Фармацевтическая композиция, ингибирующая костную резорбцию или промотирующая остеогенез

Фармацевтическая композиция, ингибирующая костную резорбцию или промотирующая остеогенез

Реферат

 

Фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I): Х - У - Z, где Y представлен следующими формулами III, IV и V: Х представляет одновалентную группу соединения типа тетрациклина, а Z представляет одновалентную группу соединения стероидного типа, такого, как эстроген. Соединение может концентрироваться на костной ткани и обладает функциями, ингибирующими резорбцию и промотирующими остеогенез. Изобретение расширяет арсенал эффективных промоторов остеогенеза. 9 з.п. ф-лы, 7 ил., 10 табл.

Изобретение относится к фармацевтической композиции, которая обладает новыми функциями, ингибирующими костную резорбцию или усиливающую остеогенез.

Нормальное сохранение костей осуществляется за счет баланса костной резорбции и остеогенеза, и, если усиливается костная резорбция, компоненты костей растворяются и уменьшаются, что приводит к такому костному заболеванию, как остеопороз. Известно, что такие половые гормоны, как эстроген, функционируют таким образом, что подавляют костную резорбцию, и поэтому их используют в Европе и Америке как профилактическое или лечебное средство для больных остеопорозом. Тем не менее, до сих пор не было подтверждено, что эти гормоны концентрируются в костях, и нельзя исключить возможность карциногенеза за счет однократного введения этих гормонов.

С другой стороны, антибиотики типа тетрациклина обладают свойством концентрирования в костях, но они не способны ни ингибировать костную резорбцию, ни вызывать костеобразование. Только в патенте США N 4925833 указано, что тетрациклин стимулирует синтез костных протеинов в экспериментах на клеточном уровне.

Хотя для остеогенеза необходим синтез костных протеинов, один только синтез костных протеинов не может обеспечить остеогенез.

До сих пор не известны материалы, обладающие способностью промотировать остеогонез, которые можно было бы использовать для профилактики и лечения костных заболеваний.

Соответственно, в настоящем изобретении предлагается лекарственное средство для костных заболеваний, которое обладает способностью ингибировать костную резорбцию, а также способствует остеогенезу, предпочтительно, синергично, и может накапливаться в костях.

Проведены ряд исследований для решения описанных ранее проблем, и обнаружено, что соединения, которые образуются за счет ковалентной связи между антибиотиком типа тетрациклина и таким стероидного типа гормоном, как эстроген, осуществляемой линкером, обладает функцией остеогенеза в дополнение к функции ингибирования костной резорбции, и более того, могут накапливаться в костях, что и составляет предмет настоящего изобретения.

Соответственно, активный компонент настоящего изобретения можно представить формулой /I/: X - Y - Z, (I) /где X представляет одновалентную группу, представленную формулой /II/: где R₁ представляет водород или гидроксильную группу, R₂ представляет водород или гидроксильную группу, R₃ представляет водород или метильную группу, а R₄ представляет водород, галоид или диметиламиногруппу/; Y представляет двухвалентную или трехвалентную группу, представленную формулами /III/, IV/ или /V/: (2) -CH₂ - N - (CH₂CH₂O)_n - CH₂CH₂ - X - (3) (IV) где = O -4, а -X- представляет простую связь, -O- или -NH-/; и представляет одновалентную группу, образуемую за счет удаления водорода или гидроксильной группы из соединения формулы /VI/: /где R_1' представляет HO- или O =; R_2' представляет атом водорода или метильную группу, R_3' представляет атом водорода, фенильную группу или замещенную фенильную группу; R_4' представляет метильную группу или этильную группу; R_5' представляет гидроксильную группу, группу кетона или ацетильную группу; R_6' представляет водород, гидроксильную группу, метильную группу, этинильную группу или пропинильную группу; или R_5' и R_6' вместе образуют = O; R_7' представляет водород, гидроксильную группу или =O, или R_6' и R_7' вместе связаны с кислородами 2,2-диоксипропильной группы, а символ ... представляет простую связь или двойную связь/, за счет чего эта связанная группа существует в 2-положении, 3-положении, 4-положении, 6-положении, 7-положении, или 17-положении, или у фенильной группы, связанной в 11-положении; /1/ формулы /II и /2/ формул /III/-/V/ непосредственно связаны, и /3/ формул /III/-/V/ и любая из связанных групп формулы /VI/ непосредственно связаны/.

В формуле /II/ галоид может быть, например, фтором, хлором, бромом или иодом, и, предпочтительно является хлором.

Фиг. 1 представляет фотографию, демонстрирующую результаты эксперимента N 3.

Фиг. 2 представляет фотографию, демонстрирующую результаты эксперимента N 3.

Фиг. 3 представляет фотографию, демонстрирующую результаты эксперимента N 3.

