Фторотаксолы, промежуточные соединения, фармацевтическая композиция и способ лечения
Реферат
Описываются новые фторотаксолы формулы (I), где R1 представляет собой - CORz, в котором Rz является RO- или R, Rg представляет собой C2-6-алкенил или радикал формулы W-Rx, в котором W является связью, а Rx - фурилом, тиенилом или фенилом; R2 представляет собой -ОСО, Н, ОН, -OR, -OSO2R1-ОСОО(СН2)tR или -ОСООR где t = 1-6, целое число, R независимо представляет собой C1-6 -алкил или фенил. Описываются промежуточные соединения, фармацевтическая композиция, обладающая противоопухолевой активностью на основе соединения формулы (I), а также способ лечения опухолей у млекопитающих с использованием вышеуказанных соединений. 4 с. и 9 з.п.ф-лы, 7 ил., 2 табл.
Настоящая заявка является частичным продолжением заявки США рег. N 08/006423, поданной 19 января 1993 г., которая полностью вводится в настоящее описание посредством ссылки и которая, в свою очередь, является продолжением заявки рег. N 07/907261, поданной 1 июля 1992 г. Настоящая заявка является также частичным продолжением заявок США рег. N 07/996455, поданной 24 декабря 1992 г., и N 08/029819, поданной 11 марта 1993 г., обе из которых полностью вводятся в настоящее описание посредством ссылки. Настоящее изобретение относится к соединениям, обладающим противоопухолевой активностью. Кроме того, настоящее изобретение относится к промежуточным соединениям, используемым для получения соединений, обладающих противоопухолевой активностью. Впервые, таксол был выделен из коры ствола тихоокеанского тиса, Taxus brevifolianutt (Tаxaceae), и его структура может быть представлена следующим образом (с указанием 2-, 7-, 10- и 13-положений): Клинические испытания таксола, финансируемые Национальным онкологическим институтом (NCI), дали многообещающие результаты при лечении запущенных случаев рака яичника, молочной железы и других видов рака. Совсем недавно таксол был апробирован для лечения метастатической карциномы яичника. По сравнению с другими антимитотическими препаратами таксол является уникальным средством, поскольку он стимулирует сборку стабильных микротрубочек из тубулина даже при прочих неблагоприятных условиях. Связываясь с микротрубочками, таксол стабилизирует их от деполимеризации, нарушая тем самым равновесие "тубулин-микротрубочка" и способствуя ингибированию митоза. Механизм действия, токсикология, клиническая эффективность и другие характеристики таксола рассматриваются в ряде статей, например в статье Rowinsky и др. Taxol: A novel Investigational Antimicrotubule Agent, J. Natl. Cancer Inst. 82, стр. 1247 (1990). Поскольку было установлено, что это лекарственное средство обладает значительной эффективностью при лечении раковых заболеваний, многие лаборатории приступили к разработке программ по исследованию аналогов таксола в целях поиска наилучших фармакологических профилей. При осуществлении одной из таких программ был получен тасотер формулы который, как указывалось, обладал такой же, как таксол, эффективностью при стимулировании сборки микротрубочек, а его цитотоксичность приблизительно в два раза выше цитотоксичности таксола. См., например, Biologically Active Taxol Analogues with Deleted A-Ring Side Chain Substitutents and Wariable C-2' Configuration, J. Med. Chem., 34, стр. 1176 (1991); Relationshipso between the Structure of Taxol Analogues and Their Antimitotic Activity, J. Med. Chem., 34, стр. 992 (1991). За последние годы было установлено, что введение фтора в фармакологически активные соединения приводит к значительным и неожиданным результатам. Для полного ознакомления с успехами в области получения биологически активных фторорганических соединений, см., Advances in the Preparation of Biologically Active Organofluorine Compounds, Tetrahedror, 43, N 14, стр. 3123 (1987). Поэтому целью настоящего изобретения является получение фторированных таксолов и их производных. Настоящее изобретение относится к фторированному производному таксола формулы I где R1 представляет собой -CORz, в котором Rz является RO- или R; Rg представляет собой C1-6 - алкил, C2-6 - алкенил, C2-6 - алкинил, C3-6 - циклоалкил, или радикал формулы - W-Rx, в котором W является связью, C2-6 - алкендиилом, или -(CH2)t-, где t = 1-6, а Rx - нафтилом, фурилом, тиенилом или фенилом и, кроме того, Rx может быть необязательно замещенным одной, двумя или тремя одинаковыми или различными C1-6 - алкильной группой, C1-6 - алкоксигруппой, галогеном, или -CF3 - группой; R2 представляет собой -OCOR, H, PH, -OR, -OSO2R, -OCONRoR, -OCONHR, -OCOO(CH2)tR