Антиандрогенные соединения, предшественник антиандрогенного соединения, фармацевтические композиции

Антиандрогенные соединения, предшественник антиандрогенного соединения, фармацевтические композиции

Реферат

 

Описываются новые антиандрогенные соединения общей формулы I, где значения R⁴, R⁶, R¹⁷ указаны в п.1 формулы. Соединения оказывают эффективное антагонистическое воздействие и при этом практически лишены агонистических свойств. Описывается также предшественник антиандрогенного соединения и фармацевтические композиции на основе соединений общей формулы I, которые используются для лечения андрогензависимых заболеваний. 5 с. и 3 з.п. ф-лы, 6 табл.

Изобретение относится к новым ингибиторам активности половых стероидных гормонов, таких как антиандрогенные соединения, которые оказывают эффективное антагонистическое воздействие и при этом практически лишены агонистических свойств. В частности, некоторые предпочтительные способы осуществления изобретения относятся к определенным аналогам тестостерона, которые обладают высоким сродством к рецепторам андрогена, но не активизируют указанные рецепторы. Некоторые антиандрогены могут также ингибировать воспроизводство половых стероидных гормонов или их предшественников.

В процессе лечения некоторых андрогензависимых болезней важным является уменьшить или по возможности устранить вызываемые андрогеном эффекты. Для этого желательно не только блокировать доступ к рецепторам андрогена с помощью "антиандрогенов", препятствуя андрогенам связываться с указанными рецепторами и активировать их, но и снизить концентрацию андрогенов, способных активировать рецепторы. Свободные рецепторы андрогена, даже в отсутствие андрогена, могут быть биологически активными. По этой причине антиандрогены, которые связываются и блокируют рецепторы, могут дать лучшие терапевтические результаты, чем лечение, которое лишь приводит к подавлению воспроизводства андрогенов.

Антиандрогены могут оказать значительное терапевтическое воздействие, замедляя или останавливая течение андрогензависимых заболеваний, в частности заболеваний, возникновению или развитию которых способствует активация рецепторов андрогена.

Желательно, чтобы антиандроген, используемый в лечении для снижения активности рецепторов андрогена, не только обладал бы хорошим сродством к рецептору андрогена, но и не проявлял бы заметную потенциальную андрогенную активность. Первое относится к способности антиандрогена связываться с рецептором андрогена, блокируя тем самым доступ андрогенов к рецептору. Последнее относится к тому воздействию, которое антиандроген оказывает на рецептор, как только он с ним связывается. Некоторые антиандрогены могут обладать потенциальной андрогенной активностью ("агонистическая активность"), которая приводит к нежелательной активации тех самых рецепторов андрогена, активность которых они должны подавлять. Другими словами, антиандрогены с потенциальной андрогенной активностью могут успешно присоединяться к рецепторам андрогена, блокируя доступ к указанным рецепторам природных андрогенов, что является полезным, однако сами же могут активировать рецептор, что нежелательно.

У известных нестероидных антиандрогенов, таких как флутамид и анандрон, нежелательная андрогенная активность отсутствует, однако их сродство к рецептору может оказаться хуже, чем у стероидных антиандрогенов (т.е. производных андронов, имеющих стероидное ядро, которое модифицируют таким образом, чтобы придать соединению антиандрогенные свойства). Однако, как полагают, стероидные антиандрогены с большей вероятностью могут обладать нежелательными агонистическими свойствами.

В заявке, опубликованной 24 января 1991 под номером Международной патентной публикации WO 91/00732, заявители описывают новые стероидные антиандрогены, в том числе соединения со стероидным ядром, содержащим новые заместители в положении 17. Опубликованная заявка включает 17- галоалкинильные заместители. Примеры многочисленных 17- иодоалкинильных заместителей, изменяющихся от иодопентинила до иодододецинила, представлены в примерах. Как рассматривается подробно далее, было показано, что общую эффективность антиандрогенных соединений можно значительно увеличить, если тщательно контролировать размер, конфигурацию и идентичность 17- заместителя и, в частности, путем ограничения его размера, как это описано и заявлено в указанной заявке. Определенные нортестостероновые соединения с определенными 17-галоалкильными боковыми цепями, использовали в различных и нефармацевтических целях Салмоном и др. ((1) J. Steroid Biochem., Vol. 33, N 1, pp. 25-31 (1989) и (2) J. Steroid Biochem., Vol. 26, N 3, pp. 383-91 (1987)).

В Международной патентной публикации WO 92/057963 приводятся некоторые 16,16-дизамещенные андростеновые производные для лечения андрогензависимых заболеваний кожи.

В Европейской патентной публикации 0435321 описываются некоторые 17-замещенные производные A-норстероид-3-карбоновой кислоты для использования при ингибировании активности 5-редуктазы млекопитающих.

Целью настоящего изобретения являются улучшенные антиандрогены, обладающие хорошим сродством к рецептору андрогенов и при этом практически лишенные андрогенной активности. Указанные антиандрогены могут быть полезны при лечении андрогензависимых заболеваний, что подробно рассматривается далее.