Фиг. 1-3 соответствуют результатам, полученным при трехкратном повторении каждого эксперимента.

Фиг. 4 представляет график, демонстрирующий действие соединения 1 - 3 на вес тела кастрированных крыс.

Фиг. 5 представляет график, демонстрирующий действие соединения 1 - 3 на плотность костной ткани /ВМД/ кастрированных крыс.

Фиг. 6 представляет график, демонстрирующий действие соединения 1 - 3 на плотность костной ткани /ВМД/ крыс DVX.

Фиг. 7 представляет график, демонстрирующий действие 0,5 мг/день соединения 1 - 3 на плотность костной ткани /ВМД/ крыс DVX.

Примеры одновалентной группы формулы /II/, которая является фрагментом соединения формулы /I/ - активного ингредиента фармацевтической композиции настоящего изобретения - следующие: Формула /II - 1/: Одновалентная группа тетрациклина, представленная формулой /II-I/ /где в формуле /II/, R₁ представляет водород, R₂ представляет гидроксильную группу, R₃ представляет метильную группу, а R₄ представляет водород/; Формула /II-2/ Одновалентная группа тетрациклина, представленная формулой /II-2/ /где в формуле /II/ R₁ представляет гидроксильную группу, R₂ представляет гидроксильную группу, R₃ представляет метильную группу, а R₄ представляет метильную группу/: Одновалентная группа хлортетрациклина, представленная формулой /II-3/ /где в формуле /II/, R₁ представляет водород, R₂ представляет гидроксильную группу, R₃ представляет метильную группу, а R₄ представляет хлор/: Формула /II-4/: Одновалентная группа деокситетрациклина, представленная формулой /II-4/, /где в формуле /II/, R₁ представляет гидроксильную группу, R₂ представляет водород, R₃ представляет метильную группу, а R₄ представляет водород/: Формула /II-5/: Одновалентная группа аминотетрациклина, представленная формулой /II-5/ /где в формуле /II/ R₁ представляет водород, R₂ представляет водород, R₃ представляет водород, а R₄ представляет диметиламиногруппу/: Примеры одновалентных групп соединения формулы /VI/, которое является фрагментом соединения формулы /I/ - активного ингредиента фармацевтической композиции настоящего изобретения - следующие: Одновалентная группа эстрона, представленная формулой /VI-1/ /где в формуле /VI/ R_5' и R_6' вместе образует =O, а R_7' представляет водород/: Формула /VI-2/: Одновалентная группа эстрадиола, представленная формулой /VI-2/ /где в формуле /I/ R_5' представляет гидроксильную группу, R_6' представляет водород, а R_7' представляет водород/: Формула /VI-3/: Одновалентная группа экстраалкинола, представленная формулой /VI-3/, где в формуле /VI/ R_5' представляет гидроксильную группу, R_6' представляет этинильную группу, а R_7' представляет водород/: Формула /VI-4/: Одновалентная группа эстриола, представленная формулой /VI-4/ /где в формуле /VI/ R_5' представляет гидроксильную группу, R_6' представляет водород, а R_7' представляет гидроксильную группу/: Связанная группа соединений формул /VI/-/VI-4/, описанных ранее, существует в 3-положении, 6-положении или 17-положении.

Соединение /VI/ может быть, кроме того, одновалентными группами, которые получают, удаляя водород или гидроксильную группу из следующих соединений (см. в конце описания).

Соответственно, активный ингредиент фармацевтической композиции настоящего изобретения может быть обозначен, например, следующими формулами: /II-1/-/III/-/3/ /VI-1/ /номера в скобках/ /представляют положение группы связи группы формулы /VI-1/: здесь и далее одинаково/ (см. в конце описания).

Описанные выше соединения per se можно получить известными способами. Так например, связывающий фрагмент /линкер/, представленный формулами /III/-/V/ вначале, связан со стероидным соединением, представленным формулой /VI/, а затем полученный продукт связан с материалом типа тетрациклина.

Связывание линкера формулы /III/-/V/ с положением -3 стероидного соединения формулы /VI/ осуществляют, например, в соответствии со следующей схемой реакции (см. в конце описания).

Далее, соединение, в котором R₅, представляет гидроксильную группу, а R₆, представляет водород или этинильную группу, можно получить, например, в следующей реакции (см. в конце описания).

Для того, чтобы связать линкер формул /III/-/V/ с положением 6 стероидного соединения, представленного формулой /VI/, группу =O вначале вводят в 6-положение стероидного соединения, а затем, осуществляют следующую реакцию (см. в конце описания).

Затем тетрациклиновое соединение можно связать с продуктом реакции линкера и стероидного соединения за счет перекрестной сшивки атома азота линкера с атомом азота амидной группы тетрациклинового соединения за счет формальдегида.