или -OCOOR, где R и Ro независимо - C1-6 - алкил, C2-6 - алкенил, C3-6 - циклоалкил, C2-6 - алкинил или фенил, необязательно замещенный 1-3 одинаковыми или различными C1-6 - алкильной группой, C1-6 - алкоксигруппой, галогеном, или -CF3 - группой. Кроме того, настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям и промежуточным соединениям, используемым для получения фторированных таксолов формулы I. Настоящее изобретение также включает в себя способ лечения опухолевых заболеваний у млекопитающих, который предусматривает использование соединений формулы I. Настоящее изобретение относится к фторированному производному таксола формулы I где R1 представляет собой -CORz, в котором Rz - RO- или R; Rg - C1-6 - алкил, C2-6 - алкенил, C2-6 - алкинил, C3-6 - циклоалкил, или радикал формулы -W-Rx, в котором W является связью, C2-6 - алкенидиилом или -(CH2)t-, где t = 1-6, а Rx - нафтилом, фурилом, тиенилом или фенилом и, кроме того, Rx может быть, но необязательно, замещенным 1-3 одинаковыми или различными C1-6 - алкильной, C1-6 - алкокси-, галогеном или -CF3 - группами; R2 представляет собой -OCOR, H, OH, -OR, -OSO2R, -OCONRoR, -OCONHR, -OCOO(CH2)tR или -OCOOR, где R и Ro независимо - C1-6 - алкил, C2-6 - алкенил, C3-6 - циклоалкил, C2-6 - алкинил или фенил, необязательно замещенный 1-3 одинаковыми или различными C1-6 - алкильной, C1-6 - алкокси, галогеном или -CF3 - группами. Синтез фторированного производного формулы I может быть осуществлен различными способами. Приведенные ниже описания синтеза и конкретные примеры его осуществления ставят перед собой лишь иллюстративные цели и не должны рассматриваться как некое ограничение настоящего изобретения какими-либо отдельными способами. В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения соединение формулы I может быть получено способом, проиллюстрированным на схеме 1. Как показано на схеме 1, 2'-гидроксизащищенный таксол формулы II подвергают реакции с трифторидом диэтиламиносеры (DAST), в результате чего получают смесь, состоящую из производного 7 -- фторотаксола формулы III и производного 8-десметил-7,8-циклопропатаксола (или просто 7,8-циклопропатаксол) формулы XXV (стадия a). Реакция стадии (a) может быть проведена в ряде растворителей, например, таких, как тетрагидрофуран, метиленхлорид, диэтиловый эфир, толуол, 1,1-диметоксиэтан (ДМЭ) и т.п., или в любой их комбинации/смеси. При этом следует отметить, что в том случае, если стадию (a) проводят в смеси ТГФ и диэтилового эфира или в смеси от около 10:1 до 8:1 толуола и тетрагидрофурана, то может быть получено более высокое отношение 7 -- фторотаксола III к 7,8-циклопропатаксола XXV. В используемом способе R3 обычно является гидроксизащитной группой. Соединение формулы III может быть отделено от соединения XXV, либо эта смесь может быть использована в стадии (b) без разделения, а продукт I может быть отделен от соединения XXVI после стадии (b). Разделение соединений может быть осуществлено любым стандартным способом очистки, обычно используемым в таких случаях специалистами. Примерами способов разделения могут служить хроматография, фракционированная кристаллизация и т. п. Особенно предпочтительным способом разделения является ЖХВД (жидкостная хроматография высокого давления). Используемые в настоящем изобретении стандартные гидроксизащитные группы (или просто гидроксизащитные группы) представляют собой такие части молекулы, которые могут быть использованы для блокирования или защиты гидроксильных функциональных групп и которые являются хорошо известными каждому специалисту. Предпочтительно использовать такие группы, которые могут быть удалены способами, не оказывающими заметного неблагоприятного воздействия на оставшуюся часть молекулы. Примерами таких легко удаляемых гидроксизащитных групп являются хлороацетил, метоксиметил, 2,2,2-трихлороэтилоксиметил, 2,2,2-трихлороэтилоксикарбонил (или просто трихлороэтилоксикарбонил), тетрагидропиранил, тетрагидрофуранил, дифенилметил, триC1-6-алкилсилил, трифенилсилил и т.