Трициклические производные, способ получения, фармацевтическая композиция, способ ингибирования вазопрессина

Трициклические производные, способ получения, фармацевтическая композиция, способ ингибирования вазопрессина

Реферат

 

Предлагаются трициклические производные бензазепина общей формулы I, где Y, A, B, Z, R₁, R₂ имеют значения, указанные в формуле изобретения, а также способ их получения, фармацевтическая композиция на их основе и способ ингибирования вазопрессина. Изобретение может быть использовано при лечении состояний, при которых желательно понижение уровней вазопрессина, таких как застойная сердечная недостаточность и другие. 4 с. и 10 з.п.ф-лы, 5 табл.

Изобретение относится к новым трициклическим непептидным антагонистам вазопрессина, которые могут быть использованы при лечении состояний, при которых желательно понижение уровней вазопрессина, таких как застойная сердечная недостаточность, болезненные состояния с избыточной ренальной водной реабсорбцией и состояний с пониженной вазкулярной резистентностью и коронарного ангиоспазма.

Вазопрессин высвобождается из задней стенки гипофиза либо в ответ на повышенную осмоляльность плазмы, регистрируемую мозговыми осморецепторами, либо пониженный объем крови и кровяное давление, определяемое рецепторами значений низкого давления и артериальными барорецепторами. Гормон оказывает свое действие посредством двух хорошо установленных рецепторных подвидов: вазкулярного V₁ и ренального эпителиального V₂ рецепторов. Вызываемый вазопрессином антидиурез, посредством ренальных эпителиальных рецепторов, помогает поддерживать нормальную осмоляльность плазмы, объем крови и кровяное давление.

Вазопрессин участвует в некоторых случаях острой сердечной недостаточности, где снижена периферическая резистентность. Антагонисты V₁ могут понижать системную вазкулярную устойчивость, повышать сердечную силу и предотвращать вызываемый вазопрессином коронарный ангиоспазм. Таким образом, при состояниях с вызванным вазопрессином повышением общей периферической резистентности и нарушенным локальным кровяным потоком, V₁ антагонисты могут быть терапевтическими агентами. Антагонисты V₁ могут понижать кровяное давление, вызывать гипотензивные эффекты и, таким образом, быть терапевтически полезными при лечении некоторых видов гипертонии.

Блокировка V₂ рецепторов полезна при лечении заболеваний, характеризующихся избыточной ренальной абсорбцией свободной воды. Антидиурез регулируется гипоталамовым высвобождением вазопрессина (антидиуретический гормон), который связан со специфическими рецепторами ренального накопления тубулиновых клеток. Это связывание стимулируется аденилил циклазой и промотируется cAMP-переносимым включением водных пор в люминарную поверхность этих клеток. Антагонисты V₂ могут корректировать сдерживание потока при застойной сердечной недостаточности, циррозе печени, невротических синдромах, заболеваниях центральной нервной системы, легочной болезни и гипонатремии.

Повышение уровней вазопрессина происходит при застойной сердечной недостаточности, которая более часто встречается у пожилых пациентов с хронической болезнью сердца. У пациентов с гипонатремической застойной сердечной недостаточностью и повышенными уровнями вазопрессина антагонист может быть успешно применен при способствовании экскреции свободной воды путем подавления действия антидиуретического гормона. С учетом биохимических и фармакологических действий гормона, антагонисты вазопрессина, как ожидается, будут терапевтически использоваться для лечения и профилактики гипертонии, сердечной недостаточности, коронарного вазоспазма, ишемии сердца, ренального вазоспазма, цирроза печени, застойной сердечной недостаточности, невротического синдрома, отека мозга, церебральной ишемии, церебрального кровотечения, тромбозного кровотечения и нарушений функций удерживания воды.

Пептидные антагонисты вазопрессина описаны в следующих работах: M. Manning et al., J. Med. Chem. 35, 382 (1992); M. Manning et al., J. Med. Chem. 35, 3895 (1992); H. Gavras and B. Lammek, US Patent 5, 070,187 (1991); M. Manning and W.H.Sawyer, US Patent 5, 055, 448 (1991); F.E. Ali, US Patent 4, 766, 108 (1988); R.R. Ruffolo et al., Drug news and Perspective, 4(4), 217, (May) (1991). P.D. Williams et al. сообщают о сильных антагонистах окситоцина [J. Med. Chem. 35, 3905 (1992)], которые проявляют также слабую антагонистическую по отношению к вазопрессину активность при присоединении к V₁ и V₂ рецепторам. Пептидные антагонисты вазопрессина проигрывают от недостаточной активности при оральном применении и многие их этих пептидов не являются селективными антагонистами, поскольку они обладают также частичной агонистической активностью.

