Соединение, фармацевтическая композиция, способ лечения или предупреждения эндометриоза и промежуточное соединение

Соединение, фармацевтическая композиция, способ лечения или предупреждения эндометриоза и промежуточное соединение

Реферат

 

Изобретение относится к новым соединениям формулы I, где В и Е независимо выбраны из СН или N; R⁴ - водород, галоген, гидрокси; G представляет собой соединения формулы II (a, b, c) и их оптические и геометрические изомеры; и нетоксичные фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли. Описываются также фармацевтическая композиция и способ лечения с использованием соединения формулы I, обладающего эстроген антагонистической /агонистической активностью. 4 c. и 17 з.п.ф-лы.

Изобретение относится к эстроген агонистам и антагонистам и их фармацевтическому применению.

Ценность эстрогенов природного происхождения и синтетических композиций, демонстрирующих "эстрогенную" активность, состоит в их медицинском и терапевтическом применении. Традиционный перечень терапевтических применений эстрогенов как таковых или в комбинации с другими активными агентами включает: пероральная контрацепция; ослабление симптомов менопаузы; профилактика угрожающего или привычного выкидыша; ослабление дисменореи; ослабление дисфункционального маточного кровотечения; вспомогательное средство в овариальном развитии; лечение угрей; уменьшение избыточного роста волос на теле женин (гирсутизм); профилактика сердечно-сосудистого заболевания; лечение остеопороза; лечение рака предстательной железы и подавление постнатальной лактации [Goodman and Gilman, The Prarmacological Basis of Therapeutics (Seventh Edition) Macmillan Publishing Company, 1985, стр. 1421-1423]. Таким образом существует повышенный интерес к открытию вновь синтезированных композиций и к новым применениям ранее известных соединений, которые являются очевидно эстрогенными, т.е. способными имитировать действие эстрогена в эстроген чувствительной ткани.

С точки зрения фармаколога, заинтересованного в разработке новых лекарственных средств, полезных для лечения человека и специфических патологических состояний, наиболее важно обеспечить соединения с некоторой доказуемой эстроген-подобной функцией, но лишенные пролиферативных побочных эффектов. В подтверждение этого последнего заключения, остеопороз, заболевание в котором кость становится значительно более ломкой, существенно снижается при применении полностью активных эстрогенов; однако, ввиду признанного возрастающего риска карциномы матки у пациенток, постоянно подвергающихся обработке активными эстрогенами, клинически не целесообразно лечить остеопороз интактной женщины полностью активными эстрогенами по причине увеличения длительности менструации. Т.о. эстроген агонисты представляют основной интерес и центральный аспект проблемы.

Остеопороз является системным заболеванием скелета, характеризующимся низкой костной массой и разрушением костной ткани, с последующим увеличением ломкости костей и подверженностью переломам. В США этим заболеванием поражено более 25 млн. человек и каждый год оно является причиной более 1.3 млн. переломов, включая 500,000 переломов позвоночника, 250,000 переломов тазобедренного сустава и 240,000 переломов запястья ежегодно. Это обходится государству более чем в 10 миллиардов долларов. Наиболее серьезными являются переломы тазобедренного сустава с 5-20% смертности пациентов за год, а свыше 50% оставшихся в живых становятся нетрудоспосбными.

Пожилые люди наиболее подвержены остеопорозу, и поэтому можно ожидать, что проблема значительно возрастет с увеличением возраста населения. Предполагается трехкратное увеличение распространенности переломов в течение ближайших 60 лет, и изучение заболеваний дает возможность предположить, что в 2050 году во всем мире будет 4,5 млн. случаев перелома тазобедренного сустава. Женщины подвергаются большему риску заболевания, чем мужчины. Женщины испытывают резкое ускорение разрежения кости в течение пяти следующих за менопаузой лет. Другие увеличивающие риск факторы включают курение, злоупотребление алкоголем, сидячий образ жизни и недостаточное потребление кальция.

Эстроген выбирается в качестве лекарственного средства для предотвращения остеопороза или после менопаузального разрежения кости у женщин; это единственный курс лечения, который определенно снижает переломы. Однако эстроген стимулирует матку и связан с возрастанием риска внутриматочной карциномы. Хотя предполагается, что риск образования внутриматочной карциномы снижается одновременным применением прогестогена, все же при применении эстрогена существует опасность возможного увеличения случаев рака молочной железы.

Black и др. в EP 0605193А1 сообщают, что эстроген, в частности, при пероральном введении снижает уровни плазмы LDL и повышает уровни благотворных альфа-липопротеинов высокой плотности (HDL's). Однако продолжительная терапия с использованием эстрогена влечет за собой разнообразные нарушения, включая увеличение риска возникновения маточной карциномы и, возможно, рака молочной железы, заставляющие многих женщин избегать этого лечения. Недавно предложены терапевтические схемы, которые стараются уменьшить риск появления карцином, такие как введение комбинаций прогестогена и эстрогена, приводящие к тому, что пациентки испытывают нежелательное кровотечение. Кроме того, комбинация прогестерона с эстрогеном, по-видимому, притупляет воздействие эстрогена, понижающее холестерин сыворотки. Значительные нежелательные воздействия, связанные с терапией с использованием эстрогена подтверждают необходимость развития альтернативной терапии для (гипер)холестеринемии, оказывающей заданное воздействие на LDL сыворотки, но не вызывающей нежелательные эффекты. Существует потребность в улучшенных эстроген агонистах, оказывающих избирательные воздействия на различные ткани организма. Тамоксифен, 1-(4- диметиламиноэтоксифенил)-1,2-дифенил-бут-1-ен, является антиэстрогеном, оказывающим временное облегчающее воздействие на рак молочной железы, но, по сообщениям, проявляет эстрогенную активность в матке.

Gill-Sharma и др. J. Reproducition and Fertility (1993) 99, 395, раскрывают, что тамоксифен при 200 и 400 мг/кг/день понижает массу "testes" и вторичных половых органов у самцов крыс.

Недавно поступило сообщение (Osteoporosis Conference Scrip N 1812/13 Апрель 16/20, 1993, стр. 29), что ралоксифен, 6-гидрокси-2(4-гидроксифенил)-3-[4-(2-пиперидинэтокси)бензоил] бензо[b] тиофен, имитирует благоприятное воздействие эстрогена на кости и липиды, но в отличии от эстрогена обладает минимальным стимулирующим воздействием на матку (Breast Cancer Res. Treat. 10(1). 1997 p. 31-36, Jordan. V.C. и др.).

Neubauer и др. The Рrostate 23: 245 (1993) сообщают, что обработка ралоксифеном самцов крыс приводит к регрессии вентральной простаты.

Ралоксифен и родственные соединения описываются как антиандрогенные вещества, которые эффективны в лечении рака молочной железы и предстательной железы. См. Патент США 4,418,068 и Charles D. Jones, и др., J. Med. Chem. 1984, 27, 1057-1066.

Jones и др., в патенте США 4,133,814 описывают производные 2-фенил-3-ароил-бензотиофена и 2-фенил-3-ароилбензотиофен-1-окислов, которые полезны в качестве противозачатоных средств, а также в качестве средства, подавляющего рост опухолей молочной железы.

Lednicer и др. , J.Med. Chem., 12, 881 (1969) описали эстроген антагонисты структуры в которой R² представляет фенил или циклофенил и R³ обозначает H, или -CH₂CHOHCH₂OH.

Bencze и др. , J.Med. Chem., 10, 138 (1967) получили серии тетрагидронафталинов, предназначенных для достижения разделения эстрогенной, противозачаточной и гипохолестеринемической активностей.

Эти структуры имеют общую формулу (I) в которой R¹ обозначает H или OCH₃; R² обозначает H, OH, OCH₃, OPO(OC₂H₅)₂, OCH₂CH₂ N(C₂H₅)₂, OCH₂COOH или OCH(CH₃) COOH.

Патент США N 3,234,090 относится к соединениям, обладающим эстрогенным и противогрибковым свойствам, формулы в которой Rh обозначает 1,2-фенилен радикал, Ar представляет моноциклическую карбоциклическую арил группу, замещенную третичным низшим-амино алкил-окси, в которой третичная амино группа отделена от окси как минимум двумя атомами углерода, R обозначает водород, алифатический радикал, карбоксициклическй арил радикал, карбоксициклический арил-алифатический радикал, гетероциклический арил радикал или гетероциклический арил алифатический радикал, группа формулы -(C_nH_2n-2)-обозначает неразветвленный алкилен радикал, имеющий от трех до пяти углеродных атомов и несущей группы Ar и R, их солям, N-окислам, солям N-окислов или четвертичным аммониевым соединениям, а также к способу получения таких соединений.

Патент США N 3,277,106 относится к неполным сложным эфирам многоатомных спиртов с эстрогенным, гипохолестеринемическим и противозачаточным действиями, имеющим формулы в которой Rh обозначает 1,2-фенилен радикала, Ar представляет моноциклический арилрадикал, замещенный по крайней мере одной низшей амино аклилоксигруппой, в которой атом азота отделен от атома кислорода по крайней мере двумя атомами углерода, R обозначает арил радикал, радикал -(C_nH_2n-2)- обозначает низший алкилен, образующий с Ph шести- или семичленный цикл, два углеродных атома, входящие в состав кольца, несут группы Ar и R, их солям, N-окислам, солям N-окислов и четвертичным аммониевым соединениям.