п. Другие подходящие защитные группы, которые могут быть использованы в данном случае, описаны в главе 2 "Protecting Groups in Organic Synthesis", Secondi Ed., Theodora W. Greene and Peter G.M. Wuts (1991, John Wiley & Sons). Для соединений формулы II особенно предпочтительный защитной группой является бензилоксикарбонил, которую обычно удаляют путем каталитического гидрирования, или триC1-6алкилсилил, которая может быть удалена с помощью иона фторида. В другом варианте осуществления настоящего изобретения соединение формулы I2 может быть получено способом, проиллюстрированным в схеме II. В этой схеме, из соединения формулы I1 удаляют (C)-13-боковую цепь путем реакции восстановления с использованием восстановительного агента, такого как борогидрид тетрабутиламмония, в результате чего получают 7 -- фторо-баккатин III формулы IV (стадия (a)). Затем азетидинон XV подвергают реакции с соединением формулы IV (стадия (b)). Основной класс азетидинонов формулы XV является хорошо известным. Синтез этих соединений или их предшественников описан в заявке на европатент (Holton) 0400971 A2, опубликованной 5 дек. 1990, в заявках на европатент (Holton) 0534709 A1; 0534708 A1 и 0534707 A1, которые все опубликованы 31 марта 1993; а также Ojima и др. в Tetrahedron, 48, N 34, стр. 6985-7012 (1992); Journal of Organic Chemistry, 56, стр., 1681-1683 (1991); и Tetrahedron letters, 33, N 39, стр. 5737-5740 (1992); Brieva и др. , в J. Org. Chem., 58, стр. 1068-1075, и Palomo и др., в Tetrahedron letters, 31, N 44, стр. 6429-6432 (1990); причем все девять указанных работ вводятся в настоящее описание посредством ссылки. Каждому специалисту ясно, что эти способы могут быть соответствующим образом адаптированы для получения других азетидинонов, которые могут быть представлены формулой XV, но которые конкретно не раскрываются ни в данном описании, ни в вышеуказанных девяти работах, ни в каких-либо других работах. В заявках на европатент 0400971 A2, 0534709 A1, 0534708 A1 и 0534707 A1 и в Tetrahedron, 48, N 34, стр. 6985-7012 (1992) также описываются способы, в которых азетидиноны формулы XV подвергают реакции с (C)13-гидроксигруппой производных баккатина III или его алкоксид металла, в результате чего получают аналоги таксола с различными (C)13-боковыми цепями. В стадии (b) схемы II, превращение гидроксигруппы на (C)13-углероде (помеченном звездочкой) в алкоксид металла предпочтительно осуществлять перед реакцией сочетания. Катион металла указанного алкоксида металла предпочтительно выбирать из металлов группы Ia или IIa. Нужный алкоксид металла может быть получен с помощью реакции соединения формулы IV с сильным металлическим основанием, таким как диизопропиламид лития, C1-6-алкиллитий, бис(триметилсили)амида лития, фениллития, гидрид лития, гидрид натрия, гидрид калия, гидрид лития или т.п. Например, если необходимо получить алкоксид лития, то соединение формулы IV может быть подвергнуто реакции с н-бутиллитием в инертном растворителе, таком как тетрагидрофуран. После удаления R3 из соединения формулы V (в стадии (c)) получают соединение формулы I3. Если R3 является триC1-6алкилсилильной группой, такой как триэтилсилильная группа, то она может быть удалена с использованием иона фторида или минеральной кислоты в спирте или ацетонитриле. Удаление с использованием фторидного иона осуществляют в инертном растворителе, таком как тетрагидрофуран, метиленхлорид, 1,4-диоксан, ДМФ, хлороформ или в аналогичном растворителе; при этом предпочтительно, чтобы реакционная среда была забуферена слабой кислотой, например уксусной кислотой. Присутствие 7,8-циклопропа-производного, если оно имеет место, не оказывает существенного влияния на какую-либо стадию схемы II, при условии, если будет использоваться соответствующее количество реагентов с учетом их потребления, обусловленного присутствием указанного производного. Как правило, бывает предпочтительным отделить 7,8-циклопропа-производное после стадии (a), но перед стадией (b). В схеме III проиллюстрирован способ получения соединений формулы I5, где R является -OCOR, -OSO2R, -OCONRoR, -OCONHR, -OCOO(CH2)tR или -OCOOR. Исходные соединения формулы XXX хорошо описаны в литературе, или они могут быть получены способами, хорошо известными специалистам. Например, как показано в схеме IIIa, соединение формулы XXXVIII может быть подвергнуто реакции с RC(= O)L, R(CH2)tOC(=O)I, POC(=O)I, LO2R, LCONRoR, LCONHR, O=C=N-R или с их ангидридным производным, где I является обычной уходящей группой, такой как хлоро-, бромо-, мезил, трифторметансульфонил или тозил; и в результате этой реакции образуется соединение формулы XXXIX. Обычно в стадии (a) необходимо использовать основание в целях предварительного удаления протона из C-10-гидроксильной группы. Особенно предпочтительным основанием для стадии (a) является сильное основание, такое как C1-6-алкиллитий, бис(триметилсилил)амид лития, или аналогичное основание, используемое в количестве около 1,1 эквивалента. Депротонирование с помощью основания предпочтительно проводить в аротонном растворителе, таком как тетрагидрофуран, и