Сульфонамидокарбоксамиды, их гидраты и физиологически приемлемые соли, фармацевтическая композиция на их основе

Сульфонамидокарбоксамиды, их гидраты и физиологически приемлемые соли, фармацевтическая композиция на их основе

Реферат

 

Описываются новые сульфонамидокарбоксамиды общей формулы (I), где значения А, У, Х указаны в п.1 формулы изобретения, обладающие антиагрегантной и антикоагулянтной активностью. Описываются их гидраты и физиологически приемлемые соли, обладающие свойством подавлять амидолитическую активность тромбина, а также фармацевтическая композиция на основе соединений формулы (I), обладающая вышеуказанными свойствами. 2 с. и 15 з.п. ф-лы, 2 табл.

Изобретение касается новых сульфонамидокарбоксамидов формулы где X является группой формулы X¹ или X² T является CH₂ или O, R¹ является водородом или -COO низшим алкилом; R², R¹¹ и R²¹ обозначают водород; Y является водородом; A обозначает низший алкил; фенил, незамещенный или замещенный низшим алкилом, трифторметильной группой, группой -COOH или -COO-низшим алкилом, трифторметоксигруппой, цианогруппой, циклопентилом, фенилом, CONH₂, тетразолилом; нафтил, гетероцикл, в том числе гетероарил, состоящий из одного или двух колец, содержащие по меньшей мере один атом азота, и которые могут нести заместители, такие как низший алкил; Q является водородом, низшим алкилом, незамещенным или замещенным гидроксилом, -COOH или -COO-низшим алкилом; M является группой M¹ или M² формул где R³ представляет собой водород, низший алкил или акленил, фенил, гетероарил, состоящий из 6-членного кольца с одним атомом азота, C₃-C₆-циклоалкил, низший алкил, замещенный C₃-C₆-циклоалкилом, фенилом, необязательно замещенным галогеном или низшим алкоксилом, гетероарилом, состоящим из 6-членного кольца с одним атомом азота; R₄ обозначает водород или низший алкил; R⁵ обозначает водород, низший алкил или необязательно, связанный через низший алкилен COOH, COO-низший алкил, низший алканоил, OH, низший алканоилокси, низший алкоксил, фенил-низший алкоксил, CONH₂, NHCOO-низший алкил, CONHCH₂CH₂OH, CONHOH, CONHOCH₃, CONHO-бензил, CONHSO₂-низший алкил, CONHCH₂CH₂-фенил, который может быть замещен двумя OH-группами, CONH-циклоалкил, NH₂, NHCOO-бензил, NHSO₃H, (NHSO₂ или NHSO₃)-низший алкил, NH-низший алканоил, NHCOCOOH, NHCOCOO-низший алкил, NH-циклоалкил, NH-(3,4-диоксо-2-оксициклобут-1-енил), NH-[2-низший-(алкокси или -алкенилокси)-3,4-диоксоциклобут-1-енил], NHCH₂-гетероарил, NHCOCO-(фенил или низший алкил), NHCOCH₂Cl, NHCOCH₂O-фенил, NHCOCH₂-фенил, NHCO-арил или гетероарил, состоящий из 6-членного кольца с одним или двумя атомами азота, причем один такой атом азота может быть в виде N-оксида, NHPO₃(R⁹, R¹⁰), гетероарил или необязательно разомкнутый кислородом -CON(CH₂)_4-9; R⁹ и R¹⁰ обозначают водород, низший алкил или фенил; N(R⁶) - бензиламино или -N(CH₂)_4-9; а также гидраты и их физиологически приемлемые соли.

Кроме того, изобретение касается способа получения вышеуказанных соединений, фармацевтической композиции, содержащей эти соединения, а также использование этих соединений для получения фармацевтической композиции.

Примерами физиологически пригодных солей соединения формулы I являются соли с физиологически приемлемыми минеральными кислотами, такими как соляная кислота, серная кислота, сернистая или фосфорная кислота; или с органическими кислотами, такими как метансульфокислота, n-толуолсульфокислота, уксусная кислота, трифторуксусная кислота, лимонная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота, винная кислота, янтарная кислота или салициловая кислота. Соединения формулы I с кислыми группами, такими как карбоксигруппа, могут образовать также соли с физиологически пригодными основаниями. Примерами таких солей являются соли щелочных металлов, соли щелочноземельных металлов, соли аммония и алкиламмония, как, например, соли натрия, калия, кальция или тетраметиламмония. Соединения формулы I могут также иметь форму амфотерных ионов.

Соединение формулы I могут быть также сольватированы, в частности гидратированы. Гидратация может осуществляться в ходе способа получения или появляться постепенно как следствие гигроскопических свойств вначале безводного соединения формулы I.

Соединение формулы I содержит по меньшей мере два асимметричных атома C и поэтому могут быть представлены в виде смеси диастереометров или в виде оптически чистого соединения.

В рамках изобретения выражение "низший" обозначает группы, содержащие 1-6, предпочтительно 1-4, атомов углерода. Так, низший алкил обозначает группы с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащие 1-6, предпочтительно 1-4, атомов углерода, как, например, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, трет-бутил, 2-бутил и пентил. Примером для низшего алкенила является аллил.

