Антитромботические азациклоалкилалканоилпептиды

Антитромботические азациклоалкилалканоилпептиды

Реферат

 

Антитромботические пептиды формулы 1, где A, R -водород, В - алкил; Z обозначает -NE-CHF-(CO)_r-G; Е -водород; F - Н, алкил, гидроксиалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, аралкил или замещенный аралкил; G -циклоалкилалкил, OR¹ или NR¹R², R¹, R² - Н или алкил, r = 0 или 1, m = 1-5, n = 0-6, р = 1-4, или их фармацевтически приемлемые соли, применимы для профилактики и лечения тромбоза. 4 с. и 9 з.п. ф-лы, 1 табл.

Данная заявка является частичным продолжением находящейся в процессе одновременного рассмотрения заявки США N 08/138 820, поданной 15 октября 1993 года.

Это изобретение касается соединений, имеющих антитромботическую активность. Более конкретно, изобретение касается азациклоалкилалканоилпептидов и псевдопептидов, которые ингибируют агрегацию тромбоцитов и образование тромбов у млекопитающих и которые применимы для профилактики и лечения тромбоза, связанного с такими патологическими состояниями, как инфаркт миокарда, тромботический инсульт, поражение периферической артерии и диссеминированное внутрисосудистое свертывание.

Гемостаз, биохимия свертывания крови, представляет собой чрезвычайно сложный феномен, посредством которого нормальная цельная кровь и ткань тела самопроизвольно останавливают кровотечение из поврежденных кровеносных сосудов. Эффективный гемостаз требует комбинированной активности сосудистых, тромбоцитарных и плазматических факторов, а также регулируемого механизма для предотвращения избыточного свертывания. Дефекты, отсутствие или избыток любого из этих компонентов могут привести к геморрагическим или тромботическим последствиям.

Адгезия тромбоцитов, разрастание и агрегация на внеклеточных матриксах являются центральными событиями в образовании тромба. Эти события опосредованы семейством адгезивных гликопротеинов, т.е. фибриногена, фибронектина и фактора фон Виллебранда. Фибриноген представляет собой кофактор агрегации тромбоцитов, тогда как фибронектин поддерживает присоединение тромбоцитов и реакции разрастания, а фактор фон Виллебранда важен для присоединения тромбоцитов к субэндотелиальному матриксу и распространения на нем. Сайты связывания для фибриногена, фибронектина и фактора фон Виллебранда были обнаружены на белковом комплексе мембран тромбоцитов, известном как гликопротеин IIb/IIIa.

Адгезивные гликопротеины, подобные фибриногену, не связываются с нормальными покоящимися тромбоцитами. Однако при активации тромбоцита агонистом, таким как тромбин или аденозиндифосфат, тромбоцит изменяет свою форму, возможно, делая сайты связывания GPIIb/IIIa доступными для фибриногена. Соединения в объеме данного изобретения блокируют рецептор фибриногена, ингибируя, таким образом, агрегацию тромбоцитов, и при введении в форме фармацевтических композиций, содержащих такие соединения, применимы для предотвращения и лечения тромбообразующих заболеваний, таких как инфаркт миокарда, тромботический инсульт, поражение периферической артерии и диссеминированное внутрисосудистое свертывание.

Известно, что присутствие Arg-Gly-Asp (RGD) является необходимым в фибриногене, фибронектине и факторе фон Виллебранда для их взаимодействия с рецептором поверхности клетки (Ruoslahti Е., Pierschbacher, Cell 1986, 44, 517-18). По-видимому, две другие аминокислотные последовательности также принимают участие в функции присоединения тромбоцитов фибриногена, а именно, Gly-Pro-Arg и последовательность додекапептида His-His-Leu-Gly-Gly-Ala-Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val. Показано, что небольшие синтетические пептиды, содержащие RGD или додекапептид, связываются с рецептором тромбоцитов GPIIb/IIIa и конкурентно ингибируют связывание фибриногена, фибронектина и фактора фон Виллебранда, а также ингибируют агрегацию активированных тромбоцитов (Plow, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1985, 82, 8057-61; Ruggeri, et al. , Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1986, 5708-12; Ginsberg, et al., J.Biol. Chem. 1985, 260, 3931-36; Gartner, et al., J.Biol.Chem. 1987, 260, 11, 891-94).

Известно, что содержащие индолил соединения, включающие в себя гуанидиноалканоил- и гуанидиноалкеноиласпартил, являются ингибиторами агрегации тромбоцитов (Tjoeng, et аl., патент США N 5037808 и N 4879313).