Фармацевтическое соединение настоящего изобретения можно вводить перорально или парэнтерально, например, за счет внутривенных, внутримышечных, подкожных инъекций, внутрибрюшинных инъекций и т.д. Эффективная дневная доза для людей составляет от 0,2 до 200 мг при пероральном приеме, и от 0,1 до 100 мг при парэнтеральном введении. Соединения настоящего изобретения обладают крайней низкой токсичностью и ЛД₅₀ при пероральном приеме соединения 1, полученного в примере 1, например, составляет для мышей 143 мг/кг.

Фармацевтические композиции настоящего изобретения могут иметь обычные формы препаратов в соответствии со способом введения. В случае перорального приема, например, фармацевтические соединения могут иметь форму капсул, таблеток, гранул, порошков, жидких препаратов и т.д. Их можно получить обычными способами. Так например, жидкие препараты можно получить, растворяя или суспендируя активный ингредиент настоящего изобретения в такой подходящей среде, как водный буфер или т.п. Препараты порошков можно получить при смешивании активного ингредиента настоящего изобретения с порошкообразным наполнителем, таким, как крахмал /например, кукурузный крахмал/ и/или такими сахаридами как лактоза.

Таблетки получают, смешивая активный ингредиент с наполнителем, таким, как указанные ранее наполнители, и таким связующим, как паста крахмала, и прессуя смесь в машине для таблетирования. Гранулы можно получить, смешивая активный ингредиент с наполнителем, связующим и т.д., смешивая смесь с такой жидкостью, как вода и/или глицерин, пропуская полученный продукт через сито для получения гранул и высушивая полученные гранулы. Капсулы можно получить, заполняя стандартного размера капсулы порошком или гранулами, полученными как указано ранее.

Дозы для парэнтерального введения можно получить, растворяя или суспендируя активный ингредиент в физиологическом солевом растворе или таком буфере, как буфер фосфорной кислоты. Дозы для парэнтерального введения могут быть в виде высушенного вымораживанием продукта, который перед применением нужно растворять или суспендировать, а носителями для сушки вымораживанием могут служить такие сахариды, как лактоза, или обычные носители для сушки вымораживанием.

Примеры Далее приводятся конкретные примеры соединений настоящего изобретения. Однако, основной объем изобретения этими примерами не ограничивается.

Пример получения 1.

101. Получение 3-хлорэтокси-17-оксиэстра-1,3,5(10)-триен /соединение 1-1/ Раствор NaOH добавляют к толуольному раствору, полученному при перемешивании 27,1 г эстрона, 22,2 г сульфоната хлорэтил-n-толуола и небольшого количества триэтиланилинхлорида. После того, как pH доводят до 10, реакцию ведут в течение 4 часов, а растворитель выпаривают. Твердый продукт перекристаллизовывают из спирта, и получают соединение /1-1, R₇=H/. Выход 79%. Т. плавления 86-88^oC. Элементный анализ: C 72,40 H 43 C 10,71.

1-2. Получение N-/17-окси-эстра-1,3,5/10/-триен-3-оксиэтил/пиперизина. /Соединение 1-2/: 7,8 г соединения /1-1/, описанного ранее, 46,6 г безводного пиперазина и 120 мл диметилформамида /ДМФ/ подвергают взаимодействию при температуре 80-100^oC в течение 5 часов. После выпаривания ДМФ полученное твердое вещество снова перекристаллизовывают из спирта и ацетона до получения белого кристаллического соединения /VI/. Выход 85%. Т.плавления 140-142^oC. Элементный анализ: C 75,10 H 9,20 N 7,40.

1-3. Получение N-4-/17-окси-эстра-1,3,5/10/-триен-3-оксиэтил/- пиперазин-1-метилентетрациклина /Соединение 1-3/: 3,8 г соединения /1-2/, описанного ранее, 0,03 г метаформальдегида и 15 мл изопропанола подвергают взаимодействию при 40^oC в течение 2 часов. После добавления 3,5 г тетрациклина, полученную смесь перемешивают, и реакцию ведут в течение 5 часов. После завершения реакции, продукт реакции отфильтровывают, промывают изопропанолом и этиловым эфиром. В результате чего получают твердое вещество желтого цвета /Соединение 1-3/ /R₁ = R₄ H; R₂ = OH, R₃ = CH₃/ Выход 95%. Т. плавления 160^oC /с разложением/ Элементный анализ: C 67,21 H 7,12 N 6,67 Пример получения 2.

2-1. Получение N-/17 - гидрокси-эстра-1,3,5(10)-триен-3-оксиэтил/пиперазина. /Соединение 2-1/: 3,8 г соединения /1-2/ примера 1 растворяют в метиловом спирте. После того, как 0,5 г боргидрата калия добавляют к щелочному раствору, реакционную смесь обрабатывают, нагревая и возвращая поток в течение 3 часов. Реакционный раствор нейтрализуют кислотой, а метиловый спирт выпаривают. Полученный твердый компонент перекристаллизовывают из спирта. И наконец, получают белые кристаллы /соединение 2-1, R₇=H/. Выход 91%.