Фенил и 1- или 2-нафтил при определенных условиях может нести один или несколько заместителей, таких как галоген, например хлор, или низший алкил или алкокси, например CH₃, трет-бутил, OH, OCH₃, фенил, CF₃, OCF₃, циклопентил, CN, COOH, COOCH₃, COOC₂H₅, CONH₂ или тетразолил.

Гетероарилгруппами являются 5-10-членные ароматические группы, состоящие из одного или 2 колец и содержащие по меньшей мере один атом азота. Примерами этих групп являются 2-, 3- или 4-пиридил, также в виде их N-оксидов, тетразолил, оксидиазолил, пиразинил и хинолил. Они могут быть замещены, например, низшим алкилом, таким как, например, CH₃, или галогеном, как, например, хлором.

Циклоалкильные группы содержат 3-6 атомов углерода. Примерами являются циклопропил, циклопентил и циклогексил.

Гетероциклил обозначает 5-10-членные неароматические, частично или полностью насыщенные группы, как, например, тетрагидрохинолил, содержащие 1 или 2 кольца, и по меньшей мере один гетероатом, например, один атом азота и при определенных условиях замещенные одним или несколькими заместителями, как, например, низшим алкилом, например, метилом.

Примерами групп N(CH₂)_4-9, необязательно разомкнутых O, являются гексагидроазепин и морфолин.

Примерами соединений формулы I являются те соединения, где: X является группой X¹, в которой R¹ и R² обозначают водород, Y обозначает водород, A, Q имеют значения, указанные выше, M обозначает группу M¹, в которой R³ и R⁴ имеют значения, указанные выше, причем, если Q, R³ и R⁵ одновременно обозначают водород, то R⁴ не может быть водородом; R⁵ обозначает водород, низший алкил или необязательно связанный через низший алкилен COOH, COO-низший алкил, OH, низший алканоил, низший алканоилокси, NH₂, NHCOO-низший алкил, NHSO₃H, (NHSO₂ или NHSO₃)-низший алкил, NH-низший алканоил, NHCOCOOH, NHCOCOO-ниший алкил или NHPO₃(R⁹, R¹⁰), или в случае, если Q не обозначает H, то M также может быть группой M², в которой N(R⁶) обозначает N(CH₂)_4-9.

Другими примерами соединений формулы I являются те соединения, где Y обозначает H, X является группой X² и M является группой M¹ или M².

Предпочтительными являются соединения, где A обозначает нафтил, метилхинолил, метилтетрагидрохинолил, метил, пиридил или фенил, замещенный трет-бутилом, трифторметильной группой, фенилом, циклопентилом, группой -COOH, метоксикарбонилом, этоксикарбонилом, трифторметоксигруппой, CN, CONH₂ или тетразолилом.

Предпочтительны соединения, где Q обозначает H, CH₃, CH₂COOH, CH₂CH₂OH или CH₂COOC₂H₅.

Предпочтительными являются также соединения, где X обозначает группу X¹, T обозначает CH₂, один из R¹ обозначает H или COO-(метил, этил, изобутил или трет-бутил), а R² обозначает H.

Другой предпочтительной группой соединений являются соединения, где X обозначает группу X¹, T обозначает O, один из R¹ обозначает H или COOC₂H₅, R² обозначает H.

Кроме того, предпочтительны соединения, где X обозначает группу X² и R¹¹ и R²¹ обозначают H.

Предпочтительны также соединения, где M обозначает группу M¹, R³ обозначает H, CH₃, пропил, изопропил, бутил, пентил, аллил, циклопропил, циклопентил, циклогексил, циклогексилметил, а R⁴ обозначает H, изопропил, 2-бутил, изобутил, и соединения, где R⁵ имеет значения R⁵⁰, или -CH₂R₅₀, или -CH₂CH₂R⁵⁰, где R⁵⁰ обозначает H, OH, COO-(H, CH₃ или C₂H₅), NHCOOCH₃, CONH₂, COCH₃, NHCOCH₃.

Кроме того, предпочтительны соединения, где M обозначает группу M² и N(R⁶) обозначает гексаметиленимино.

Примерами предпочтительных соединений также являются: N-[N4-[[(S)-1-амидино-3-пиперидинил] метил]-N2-(2-нафтил-сульфонил)- L-аспаригинил]-N-циклопропилглицин, (S)-[[3-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметилкарбамоил] -2-(нафталин- 2-сульфониламино)пропионил]циклопропиламино]пропионовая кислота, [(S)-3-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметилкарбамоил]-2-(4- трифторметилфенилсульфониламино)пропионилциклопропиламино]уксусная кислота.