Первым аспектом настоящего изобретения является антиандрогенное соединение, имеющее структурную формулу (I): где пунктирные линии обозначают необязательно пи-связи; R⁴ обозначают атом водорода или метил; R⁶ обозначает атом водорода, метил, этил или атом галогена; а R¹⁷ выбирают из группы, включающей: A) ненасыщенный углеводородный фрагмент, содержащий по крайней мере один атом углерода, отделенный от D-кольца молекулярной формулы (I) по крайней мере тремя промежуточными атомами углерода, отделенного от указанного D-кольца молекулярной формулы (I), более, чем четырьмя промежуточными атомами.

B) галогензамещенный ненасыщенный углеводородный фрагмент, содержащий по крайней мере один атом галогена, отделенный от указанного D-кольца по крайней мере тремя промежуточными атомами, и не одержащий атома углерода, отделенного от указанного D-кольца молекулярной формулы (I), более, чем четырьмя промежуточными атомами и C) галогеналкильный фрагмент, содержащий по крайней мере один атом галогена, отделенный от указанного D-кольца по крайней мере тремя промежуточными атомами, и не содержащий атома углерода, отделенного от указанного D-кольца молекулярной формулы (I), более, чем четырьмя, промежуточными атомами.

Другим аспектом настоящего изобретения является предшественник лекарственного средства, который в условиях in vivo превращается в вышеуказанное соединение.

Еще одним аспектом настоящего изобретения является антиандрогенное соединение, имеющее структурную формулу (I): где пунктирные линии обозначают необязательно пи-связи; R⁴ обозначают атом водорода или метил; R⁶ обозначает атом водорода, метил, этил или атом галогена; а R¹⁷ выбирают из группы, включающей: A) ненасыщенный углеводородный фрагмент, содержащий по крайней мере один атом углерода, отделенный от D-кольца молекулярной формулы (I) по крайней мере тремя промежуточными атомами углерода, и не содержащий атома углерода, отделенного от указанного D-кольца молекулярной формулы (I), более чем четырьмя промежуточными атомами.

B) галогензамещенный ненасыщенный углеводородный фрагмент, содержащий по крайней мере один атом галогена, отделенный от указанного D-кольца по крайней мере тремя промежуточными атомами, и не содержащий атома углерода, отделенного от указанного D-кольца молекулярной формулы (I), более чем четырьмя, промежуточными атомами и C) галогеналкильный фрагмент, содержащий по крайней мере один атом галогена, отделенный от указанного D-кольца по крайней мере тремя промежуточными атомами, и не содержащий атома углерода, отделенного от указанного D-кольца молекулярной формулы (I), более чем четырьмя, промежуточными атомами, при условии, что R¹⁷ не является группой если R⁴ и R⁶ оба обозначают атом водорода. По другому аспекту R¹⁷ не является группой не зависимо от идентичности R⁴ и R⁶.

Следующим аспектом изобретения являются фармацевтические композиции для местного и общего назначения, содержащие антиандрогены по настоящему изобретению вместе с фармацевтически приемлемыми разбавителями или носителями.

По следующему аспекту изобретения новые антиандрогены или содержащие их фармацевтические композиции используют при лечении или предотвращении андрогензависимых заболеваний кожи, таких как угри, избыточное оволосение у женщин, себорея, андрогенное облысение, преждевременное облысение у мужчин и т.п.

По следующему аспекту изобретения они используются при лечении или предотвращении андрогензависимых системных заболеваний, таких как рак предстательной железы или доброкачественная гиперплазия предстательной железы.

Если специально не оговаривается, заместители в стероидных ядрах антиандрогенов по настоящему изобретению могут иметь альфа- или бета-стереохимию. Необязательные пи-связи, обозначенные пунктирными линиями в структурной формуле, не зависят от любых связей, которые могут возникать в структуре, при этом наличие одной из них не зависит от присутствия или отсутствия другой, если их взаимозависимость не определяется требованиями валентности. Рассматриваемые соединения могут использоваться в виде предшественника лекарственного средства, которое может в условиях in vivo превращаться в требуемое активное соединение. Атомы стероидных ядер, для которых не указано никаких заместителей, могут быть далее необязательно замещены (если позволяют требования валентности), при условии, что подобные заместители не оказывают значительного и негативного воздействия на средство соединений к рецептору андрогенов и не делают соединения значительно более андрогенными.

Термин "низший" при описании химических фрагментов означает в данном случае фрагмент, содержащий не более 8 атомов. Например, "низший алкил" означает (C1-C8)алкил. Любой фрагмент, содержащий более двух атомов, может иметь, если специально не оговаривается, прямую или разветвленную цепь.

Антиандрогены и содержащие их фармацевтические композиции могут использоваться в соответствии с настоящим изобретением при лечении антиандрогензависимых заболеваний, развитию которых способствует активирование рецепторов андрогенов, в частности, рака предстательной железы и доброкачественной гиперплазии предстательной железы, угрей, избыточного оволосения у женщин, себореи, андрогенного облысения, преждевременного облысения у мужчин и т.п.