Патент США N 4992463 (Tjoeng et al.), выданный 12 февраля 1991 г., описывает ряд арил- и аралкилгуанидиноалкилпептидных миметических соединений, которые проявляют активность ингибирования агрегации тромбоцитов, и описывает конкретно ряд моно- и диметоксифенилпептидных миметических соединений и бифенилалкилпептидное миметическое соединение.

Патент США N 4857508 (Adams, et al), выданный 15 августа 1989 г., описывает ряд гуанидиноалкилпептидных производных, содержащих концевые аралкильные заместители, которые проявляют активность ингибирования агрегации тромбоцитов, и описывает конкретно ряд содержащих О-метилтирозин, бифенил и нафтилпроизводных, имеющих концевую амидную группу.

Haverstick, D. M. , et al., в Blood 66(4), 946-952 (1985) описывают ряд синтетических пептидов, включающих в себя Arg-Gly-Asp-Ser и Gly-Arg-Gly-Asp-Ser, способных ингибировать индуцированную тромбином агрегацию тромбоцитов.

Plow, E. F. , et ai., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 79, 3711-3715 (1982) описывают, что тетрапептид глицил-L-пролил-L-аргинил-L- пролин ингибирует связывание фибриногена с тромбоцитами человека.

Заявка Франции N 86/17507 от 15.12.1986 г., раскрывает, что тетра-, пента- и гексапептидные производные, содержащие последовательность -Arg-Gly-Asp- применимы в качестве антитромботических средств.

Патент США N 4683291 (Zimmerman, et al.), выданный 28 июля 1987 г., сообщает, что ряд пептидов, состоящих из 6-40 аминокислот, содержащих последовательность -Arg-Gly-Asp-, является ингибиторами связывания тромбоцитов.

ЕПВ N 0319506, опубликованная 7 июня 1989 г., раскрывает ряд тетра-, пента- и гексапептидных производных, содержащих последовательность -Arg-Gly-Asp-, являющихся ингибиторами агрегации тромбоцитов.

В патенте США N 5023233 сообщается, что циклические пептидные аналоги, содержащие последовательность Gly-Asp, являются антагонистами рецептора фибриногена.

В ожидающих решения заявки США NN 07/677006, 07/534385 и 07/460777, поданных 28 марта 1991 г., 7 июня 1990 г. и 4 января 1990 г., соответственно, а также в U. S. Patent N 4952562 и International Application N PCT/US90/05448, поданной 25 сентября 1990 г., описываются пептиды и псевдопептиды, содержащие амино-, гуанидиногруппу, имидизалоил, и/или аминоалканоил и алкеноил, являются антитромботическими агентами.

Известно, что пептиды и псевдопептиды, содержащие аминогруппу и радикалы гуанидиноалкил и алкенилбензоил, фенилалканоил и фенилалкеноил, являются антитромботическими агентами (заявка США N 07/475, поданная 5 февраля 1990, N PCT/US91/02471, поданная 11 апреля 1991 г., опубликованная как International Application N WO 92/13117, 29 октября 1992).

В патенте США N 5053392, поданном 1 декабря 1989, и переуступленном тому же правопреемнику, и имеющем тех же авторов, что и данное изобретение, сообщается, что содержащие алканоил и (замещенный алканоил) азациклоалкилформилпроизводные аспарагиновой кислоты являются ингибиторами агрегации тромбоцитов.

В патенте США N 5064814, поданном 5 апреля 1990 г. теми же авторами и переуступленном тому же правопреемнику, сообщается, что производные N-замещенной азациклоалкилкарбонил (циклический аминоацил)аспарагиновой кислоты являются антитромботическими агентами. Производные азациклоалкилформилглициласпарагиновой кислоты являются антитромботическими агентами также согласно патенту США N 5051406, поданному 10 октября 1989 г. и переуступленному тому же правопреемнику, который является правопреемником данного изобретения.

ЕР заявка 0479 481, опубликованная 8 апреля 1992 г., описывает азациклоалкилалканоилглициласпартиламинокислоты в качестве антагонистов рецептора фибриногена.

ЕР заявка N 0478 362, опубликованная 1 апреля 1992 г., описывает азациклоалкилалканоилпептидил -- аланины в качестве антагонистов рецептора фибриногена.

Данное изобретение касается азациклоалкилалканоилпептидов и псевдопептидов, которые ингибируют агрегацию тромбоцитов и тромбообразование.