Примерами других предпочтительных соединений являются соединения, представляющие собой: (S)-N4-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметил]-N1-карбоксиметил-N1- циклопентил-2-(нафталин-2-сульфониламино)сукцинамид, (S)-3-[(S)-2-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметилкарбамоил] -2-(нафталин-2- сульфониламино)пропионил]пропиламиноуксусную кислоту, N-[N4-[[(S)-1-амидино-3-пиперидинил] метил] -N2-(2-нафтил-сульфонил)-L- аспарагинил]-N-(o-хлорбензил)глицин, [2-[[(S)-3-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидинил-3-илметил-карбамоил] 2-(нафталин- 2-сульфониламино)пропионил]бутиламино]этил]оксаминовую кислоту, (S)-N4-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметил] -N1-бутил-2- (нафталин-2-сульфониламино)-N1-(2-сульфоаминоэтил)сукцинамид, [(S)-3-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметилкарбамоил] 2- (4-трет-бутилфенилсульфониламино)-пропионилциклопропиламино]уксусную кислоту.

Предпочтительны также соединения, представляющие собой: 3-[[(S)-3-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илкарбамоил] -2- (4-карбамилфенилсульфониламино)пропионил]циклопропиламино]пропионовую кислоту.

(S)-N4-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметил] -N1-циклопропил-2- (нафталин-2-илсульфониламино)-N1-[2-пиразин-2-илкарбониламино)этил] сукцинамид, (S)-N4-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметил] -N1-циклопропил-N1- [2-(3,4-диоксифенил)этилкарбамоилметил] -2-(2-нафтилсульфониламино)сукцинамид.

Кроме того, предпочтительны следующие соединения: 2-[(S)-2-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметилкарбамоил] -1-[циклопропил (2-этоксикарбонилэтил)карбамоил]этилсульфамоил]бензойная кислота, 3-[[(S)-3-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илкарбамоил] -2-4-цианофенилсульфониламино)пропионил]циклопропиламино]пропионовая кислота, (S)-N(4)-[4-(аминоиминометил)морфолин-2-илметил] -N(1)-циклопропил-N(1)- (тетразол-5-ил)этил]-2-(нафталин-2-илсульфонил)сукцинамид, сложный этиловый эфир [[(S)-3-[4-(аминоиминометил)морфолин-2-илметилкарбамоил] -2-(нафталин-2- илсульфонил)пропионил] циклопропиламино]ускусной кислоты, [[(S)-3-[4-(аминоиминометил)морфолин-2-илметилкарбамоил] -2-(нафталин- 2-илсульфонил)пропионилциклопропиламино]уксусная кислота, 2-[[(S)-3-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметилкарбамоил] -2-(нафталин- 2-илсульфониламино)пропионил] циклопропиламино] этилсульфаминокислота, (S)-N4-[(S)-1(аминоиминометил)пиперидин-3-илметил] -N1(2-хлорацетиламиноэтил)- N1-циклопропил-2-(нафталин-2-илсульфониламино)сукцинамид, (S)-N4-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметил] -N1-циклопропил-2- (нафталин-2-илсульфониламино)-N1-(2-феноксиацетиламиноэтил)сукцинамид, (S)-N4-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметил] -N1-циклопропил-2- (нафталин-2-илсульфониламино-N1-[2-(2-оксо-2-фенилацетиламино)этил] сукцинамид, (S)-N4-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметил] -N1-циклопропил-2- (нафталин-2-илсульфониламино)-N1-[2-(2-оксопропиониламино)этил]сукцинамид, (S)-N4-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметил] -N1-циклопропил-2- (нафталин-2-илсульфониламино)-N1-[2-(пиридин-3-илкарбониламино)этил]сукцинамид, (S)-N4-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметил] -N1-циклопропил-2- (нафталин-2-илсульфониламино)-N1-[2-(1-оксиникотиноиламино)этил]сукцинамид.

Вышеохарактеризованные сульфонамидокарбоксамиды обладают свойством подавлять амидолитическую активность тромбина.

Соединения формулы I могут быть получены известным способом, заключающимся в том, что а) кислоту формулы подвергают взаимодействию с амином формулы Q - NHCH₂ - X или его солью, используя защиту функциональных групп, содержащихся в группах A, Y и M (во II) и Q (в III) или б) амин формулы где X³ является группой X³¹ или X³².

подвергают взаимодействию с амидинирующим агентом и в) при необходимости реакционноспособную группу, содержащуюся в группе M или Q соединения формулы I, превращают в другую функциональную группу; г) при необходимости соединение формулы I превращают в физиологически пригодную соль или соль соединения формулы I превращают в свободную кислоту или основание.

Целесообразно процесс взаимодействия кислоты II вести в растворителе, таком как диметилформамид (ДМФ) или хлористый метилен, в присутствии основания, такого как, например, 4-этилморфолин, триэтиламин, этилдиизопропиламин или 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (ДБУ), используя соль соединения формулы III, например, трифторацетат, бисульфит, нитрат, гидрохлорид или гидройодид, и бензотриазол-1-илокси-трис(диметиламино)фосфонийгексафторфосфат (БОФ), при комнатной температуре. Содержащиеся в соединениях II и III промежуточно защищаемые функциональные группы, как, например, COOH, NH₂ и OH могут быть защищены в виде низших алкилOCO-групп, бензилOCO- или азидогрупп или соответственно бензилоксигрупп. Расщепление защищенной карбоксигруппы, как, например, COOCH₃ или COOC₂H₅, для получения COOH может осуществляться гидроокисью натрия в этаноле. Перевод бензилOCONH- или N₃-группы в свободную аминогруппу можно осуществлять путем каталитического (Pd/C) гидрирования в этаноле.

