Производные хиназолина, способ их получения, фармацевтическая композиция и способ достижения антипролиферативного эффекта

Производные хиназолина, способ их получения, фармацевтическая композиция и способ достижения антипролиферативного эффекта

Реферат

 

Изобретение относится к производным хиназолина формулы (I), где n = 2 и каждый R² независимо галоген; R³ - (1-4С)алкокси; R¹ - ди-[(1-4С)алкил]амино(2-4С)алкокси, пирролидин-1-ил-(2-4С)алкокси, пиперидино-(2-4С)алкокси, морфолино-(2-4С)алкокси, пиперазин-1-ил-(2-4С)алкокси, 4-(1-4С)алкилпиперазин-1-ил-(2-4С)алкокси, имидазол-1-ил-(2-4С)алкокси, ди-[(1-4С)-алкокси-(2-4С)алкил] амино-(2-4С)алкокси и любой из R¹, содержащий метиленовую группу, которая не связана ни с атомом азота, ни с атомом кислорода, необязательно содержит в указанной метиленовой группе гидроксильный заместитель, или их фармацевтически приемлемым солям, способам их получения, фармацевтическим составам, содержащим эти соединения, и использованию ингибирующей активности соединений для подавления рецепторных тирозинкиназ при лечении пролиферативного заболевания, такого как рак. 6 с. и 14 з.п.ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к производным хиназолина или их фармацевтически приемлемым солям, которые обладают антипролиферативным действием, таким как противораковый эффект, и соответственно могут использоваться при лечении человека или животных. Настоящее изобретение также относится к способам получения производных хиназолина, фармацевтическим составам на их основе и их использованию при производстве лекарственных средств, оказывающих антипролиферативный эффект у теплокровных животных, в частности, у человека.

Многие современные методы лечения заболеваний, связанных с клеточной пролиферацией, таких как псориаз и рак, включают использование соединений, которые подавляют синтез ДНК. Такие соединения обычно являются токсичными для клеток, но их токсичность при быстром размножении клеток, таких как опухолевые клетки, может оказаться желательной. Альтернативные подходы к антипролиферативным препаратам, действующим по иному механизму, нежели ингибирование ДНК-синтеза, предполагают достижение высокой селективности действия.

За последние годы было установлено, что клетки могут перерождаться в злокачественные вследствие трансформации части ДНК в онкоген, то есть ген, который при активации вызывает образование злокачественных опухолевых клеток (Bradshaw, Mytaqenesis, 1986, 1, 91). Ряд таких онкогенов вызывают увеличение образования пептидов, которые являются рецепторами для факторов роста. Комплекс рецепторов фактора роста в дальнейшем вызывает увеличение пролиферации клеток. Известно, например, что некоторые онкогены кодируют тирозинкиназы и что определенные рецепторы фактора роста также являются тирозинкиназной группой ферментов. (Yarden et al., Ann. Rev.Biochem, 1988, 57, 443; Larsen et al., Ann.Reports in Med. Chem. 1989, гл.13).

Рецепторы тирозинкиназы играют важную роль в передаче биохимических сигналов, которые инициируют воспроизводство клеток. Они представляют собой крупные ферменты, которые воздействуют на мембрану клетки и занимают внеклеточную связующую область для факторов роста, таких как эпидермальный фактор роста (EGF), и внутриклеточную часть, которая функционирует как киназа, осуществляя фосфорилирование тирозинаминокислот в протеины и тем самым оказывая влияние на клеточную пролиферацию. Известны различные классы рецепторных тирозинкиназ (Wilks Advancesin Cancer Research, 1993, 60, 43-73), включающие семейства факторов роста, которые связаны с различными рецепторными тиразинкиназами. Классификация включает Класс I рецепторных тирозинкиназ, содержащих EGF семейство рецепторных тирозинкиназ, таких как EGF. TGF. N EL'erbB. X mrk HER и let 23 рецепторы, Класс II рецепторных тирозинкиназ, включающих инсулиновое семейство рецепторных тирозинкиназ, таких как инсулин, ICF I и инсулиноподобные рецепторные (IRR) рецепторы, и Класс III рецепторных тирозинкиназ, содержащих семейство тромбоцитопроизводных фактора роста (PDGF) рецепторных тирозинкиназ, таких как PDGF, PDGF, и рецепторы колонию стимулирующего фактора I (CSFI). Известно, что киназы Класса I, такие как EGF - семейство рецепторных тирозинкиназ, часто присутствуют в обычных раковых опухолях человека, таких как рак молочной железы (Sainsbury et al., Brit.J.Cancer, 1988, 58, 458; Guerin et al., Oncoqene Res, 1988, 3, 21 и Klijn et al., Breast Cancer Res.Treat., 1994, 29, 73), крупно-клеточные раки легкого (NSCL Cs), включая аденокарциному (Cerny et al., Brit.J.Cancer, 1989, 54, 265; Reubi et al. Int.J.Cancer, 1990, 45, 269; и Rusch et al. Cancer Research, 1993, 53, 2379), и сквамозно-клеточный рак легкого (Hendler et al., Cancer Cells, 1989, 7, 347), рак мочевого пузыря (Neal et al., Lancet, 1985, 366), рак пищевода (Mukaida Cancer, 1991, 68, 142), рак желудочно-кишечного тракта, таких как толстая кишка, прямая кишка и желудок (Bolen et al., Oncoqone Res., 1987, 1, 149), рак простаты (Visakorpi et al., Hitstochem. J., 1992, 24, 481), лейкемия (Konaka et al. Cell, 1984, 37, 1035) и рак яичников, бронхов или поджелудочной железы (Европейское Патентное описание N 0400586). Когда другие человеческие опухолевые ткани испытывали на семейство EGF рецепторных тирозинкиназ, ожидалось, что будет установлено их существенное преобладание в других раковых опухолях, таких как рак щитовидной железы и рак матки. Также известно, что тирозинкиназная активность EGF типа редко обнаруживается в нормальных клетках, в то время как более часто обнаруживается в злокачественных клетках (Cell, 1987, 50, 823). Недавно было показано (W.J.Gullick, Brit. Med.Bull.,1991,47, 87), что EGF рецепторы, которые обладают тирозинкиназной активностью, присутствуют в значительном избытке во многих раковых опухолях человека, таких как рак мозга, легочных сквамозных клеток, опухоли мочевого пузыря, желудка, молочной железы, головы и шеи, пищевода, гинекологические опухоли, щитовидной железы.