Краткое изложение сущности изобретения Соединения данного изобретения имеют формулу I в которой А представляет собой -H, амидиногруппу или замещенную амидиногруппу; B представляет собой алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкил, алкилциклоалкилалкил, арил, аралкил, алкиларил или алкиларалкил Z представляет собой: в которой E обозначает -H или, в комбинации с F, образует 4-, 5-, 6- или 7-членное азациклоалкановое кольцо, F обозначает - углеродную боковую цепь природной - аминокислоты, -H, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкил, алкилциклоалкилалкил, арил, замещенный арил, аралкил, замещенный аралкил, гетероциклил, замещенный гетероциклил, гетероциклилалкил, замещенный гетероциклилалкил или, в комбинации с E, образует 4-, 5-, 6- или 7-членное азациклоалкановое кольцо.

G обозначает алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкил, алкилциклоалкилалкил, арил, замещенный арил, аралкил, замещенный аралкил, гетероциклил, замещенный гетероциклил, гетероциклилалкил, замещенный гетероциклилалкил, OR¹ или NR¹R², где R¹ и R² независимо обозначают -H, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкил, алкилциклоалкилалкил, арил, аралкил, алкиларил или алкиларалкил и r обозначает 0 или 1; R обозначает -H, алкил, арил или аралкил; m обозначает 1-5; n обозначает 0-6; и р обозначает 1-4; или являются их фармацевтически приемлемой солью.

Кроме того, данное изобретение касается фармацевтических композиций, содержащих такие соединения, и способов профилактики или лечения тромбоза у млекопитающих, требующих такого лечения, предусматривающих введение таких соединений и фармацевтических композиций.

Данное изобретение характеризуется заметной и пролонгированной антитромботической активностью соединений формулы I, представленной выше, причем активность наблюдается после перорального введения этих соединений.

Как в предшествующем тексте, так и во всем этом изобретении следующие ниже термины будут иметь следующие значения (если нет других указаний); "Амидино" обозначает группу "Замещенная амидино" обозначает амидиногруппу, N-замещенную на одном или обоих атомах азота одним или более алкилом, циклоалкилом, циклоалкилалкилом, алкилциклоалкилом, алкилциклоалкилалкилом, арилом или аралкилом.

"Алкил" обозначает насыщенную алифатическую углеводородную группу, которая может быть прямой или разветвленной, имеющую приблизительно 1-20 атомов углерода в цепи. Разветвленная группа обозначает, что группа низшего алкила, такая как метил, этил или пропил, присоединена к линейной цепи алкила. Предпочтительными прямыми или разветвленными алкильными группами являются группы "низшего алкила", представляющие собой алкильные группы, имеющие от 1 до приблизительно 10 атомов углерода. Наиболее предпочтительные группы низшего алкила имеют от 1 до приблизительно 5 атомов углерода.

"Циклоалкил" обозначает насыщенную карбоциклическую группу, имеющую одно или более колец, имеющих приблизительно 3-10 атомов углерода. Предпочтительные циклоалкильные группы включают в себя циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и декагидронафтил.

"Циклоалкилалкил" обозначает группу алкила, замещенную циклоалкильной группой. Предпочтительные циклоалкилалкилы включают в себя циклопентилметил, циклогексилметил, циклогексилэтил, декагидронафт-1-илметил и декагидронафт-2-илметил.

"Алкилциклоалкил" обозначает циклоалкил, замещенный алкилом. Примерами алкилциклоалкилов являются 1-, 2-, 3- или 4-метил или этилциклогексил.

"Алкилциклоалкилалкил" обозначает алкил, замещенный алкилциклоалкилом. Примеры алкилциклоалкилалкила включают в себя 1-, 2-, 3- или 4-метил- или этилциклогексилметил или 1-, 2-, 3- или 4-метил- или этилциклогексилэтил.

"Азациклоалкан" обозначает насыщенное алифатическое кольцо, содержащее атом азота. Предпочтительные азациклоалканы включают в себя пирролидин и пиперидин.

"Природная - аминокислота" обозначает глицин, аланин, валин, лейцин, изолейцин, серин, треонин, фенилаланин, тирозин, триптофан, цистеин, метионин, пролин, гидроксипролин, аспарагиновую кислоту, аспарагин, глутамин, глутаминовую кислоту, гистидин, аргинин, орнитин и лизин.

"- углеродная боковая цепь природной - аминокислоты" обозначает часть молекулы, которая замещает - углерод природной - аминокислоты. Примеры - углеродных боковых цепей природных - аминокислот включают в себя изопропил, метил и карбоксиметил для валина, аланина и аспарагиновой кислоты соответственно.

"Арил" обозначает фенил или нафтил.

"Замещенный арил" обозначает фенил или нафтил, замещенные одним или более заместителями арильной группы, которые могут быть одинаковыми или различными, где "заместитель арильной группы" включает в себя алкил, алкенил, алкинил, арил, аралкил, гидроксигруппу, алкоксигруппу, арилоксигруппу, аралкоксигруппу, гидроксиалкил, ацил, формил, карбоксигруппу, алкеноил, ароил, галоген, нитрогруппу, тригалогенметил, цианогруппу, алкоксикарбонил, арилоксикарбонил, аралкоксикарбонил, ациламиногруппу, ароиламиногруппу, карбамоил, алкилкарбамоил, диалкилкарбамоил, арилкарбамоил, аралкилкарбамоил, алкилсульфонил, алкилсульфинил, арилсульфонил, арилсульфинил, аралкилсульфонил, аралкилсульфинил или - NR_aR_b, где R_a и R_b обозначают независимо водород, алкил, арил или аралкил.

"Аралкил" обозначает алкил, замещенный радикалом арилом. Предпочтительные аралкильные группы включают в себя бензил, нафт-1-илметил, нафт-2-илметил и фенетил.

"Замещенный аралкил" обозначает аралкил, замещенный арильной частью одного или более заместителей арильной группы.

"Гетероциклил" обозначает 4-15-членную моноциклическую или полициклическую систему, в которой один или более атомов в кольце представляют собой элемент, иной, чем углерод, например азот, кислород или серу. Предпочтительные гетероциклильные группы включают в себя пиридил, пиримидил и пирролидил.

"Замещенный гетероциклил" обозначает гетероциклил, замещенный одним или более заместителями арильной группы.

"Гетероциклоалкил" и "замещенный гетероциклилалкиk" обозначают алкил, который замещен гетероциклилом и замещенным гетероциклилом соответственно.

Предпочтительный класс соединений данного изобретения описывается формулой 1, в которой F обозначает -H, алкил, гидроксиметил, 1-гидроксиэтил, меркаптометил, 2-метилтиоэтил, карбоксиметил, 2-карбоксиэтил, 4-аминобутил, 3-гуанидинопропил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкил, алкилциклоалкилалкил, арил, замещенный арил, аралкил, замещенный аралкил, гетероциклил, замещенный гетероциклил, гетероциклилалкил, замещенный гетероциклилалкил или, в комбинации с E, образует 4-,5-, 6- или 7- членное азациклоалкановое кольцо, при условии, что гетероциклилалкил иной, чем индол-3-илметил.

Более предпочтительный класс соединений данного изобретения описан в виде предпочтительного класса соединений, в которых F обозначает -H, алкил, гидроксиметил, 1-гидроксиэтил, меркаптометил 2-метилтиоэтил, карбоксиметил, 2-карбоксиэтил, 4-аминобутил, 3-гуанидинопропил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкил, алкилциклоалкилалкил, арил, замещенный арил, аралкил, замещенный аралкил или, в комбинации с E, образует 4-, 5-, 6- или 7-членное азациклоалкановое кольцо.

Еще более предпочтительный класс соединений данного изобретения описывается более предпочтительным классом соединений, в которых F обозначает -H, алкил, гидроксиметил, 1-гидроксиэтил, меркаптометил, 2-метилтиоэтил, карбоксиметил, 2-карбоксиэтил, 4-аминобутил, 3-гуанидинопропил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкил, алкилциклоалкилалкил или, в комбинации с E, образует 4-, 5-, 6- или 7-членное кольцо азациклоалкана.

Наиболее предпочтительный класс соединений данного изобретения описывается еще более предпочтительным классом соединений, в которых В обозначает алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкил или алкилциклоалкилалкил.

Особый вариант данного изобретения описывается формулой II: в которой A обозначает -H или амидиногруппу, B обозначает алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкил, алкилциклоалкилалкил, арил, аралкил, алкиларил или алкиларалкил, j обозначает -H, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкил, алкилциклоалкилалкил, арил, замещенный арил, аралкил, замещенный аралкил, L обозначает OR¹ или NR¹R², где R¹ и R² обозначают независимо -H, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкил, алкилциклоалкилалкил, арил, аралкил, алкиларил или алкиларалкил.

m обозначает 1-5, n обозначает 2-6 и p обозначает 1 или 2, или является фармацевтически приемлемой солью этого соединения.