Т. Плавления = 142 - 142^oC.

Элементный анализ: C 75,21 H 9,23 N 7,14 2-2 Получение N-4-/17 - гидрокси-эстра-1,3,5(10)-триен-3-оксиэтил/-пиперазин-1-метилентетрациклина /Соединение 2-2/: 3,84 г соединения /2-1/, описанного ранее, 0,03 г метанформальдегида и 20 мл изопропанола подвергают взаимодействия при 40^oC в течение 2 часов. После того, как добавляют 3,5 г тетрациклина, реакционную смесь перемешивают, и реакцию ведут в течение 5 часов. После завершения реакции, продукт реакции отфильтровывают и промывают изопропанолом и этиловым эфиром. После этого получают бледно-желтое твердое вещество /соединение 2-2/ /R₁=R₄=H, R₃= OH, R₃=CH₃/. Выход 95%.

Т. плавления 165^oC /с разложением/ Элементный анализ: C 67,30 H 7,34 N 6,54 Пример получения 3 Получение N-4-/17 - гидрокси-эстра-1,3,5-(10)-триен-3-оксиэтил/-1-пиперазин-1- метилен-окситетрациклина /соединение 3-1/ 3,8 г соединения примера 2/2-1/, 0,03 г метаформальдегида и 20 мл изопропанола подвергают взаимодействию при 40^oC в течение 2 часов. После того, как добавляют 3,5 г тетрациклина, реакционную смесь перемешивают и реакцию ведут при перемешивании в течение 5 часов. После завершения реакции смесь обрабатывают по способу примера 1-3, в результате чего получают твердое вещество бледно-желтого цвета /соединение 3/ /R₁=R₂=OH, R₃=CH₃, R₄= H/. Выход 93%.

Т. плавления 171^oC /с разложением/.

Элементный анализ: C 65,62 H 7,10 N 6,67 Пример получения 4 4-1. Получение бис-N,N-/17-окси-эстра-1,3,5-(10)-триен-3-оксиэтил/амина /соединение 4-1/ Раствор NaOH добавляют к смеси 3,6 г мастагенхлорида, 12 г эстрона, 4 г триэтиланилина, воды и толуола при перемешивании. После того, как смешанный раствор кипятят с обратным холодильником в течение 5 часов, растворитель выпаривают. Твердую часть перекристаллизовывают из спирта и получают нужный продукт. Выход 72%.

Т. плавления = 256 - 259^oC.

Элементный анализ: C 78,50 H 8,60 N 2,31 4-2. Получение бис-N,N-/17-окси-эстра-1,3,5/10/-триен-3-оксиэтил/-аминометилентетрациклина /соединение 4-2/: 6,1 г соединения /4-1/, указанного ранее, 0,03 г метаформальдегида и 20 мл изопропанола подвергают взаимодействию при 40^oC в течение 2 часов. После добавления 3,5 г тетрациклина реакционную смесь перемешивают и реакцию ведут при перемешивании в течение 8 часов. После завершения реакции получают твердый продукт бледно-желтого цвета /соединение 4-2/ /R₁ = R₄ = H, R₂ = OH, R₃ = CH₃/. Выход составляет 68%. Т. плавления = 183^oC /с разложением/.

Элементный анализ: C 71,10 H 7,21 N 3,89 Структуры полученных в примере 4 соединений представлены следующими формулами (см. в конце описания).

Пример получения 5 5-1. Получение бис-N,N-/17 - гидрокси-эстра-1,3,5/10/-триен- 3-оксиэтил/амина/ /соединение 5-1/: Метиловый спирт добавляют к 6,1 г указанного ранее соединения /4 - 1/, и, после того, как в щелочных условиях добавляют 0,5 г боргидрата калия, реакцию ведут при кипении с обратным холодильником в течение 5 часов. Затем реакционный раствор нейтрализуют кислотой, и метиловый спирт выпаривают. Твердую часть очищают в ацетоновом растворе и спиртовом растворе. Эстрон-17-кетон в получении соединения /4-1/ восстанавливают до продукта белого цвета, содержащего -17-гидроксильную группу. Выход составляет 82%.

Т. плавления = 193 - 197^oC.

Элементный анализ: C 78,41 H 8,51 N 2,33 5-2. Получение бис-N,N-/17 - гидрокси-эстра-1,3,5(10)-триен- 3-оксиэтил/аминометилентетрациклина /соединение 5-2/: 5,4 г соединения /5-1/, описанного ранее, 0,03 г метаформальдегида и 20 мл изопропанола подвергают взаимодействию при 40^oC в течение 2 часов. После добавления 3,5 г тетрациклина реакцию ведут при перемешивании в течение 8 часов. После завершения реакции получают твердый продукт бледно-желтого цвета /соединение 5-2/ /R₁ = R₄ = H, R₂ = OH, R₃ = CH₃/ по способу примера 1-3. Выход составляет 94%. Т. плавления = 171^oC /с разложением/ Элементный анализ: C 71,02 H 7,02 N 3,98 Полученное соединение имеет следующую формулу: Пример получения 6 6-1. Получение бис-N,N- 17 - гидрокси 17 - -этинил-эстра-1,3,5/10/-триен-3-оксиэтил/амина/ соединение 6-1/: 6,1 г соединения /4-1/ примера 4 растворяют в 100 мл тетрагидрофурана и 1,0 г порошка гидроксида калия, и полученную смесь подвергают взаимодействию до окончания реакции при 0^oC при интенсивном перемешивании, вводят газообразный ацетилен. Реакционную смесь нейтрализуют до pH 4 кислотой, и растворитель выпаривают. Затем продукт реакции перекристаллизовывают из спирта и хлороформа, в результате чего получают белый твердый продукт /6-1/. Выход 78%.

Т. плавления 201-205^oC.

Элементный анализ: C 79,21 H 8,58 N 2,18 Полученное соединение имеет следующую структурную формулу: 6-2. 6 г соединения /6-1/, полученного ранее, 0,03 г метаформальдегида и 20 мл изопропанола подвергают взаимодействию при 60^oC в течение 2 часов, а затем добавляют 3,4 г тетрациклина. Реакционную смесь перемешивают и оставляют реагировать в течение 8 часов. После завершения реакции получают твердое вещество бледно-желтого цвета /соединение 6-2/, т.е. бис-N,N-/17 - гидрокси-17 - этинил-эстра-1,3,5(10)-триен-3-оксиэтил/аминометилентетрациклин /R₁=R₄=H, R₂=OH, R₃=CH₃/ по способу примера 1-3. Выход 93%. Т. плавления = 178^oC /с разложением/.

Элементный анализ: C 72,1 H 7,12 N 3,90 Полученное соединение имеет следующую структурную формулу: Пример получения 7 7-1. Получение N-/17-окси-эстра-1,3,5(10)-триен-3-оксиэтил/N-метил-амина /соединение 7-1/: 2,7 г эстрона, 1 г хлорэтилметиламина и небольшое количество триэтиланилина смешивают с толуольным раствором, и добавляют раствор гидроксида натрия. После того, как pH доводят до примерно 10, реакцию ведут в течение 4 часов. После этого растворитель выпаривают, твердую часть перекристаллизовывают из спирта до получения соединения /7-1, R₇=H/. Выход 71%/.

Т. плавления = 262-266^oC.

Элементный анализ: C 75,24 H 9,41 N 4,28 7-2. 3,3 г соединения /7-1/, указанного ранее, 0,03 г метаформальдегида и 20 мл изопропанола подвергают взаимодействию в течение 2 часов, а затем добавляют 3,5 г тетрациклина. Реакционную смесь перемешивают, и ведут реакцию в течение 8 часов /при перемешивании/. После завершения реакции твердое вещество бледно-желтого цвета /соединение 7-2/, т.е. N-/17-окси-эстра-1,3,5(10)-триен-3-оксиэтил/N-метиламинометилен- тетрациклин /R₁=R₄=H, R₂=OH, R₃=CH₃/, получают по способу примера 1-3. Выход 90%.

Т. плавления 190^oC /с разложением/ Элементный анализ: C 68,8 H 7,22 N 3,62 Структура полученного соединения представлена следующей формулой: Пример получения 8 8-1. Получение N-/3,17 - дигидрокси-эстра-1,3,5(10)-триен-6-аминоэтил/пиперазина /Соединение 8-1/: 5,1 г соединения /8-0/ растворяют в 120 мл тетрагидрофурана, и добавляют 3,2 г аминоэтилпиперазина. Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 2 часов. ТГФ выпаривают и удаляют, и добавляют 100 мл метилового спирта и 2,8 г муравьиной кислоты. Продолжают кипячение с обратным холодильником, и реакцию ведут в течение 3 часов. Метиловый спирт выпаривают и удаляют, а остаток перекристаллизовывают из спирта до получения соединения 8-1. Т.плавления 172 - 177^oC.

8-2. Получение N-4-/3,17 - дигидрокси-экстра-1,3,5(10)- триен-6-аминоэтил/-пиперазин-1-метилен-тетрациклина /соединение 8-2/: 4,1 г соединения /8-1/, 0,03 г метаформальдегида и 20 мл изопропанола смешивают, и реакцию ведут при 50^oC в течение 2 часов. Затем добавляют 3,5 г тетрациклина и реакцию ведут при перемешивании в течение 5 часов. После завершения реакции полученный продукт отфильтровывают, промывают изопропанолом и этиловым эфиром, затем сушат в вакууме до получения твердого продукта бледно-желтого цвета /соединение 8-2/. Температура плавления 167^oC /с разложением/.