Lednicer и др. , в J.Med. Chem 10 78(1967) и патенте США N 3,274,213 приводят соединения формулы в которой R₁ и R₂ выбраны из класса, состоящего из низшего алкила и низшего алкила, связанных вместе таким образом, что образуется 5-7 членный насыщенный гетероциклический радикал.

Краткое описание изобретения Изобретение предлагает соединения формулы в которой: A выбирают из CH₂ и NR; B, D и E независимо выбирают из CH и N; Y обозначает (a) фенил, необязательно замещенный 1-3 заместителями, независимо выбранными из R⁴; (b) нафтил, необязательно замещенный 1-3 заместителями, независимо выбранными из R⁴; (c) C₃-C₈ циклоалкил, необязательно замещенный 1-2 заместителями, независимо выбранными из R⁴; (d) C₃-C₈ циклоалкенил, необязательно замещенный 1-2 заместителями, независимо выбранными из R⁴; (e) пятичленный гетероцикл, содержащий до двух гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из -O-, -NR²- и -S(O)_n-, необязательно замещенный 1-3 заместителями, независимо выбранными из R⁴; (f) шестичленный гетероцикл содержащий до двух гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из -O-, -NR²- и -S(O)_n-, необязательно замещенный 1-3 заместителями, независимо выбранными из R⁴; или (g) бициклическая кольцевая система, содержащая пяти или шестичленный гетероцикл, сконденсированный с фенильным кольцом, где указанный гетероцикл содержит до двух гетероатомов, выбранных из группы, включающей -O-, -NR²- и -S(O)_n-, необязательно замещенный 1-3 заместителями, независимо выбранными из R⁴; Z¹ обозначает (a) -(CH₂)_p W (CH₂)_q-; (b) -O(CH₂)_p CR⁵R⁶-; (c) -O(CH₂)_pW(CH₂)q; (d) -Ochr²chr³-; или (e) -Schr²chr³-; G обозначает (a) -NR⁷R⁸; (b) в котором n равно 0,1 или 2; m равно 1,2 или 3; Z² обозначает -NH-, -O-, -S- или -CH₂-; необязательно сконденсированный по смежным углеродным атомам с одним или двумя фенильными циклами и необязательно независимо замещенный по углероду одним - тремя заместителями и необязательно независимо по азоту - химически пригодным заместителем, выбранным из R⁴; или (C) бициклический амин, содержащий от пяти до двенадцати атомов углерода, либо связанный мостиковой связью, либо сконденсированный и необязательно замещенный 1-3 заместителями, независимо выбранными из R⁴; или Z¹ и G в комбинации могут представлять W обозначает (a) -CH₂-- (b) -CH=CH-; (c) -O-; (d) -NR²-; (e) -S(O)_n-; (f) (g) -CR²(OH)-; (h) -CONR²-; (i) -NR²CO-; R представляет водород или C₁-C₆-алкил; R² и R³ независимо обозначают (a) водород; или (b) C₁-C₄-алкил; R⁴ представляет (a) водород; (b) галоген; (c) C₁-C₆-алкил; (d) C₁-C₄-алкокси, (e) C₁-C₄-ацилокси, (f) C₁-C₄-алкилтио, (g) C₁-C₄-алкисульфонил, (h) C₁-C₄-алкилсульфонил, (i) гидрокси-(C₁-C₄)-алкил, (j) арил-(C₁-C₄)-алкил, (k) -CO₂H, (l) -CN, (m) -CONHOR, (n) -SO₂NHR, (o) -NH₂, (p) C₁-C₄-алкиламино, (q) C₁-C₄-диалкиламино, (r) -NHSO₂R, (s) -NO₂, (t) -арил или (u) -OH.

R⁵ и R⁶ представляет независимо C₁-C₈-алкил или вместе образуют C₃-C₁₀-карбоцикл, R⁷ и R⁸ обозначают независимо (a) фенил, (b) C₃-C₁₀ карбоцикл, насыщенный или ненасыщенный, (c) C₃-C₁₀ гетероцикл, содержащий до двух гетероатомов, выбранных из -O-, -N- и -S-, (d) H, (e) C₁-C₆-алкил или (f) образуют 3-8-членный азот, содержащий цикл с R⁵ или R⁶, R⁷ и R⁸ в форме либо линейной, либо циклической могут необязательно содержать до трех заместителей, независимо выбранных из: C₁-C₆-алкил, галоген, алкокси, гидрокси и карбокси; цикл, образованный R⁷ и R⁸, может необязательно быть конденсированным с фенильным кольцом; e равно 0, 1 или 2; m равно 1, 2 или 3; n равно 0, 1 или 2; p равно 0, 1, 2 или 3; q равно 0, 1, 2, или 3; и их оптические и геометрические изомеры, а также их нетоксичные фармакологически приемлемые соли кислотного присоединения, N-окиси и четвертичные аммониевые соли.