Более предпочтительный особый вариант данного изобретения описывается соединениями особого варианта, в которых А обозначает -H, B обозначает алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкил, алкилциклоалкилалкил, j обозначает -H, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкил или алкилциклоалкилалкил, m обозначает 3 и n обозначает 3 или 4.

Наиболее предпочтительный особый вариант данного изобретения описывается соединениями более предпочтительного особого варианта, в котором А обозначает -H, B обозначает алкил, j обозначает алкил, циклоалкил или циклоалкилалкил, R¹ и R² независимо обозначают -H, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкилциклоалкил, алкилциклоалкилалкил, m обозначает 3, n обозначает 3 или 4 и p обозначает 1.

Характерные соединения данного изобретения включают в себя: N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N-этилглицил]аспартил]-валин, N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N-этилглицил]аспартил]-D-валин, N-[N-[N-(3-пиперидин-4-ил)пропаноил)-N-этилглицил]аспартил]-валин, N-[N-[N-(5-(пиперидин-4-ил)пентаноил)-N-этилглицил]аспартил]-валин, N-[N-[N-(4-пиперидин-4-ил)бутаноил)-N-этилглицил] аспартил] -L-- циклогексилглицин, N-[N-[N-(4-пиперидин-4-ил)бутаноил)-N-этилглицил] аспартил] -- циклогексилаланин, N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил]аспартил]норлейцин, N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил] acпapтил] -L- - (2,2-диметил)проп-3-илглицин, N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил] аспартил]-L- - декагидронафтил-1-илаланин, N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил]аспартил]-L- - (2-циклогексилэтил)глицин, N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил]аспартил]фенилаланин, N-[N-[N-(4-пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил] аспартил] -L- - нафт-1-илаланин, N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил[аспартил] -L- - нафт-2-илаланин, N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N-этилглицил] аспартил] -L- - циклогексилаланинамид, Этиловый эфир N-[N-[N-(4-(пиперидин)бутаноил)-N- этилглицил]аспартил]-L- -- циклогексилаланина, 2-циклогексил-N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил] аспартил]-этиламин, N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил] аспартил] -L- - цис-декагидронафт-2-илаланин, 3-aдaмaнт-1-илпpoпил-N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил] аспартат, N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил] аспартил] -- аминоциклогексанкарбоновая кислота, N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил] аспартил] -- циклогексил-D-аланин, N-[N-[N-(4-пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил] аспартил] -- декагидронафт-1-илаланин, N-[N-[N-(4-пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил] аспартил] -- циклогексилаланинэтиламид, N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил] аспартил] -- циклооктилаланин, N-[N-[N-(4-пиперидин-4-ил)бутаноил)- N-этилглицил] аспартил] -- циклогексилметилэтаноламин, N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил]аспартил] -- циклогексилметилаланинамид, N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил]аспартил] -- адамант-1-илаланин, N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил] acпapтил] -- (1,2,3,4)-тетрагидронафт-5-илаланин, N-[N-[N-4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N-этилглицил] аспартил] -- (4-циклогексил)циклогексилаланин, N-[N-[N-[ (4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил]аспартил] -- циклогептилаланин, N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил]аспартил] -- циклооктилаланинамид, N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N-этилглицил] аспартил] -- циклогексилпропилглицин, N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N-этилглицил] аспартил] -- циклооктилметилаланин, N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил]acпapтил] -- циклопентилаланин и этиловый эфир N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил]аспартил] -- циклогексилметилаланина, и их фармацевтически приемлемые соли.

Соединения данного изобретения содержат асимметричные центры. Эти асимметричные центры могут быть независимо в R-конфигурации или в S-конфигурации. Данное изобретение включает в себя отдельные стереоизомеры и их смеси.

Соединения данного изобретения могут применяться в форме свободного основания или кислоты или в форме их фармацевтически приемлемой соли. Все эти формы находятся в объеме данного изобретения.