Выход составил 81,20.

Соединение /8-0/ получают следующим образом.

1. Получение 17 - эстродиола 4 г эстрона растворяют в метиловом спирте и прикапывают смешанный раствор 0,8 г боргидрата калия, 1,76 г гидроксида натрия и 8,8 мл воды при температуре около 30^oC. После этого реакцию ведут в течение 2 часов, реакционный раствор нейтрализуют разбавленной уксусной кислотой до нейтрального, а затем разбавляют водой. После образования твердого вещества его отфильтровывают, промывают водой и сушат. Полученный продукт перекристаллизовывают из спирта, содержащего воду до получения белых кристаллов. Т.плавления = 173-174^oC.

Выход 97,2%.

Получение 17 - эстрадиолдиацетата 10 г 17 - эстроалкинола растворяют в пиридине, и к этому добавляют 35 мл уксусной кислоты. Реакцию ведут при кипячении с обратным холодильником в течение одного часа, затем реакционную смесь выливают в ледяную воду до получения твердого продукта, который отфильтровывают и сушат, перекристаллизовывают из абсолютного спирта до получения кристаллов белого цвета. Т. плавления 126-128^oC. Выход составляет 97%.

3. Получение 6-окси-17 - эстрадиолдиацетата /соед. XII/.

5 г 17 - эстрадиолацетата растворяют в бензоле и к этому прикапывают 0,45 г триоксида хрома при охлаждении, затем полученную смесь растворяют в смешанном бензольном растворе 30 мл ледяной уксусной кислоты, 20 мл уксусной кислоты и 30 мл бензола. После завершения реакции, реакционную смесь некоторое время перемешивают, а затем выливают в воду. Продукт реакции экстрагируют этиловым эфиром, промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия, водой, затем сушат и концентрируют, после чего выделяют на силикагеле целевой продукт. Т.плавления 173 - 175^oC. Выход составляет 40%.

Пример получения 2.

Получение N-4-/17-окси-экстра-1,3,5(10)-триен-3-оксиэтил/- 1- пиперазин-1-метилен-доксициклина. HCl /Соединение 9/: 2,2 г соединения /1-2/, 0,20 г полиформальдегида и 100 мл изопропанола нагревают и перемешивают при 60^oC в течение 1,5 часа, затем добавляют 3 г доксициклингидрохлорида. Реакционную смесь выдерживают при 60^oC при перемешивании в течение 2,5 часа. После завершения реакции, полученный продукт отфильтровывают, промывают изопропанолом и этиловым эфиром, затем сушат до получения твердого продукта бледно-желтого цвета /соединение 9/ с температурой плавления 172^oC /с разложением/. Выход составляет 87%.

Пример получения 10 Получение N-4-/17 окси-экстра-1,3,5(10)-триен-3-оксиэтил/-пиперазин-1-метилен- окситетрациклина /соединение 10/: 0,91 г соединения /1-3/, 80 мг полиформальдегида и 50 мл изопропанола подвергают взаимодействию при перемешивании при 60^oC в течение 2 часов. Затем добавляют 1,0 г террамицина, и реакционную смесь выдерживают при перемешивании при 60^oC в течение 3 часов. Продукт реакции отфильтровывают, промывают изопропанолом и этиловым эфиром, сушат до получения твердого продукта бледно-желтого цвета /соединение 10/ с Т.плавления 175^oC /с разложением/. Выход 89%.

Пример получения 11 Получение N-4/17 гидрокси-эстра-1,3,5(10)-триен-3-этоксиэтил/пиперазин-1-метилентетрациклина /Соединение 11/: 4,1 г N-/17-гидроксиэстрон-1,3,5(10)-триен-3-оксиэтил/пиперазина, 0,5 г полиформальдегида и 50 мл изопропанола подвергают взаимодействию при перемешивании при 60^oC в течение 2 часов. После этого добавляют 4 г тетрациклина, и реакцию ведут при температуре 40 - 45^oC в течение 3 часов. Полученный продукт отфильтровывают, промывают изопропанолом и этиловым эфиром до получения твердого продукта бледно-желтого цвета /соединение 11/ с температурой плавления 154^oC /с разложением/. Выход составляет 68,6%.

Пример получения 12 Получение 17-гидрокси -андрост-4-ен-3-оксиэтиламинометилентетрациклина 3,3 г 3-аминоэтокси-17-гидроксиандрост-4-ена, 0,3 г метаформальдегида и 40 мл изопропанола подвергают взаимодействию при 60^oC в течение 4 часов. После добавления 4,5 г тетрациклина реакцию ведут при перемешивании в течение 5 часов. Продукт реакции отфильтровывают, промывают изопропанолом и этиловым эфиром до получения твердого продукта бледно-желтого цвета. Выход 92%.

Элементный анализ: C 66,78 H 7,41 N 5,38 Пример получения 13 Получение 17-гидрокси-андрост-4-ен-3-он-6-метиленоксиэтиламинометилентетрациклина: 3,6 г 6-аминометоксиметилен-17-гидрокси-андрост-4-ен-3-она, 0,3 г метаформальдегида, 4,5 г тетрациклина и 30 мл ацетона перемешивают при комнатной температуре в течение 24 часов без света. После завершения реакции полученный продукт отфильтровывают, промывают ацетоном и этиловым эфиром до получения твердого продукта желтого цвета. Выход составляет 86%.

Элементный анализ: C 67,90 H 7,67 N 5,18 Пример получения 14 Получение 17-гидрокси-андростан-3-оксиэтиламинометилентетрациклина: 3,35 г 3-аминоэтокси-17-гидроксиандростана, 0,3 г метаформальдегида, 4,5 г тетрациклина и 30 мл ацетона подвергают взаимодействию при перемешивании при комнатной температуре в течение 30 часов без света. После завершения реакции полученный продукт отфильтровывают, промывают ацетоном и этиловым эфиром до получения твердого вещества желтого цвета. Выход 85%.

Элементный анализ: C 66,61 H 7,66 N 5,40 Пример получения 15 Получение 17 - гидрокси-18-метил-19-норандрост-4-ен-3-он-17 -бутиниленаминометилентетрациклина: 3,7 г 17 - аминоэтинил-17 - гидрокси-8-метил-19-норандрост-4-ен-3-она, 0,3 г метаформальдегида и 30 мл изопропанола подвергают взаимодействию при 60^oC в течение 4 часов. После добавления 4,5 г тетрациклина реакцию ведут при перемешивании в течение 6 часов. После завершения реакции полученный продукт отфильтровывают и промывают изопропанолом и этиловым эфиром до получения твердого продукта желтого цвета.

Выход составляет 85%.

Элементный анализ: C 68,51 H 7,11 N 5,17 Пример получения 16 Получение 16, 17- дигидрокси-эстра-1,3,5(10)-триен-3- оксиэтиламинометилентетрациклина: 3,3 г 3-аминоэтокси-16 , 17- эстра-1,3,5(10)-триена, 0,3 г метаформальдегида и 50 мл изопропанола подвергают взаимодействию при 80^oC в течение 2 часов, а затем охлаждают до 40^oC. После добавления 4,5 г тетрациклина реакцию ведут в течение 6 часов. После завершения реакции, полученный продукт отфильтровывают, промывают изопропанолом и этиловым эфиром до получения твердого вещества желтого цвета. Выход 85%.

Элементный анализ: C 65,48, H 6,82 N 5,13 Пример получения 17 Получение 18-метил-17-окси-эстра-1,3,5(10)-триен-3- оксиэтиламинометилентетрациклина 3,3 г 3-аминоэтокси-18-метил-эстра-1,3,5(10)-триен-17-она, 0,3 г метаформальдегида и 50 мл ацетона подвергают взаимодействию при 30^oC в течение 48 часов без света. После завершения реакции полученный продукт отфильтровывают и промывают изопропанолом и этиловым эфиром до получения твердого вещества желтого цвета. Выход 82%. Элементный анализ: C 67,45 H 6,86 N 5,27 Пример получения 18 Получение 17- гидрокси-прегна-4-ен-20-он-3- оксиэтиламинометилентетрациклина 3,8 г 3-аминоэтокси-17 - гидрокси-прегна-4-ен-20-она, 0,3 г метаформальдегида и 50 мл изопропанола нагревают и при 60^oC реакцию ведут в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждают до 40^oC и добавляют 4,5 г тетрациклина. Реакцию ведут при 60^oC в течение 5 часов. После завершения реакции полученный продукт отфильтровывают и промывают ацетоном и этиловым эфиром до получения твердого вещества желтого цвета.

Выход составляет 87%.

Элементный анализ: C 66,52 H 7,37 N 5,01 Пример получения 19 Получение прегна-5-ен-20-он-3-оксиэтиламинометилентетрациклина: 3,6 г 3-аминоэтокси-прегна-5-ен-20-она, 0,6 г метаформальдегида и 40 мл изопропанола нагревают до 80^oC и реакцию ведут в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждают до 40^oC и добавляют 4,5 г тетрациклина. Полученную смесь оставляют реагировать при 40^oC в течение 6 часов. После завершения реакции полученный продукт отфильтровывают и промывают изолпропанолом и этиловым эфиром до получения твердого продукта. Выход составляет 93%.