Предпочтительными соединениями изобретения являются соединения формулы R⁴ представляет H, OH, F или Cl; B и E независимо выбирают из CH и N.

Наиболее предпочтительными соединениями являются: Цис-6-(4-фтор-фенил)-5-[4-(2-пиперидин-1-ил-этокси)-фенил] -5,6,7,8- тетрагидронафталин-2-ол; (-)-Цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-ил-этокси)-фенил] -5,6,7,8- тетрагидронафталин-2-ол; Цис-6-фенил-5-[4-(2-пирролидин-1-ил-этокси)-фенил] -5,6,7,8- тетрагидро-нафталин-2-ол; Цис-1-[6'-пирролидиноэтокси-3'-пиридил] -2-фенил-6-гидрокси-1,2, 3,4-тетрагидронафталин; 1-(4'-Пирролидиноэтоксифенил)-2-(4''-фторфенил)-6-гидрокси-1,2, 3,4-тетрагидроизохинолин; Цис-6-(4-гидроксифенил)-5-[4-(2-пиперидин-1-ил-этокси)-фенил] -5,6, 7,8-тетрагидронафталин-2-ол и 1-(4'-Пирролидинолэтоксифенил)-2-фенил-6-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин.

С другой стороны, данное изобретение предлагает способы лечения или профилактики болезненных состояний, включающих рак молочной железы, остеопороз, внутриматочное или сердечно-сосудистое заболевание и (гипер)холестеринемию у мужских и женских особей млекопитающих и доброкачественную гипертрофию предстательной железы и карциномы предстательной железы у мужских особей млекопитающих, которые включают введение указанному млекопитающему количества соединения формулы I и желательно предпочтительного соединения из соединений формулы I, указанных выше, которое эффективно в лечении или профилактике указанного состояния.

С другой стороны, данное изобретение предлагает способ лечения или предупреждения ожирения у млекопитающих, который включает введение указанному млекопитающему количества соединения формулы I и желательно предпочтительного соединения формулы I, указанного выше, эффективного в лечение или профилактике ожирения.

Дальнейший аспект данного изобретения составляет фармацевтическая композиция для лечения или предупреждения рака молочной железы, остеопороза, ожирения, сердечно-сосудистого заболевания, (гипер)холестеринемии, внутриматочного заболевания и заболевания предстательной железы, включающая соединение формулы I и фармацевтически приемлемый носитель.

Другой аспект данного изобретения составляют промежуточные соединения, полезные для получения соединений формулы I. Это 1-{2-[4-(6-метокси-3,4-дигидронафталин-1-ил)фенокси] этил} пирролидин и 1-{2-[4-(2-бром-6-метокси-3,4-дигидронафталин-1-ил)фенокси]этил}пирролидин.

Подробное описание изобретения Термины C₁-C₃ хлоралкил и C₁-C₃ фторалкил включают метил, этил, пропил и изопропил, замещенный до некоторой заданной степени атомами хлора или фтора, от одного атома до полного замещения. Термин C₅-C₇ циклоалкил включает циклопентил, циклогексил и циклогептил.

Галоид означает хлор, бром, иод и фтор. Арил (Ar) включает фенил и нафтил, необязательно замещенные одним-тремя заместителями, выбранными из R⁴, как определено выше. DTT означает дитиотреитол. DMSO означает диметилсульфоксид. EDTA - этилендиаминтетрауксусная кислота.

Эстроген агонисты определяются здесь как химические соединения, способные связываться по эстроген рецепторным участкам в ткани млекопитающих и имитирующие действия эстрогена в одной или более тканях.

Эстроген антагонисты определяются здесь как химические соединения, способные связываться по эстроген рецепторным участкам в ткани млекопитающих и блокирующие действия эстрогена в одной или более тканях.

Каждому специалисту понятно, что некоторые перечисленные в данном изобретении соединения будут химически несовместимы одно с другим или с гетероатомами в соединениях, и следует избегать этих несовместимостей при выборе соединений данного изобретения. Аналогично, некоторые функциональные группы (в ходе синтезов) могут нуждаться в защитных группах, известных каждому специалисту-химику.

Каждому специалисту-химику понятно, что некоторые соединения данного изобретения содержат атомы, которые могут давать отдельные оптические и геометрические конфигурации. Все такие изомеры включены в данное изобретение; предпочтительны левовращающие изомеры в цис конфигурации. Аналогично, химику очевидно, что из некоторых соединений данного изобретения могут быть получены разнообразные фармакологически приемлемые сложные эфиры и соли. Все такие эфиры и соли включены в данное изобретение.