Если соединение данного изобретения замещено основным радикалом, то могут быть образованы соли с кислотой, которые являются более удобной формой для использования; и на практике применение такой формы соли равнозначно применению формы свободного основания. Кислоты, которые можно применять для получения солей с кислотами, включают в себя предпочтительно те кислоты, которые дают при объединении со свободным основанием фармацевтически приемлемые соли, т. е. соли, анионы которых являются нетоксичными для организма животного в фармацевтических дозах этих солей, так что полезные антитромботические свойства, присущие свободным основаниям, не исчезают вследствие побочных эффектов, приписываемых анионам. Хотя предпочтительны фармацевтически приемлемые соли основных соединений, все соли с кислотой применимы в качестве источников формы свободного основания, даже если конкретная соль, per se, желательна только в качестве промежуточного продукта, например, при образовании соли только для целей очистки или идентификации или при использовании ее в качестве промежуточного продукта в приготовлении фармацевтически приемлемой соли при помощи ионообменной процедуры. Фармацевтически приемлемыми солями в объеме данного изобретения являются соли, полученные из следующих кислот: минеральных кислот, таких как соляная кислота, серная кислота, фосфорная кислота и сульфаминовая кислота; и органических кислот, таких как уксусная кислота, лимонная кислота, молочная кислота, винная кислота, малоновая кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, п-толуолсульфокислота, циклогексилсульфаминовая кислота, хинная кислота и т.п. Соответствующие соли с кислотами включают в себя: гидрохлорид, сульфат, фосфат, сульфамат, ацетат, цитрат, лактат, тартрат, малонат, метансульфонат, этансульфонат, бензолсульфонат, п-толуолсульфонат, циклогексилсульфамат и хиннат, соответственно.

Соли с кислотами соединений данного изобретения получают либо растворением свободного основания в водном или водно-спиртовом растворе или других подходящих растворителях, содержащих подходящую кислоту, и выделением соли выпариванием раствора, либо реакцией свободного основания и кислоты в органическом растворителе, причем в этом случае соль отделяется сразу или она может быть получена концентрированием раствора.

Если соединение изобретения замещено кислотной частью молекулы, то соли с основанием могут быть образованы и они являются абсолютно более удобной формой для применения; и на практике применение такой соли равнозначно применению формы свободной кислоты. Основания, которые можно применять для получения солей с основаниями, включают в себя предпочтительно те основания, которые при взаимодействии со свободной кислотой образуют фармацевтически приемлемые соли, т.е. соли, катионы которых являются нетоксичными для организма животного в фармацевтических дозах этих солей, так что полезные антитромботические свойства, присущие свободной кислоте, не исчезают вследствие побочных эффектов, приписываемых катионам. Фармацевтически приемлемыми солями в объеме данного изобретения являются соли, полученные из следующих оснований: гидроксида натрия, гидроксида калия, гидроксида кальция, гидроксида алюминия, гидроксида лития, гидроксида магния, гидроксида цинка, аммиака, этилендиамина, N-метилглутамина, лизина, аргинина, орнитина, прокаина, N-бензилфенетилдиамина, диэтиламина, холина, N,N'-бензилфенетиламина, пиперазина, трис(гидроксиметил)аминометана, гидроксида тетраметиламмония и т.п.

Соли металлов соединений данного изобретения можно получить контактированием гидроксида, карбоната или подобного реактивного соединения выбранного металла в водном растворителе с формой свободной кислоты данного соединения. Используемым водным растворителем может быть вода или смесь воды с органическим растворителем, предпочтительно спиртом, таким как метанол или этанол, или кетоном, таким как ацетон, алифатическим простым эфиром, таким как тетрагидрофуран, или сложным эфиром, таким как этилацетат. Такие реакции обычно проводят при комнатной температуре, но их можно проводить, при желании, с нагреванием.

Соли аминов соединений данного изобретения можно получить контактированием амина в водном растворителе со свободной кислотной формой данного соединения. Подходящими водными растворителями являются вода и смеси воды со спиртами, такими как метанол или этанол, простыми эфирами, такими как тетрагидрофуран, нитрилами, такими как ацетонитрил, или кетонами, такими как ацетон. Подобным образом можно получить также соли с аминокислотами.

Соединения этого изобретения можно получать в соответствии с описанными ниже последовательностями реакций или их можно получать способами, известными в данной области. Исходные материалы, применимые в получении соединений этого изобретения, известны или коммерчески доступны или они могут быть приготовлены известными способами или по описанным здесь характерным схемам реакций.

Соединения данного изобретения можно легко получить при помощи процедур стандартного пептидного синтеза в твердой фазе или в фазе раствора с применением исходных материалов и/или легко доступных промежуточных продуктов из поставляющих химических компаний, таких как Aldrich или Sigma (Н. Paulsen, G. Merz, V. Weichart, "Solid Phase Synthesis of O-Glycopeptide Sequences", Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 27 (1988); Н. Mergler, R. Tanner, J. Gosteli, and P. Grogg, "Peptide Synthesis by a Combination of Solid-Phase and Soluti on Methods 1: A New Very Acid-Labile Anchor Group for the Solid-Phase Synthesis of Fully Protected Fragments. Tetrahedron letters 29, 4005 (1988); Merrifield, R. B. "Solid Phase Peptide Synthesis after 25 Years: The Design and Synthesis of Antagonists of Glucagon", Makromol. Chem. Macromol. Symp. 19, 31 (1988).

Предпочтительным способом получения соединений данного изобретения является жидкофазный способ, изображенный в схеме 1 (см. в конце описания).

в которой A, B, E, F, G, R, m, n, p и r имеют определенные выше значения; A', E', F', G' и R' обозначают A, B, E, F, G и R соответственно, или они защищены их аналогами или замещены предшественниками заместителей; и P₁, P₂, и P₃ обозначают защитные группы для аминокислот.

Соединения данного изобретения получают обычно в результате первоначального присоединения подходящей аминокислоты или другой подходящей группы Z (предшественника), где Z имеет указанное выше значение, которая содержит свободный первичный и вторичный амин, со свободной частью карбоновой кислоты защищенного производного аспарагиновой кислоты.

Функциональные группы аспарагиновой кислоты или любые функциональные группы предшественника Z группы, которые не должны соединяться, защищены, если необходимо, блокирующими группами для предотвращения перекрестной реакции во время процедуры присоединения, так же как и производные аминокислот и производные азациклоалкилалкановой кислоты, применяемые в последующих стадиях синтеза. Эти блокирующие группы включают в себя N-- трет- бутилоксикарбонил (ВОС), бензилоксикарбонил (CBZ), бензил, метил, т-бутил, 9-флуоренилметилоксикарбонил (FMOC), 2-(триметилсилил)- этил и 4-метокси-2,3,6-триметилбезолсульфонил.

Предпочтительным защищенным производным аспарагиновой кислоты является - бензиловый эфир ВОС-аспарагиновой кислоты. Взаимодействие проводят способами, известными в этой области. Предпочтительным способом проведения соединения является объединение амина и карбоновой кислоты в подходящем апротонном органическом растворителе, например метиленхлориде или диметилформамиде (DMF), в присутствии подходящих связующих веществ. Предпочтительным связующим агентом является изопропилхлорформат в присутствии N-метилпиперидина. Другим предпочтительным связующим агентом является гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3- этилкарбодиимида (EDC) в присутствии 1-гидроксибензотриазола (НОВТ) и триэтиламина. Еще одним предпочтительным связующим агентом является хлорангидрид бис(2-оксо-3-оксазолидинил)-фосфоновой кислоты (ВОР-С1) в присутствии триэтиламина.

Полученный защищенный продукт селективно освобождается от защитных групп известными способами с образованием N-концевого свободного амина части аспарагиновой кислоты. Предпочтительным способом для удаления ВОС группы является обработка трифторуксусной кислотой в апротонном органическом растворителе, например метиленхлориде.

Затем полученный, освобожденный от защитных групп продукт соединяют с N-защищенным N-замещенным производным глицина или - аланина, имеющим свободную карбоксильную группу. Затем полученный продукт освобождают от N-защитных групп. Полученный свободный амин затем соединяют с подходящей защищенной азациклоалкилалкановой кислотой и этот продукт освобождают от защитных групп (депротектируют) известными способами, получая конечный продукт.

В другом предпочтительном способе соединения данного изобретения можно получать твердофазными способами, хорошо известными в этой области. В таком твердофазном способе C-концевой остаток связывают по карбоксильной части с нерастворимой смолой, например, остаток можно связать в виде сложного эфира полимера n-алкоксибензилового спирта. Способом, подобным жидкофазному способу, защищенную аминокислоту или другие остатки добавляют по одному до тех пор, пока вся последовательность не будет построена на полимере. Затем это соединение депротектируют и выделяют из смолы стандартными способами, получая конечное соединение Во время получения соединений данного изобретения или полупродуктов их синтеза может быть желательно или необходимо предотвратить перекрестную реакцию между химически активными заместителями, иными, чем те, которые присутствуют у природных или других аминокислотах. Эти заместители могут быть защищены стандартными защитными группами, которые затем могут быть удалены или сохранены, если необходимо, известными способами для получения целевых продуктов или промежуточных продуктов (см. , например. Green, "Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley, New York, 1981). Селективная защита или депротектирование могут быть также необходимыми или желательными, чтобы сделать возможными превращение или удаление существующих заместителей и получение в последующей реакции конечного целевого продукта.