Непептидные антагонисты вазопрессина были описаны недавно Y. Yamamura et al. , Sience 252, 579 (1991); Y. Yamamura et al., Vr. J. Pharm. 105, 787 (1992); Ogawa et al. (Otsuka Pharm. Co. LTD) EP 0514667-A1; JP 04154765-A; EPO 382185-A2; and WO 9105549. Ogawa et al. (Otsuka Pharm. Co) EP 470514A содержит описание карбостирильных производных и содержащих их фармацевтических композиций. Непептидные антагонисты окситоцина и вазопрессина были описаны Merck and Co., M.G. Bock and P.D. Williams, EP 0533242A; M.G. Bock et al. , EP 0533244A; J.M. Erb, D.F. Verber, P.D. Williams EP 0533240A; K. Gilbert et al. EP 0533243A.

Преждевременные роды могут вызывать проблемы со здоровьем младенца и смерть, ключевым медиатором в механизме родов является пептидный гормон окситоцин. Исходя из фармакологического действия окситоцина, для предотвращения преждевременных родов используются антагонисты этого гормона, B.E. Evans et al. , J. Med. Chem. 35, 3919 (1992), J. Med. Chem. 36, 3993 (1993) и указанные отсылки. Соединения по настоящему изобретению являются антагонистами пептидного гормона окситоцина и применяются для контроля за преждевременными родами.

Настоящее изобретение относится к новым трициклическим производным, которые обладают антагонистической активностью по отношению к V₁ и/или V₂ рецепторам и проявляют in vivo антагонистическую по отношению к вазопрессину активность. Соединения проявляют антагонистическую активность и по отношению к окситоцину.

Данное изобретение относится к новым соединениям, выбранным из соединений общей формулы I: где Y является (CH₂)_n, O, S, NH, NCOCH₃, N-низший алкил (C₁-C₃), CH-низший алкил (C₁-C₃), CHNH-низший алкил (C₁-C₃), CHNH₂, CHN [низший алкил (C₁-C₃)], CHO-низший алкил (C₁-C₃), CHS-низший алкил (C₁-C₃), или группа где n = 0, 1, 2; A-B обозначает где m = 0, 1, 2; при условии, что, когда Y является -(CH₂)_n и n = 2, может быть также нулем и, когда n = 0, m может быть также тройкой, при условии, что, когда Y является -(CH₂)_n и n = 2, m может быть двойкой.

R₁ обозначает водород, галоген (хлор, бром, фтор, иод), OH, -S-низший алкил (C₁-C₃), -SH, SO-низший алкил (C₁-C₃), -SO₂-низший алкил (C₁-C₃), -SO₂-низший алкил (C₁-C₃), -CO-низший алкил (C₁-C₃), -CF₃; -низший алкил (C₁-C₃); O-низший алкил (C₁-C₃), -NO₂, -NH₂, -NHCO-низший алкил (C₁-C₃), -N-[низший алкил (C₁-C₃)] ₂, -SO₂NH₂; -SO₂NH-низший алкил (C₁-C₃) или -SO₂N [низший алкил (C₁-C₃)]₂; R₂ обозначает водород, Cl, Br, F, J, -OH, низший алкил (C₁-C₃), O-низший алкил (C₁-C₃), или R₁ или R₂, взятые вместе, являются метилендиокси или этилендиокси; R₃ является группой: где Ar является группой, выбранной из групп X является O, S, -NHCH₃, или -N-COCH₃; R₄ обозначает водород, -низший алкил (C₁-C₃), -CO-низший алкил (C₁-C₃); фенил CO, фенил SO₂; толил SO₂; SO₂ низший алкил (C₁-C₃); или группами формул: R₅ является водородом, -CH₃, -C₂H₅, Cl, Br, F, -O-CH₃ или -O-C₂H₅; R₆ выбран из (a) групп формулы: где циклоалкил определен как C₃-C₆-циклоалкил, циклогексенил или циклопентенил; R_a обозначает водород, CH₃, C₂H₅, группы формул: -(CH₂)₂O-низший алкил (C₁-C₃) или -CH₂CH₂OH; q обозначает один или два; R_b - водород, CH₃ или -C₂H₅; (b) группы формулы: где R₂ определено выше; (c) группы формулы: где J обозначает R_a, прямой или разветвленный низший алкил (C₁-C₈), прямой или разветвленный низший алкенил (C₂-C₈), прямой или разветвленный O-низший алкенил (C₁-C₃), тетрагидротиофен или -CH₂-K, где K обозначает галоген, -OH, тетрагидрофуран, тетрагидротиофен или часть гетероциклического кольца: где D, E, F и G выбраны из углерода или азота и где атомы углерода могут быть необязательно замещены галогеном, (C₁-C₃) низшим алкилом, гидрокси, -CO-низшим алкилом (C₁-C₃), CHO, (C₁-C₃) низшим алкокси, -CO₂-низшим алкилом (C₁-C₃) и R_a и R_b определены выше; (d) группа, выбранная из групп формул: где R_c выбран из галогена, (C₁-C₃) низшего алкила, -O-низшего алкила (C₁-C₃) и OH, P_b определен выше; Ar' является группой, выбранной из групп R₇ - водород, -CH₃, -C₂H₅, Cl, Br, -OCH₃, -OC₂H₅ или -CF₃; R₈ и R₉ обозначают независимо водород, низший алкил (C₁-C₃); O-низший алкил (C₁-C₃); S-низший алкил (C₁-C₃), -CF₃, -CN, OH, SCF₃, OCF₃, галоген, NO₂, амино или NH-низший алкил (C₁-C₃); R₁₀ обозначает галоген, водород или низший алкил (C₁-C₃); W' обозначает O, S, NH, N-низший алкил (C₁-C₃), NCO-низший алкил (C₁-C₃) или NSO₂-низший алкил (C₁-C₃).