Используемое в данном описании понятие заболевания простаты означает доброкачественную гиперплазию простаты или рак предстательной железы.

Лекарственные средства для лечения заболеваний простаты, рака молочной железы, ожирения, сердечно-сосудистого заболевания, (гипер) холестеринемии и остеопороза в данном изобретении включают в качестве активного ингредиента соединение формулы I или его соль, или сложный эфир. Фармацевтически приемлемыми солями соединений формулы I являются обычно используемые нетоксичные соли, такие как соли с органическими кислотами (например, муравьиная, уксусная, трифторуксусная, лимонная, малеиновая, щавелевая кислоты, метансульфокислота, бензолсульфокислота и толуолсульфокислота), неорганическими кислотами (например, соляная, бромистоводородная, серная или фосфорная кислоты) и аминокислотами (например, аспарагиновая или глутаминовая кислоты). Такие соли могут быть получены известными каждому специалисту-химику способами.

Лекарственные средства для лечения заболеваний простаты, рака молочной железы, ожирения, сердечно-сосудистого заболевания, (гипер) холестеринемии и остеопороза данного изобретения могут вводиться животным, включая человека, перорально или парентерально в обычно используемых для препаратов формах, таких как капсулы, микрокапсулы, таблетки, гранулы, порошки, лепешки, пилюли, суппозитории, инъекции, суспензии и сиропы.

Лекарственные средства данного изобретения для лечения заболеваний простаты, рака молочной железы, ожирения, сердечно-сосудистого заболевания, (гипер)холестеринемии и остеопороза могут быть получены обычными способами с применением обычных органических или неорганических добавок, таких как наполнитель (например, сахароза, крахмал, маннитол, сорбитол, лактоза, глюкоза, целлюлоза, тальк, фосфат кальция или карбонат кальция), связывающие вещества (например, целлюлоза, метилцеллюлоза, гидроксиметилцеллюлоза, полипропилпирролидин, поливинилпирролидон, желатин, гуммиарабик, полиэтиленгликоль, сахароза или крахмал), разрыхлитель (например, крахмал, карбоксиметилцеллюлоза, гидроксипропилкрахмал, мало замещенная гидроксипропилцеллюлоза, бикарбонат натрия, фосфат кальция или цитрат кальция), смазывающее вещество (например, стеарат магния, маловязкая безводная кремневая кислота, тальк или лаурилсульфат натрия), корригент (например, лимонная кислота, ментол, гликокол или апельсиновый порошок), консервант (например, бензоат натрия, бисульфит натрия, метилпарабен или пропилпарабен), стабилизатор (например, лимонная кислота, цитрат натрия или уксусная кислота), суспендирующее вещество (например, метилцеллюлоза, поливинилпирролидон или стеарат алюминия), диспергирующее вещество (например, гидроксипропилметилцеллюлоза), растворитель (например, вода) и восковая основа (например, масло какао, белый вазелин или полиэтиленгликоль). Количество активного ингредиента в медицинской композиции должно быть на таком уровне, чтобы оказывать желаемый терапевтический эффект; например, приблизительно от 0,1 до 50 мг в стандартной дозе как для перорального, так и для парентерального введения.

Активный ингредиент обычно может вводиться пациенту от одного до четырех раз в день со стандартной дозой от 0,1 до 50 мг, но данная доза может быть соответственно изменена в зависимости от возраста, веса тела и медицинского состояния пациента и типа введения. Предпочтительная доза для человека составляет от 0,25 до 25 мг. Предпочтительно введение одной дозы в день.

Соединения изобретения легко получить по приведенным ниже реакционным схемам.

Определенные соединения формулы I можно получить из ненасыщенного промежуточного соединения путем гидрирования с благородным металлом в качестве катализатора в реакционно инертном растворителе. Давление и температура не являются решающими и гидрирование обычно завершается за несколько часов при комнатной температуре и при давлении водорода 20-80 фунт/кв.дюйм (1,4-26,7 кг/см²).

Продукт гидрирования выделяют, очищают при желании и простую эфирную группу расщепляют с кислотным катализатором в реакционно инертном растворителе при температуре между 0 и 100^oC в зависимости от используемого кислотного катализатора. Найдено, что в этой реакции эффективны: бромистый водород при повышенных температурах, трибромид бора и хлористый алюминий при температурах от 0^oC до температуры окружающей среды.

Продукт формулы I выделяют и очищают стандартными способами.

Промежуточные продукты формулы II, в которых A представляет CH₂, и B, D и E обозначают CH, описаны в патенте США 3,274,213; J.Med. Chem. 10, 18 (1967); J. Med. Chem. 10, 138 (1967); и J. Med. Chem. 12, 881(1969), каждый из которых представлен здесь в качестве ссылки. Они могут также быть получены по описанным ниже методикам.

