Аналоги витамина d, способ их получения, диастереоизомер, фармацевтическая композиция

Аналоги витамина d, способ их получения, диастереоизомер, фармацевтическая композиция

Реферат

 

Изобретение относится к аналогам витамина D формулы I, где R представляет группу где q равно 0,1; n равно от 2 до 4; m равно 0; Y₁ и Y₂ независимо представляют водород, атом галогена; R₁ и R₂ независимо представляют водород, низший алкил, необязательно замещенный атомами галогена или азидогруппой; X представляет водород или гидроксигруппу, при этом имеющиеся гидроксигруппы могут быть защищены, описывается также фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующей активностью в отношении пролиферации опухолевых клеток на основе соединений I. Соединения оказывают антивоспалительное и иммуномодулирующее воздействие, а также проявляют сильную активность, стимулируя дифференциацию и ингибируя нежелательное разрастание некоторых клеток. 6 с. и 2 з.п. ф-лы, 4 табл.

Изобретение относится к ранее неизвестному классу соединений, которые оказывают антивоспалительное и иммуномодифицирующее воздействие, а также проявляют повышенную активность, стимулируя дифференциацию и ингибируя нежелательное разрастание некоторых клеток, в том числе раковых клеток и клеток кожи, фармацевтическим препаратам, содержащим указанные соединения, к стандартным дозам указанных препаратов и к их использованию для лечения и профилактики синдрома гиперфункции паращитовидной железы, в частности вторичного синдрома гиперфункции паращитовидной железы, вызванного почечной недостаточностью, ряда болезненных состояний, включая сахарный диабет, гипертонию, угри, облысение, старение кожи, нарушения баланса иммунной системы, воспалительных заболеваний, таких как ревматоидный артрит и астма, заболеваний, характеризующихся ненормальной дифференциацией клеток и/или разрастанием клеток, таких как, например, псориаз и рак, для предотвращения и/или лечения атрофии кожи, вызываемой стероидами, и для стимулирования костеобразования и лечения остеопороза.

Соединения по настоящему изобретению представлены общей формулой I где R обозначает насыщенную или ненасыщенную алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, содержащую от 4 до 12 атомов углерода, которая необязательно замещена гидроксильной группой и, возможно, содержит кольцевые структуры и в которой по крайней мере один атом углерода, не содержащий гидроксильной группы, замещен одним или большим количеством атомов галогена или азидо-групп.

R предпочтительно обозначает группу формулы II где q равно 0 или 1, а n и m независимо обозначают 0 или целое число от 1 до 6, Y¹ и Y² независимо обозначают атом водорода, атом галогена или азидо-группу; R¹ и R², которые могут совпадать или различаться, обозначают атом водорода, низший алкил, низший циклоалкил или совместно с атомом (помечен звездочкой в формуле II), содержащим группу X, R¹ и R² могут образовывать C₃-C₈ карбоцикл, R¹ и R² необязательно могут быть замещены азидо-группой или одним или большим количеством атомов галогена, X обозначает атом водорода или гидроксил.

В контексте настоящего изобретения выражение "низший алкил" означает насыщенную или ненасыщенную алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, содержащей от 1 до 5 атомов углерода, а выражение "низший циклоалкил" обозначает насыщенный или ненасыщенный C₃-C₇ карбоцикл. Галоген обозначает фтор, хлор, бром или иод.

В частности, R¹ и R² независимо выбирают из группы, включающей атом водорода, метил, этил, пропил, изо-пропил, бутил, изо-бутил, трет-бутил, втор-бутил, пентил, фторметил, дифторметил, трифторметил, пентафторметил, 2,2,2-трифторэтил, 2-фторпропил-2, 3-фторпропил-3, хлорметил, трихлорметил, 2-хлорпропил-2, 3-хлорпропил-3, бромметил, 2-бромпропил-2, 3-бромпропил-3, иодметил, 2-иодпропил-2, 3-иодпентил-3, азидометил, 2-азидопропил-2 и 3-азидопропил-3.

Как видно из формул I и II, в зависимости от значений R, Y¹, Y², X, R¹ и R², соединения по изобретению образуют несколько диастереоизомерных форм. Изобретение включает все указанные диастереоизомерные формы в чистом виде, а также смеси указанных диастереоизомеров. Далее, предшественники лекарственных средств соединения I, в которых одна или большее количество гидроксильных групп маскируются группами, которые можно вновь превратить в гидроксильные группы в условиях in vivo, также входят в объем притязаний по изобретению.

Соединения формулы I, в которых R не замещен гидроксильной группой, составляют другую группу предшественников лекарственного средства. Указанные соединения относительно не активны in vitro, однако превращаются в активные соединения формулы I под влиянием ферментативного гидроксилирования после назначения пациенту.