17- Заместитель у антиандрогенов по настоящему изобретению может быть как разветвленным, так и с прямой цепью. Наиболее длинная цепочка преимущественно содержит 4-5 атомов углерода, при этом предпочтительными являются фрагменты с прямой цепью. Предпочтительными являются также ненасыщенные фрагменты, такие как галогензамещенные фрагменты. Ненасыщенные фрагменты преимущественно являются ненасыщенными в положениях , у D - кольца стероида. Предпочтительными являются иодзамещенные 17 фрагменты (в частности, EM 250, см. далее).

Галогензамещенные фрагменты могут содержать атом галогена более чем в одном положении. Аналогично ненасыщенные фрагменты могут быть ненасыщенными в нескольких местах, например, -C C-CH=CH₂. Необязательная двойная связь преимущественно располагается в 4-положении A-кольца стероида. Предпочтительные заместители R¹⁷ являются, но не ограничиваются, бутинилом, бутенилом, пентинилом, пентенилом, галобутинилом, галобутенилом, галопентинилом, галопентенилом, галобутилом и галопентилом. Другими предпочтительными фрагментами являются, но не ограничиваются, CH₂CH₂CH=CHX и где R¹⁰⁰ выбирают из группы, включающей атомы водорода, фтора, хлора, брома и иода, n обозначает 2 или 3, а пунктирная линия обозначает необязательную пи-связь. Наиболее предпочтительными являются галобутинил и галобутенил.

Наиболее предпочтительным антиандрогеном для местного назначения является EM-250, т. к. полагают, что он не оказывает системного антиандрогенного воздействия несмотря на то, что обладает значительным антиандрогенным воздействием при местном использовании. Таким образом, ожидается, что случайное проникновение через кожу, которое возможно при местном назначении EM-250, не вызовет нежелательное системное воздействие.

Еще одним аспектом настоящего изобретения является предшественник лекарственного средства, который в условиях in vivo превращается в соединение: где пунктирные линии обозначают необязательно пи-связи; R⁴ обозначают атом водорода или метил; R⁶ обозначает атом водорода, метил, этил или атом галогена; а R¹⁷ выбирают из группы, включающей: A) ненасыщенный углеводородный фрагмент, содержащий по крайней мере один атом углерода, отделенный от D-кольца молекулярной формулы (I) по крайней мере тремя промежуточными атомами углерода, и не содержащий атома углерода, отделенного от указанного D-кольца молекулярной формулы (I), более чем четырьмя промежуточными атомами.

B) галогензамещенный ненасыщенный углеводородный фрагмент, содержащий по крайней мере один атом галогена, отделенный от указанного D-кольца по крайней мере тремя промежуточными атомами, и не содержащий атома углерода, отделенного от указанного D-кольца молекулярной формулы (I), более чем четырьмя промежуточными атомами и C) галогеналкильный фрагмент, содержащий по крайней мере один атом галогена, отделенный от указанного D-кольца по крайней мере тремя промежуточными атомами, и не содержащий атома углерода, отделенного от указанного D-кольца молекулярной формулы (I), более чем четырьмя промежуточными атомами.

Известно много модификаций химических фрагментов в активных соединениях, такие как гидроксильная или кетонная группа, которые приводят к получению форм предшественников, при этом указанные формы предшественника лекарственного средства способны в условиях in vivo превращаться в активное соединение, например, за счет гидролиза, ферментативного катализа и т.п. Предпочтительные формы предшественника лекарственного средства в соответствии с настоящим изобретением имеют заместитель в 3-положении стероидного ядра, который in vivo превращается в 3-кето-группу. Среди преимущественных 3-заместителей предпочтительных форм предшественников лекарственного средства выбирают заместитель из группы замещенных или незамещенных фрагментов, включающий: Как подробнее рассматривается далее, помещая конкретные указанные заместители в 3-положение, можно вызвать смещение двойных стероидных связей, получая предпочтительный предшественник лекарственного средства формулы: В процессе использования 3-положение вновь превращается в =O, а двойная связь смещается обратно, что приводит к образованию предпочтительного активного андрогена.

Ниже вместе с предпочтительными методами синтеза приводятся некоторые не ограничивающие изобретение примеры предпочтительных активных соединений и их предпочтительных модификаций в виде предшественников лекарственного средства.

Пример 1 Синтез 17_(4'-хлорбутинил)-17_гидрокси-4-андростен-3-она (EM 248) Этот синтез представлен схемой 1 Тиокеталь 2 К раствору тестостерона 1 (288,43 г, 1,0 моль) (получают от компании "Schering A. G.", Германия) в ледяной уксусной кислоте (2,5 л) при 10^oC добавляют этандитиол (85 мл, 1,06 моль) и эфират трехфтористого бора (800 мл). Смесь перемешивают при указанной температуре в течение 1 часа и выливают в лед (2 кг). Из водной фазы выделяют белый порошок, который извлекают фильтрованием, промывают водой (2 х 2 л) и сушат на воздухе. Перекристаллизацией из метанола получают чистый тиокеталь 2. Выход: 328,28 г (90%). Синтез ¹H ЯМР (хлороформ-d, 300 МГц, TMC): 0,74 (синглет, 3H, 18-CH₃), 1,03 (синглет, 3H, 19-CH₃), 3,14 - 3,42 (мультиплет, 4H, SCH₂), 3,60 (триплет, J = 8,4 Гц, 17 H), 5,47 (синглет, 1H, C-4H).

