих субтикол компонентов: Е.coli М-17 - 109 - 1011 живых микробных клеток в 1 дозе B.subtilis 3 - 109 - 1011 живых микробных клеток в 1 дозе В.licheniformis 31 - 109 - 1011 живых микробных клеток в 1 дозе Культуры находятся в равных соотношениях по объему.Формула изобретения
1. Биопрепарат для профилактики и лечения инфекционных болезней, содержащий штамм бактерий Escherichia coli M-17 и стабилизатор, отличающийся тем, что он дополнительно содержит штаммы бактерий Bacillus subtilis 3 и Bacollus licheniformis 31, взятые в эффективном количестве. 2. Биопрепарат по п.1, отличающийся тем, что содержит штаммы бактерий Escherichia coli M-17, Bacillus subtilis 3 и Bacillus licheniformis 31, взятые в равных соотношениях. 3. Биопрепарат по п.2, отличающийся тем, что содержит каждый из штаммов в титре 109 - 1011 живых микробных клеток в одной дозе.РИСУНКИ
Рисунок 1