Показано, что 1, 25-дигидрокси-витамин D₃ (1,25(OH)₂D₃) оказывает влияние на воздействие и/или воспроизводство интерлейкинов (Muller et al., Immunol. Lett., 1988, Vol. 17, pp. 361-366), что указывает на потенциальную полезность этого соединения при лечении болезней, характеризующихся дисфункцией иммунной системы, в частности аутоиммунных заболеваний, СПИДа, реакции "трансплантант против хозяина", отторжения трансплантантов или других состояний, характеризующихся ненормальным воспроизводством интерлейкина-1, в частности воспалительных заболеваний, таких как ревматоидный артрит и астма.

Показано также, что 1,25(OH)₂D₃ способен стимулировать дифференциацию клеток и ингибировать избыточное разрастание клеток (E. Abe et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1981, Vol. 78, pp. 4990-4994) и было высказано предположение, что это соединение может быть полезным при лечении заболеваний, характеризующихся ненормальным разрастанием клеток и/или дифференциацией клеток, таких как лейкемия, миелофиброз и псориаз.

Далее, предложено использовать 1,25(OH)₂D₃ или его предшественник 1 -OH-D₃ при лечении гипертонии (L. Lind et al., Acta Med. Scand., 1987, Vol. 222, pp. 423-427) и сахарного диабета (S. Inomata et al., Bone Mineral, 1986, Vol. 1, pp. 187-192). Другое показание 1,25(OH)₂D₃ следует из недавнего открытия взаимозависимости наследственной невосприимчивости к витамину D и облысением: лечение с использованием 1,25(OH)₂D₃ может способствовать росту волос (Колонка редактора, Lancet, March 4, 1989, p. 478). Тот факт, что местное применение 1,25(OH)₂D₃ уменьшает размер сальных желез в ушах сирийских хомяков, позволяет также предположить, что указанное соединение может быть полезно для лечения угрей (V.L. Malloy et al., The Tricontinental Meeting for Investgative Dermatologym, Washington, 1989).

Тем не менее терапевтические возможности в таких показаниях 1,25(OH)₂D₃ значительно ограничены по причине хорошо известного потенциального воздействия указанного гормона на обмен кальция: повышенное содержание его в крови приводят к быстрому росту содержания кальция в крови. Таким образом, указанное соединение и его потенциальные синтетические аналоги не являются вполне удовлетворительными для использования в качестве лекарственных средств при лечении, например, псориаза, рака или иммунных заболеваний, которые могут потребовать продолжительного назначения лекарственного средства в сравнительно больших дозах.

Известен ряд окса-производных витамина D₃ 1, 25-дигидрокси-2-окса-21-норвитамин D₃ и 1-гидрокси-20-окса-21-норвитамин D₃ описаны в статье N. Kubodera et al., Chem. Pharm. Bull. Vol. 34, p. 2286 (1986). 1. 25-дигидрокси-22-оксавитамин D₃ и 25-гидрокси-22-оксавитамин D₃ описаны в публикациях E. Murayamd et al., Chem. Pharm. Bull. Vol. 34, p. 4410 (1986), J. Abe et al., FEBS Lett., Vol. 226, p. 58 (1987) и Европейской патентной заявки с номером публикации 184112, 1, 25-дигидрокси-23-оксавитамин D₃ описан в Европейской патентной заявке с номером публикации 78704, а ряд 22-окса-производных витамина D₃ приводится в Международной патентной заявке с номером PCT/DK90/00037 и Международной патентной заявке с номером PCT/DK90/00036.

Эксперименты в условиях in vitro показывают, что некоторые из указанных соединений могут обладать преимуществами перед 1,25(OH)₂D₃. Так, 1, 25-дигидрокси-22-оксавитамин D₃ обладает лишь одной четырнадцатой от величины сродства 1,25(OH)₂D₃ по отношению к кишечному цитозольному рецептору цыпленка, меньшим сродством по отношению к лейкемийной клеточной линии костного мозга человека (HL-60) и большей активностью в качестве инициатора дифференциации в клетках HL-60.

Полезность аналогов витамина D в приведенных выше показаниях зависит не только от благоприятного соотношения сродства связывания к соответствующим рецепторам, по сравнению с кишечным рецептором, но и от дальнейшей судьбы соединения в организме.

Нами обнаружено, что соединения по настоящему изобретению, содержащие атом галогена в соответствующем положении в боковой цепи, проявляют благоприятную селективность по отношению к связыванию рецептора и в то же время обладают высокой биологической доступностью и метаболической устойчивостью по сравнению с 1,25(OH)₂D₃.

Селективность соединений подтверждает тот факт, что они, обладая высоким сродством к рецептору раковых клеток (аналогичной или же значительно лучшей, чем у 1,25(OH)₂D₃, характеризуются той же или значительно меньшей концентрацией, чем 1,25(OH)₂D₃, необходимой для инициирования дифференциации моноцитарной линии опухолевых клеток, чтобы вызывать тот же эффект, что и 1,25(OH)₂D₃, при этом их сродство связывания по отношению к кишечному рецептору меньше, чем у 1,25(OH)₂D₃. У крыс в условиях in vivo соединения менее активны, чем 1,25(OH)₂D₃, и вызывают повышение содержания кальция в моче и в крови.