Кетон 3 Способ А: Раствор тиокеталя 2 (182,3 г, 0,5 моль) в сухом дихлорметане (1,5 л) при комнатной температуре и при механическом перемешивании по каплям добавляют к раствору хлорхромата пиридиния (150 г, 0,7 моль), молекулярным ситам 3A (200 г) и ацетату натрия (25 г). По окончании добавления смесь перемешивают в течение 16 часов, а затем разбавляют диэтиловым эфиром (2 л) и отфильтровывают через слой силикагеля на воронке с фильтрующим дном. Фильтрат упаривают в вакууме и полученное твердое вещество перекристаллизовывают из метанола и получают чистый кетон 3. Выход: 158,7 г (87%). Спектр ¹H ЯМР (хлороформ-d, 300 МГц, TMC): 0,86 (синглет, 3H, 18-CH₃), 1,02 (синглет, 3H, 19-CH₃), 3,12 - 3,42 (мультиплет, 4H, SCH₂), 5,49 (синглет, 1H, C-4H).

Способ Б: Тиокеталь 2 (182,3 г, 0,5 моль) растворяют в растворе N-окиси 4-метилморфолина (87,9 г, 0,75 моль) в сухом дихлорметане (1,5 л). Добавляют 200 г порошкообразных молекулярных сит 4A. Порциями по 1 г через каждые 5 минут добавляют катализатор - перрутенат тетрапропиламмония (6 г, 3,5% мольн). Исходные материалы вступают во взаимодействие в течение часа. Твердое вещество отделяют фильтрованием через небольшой слой силикагеля и 4-метилморфолин удаляют из фильтрата промыванием разбавленной соляной кислотой (1N). После сушки над сульфатом магния растворитель удаляют в вакууме. Полученный твердый остаток растворяют в минимальном (500 мл) количестве смеси этилацетат/четыреххлористый углерод (4/6). Раствор отфильтровывают через слой силикагеля, элюируя смесью того же состава. Упаривая растворитель и высушивая, получают кетон 3 (137 г, вход 75%).

Эфир тетрагидропиранила 4 К раствору метиллития (500 мл 1,4 молярного раствора в эфире, 0,7 моль) в 1 л безводного тетрагидрофурана в 5-литровой круглодонной колбе при температуре минус 30^oC в атмосфере аргона добавляют по каплям 2-(3-бутинилокси)тетрагидро-2H-пирана (112,5 г, 0,729 моль). По окончании прибавления охлаждающую баню убирают и оставляют раствор при комнатной температуре на 4 часа. Вновь охлаждают раствор до минус 30^oC и по каплям добавляют раствор кетона 3 (75 г, 0,2 моль) в 2,5 л безводного тетрагидрофурана. По окончании прибавления охлаждающую баню убирают и оставляют раствор при комнатной температуре на 16 час. К полученной смеси добавляют 100 мл насыщенного раствора соли и разбавляют этилацетатом, органическую фазу промывают насыщенным раствором соли и сушат над безводным сульфатом магния. Растворитель упаривают и через некоторое время продукт кристаллизуется. Для полноты осаждения добавляют гексан. Твердое вещество отфильтровывают и промывают гексаном. Соединение 4 используют без дальнейшей очистки на следующей стадии. Выход: 95,8 г (90%). Спектр ¹H ЯМР (хлороформ-d, 300 МГц, TMC): 0,82 (синглет, 3H, 18-CH₃), 1,01 (синглет, 3H, 19-CH₃), 2,52 (триплет, 2H, J = 6,8 Гц, CCCH₂), 3,15 - 3,44 (мультиплет, 4H, SCH₂), 3,50 - 3,56 (мультиплет, 2H, CH₂OTHP), 3,75 - 3,90 (мультиплет, 2H, пирановый OCH₂), 4,66 (синглет, 1H, OCHO), 5,47 (синглет, 1H, C-4H).