при низких температурах, обычно в пределах от -40o до 0oC. В стадии (b) соединение формулы XXXIX может быть подвергнуто реакции с азетидиноном формулы XV, в основном таким же образом, как и в стадии (b) схемы II, с получением соединения формулы XI, из которого могут быть удалены группы R3, в результате чего образуется соединение формулы XXX. Соединение формулы I3, которое принадлежит к ряду соединений формулы I, может быть получено способом, проиллюстрированным на схеме IV. В стадии (a), при обработке соединения VI от 1 до 2 эквивалентами стандартного гидроксизащитного реагента, предпочтительно трихлороэтилхлороформата, может быть получена смесь, одновременно включающая в себя 2'- и 7-гидроксизащитное (соединение формулы XIII) и 2'- и 10-гидроксизащищенное (соединение формулы VII) производные таксола. Соединение формулы XIII затем подвергают реакции с 1,1,2-трифторо-2-хлоротриэтиламином (стадия (b)) и получают диенеон формулы VIII. В стадии (c) защитные группы R3 удаляют. (Удаление трихлороэтилоксикарбонильной группы может быть осуществлено с использованием цинкового порошка в уксусной кислоте.) В стадии (d) диен соединения формулы IX подвергают каталитическому гидрированию, в результате чего получают соединение формулы X. После этого в стадии (e) 2'-гидроксигруппу еще раз блокируют, на этот раз предпочтительно бензилоксикарбонилом, и получают в результате соединение формулы XI. После обработки этого соединения формулы XI соединением DAST получают фторосоединение формулы XII. Затем защитные группы R3 (стадия (g)) удаляют и получают в результате соединение формулы I3. В схеме V проиллюстрирован способ получения соединения формулы I4, которое, кроме того, принадлежит к соединениям формулы I. В cтадии (a) соединение формулы VII подвергают реакции cDAST, в результате чего получают соединение формулы XIV. После удаления защитных групп R3 получают соединение I4. Соединение формулы VI является либо уже известным, либо оно может быть легко получено способом, показанным на cхеме VI. В этой cхеме cтадия (a) в основном идентична cтадии (b) cхемы II. Производное баккатина III формулы XXXIII с защитными группами на 7- и 10-гидроксигруппах также является либо уже известным соединением, либо оно может быть легко получено из 10-диацетилбаккатина III. См., например, заявки на Европатент 0 253 738 A1 и 0 522 958 A1, опубликованные 20 января 1988 г. и 13 января 1993 г. соответственно. После удаления гидроксизащитных групп в стадии (b) получают соединение формулы VI. В настоящей заявке, числовые индексы, следующие после символа "C", указывают на число атомов углерода, которое может содержать данная группа. Например, понятие "C1-6-алкил" включает в себя алкильные группы с прямой или разветвленной цепью, имеющие от 1 до 6 атомов углерода и представляющие собой метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, т-бутил, н-пентил, н-гексил, 3-метилпентил или аналогичные алкильные группы; понятие "C2-6-алкенил" включает в себя прямые или разветвленные алкенильные группы, такие как винил, аллил, 1-пропенил, изопропенил, 1-бутенил, 2-бутенил, 3-бутенил, металлил, 1,1-диметилаллил, 1-гексенил, 2-гексенил или аналогичные группы; понятие "C3-6-циклоалкил" включает в себя цилкопропил, циклобутил, циклопентил или циклогексил; понятие "C2-6-алкинил" включает в себя прямые и разветвленные алкинильные группы, такие как этинил, пропаргил (2-пропинил), 1-пропинил, 2-бутинил, 3-бутинил, 1-гексинил, 4-метил-2-пентинил и аналогичные группы; понятие "C2-6-алкениил" включает в себя такие группы, как этилен-1,2-диил(винилен), 2-метил-2-бутен-1,4-диил, 2-гексен-1,6-диил и аналогичные группы; понятие "C1-6-алкилокси(алкокси) включает в себя прямые или разветвленные алкилоксигруппы, такие, как метокси, этокси, н-пропокси, i-пропокси, н-бутокси, т-бутокси (т-бутилокси), н-пентилокси, н-гексилокси или 3-метилпентилокси и т. п.; а понятие "галоген" включает в себя фтор, хлор, бром или иод. Термин "азетидинон" относится к азетидин-2-ону. В настоящем описании все однажды определенные символы сохраняют свое значение до тех пор, пока им не будет дано новое определение. Ниже представлены конкретные примеры, которые иллюстрируют синтез характерных соединений настоящего изобретения, но при этом не ограничивают объема настоящего изобретения или области, к которой оно относится. Описанные в примерах методы могут быть адаптированы для получения соединений, входящих в объем настоящего изобретения, но конкретно не раскрываемых в данных примерах. Кроме того, каждому специалисту ясно, что те же самые соединения могут быть получены с использованием некоторых модификаций описанных способов. Все указанные в примерах температуры даны в градусах Цельсия, если это не оговорено особо. Специальные характеристики, полученные методом ядерного магнитного резонанса (ЯМР), относятся к химическим сдвигам (), выраженным в миллионных долях (м.д.) и измеренным по отношению к сигналу тетраметилсилана (ТМС), который использовали в качестве эталона. Относительные области, указанные для различных сдвигов в спектральных данных протонного ЯМР, соответствуют числу атомов водорода определенного функционального типа в данной молекуле. Природа сдвигов в отношении их мультиплетности описывается как: широкий синглет (ш.с), широкий дублет (ш.д), широкий триплет (ш.т.), широкий мультиплет (ш.м.), широкий квартет (ш.кв.), синглет (с), мультиплет (м), дублет (д), квартет (кв.), триплет (т), двойной дублет (дд), двойной триплет (дт) и двойной квартет (д.кв). Для снятия ЯМР-спектров в качестве растворителей использовали ДМСО-d6 (пердейтеродиметилсульфоксид), D2O (тяжелая вода), CDCl3 (дейтерохлороформ) и другие стандартные дейтерированные растворители. Сокращение "Обмен" означает обмениваемый на CD3OD (например, "д + обм. " означает "дублет + обмениваемый сигнал. Полный сигнал коллапсирует именно в дублет, после того как был обменен протон). "Включ." означает "включая". Описание инфракрасных (ИК) спектров включает в себя лишь абсорбционные волновые числа (см-1), являющиеся показателем идентификации функциональных групп. Целит представляет собой зарегистрированную торговую марку (Корпорации: Johns - Manville Products Corporation) диатомовой земли. Используемые в настоящем описании аббревиатуры являются стандартными сокращениями, обычно используемыми в специальной литературе. Ниже приведен список некоторых из таких аббревиатур: Ac - ацетил; Ar - арил; Bz - бензоил; Cbz - бензилоксикарбонил; DCl - десорбционная химическая ионизация; DMF - диметилформамид (ДМФ); DMSO - диметилсульфоксид (ДМСО); FAB - бомбардировка быстрыми атомами; h - часы, ч; HPM - масс-спектроскопия высокого разрешения (МСВР); i-PrOH - изопропиловый спирт; min - минуты (мин); MS - масс-спектрометрия; NOBA - м-нитробензиловый спирт; Ph - фенил; rt - комнатная температура; tBu - третичный бутил (т-бутил); TES - триэтилсилил; THF - тетрагидрофуран (ТГФ); tIc - тонкослойная хроматография (ТСХ); v/v - объем/объем; V - выход. В Таблицах 1 и 2 перечислены некоторые соединения, синтез которых описан в представленных ниже Примерах. Пример 1. 2'-O-(Бензилоксикарбонил)таксол (IIa). К размешанному раствору таксола (150 мг, 0,176 мМ) и N,N-диизопропилэтиламина (93 мкл, 0,534 мМ, 3 экв.) в безводном CH2Cl2 (4 мл) при комнатной температуре добавляли бензилхлороформат (75 мкл, 0,525 мМ, 3 экв.) при комнатной температуре. Реакционную смесь размещали при комнатной температуре в течение 3 часов. После этого смесь концентрировали до получения объема 2 мл, а остаток очищали на колонке с силикагелем, используя смесь (1:1) EtOAc/гексана в качестве элюента, в результате чего получали 150 мг (0,152 мМ, выход 86%) целевого соединения IIa, в виде белого порошка: т.пл. 140-150oC (разлож. ) []2D0 = -53,5o (c = 0,2, 95% EtOH); 1H-ЯМР (300 МГц, ацетон-d6) (м. д. ): 1,18 3H, с, 17-H3); 1,92 (3H, с, 16-H3); 1,66 (3H, с, 19-H3); 1,96 (3H, с, 18-H3); 2,16 (3H, с, 10-OAc); 2,5 (3H, с, 4-OAc); 3,53 (1H, д, J = 5,89 Гц, 7-OH, обмен. CD2O); 3,85 (1H, д, J = 7,19; 3-H); 3,9 (1H, с, OH, обмен с D2O); 3,85 (1H, д, J = 7,19; 3-H); 3,9 (1H, с, OH, обмен с D2O); 4,17 (2H, ABкв., 2O-H2), 4,25 (1H, м, 7-H), 4,97 (1H, д, J = 9,56 Гц, 5-H); 5,19 (2H, ABкв., OCH2C6H5), 5,54 (1H, д, J = 5,5 Гц, 2'-H); 5,68 (1H, д, J = 7,13 Гц, 2-H); 6,01 (1H, дд, J = 5,5, 9,05 Гц, 3'-H); 6,17 (1H, ш.т., J = 9,0 Гц, 13-H); 6,42 (1H, с, 10-H); 7,28 - 7,69 (16H, м); 7,78 (2H, "д", J = 8 Гц, 3'-NHCOPh), 8,14 (2H, д, J = 8 Гц, 2-CO2Ph); 8,55 (1H, д, J = 9,06 Гц, NH, обмен. с D2O): МС (FAB-NOBA/NaI+KI); m/e = 988 (M+H)+, 1010 (M+Na)+, 1026 (M+K)+; ИК (KBr) макс.: 3448, 1748 (C+O), 1726 (CONH), 1250 (C-O) см-1; УФ (MeOH : H2O, 1:1) макс : 198 ( 7,3 104), 230 нм ( 2,7 104). МСВР (масс-спектроскопия высокого разрешения) для C55H58NO16 (MH+: вычислено 988,3756; найдено 988,3766 Элементный анализ для C55H57NO16 H2O: вычислено: C 65,67, H 5,92; N 1,40; найдено: C 65,99; H 5,64; N 1,33. Пример 2. 2'-O-Бензилоксикарбонил-7- -- фторотаксол IIIa. DAST (18,7 мкл, 0,141 мМ) растворяли в сухом дихлорметане (0,5 мл), и полученный раствор охлаждали до 0oC. Затем добавляли раствор соединения IIa (71 мг, 0,072 мМ) в дихлорметане (1 мл), и полученный раствор выдерживали 30 минут при 0oC и 4 часа при комнатной температуре. После этого реакцию гасили путем добавления к реакционной смеси воды (0,15 мл) и смесь концентрировали. Остаток хроматографировали на колонке с силикагелем (элюируя 40% этилацетатом в гексане), в результате чего получали 61 мг смеси соединения IIIa и 2-O-бензилоксикарбонил-8-десметил-7,8-циклопропатаксола XXVa; 1H-ЯМР (смеси IIIa и XXVa, CDCl3): 8,08 (д, J = 8,7 Гц, 2H); 7,65 - 7,17 (м, 18H): 6,85 (обмен. д, J = 9,4 Гц, 1H); 6,49 (с, 1H, H-10); 6,25 - 6,14 (м, 1H, H-13); 5,92 (дд, J = 9,4 Гц, J = 2,4 Гц); 1H, H-3; 5,68 (д, J = 7,2 Гц, 1H, H-2); 5,38 (м, H, H-2); 5,06 (м, 2H); 4,96 (ш.д, 1H, H-5); 4,80 - 4,35 (М, 1H, H-7); 4,31 - 4,20 (м, 2H, H-20); 3,94 (д, J = 7,2 Гц; 1H, H-3); 2,47 - 1,64 (м, 17H, включ. с. при 2,38, 3H, при 2,11, 3H, при 1,78, 3H, 1,65, 3H); 1,10 (c, 3H); 1,07 (с, 3H). Пример 3. 7 -- Фторотаксол (1a). Смесь (1: 1) соединения IIIa и 2'-O-бензилоксикарбонил-8-десметил-7,8-циклопропатаксола (89 мг) растворяли в этилацетате (3 мл), и получаемую смесь слегка размешивали при давлении водорода в 1 атм и в присутствии палладированного угля (10% Pd, 29 мг, 0,027 мМ). Через 12 часов растворитель удаляли, а остаток очищали с помощью хроматографии на сигикагеле, элюируя смесью 40% этилацетата в гексане, в результате чего получали 67,7 мг целевого соединения вместе с 8-десметил-7,8-циклопропатаксолом (XXXIa), в виде белого твердого продукта; 1H-ЯМР (смеси XXVa и Ia, CDCl3) 8,11 (д, J = 8,7 Гц, 2H); 7,72 - 7,07 (м, 14H); 6,50 (с, 1H, H-10); 6,14 (ш.т, H-13); 5,80 (дд, J = 9,0 Гц, J = 2,4 Гц, 1H, H-3); 5,74 (д, J = 7,2, 1H, H-2) 4,98 (д, J = 8,1 Гц, 1H, H-5); 4,77 (м, 1H, H-2); 4,70 - 4,40 (м, 1H, H-7); 4,40 - 4,21 (м, 2H, H-20); 4,02 (д, J = 7,2 Гц, 1H, H-3); 2,60 - 1,55 (м, 17H, включ. с при 2,37, 3H, 2,20, 2H, 1,77, 3H, 1,74, 3H); 1,14 (с, 4H); 1,12 (с, 3H). Для разделения 7 -- фторотаксола и 8-десметил-7,8-циклопропатаксола были использованы следующие методы ЖХВД: Метод I: Оснащение: Насос: PE Серии 4 Колонка: Shandon Hypercarb (графитированный углерод), 7 мкм, 100 4,6 мм, 59864750 (информация относительно размеров препаративной колонки может быть получена из Keyst one Scientific Bellefonte, PA) Инжектор: PEISS - 100 Детектор: HP-1040M Условия: Подвижная фаза: метиленхлорид: гексан 85 : 15. Разделение не дает потерь при смеси метиленхлорид : гексан : изопропиловый спирт 80:19:1 Скорость потока: 2,5 мл/мин Детектор: 254 нм Разбавитель: образец, растворенный в метиленхлориде Метод 2. При использовании колонки (30 см x 2,5 см) для препаративной ЖХВД FYNMAX-60A (Si 83.121-C) с этилацетатом и гексаном (1:1) в качестве элюента и скоростью потока 10 мл/мин время удерживания для 7 -- фторотаксола составляло 15,59 мин, тогда как время удерживания для 8-десметил-7,8-циклопропатаксола составляло 16,65 мин. Пример 4. -- Фторотаксол (Ia) Соединение IIa (258 мг, 0,26 мМ) растворяли в ТГФ (1,7 мл) и диэтиловом эфире (3,4 мл), полученный раствор охлаждали до -78oC. К этому раствору добавляли DAST (69 мкл, 0,52 мМ), смесь размешивали 30 минут при -78oC, а затем в течение ночи при комнатной температуре. Реакцию гасили путем добавления воды (0,3 мл), а реакционную смесь концентрировали. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле, элюируя смесь 30% этилацетата в гексане, и получали 87 мг (выход 33,7%) 2'-O-бензилоксикарбонил -7- фторотаксола (IIIa) в виде аморфного твердого вещества. 1H-ЯМР-спектр был в основном идентичен спектру, указанному в Примере 2; 19F-ЯМР (CDCl3) (VS, CF3COOH) 90 (ддд, JF,H7 = 49,6 Гц, JF,H6 = 40,1 Гц, JF,H6 = 21,6 Гц). После удаления 2'-O-бензилоксикарбонильной группы, как описано в примере 3, получали целевое соединение с выходом 87%, 1H-ЯМР подтвердили предполагаемую структуру. MCBP для MH+: вычислено 856,3344; найдено: 856,3367. Пример 5. N-Дебензоил-N-бутоксикарбонил-2'-O-триэтилсилил-7- -- фторотаксол (Va). Смесь 7 -- фторотаксола и 2'-O-бензилоксикарбонил-8-десметил- 7,8-циклопропатаксола (572 мг, 3: 2 - смесь) обрабатывали борогидридом тетрабутиламмония (286 мг, 1,111 мМ) в сухом дихлорметане (7 мл) при комнатной температуре. Избыточный борогидрид нейтрализовали уксусной кислотой (0,4 мл); а растворитель выпаривали, в результате чего получали неочищенный продукт. Этот продукт очищали на колонке с силикагелем, элюируя 50% этилацетатом в гексане, и получали 271 мг смеси 7 -- фторобаккатина III (IV) и 8-десметил-7,8-циклопропабаккатина III (XXVII) в виде белого пенистого продукта. ЯМР - спектр соответствовал нужной структуре. Раствор смеси соединения IV и 8-десметил-7,8-циклопропабаккатина III (130 мг) в сухом ТГФ (1 мл) охлаждали до -40oC, и по капле в присутствии аргона добавляли н-бутиллитий (1,63 М в гексане, 0,164 мл, 0,260 мМ). Через 15 минут добавляли раствор 1-т-бутоксикарбонил-(3R,4S)-цис-3-триэтилсилилокси-4-фенилазетидинона (XVa) (203 мг, 0,530 мМ) в сухом ТГФ (0,5 мл), и полученную смесь нагревали до 0oC. Затем реакцию оставляли на 90 минут при 0oC, после чего ее гасили насыщенным водным хлоридом аммония. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом. Этилацетатный слой осушали, фильтровали и концентрировали в вакууме, в результате чего получали неочищенный маслянистый продукт. Этот продукт очищали с помощью хроматографии на силикагеле, элюируя 40% этилацетатом в гексане, и получали 143 мг смеси целевого соединения и N-дебензоил- N-т-бутоксикарбонил-2'-O-триэтилсилил-8-десметил-7,8-циклопропатаксола (XXVIIIa) в виде белого пенистого продукта; 1H-ЯМР (смеси XXVIIIa и Va, 300 МГц, CDCl3) 8,14 (д, 2H); 7,45-7,17 (м, 8H); 6,56 (с, 0,6H, H-10); 6,32 (с, 0,4H, H-10, H-10); 6,28 (м, 1H, H-13); 5,72 (д, 0,6H, H-2); 5,44 (м, 1H, H-3); 5,28 (обм.м. 1H, N-H); 5,00 (д, 1H, H-5); 4,70-4,45 (м, 1H, H-7); 4,50 (ш.с., 1H, H-2); 4,40-4,35 (м, 2H, H-20) 4,05 (д, 1H, H-3); 2,63-1,15 (м, 32H); 0,73 (м, 9H); 0,34 (м, 6H). Пример 6. N-Дебензол-N-т-бутоксикарбонил-7 -- фторотаксол (Ib). К раствору, содержащему смесь соединения Va и N-дебензоил-N-т- бутоксикарбонил-2'-O-триэтилсилил-8-десметил-7,8-циклопропатаксола (100 мг) в ацетонитриле (1 мл) при -5oC добавляли водную HCl (0,0192 мл, 0,30 мМ, 36% - раствор). Реакционную смесь размешивали в течение 10 минут, а затем разбавляли этилацетатом (1,5 мл). Органическую фазу промывали водой, осушали, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле, элюируя 40% этилацетата в гексане, в результате чего получали 73 мг смеси целевого продукта и N-дебензоил-N-т-бутоксикарбонил-8-десметил-7,8-циклопропатаксола (XXIXa), в виде пенистого вещества; 1H-ЯМР (смеси Ib и XXIXa, 300 МГц, CDCl3) 8,11 (м, 2H); 7,60-7,22 (м, 8H); 6,50 (с, 0,6H, H-10); 6,30 (с, 0,4H, H-10); 6,22 (м, 1H, H-13); 5,72 (д, 0,6H, H-2); 5,61 (д, 0,4H, H-2); 5,50-5,42 (м, 1H, H-3'); 5,28 (обм.ш.д, 1H, N-H); 5,00 (д, 1H, H-5); 4,70-4,40 (м, 1H, H-7); 4,60 (ш.с, 1H, H-2'); 4,40-4,23 (м, 1H, H-20); 4,20 (д, 1H, H-3); 3,40 (обм. ш.с., 1H, O-H); 2,65-1,10 (м, 32H). МСВД для МH+: вычислено 852,3607; найдено 852,3604. Пример 7. 7 -- Фторобаккатин III (IV). В сухую колбу в инертной атмосфере добавляли 2'-O-(бензилоксикарбонил)таксол (IIa) (4 г, 4 мМ) и сухой толуол (80 мл). Полученную суспензию размешивали при температуре окружающей среды, добавляя при этом по капле сухой тетрагидрофуран (16 мл) до тех пор, пока не получали бесцветный раствор. Этот раствор охлаждали до -78oC в бане из сухого льда и ацетона, а затем обрабатывали трифторидом диэтиламиносеры (DAST, 1,2 мл, 2,5 экв. ). Реакционную смесь размешивали в течение 16 часов, и в процессе этого перемешивания смесь постепенно нагревалась до температуры окружающей среды. Полученную суспензию фильтровали, а фильтрат (разведенный этилацетатом (30 мл)) промывали насыщенным водным дикарбонатом натрия, а затем солевым раствором. Органическую фракцию осушали (MgSO4) и концентрировали, в результате чего получали неочищенный продукт в виде белого пенистого вещества. Этот продукт частично очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя 10% CH3CN в CH2Cl2, и получали 1,45 г смеси 7 -- фторо-производного IIIa и 7,8-циклопропа-аддукта XXVa (смесь 82:18, как было установлено с помощью 1H-ЯМР). Вышеуказанную смесь (1,45 г) растворяли в этилацетате (60 мл) и обрабатывали палладированным углем (300 мг). После встряхивания в течение 4 часов при давлении водорода 50 фунт/кв.дюйм (344,7 кПа) реакционную смесь вентилировали (т. е. , удаляли газы) и фильтровали через небольшой слой из силикагеля, а затем концентрировали. В результате этой процедуры получали целевой продукт в виде белой пенистой смеси (1,24 г, выход 99%, согласно 1H-ЯМР, смесь имела состав 90:10). После этого смесь 7 -- фторо- и 7,8-циклопропатаксола растворяли в метиленхлориде (30 мл) и обрабатывали борогидридом тетрабутиламмония (745 мг, 2,9 мМ, 2 экв.) и размешивали в течение 6 часов. Затем реакцию гасили уксусной кислотой (1 мл), разводили дополнительным количеством метиленхлорида (30 мл) и промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Органическую фракцию осушали сульфатом магния и концентрировали. Неочищенный остаток (маточную смесь замещенного таксана) частично очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя 10% CH3CN в CH2Cl2, и получали целевой баккатин III (50 мг, 60%) в виде 90:10 - смеси (как было определено с помощью 1H-ЯМР) 7 -- фторо- и 7,8-циклопропа-аналогов виде белого пенистого продукта. Этот продукт кристаллизовали из горячего изопропанола, и получали 7 -- фторобаккатин III (IV) в виде небольших белых игольчатых кристаллов (выход: 410 мг); т.