представляет: (1) конденсированный фенил или конденсированный замещенный фенил, необязательно замещенный одним или двумя заместителями, выбранными из (C₁-C₃) низшего алкила, галогена, амино, (C₁-C₃)низшего алкокси или (C₁-C₃) низшего алкиламино; (2) 5-членное ароматическое (ненасыщенное) гетероциклическое кольцо, имеющее один гетероатом, выбранный из O, N или S; (3) 6-членное ароматическое (ненасыщенное) гетероциклическое кольцо, имеющее один атом азота; (4) 5 или 6-членное ароматическое (ненасыщенное) гетероциклическое кольцо, имеющее два атома азота; (5) 5-членное ароматическое (ненасыщенное) гетероциклическое кольцо, имеющее один атом азота вместе с либо одним атомом кислорода или одним атомом серы; где 5 или 6-членные гетероциклические кольца являются необязательно замещенными (C₁-C₃)низшим алкилом, формилом, группой формулы: галогеном или (C₁-C₃)низшим алкоксилом. Например, конденсированное гетероциклическое кольцо может быть представлено фурановым, пирроловым, пиразоловым, тиофеновым, тиазоловым, оксазоловым, имидазоловым, пиримидиновым или пиридиновым кольцом, которое может быть замещенным или незамещенным.

Из групп, определенных формулой I, некоторые подгруппы соединений являются обычно предпочтительными. Обычно предпочтительными являются такие соединения, где R₃ является группой: и Ar выбран из группы: где R₅, R₆ и R₇ определены выше.

Особенно предпочтительными являются соединения, где R₃ является группой: и Ar выбран из группы: R₆ обозначает NHCOAr' и Ar' обозначает где R₈, R₉ и W' определены выше.

Также особенно обычно предпочтительными являются соединения, где Y в формуле I обозначает -(CH₂)_n и n = 0 или 1; A-B обозначает и R₄ - R₁₀ определены выше; и m = 1, 2.

Наиболее предпочтительными из соединений формулы I являются такие, где Y является -(CH₂)_n и n = 1; A-B обозначает: R₃ обозначает группу: Ar обозначает R₆ обозначает Ar' обозначает группу: Циклоалкил и W' определены ранее и R₈ и R₉ являются предпочтительно орто CF₃, Cl, OCH₃, CH₃, SCH₃ или OCF₃ заместителями или Ar' являются дизамещенными производными, где R₈ и R₉ являются независимо Cl, OCH₃, CH₃.

Наиболее максимально предпочтительными из соединений формулы I являются такие, где Y обозначает -(CH₂)_n, n = 0 или 1 и группа представляет конденсированное фенильное, замещенное фенильное, тиофенильное, фурановое, пиррольное или пиридиновое кольцо; A-B обозначает m = 1, когда n = 1 и m = 2, когда n = 0; R₃ обозначает группу: где Ar обозначает и R₆ выбран из группы где Ar' выбран из группы и R_a, R_b, R₁ - R₉ и W' определены ранее.

Особенно наиболее предпочтительными являются соединения формул: где m обозначает целое число или два; R₁ и R₂ определены ранее; R₃ обозначает группу: где Ar выбран из групп формул: R₆ обозначает где циклоалкил определен как C₃-C₆ циклоалкил, циклогексенил или циклогептенил и где Ar' выбран из групп: R_a независимо выбран из водорода, CH₃ или -C₂H₅; и R₅, R₇, R₈, R₉, R₁₀ и W' определены выше.

Соединения по данному изобретению могут быть получены как показано в схеме 1 путем взаимодействия трициклических производных формулы 3a и 3b с замещенным или незамещенным 4-нитробензоилхлоридом 4 для получения промежуточных продуктов 5a и 5b. Восстановление нитрогруппы в промежуточных соединениях 5a и 5b дает 4-аминобензоильные производные 6a и 6b. Восстановление нитрогруппы в промежуточных соединениях 5a и 5b может быть осуществлено в условиях каталитического восстановления (водород-Pd/C; Pd/C-гидразин-этанол) или в условиях химического восстановления (SnCl₂-этанол; Zn-уксусная кислота; TiCl₃) и относящимся к условиям восстановления, известным специалистам для превращения нитрогруппы в аминогруппу. Условия для превращения нитрогруппы в аминогруппу выбраны на основании способности сохранения других функциональных групп в молекуле.