Спирт 5 Смесь соединения 4 (100 г, 0,19 моль) и иодистого метила (250 мл, 3,8 моль) в 96%-ном этаноле (2,5 л) кипятят с обратным холодильником в течение 16 часов. Растворитель удаляют в вакууме и сырую смесь разбавляют этилацетатом (2,5 л). Органическую фазу промывают 3%-ным раствором едкого натра (3 х 50 мл) и сушат над сульфатом магния. Растворитель упаривают, твердое вещество промывают диэтиловым эфиром, отфильтровывают через воронку с фильтрующим дном и вновь промывают диэтиловым эфиром. Соединение 5 можно использовать без дальнейшей очистки на следующей стадии: получено 45,5 г (выход 66%); небольшой образец перекристаллизовывают из смеси этилацетата и гексана и получают: т.пл. 179-181^oC; спектр ¹H ЯМР (хлороформ-d, 300 МГц, TMC): 0,85 (синглет, 3H, 18-CH₃), 1,17 (синглет, 3H, 19-CH₃), 2,45 (триплет, 2H, J = 6,0 Гц, CCCH₂), 3,70 (триплет, 2H, J = 6,1 Гц, CH₂OH), 5,41 (синглет, 1H, C-4H).

17_(4'-хлорбутинил)-17_гидрокси-4-андростен-3-он (EM 248) Смесь спирта 5 (15 г, 0,04 моль), трифенилфосфина (21 г, 0,08 моль) и четыреххлористого углерода (9,3 г, 0,06 моль) кипятят в течение 10 часов с обратным холодильником в 1 л безводного дихлорметана. Растворитель упаривают, сырую смесь переносят на силикагель и полученный гель хроматографируют методом испарительной тонкослойной хроматографии, элюируя смесью эфир-гексан (70: 30). Соединение затем перекристаллизовывают из диэтилового эфира. Выход 85%; т. пл. 120-121^oC; спектр ¹H ЯМР (хлороформ-d, 300 МГц, TMC): 0,87 (синглет, 3H, 18-CH₃), 1,19 (синглет, 3H, 19-CH₃), 2,69 (триплет, 2H, J = 7,0 Гц, CCCH₂), 3,58 (триплет, 2H, J = 7,0 Гц, CH₂Cl), 5,72 (синглет, 1H, C-4H); масс-спектр высокого разрешения; вычислено для C₂₃H₃₁O₂Cl: 374,2013; найдено: 374, 20153; элементный анализ: вычислено: C 73,68; H 8,33; Cl 9,46; найдено: C 73-65; H 8,45; Cl 9,58. (схема 1).

Пример 2 Синтез 17-(4'-иодбутинил)-17-гидрокси-4-андростен-3-она (EM 250) Синтез A К смеси трифенилфосфина (7,87 г, 30 ммоль) и иода (7,61 г, 30 ммоль) в сухом дихлорметане (500 мл) при комнатной температуре добавляют имидазол (2,04 г, 30 ммоль). Через небольшой промежуток времени выделяется твердое вещество. После этого при комнатной температуре добавляют спирт 5 (7,13 г, 20 ммоль). Перемешивают смесь в течение 30 минут, раствор разбавляют эфиром (100 мл) и образовавшееся твердое вещество отфильтровывают на воронке со стеклянным фильтрующим дном. Фильтрат упаривают и остаток очищают методом испарительной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью диэтилового эфира и гексана (70/30). Соединение (EM 250) затем очищают перекристаллизацией из диэтилового эфира. Выход 6,34 г (68%); т.пл. 124,5-125,5^oC; ИК спектр см^-1 (KBr): 1611, 1653, 2873, 2948, 3380 и 3510; спектр ¹H ЯМР (хлороформ-d, 300 МГц, TMC): 0,86 (синглет, 3H, 18-CH₃), 1,17 (синглет, 3H, 19-CH₃), 2,80 (триплет, 2H, J = 7,1 Гц, CCCH), 3,21 (триплет, 2H, J = 7,1 Гц, CH₂), 5,71 (синглет, 1H, C-4H); спектр ¹³C ЯМР (хлороформ-d, 75, МГц, TMC): 2,5, 12,7, 20,8, 23,2, 23,9, 31,5, 32,7, 33,9, 35,7, 36,3, 38,6, 38,96, 46,8, 49,8, 53,5, 65,8, 79,8, 84,8, 85,7, 123,9, 171,2, 199,5: масс-спектр m/e: 467 (M+), 426, 369, 339, 321, 245, 149, 123, 105, 79 (100); масс-спектр высокого разрешения: вычислено для C₂₃H₃₁O₂I: 466,1369; найдено: 466,1382; элементный анализ: вычислено: C 59,23; H 6,70; I 27,21; найдено: C 59,22; H 6,55; I 27,05 (схема 2).