Элементный анализ: C 67,70 H 7,36 N 5,05 Пример получения 20 17-гидрокси-андрост-1,4-диен-3-оксиэтиламинометилендоксициклин: 3,3 г 3-амино-этокси-17 - гидроксиандрост-1,4-диена, 0,3 г метаформальдегида и 50 мл изопропанола подвергают взаимодействию при 80^oC в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждают до 40^oC и добавляют 4,5 г доксициклингидрохлорида. Реакцию ведут в течение 4 часов. После завершения реакции полученный продукт промывают изопропанолом и этиловым эфиром до получения твердого вещества желтого цвета. Выход составляет 89%.

Элементный анализ: C 67,23 H 7,25 N 5,28 Пример получения 21 Получение 17 - метил-17 - гидрокси-андрост-4-ен-3-он-6- метиленоксиэтиламинометилендоксициклина: 3,8 г 6-амино-этоксиметилен-17 - метил-17 - гидроксиандрост-4-ен-3-она, 0,3 г метаформальдегида и 25 мл изопропанола подвергают взаимодействию при 60^oC в течение 4 часов. После завершения реакции реакционную смесь охлаждают до 40^oC и добавляют 4,5 г доксициклингидрохлорида, и реакцию ведут в течение 8 часов. После завершения реакции полученный продукт промывают изопропанолом и этиловым эфиром до получения твердого вещества желтого цвета. Выход составляет 86%.

Элементный анализ: C 63,62 H 7,02 N 5,13 Пример получения 22 Получение 17 - метил-17 - гидроксиандростан-3-он-2- оксиэтиламинометилендоксициклина: 3,6 г 2-аминоэтокси-17 - метил-17 - гидроксиандростан-3-она, 0,3 г метаформальдегида и 30 мл изопропанола подвергают взаимодействию при 60^oC в течение 2 часов, а затем добавляют 4,5 г доксициклингидрохлорида. Реакцию ведут дальше. После ее завершения полученный продукт промывают изопропанолом и этиловым эфиром до получения твердого продукта желтого цвета.

Выход составляет 91%.

Элементный анализ: C 65,91 H 7,51 N 5,07 Пример получения 23 Получение 17 - метил-17 - гидрокси-19-норандрост-4-ен-3-он-метиленоксиэтиламинодоксициклина: 3,7 г 6-аминоэтоксиметилен-17 - метил-17 - гидрокси-19-нор- андрост-4-ен-3-она, 0,3 г метаформальдегида и 50 мл ацетона подвергают взаимодействию при 30^oC в течение 2 часов и затем добавляют 4,5 г доксициклингидрохлорида. Реакцию ведут затем еще в течение 30 часов. После завершения реакции полученный продукт отфильтровывают и промывают изопропанолом и этиловым эфиром до получения твердого вещества желтого цвета.

Выход составляет 87% Элементный анализ: C 63,64 H 7,03 N 5,18 Пример получения 24 Получение 17 - этинил-17 - гидроксиандрост-5-(10)-ен-3-он-6- метиленоксиэтиламинометилендоксициклина: 3,7 г 6-амино-этоксиметилен-17 - этинил-17 - гидрокси- андрост-5-/10/-ен-3-она, 0,3 г метаформальдегида и 50 мл изопропанола подвергают взаимодействию при 60^oC в течение 2 часов, а затем добавляют 4,5 г доксициклингидрохлорида. Реакцию ведут при 40^oC в течение 8 часов. После завершения реакции полученный продукт отфильтровывают и промывают изопропанолом и этиловым эфиром до получения твердого вещества желтого цвета. Выход составляет 87%.

Элементный анализ: C 66,81 H 7,06 N 5,01 Пример получения 25 17 - пропилен-17 - гидрокси-11-диметиламинофениландрост-4,9-диен-3-он-6- метиленоксиэтиламинометилендоксициклин: 5 г 6-амино-этоксиметилен-11-/4'-диметиламинофенил/-17 пропилен-17 - гидроксиандрост-4,9-диен-3-она, 0,3 г метаформальдегида и 40 мл изопропанола подвергают взаимодействию при 80^oC в течение 2 часов. Затем реакционную смесь охлаждают до 40^oC и добавляют 4,5 г доксициклингидрохлорида. Реакцию ведут в течение 6 часов. После завершения реакции полученный продукт отфильтровывают и промывают изопропанолом и этиловым эфиром до получения твердого вещества желтого цвета. Выход 90%.

Элементный анализ: C 68,76 H 6,88 N 5,72 Пример получения 26 Получение 16,17-изопропилиден-16,17-диоксиэстра-1,3,5(10)-триен-3 -оксиэтиламинометилендоксициклина: 3,7 г 16,17-изопропилиден-16,17-диоксиэстра-1,3,5(10)-триен-3-аминоэтилового эфира, 0,3 г метаформальдегида и 50 мл изопропанола подвергают взаимодействию при 60^oC в течение 2 часов, а затем добавляют 4,5 г доксициклингидрохлор