Соответственно, признается, что ингибитор рецепторной тирозинкиназы должен быть ценным селективным ингибитором роста раковых клеток молочной железы (Yaish et al. Science, 1988, 242, 933). В пользу такой точки зрения говорит то, что эрбстатин, EGF рецепторный тирозинкиназный ингибитор, специфически замедляет рост у атимусных голых мышей трансплантированной в них человеческой карциномы молочной железы, которая усиливает EGF рецепторную тирозинкиназу, но не оказывает эффекта на рост другой карциномы, которая нечувствительна к EGF рецепторной тирозинкиназе (Toi et al., Eur.J. Cancer Clin. Oncol. , 1990, 26, 722). Также указывается, что различные производные стирола обладают способностью ингибировать тирозинкиназу (Европейские патентные заявки NN 0211363, 0304493 и 0322738) и могут применяться в качестве противоопухолевых агентов. Ингибируюций эффект ин виво двух таких производных стирола, являющихся ингибиторами рецепторной EGF тирозинкиназы, был продемонстрирован на примере подавления роста сквамозной карциномы клеток человека, вводимых голым мышам (Yoneda et al., Cancer Research,1991, 51, 4430). В недавнем обзоре (TR Burke Jr.Druqs of the Future, 1992, 17, 119) описываются различные известные ингибиторы тирозинкиназы.

Из Европейских патентных заявок 0520722, 0566226 и 0635498 известно, что определенные производные хиназолина, которые несут анилинозаместитель в положении 4, способны ингибировать активность рецепторной тирозинкиназы. Известно, что определенные производные хиназолина, которые имеют в положении 4 гетероариламинозаместитель, также обладают способностью ингибировать активность рецепторной тирозинкиназы (Европейская патентная заявка N 0602851).

Кроме того, известно, что определенные арил- или гетероарилсоединения подавляют EGF и/или PDGF рецептор тирозинкиназы (Международная патентная заявка WO 92/20642). В заявке раскрываются определенные производные хиназолина, но нет никаких упоминаний о 4-анилинохиназолиновых производных.

Антипролиферативный эффект ин витро 4-анилино-хиназолинового производного раскрывается Fry et al. Science, 1994, 265, 1093. Утверждается, что 4-(3'-броманилино)-6,7-диметоксихиназолин показал высокую эффективность как ингибитор EGF рецептора тирозинкиназы.

Ингибирующее действие ин виво 4,5-дианилинофталимидного производного, который является ингибитором EGF семейства рецепторной тирозинкиназы, проиллюстрировано в отношении роста у BALB/C голых мышей эпидермоидной карциномы человека A-431 или карциномы яичников человека S KOV-3 (Buchdunqer et al., Proc. Nat. Acad. Sci., 1994, 91, 2334).

Из Европейской патентной заявки N 0635507 также известно, что определенные трициклические соединения, которые включают пяти- или шестичленное кольцо, конденсированное с бензольным ядром хиназолина, обладают ингибирующей активностью в отношении рецепторной тирозинкиназы. Также известно из Европейской патентной заявки N 0635498, что определенные производные хиназолина, которые содержат аминогруппу в положении 6 и галоген в положении 7, проявляют ингибирующую активность в отношении рецепторной тирозинкиназы.

Соответственно, установлено, что ингибиторы рецепторной тирозинкиназы Класса I могут использоваться при лечении различных раковых заболеваний у человека.

С рецепторными тирозинкиназами EGF также связаны незлокачественные пролиферативные нарушения, такие как псориаз (Elder et al. Science, 1989, 243, 811). Следовательно, можно ожидать, что ингибиторы рецепторных тирозинокиназ типа EGF могут использоваться при лечении незлокачественных форм чрезмерной клеточной пролиферации, таких как псориаз (где, как полагают, TGF является наиболее важным фактором роста), доброкачественная гипертрофия простаты (BPH), атеросклероз и рестеноз.

Ни в одной из указанных ссылок не раскрываются производные хиназолина, которые содержат в положении 4 анилинозаместитель, в положении 7 алкоксильный заместитель и в положении 6 диалкиламиноалкоксизаместитель. Авторами изобретения было установлено, что такие соединения обладают антрипролиферативными свойствами ин виво, которые, можно полагать, возникают в результате их ингибирующей активности в отношении рецепторной тирозинкиназы Класса I.

В соответствии с настоящим изобретением предлагается производное хиназолина формулы I: где n = 1, 2 или 3 и каждый R² независимо галоген, трифторметил или (1-4C)алкил; R³ - (1-4C) алкоксильная группа и R¹ - ди[(1-4C)алкил]амино-(2-4C)алкокси, пирролидин-1-ил-(2-4C)алкокси, пиперидино-(2-4C)алкокси, морфолино- (2-4C)алкокси, пиперазин-1-ил(2-4C)алкокси, 4-(1-4C)алкилпиперазин- 1-ил-(2-4C)алкокси, имидазол-1-ил-(2-4C) алкокси, ди-[(1-4C)алкокси-(2-4C)алкил] амино-(2-4C)алкокси, тиаморфолино- (2-4C)алкокси, 1-оксотиаморфолино(2-4C)алкокси или 1,1-диоксотиаморфолино-(2-4C)алкокси, и где любой из вышеупомянутых R¹ заместителей, включающий CH₂ (метиленовую) группу, не связанную ни атомом азота, ни с атомом кислорода, произвольно содержит в указанной CH₂-группе гидроксильный заместитель; или его фармацевтически приемлемая соль.

В соответствии с еще одним аспектом настоящего изобретения предлагается производное хиназолина формулы I, где n равно 1, 2 или 3 и каждый R² независимо представляет собой галоген, трифторметил или (1-4C)алкил; R³ - (1-4C) алкоксигруппа и R¹ - ди-[(1-4C)алкил]амино-(2-4C)алкокси, пирролидин-1-ил-(2-4C)алкокси, пиперидино-(2-4C)алкокси, морфолино-(2-4C)-алкокси, пиперазин-1-ил-(2-4C) алкокси, 4-(1- 4C)алкилпиперазин-1-ил-(2-4C)алкокси, имидазол-1-ил-(2-4C) алкокси или ди[(1-4C) алкокси-(2-4C) алкил] амино-(2-4C) алкокси, и где любой из упомянутых выше R¹ заместителей, содержащий CH₂ (метиленовую) группу, не связанную с атомами азота или кислорода, произвольно содержит в указанной CH₂-группе гидроксильный заместитель; или его фармацевтически приемлемая соль.

В настоящем описании термин "алкил" относится как к алкильным группам с прямой, так и с разветвленной цепью, но ссылка на индивидуальную алкильную группу, например "пропил", используется для обозначения группы с прямой цепью. Например, когда R¹ представляет собой ди-[(1-4C) алкил] амино-(2-4C) алкокси, приемлемые значения для такого общего радикала включают 2-диметиламиноэтокси, 3-диметиламинопропокси, 2-диметиламинопропокси и 1-диметиламино-2-илокси. Аналогичный подход используется для обозначения других общих терминов.

Следует иметь в виду, что настоящее изобретение, поскольку определенные соединения формулы I могут существовать в оптически активных или рацемических формах, благодаря наличию одного или нескольких заместителей, содержащих асимметрический атом углерода, включает любую такую оптически активную форму или рацемат, которые проявляют антипролиферативную активность. Синтез оптически активных форм может осуществляться стандартными методами органической химии, которые хорошо известны специалистам, например синтезом из оптически активных исходных реагентов или путем расщепления рацемической формы.

Хиназолины формулы I являются незамещенными в положениях 2, 5 и 8.

Также следует иметь ввиду, что определенные производные хиназолина формулы I могут существовать в сольватированной, также как и в несольватированной формах, таких как, например, гидратированные формы. Очевидно, что настоящее изобретение охватывает все такие сольватированные формы, которые обладают антипролиферативной активностью.

Приемлемые значения для радикалов в общей форме, упомянутых выше, включают те, которые перечислены ниже.

Приемлемое значение R² в том случае, когда он представляет собой галоген, включает, например, фтор, хлор, бром или йод; когда представляет собой (1-4C)алкил, включает, например, метил, этил, пропил, изопропил или бутил.

Приемлемое значение R³ в том случае, когда он представляет собой в общей форме (1-4C)алкокси, может выбираться, например, из числа таких, как метокси, этоксипропокси, изопропокси или бутокси.

Приемлемыми значениями каждого R¹ заместителя, которые могут присутствовать в хиназолиновом цикле, являются, например: для ди-[(1- 4C)алкил]амино-(2-4C)алкокси: 2-диметиламиноэтокси, 2-(N-этил-N-метиламино)этокси, 2-диэтиламиноэтокси, 2-дипропиламиноэтокси, 3-диметиламинопропокси, 3-диэтиламинопропокси, 2-диметиламинопропокси, 2-диэтиламинопропокси, 1-диметиламинопроп- 2-илокси, 1-диэтиламинопроп-2-илокси, 1-диметиламино-2-метилпроп- 2-илокси, 2-диметиламино-2-метилпропокси, 4-диметиламинобутокси, 4-диэтиламинобутокси, 3-диметиламинобутокси, 3-диэтиламинобутокси, 2-диметиламинобутокси, 2-диэтиламинобутокси, 1-диметиламинобут-2- илокси и 1-диэтиламинобут-2-илокси; для пирролидин-1-ил-(2-4C)алкоксигруппы: 2-(пирролидин-1-ил)этокси, 3-(пирролидин-1-ил)пропокси и 4-(пирролидин-1-ил)бутокси; для пиперидино-(2- 4C)алкоксигруппы: 2-пиперидиноэтокси, 3-пиперидинопропокси и 4-пиперидинобутокси; для морфолино-(2-4C)алкоксигруппы: 2-морфолиноэтокси, 3-морфолинопропокси и 4-морфолинобутокси; для пиперазин-1-ил-(2-4C)алкоксигруппы: 2-(пиперазин-1-ил)этокси, 3-(пиперазин-1-ил)пропокси и 4-(пиперазин-1-ил) бутокси; для 4-(1-4C)алкилпиперазин-1-ил(2-4C)алкоксигруппы: 2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси, 3-(4-метипиперазин-1- ил)пропокси и 4-(4-метилпиперазин-1-ил)бутокси; для имидазоп-1-ил-(2-4C)алкоксигруппы: 2-имидазол-1-ил) этокси, 3-(имидазол-1-ил) пропокси и 4-(имидазол-1-ил)бутокси; для ди-[(1-4C) алкокси-(2-4C)алкил]амино-(2-4C) алкоксигруппы: 2-[ди-(2-метоксиэтил)амино] этокси, 3-[ди-(2-метоксиэтил)амино] пропокси, 2-[ди-(3-метоксипропил) амино]этокси и 3-[ди-(3-метоксипропил)амино]пропокси; для тиаморфолино-(2-4C)алкоксигруппы: 2-тиаморфолиноэтокси, 3-тиаморфолинопропокси и 4-тиаморфолинобутокси; для 1-оксотиаморфолино-(2-4C)алкоксигруппы: 2-(1-оксотиаморфолино)этокси, 3-(1-оксотиаморфолино)пропокси и 4-(1-оксотиаморфолино)бутокси; для 1,1-диоксотиаморфолино-(2-4C)алкоксигруппы: 2-(1,1-диоксотиаморфолино)этокси, 3-(1,1-диоксотиаморфолино) пропокси и 4-(1,1-диоксотиаморфолино)бутокси.

Приемлемыми заместителями, получаемыми, когда любой из R¹ заместителей, включающий CH₂ группу, которая не связана с атомом азота или кислорода, несет на указанной CH₂ группе гидроксильный заместитель, являются, например, замещенные ди-[(1-4C) алкил]амино-(2-4C)алкоксигруппы, например гидрокси-ди-[(1-4C) алкил]амино-(2-4C)алкоксигруппы, такая как 3-диметиламино-2- гидроксипропокси.

Приемлемой фармацевтически пригодной солью производного хиназолина по настоящему изобретению является, например, аддитивная соль кислоты производного хиназолина по настоящему изобретению, которая является достаточно основной, например моно- или дикислоты, например, органической или неорганической кислоты, например соляной, бромистоводородной, серной, фосфорной, трифторуксусной, лимонной, малеиновой, винной, фумаровой, метансульфокислоты или 4-толуолсульфокислоты.