Синтез Б 3-Метоксиандроста-3,5-диен-17-он (6) К 4-андростен-3,17-диону (15 г, 52 ммоль) (получен от компании "Aldrich Chemical Company", Милуоки, штат Висконсин, США) в тетрагидрофуране (100 мл) добавляют триметоксиэтан (17 г, 156 ммоль) и моногидрат п-толуолсульфокислоты (450 мг, 2,37 ммоль). Смесь перемешивают в течение 2,5 часов и добавляют триэтиламин (2,1 мл, 2,37 ммол), а затем воду (4 мл). После удаления растворителя получают влажную массу желтого цвета, которую перемешивают в воде (100 мл) в течение 10 минут и отфильтровывают. Твердое вещество промывают водой (4 раза) и сушат при 80^oC в высоком вакууме в течение 12 часов, получая целевой продукт (15,6 г, 100%). Спектр ¹H ЯМР (хлороформ-d, 300 МГц, TMC): 0,93 (синглет, 3H, 18-CH₃), 0,99 (синглет, 3H, 19-CH₃), 3,57 (синглет, 3H, OCH₃), 5,13 (синглет, 1H, C-4H), 5,25 (уширенный синглет, 1H, C-6H): спектр ¹³C ЯМР (хлороформ-d, 75 МГц, TMC): 220,83, 155,36, 140,92, 117,31; 98,35, 54,20, 51,89, 48,38, 47,58, 35,78, 35,23, 33,68, 31,46, 31,41, 30,66, 25,18, 21,76, 20,44, 18,89, 13,61.

17- Гидрокси-17- (4'-гидроксибутинил)-4-андростен-3- он(7) н-Бутиллитий (7,9 мл, 19,78 ммоль) добавляют по каплям к смеси ди-изо-пропиламина (0,14 мл, 5% 19,98 ммоль) и 3-бутин-1-ол (1,5 мл, 19,98 ммоль) в ТГФ (30 мл) при температуре минус 40^oC. Смесь перемешивают в течение 1 часа, а затем добавляют хлортриметилсилан (2,5 мл, 19,98 ммоль) и смесь перемешивают еще в течение часа (окончание реакции определяют методом ЯМР). По каплям добавляют н-бутиллитий (7,9 мл, 19,78 ммоль). Через 1 час добавляют стероид 6 (2 г, 6,6 ммоль) в ТГФ (35 мл) и смесь перемешивают в течение 90 минут (анализ по ТСХ показывает отсутствие исходного соединения) при температуре минус 40^oC. Добавляют воду (30 мл) и концентрированную смоляную кислоту (3 мл) и кипятят с обратным холодильником в течение 1 часа (за протеканием реакции гидролиза наблюдают по ТСХ). Тетрагидрофуран удаляют и водный раствор экстрагируют хлористым метиленом (5 х 40 мл). Органические вытяжки объединяют, последовательно промывают насыщенными растворами бикарбоната натрия и соли. После сушки и удаления растворителя (сначала в вакууме водоструйного насоса, а затем в глубоком вакууме) получают сырой продукт (2,4 г), который перекристаллизовывают из смеси н-гексана и этилацетата (содержимое перед фильтрованием выдерживают в холодном помещении в течение 24 часов) и получают чистый продукт (2,01 г, 85%); спектр ПМР (хлороформ-d, 300 МГц, TMC): 0,84 (синглет, 3H, 18-CH₃), 1,16 (синглет, 3H, 19-CH₃), 3,14 (уширенный синглет, 1H, OH), 3,30 (синглет, 1H, OH), 3,68 (триплет, 2H, J = 5,87 Гц, CH₂OH), 5,71 (синглет, 1H, С-4H); спектр ¹³C ЯМР (хлороформ-d, 75 МГц, TMC): 199,58, 171,42, 123,48, 85,71, 82,69, 79,27, 60,75, 53,17, 49,59, 46,35, 38,64, 38,38, 35,96, 35,36, 33,62, 32,54, 32,39, 31,22, 22,87, 22,78, 20,47, 17,13, 12,58.

17-Гидрокси-17-(4'-тозилоксибутинил)-4-андростен-3- он (8) В трехгорлую колбу, снабженную мешалкой и термометром, помещают 17-гидрокси-17-(4'-гидроксибутинил)-4-андростен-3-он (4,0 г, 11,22 ммоль) и пиридин (10,65 г, 134,64 ммоль). Охлаждают колбу до 0^oC. При указанной температуре добавляют п-толуолсульфохлорид (2,25 г, 12,34 ммоль) порциями в течение от 20 до 30 минут или с такой скоростью, чтобы температура ни в коем случае не поднималась выше 20^oC. Затем перемешивают смесь при комнатной температуре в течение 12 часов и разбавляют раствором 30 мл соляной кислоты в 70 мл воды. Водный раствор экстрагируют хлористым метиленом (3 х 100 мл). Органические вытяжки объединяют, промывают насыщенным раствором соли и сушат. Растворитель удаляют при вакууме, создаваемом водоструйным насосом при 40^oC, и получают твердое вещество, которое затем высушивают в глубоком вакууме в течение 3 часов и получают 4,84 г (93%) продукта. Анализ с помощью ¹H ЯМР указывает на смесь тозилата (75%) и хлорида (25%). Спектр ¹H ЯМР (хлороформ-d, 300 МГц, TMC): 0,84 (синглет, 3H, 75%, 18-CH₃), 0,85 (синглет, 3H, 25%, 18-CH₃), 1,16 (синглет, 6H, 2CH₃), 2,41 (синглет, 3H, A CH₃), 2,57 (триплет, 2H, J = 6,8, 6,8 Гц), 75% CH₂, 2,7 (триплет, 2H, J = 6,7, 6,8 Гц), 25% CH₂, 3,55 (триплет, 2H, =6,7, 6,7 Гц), 25% CH₂, 4,06 (триплет, 2H, J = 6,7, 6,8 Гц), 75% CH₂, 5,70 (синглет, 1H, C-4H); 7,31 (дублет, 2H, J = 8,2 Гц, ArH_2'h_6') 7,75 (дублет, 2H, 8,2 Гц, ArH_3'H_5'): спектр ¹³C ЯМР (хлороформ-d, 300 МГц, TMC): 199,6, 171,4, 145,0, 133,0, 129,9, 127,8, 123,8, 86,1, 80,3, 79,6, 67,8, 53,5, 53,2, 49,8, 46,7, 42,1 (C C1), 38,8, 38,6, 36,2, 35,7, 35,6, 33,9, 32,8, 32,5, 31,5, 31,4, 23,0, 21,7, (ArCH), 20,7, 19,9, 17,4, 12,8.