По этой причине соединения по изобретению особенно удобны как для местного, так и для системного лечения и профилактики болезней человека и ветеринарных болезней, которые характеризуются ненормальным разрастанием клеток и/или дифференциацией клеток, таких как некоторые дерматологические заболевания, в том числе псориаз и определенные формы рака, в частности лейкемия и миелофиброз, и заболеваний, которые характеризуются нарушением баланса в иммунной системе, в частности аутоиммунных заболеваний или СПИДа, и для осуществления необходимой иммунодепрессии при операциях трансплантации, а также при лечении угрей, сахарного диабета и гипертонии и воспалительных заболеваний, таких как ревматоидный артрит и астма. Поскольку соединения по настоящему изобретению могут ускорять дифференциацию клеток волосяных фолликул, то указанные соединения могут быть полезны при лечении облысения. Предварительные испытания показывают, что соединения по настоящему изобретению способны устранять нежелательные последствия, вызываемые старением кожи, в частности кожи, старение которой происходит под воздействием света.

Соединения формулы I удобно получать из производного I витамина D (или его 20R изомера) (Tetrahedron, 1987, Vol. 43, p. 4609) по способам, приведенным на схеме 2. Окисление соединения I с использованием, например, методики ван Риинена (Tetrahedron Lett. 1969, p. 985) приводит к кетону 2, который восстанавливают в 20R-спирт 3. Если использовать подходящий хиральный восстановительный агент, то можно получить соединение 3 с высокой стереоселективностью, однако соединение 3 удобно получать, восстанавливая соединение 2 с помощью боргидрида натрия и удаляя небольшое количество соответствующего 20S-спирта хроматографически. O-Алкилирование соединения 3 с получением соединения III проводится в щелочных условиях с использованием структурных блоков в боковой цепи общей формулы Z-R³, где Z обозначает уходящую группу, такую как атом брома, атом иода, п-толуолсульфонилокси-группа, метансульфонилокси-группа или трифторметансульфонилокси-группа, а R³ обозначает группу R (формулы I) или необязательно радикал, который может быть превращен в группу R на любой подходящей последующей стадии (или через несколько стадий). Так, R³ в соединениях III, IV, V и VI необязательно имеет то же самое значение по всей конкретной цепочке синтетических превращений. Превращение R³ в R может потребовать нескольких стадий и возможно потребует временной защиты чувствительной триеновой системы молекулы. Помимо необходимых изменений в боковой цепи (R³), превращение соединения III в соединение I включает стадию фотоизомеризации и стадию десилилирования, аналогичную стадиям, которые применяются на последних этапах синтеза другого аналога витамина D (см. Европейский патент 0227826).

В общем случае фрагмент боковой цепи R³-Z имеет структуру -(CH₂)_n-(C(Y¹)(Y²))_q- (CH₂)_m-C(R¹)(R²)-OR⁵, где обычно подразумевается, что R³ имеет то же значение, что и в формуле II, где X обозначает защищенную гидроксильную группу (например R⁵ = тетрагидропиранил или триалкилсилил). Уходящая группа Z должна выбираться таким образом, чтобы она была более реакционноспособной, чем заместители Y¹ и Y² или соответствующие гетероатомы в R¹ и R².

Боковые структурные блоки являются либо известными соединениями (например, (R)- и (S)-4-(1-этоксиэтокси)-3-фтор-1-иодо-4-метилпентаном, приведенным в статье S.-J. Shiney et al., J. Org. Chem., 1988, Vol. 53, p. 1040, и 4-(1-этоксиэтокси)-3,3-дифтор-1-иодо-4-метилпентаном, приведенным в патенте США 4421690, выданном на имя Дж.Дж. Патриджа и др.) или же могут быть получены по способам, представленным на схеме 1. Очевидно, что синтезы конкретных фрагментов могут сильно различаться, однако, с целью пояснения описания в разделе Препараты приводятся синтезы конкретных соединений, которые представлены в таблице 1.

В настоящем описании используются следующие обычные сокращения: Me = метил, Et = этил, n-Pr = н-пропил, i-Pr = изо-пропил, t-Bu = трет-бутил, MOM = метоксиметил, EE = 1-этоксиэтил, THP = тетрагидро-4H-пиран-2-ил, ТГФ = тетрагидрофуран, Ts = п-толуолсульфонил, ТБА = тетра-(н-бутил)аммоний, TMS = триметилсилил, TBDMS = трет-бутилдиметилсилил, ДМФА = диметилформамид.

Пояснения к схеме 1 a) Взаимодействие с металлоорганическим реагентом (в частности, R²MgBr, R²MgI или R²Li).

b) Превращение группы OH в уходящую группу (в частности, тозилированием в случае Z = OTs или бромированием в случае Z = Br).

c) Селективная защита первичной спиртовой группы (R⁴ обычно обозначает ацетатную или бензоатную группу).

d) Защита гидроксильной группы (в частности, с помощью три(низший алкил)силила, MOM или THP).

e) Селективное удаление защиты у спиртовой группы (например, с помощью карбоната калия или литийалюмогидрида).

f) Снятие защиты со спиртовой группы (в частности, с использованием тетра-(н-бутил)аммонийфторида или HF).

g) Гидроборирование-окисление (борановый комплекс + перекись щелочного металла).

h) Реакция Гриньяра с кетоном формулы R¹-CO-R².