Получение соединений формулы I, в которых e=1, A=CH₂, Z¹=OCH₂CH₂, G= циклоалкиламин, B= CH, показано в схеме 1. Соединения 1-2, в которых D и E представляют CH, получают алкилированием 4-бромфенола с соответствующим N-хлорэтиламином, используя карбонат кальция в качестве основания в полярном апротонном растворителе, таком как диметилформамид, при повышенных температурах. Предпочтительна температура в 100^oC. Соединение 1-2, в которых D или E или оба обозначают N, синтезируют, используя реакцию нуклеофильного замещения, выполненного на дибромидах (I-1) с использованием гидроксиэтилциклоалкиламинов в условиях фазового переноса, что дает бромамины (I-2). Synthesis, 77, 573(1980). Последующий металлогалоидного обмена с использованием н-бутиллития или металлического магния бромаминов (I-2), дающий соответствующие литиевые или магниевые реагенты, позволяющие проводить реакцию при низких температурах, предпочтительно в присутствии цезий хлорида (в отсутствии цезий хлорида реакция также протекает) с 6-метокси-1-тетралоном с получением карбинолов (I-3) или стиролов (I-4) после обработки кислотой. Обработка карбинолов (I-3) или стиролов (I-4) бромирующим агентом, таким как пиридиний бромид, дает бромстиролы (I-5). Арил или гетероарил хлориды цинка или арил или гетероарил борные кислоты реагируют с бромидами (I-5) в присутствии металлического палладия в качестве катализатора, такого как тетракис трифенил фосфин палладий (0), с образованием диарил стиролов (I-6). [Pure & Applied Chem. 63, 419, (1991) и Bull. Chem. Soc. Jpn. 61, 3008-3010, (1988)] . Для получения предпочтительных соединений в этой реакции используют замещенные фенил хлориды цинка или замещенные фенилборных кислот. Арил хлориды цинка получают гашением соответствующего литиевого реагента безводным хлористым цинком. Арил борные кислоты, которые не выпускаются промышленностью, получают гашением соответствующего арил литиевого реагента триалкил боратом, предпочтительно триметил или триизопропил боратом, с последующей обработкой водной кислотой. Acta Chemica Sсan. 47, 221-230 (1993). Литиевые реагенты, не выпускаемые промышленностью, получают путем металло-галоидного обмена соответствующего бромида или галогенида с н-бутил или т-бутиллитием. Или же иначе, литиевый реагент получают путем облегченной гетероатомной литизации, как описано в Organic Reactions, Volumer 27, Chapter I. Каталитическое гидрирование (I-6) в присутствии гидроокиси палладия на активированном угле, например, дает соответствующие дигидрометокси промежуточные продукты, которые впоследствии диметилируют, используя трибромид бора при 0^oC в метилен хлориде или 48% бромистый водород в уксусной кислоте при 80-100^oC, что дает целевые структуры (I-7). Эти соединения рацемические и могут быть разделены на энантиомеры жидкостной хроматографией высокого давления с применением колонки с хиральной неподвижной фазой, такой как колонки Chiracel OD.

Иначе оптическое разделение может быть выполнено перекристаллизацией диастереомеромерных солей, образованных с оптически чистыми кислотами, такими как 1,1'-динафтил-2,2'-диил кислый фосфат (см. пример 8).

Цис соединения (I-7) могут быть изомеризованы в транс соединения обработкой основаниями (см. пример 2).

Когда D и/или E является азотом, промежуточные соединения (формула II) и соединения формулы I могут быть получены из соответствующих дигалоидпиридинов или пиримидинов, как показано в схеме 1 и как подробно описано для 6-фенил-5-[6-(2-пирролидин-1-ил-этокси)пиридин-3-ил] -5,6,7,8- тетрагидронафталин-2-ола в примере 6.

Простой метиловый эфир соединения формулы I, в котором e=1, A=CH₂, Z¹= OCH₂CH₂, G= пирролидин, D, E, B=CH, Y=Ph, удобно получать на первой стадии гидрирования нафоксидина (Upjohn & Co. , 700 Portage Road, Kalamazoo, M1 49001) в реакционно инертном растворителе в присутствии благородного металла в качестве катализатора. Давление и температура не имеют решающего значения; реакция обычно проходит в этаноле при комнатной температуре приблизительно за 20 часов при 50 фунт/кв.дюйм (10,5 кг/см²).

Второй стадией является расщепление метокси группы, которое выполняется обычно при комнатной температуре с кислотным катализатором, таким как трибромид бора в реакционно инертном растворителе или при 80-100^oC с бромистым водородом в уксусной кислоте. Продукт затем выделяют обычными способами и превращают при желании в кислую соль.