17-(4'-иодбутинил)-17-гидрокси-4-андростен-3-он (EM 250) Полученную ранее смесь (2,2 г, 4,45 ммоль) и иодид натрия (1,33 г, 4,45 ммоль) в 2-бутаноле (12 мл) кипятят с обратным холодильником (при 100^oC) в течение 12 часов (по прошествии 1 часа ТСХ показывает полное превращение тозилата в иодид, однако для конверсии хлорида в иодид необходимо 12 часов (ЯМР). После удаления растворителя получают остаток, который растворяют в воде (50 мл) и экстрагируют хлористым метиленом (3 х 80 мл). Органические вытяжки объединяют, промывают 15%-ным водным раствором бисульфита натрия (80 мл), а затем насыщенным раствором соли и сушат. Растворитель удалят при пониженном давлении при температуре 40^oC и получают сырой продукт, который очищают на хроматографической колонне, элюируя смесью гексан/ацетон (4/1) и получают чистый целевой продукт (1,95 г, 95%). Перекристаллизовывают из смеси гексана и ацетона и получают продукт, который идентичен соединению по п. А; т.пл. 124,5-125,5^oC (схема 3).

Пример 3 Аналогично методикам, приведенным в Примерах 1 и 2, используя различные тетрагидропиранилоксиалкины и различные тетрагалоидные производные углерода в качестве алкилирующих агентов, получают следующие соединения, указанные в таблице 1.

Пример 4 Синтез 17-гидрокси-17-(4'-иодбут-1'(E)-енил)-4-андростен-3- она (EM 816) При комнатной температуре в атмосфере аргона кетоенол 6 (300 мг, 1 ммоль) и хлорметилфенилсульфон (191 мг, 1 ммоль) в сухом тетрагидрофуране обрабатывают 1М раствором трет-бутоксида калия (1,3 мл). После того как все исходные вещества прореагируют, о чем судят по данным ТСХ, добавляют воду и экстрагируют эфиром, получая эпоксисульфон 9.

Неочищенный эпоксисульфон 9 (360 мг, 0,08 ммоль) в сухом тетрагидрофуране в течение 2 часов в атмосфере аргона при комнатной температуре обрабатывают трет-бутоксидом калия (890 мг, 8 ммоль) и водой (43 мг, 2,4 ммоль). После экстракции эфиром получают сырой гидроксимальдегид 10, который растворяют в смеси триэтиламина (10 мл), уксусного ангидрида (150 мкл) и 4-(диметиламино)пиридина (10 мг). Выдерживают под аргоном в течение нескольких дней и добавляют метанол, смесь перемешивают в течение 30 минут и упаривают в вакууме. Ацетоксиальдегид 11 экстрагируют эфиром и очищают методом испарительной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью этилацетата и гексана.

Ацетоксиальдегид 11 (188 мг, 0,8 ммоль) в тетрагидрофуране добавляют под азотом в LiBr комплекс илида, полученного in situ из 3-бром-(тетрагидро-2'H-пиран-2'-ил)оксипропана, трифенилфосфина, бромида лития и н-бутиллития в том же растворителе при низкой температуре. Через несколько часов добавляют фениллитий (0,5 мл), затем трет-бутиловый спирт и раствор нагревают до тех пор, пока реакция не закончится. Приливают воду и аддукт 12 экстрагируют эфиром и очищают методом испарительной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью этилацетата и гексана.

В атмосфере аргона при 0^oC к раствору аддукта 12 (350 мг, 0,7 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (5 мл) добавляют раствор трет-бутоксида калия (110 мг, 1 ммоль) в трет-бутиловом спирте. Перемешивают в течение 40 минут, выливают раствор в ледяную воду и экстрагируют этилацетатом. Остаток растворяют в метаноле (10 мл) и добавляют несколько капель концентрированной соляной кислоты. Кипятят смесь с обратным холодильником в течение 2 часов, упаривают в вакууме и экстрагируют этилацетатом. Кетодиол 13 очищают методом испарительной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью этилацетата и гексана.