пл. 234-236oC (разлож.); 1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3): 8,14 (д, 2H, J = 6 Гц); 7,65-7,52 (м, 1H); 7,52-7,49 (м, 2H), 6,57 (с, 1H); 5,72 (д, 1H, J = 9 Гц); 5,03 (д, 1H, J = 9 Гц); 4,86-4,79 (м, 1H); 4,55 (дд, C-7 протон 1H, J = 3,9, JH-F=47,1 Гц); 4,36 (A ABкв., 1H, J = 7,8 Гц); 4,27 (B ABкв., 1H, J=7,8 Гц); 4,12 (д, 1H, J = 6,9 Гц); 2,60-2,48 (м, 2H); 2,30-1,07 (м, 22H, включая синглеты при 2,30; 2,21; 2,08; 1,77; 1,58; 1,13; 1,07). Пример 8. Получение 1-т-бутоксикарбонил-(3R,4S)-цис-3- триэтилсилилокси-4-фенилазетидинона (XVa) (Схема VII). Гидрохлорид (L) - треонинметилового сложного эфира (1,26 г, 7,44 мМ) в безводном дихлорметане (15 мл) размешивали с имидазолом (1,01 г, 14,89 мМ) и т-бутоксидифенилсилилхлоридом (2,274 г, 7,816 мМ) при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь распределяли между водой и дихлорметаном. Органическую фазу промывали 5% водным бикарбонатом натрия и водой, осушали, концентрировали и получали 2,88 г неочищенного маслянистого продукта, который непосредственно использовали в следующей стадии; 1H-ЯМР (CDCl3) 7,70-7,25 (м, 10H); 4,40 (м, 1H); 3,62 (с, 3H); 3,31 (д, J = 3 Гц, 1H); 2,12 (ш.с. 2H); 1,3-1,15 (м, 12H). Полученный маслянистый продукт (548 мг, 1,414 мМ) в безводном дихлорметане (10 мл) обрабатывали бензальдегидом (0,158 мл, 1,55 мМ) при комнатной температуре и в присутствии 4A-молекулярного сита, и получали в результате соединение формулы XVIIa in situ. После охлаждения раствора, содержащего соединение XVIIa, до -40oC добавляли триэтиламин (0,20 мл, 1,698 мМ), а затем добавляли ацетоксиацетилхлорид (XVIa) (0,182 мл, 1,698 мМ) в течение 10 минут. Смесь оставляли на 4 часа для нагревания до комнатной температуры, после чего продукт распределяли между дихлорметаном и водой. Затем органическую фазу промывали водой и солевым раствором, осушали и концентрировали. После хроматографии на силикагеле (элюирование смесью EtOAc/гексана = 1:4) получали 411 мг соединения XVIIIa в виде прибл. 10:1 - смеси 3R, 4S:3S,4R - диастереомеров. Полученную смесь диастереомеров (245,51 мг, 0,414 мМ) в сухом ТГФ (2 мл) обрабатывали уксусной кислотой (0,15 мл) и фторидом тетрабутиламмония (ФТБФ, 1М в ГТФ, 1,20 мл). Раствор размешивали 14 часов при комнатной температуре, а затем распределяли между этилацетатом и 5% водным бикарбонатом натрия. Органическую фазу осушали и концентрировали. После флеш-хроматографии на силикагеле (с использованием в качестве элюента смесь (1:1) этилацетата и гексана) получали 66 мг (выход 50%) соединения XIXa (один диастереомер) в виде пенистого вещества); 1H-ЯМР (CDCl3) : 7,42 - 7,25 (м, 5H); 5,90 (д, J=4,8 Гц, 1H); 5,09 (д, J= 4,8 Гц, 1H); 4,28 (м, 1H); 4,01 (д, J=4,8 Гц, 1H); 3,70 (с, 3H); 1,73 (с, 3H); 1,19 (д, J=6,6 Гц, 3H). Соединение формулы XIXa (9,8 г, 0,0305 М) в сухом дихлорметане (100 мл) обрабатывали при -78oC триэтиламином (9,40 мл 0,0671 М) и метансульфонилхлоридом (MSCl, 3,50 мл, 0,0457 М). Раствор оставляли на ночь для нагревания до комнатной температуры. После этого реакционную смесь распределяли между собой и дихлорметаном. Органический слой промывали 5% водным бикарбонатом натрия, разбавляли водной HCl, водой и солевым раствором, и концентрировали, в результате чего получали соединение XXa в виде неочищенного маслянистого остатка. Этот остаток (10,0 г) растворяли в дихлорметане (250 мл) и озонировали при -78oC до тех пор, пока окраска раствора не станет синей. Затем добавляли метилсульфид (11 мл), реакционную смесь концентрировали и получали соединение формулы XXIa (неочищенное). Соединение формулы XXIa растворяли в ТГФ (150 мл) и при -78oC обрабатывали гидратом гидразина (10 мл). Через 2 часа смесь выливали в разбавленную водную HCl и этилацетат и две фазы разделяли. Органическую фазу промывали другой кислотой, водой и солевым раствором, а затем концентрировали и получали неочищенный продукт, который очищали с помощью хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента 1 - 5% метанол в метиленхлориде, и в результате этой процедуры получали 4,40 (выход 71%) соединения формул