Конкретно к числу новых соединений по настоящему изобретению относятся, например, производные хиназолина формулы I или их фармацевтически приемлемые соли, у которых: a) n равно 1 или 2 и каждый R² независимо представляет собой атом фтора, хлора, брома, метил или трифторметил; и R³ и R¹ принимают любые значения из числа определенных выше или в настоящем разделе, относящиеся к конкретным новым соединениям по настоящему изобретению; b) n равно 1, 2 или 3 и каждый R² независимо представляет собой фтор, хлор или бром; и R³ и R₁ принимают любые значения, указанные ранее или в настоящем разделе, относящиеся к конкретным новым соединениям по настоящему изобретению; c) R³ - метокси- или этоксигруппа и n, R² и R¹ принимают любое из значений, определенных выше или в настоящем разделе, относящихся к конкретным новым соединениям по настоящему изобретению; d) R¹ представляет собой 2-диметиламиноэтокси, 2-диэтиламиноэтокси, 3-диметиламинопропокси, 3-диэтиламинопропокси, 2-(пирролидин-1-ил)этокси, 3-(пирролидин-1-ил)пропокси, 2-пиперидиноэтокси, 3-пиперидинопропокси, 2-морфолиноэтокси, 3-морфолинопропокси, 2-(пиперазин-1-ил)этокси, 3-(пиперазин-1- ил)пропокси, 2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси, 3-(4- метилпиперазин-1-ил)пропокси, 2-(имидазол-1-ил)этокси, 3-(имидазол-1-ил)пропокси, 2-[ди-(2-метоксиэтил)амино]этокси, 3-[ди-(2-метоксиэтил)амино]пропокси, 3-диметиламино- 2-гидроксипропокси, 3-диэтиламино-2-гидроксипропокси, 3-(пирролидин-1-ил)-2-гидроксипропокси, 3-пиперидино-2-гидроксипропокси, 3-морфолино-2-гидроксипропокси, 3-(пиперазин-1-ил)-2- гидроксипропокси или 3-(4-метилпиперазин-1-ил)-2-гидроксипропокси; и n, R² и R³ принимают любые значения, определенные выше или в настоящем разделе, относящиеся к конкретным новым соединениям по настоящему изобретению; е) R¹ представляет собой 3-диметиламинопропокси, 3-диэтиламинопропокси, 3-(пирролидин-1-ил)пропокси, 3-пиперидинопропокси, 3-морфолинопропокси, 3- (пиперазин-1-ил)пропокси, 3-(4-метилпиперазин-1-ил)пропокси, 3-(имидазол-1-ил)пропокси, 3-[ди-(2-метоксиэтил)амино] пропокси, 3-диметиламино-2-гидроксипропокси, 3-диэтиламино-2-гидроксипропокси, 3-(пирролидин-1-ил)-2-гидроксипропокси, 3-пиперидино-2- гидроксипропокси, 3-морфолино-2-гидроксипропокси, 3-(пиперазин-1- ил)-2-гидроксипропокси или 3-(4-метилпиперазин-1-ил)-2- гидроксипропокси; и n, R² и R³ принимают любые значения, определенные выше или в настоящем разделе, относящиеся к конкретным новым соединениям по настоящему изобретению; f) R¹ представляет собой 3-диметиламинопропокси, 3-диэтиламинопропокси, 3-(пирролидин-1-ил)пропокси, 3-морфолинопропокси или 3-морфолино-2-гидроксипропокси; и n, R² и R³ принимают любые значения, определенные выше или в настоящем разделе, относящиеся к новым соединениям по настоящему изобретению; q) R¹ представляет собой 3-морфолинопропоксигруппу; и n, R² и R³ принимают любые значения, определенные выше или в настоящем разделе, относящиеся к конкретным новым соединениям по настоящему изобретению.

Предпочтительным соединением по настоящему изобретению является производное хиназолина формулы I, где (R²)_n представляет собой 3'-фтор-4'-хлор или 3'-хлор-4'-фторгруппу; R³ - метоксигруппа и R¹ есть 2-диметиламиноэтокси, 2-диэтиламиноэтокси, 3-диметиламинопропокси, 3-диэтиламинопропокси, 2-(пирролидин-1-ил) этокси, 3-(пирролидин-1-ил)пропокси, 2- пиперидиноэтокси, 3-пиперидинопропокси, 2-морфолиноэтокси, 3- морфолинопропокси, 2-(4-метилпиперазин-1-ил)-этокси, 2-(имидазол- 1-ил) этокси, 3-(имидазол-1-ил)пропокси, 2-[ди-(2- метоксиэтил)амино]этокси или 3-морфолино-2- гидроксипропокси; или их фармацевтически приемлемая аддитивная соль моно- и дикислоты.

Еще предпочтительным соединением по настоящему изобретению является производное хиназолина формулы I, где (R²)_n представляет 3'-хлор, 3'-бром, 3'-метил, 2', 4'-дихлор, 3', 4'-дифтор, 3',4'-дихлор, 3'-фтор-4'-хлор или 3'-хлор- 4'-фторгруппу; R³ - метоксигруппу и R¹ представляет собой 2-диметиламиноэтокси, 2-диэтиламиноэтокси, 3-диметиламинопропокси, 3-диэтиламинопропокси, 2-(пирролидин-1-ил) этокси, 3-(пирролидин-1-ил)пропокси, 2-морфолиноэтокси, 3-морфолинопропокси, 2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси, 2-(имидазол-1-ил)этокси, 2-[ди-(2-метоксиэтил)амино]этокси или 3-морфолино-2-гидроксипропокси; или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Еще предпочтительным соединением по настоящему изобретению является производное хиназолина формулы I, где (R²)_n есть 3'-хлор, 3'-бром, 3'-метил, 2'-4'-дифтор, 2', 4'-дихлор, 3',4'-дифтор, 3',4'-дихлор, 3'-фтор-4'-хлор или 3'-хлор-4'-фтор; R³ - метоксигруппа и R¹ является 3- диметиламинопропокси, 3-диэтиламинопропокси, 3-(пирролидин-1-ил) пропокси, 3-морфолинопропокси или 3-морфолино-2-гидроксипропокси; или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Далее предпочтительным соединением по настоящему изобретению является производное хиназолина формулы I, где (R²)_n представляет 3',4'-дифтор, 3', 4'-дихлор, 3'-фтор-4'- хлор или 3'-хлор-4'-фтор; R³ является метоксигруппой и R¹ представляет собой 3-морфолинопропоксигруппу; или его фармацевтически приемлемые аддитивные соли кислоты.

Особо предпочтительным соединением по настоящему изобретению является следующее производное хиназолина формулы I: 4-(3'-хлор-4'-фторанилино)-7-метокси-6-(2-пирролидин-1-ил- этокси)хиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Еще особо предпочтительным соединением по настоящему изобретению является следующее производное хиназолина формулы I: 4-(3'-хлор-4'-фторанилино)-7-метокси-6-(2-морфолино- этокси)хиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Еще особо предпочтительным соединением по настоящему изобретению является следующее производное хиназолина формулы I: 4-(3'-хлор-4'-фторанилино)-7-метокси-6-[2-(4- метилпиперазин-1-ил)этокси] хиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Еще особо предпочтительным соединением по настоящему изобретению является следующее производное хиназолина формулы I: 4-(3'-хлор-4'-фторанилино)-7-метокси-{ 2-[ди-(2-метоксиэтил)амино] этокси} -хиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Еще особо предпочтительным соединением по настоящему изобретению является следующее производное хиназолина формулы I: 4-(3'-хлор-4'-фторанилино)-6-(2-диметиламиноэтокси)-7- метоксихиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Еще особо предпочтительным соединением по настоящему изобретению является следующее производное хиназолина формулы I: 4-(3'-хлор-4'-фторанилино)-6-(2-диэтиламиноэтокси)-7- метоксихиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Еще особо предпочтительным соединением по настоящему изобретению является следующее производное хиназолина формулы I: 4-(2', 4'-дифторанилино)-6-(3-диметиламинопропокси)- 7-метоксихиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Еще особо предпочтительным соединением по настоящему изобретению является следующее производное хиназолина формулы I: 4-(3'-хлор-4'-фторанилино)-6-(2-гидрокси-3- морфолинопропокси)- 7-метоксихиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Еще особо предпочтительным соединением по настоящему изобретению является следующее производное хиназолина формулы I: 4-(2', 4'-дифторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси) хиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Еще особо предпочтительным соединением по настоящему изобретению является следующее производное хиназолина формулы I: 4-(3'-хлор-4'-фторанилино)-6-(2-имидазол-1-ил-этокси)-7- метоксихиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Еще особо предпочтительным соединением по настоящему изобретению является следующее производное хиназолина формулы I: 4-(3'-хлор-4'-фторанилино)-6-(3-диэтиламинопропокси)-7- метоксихиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Еще особо предпочтительным соединением по настоящему изобретению является следующее производное хиназолина формулы I: 4-(3'-хлор-4'-фторанилино)-7-метокси-6-(3-пирролидин-1-ил пропокси)хиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Еще особо предпочтительным соединением по настоящему изобретению является следующее производное хиназолина формулы I: 4-(3'-хлор-4'-фторанилино)-6-(3-диметиламинопропокси)-7- метоксихиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Еще особо предпочтительным соединением по настоящему изобретению является следующее производное хиназолина формулы I: 4-(3', 4'-дифторанилино)-6-(3-диметиламинопропокси)-7- метоксихиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль аддукт кислоты.

Еще особо предпочтительным соединением по настоящему изобретению является следующее производное хиназолина формулы I: 4-(3', 4'-дифторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси) хиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Еще особо предпочтительным соединением по настоящему изобретению является следующее производное хиназолина формулы I: 6-(3-диэтиламинопропокси)-4-(3', 4'-дифторанилино)-7- метоксихиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Еще особо предпочтительным соединением по настоящему изобретению является следующее производное хиназолина формулы I: 4-(3'-хлор-4'-фторанилино)-7-метокси-6-(3- пиперидинопропокси)хиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Еще особо предпочтительным соединением по настоящему изобретению является следующее производное хиназолина формулы I: 4-(3'-хлор-4'-фторанилино)-7-метокси-6-(2- пиперидиноэтокси)хиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Еще особо предпочтительным соединением по настоящему изобретению является следующее производное хиназолина формулы I: 4-(3'-хлор-4'-фторанилино)-6-(3-имидазол-1-ил-пропокси)- 7-метоксихиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

В соответствии с дополнительным признаком настоящего изобретения некоторые соединения по изобретению не только обладают потенциальной антипролиферативной активностью ин виво, замедляя скорость роста опухолевых тканей, но также способностью остановить рост опухоли и в высоких дозировках вызывают уменьшение начального объема опухоли.

В соответствии с этим аспектом настоящего изобретения предлагается производное хиназолина формулы I: 4-(3'-хлор-4'-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси) хиназолин или его фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты.