К смеси трифенилфосфина (196 г, 0,75 ммоль) и иода (190 мг, 0,75 ммоль) в сухом дихлорметане (10 мл) при комнатной температуре добавляют имидазол (51 г, 0,75 ммоль). Через небольшой промежуток времени выпадает осадок. Затем при комнатной температуре добавляют кетодиол 13 (234 мг, 0,5 ммоль), перемешивают смесь в течение 30 минут и разбавляют эфиром. Образовавшееся твердое вещество отфильтровывают. Фильтрат упаривают и хроматографируют на силикагеле, элюируя смесью эфира и гексана, и получают иодид EM 816 (схема 4).

Пример 5 Аналогично методикам, приведенным в Примере 4, используя различные бром (тетрагидро-2'H-пиран-2'-ил)оксиалканы или различные тетрагалоидные производные углерода вместо иода, получат следующие соединения, указанные в Таблице 2.

Пример 6 Синтез 17-(4'-бромбут-1'(Z)-енил)-17-гидрокси-4- андростен-3-она Этот синтез поясняется Схемой 5.

Гидроксикеталь 14 Тестостерон (50 г, 0,17 моль) (получают от фирмы "Schering A.G.", Германия) обрабатывают диэтиленгликолем (100 мл) в толуоле (1 л) в аппарате с насадкой Дина-Старка в присутствии каталитического количества п-толуолсульфокислоты (1 г) при кипячении с обратным холодильником в течение 16 часов. После охлаждения добавляют эфир, органическую фазу отделяют, промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и водой, сушат и упаривают, получая гидроксикеталь 14.

Кетокеталь 15 К гидроксикеталю 14 (40 г, 0,12 моль) в сухом хлористом метилене (1 л) добавляют дихромат пиридиния (90 г, 0,24 моль) и оставляют смесь на ночь перемешиваться при комнатной температуре, а затем отфильтровывают через предварительно обработанный 1%-ным триэтиламином силикагель, элюируя смесью этилацетата и гексана.

Бутинил-аддукт 16 В осушенную пламенем горелки колбу в атмосфере аргона помещают (тетрагидро-2'-H-пиран-2'-ил)оксибутин (77 г, 0,5 моль) и безводный тетрагидрофуран (1 л). Раствор охлаждают до минус 78^oC, добавляют 2,5 раствор н-бутиллития (200 мл) и перемешивают раствор при указанной температуре в течение 2 часов. Затем добавляют кетокеталь 15 (33 г, 0,1 моль) в тетрагидрофуране (1 л). Через два часа приливают воду и дают смеси нагреться до комнатной температуры. Раствор упаривают в вакууме и остаток экстрагируют эфиром. Органическую фазу промывают водой, сушат и упаривают. Остаток очищают на силикагеле, используя в качестве элюента смесь этилацетата и гексана.

Z-Бутенил-аддукт 17 К бутинил-аддукту 16 (43,7 г, 0,09 моль), растворенному в 500 мл сухого ацетона и 120 мл сухого пиридина, добавляют отравленный свинцом 5%-ный палладий на карбонате кальция (4 г) катализатор Линдлара, получают от фирмы "Aldrich Chemical Company", Милуоки, штат Висконсин, США). После трех продувок водородом смесь перемешивают в атмосфере водорода в течение по крайней мере 15 минут и отфильтровывают на целите. Твердое вещество промывают смесью метанола и хлористого метилена и растворитель упаривают. Остаток очищают методом тонкослойной испарительной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью этилацетата и гексана.

17-(4'-Бромбут-1'(z)-енил)-17-гидрокси-4-андростен-3-он (18) По методике, описанной А.Вагнером и др. (Tetrahedron Letters 30, 557-558, 1989) тетрагидропиранилокси-группу превращают в бромид. Так, четырехбромистый углерод (31,5 г, 0,095 моль) добавляют при комнатной температуре в атмосфере аргона к раствору z-бутенил-аддукта 17 (25,2 г, 0,06 моль) в безводном хлористом метилене (300 мл). Перемешивают в течение 10 минут, охлаждают раствор до 0^oC и добавляют трифенилфосфин (44,5 г, 0,17 моль). Полученную смесь оставляют на ночь перемешиваться при комнатной температуре и отфильтровывают через силикагель. Растворитель упаривают, остаток растворяют в смеси (500 мл) метанола и воды (9:1) и добавляют несколько капель соляной кислоты. Смесь нагревают в течение нескольких минут, охлаждают, упаривают и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия и водой, сушат и упаривают досуха. Остаток очищают методом тонкослойной испарительной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью этилацетата и гексана (схема 5).

Пример 7 Синтез 17-(4'-иодбут-1'(z)-енил)-17-гидрокси-4-андростен-3-он (19) Полученное ранее соединение 18 (2,1 г, 5 ммоль) и иодид натрия (1,5 г, 5 ммоль) в 2-бутаноле (12 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 12 часов. После удаления растворителя полученный остаток растворяют в воде (50 мл) и экстрагируют хлористым метиленом (3 х 80 мл). Органич