Пояснения к схеме 2 a) Окисление, например, кислородом в присутствии Cu(AcO)₂, 2,2'-бипиридила и 1,4-диазобицикло(2.2.2)октана в качестве катализатора.

b) Восстановление (например, с помощью боргидрида натрия).

c) Алкилирование боковым фрагментом R³-Z в присутствии основания (в частности, KOH, t-BuOK или KH) в присутствии или в отсутствии катализатора (например, 18-краун-6) в растворителе, например ТГФ.

d) Необязательная модификация функциональной группы в боковой цепи.

e) Изомеризация с помощью h-триплетного сенсибилизатора, например антрацена.

f) Удаление защиты с помощью тетра-(н-бутил)аммонийфторида или HF.

Следует отметить, что хотя приведенные промежуточные соединения могут содержать гидроксильные группы, защищенные в виде трет-бутилметилсилиловых эфиров, объем притязаний по настоящему изобретению не исключает использования альтернативных гидроксильных защитных групп, хорошо известных в области техники (таких как приведенные в монографии T.W.Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley, N.V. 1981), а также альтернативных реакций для удаления защиты.

Настоящие соединения предназначены для использования в фармацевтических композициях, которые полезны при лечении болезней человека и ветеринарных болезней, как указано ранее.

Необходимое количество соединения формулы I (далее обозначается как активный ингредиент) для достижения терапевтического воздействия будет, естественно, изменяться как в зависимости от конкретного соединения, так и от пути назначения и вида млекопитающего, лечение которого проводится. Соединения по изобретению могут назначаться парентерально, внутрисуставно, энтерально или местно. Они хорошо усваиваются при энтеральном введении и этот путь является предпочтительным способом назначения при лечении системных заболеваний. При лечении дерматологических заболеваний, таких как псориаз, предпочтительными формами являются местное или энтеральное назначение.

При лечении респираторных заболеваний, таких как астма, предпочтительны аэрозоли.

Хотя активный ингредиент можно назначать сам по себе в виде чистого вещества, предпочтительнее назначать его в виде фармацевтических составов. Удобное количество активного ингредиента составляет от 1 промиле до 0,1% по отношению к весу композиции.

Под термином "единичная доза" понимается однократная доза, которая может быть назначена пациенту и которую легко можно упаковать и транспортировать, сохраняющаяся как физически и химически стабильная однократная доза, содержащая активное соединение в чистом виде или в виде его смеси с твердым или жидким фармацевтическими разбавителями или носителями.

Составы как для ветеринарного использования, так и для лечения людей по настоящему изобретению содержат активный ингредиент вместе с фармацевтически приемлемым для этого носителем и необязательно другими терапевтическими ингредиентами. Носители должны быть "приемлемыми" в том смысле, что они должны быть совместимыми с другими ингредиентами композиции и не должны оказывать вредного воздействия на самого пациента.

Композиции включают, например, составы в форме, пригодной для орального, ректального, парентерального (в том числе подкожного, внутримышечного и внутривенного), внутрисуставного, местного и внутриглазного назначения.

Составы могут быть представлены в удобном виде в форме единичной дозы и могут быть получены любыми способами, хорошо известными из области фармации. Все эти методы включают стадию смешения активного ингредиента с носителем, который включает один или несколько вспомогательных ингредиентов. В общем случае композиции готовят путем тщательного и однородного смешения активного ингредиента с жидким носителем или тщательно измельченным твердым носителем или же с обоими указанными носителями, а затем, если необходимо, придания композиции нужной формы.

Составы по настоящему изобретению, пригодные для орального назначения, могут быть в форме дискретных доз, таких как капсулы, бляшки, таблетки или лепешки, каждая из которых содержит определенное количество активного ингредиента: в форме порошка или гранул, в форме раствора или суспензии в водной или неводной среде или в форме водно-масляной эмульсии. Активный ингредиент можно также назначать в форме болюсов, лекарственной кашки или пасты.

Таблетки могут готовиться путем прессования или заливки активного ингредиента в пресс-форму, необязательно вместе с одним или большим количеством вспомогательных ингредиентов. Таблетки можно приготовить, спрессовывая в соответствующей машине активный ингредиент в виде порошка или гранул, необязательно смешанного со связующим, смазывающим средством, инертным разбавителем, поверхностно-активным веществом и диспергирующим средством. Таблетки, полученные с помощью пресс-формы, можно приготовить прессованием в соответствующей машине смеси порошкообразного активного ингредиента и подходящего носителя, увлажненного инертным жидким разбавителем.