По варианту способа б) соединение IV в растворителе, таком как, например, ДМФ или метанол, в присутствии основания, такого как, например, триэтиламин, подвергают взаимодействию с формамидинсульфокислотой или 3,5-диметил-1-пиразолилформамидинийнитратом, предпочтительно при температуре до 50^oC.

В качестве функциональных превращений по варианту в) можно назвать следующие: 1. Омыление группы сложного эфира, как, например, этоксикарбонила, например, в этаноле или метаноле с помощью основания, как, например, водным NaOH, или омыление группы сложного эфира, как, например, ацетокси, например, в ТГФ с помощью основания, например, водным LiOH.

2. Гидрирование двойной связи в алкиленгруппе, например в этаноле и воде в присутствии Pd/C.

3. Гидрирование арилгруппы до получения соответствующих циклоалкилгрупп, например, в этаноле в присутствии уксусной кислоты и Рd/C.

4. Расщепление простого эфира, такого как, например, простого бензилового эфира до получения соответствующего спирта, например, с помощью раствора трибромида бора в хлористом метилене.

5. Этерификация спирта, например, низшим алкилгалогенидом, например метилйодидом, в присутствии раствора ДБУ в ТГФ.

6. Превращение карбоновой кислоты в амид карбоновой кислоты путем реакции с амином, таким как, например, морфолин, например, в ДМФ в присутствии БОФ и 4-этилморфолина.

7. a) Преобразование при необходимости амина в четвертичное производное кислоты, например, путем реакции с 3,4-бис(2-пропенилокси)-3-циклобутен-1,2-дионом в ТГФ при температуре 0^oC.

b) Каталитическое отщепление 2-пропенилгруппы от полученного в a) четвертичного производного кислоты, например, с помощью палладий (II)-ацетата в ацетонитриле и воде в присутствии триэтилфосфита и затем натрий-2-этилкапроната.

N-Сульфирование аминокислоты формулы II могут быть получены путем реакции соответствующего реакционноспособного производного сульфокислоты, как, например, сульфохлорида A-SO₂Cl, с соответствующим промежуточно защищенным производным аминокислоты HN(Y)-M-COO-трет-бутилом, как, например, описано в EP-468231A. Расщепление сложного трет-бутилового эфира для получения требуемой кислоты II можно осуществить трифторуксусной кислоты в CH₂Cl₂ или соляной кислотой в этилацетате.

Кроме того, можно получить аминокислоты II, где M является группой M¹ по следующей схеме реакции (1), (2), (3); где tBu = трет-бутокси; Boc = трет-Bu-OCO Реакцию (1)можно проводить в растворителе, таком как, например, толуол, при повышенной температуре. Реакцию (2) целесообразно проводить, как вышеописанную реакцию II с III. Реакцию VI -> VII осуществляют таким образом, что сначала полученную в VI Boc-группу отщепляют от атома N, например, в ацетонитриле или диоксане, n-толуолсульфокислотой, и полученное соединение преобразуют сульфохлоридом A-SO₂Cl в диоксане. Гидролиз сложного эфира VII для получения кислоты II можно осуществить с помощью трифторуксусной кислоты в хлористом метилене.

Получение сложного эфира VII, в котором R⁵ является тетразолилом, проходит через соответствующий сложный эфир, в котором R⁵ обозначает циано. Превращение цианогруппы в тетразолилгруппу можно осуществлять в ДМФ с помощью хлорида аммония и азида натрия.

Исходные гуанидины III, в которых X является группой X¹ и R¹, R² и Q являются H, могут быть получены, как описано в EP-468231A, например, исходя из 3-пиколиламина или 2-аминометил-4-бензилморфолина в зависимости от того, желательны ли гуанидины III с T=CH₂ или T=O. Получение оптически активного гуанидина III можно проводить, как описано в примере 36B. N-(3-пиридилметил)бензамид гидрируют в присутствии Pd/C в этаноле и соляной кислоте для получения (RS)-N-пиперидин-3-илметилбензамида. Путем солеобразования с D-миндальной кислотой в хлористом метилене после добавления простого диэтилового эфира может кристаллизоваться соль миндальной кислоты и (R)-N-пиперидин-3-илметилбензамида. Эта соль затем может подвергаться амидинированию в ДМФ триэтиламином и формамидинсульфокислотой. Путем нагревания раствора полученной соли в концентрированной соляной кислоте может получаться (S)-гуанидин формулы III, где X является группой X¹ и Q=R¹=R²=H.

Гуанидин III, где X=X² и Q, R¹¹ и R²¹ означают H, можно получать аналогично соединению, где X=X¹, T=CH₂ и Q, R¹ и R² означают H, например, по следующей схеме реакции (4) и как описывается в нижеследующем примере 67 а) б): Гуанидины III, где один из R¹ и R² или R¹¹ и R²¹ означают H, могут получаться, например, через соединения типа VIII, IX, X по следующей схеме реакции (S) и как описывается в примере 48 а) б) в): Таким образом амин III в гексане и воде преобразуется с помощью тетрабутиламмонийгидросульфата и 1H гидроокиси натрия и затем с помощью бензилхлорформиата. Из полученного соединения IX Boc-группа отщепляется раствором соляной кислоты в уксусном эфире. Продукт переводится в ДМФ триэтиламином в формамидинсульфокислотой в соединение X. Для защиты амидиногруппы в соединении X последняя преобразуется, например, в хлористом метилене с помощью сложного этилового эфира хлормуравьиной кислоты. Путем гидрокаталитического отщепления Z-группы получают производное пиперидина III, где X является группой X¹ и один из R¹ и R² является этоксикарбонилом. Аналогичным образом можно получить соответствующее производное морфолина III (T=O).

Для защиты амидиногруппы, полученной в гуанидине III, Boc-группой можно гуанидин типа X преобразовать с помощью ди-трет-бутилдикарбоната (вместо сложного этилового эфира хлормуравьиной кислоты) в диоксане.

Гуанидины III с QH могут быть получены, например, следующими реакциями (6) и (7), как описывается в нижеследующем примере 9 от а) до г): Гуанидины III с QH и T=O получают путем а) преобразования 2-аминометил-4-бензилморфолина (J. Med.Chem. 33, 1990, 1406-1413) дитрет-бутилдикарбонатом в диоксане, б) преобразования полученного BOC-защищенного амина посредством NaH и бромида Q-Br в ДМФ, в) отщепления бензилгруппы в полученном продукте путем гидрирования в этаноле в присутствии Pd/C, и г) амидинирования полученного производного морфолина, как описано выше для соединения IV, и отщепления Boc-группы.

Исходные амины IV получают, например, следующей реакцией (8), где W является защитной группой, как, например, Boc или Z.

Для получения соединения IV, где QH, первичный амин XII [может быть получен из 3-гидроксиметилпиперидина, как описывается в EP-468231A и в нижеследующем примере 12 от а) до ж)] преобразуется в растворителе, таком как, например, хлористый метилен, во вторичный амин XIII с помощью основания, как, например, основания Гюнига и бромида Q-Br. Затем кислота II реагирует с этим амином XIII (как описано в вышеуказанной реакции II+III). После чего защитную группу Boc отщепляют с помощью трифторуксусной кислоты в хлористом метилене, n-толуолсульфокислоты в ацетонитриле или раствора хлористого водорода в этилацетате. Отщепление защитной группы Z осуществляют путем гидрирования в этаноле в присутствии Pd/C. Для получения соединения IV, где Q= H, кислота II реагирует с амином XII (вместо XIII).

Получение исходного амина IV, в котором M является группой M¹ и R⁵ является NHCOCOO-низшим алкилом, осуществляется через соединение формулы IV, в которой R⁵ обозначает азидогруппу. Преобразование азидо в NHCOCOO-низший алкил может осуществляться путем каталитического гидрирования Pd/C в метаноле), затем путем преобразования полученной аминогруппы в NHCOCOO-низший алкил путем реакции с моно(низшим)алкиловым эфиром хлорангидрида щавелевой кислоты в присутствии пиридина в метиленхлориде. Если вместо моно(низшего)алкилового эфира хлорангидрида щавелевой кислоты используется пиразинкарбоновая кислоты в присутствии основания Гюнига в метиленхлориде, то получают соединение IV, в котором M=M¹ и R⁵=NHCO-пиразинил.

Кроме того, некоторые из нижеследующих примеров содержат подробные сведения относительно получения определенных соединений формул II, III и IV. Соединения формулы III, в которой X является группой X¹ и по меньшей мере один из R¹, R² и Q не является H, или в которой X является группой X², а также соединения формулы IV, в которой M является группой M¹ или у случае если X³ является группой X³², или если X является группой X³¹ и одновременно Q не является H и/или если A является алкилом, то M также может быть группой M², являются новыми и в качестве таковых также являются предметом настоящего изобретения.

Соединения формулы I, их сольваты и соли замедляют скопление тромбоцитов, вызванных тромбином, а также вызванное тромбином свертывание фибриногенов в плазме крови. Указанные соединения влияют как на образовавшиеся тромбоциты, так и на плазматическое свертывание крови. Таким образом, они предотвращают, в частности, возникновение тромбов при свертывании, а также тромбов, снабженных тромбоцитами, и могут использоваться в борьбе с болезнями, как, например, тромбозом, апоплексией, инфарктом, воспалением и атеросклерозом, а также для их профилактики. Кроме того, эти соединения воздействуют на опухолевые клетки и предотвращают образование метастаз. Таким образом, они могут использоваться также как противоопухолевые средства.

Различная степень подавления тромбина и других серин-протеаз достигнута благодаря возможно высокой специфичности указанных соединений и тем самым предотвращения возможных побочных явлений. Наряду с другими испытанными серин-протеазами для оценки общей массы специфичности соединения было принято соотношение подавления трипсина к подавлению тромбина (q в нижеследующей таблице), так как трипсин, как самая неспецифичная серин-протеаза, может легко подавляться самыми различными ингибиторами. Для сравнения подавления тромбина и трипсина, несмотря на использование различных субстратов, в качестве подавления была установлена константа подавления K_i, независимая от концентрации субстрата и фермента.

Для доказательства подавления каталитической активности вышеуказанных протеаз могут использоваться специфические хромогенные субстраты пептидов.

Подавление амидолитической активности тромбина и трипсина вышеуказанными соединениями было доказано нижеследующим примером.

Измерения проводились на микротитропластинах при комнатной температуре. Для этого в углублении пластины смешивали 150 мкл буферного раствора (50 мМ Триса, 100 мМ NaCl, 0,1% полиэтиленгликоля, pH 7,8) с 50 мкл растворенного в диметилсульфоксиде (DMSO) и разбавленного в буферном растворе ингибитора и добавляли 25 мкл человеческого тромбина (0,5 нМ конечная концентрация). Через 10 минут инкубационного периода начиналась реакция путем подачи хромогенного субстрата S-2238 (H-D-Phe-Pip-Arg-паранитроанилин кабивитрия; 10 или 50 мкМ конечная концентрация) и прослеживали гидролиз субстрата спектрофотометрическая способом на кинетическом устройстве считывания микротитроплат в течение 5 минут. По графическому изображению кривой подавления были определены величины K_i по методу, описанному в Biochem. J. 55, 1955, 170-171. Подавление трипсина осуществлялось аналогично, но при использовании субстрата S-2251 (H-D-Val-Leu-Lys-паранитриоанилин) в 200 и 750 мкМ конечной концентрации.

Результаты отражены в следующей таблице.

Соединение формулы I имеют незначительную токсичность. Таким образом соединения приведенных в таблице примеров при внутривенном введении имеют LD₅₀ от 125-500 мг/кг мыши.

Фармацевтическая композиция, обладающая антиагрегантной и антикоагулянтной активностью, содержащая соединение формулы I, его сольват или соль также является предметом настоящего изобретения. Способ получения такой композиции состоит в том, что используют одно или несколько других терапевтических пригодных веществ в галеновой форме изготовления. Применяются драже, твердые и мягкие желатиновые капсулы, растворы, эмульсии или суспензии, либо, например, в виде ректальных суппозиториев, либо в виде распылителей. Однако, введение может осуществляться также парентерально, например, в виде инъекционных растворов.

Для получения таблеток, таблеток с лаковым блеском, драже и твердых желатиновых капсул биологически активное вещество может смешиваться с фармацевтически инертным, неорганическим или органическим эксципиентами. В качестве таких эксципиентов можно использовать для таблеток, таблеток с лаковым блеском, драже и твердых желатиновых капсул, например, лактозу, кукурузный крахмал или его производные, тальк, стеариновую кислоту или ее соли. Для мягких желатиновых капсул в качестве эксципиентов подходят, например, растительные масла, воск, жиры, полутвердые или жидкие многоатомные спирты. В зависимости от свойств биологически активного вещества для мягких желатиновых капсул вообще могут не требоваться эксципиенты. Для получения растворов и сиропов в качестве эксципиентов подходят, например, вода, многоатомные спирты, сахароза, инвертный сахар и глюкоза. Для инъекционных растворов подходят, например, вода, спирты, многоатомные спирты, глицерин, растительные масла. Для суппозиториев подходят натуральные или отвержденные масла, воск, жиры, полужидкие или жидкие многоатомные спирты. Наряду с этим фармацевтические композиции могут содержать еще консерванты, агенты растворения, стабилизаторы, смачиватели, эмульгаторы, сладкие вещества, красители, ароматизирующие вещества, соли для изменения осмотического давления, буферные растворы, покрывающие вещества или антиокислители.

Для борьбы с вышеуказанными болезнями или для их профилактики можно варьировать дозировку биологически активного вещества в широких пределах и, естественно, в каждом отдельном случае необходимо соблюдать индивидуальные данные. Обычно при оральном или парентеральном, например, внутривенном или подкожном введении, можно применять дозу, примерно от 0,1 до 20 мг/кг, предпочтительно примерно от 0,5 до 4 мг/кг, ежедневно для взрослого, причем указанные верхние границы могут подниматься или опускаться в зависимости от показаний.

Пример 1. Раствор 0,85 г трет-бутил-(S)-N-циклогексил-N- [(этоксикарбонил)метил]-3-(2-нафтилсульфониламидо) сукцинамата в 21 мл метиленхлорида смешивают при 0^oC с 2,4 мл трифторуксусной кислоты и размешивают при комнатной температуре. Пену, полученную после выпаривания раствора, растворяют в 13 мл ДМФ, затем смешивают с 0,98 мл 4-этиленморфолина, 0,68 г бензотриазол-1-илокси-трис(диметиламино)фосфонийгексафторфосфата и 0,43 г дигидрохлорида (S)-1-амидино-3-(аминометил)пиперидина и перемешивают при комнатной температуре. Реакционную смесь выпаривают и остаток с помощью этилацетата, затем этилацетата-ацетона-уксусной кислоты-воды, 16:2:1:1 подвергают хроматографическому разделению на силикагеле. Выделяют диацетат сложного этилового эфира N-[N4-[[(S)-1-амидино-3-пиперидинил]метил]-N-2-(2-нафтилсульфонил)- L-аспарагинил]-N-циклогексилглицина.

FAB-MS: 629,3 (N+H)⁺.

Получение исходного материала: а) К раствору 2,89 г сложного - трет-бутилового эфира N-Boc-L-аспарагиновой кислоты в 50 мл ДМФ добавляют 3,78 мл 4-этилморфолина, 4,42 г бензотриазол-1-илокси-трис(диметиламино)фосфонийгексафторфосфата (БОФ) и раствор 2,25 г сложного этилового эфира N-циклогексилглицина (J. Hetetocycl. Chem. 23, 1986, 929-933) в 8 мл ДМФ. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре, затем выпаривают и остаток распределяют между этилацетатом и водой. Органическую фазу высушивают, выпаривают и остаток хроматографируют с помощью этилацетата-гексана 1:1 на силикагеле. Таким образом получают 4,5 г трет-бутил-(S)-3-(1-трет-бутоксиформамидо-N-циклогексил-N- [(этоксикарбонил)метил]сукцинамата.

FAB-MS: 457 (M+H)⁺.

б) Раствор 2,1 г продукта со стадии а) в 22 мл ацетонитрила объединяют с 2,2 г моногидрата n-толуолсульфокислоты при помешивании. Затем раствор выпаривают и высушивают, 2,4 г остатка растворяют в 45 мл диоксана и смешивают с раствором из 1,56 г - нафтилсульфохлорида в 15 мл диоксана. К смеси добавляют 1,9 г бикарбоната натрия в 19 мл воды. После перемешивания реакционную смесь выливают на лед и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу промывают водой, затем высушивают и выпаривают. Остаток хроматографируют смесью гексана и этилацетата 4:1 на силикагеле. Получают 0,85 г трет-бутил-(S)-N-циклогексил-N-[(этоксикарбонил)метил] -3-(2- нафтилсульфонамидо)сукцинамата.

FAB-MS: 547 (M+H)⁺ Пример 2.

2A) Аналогично примеру 1 получают следующие соединения: а) ацетат сложного этилового эфира N-[N4-[[(S)-1-амидино-3-пиперидинил] метил] -N2-(2-нафтилсульфонил)-L- аспарагинил] -N-циклопропилглицина; MS (ионное распыление): 587,3 (M+H)⁺; б) ацетат сложного этилового эфира [[(S)-3-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметилкарбамоил] -2- (2-нафтилсульфониламино)пропионил] бензиламино] уксусной кислоты; MS (ионное распыление): 637,3 (M+H)⁺; в) ацетат сложного метилового эфира N-[N4-[[(S)-1-амидино-3-пиперидинил] метил] -N2-(2-нафтилсульфонил)-L- аспарагинил] -N-циклопропилглицина; MS (ионное распыление): 629,4 (M+H)⁺; г) гидрохлорида сложного этилового эфира N-[N4-[[(S)-1-амидино-3-пиперидинил] метил] -N2-(2-нафтилсульфонил)- L-аспарагинил] -N-метилглицина; MS (ионное распыление): 561,5 (M+H)⁺; д) гидрохлорид сложного этилового эфира N-[N4-[[(S)-1-амидино-3-пиперидинил]метил]-N2-(2-нафтилсульфонил)-L- аспарагинил]-N-изопропилглицина; MS (ионное распыление): 589,0 (M+H)⁺; е) гидрохлорид сложного этилового эфира (S)-[N-аллил-[3-(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметилкарбамоил] -2-(2- нафтилсульфониламино)пропионил]амино]уксусной кислоты; MS (ионное распыление): 587,0 (M+H)⁺; ж) гидрохлорид сложного этилового эфира N-[(S)-3-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметилкарбамоил] -2-(нафталин-2- илсульфониламино)пропионил] бутиламино]уксусной кислоты; MS (ионное распыление): 603,2 (M+H)⁺; з) гидрохлорид сложного этилового эфира N-[N4-[[(S)-1-амидино-3-пиперидинил]метил]-N2-(2-нафтилсульфонил)- L-аспарагинил]-N-(циклопропилметил)глицина; MS (ионное распыление): 601,2 (M+H)⁺; и) гидрохлорид (S)-N4-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметил]-N1-этоксикарбонилметил- N1-циклопентил-2-(нафталин-2-илсульфониламино)сукцинамида; MS (ионное распыление): 615,2 (M+H)⁺; к) гидрохлорид сложного этилового эфира N-[N4-[[(S)-1-амидино-3- пиперидинил]метил]-N2-(2-нафтилсульфонил)-L-аспарагинил]-L-лейцина; MS (ионное распыление): 603,0 (M+H)⁺; л) гидрохлорид сложного этилового эфира N-[N4-[[(S)-1-амидино-3- пиперидинил]метил]-N2-(2-нафтилсульфонил)-L-аспарагинил]-N-циклопропил- аланина; MS (ионное распыление): 601,3 (M+H)⁺; м) гидрохлорид сложного этилового эфира (S)-3-[аллил-[3-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметилкарбамоил] -2-(2- нафталин-2-илсульфониламино)пропионил] пропионовой кислоты; MS (ионное распыление): 601,2 (М+Н)⁺; н) гидрохлорид (S)-N4-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметил]-N1-бутил-N1- (2-этоксикарбонилэтил)-2-(нафталин-2-илсульфониламино)сукцинамида; MS (ионное распыление): 617,5 (M+H)⁺; о) гидрохлорид сложного этилового эфира (S)-3-[(S)-1-(аминоиминометил)пиперидин-3-илметилкарбамоил] -2-(нафталин-2- илсульфониламино)-N-пентилпропиониламиноуксусной кислоты; MS (ионное распыление): 617,1 (M+H)⁺.

2Б) Получение исходных материалов: 2Б) а) К раствору 15,4 мл циклопропиламина в 100 мл толуола добавляют 14,0 мл сложного этилового эфира 3-бромпропионовой кислоты и нагревают реакционную смесь 3 часа до 90^oС. Затем фильтруют выпавшую в осадок соль и фильтрат дистиллируют. Получают 9,5 г сложного этилового эфира N-циклопропил--аланина, FAB-MS: 157 (M+H)⁺.

2Б) б) Аналогично способу 2Б) а) при использовании аллиламина или бутиламина вместо циклопропиламина получают следующие соединения: 1) сложный этиловый эфир N-аллил--аланина, FAB-MS: 157 (M⁺); 2) сложный этиловый эфир 3-бутиламинопропионовой кислоты, FAB-MS: 173 (M⁺).

2Б) в) Аналогично примеру 1а), но при использовании N-замещенного сложного эфира глицина вместо сложного этилового эфира N-циклогексилглицина получают следующие сложные триэфиры: 2Б)в)1) трет-бутил(S)-2-(2-трет-бутоксиформамидо)-N-циклопропил-N- [(этоксикарбонил)метил]сукцинамат, FAB-MS: 415 (M⁺); 2Б)в)2) сложный бутиловый эфир (S)-N-бензил-3-трет-бутоксикарбониламино-N-этоксикарбонилметилсукцинаминовой кислоты, MS (ионное распыление): 546,2 (M+H)⁺; 2Б)в)3) сложный бутиловый эфир (S)-3-трет-бутоксикарбониламино-N- циклогексилметил-N-метоксикарбонилметилсукцинаминовой кислоты, MS (ионное распыление): 457,3 (M+H)⁺.

2Б) г) Аналогично примеру 1б) получают следующие соединения: 2Б)г)1) сложный трет-бутиловый эфир (S)-N-циклопропил-N-этоксикарбонилметил-3-(нафталин-2-илсульфониламино)сукцинаминовой кислоты, FAB-MS: 505 (M + H)⁺; 2Б)г)2) сложный трет-бутиловый эфир (S)-N-бензил-N-этоксикарбонилметил-3-(нафталин-2-илсульфониламино)-сукцинаминовой кислоты, MS (ионное распыление): 555,2 (M + H)⁺; 2Б)г)3) сложный трет-бутиловый эфир (S)-N-циклогексилметил-N-метоксикарбонилметил-3-(нафталин-2-илсульфониламино)-сукцинаминовой кислоты, MS (ионное распыление): 547,2 (M + H)⁺; 2Б)д) К раствору 5,78 г сложного бета-трет-бутилового эфира N-Boc-L-аспарагиновой кислоты в 100 мл метиленхлорида поочередно добавляют 10,6 мл 4-этилморфолина, 4,6 г гидрохлорида N-(диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимида, 244 мг 4-диметиламинопиридина и 3,1 г гидрохлорида сложного этилового эфира саркозина. После перемешивания реакционную смесь выливают в ледяной раствор 5%-ного гидросульфата калия - 10%-ного сульфата калия и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу промывают водой, затем высушивают, выпаривают и остаток хроматографируют смесью н-гексана и этилацетата (3 : 1) на силикагеле. Получают 6,8 г сложного трет-бутилового эфира (S)-3-трет-бутоксикарбониламино-N-этоксикарбонилметил-N-метилсукцинаминовой кислоты, MS (ионное распыление): 389,4 (M + H)⁺; 2Б)е) Аналогично 2Б)д), но при использовании N-замещенных сложных глициновых эфиров вместо сложного этилового эфира саркозина, получают следующие сложные триэфиры: 2Б)е)1) сложный трет-бутиловый эфир (S)-3-трет-бутоксикарбониламино-N-этоксикарбонилметил-N-изопропилсукцинаминовой кислоты, MS (ионное распыление): 417,1 (M + H)⁺; 2Б)е)2) трет-бутил-(S)-N-аллил-N-[(этоксикарбонил)метил] -3-(1-трет-бутоксиформамидо)сукцинамат, MS (ионное распыление): 415,2 (M + H)⁺; 2Б)е)3