Также предлагается солянокислая соль производного хиназолина формулы I: 4-(3'-хлор-4'-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси) хиназолина.

Также предлагается дигидрохлоридная соль производного хиназолина формулы I: 4-(3'-хлор-4'-фторанилино)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси) хиназолина.

Производное хиназолина формулы I или его фармацевтически приемлемая соль могут синтезироваться любыми известными способами, применяемыми для получения химически родственных соединений. Приемлемые способы включают, например, те, которые раскрываются в Европейских патентных заявках N 0520722, N 0566226, N 0602851, 0635498, N 0635507. Такие способы, используемые для приготовления производного хиназолина формулы 1 или его фармацевтически приемлемой соли, раскрываются как дополнительный признак изобретения и иллюстрируются следующими прилагаемыми примерами, в которых, если не оговорено особо, n, R², R³ и R¹ могут принимать любые из определенных выше значений для производных хиназолина формулы I. Требующиеся исходные реагенты можно получать стандартными методами органической химии. Получение таких исходных реагентов описано в прилагаемых примерах, которые не следует рассматривать как ограничение патентных притязаний. Альтернативно, необходимые исходные реагенты могут быть синтезированы аналогичными методами, которые относятся к практике специалиста в данной области.

a) Реакция, предпочтительно в присутствии приемлемого основания, хиназолина формулы II: где Z представляет собой замещаемую группу, с анилином формулы III: Подходящей замещаемой группой Z могут служить, например, галоген, алкокси, арилокси или сульфонилоксигруппа, например, хлор, бром, метокси, фенокси, метансульфонилокси или толуол-4-сульфонилокси.

Приемлемым основанием является, например, органический амин, такой как, например, пиридин, 2,6-лутидин, коллидин, 4-диметиламинопиридин, триэтиламин, морфолин, N-метилморфолин или диазабицикло [5.4.0]ундец-7-ен, или, например, карбонаты или гидроксиды щелочных или щелочноземельных металлов, например карбонат натрия, карбонат калия, карбонат кальция, гидроокись натрия или гидроокись калия. Альтернативно, приемлемым основанием может служить, например, амид щелочного или щелочноземельного металла, например амид натрия или натрий бис(триметилсилил)амид.

Реакцию предпочтительно проводить в присутствии приемлемого инертного растворителя или разбавителя, например алканола или сложного эфира, таких как метанол, этанол, изопропиловый спирт или этилацетат, галоидированного растворителя, такого как метиленхлорид, хлороформ или четыреххлористый углерод, простого эфира, такого как тетрагидрофуран или 1,4-диоксан, ароматического растворителя, такого как толуол, или диполярного апротонного растворителя, такого как N,N-диметилформамид, N,N-диметилацетамид, N-метилпирролидин-2-он или диметилсульфоксид. Реакцию предпочтительно проводить при температуре в диапазоне, например, 10-150^oC, более предпочтительно в диапазоне от 20^oC до 80^oC.

Производное хиназолина формулы I можно получать в соответствии с настоящим способом в виде свободного основания или, напротив, в виде соли кислоты формулы H-Z, где Z принимает указанные выше значения. Если необходимо из соли получить свободное основание, соль может обрабатываться приемлемым основанием, определенным выше, стандартным способом.

b) Для получения тех соединений формулы I, у которых R¹ представляет собой аминозамещенную (2-4C)алкоксильную группу, осуществляют алкилирование, желательно в присутствии подходящего основания, определенного выше, производного хиназолина формулы I, где R¹ гидроксильная группа.

В качестве приемлемого алкилирующего агента, например, может использоваться любое вещество, обеспечивающее алкилирование гидроксильной группы в аминозамещенную алкоксильную группу, например, аминозамещенный алкилгалогенид, например аминозамещенный (2-4C)алкилхлорид, бромид или йодид, в присутствии приемлемого основания, определенного выше, в приемлемом инертном растворителе или разбавителе, определенных выше, и при температуре в диапазоне, например, от 10 до 140^oC, предпочтительно при или приблизительно при 80^oC.

c) Для получения соединений формулы I, где R¹ представляет собой аминозамещенную (2-4C) алкоксильную группу, осуществляют реакцию предпочтительно в присутствии приемлемого основания, определенного выше, соединения формулы I, где R¹ представляет собой гидрокси-(2-4C) алкоксильную группу, или его реакционноспособного производного, с приемлемым амином.

Реакционноспособным производным соединением формулы I, где R¹ представляет собой гидрокси-(2-4C) алкоксильную группу, является, например, галогено- или сульфонилокси-(2-4C)алкоксильная группа, такая как бром или метансульфонилокси-(2- 4C)алкоксильная группа.

Реакцию предпочтительно осуществлять в присутствии приемлемого инертного растворителя или разбавителя, определенного выше, при температуре в пределах, например, 10^oC-150^oC, предпочтительно при или примерно при 50^oC.

d) Для получения соединений формулы I, где R¹ представляет собой гидрокси-амино-(2-4C)алкоксигруппу, осуществляют реакцию соединения формулы I, где R¹ представляет собой 2,3-эпоксипропокси- или 3,4-эпоксибутоксигруппу, с соответствующим амином.

Реакцию предпочтительно осуществляют в присутствии приемлемого инертного растворителя или разбавителя, определенного выше, и при температуре в диапазоне, например, 10 - 150^oC, предпочтительно при или приблизительно при 70^oC.

В том случае, когда необходима фармацевтически приемлемая соль производного хиназолина формулы I, например моно- или диаддукт кислоты с производным хиназолина формулы I, он может быть получен, например, путем реакции указанного соединения с, например, приемлемой кислотой, используя стандартные методы.

Как указывалось ранее, производные хиназолина по настоящему изобретению обладают антипролиферативной активностью, которая, можно полагать, есть результат ингибирующей способности соединений в отношении рецепторных тирозинокиназ Класса I. Эти свойства можно оценить, используя одну или несколько процедур, описанных ниже.

a) Оценка ин витро способности испытуемого соединения подавлять EGF рецепторную тирозинкиназу. Рецепторную тирозинкиназу готовили в частично очищенной форме из клеток A-431 (взятых из карциномы наружных женских половых органов), следуя методикам, описанным ниже и взятым из Carpenter et al., J. Biol. Chem., 1979, 254, 4884; Cohen et al., J.Biol. Chem., 1982, 257, 1523 и Braun et al., J. Biol. Chem., 1984, 259, 2051.

Клетки A-431 выращивали для слияния, используя модифицированную Дулбекко среду Игла (DMEM), используя 5% плодную сыворотку теленка (FCS). Полученные клетки гомогенизировали в гипотоническом буфере борной кислоты/EDTA при pH 10,1. Гомогенат центрифугировали при 400 q в течение 10 минут при 0-4^oC. Надосадочную жидкость центрифугировали при 25000 q в течение 30 минут при 0-4^oC. Осадок после центрифугирования суспендировали в 30 мМ буфера Гепеса при pH 7,4, содержащего 5% глицерина, 4 мМ бензамида и 1% тритон Х-100, перемешивали один час при 0-4^oC и вновь центрифугировали при 100000 q в течение часа при 0-4^oC. Надосадочную жидкость, содержащую растворенную рецепторную тирозинкиназу, хранили в жидком азоте.

Для проведения эксперимента 40 мкл раствора фермента, полученного таким образом, добавляли к смеси 400 мкл смеси 150 мМ буфера Гепеса при pH 7,4, 500 мкМ ортованадата натрия, 1% Тритона Х-100, 10% глицерина, 200 мл воды, 80 мкл 25 мМ DTT и 80 мкл смеси 12,5 мМ хлорида марганца, 125 мМ хлорида магния и дистиллированной воды. Таким образом готовили испытуемый раствор фермента.

Каждое испытуемое соединение растворяли в диметилсульфоксиде (DMSO), получая 50 мМ раствор, который разбавляли 40 мМ буфером Гепеса, содержащим 0,1% Тритон Х-100, 10% глицерин и 10% DMSO, получая 500 мкМ раствор. Смешивали равные объемы этого раствора и раствора эпидермального фактора роста (EGF, 20 мкг/мл).

[³²P] ATP (3000 Ci/mM, 250 Ci; =11.110¹³ расп./смМ, 9.2510' расп./с. ) разбавляли до объема 2 мл добавлением раствора ATP (100 мкМ) в дистиллированной воде. Добавляли равный объем 4 мг/мл раствора пептида Arg-Arg-Leu-Ile- Glu-Asp-Ala-Glu-Tyr-Ala-Ala-Arg-Gly в смеси 40 мМ буфера Гепеса при pH 7,4, 0,1% Тритон Х-100 и 10% глицерин.

К испытуемому раствору фермента (10 мкл) добавляли 5 мкл раствора смеси испытуемое соединение/EGF и смесь инкубировали при 0-4^oC 30 минут. Добавляли 10 мл смеси ATP/петид и смесь инкубировали при 25^oC в течение 10 минут. Реакцию фосфорилирования обрывали добавлением 5% трихлоруксусной кислота (40 мкл) и коровьего серумальбумина (BSA, 1 мг/мл, 5 мкл). Смесь выдерживали при 4^oC 30 минут и затем центрифугировали. Аликвоту (40 мкл) надосадочной жидкости наносили на полоску Ватман p 81 фосфоцеллюлозной бумаги. Полоску промывали в 75 мМ фосфорной кислоты (4 х 10 мл) и сушили промоканием. Измеряли радиоактивность фильтровальной бумаги с помощью жидкостного счетчика (результат A). Реакцию повторяли в отсутствии EGF (результат B) и вновь в отсутствии испытуемого соединения (результат C).

Ингибирование рецепторной тирозинкиназы вычисляли следующим образом: Степень ингибирования определяли для диапазона концентраций испытуемого соединения, чтобы получить величину IC₅₀.