Составы для ректального назначения могут быть в форме суппозиторий, содержащих активный ингредиент и носитель, такой как шоколадное масло, или в форме клизмы.

Составы, пригодные для парентерального назначения, удобно готовить с использованием стерильной масляной или водной композиции активного ингредиента, которая предпочтительно изотонична с кровью пациента.

Составы, пригодные для внутрисуставного назначения, могут быть в форме стерильных водных составов активного ингредиента, которые могут быть в микрокристаллической форме, например в виде жидкой микрокристаллической суспензии. Липосомные составы и системы на основе биоразлагаемых полимеров также могут использоваться как для внутрисуставного, так и для внутриглазного назначения активного ингредиента.

Составы, пригодные для местного назначения, в том числе глазные композиции, включают жидкие или полужидкие композиции, такие как линименты, лосьоны, аппликации, эмульсии масла в жидкости и жидкости в масле, такие как кремы, мази, в том числе глазные мази, пасты, или растворы, или суспензии, такие как капли, в том числе глазные капли.

Для лечения астмы могут использоваться ингаляции порошка, самораспыляющиеся или пульверизующиеся композиции, распыляемые с помощью баллончика, пульверизатора или распылителя. Распыляемые составы преимущественно содержат частицы с размерами от 10 до 100 мкм.

Указанные составы наиболее предпочтительно готовятся в виде тонко измельченного порошка для внутрилегочного назначения с помощью порошкового ингалятора или самораспыляющихся составов на основе порошковых дисперсий. В случае самораспыляющихся растворов и распыляемых композиций эффект достигается либо за счет подбора вентиля, имеющего требуемые параметры (т.е. способного генерировать аэрозоль с нужными размерами частиц), либо путем включения активного ингредиента в форме суспендированного порошка с контролируемым размером частиц. Указанные самораспыляющиеся композиции могут представлять собой как порошковые диспергирующиеся композиции, так и композиции, в которых активный ингредиент диспергирован в виде капель раствора или суспензии.

Составы на основе самораспыляющихся порошковых дисперсий предпочтительно содержат диспергированные частицы или твердые активные ингредиенты и жидкий газ-вытеснитель с температурой кипения ниже 18^oC при атмосферном давлении. Жидким газом-вытеснителем может быть любой газ-вытеснитель, для которого известно, что он подходит для медицинского использования и может содержат одно или большее количество C₁-C₆ углеводородов или их смесей или галоидированных (C₁-C₆) углеводородов или их смесей, особенно предпочтительными являются хлорированные и фторированные (C₁-C₆) углеводороды. В общем случае газ-вытеснитель составляет от 45 до 99% от веса состава, в то время как активный ингредиент составляет от 1 промиле до 0,1% вес. от состава композиции.

Помимо уже указанных ингредиентов составы по изобретению могут включать один или несколько дополнительных ингредиентов, таких как разбавители, буферные добавки, ароматизирующие соединения, связующие, поверхностно-активные вещества, загустители, смазывающие средства, консерванты, в частности метилгидроксибензоат (в том числе антиоксиданты), эмульгирующие средства и т.п.

Композиции могут содержат также другие терапевтически активные соединения, которые обычно используют при лечении указанных ранее патологических состояний.

В настоящем изобретении также рассматривается способ лечения пациентов, при этом указанный способ заключается в назначении пациенту, нуждающемуся в лечении, эффективного количества одного или большего количества соединений формулы I в чистом виде или в сочетании с одним или большим количеством терапевтически активного соединения, которое обычно используют при лечении указанных патологических состояний. Лечение с использованием заявляемых соединений и/или других терапевтически активных соединений может быть непрерывным или проводится через определенные промежутки времени.

При лечении системных заболеваний назначаются дневные дозы, включающие 0,1-100 мкг, предпочтительно 0,2-25 мкг соединения формулы I. При местном лечении кожных заболеваний назначаются мази, кремы или лосьоны, содержащие 0,1-500 мкг, преимущественно 1-100 мкг соединения I. Составы для орального назначения готовятся преимущественно в виде таблеток, капсул или капель, содержащих 0,05-50 мкг, преимущественно в виде таблеток, капсул или капель, содержащих 0,05-50 мкг, преимущественно 0,1-25 мкг соединения формулы I на одну единичную дозу.

Изобретение далее поясняется следующими неограничивающими его Препаратами и Примерами: Препараты и Примеры Выборочные соединения формулы I представлены в таблице 1. Фрагменты в боковой цепи по схеме 1 и промежуточные соединения по схеме 2, приведенные в Препаратах, идентифицируются с помощью номеров соответствующих формул в таблицах 2 и 3 соответственно. Они используются для пояснения типичных синтезов выборочных соединений формулы I.

Для спектров ядерного магнитного резонанса (300 МГц) величины химических сдвигов () приводятся для растворов в дейтерохлороформе относительно тетраметилсилана ( = 0) или хлороформа ( = 7,25), используемых в качестве внутреннего стандарта. Значения для мультиплета, как разрешенного (дублет (д), триплет (т), квартет (кв)), так и неразрешенного (м), приведены приблизительно для средней точки, за исключением того случая, когда приводится интервал (с = синглет, ш = широкий). Константы взаимодействия (J) приведены в герцах и иногда округлены до целого значения.