Соединения формулы I, в которых B обозначает азот, получают способами, показанными в схеме 2 и примерах 3-5 и 10-12.

Синтез соединений формулы I, в которых B=N, приведен в схеме 2. Арил хлорангидриды (2-1) при обработке первичными аминами дают арил вторичные амиды (2-2), которые восстанавливают алюмогидридом лития в эфирных растворителях, получая вторичные амины (2-3). Последующее ацилирование (2-3) ароил хлорангидридами приводит к третичным амидам (2-4), которые циклизуют в горячем оксихлориде фосфора, получая соли дигидро изохинолина (2-5). Восстановление боргидридом натрия до алкокситетрагидроизохинолинов и последующее деметилирование в метиленхлориде дают требуемые структуры.

Синтез соединений формулы I, в которых B=N, также описан ниже на схеме 3. Вторичные амины (3-1) при ацилировании бензилоксиароилхлоридами (3-2) дают третичные амиды (3-3), которые при циклизации с горячим оксихлоридом фосфора образуют соли дигидро изохинолина (3-4). Восстановление боргидридом натрия (3-4) с последующим дебензилированием с водной соляной кислотой дают изохинолины (3-5), которые алкилируют соответствующими функциональными хлоридами и деметилируют трибромидом бора, получая заданные целевые структуры.

Соединения данного изобретения являются ценными эстроген агонистами и фармацевтическими средствами или промежуточными продуктами для них. Те соединения, которые являются эстроген агонистами, полезны для пероральной контрацепции; для ослабления симптома менопаузы; предупреждения угрожающего или привычного выкидыша; ослабления дисменореи; ослабления дисфункционального маточного кровотечения; как вспомогательное средство в овариальном развитии; при лечении угрей; для уменьшения избыточного роста волос на теле женщин (гирсутизм); для профилактики и лечения сердечно-сосудистого заболевания; для профилактики и лечения атеросклероза; профилактики и лечения остеопороза; лечения доброкачественной простатической гиперплазии и карциномы предстательной железы; ожирения и подавления пост-натальной лактации. Эти соединения оказывают также благотворное воздействие на уровни липидов плазмы и сами по себе полезны в лечении и профилактике (гипер)-холестеринемии.

Хотя соединения данного изобретения являются эстроген агонистами в кости, они служат также антиэстрогенами в ткани молочной железы и как таковые полезны в лечении и профилактике рака молочной железы.

Предупреждение и борьба с эндометриозом.

Протокол хирургически индуцируемого эндометриоза идентичен протоколу, описанному Jones, Acta Endoerinol (Copenh) 106:282-8. Используют взрослые особи Charles River Spraque-Dawley CD самок крыс (200-240 г). Косой вентральный надрез делают через кожу и мускулатуру стенки тела. Вырезают сегмент правой трубы матки, мышечную оболочку матки отделяют от эндометрия и сегмент режут продольно. 5х5 мм разрез эндометрия с эпителиальной выстилкой, соединенной со стенкой тела, сшивают по его четырем углам с мышцей, используя полиэфирную нить (Ethiflex, 7-0). Критерием жизнеспособного трансплантата является аккумуляция жидкости, аналогичная аккумуляциии, которая происходит в результате стимуляции эстрогеном.

Спустя три недели после трансплантации эндометриальной ткани (+3 недели) животными производят лапаротомию, объем эксплантата (длина х ширина х высота) в мм измеряют циркулем и начинают обработку лекарственными препаратами. Животным впрыскивают подкожно в течение 3 недель от 10 до 1000 мг/кг/день соединения формулы I. В качестве контрольных животных используют с эндометриальным трансплантатом, вводя подкожно в течение 3 недель кукурузное масло по 0,1 мл/день. По окончании 3 недельного периода обработки (+6 недель), животным производят лапоротомию и определяют объем эксплантата. Спустя 8 недель после прекращения обработки лекарственными средствами (+14 недель) животных забивают; эксплантат измеряют вновь. Статистический анализ объема эксплантата производят путем анализа отклонений.

Воздействие на вес простаты Самцам Sprague-Dawley крыс, в возрасте трех месяцев, подкожно инъекцитируют одним из: растворитель (10% этанол в воде), эстрадиол (30 мг/кг), тестостерон (1 мг/кг) или соединение формулы I - ежедневно в течение 14 дней (n= 6/группа). Спустя 14 дней животных забивают, простату удаляют и определяют вес влажной простаты. Определяют средний вес и статическую значимость (p < 0,05) по сравнению с группой, обработанной растворителем, используя t-тест Student's.

Соединения формулы I существенно (P < 0,05) снижают вес простаты по сравнению с растворителем. Тестостерон не оказывает никакого действия, хотя экстрадион при концентрации 30 мкг/кг также значительно уменьшает вес простаты.

Минеральная плотность костей Минеральная плотность кости, степень минерального содержания кости, отвечают за более чем 80% прочности кости. Снижение минеральной плотности кости с возрастом и/или заболеванием делает ее более склонной к переломам. Степень минерального содержания кости точно измеряют у людей и животных путем абсорбциометрии с помощью двойного рентгеновского луча (DEXA), так что могут быть определены такие малые как 1% изменения. Использован утилизированный DEXA для оценки изменений в минеральной плотности костей, обусловленной дефицитом эстрогена, вызванным овариэктомией (хирургическое удаление яичников) и обработкой растворителем, эстрадиолом (E2), кеоксифеном (ралоксифеном) или другими агонистами эстрогена. Целью этих изучений является оценка способности соединений данного изобретения предупреждать вызываемое дефицитом эстрогена разрежение кости, измеренное посредством DEXA.

Самок (S-D) крыс в возрасте 4-6 месяцев подвергают овариэктомии или симулированному хирургическому вмешательству и дают оправиться от наркоза. Крыс обрабатывают путем подкожной инъекции или перорально через зонд различными дозами (10-1000 мг/кг/день, например) соединения формулы I ежедневно в течение 28 дней. Все соединения взвешивают и растворяют в 10% этаноле в стерильном физиологическом растворе. Спустя 28 дней крыс забивают и бедра удаляют и очищают от мяса. Бедренную кость помещают на Hologic QDR1000W (Hologic, Inc. Waltham, MA) и определяют минеральную плотность кости в периферической части бедренной кости в месте, расположенном на 1-2 см от конца бедренной кости, используя software высокого разрешения, поставляемый Hologic. Минеральную плотность кости определяют путем деления костного минерального содержания на площадь дистальной бедренной кости. Каждая группа состоит по крайней мере из 6 животных. Получают среднюю минеральную плотность кости для каждого животного и определяют t-тестом статистические разности (p<0,05) для группы, обработанной растворителем, овариэктомией и симулированным хирургическим вмешательством.

In vitro (в лабораторном сосуде) испытание эстроген-рецепторного связывания Для определения способности соединений настоящего изобретения к эстроген-рецепторному связыванию используют in vitro испытание эстроген-рецепторного связывания, которое определяет способность соединений настоящего изобретения к замещению [3H]-эстрадиола из человеческого эстроген-рецептора, полученного рекомбинантными способами в дрожжах. В данном испытании использованы следующие вещества: (I) буферный раствор для испытания, TD - 0.3 (содержащий 10 нМ Трис, pH 7,6, 0,3 М хлористого калия и 5 мМ DTT, pH 7,6); (2) используют [3H]-эстрадиол радиолиганд, полученный от New England Nuclear; (3) в качестве холодного лиганда использован эстрадиол, полученный от Sigma; (4) рекомбинантный человеческий эстроген рецептор, hER.

Раствор подлежащего испытанию соединения получают в TD-0,3 с 4% DMCO и 16% этанола. Насыщенный тритием эстрадиол растворяют в TD-0.3 так, чтобы конечная концентрация в опыте составляла 5 нМ. hER также растворяют в TD-0.3 так, чтобы 4-10 мг общего белка было в каждой ячейке для испытания. На используемых пластинах для микротитрования в каждый инкубат добавляют 50 (мкл) холодного эстрадиола (неспецифическое связывание) или раствор соединения, 20 (мкл) насыщенного тритием эстрадиола и 30 (мкл) растворов hER. Каждая пластина содержит тройное повторение общего связывания и различных концентраций соединения. Пластины инкубируют в течение ночи при 4^oC. Затем реакцию связывания прерывают добавлением и перемешиванием со 100 мл 3% гидроксилапатита в 10 мМ трис, pH 7,6 и инкубируют 15 минут при 4^oC. Смеси центрифугируют и осадок промывают четыре раза 1% Triton x 100 в 10 мМ Трис, pH 7,6. Осадки гидроксилапатита суспендируют в Ecoscint A и определяют радиоактивность, используя сцинциграфию. Определяют среднее значение из трех полученных точек (подсчет в минуту, cpm's). Специфическое связывание рассчитывают путем вычитания неспецифических cpm's (определенных как подсчет остатка после разделения реакционной смеси, содержащей рекомбинантный рецептор радиолиганд и избыток немеченного лиганда) из cpm's общего связывания (определенных как подсчет остатка после разделения реакционной смеси, содержащей только рекомбинантный рецептор, радиолиганд). Активность соединения оценивают, определяя значени