Взаимодействие соединений формулы 6a и 6b с ароилхлоридом или соответствующими активированными производными карбоновых кислот в растворителях, таких как хлороформ, дихлорметан, диоксан, тетрагидрофуран, толуол и тому подобное, в присутствии третичного основания, такого как триэтиламин и диизопропилэтиламин или пиридин и тому подобное, приводят к соединениям 8a и 8b, которые являются антагонистами вазопрессина.

Взаимодействие трициклических производных формулы 6a и 6b с либо карбамоильным производным 9, либо производным изоцианата 10 дает соединения (схема 2) формулы 11a и 11b, которые являются антагонистами вазопрессина формулы 1, где R₆ обозначает и R_b представляет собой H₂CH₃ или C₂H₅.

Взаимодействие трициклических производных формулы 6a и 6b с арилуксусными кислотами, активированными как хлорангидриды кислот 12, ангидриды, смешанные ангидриды или активированные известными активирующими агентами, дает соединения 13a и 13b (схема 3).

Соединения формулы 1, где Y, A-B, Z, R₁, R₂ и R₃ определены выше и арил в R₃ (-COAr) обозначает могут быть получены как показано в схеме 4 путем взаимодействия активированного эфира индол-5-карбоновых кислот 14 с трициклическими производными 3a и 3b. Индол-5-карбоновые кислоты 14 могут быть активированы получением ангидрида, смешанного ангидрида или взаимодействием с диэтил цианофосфонатом, N, N-карбонилдиимидазолом или соответствующими реагентами для пептидного связывания. В качестве примера производное 15 может быть получено взаимодействием кислоты 14 и N,N-карбонилдиимидазола в тетрагидрофуране; растворитель удаляют и производное взаимодействует с 3a или 3b при от 100^oC до 120^oC без растворителя. Альтернативно, 3a и 3b может взаимодействовать с 15 в растворителе, таком как толуол или ксилол, при температуре кипения с обратным холодильником. Активирующий реагент для индольной кислоты 14 выбирают на основании его совместимости с группой R₄ и его реакционной способности с трициклическими производными 3a и 3b с получением антагонистов вазопрессина 16a и 16b.

Соединения формулы 1, где Y, A-B, Z, R₁, R₂ и R₃ определены выше и арил в R₃ (-COAr) обозначает где R₆ обозначает могут быть получены как показано в схеме 5 сначала путем взаимодействия производных 8a и 8b с гидридом натрия или подобными реагентами для получения амидного аниона и далее взаимодействия аниона с диалкоксифосфорилхлоридом с получением промежуточных продуктов 17a и 17b. Взаимодействие этих промежуточных соединений с азидом натрия или лития дает продукты 18a и 18b.

Альтернативно, продукты 8a и 18b могут быть получены связыванием тетразольных производных формулы 19 с трициклическими производными 3a и 3b (схема 6). Тетразолкарбоновые кислоты активируют для присоединения к трициклическим соединениям 3a и 3b путем взаимодействия с реагентами для пептидного связывания, преобразованием в хлорангидриды кислот, ангидриды или смешанные ангидриды.

В качестве альтернативного способа получения соединений по данному изобретению, описываемых формулой 1, где Y, A-B, R₁, R₂ и Z определены ранее и R₃ обозначает является присоединение арилкарбоновых кислот 20a к трициклическим производным 3a и 3b, как показано на схеме 7.

Для присоединения арилкарбоновые кислоты активируют путем преобразования в хлорангидрид, бромангидрид или ангидрид кислоты или предварительным взаимодействием с активирующим реагентом, таким как N,N-дициклокарбодиимид, диэтил цианофосфонат и соответствующий активирующий реагент "пептидного типа". Способ активирования кислот 20a для присоединения к трициклическим производным 3a и 3b выбирают, основываясь на свойствах других замещающих групп в данной молекуле. Методом выбора является преобразование арилкарбоновых кислот 20a в соответствующий ароилхлорид. Хлорангидриды арильных кислот 20 могут быть получены обычными способами, известными специалистам, такими как взаимодействие с тионилхлоридом, оксалилхлоридом и тому подобное. Реакцию присоединения проводят в растворителе, таком как галогенированные углеводороды, толуол, ксилол, тетрагидрофуран, диоксан, в присутствии пииридина или третичного основания, такого как триэтиламин или тому подобное. Альтернативно, ароилхлориды, полученные из арилкарбоновых кислот 20, могут взаимодействовать с производными 3a и 3b в пиридине в присутствии или без 4-(диметиламино)пиридина с получением производных 21a и 21b.

Обычно, когда арилкарбоновые кислоты активируют с помощью N,N-карбонилдиимидазола и других активирующих агентов "пептидного типа", требуется более высокая температура, чем когда используются ароилхлориды. Реакцию можно проводить в высококипящем растворителе ксилоле или без растворителя (от 100^oC до 150^oC).

Исходные продукты 3a и 3b в схеме 1 могут быть получены описанными в литературе способами. Например, промежуточные 6,11-дигидро-5H-дибенз[b, e] азепины и замещенные производные получают согласно способу, описанному: L.H. Werner et al. , J. Med. Chem. 8, 74-80 (1965); A.W.H. Wardrop et al., J. Chem. Soc. Perkins Trans I, 1279-1285 (1976).

Замещенный 5,11-дигидродибенз[b, e] азепины-6-он получают по описанному способу: J. Schmutz et al., Helv, Chim. Acta, 48, 336 (1965); и восстанавливают до замещенных 6,11-дигидро-5H-дибенз[b,e]азепинов литийалюминийгидридом, дибораном, диборан-диметилсульфидом и агентами, известными специалистам для восстановления амидного карбонила в метиленовую группу. Промежуточные 10,11-дигидродибенз[b, f][1,4]тиазепины получают описанными способами - например, см. K. Brewster et al., J. Chem. Soc. Perkin i, 1286 (1976). Восстановление как дибенз[b,f][1,4]оксазепинов [A.W.H. Wardrop et al., J. Chem. Soc. Perkins Trans I, 1279 (1976), так и дибенз[b,f][1,4]оксазепин-11(10H)-онов и дибенз[b, f][1,4]тиазепин-11(10H)-онов - J. Schmutz et al., Helv. Chim. Acta, 48, 336, (1965); может быть осуществлено литийалюминийгидридом в инертных растворителях, таких как диоксан и тому подобное. Трициклические производные 6,7-дигидро-5H-дибенз[b,d]азепина формулы 30 могут быть получены описанным способом: T. Ohta et al., Tetrahedron Lett, 26, 5811 (1985); Weisner et al., J. Amer. Chem. Soc. 77, 675 (1955);; или производные могут быть получены способами, проиллюстрированными в схеме 8. Восстановление нитросоединений структуры типа 31 с последующим замыканием цикла приводит к лактамам 32, которые восстанавливают с получением трициклических азепинов формулы 33.

5,11-Дигидро-6H-пиридо[3,2-c][1]бензазепины получают описанными способами - J. Firl et al. , Liebigs Ann. Chem., 469 (1989). Трициклические 1,2,3,4-тетрагидропиразоло[4,3-c] [1] бензазепины синтезируют как описано в литературе - G. Palazpino et al., J. Heterocyclic Chem., 26, 71 (1989).

Трициклические промежуточные соединения 42 для синтеза выбранных антагонистов вазопрессина по данному изобретению, где Y в формуле 1 обозначает -CH₂- и m = 1, могут быть получены как показано в схеме 9. Подходящие 1-нитро-2-хлор или 1-нитро-2-бром гетероциклы 35 подвергают замещению галогена при взаимодействии с алкиллитиевым реагентом, таким как трет-бутиллитий, фтор-бутиллитий или н-бутиллитий, с получением промежуточного соединения 37, которое взаимодействует с ангидридом формулы 38. R₁₂ обозначает трет-бутил, фтор-бутил, н-бутил, 2,6-диметилпиперидин или затрудненный не нуклеофильный диалкиламин. Нитропродукты 39 восстанавливают водородом и подходящим катализатором или химическим путем (Zn-уксусная кислота, TiCl₃ и т.д.) до промежуточного амино соединения 40. Замыкание цикла для образования циклического лактама 41 удобно осуществляют нагреванием в ксилоле или в инертном растворителе при от 100^oC до 200^oC. Циклические лактамы структуры типа 41 легко восстанавливаются дибораном в тетрагидрофуране, диборан-диметилсульфидом в тетрагидрофуране или литийалюминийгидридом в подходящем растворителе, таком как диоксан, с получением трициклических соединений 42.

Альтернативно, как показано на схеме 10, некоторые трициклические производные структурного типа 42 могут быть получены присоединением "палладиевого" типа или вызываемым "медью" присоединением галогенированных производных 43 с получением трициклических лактамов 44. Восстановление лактамовой карбонильной группы дает промежуточные соединения 42. Присоединение галогенпроизводных 45 для осуществления замыкания цикла к реагентам, активированным медью или "палладиевого" типа, которые вызывают арильное присоединение дает лактамы 46. Восстановление лактамов 46 дибораном дает производные 47. Ульмановское поперечное связывание галогенированных гетероциклов и - бромнитробензолов и соответствующее поперечное связывание низковалентными палладиевыми соединениями, такими как [Pd(PPh₃)₄] и PdCl₂(PPh₃)₂, являются известными способами синтеза; N. Shimizu et al., Tetrahedron Lett. 34, 3421 (1993) и приведенные там ссылки; J. Stavenuiter et al., Heterocycles, 26, 2711 (1987) и приведенные там ссылки.

Татрагидро-1H-бензазепин-5-оны 51 и тетрагидро-1H-бензазепин-2,5-дионы 52 используются для синтезов промежуточных трициклических гетероциклических структур 53 и 54 (схема 11). Тетрагидробензазепин-5-оны 51 и 52 могут быть формилированы с получением гидроксиметиленовых производных или подвергнуты взаимодействию или с реагентом Вильсмейера, или N,N-диметилформамиддиметилацеталем с получением диметиламинометилен производными. Отщепление гетероциклических колец от L-гидроксиметиленкетонов взаимодействием с гидразином, N-метилгидразином, гидроксиламином или формамидином с получением пиразолов, N-метилпиразолов, оксазолов или пиримидинов, соответственно, является стандартным описанным способом. См. формилирование Вильсмейера - Tetrahedron, 49, 4015-4034 (1993) и приведенные там ссылки, и формилирование колец - J. Heterocyclic Chem., 29, 1214 (1992) и приведенные ссылки.

Замещенные и незамещенные тетрагидробензазепин-2-оны являются известными соединениями, которые получают взаимодействием L-тетранолов с азидом натрия в кислых условиях. [J. Chem. Soc. 456 (1937); Tetrahedron 49, 1807 (1993)] (Schmidt reaction - реакция Шмидта). Восстановление тетрагидро-1H-бензазепин-2-онов дает тетрагидро-1H-бензазепины 48, ацилирование которых дает соединения 49. Окисление N-ацил тетрагидро-1H-бензазепинов типа 49 для получения 5-он производных является известным способом окисления; R.L. Augustine and W.G. Pierson, J. Org. Chem. 34, 1070 (1969).

Синтез 3,4-дигидро-1H-1-бензазепин-2,5-дионы (52: R15=H) известен, так же как и преобразование 3,4-дигидро-1H-1-бензазепин-2,5-дионов в 4-[(диметиламино)метилен] -3,4-дигидро-1H-1-бензазепин-2,5-дионы с помощью N, N-диметилформамида, диметилацеталя: [W.-Y. Chen, and Gilman J. Heterocyclic Chem. , 20, 663 (1983)]. Предшествующие ссылки описывают синтез 2-метил-5,7-дигидропиримидо[5,4-d] [1]бензазепин-6(6H)онов, которые могут быть восстановлены удалением карбонильной группы лактама для получения трициклических производных структурного типа 54, где Z обозначает пиримидиновое кольцо.

Синтез соединений формулы 1, где R₃ обозначает где группа Ar обозначает R₆ обозначает и где Ar' определено ранее, осуществляют согласно схеме 12. Трициклические соединения 3a и 3b взаимодействуют с монометил терефталилхлоридом 55 (полученным из моно-метилтерефталата и тионилхлорида) в присутствии третичного основания, такого как триэтиламин в растворителях, таких как дихлорметан, тетрагидрофуран, диоксан, толуол и тому подобное, с получением производных 56a и 56b. Эти эфирные промежуточные соединения (56a и 56b) гидролизуют с от двух до десяти эквивалентами щелочных гидроксидов, таких как гидроксид калия или натрия, в водном метаноле или этаноле с получением соответствующих кислот после подкисления и обработки. Свободные кислоты преобразуют в хлорангидриды кислот с помощью тионилхлорида и эти промежуточные хлорангидриды кислот, 57a и 57b, подвергают взаимодействию с аминоарилпроизводными формулы: где Ar' определено ранее для получения соединений 59a и 59b.

Как описано в реакционной схеме 1, для следующих конкретных трициклических кольцевых систем общей формулы 3a и 3b показан один из способов синтеза для получения соединений по изобретению. Эти производные 60, 63, 66, 69, 72, 78, 81, 84, 87, 90 и 93, когда их подвергают условиям реакции схемы 1, при которой осуществляют ацилирование трициклических соединений (P16=H) с 4-нитробензоилхлоридом или замещенным 4-нитробензоилхлоридом в присутствии триалкиламина, такого как триэтиламин, в растворителях, таких как хлороформ, дихлорметан, диоксан, тетрагидрофуран, толуол и тому подобное, дают промежуточные соединения 61, 64, 67, 70, 73, 76, 79, 82, 85, 88, 91, 94. Эти 4-нитробензоил- и замещенные 4-нитробензоилпроизводные восстанавливают водородом в присутствии катализатора, такого как Pd/C в растворителях, таких как этанол, этанол-этилацетат, уксусная кислота или N,N-диметилформамид, дают 4-аминобензоил- или замещенные 4-аминобензоилпроизводные 62, 65, 68, 71, 74, 77, 80, 83, 86, 89, 92, 95. Альтернативно, 4-нитробензоил- и замещенные 4-нитробензоилпроизводные 61, 64, 67, 70, 73, 76, 79, 82, 85, 88, 91, 94 восстанавливают с помощь/ Pd/C и гидразином при кипячении с обратным холодильником в этаноле.

4-Аминобензоил- или замещенные 4-аминобензоилпроизводные 62, 65, 68, 71, 74, 77, 80, 83, 86, 89, 92, 95 взаимодействуют с хлорангидридами кислот формулы: Ar'COCl, циклоалкил(CH₂)_nCOCl, Ar'CH₂COCl с получением продуктов, как показано в схеме 1, где R₆ определено выше.

Как описано в схеме 2, трициклические 4-амионобензоил- или замещенные 4-аминобензоилпроизводные 62, 65, 68, 71, 74, 77, 80, 83, 86, 89, 92, 95 взаимодействуют с карбамоильными производными.

или арилизоцианатами Ar'-N=C=O с получением конкретных производных, где P₆ обозначает и R_b независимо выбран из H, CH₃ или -C₂H₅.

Как описано в схеме 7, трициклические производные 60, 63, 66, 69, 72, 78, 81, 84, 87, 90 и 93 взаимодействуют в одну стадию с предварительно синтезированным ArCOcl соединением, где Ar определен ранее. Например, взаимодействие конкретных трициклических производных 60, 63, 66, 69, 72, 78, 81, 84, 87, 90, 93 с ароилхлоридами соответствующих структурных типов: дают в одну стадию производные этих нелинейных трициклических соединений, где Ar группа является частью: формула 1 обозначает и R₆ обозначает где циклоалкил, R_a, R_b, R₁, R₂, R₅, R₇ и Ar описаны выше.

Целевые соединения настоящего изобретения исследуют на биологическую активность следующим образом: Исследование связывания с V₁ рецептором печени крыс Мембраны плазмы печени крыс, представляющие подтипы рецептора вазопрессина V₁, выделяются с помощью градиента плотности сукрозы по методу, описанному Lesko et al. , (1973). Эти мембраны быстро суспендируют в 50,0 мМ Трис-HCl буфере, pH 7,4, содержащем 0,2% бычий сывороточный альбумин (BSA) и 0,1 мМ фенилметилсульфонилфторид (PMSF), и выдерживают при заморозке при -70^oC до использования в соответствующих экспериментах по связыванию. Для эксперимента по связыванию в ячейки микротитрационного планшета с девяносто шестью ячейками помещают следующий состав: 100 мкл 100,0 мМ Трис-HCl буфера, содержащего 10,0 мМ gCl 0,2% инактивированного нагреванием BSA и смесь ингибиторов протеазы: лейпептин, 1,0 мг%; апротинин, 1,0 мг%, 1,10-фенантролин, 2,0 мг%; ингибитор трипсина, 10,0 мг% и 0,1 мМ PMSF, 20,0 мкл [фенилаланил-3,4,5-³H]вазопрессина (S.A. 45,1 Ci/ммоль) при 0,8 нМ и реакцию инициируют добавлением 80 мкл тканевой мембраны, содержащей 20 мкг тканевого протеина. Планшет выдерживают не встряхивая на вращающемся станке при комнатной температуре в течение 120 мин для достижения равновесия. Неспецифические образцы испытывают в присутствии 0,1 мкМ намеченного антагониста фенилаланилвазопрессина, добавленного в 20,0 мкл объем.

Исследуемые соединения солюбилизируют в 50% диметилсульфоксиде (DMSO) и добавляют в 20,0 мкл объем до конечного инкубационного объема в 200 мкл. По завершении связывания, содержимое каждой ячейки отфильтровывают, используя харвестер клеток Brandel^@ (Gaithesburg, MD). Радиоактивность, задерживаемая на фильтровальном диске комплексом лиганд-рецептор, измеряется жидким сцинцилляционным счетчиком в Packard LS Counter с эффективностью в 65% для трития. Полученные данные проанализированы для определения величины IC₅₀ по сравнительному методу LUNDON-2 program for competition (LUNDON SOFTWARE, OH) и представлены в таблице 1.

Исследование связывания с медуллярным V₁ рецептором почек крыс Медуляторную ткань из почек крыс отделяют, нарезают на маленькие кусочки и вымачивают в 0,154 мМ растворе хлорида натрия, содержащем 1,0 мМ EDTA при многократной смене жидкой фазы, до тех пор, пока раствор станет чистым от крови. Ткань гомогенизируют в 0,25 М растворе сукрозы, содержащем 1,0 мМ EDTA и 0,1 мМ PMSF, используя гомогенизатор Potter-Elvehjem с тефлоновым пестиком. Гомогенат фильтруют через несколько слоев (4 слоя) сырной ткани (cheesecloth). Фильтрат вновь гомогенизируют, используя гомогенизатор dounce с плотным подходящим пестиком. Конечный гомогенат центрифугируют при 1500g в течение 15 минут. Ядерные пластинки отбрасывают и жидкий супернатант опять центрифугируют при 40000g в течение 30 мин. Полученная лепешка содержит внутреннюю темную часть с внешней поверхностью, слегка розовой. Розовую внешнюю часть суспендируют в небольшом количестве 50,0 мМ Трис-HCl буфера, pH 7,4. Содержание протеина определяют методом Лаури (Lowry et al., J. Biol. Chem. 1953). Суспензию мембраны хранят при -70^oC в 50,0 мМ Трис-HCl, содержащем 0,2% инактивированного BSA и 0,1 мМ PMSF, в частях по 1,0 мл, содержащих 10,0 мг протеина на мл суспензии, перед тем, как использовать в соответствующих экспериментах на связывание.

Для экспериментов по связыванию в 1 мкл-овые углубления микротитрационного планшета с 96 углублениями помещают следующий состав: 100,0 мкл 100,0 мМ Трис-HCl буфера, содержащего 0,2% инактивированного нагреванием BSA, 10,0 мМ MgCl₂ и смесь ингибиторов протеазы: лейпептин, 1,0 мг%; апротинин, 1,0 мг%; 1,10-фенантролин, 2,0 мг%; ингибитор трипсина, 10,0 мг% и 0,1 мМ PMSF, 20,0 мл [³H] Аргинина 8, вазопрессин (S.A. 75,0 Ci/ммоль) при 0,8 нМ и реакцию инициируют добавлением 80 мкл тканевой мембраны, содержащей (200,0 мк тканевого протеина). Планшет выдерживают не встряхивая на вращающемся станке в течение 120 мин для достижения равновесия. Неспецифические образцы испытывают в присутствии 0,1 мкМ немеченого лиганда, добавленного в 20,0 мкл объем. Исследуемые соединения солюбилизируют в 50% диметилсульфоксиде (DMSO) и добавляют в 20,0 мкл объем до конечного инкубационного объема в 200 мкл. По завершении связывания содержимое каждого углубления отфильтровывают, используя харвестер клеток Brandel^@ (Gaithersburg, MD). Радиоактивность, задерживаемая на фильтровальном диске комплексом лиган-рецептор, измеряется жидким сцинцилляционным счетчиком в Packard LS Counter с эффективностью в 65% для трития. Полученные данные проанализированы для оценки значения IC₅₀ по сравнительному методу LUNDON-2 program for competition (LUNDON SOFTWARE, OH) и представлены в таблице 1.

Эксперименты по радиоактивному связыванию на мембранах тромбоцитов человека (a) Приготовление тромбоцидной мембраны: Замороженную обогащенную тромбоцитами плазму (PRP), полученную из Hudson Valley Blood Services, размораживают при комнатной температуре. (Источник тромбоцитов: Hudson Valley Blood Services, Westchester Medical Center, Valhalla, NY). Пробирки, содержащие PRP центрифугируют при 16000g в течение 10 мин при 4^oC и отбрасывают жидкий супернатант. Тромбоциты вновь суспендируют в равном объеме 50,0 мМ Трис-HCl, pH 7,5, содержащем 120 мМ NaCl и 20,0 мМ EDTA. Суспензию вновь центрифугируют при 16000g в течение 10 мин. Эту промывочную стадию повторяют еще один раз. Промывные воды отбрасывают и дизированные тромбоциты гомогенизируют в буфере Трис-HCl низкой ионной силы, 5,0 мМ, pH 7,5, содержащем 5,0 мМ EDTA. Гомогенат центрифугируют при 39000g в течение 10 мин. Полученные тромбоциты вновь суспендируют в Трис-HCl буфере, 70 мМ, pH 7,5 и вновь центрифугируют при 39000g в течение 10 мин. Конечные тромбоциты вновь суспендируют в 50,0 мМ Трис-HCl буфере, pH 7,4, содержащем 120 мМ NaCl и 5,0 мМ KCl с получением 1,0-2,0 мг протеина на мл суспензии.

(b) Связывание V₁ рецептора вазопрессина подтипа в мембранах тромбоцитов человека.

В ячейки микротитрационного планшета с 96 ячейками добавляют 100,0 мкл 50,0 мМ трис-HCl буфера, содержащего 0,2% BSA и смесь ингибиторов протеазы (апротинин, лейпептид и т. д. ). Затем добавляют 20,0 мкмл [³H] лиганд (Manning или Arg 8 Вазопрессин) с получением конечных концентраций, изменяющихся от 0,01 до 10,0 нМ. Инициируют связывание добавлением 80 мкл суспензии тромбоцитов (приблизительно 100,0 мкг протеина). Смешивают все реагенты с помощью пипетки, пропуская смесь вверх и вниз несколько раз. Неспецифическое связывание измеряют в присутствии 0,1 мкМ немеченого лиганда (Manning или Arg 8 Вазопрессин). Смеси дают постоять не встряхивая при комнатной температуре в течение девяноста (90) мин. После этого времени инкубат быстро отфильтровывают вакуумным отсосом на фильтре GF/B, используя харвестер клеток Brandel. Радиоактивность, задерживаемая на фильтровальном диске определяется добавлением жидкого сцинциллянта и обсчетом в жидком сцинтилляторе.

Связывание с мембранами фибропластных клеток мышей линии (LV-2), инфицированных CDNA, выраженным V₂ рецептором вазопрессина человека (a) Приготовление мембраны Колбу объемом 175 мл, содержащую присоединенные клетки, выросшие до слияния, очищают отсосом культуральной среды. Колбы, содержащие присоединенные клетки, споласкивают 2х5 мл соляным фосфатным буфером (PBS) и жидкость