Эфир обозначает диэтиловый эфир, который сушат над натрием. ТГФ сушат над смесью натрий-бензофенон. Петролейный эфир обозначает пентановую фракцию. Реакции, если специально не оговаривается, проводят при комнатной температуре. Выделение продуктов реакций включает разбавление указанным растворителем (в противном случае органическим растворителем, используемым в реакции), промывку водой и насыщенным раствором соли, сушку над сульфатом магния и упаривание в вакууме с получением остатка.

Препарат 1: Соединение 2 К раствору 1(S), 3(R)-бис-(трет-бутилдиметилсилилокси)-20(S)- формил-9,10-секопрегна-5(E), 7(E), 10(19)-триена (3,44 г, 6 ммол) (1) в N,N-диметилформамиде (150 мл) добавляют 1,4-диазабицикло(2.2.2)октан (600 мг, 5,3 ммол), моногидрат ацетата меди (90 мг, 0,45 ммол) и 2.2'-бипиридил (72 мг, 0,45 ммол). Через раствор при интенсивном перемешивании при температуре 40^oC барботируют воздух в течение 6 дней.

Реакционную смесь разбавляют этилацетатом (500 мл), промывают водой (2 х 100 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (3 х 50 мл) и сушат над сульфатом магния. Этилацетат упаривают и твердый остаток очищают хроматографически (силикагель, элюент - 10% эфира в петролейном эфире) и получают целевое соединение.

Спектр ЯМР: 0,037 (с, 3H), 0,043 (с, 3H), 0,056 (с, 6H), 0,49 (с, 3H), 0,84 (с, 9H), 0,89 (с, 9H), 1,5-2,30 (м, 13H), 2,13 (с, 3H), 2,55 (дублет д, 1H), 2,70 (т, 1H), 2,89 (широкий д, 1H), 4,21 (м, 1H), 4,52 (м, 1H), 4,94 (м, 1H), 4,98 (м, 1H), 5,83 (д, 1H), 6,43 (д, 1H) м.д.

Препарат 2: Соединение 3 и его 20S-изомер Соединение 2 (Препарат 1) (3,10 г, 5,5 мол) растворяют в тетрагидрофуране (140 мл) и добавляют боргидрид натрия (0,35 г, 3,3 мол). Затем по каплям в течение 15 минут добавляют метанол. Реакционную смесь перемешивают в течение 20 минут, разбавляют этилацетатом (560 мл). Промывают водой (5 х 150 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (150 мл), сушат над сульфатом магния и упаривают, получая бесцветное масло. Маслянистый остаток очищают хроматографически (силикагель, элюент - 15% этилацетата в петролейном эфире) и перекристаллизовывают из метанола, получая соединение 3.

Спектр ЯМР: 0,05 (м, 12H), 0,62 (с, 3H), 0,86 (с, 9H), 0,89 (с, 9H), 1,10 - 2,10 (м, 14H), 1,15 (д, 3H), 2,30 (широкий д, 1H), 2,53 (дублет д, 1H), 2,89 (м, 1H), 3,71 (м, 1H), 4,21 (м, 1H), 4,52 (м, 1H), 4,93 (м, 1H), 4,98 (м, 1H), 5,81 (д, 1H), 6,45 (д, 1H) м.д.

Фракции, содержащие более полярный 20S-изомер, упаривают и получают бесцветный остаток, который перекристаллизовывают из метанола.

Спектр ЯМР: 0,052 (широкий д, 12H), 0,54 (с, 3H), 0,85 (с, 9H), 0,89 (с, 9H), 1,22 (д, 3H), 1,20-2,10 (м, 14H), 2,30 (широкий д, 1H), 2,55 (дублет д, 1H), 2,87 (м, 1H), 3,72 (м, 1H), 4,21 (м, 1H), 4,52 (м, 1H), 4,94 (широкий с, 1H), 4,98 (м, 1H), 5,82 (д, 1H), 6,44 (д, 1H) м.д.

Препарат 3: 3,3-дифтор-2-метил-5-гексен-2-ол (Соединение 4) К раствору этилового эфира 2,2-дифтор-4-пентановой кислоты (5,0 г, 30,5 ммол) в сухом эфире (50 мл) при температуре минус 25^oC по каплям добавляют раствор метилмагнийбромида (3,0 М раствор, 30,5 мл). Смесь перемешивают при температуре минус 25^oC в течение получаса, а затем в течение 1 ч при температуре ^oC. Выливают реакционную смесь в насыщенный раствор хлорида аммония (25 мл). Органическую фазу отделяют, а водную фазу дополнительно экстрагируют эфиром (2 х 25 мл). Органические вытяжки объединяют, сушат над сульфатом магния и упаривают. После испарительной хроматографии (50 г силикагеля, элюент - 5% эфира в петролейном эфире) получают целевое соединение в виде бесцветного масла.