Далее изобретение поясняется иллюстративными примерами. В следующих далее примерах, если нет других указаний, - аминокислоты, которые могут иметь хиральные - углероды, находятся в L-конфигурации.

Если нет других указаний, сообщаемые данные масс-спектрального анализа получали способом Lou Resolution Fast Atom Bombard - ment, проводимым на VG 70SE с "рассчитанными" величинами (М+Н)⁺. Спектральные данные ядерного магнитного резонанса получают на Brucker ACF 300, в D₂O. Флэш-хроматографию выполняли на силикагеле. Жидкостная хроматография высокого разрешения (ЖХВР, HPLC) проведена на Dynamax 8 микрон С-18 колонке с обращенной фазой.

Пример 1 N-[N-[N-(4-(пиперидин-4-ил)бутаноил)-N- этилглицил] аспартил] - циклогексилаланин А. - циклогексилаланин (1,12 г) растворяют в метаноле (50 мл) и пропускают газообразный хлористый водород через раствор в течение приблизительно 15 минут. Раствор выпаривают в вакууме и перегоняют в виде азеотропа с толуолом из осадка, получая метиловый эфир - циклогексил-L-аланина в виде соли гидрохлорида.

B. - бензиловый эфир BOC-L-аспарагиновой кислоты (1,27 г) растворяют в метиленхлориде (20 мл). Раствор охлаждают до 0^oC и добавляют N-метилпиперидин (0,48 мл), а затем изопропилхлорформиат (3,94 мл). Этот раствор перемешивают при 0^oC в течение приблизительно 2 минут и добавляют гидрохлорид метилового эфира - циклогексил-L-аланина (0,88 г). Раствору дают согреться до комнатной температуры и перемешивают в течение ночи. Раствор выпаривают в вакууме и остаток распределяют между этилацетатом (200 мл) и 1 н. соляной кислотой (HCl) (50 мл). Органический слой промывают 1 н. HCl, насыщенным раствором бикарбоната натрия, солевым раствором, сушат над сульфатом магния, фильтруют и выпаривают в вакууме, получая метиловый эфир N-/BOC-L-acпapтил] (- бeнзиловый эфир)] -- циклогексил-L-аланина.

С. Метиловый эфир N-[ВОС-L-аспартил (- бензиловый эфир)]- - циклогексилаланина (2,01 г) растворяют в метиленхлориде (15 мл). Раствор охлаждают до 0^oC и добавляют трифторуксусную кислоту (5 мл) в течение периода приблизительно 1 мин. Этот раствор перемешивают при 0^oC в течение 2 часов, выпаривают в вакууме и остаток поглощают в этилацетат, после чего органический раствор промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия до тех пор, пока промывки не станут щелочными. Этот органический раствор промывают солевым раствором, сушат над сульфатом магния, фильтруют и выпаривают в вакууме, получая метиловый эфир L-аспартил (- бензиловый эфир) -- циклогексил-L-аланина.

D. Используя процедуру примера 1В, описанную выше, с последующей процедурой удаления защитных групп согласно примеру С, получают метиловый эфир N-этилглицил-L- аспартил -(- бензиловый эфир) -L-- циклогексил-L-аланина из метилового эфира L- аспартил- (- бензиловый эфир) -- циклогексил-L-аланина и N-BOC-N- этилглицина.

Е. Смешивают 4-пиридинуксусную кислоту (10 г) и оксид платины (1,0 г) в уксусной кислоте (100 мл) и смесь качают под водородом при 50 psi (344734,85 Па) в течение приблизительно 18 часов. Смесь фильтруют и раствор выпаривают в вакууме и перегоняют в виде азеотропа с тотуолом из остатка, получая 2-(пиперидин-4-ил) уксусную кислоту.

F. 2-(пиперидин-4-ил) уксусную кислоту (11,6 г) растворяют в 1 N водном растворе гидроксида натрия (200 мл) и раствор охлаждают до 0^oC. К нему по каплям добавляют раствор ди-трет- бутилдикарбоната (18,0 г) в тетрагидрофуране (THF) (100 мл) и смеси дают нагреться до комнатной температуры и перемешивают в течени