Спектр ЯМР: 1,32 (т, 6H), 1,97 (широкий с, 1H), 2,74 (м, 2H), 5,20 (м, 2H), 5,92 (м, 1H) м.д.

Препарат 4: 3,3-дифтор-2-метил-5-[(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси]-5-гексан (Соединение 5) Раствор Соединения 4 (3,8 г, 25,3 ммол) и свежеперегнанного 3,4-дигидро-2H-пирана (4,59 мл, 50,6 ммол) в дихлорметане (50 мл) перемешивают при комнатной температуре в присутствии кислого силикагеля (150 мг). После перемешивания в течение 1 ч катализатор удаляют фильтрованием и добавляют 1-2 капли триэтиламина. Растворитель отгоняют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией (50 г силикагеля, элюент - 5% эфира в петролейном эфире) и получают целевое соединение в виде бесцветного масла.

Спектр ЯМР: 1,35 (т, 6H), 1,53 (м, 4H), 1,69 (м, 1H), 1,84 (м, 1H), 2,74 (м, 2H), 3,48 (м, 1H), 3,94 (м, 1H), 4,90 (м, 1H), 5,19 (м, 2H), 5,91 (м, 1H) м.д.

Препарат 5: 4,4-дифтор-5-метил-5-[(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси]-1-гексанол (Соединение 6) Комплекс боран-метилсульфид (21,3 мл, 0,213 мол) добавляют при 0^oC в атмосфере аргона к перемешиваемому раствору Соединения 5 (5,0 г, 21,3 ммол) в сухом ТГФ (100 мл). Реакционную смесь перемешивают при 0^oC в течение 2 ч, а затем последовательно обрабатывают водой (20 мл), раствором едкого натра (3М, 55 мл) и перекисью водорода (30%-ный раствор в воде, 30 мл). Полученную смесь перемешивают в течение 1 ч при температуре 25^oC, разбавляют водой (150 мл), экстрагируют эфиром и промывают насыщенными растворами бикарбоната натрия и соли. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют в вакууме и сырой продукт анализируют методом ПМР спектроскопии, который показывает, что соотношение между целевым соединением и соответствующим продуктом по правилу Марковникова составляет 71:29. Смесь очищают методом испарительной хроматографии (50 г силикагеля, элюент - от 10% до 20% этилацетата в петролейном эфире) и получают чистый первичный спирт в виде бесцветного масла.

Спектр ЯМР: 1,34 (широкий с, 6H), 1,53 (м, 4H), 1,68 (м, 1H), 1,82 (м, 4H), 1,92-2,17 (м, 2H), 3,48 (м, 1H), 3,70 (широкий т, 2H), 3,93 (м, 1H), 4,89 (м, 1H) м.д.

Препарат 6: 4,4-дифтор-5-метил-5-[(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси]- 1-(4-толуолсульфонилокси)гексан (Соединение 7) Соединение 6 (2,85 г, 11,3 ммол) растворяют в дихлорметане (75 мл) и пиридине (10 мл) и к полученному раствору при перемешивании и охлаждении льдом добавляют п-толуолсульфонилхлорид (7,11 г, 37,3 ммол). Оставляют реакционную смесь на ночь при комнатной температуре, а затем выливают в смесь этилацетата и воды. Органический слой последовательно промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия, насыщенным раствором соли, сушат и упаривают в вакууме. После испарительной хроматографии (50 г силикагеля, элюент - 5% этилацетата в петролейном эфире) получают целевой тозилат в виде бесцветного масла.

Спектр ЯМР: 1,30 (широкий с, 6H), 1,40-2,12 (м, 10H), 2,45 (с, 3H), 3,47 (м, 1H), 3,90 (м, 1H), 4,10 (т, 2H), 4,85 (м, 1H), 7,35 (д, 2H), 7,79 (д, 2H) м.д.

Препарат 7: 3-этил-4,4-дифтор-6-гептен-3-ол (Соединение 8) К раствору этилового эфира 2,2-дифтор-4-пентановой кислоты (5,0 г, 30,5 ммол) в сухом эфире (50 мл) при температуре минус 78^oC по каплям добавляют раствор этиллития (1,7 М раствор, 35,9 мл). После перемешивания в течение 30 минут при температуре минус 78^oC добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (25 мл). Органическую фазу отделяют, а водную фазу дважды экстрагируют эфиром (по 25 мл). Органические вытяжки объединяют, последовательно промывают водой (2 х 50 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл), сушат и упаривают в вакууме. После испарительной хроматографии (75 г силикагеля, элюент - от 5% до 10% этилацетата в петролейном эфире) получают целевое соединение в виде бесцветного масла.

Спектр ЯМР: 0,94 (м, 6H), 1,68 (м, 4H), 1,76 (с, 1H), 2,73 (м, 2H), 5,20 (м, 2H), 5,93 (м, 1H) м.д.

Препарат 8: 3-этил-4,4-дифтор-3-O-метоксиметил-6-гептен (Соединение 9) К перемешиваемому раствору Соединения 8 (2,83 г, 15,9 ммол) в сухом хлороформе (100 мл) добавляют метилаль (75 мл) и пентоксид фосфора (25 г). После перемешивания в течение 2 ч смесь выливают в охлажденный льдом раствор бикарбоната натрия. Органическую фазу отделяют и промывают насыщенным раствором соли, сушат над хлоридом кальция и упаривают в вакууме. Остаток очищают хроматографически (75 г силикагеля, элюент - от 5% до 10% этилацетата в петролейном эфире) и получают целевое соединение в виде бесцветного масла.

Спектр ЯМР: 0,95 (м, 6H), 1,79 (м, 4H), 2,71 (м, 2H), 3,40 (с, 3H), 4,76 (с, 2H), 5,20 (м, 2H), 5,90 (м, 1H) м.д.

Препарат 9: 5-этил-4,4-дифтор-5-метил-5-O-метоксиметил-1-гептанол (Соединение 10) Соединение получают, используя способ, приведенный для Препарата 5, за исключением того, что в качестве исходного берут Соединение 9, а не Соединение 5.

Спектр ЯМР: 0,94 (широкий т, 6H), 1,60-2,13 (м, 8H), 2,56 (широкий с, 1H), 3,40 (м, 3H), 3,67 (т, 2H), 4,75 (с, 2H) м.д.

Препарат 10: 5-этил-4,4-дифтор-5-метил-5-O-метоксиметил-1-(4- толуолсульфонилокси)гептан (Соединение 11) Соединение получают, используя способ, приведенный для Препарата 6, за исключением того, что в качестве исходного берут Соединение 10, а не Соединение 6.

Спектр ЯМР: 0,92 (широкий т, 6H), 1,60-2,10 (м, 8H), 2,45 (широкий с, 3H), 3,38 (с, 3H), 4,09 (т, 2H), 4,70 (с, 2H), 7,35 (д, 2H), 7,79 (д, 2H) м. д.

Препарат 11: 3,3-дихлор-2-метил-5-гексен-2-ол (Соединение 12) Соединение получают, используя способ, приведенный для Препарата 3, за исключением того, что в качестве исходного берут метиловый эфир 2,2-дихлор-4-пентановой кислоты, а не этиловый эфир 2,2-дифтор-4-пентановой кислоты.

Спектр ЯМР: 1,54 (с, 6H), 2,27 (широкий с, 1H), 3,02 (м, 2H), 5,27 (м, 2H), 6,11 (м, 1H) м.д.

Препарат 12: 3,3-дихлор-2-метил-5-[(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси]-5-гексен (Соединение 13) Соединение получают, используя способ, приведенный для Препарата 4, за исключением того, что в качестве исходного берут Соединение 12, а не Соединение 4.

Спектр ЯМР: 1,57 (с, 3H), 1,60 (с, 3H), 1,50-1,90 (м, 6H), 2,92-3,15 (м, 2H), 3,51 (м, 1H), 3,97 (м, 1H), 5,00 (м, 1H), 5,17 - 5,32 (м, 2H), 6,13 (м, 1H) м.д.

Препарат 13: 4,4-дихлор-5-метил-5-[(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси]-1-гексанол (Соединение 14) Соединение получают, используя способ, приведенный для Препарата 5, за исключением того, что в качестве исходного берут Соединение 13, а не Соединение 5.

Спектр ЯМР: 1,56 (с, 3H), 1,60 (с, 3H), 1,50 - 2,15 (м, 9H), 2,35 (м, 2H), 3,50 (м, 1H), 3,75 (м, 2H), 3,97 (м, 1H), 4,99 (м, 1H) м.д.

Препарат 14: 4,4-дихлор-5-метил-5-[(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси]- 1-(4-толуолсульфонилокси)гексан (Соединение 7) Соединение получают, используя способ, приведенный для Препарата 6, за исключением того, что в качестве исходного берут Соединение 14, а не Соединение 6.

Спектр ЯМР: 1,51 (с, 3H), 1,56 (с, 3H), 1,50-2,42 (м, 10H), 2,45 (м, 3H), 3,50 (м, 1H), 3,94 (м, 1H), 4,15 (т, 2H), 4,95 (м, 1H), 7,36 (д, 2H), 7,80 (м, 2H) м.д.

Препарат 15: 3-этил-4,4-дифтор-3-триэтилсилилокси-6-гептен (Соединение 16) К перемешиваемому раствору Соединения 8 (1,7 г, 9,54 ммол) в дихлорметане (10 мл) при температуре 0^oC добавляют 2,6-лутидин (2,26 мл, 19,1 ммол) и триэтилсилилтрифторметансульфонат (2,37 мл, 10,5 ммол) и полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляют эфир (50 мл) и воду (75 мл). Органическую фазу отделяют, промывают водой (2 х 50 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (50