Арил- или гетероариламиды тетрагидронафталин-, хроман-, тиохроман- и 1,2,3,4-тетрагидрохинолинкарбоновых кислот, проявляющие ретиноидоподобную биологическую активность

Арил- или гетероариламиды тетрагидронафталин-, хроман-, тиохроман- и 1,2,3,4-тетрагидрохинолинкарбоновых кислот, проявляющие ретиноидоподобную биологическую активность

Реферат

 

Описываются новые соединения общей формулы (1), в которой Х означает S, О; Х означает [C(R₁)₂]_n, где n означает целое число от 0 до 2; R₁ означает независимо Н или алкил с числом атомов углерода от 1 до 6; R₂ означает водород или низший алкил с числом атомов углерода от 1 до 6; R₃ означает водород или низший алкил с числом атомов углерода от 1 до 6; m означает целое число от 0 до 2; o означает целое число от 0 до 4; р означает целое число от 0 до 2; r означает целое число от 0 до 2 при условии, что, когда Z означает О, сумма р, по меньшей мере, означает 1, и r, по меньшей мере, означает 1 и (W)_p не представляет собой единичную алкильную группу; Y означает фенильную или пиридильную группы, которые по возможности имеют в качестве заместителя одну или две группы R₂; W означает заместитель, выбранный из группы, состоящей из F, Br, Cl, J, С_1-6 алкила, фторзамещенного С_1-6 алкила, NO₂, N₃, ОН, ОСН₂ОСН₃; L означает -(C=Z)-NH- или HN-(C=Z); Z означает О или S; А означает (CH₂)_q, где q означает 0-5; В означает СООН или ее фармацевтически приемлемую соль, COOR₈, R₈ означает алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 10. Соединения формулы (1) обладают ретиноидоподобной биологической активностью. 3 с. и 27 з.п. ф-лы, 2 табл.

Изобретение относится к новым соединениям, обладающим ретиноидоподобной биологической активностью. Более конкретно, данное изобретение относится к амидам, образованным арил- или гетероариламинами и тетрагидронафталин-, хроман-, тиохроман- и 1,2,3,4-тетрагидрохинолинкарбоновыми кислотами, у которых, по меньшей мере, один из ароматических или гетероароматических фрагментов амида содержит электроноакцепторный заместитель. Соединения являются агонистами RAR-рецепторов ретиноидов.

Соединения, обладающие ретиноидоподобной активностью, хорошо известны в технике и описаны в многочисленных патентах США и других стран и научных публикациях. Общеизвестно и общепринято в технике, что ретиноидоподобная активность применяется для лечения и частичного снятия симптомов и состояний многочисленных заболеваний у животных класса млекопитающих, включая людей. Иными словами, общепринято в технике, что фармацевтические композиции, содержащие ретиноидоподобное соединение или соединения в качестве активного ингредиента, полезны в качестве регулятора в пролиферации и дифференцировки клеток и в особенности в качестве агентов для лечения заболеваний, связанных с кожей, включая старческий кератоз, арсенокератоз, угри воспалительного и невоспалительного характера, псориаз, ихтиоз и другие виды кератинизации и гиперпролиферативных заболеваний кожи, экзему, диффузный нейродермит, болезнь Дарье, лишай Вильсона, для предотвращения и изменения глюкокортикоидного нарушения (стероидной атрофии), в качестве местных антибактериальных агентов и антипигментационных средств для кожи, и для лечения и изменения разрушительного действия возраста и света на кожу. Ретиноидные соединения также применяются для предотвращения и лечения раковых заболеваний и предраковых состояний, включая предопухолевые и злокачественные гиперпролиферативные заболевания, такие как рак молочной железы, кожи, простаты, шеи, матки, толстой кишки, мочевого пузыря, пищевода, желудка, легких, гортани, полости рта, кровеносной и лимфатической системы, метаплазии, дисплазии, неоплазии, лейкоплакии и папилломы слизистых оболочек, и при лечении саркомы Капоши. Кроме того, ретиноидные соединения можно применять для лечения глазных болезней, включая, без ограничения, пролиферативную витреоретинопатию (PVR), отслойку сетчатки, синдром Шегрена (ксеродерматоз) и другие виды корнеопатии (изменения роговицы), а также для лечения и предотвращения различных сердечно-сосудистых заболеваний, включая, без ограничения, заболевания, связанные с липидным обменом, например, дислипидемии, для предотвращения постангиопластического повторного стеноза и в качестве агента для повышения уровня тканевого активатора плазминогена (TPA) в кровотоке. Другие применения ретиноидных соединений включают предотвращение и лечение состояний и заболеваний, ассоциирующихся (связанных) с вирусом папилломы человека (HPV, ВПЧ), включая бородавки и остроконечные кондиломы, различных воспалительных заболеваний, таких как пневмосклероз, илеит, колит, болезнь Крона, нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона и припадок (удар), неправильной функции гипофиза, включая недостаточное продуцирование гормона роста (СТГ), модуляции апоптоза, включая как индукцию апоптоза, так и ингибирование активированного апоптоза T-клеток, для восстановления роста волос, включая сочетание терапии данными соединениями и другими агентами, такими как Minoxidil^R (миноксидил), (лечения) заболеваний, связанных с иммунной системой, включая применение данных соединений в качестве иммунодепрессантов и иммуностимуляторов, модуляции отторжения трансплантатов и для облегчения заживления ран, включая модуляцию хейлоза.

Патенты США NN 4,740,519 (Shroot et al.), 4,826,969 (Maignan et al.), 4,326,055 (Loeliger et al. ), 5,130,335 (Chandraratna et al.), 5,324,840 (Chandraratna), 5,344,959 (Chandraratna), 5,130,335 (Chandraratna et al.), опубликованные Европейские Заявки (EA) NN 0170105 (Shudo), 0176034 A (Wuest et al. ), 0350846 A (Klaus et al.). 0176032 A (Frickel et al.), 0176033 A (Frickel et al.). 0253302 A (Klaus et al.), 0303915 A (Bryce et al.), Заявка Великобритании GB 2190378 A (Klaus et al.), Заявка ФРГ NN. DE 3715955 A1 (Klaus et al.), DE 3602473 A1 (Wuest et al.) и статьи J. Amer. Acad. Derm. 15: 756-764 (1986) (Sporn et al.), Chem. Pharm. Bull. 33: 404-407 (1985) (Shudo et al.), J. Med. Chem. 1988 31, 2182-2192 (Kagechicka et al.), Chemistry and Biology of Synthetic Retinoids CRC Press Inc. 1990 p. 334-335, 354 (Dawson et al.) описывают или затрагивают соединения, которые содержат тетрагидронафтильный фрагмент и обладают ретиноидоподобной или родственной ей биологической активностью. В Патенте США N 4,391,731 (Boller et al.) описываются производные нафталина для применения в виде жидкокристаллических композиций.

В Патентах США NN 4,980,369; 5,006,550; 5,015,658; 5,045,551; 5,089,509; 5,134,159; 5,162,546; 5,234,926; 5,248,777; 5,264,578; 5,272,156; 5,278,318; 5,324,744; 5,346,895; 5,346,915; 5,348,972; 5,348,975; 5,380,877; 5,399,561; 5,407,937 (принадлежащих тому же патентообладателю, что и данная заявка) и приведенных в них патентах и публикациях, описываются производные хромана, тиохромана и 1,2,3,4-тетрагидрохинолина, обладающие ретиноидоподобной активностью. Далее, несколько заявок, по которым одновременно ведется делопроизводство, и недавно выданных патентов, принадлежащих заявителю данной заявки, направлены на получение дополнительных соединений с ретиноидоподобной активностью.

Общеизвестным в настоящее время является то, что у млекопитающих (и других организмов) существует два основных типа рецепторов ретиноидов. Два основных типа или семейства рецепторов обозначены соответственно RAR и RXR. Внутри этих типов есть подтипы; в семействе RAR подтипы обозначены RAR, RAR и RAR, и в RXR подтипы следующие: RXR, RXR и RXR. Также было установлено в технике, что распределение двух основных типов рецепторов ретиноидов и нескольких подтипов не является однородным в различных тканях и органах организмов млекопитающих. Соответственно, среди соединений, обладающих агонистоподобной активностью по отношению к рецепторам ретиноидов, специфичность или селективность по отношению к одному из основных типов или семейств и даже специфичность или селективность по отношению к одному или более подтипов внутри семейства рецепторов рассматривается как желательное фармакологическое свойство.

Данное изобретение предлагает соединения, обладающие ретиноидоподобной биологической активностью, и конкретно соединения, которые связываются с одним или более RAR подтипов рецепторов ретиноидов.

Данное изобретение охватывает соединения Формулы 1 где X означает S, O, NR', где R' означает H или алкил, содержащий от 1 до 6 атомов углерода или; X означает [C(R₁)₂]_n, где n означает целое число между 0 и 2; R₁ означает независимо H или алкил с числом атомов углерода от 1 до 6; R₂ означает независимо водород или низший алкил с числом атомов углерода от 1 до 6; R₃ означает независимо водород, низший алкил с числом атомов углерода от 1 до 6 или F; m означает целое число от 0 до 2; o означает целое число от 0 до 4; p означает целое число от 0 до 2; r означает целое число от 0 до 2 при условии, что, когда Z означает O, сумма p и r, по меньшей мере, равна 1; Y означает фенильную или нафтильную группу, или гетероарил, выбранный из группы, состоящей из пиридила, тиенила, фурила, пиридазинила, пиримидинила, пиразинила, тиазолила, оксазолила, имидазолила и пирразолила, причем указанные фенильная, нафтильная и гетероарильная группы, по возможности, имеют в качестве заместителя одну или две группы R₂; W означает заместитель, выбранный из группы, состоящей из F, Br, Cl, I, C_1-6 алкила, фторзамещенного C_1-6 алкила, NO₂, N₃, OH, OCH₂OCH₃, OC_1-10 алкила, тетразола, CN, SO₂C_1-6 алкила, SO₂C_1-6-фторзамещенного алкила, SO-C_1-6 алкила, CO-C_1-6 алкила, COOR₈, фенила, фенила самого замещенного на W-группу, иную, нежели фенил или замещенный фенил; L означает -(C=Z)-NH- или -NH-(C=Z)-; Z означает O или S; A означает (CH₂)_q, где q означает от 0 до 5, низший разветвленный алкил с числом атомов углерода от 3 до 6; циклоалкил, содержащий от 3 до 6 атомов углерода; алкенил, содержащий от 2 до 6 атомов углерода и 1 или 2 двойные связи; алкинил, содержащий от 2 до 6 атомов углерода и 1 или 2 тройные связи; B означает COOH или ее фармацевтически приемлемую соль, COOR₈, CONR₉R₁₀, -CH₂OH, CH₂OR₁₁, CH₂OCOR₁₁, CHO, CH(OR₁₂)₂, CHOR₁₃O, -COR₇, CR₇(OR₁₂)₂, CR₇OR₁₃O, где R₇ означает алкильную, циклоалкильную или алкенильную группу, содержащую от 1 до 5 атомов углерода, R₈ означает алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 10 или триметилсилилалкил, где алкильная группа содержит от 1 до 10 атомов углерода, или циклоалкильную группу с числом атомов углерода от 5 до 10 или R₈ означает фенил или низший алкилфенил, R₉ и R₁₀ независимо означают водород, алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 10 или циклоалкильную группу с числом атомов углерода от 5 до 10, или фенил или низший алкилфенил, R₁₁ означает низший алкил, фенил или низший алкилфенил, R₁₂ означает низший алкил и R₁₃ означает двухвалентный алкильный радикал с числом атомов углерода от 2 до 5.

Во втором аспекте данное изобретение относится к применению соединений Формулы 1 для лечения кожных заболеваний, включая, без ограничения, старческий кератоз, арсенокератоз, угри воспалительного и невоспалительного характера, псориаз, ихтиоз и другие виды кератинизации и гиперпролиферативных заболеваний кожи, экзему, диффузный нейродермит, болезнь Дарье, лишай Вильсона, для предотвращения и изменения глюкокортикоидного нарушения (стероидной атрофии), в качестве местных антибактериальных агентов и антипигментационных средств для кожи, и для лечения и изменения разрушительного действия возраста и света на кожу. Соединения также применяются для предотвращения и лечения раковых заболеваний и предраковых состояний, включая предопухолевые и злокачественные гиперпролиферативные заболевания, такие как рак молочной железы, кожи, простаты, шеи, матки, толстой кишки, мочевого пузыря, пищевода, желудка, легких, гортани, полости рта, кровеносной и лимфатической системы, метаплазии, дисплазии, неоплазии, лейкоплакии и папилломы слизистых оболочек, и при лечении саркомы Капоши. Кроме того, данные соединения можно применять для лечения глазных болезней, включая, без ограничения, пролиферативную витреоретинопатию (PVR), отслойку сетчатки, синдром Шегрена (ксеродерматоз) и другие виды корнеопатии (изменения роговицы), а также для лечения и предотвращения различных сердечно-сосудистых заболеваний, включая, без ограничения, заболевания, связанные с липидным обменом, например, дислипидемии, для предотвращения постангиопластического повторного стеноза и в качестве агента для повышения уровня тканевого активатора плазминогена (TPA) в кровотоке. Другие применения соединений по данному изобретению включают предотвращение и лечение состояний и заболеваний, ассоциирующихся (связанных) с вирусом папилломы человека (HPV, ВПЧ), включая бородавки и остроконечные кондиломы, различных воспалительных заболеваний, таких как пневмосклероз, илеит, колит, болезнь Крона, нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона и припадок (удар), неправильной функции гипофиза, включая недостаточное продуцирование гормона роста (СТГ), модуляции апоптоза, включая как индукцию апоптоза, так и ингибирование активированного апоптоза T-клеток, для восстановления роста волос, включая сочетание терапии данными соединениями и другими агентами, такими как Minoxidil^R (миноксидил), (лечения) заболеваний, связанных с иммунной системой, включая применение данных соединений в качестве иммунодепрессантов и иммуностимуляторов, модуляции отторжения трансплантатов и для облегчения заживления ран, включая модуляцию хейлоза.

Данное изобретение также относится к фармацевтическим препаратам, содержащим соединение Формулы 1 в смеси с фармацевтически приемлемым носителем.

В другом аспекте данное изобретение относится к процессам получения соединения Формулы 1; эти процессы включают реакцию в присутствии акцептора кислоты или акцептора воды, соединения Формулы 2 с соединением Формулы 3 или соединения Формулы 2a с соединением Формулы 3a, где X₁ означает OH, галоген или другую группу, которая делает группу -COX₁ способной образовывать амид и где значения остальных символов даны при описании Формулы 1.

H₂N-Y(W)_r-A-B Формула 3 X₁OC-Y(W)_r-A-B Формула 3a Далее данное изобретение относится к таким реакциям соединений Формулы 1, которые вызывают превращение B-группы при том, что продукт реакции продолжает соответствовать Формуле 1.

Общие определения терминов, применяемых в вариантах изобретения Термин алкил подразумевает и охватывает любые и все группы, которые известны как нормальный алкил, разветвленный алкил и циклоалкил. Термин алкенил подразумевает и охватывает нормальные алкенильные, разветвленные алкенильные и циклоалкенильные группы, имеющие одну или более ненасыщенных связей. Подобным образом термин алкинил подразумевает и охватывает нормальные алкинильные и разветвленные алкинильные группы, содержащие одну или более тройных связей.

Низший алкил означает вышеприведенное широкое определение алкильной группы, содержащей от 1 до 6 атомов углерода в случае нормального низшего алкила и применимое при наличии от 3 до 6 атомов углерода для разветвленных и циклоалкильных групп. Низший алкенил определяется подобным же образом как содержащий от 2 до 6 атомов углерода в случае нормальных алкенильных групп и от 3 до 6 атомов углерода для низших разветвленных и циклоалкенильных групп. Низшие алкинилы аналогично определяются как содержащие от 2 до 6 атомов углерода для нормальных низших алкинильных групп и от 4 до 6 атомов углерода для низших разветвленных алкинильных групп.

Термин "(сложный) эфир (ester)" так, как он употребляется здесь, подразумевает и охватывает любое соединение, подпадающее под этот термин в классической органической химии. Он включает эфиры органических и неорганических кислот. В случае, если B в Формуле 1 означает -COOH, этот термин охватывает продукты, полученные при взаимодействии этой функциональной группы со спиртами или тиоспиртами, предпочтительно с алифатическими спиртами, содержащими от 1 до 6 атомов углерода. В случае, если эфир образован из соединений, в которых B означает -CH₂OH, этот термин охватывает соединения, образованные из органических кислот, способных давать эфиры, включая фосфорсодержащие и серосодержащие кислоты, или соединения формулы -CH₂OCOR₁₁, где R₁₁ означает любую замещенную или незамещенную алифатическую, ароматическую, гетероароматическую или алифатически-ароматическую группу, предпочтительно с числом атомов углерода в алифатических фрагментах от 1 до 6.

Если в данной заявке не указано иначе, предпочтительные эфиры получают из насыщенных алифатических спиртов или кислот с числом атомов углерода десять или менее или циклических или насыщенных алифатических-циклических спиртов и кислот с числом атомов углерода от 5 до 10. Особенно предпочтительными алифатическими эфирами являются таковые, образованные из низших алкильных кислот и спиртов. Также предпочтительны фениловые или низший алкил-фениловые эфиры.

Амиды имеют смысл, классически соответствующий этому термину в органической химии. В данном случае он включает незамещенные амиды и все алифатические и ароматические моно- и дизамещенные амиды. Если в данной заявке не указано иначе, предпочтительными амидами являются моно- и дизамещенные амиды, образованные из насыщенных алифатических радикалов, содержащих десять или менее атомов углерода, или циклических или насыщенных алифатически-циклических радикалов, содержащих от 5 до 10 атомов углерода. Особенно предпочтительными амидами являются таковые, образованные из замещенных и незамещенных низших алкиламинов. Также предпочтительны моно- и дизамещенные амиды, образованные из замещенных и незамещенных фенил- или низших алкилфениламинов. Незамещенные амиды также предпочтительны.

Ацетали и кетали включают радикалы формулы-CK, где K означает (-OR)₂. Здесь R означает низший алкил. Также K может означать -OR₇O-, где R₇ означает низший алкил, содержащий от 2 до 5 атомов углерода, линейный или разветвленный.

Фармацевтически приемлемую соль можно приготовить из любого соединения по данному изобретению, содержащего функциональную группу, способную образовывать такую соль, например кислотную группу. Фармацевтически приемлемая соль означает любую соль, которая сохраняет активность исходного соединения и не оказывает никакого вредного или неблагоприятного воздействия на субъект, которому она вводится и в условиях, в которых она вводится. Фармацевтически приемлемые соли могут получаться из органических или неорганических оснований. Соль может представлять собой моно- или поливалентный ион. Особый интерес представляют неорганические ионы натрия, калия, кальция и магния. Органические соли могут быть получены из аминов, особенно аммониевые соли таких аминов, как моно-, ди- и триалкиламинов или этаноламинов. Соли также могут давать кофеин, трометамин и подобные молекулы. В случае, когда основность атома азота достаточна для образования аддуктов с кислотой, таковые можно получать из любых неорганических или органических кислот или алкилирующих агентов, таких как йодистый метил. Предпочтительные соли представляют собой такие, которые образуют неорганические кислоты, например соляная кислота, серная кислота или фосфорная кислота. Также можно использовать любую из числа простых органических кислот, таких как моно-, ди- или трикарбоновая кислота.

Некоторые соединения по данному изобретению могут иметь транс и цис (E и Z) изомеры. Кроме того, соединения по данному изобретению могут содержать один или более хиральных центров и, следовательно, могут существовать в формах энантиомеров и диастереомеров. Данное изобретение намерено охватить все такие изомеры сами по себе, а также смеси цис- и трансизомеров, смеси диастереомеров и рацемические смеси энантиомеров (оптических изомеров).

Что касается символа Y в Формуле 1, то предпочтительными соединениями по данному изобретению являются таковые, в которых Y означает фенил, пиридил, 2-тиазолил, тиенил или фурил, причем более предпочтителен фенил. Что касается заместителей в группах Y (фенил) и Y (пиридил), то предпочтительными являются соединения, в которых фенильная группа в 1,4 (пара)-положениях имеет в качестве заместителей L и A-B-группы, и в которых в 2,5-положениях пиридинового кольца имеются в качестве заместителей L и A-B-группы. (Замещение в 2,5-положениях по "пиридиновой номенклатуре" соответствует замещению в 6-положении по "номенклатуре никотиновой кислоты"). В предпочтительных соединениях по данному изобретению отсутствует возможный заместитель R₂ в Y-группе.

Что касается амидной или карбамоильной функции "L", связывающей два циклических фрагмента молекулы, то L предпочтительно означает -CZ-NH-; другими словами предпочтительными по данному изобретению являются те амидные или карбамоильные соединения, в которых карбонильная (CO-) или тиокарбонильная (CS-) группа связана с остатком конденсированного цикла.

Относительно символа X в Формуле 1 надо сказать, что предпочтительными по данному изобретению являются те соединения, в которых X означает [C(R₁)₂] _n и n означает 1, а также те, в которых X означает O или S (производные хромана и тиохромана).

Группа R₁ представляет собой предпочтительно H или CH₃. Группы R₂ представляет собой предпочтительно водород.

A-B-группа предпочтительных соединений представляет собой (CH₂)_n-COOH или (CH₂)_n-COOR₈, где значение n и R₈ дано выше. Еще более предпочтительно, когда n означает ноль и R₈ означает низший алкил, или n означает ноль, а B означает COOH или ее фармацевтически приемлемую соль.

Что касается W в Формуле 1, то эта группа представляет собой, вообще говоря, электроноакцепторную группу, которая находится в соединениях по данному изобретению или в ароматической части конденсированной циклической системы, или в виде заместителя в арильной или гетероарильной группе Y. Предпочтительно, когда W-группа находится в группе Y или как в группе Y, так и в ароматическом фрагменте конденсированной гетероциклической системы. Когда группа Z означает S (тиоамиды), W-группа не обязательно присутствует в соединениях по данному изобретению, хотя тем не менее предпочтительным является наличие, по меньшей мере, одной W-группы. В арильном или гетероарильном Y-фрагменте группа W предпочтительно расположена в положении, прилегающем к группе A-B; предпочтительным является, когда группа A-B находится в пара-положении в фенильном кольце по отношению к "амидному" фрагменту, и, следовательно, W-группа предпочтительно занимает мета-положение относительно амидного фрагмента. Когда W-группа также присутствует в ароматической части конденсированной гетероциклической системы, она находится в положении 8 ядра хромана или тиохромана, при этом группа Z=C-NH предпочтительно занимает положение 2 и W-группа находится в положении 3 или 4. Предпочтительными группами W являются F, NO₂, Br, I, CF₃, N₃ и OH. Наличие в качестве заместителей одного или двух атомов фтора в группе Y является особенно предпочтительным. Когда Y-группа означает фенил, заместитель - фтор -, предпочтительно занимает орто и орто'-положения относительно A-B-группы, которая предпочтительно представляет собой COOH или COOR₈.

Наиболее предпочтительные соединения по данному изобретению показаны в таблице 1, относящейся к соединениям Формулы 4 и Формулы 5.

Способы введения соединений по данному изобретению Соединения по данному изобретению можно вводить системно или местно, в зависимости от таких соображений, как состояние, подвергаемое лечению, необходимость в специфическом локальном лечении, количество лекарства, которое должно быть введено, и множества других причин.

При лечении дерматозов обычно предпочитают назначать местное введение лекарства, хотя в некоторых случаях, например, при лечении тистозных угрей или псориаза может применяться оральное введение. Можно использовать любую обычную форму для местного введения, например раствор, суспензию, гель, мазь и тому подобное. Препараты (с рецептурой) для местного употребления хорошо описаны в литературе (технике) по фармацевтическим препаратам, например в книге Remington, Pharmaceutical Science, Edition 17, Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania. В качестве препаратов для местного применения эти соединения можно вводить в виде порошка или распыляемого раствора, особенно в форме аэрозоля. Если лекарство надо вводить системно, оно может быть приготовлено в виде порошка, драже, таблетки и тому подобного или в виде сиропа или эликсира, пригодных для орального применения. Для внутривенного или внутрибрюшинного введения соединения можно приготовить в виде раствора или суспензии, которые можно применять путем инъекций. В некоторых случаях можно применять эти соединения в форме суппозитория или в виде препаратов пролонгированного действия для подкожного или внутримышечного введения.

В препараты для местного применения можно добавлять другие медикаменты для таких дополнительных целей, как лечение сухости кожи; защита от действия света; другие лекарственные препараты для лечения дерматозов; медикаменты для предотвращения инфекции, уменьшения раздражения, воспаления и тому подобное.

На лечение дерматозов или любых других показаний, о которых известно или будет обнаружено, что они чувствительны к действию соединений, подобных ретиновой кислоте, оказывает влияние введение терапевтически эффективной дозы одного или более соединений по данному изобретению. Лечебная (доза) концентрация представляет собой такую концентрацию, которая вызывает улучшение конкретного состояния или замедляет его ухудшение (распространение). В некоторых (особых) случаях соединение потенциально можно применять с профилактической целью для предотвращения этого конкретного состояния.

Применяемая лечебная или профилактическая концентрация может меняться в зависимости от состояния, и в некоторых случаях она может меняться в зависимости от тяжести подвергаемого лечению состояния и чувствительности больного к лечению. Соответственно, нет единой, во всех случаях применяемой концентрации (дозы), но требуется изменение (модификация), зависящее от конкретного заболевания, лечение которого осуществляется. Такие дозы выявляются в ходе рутинного эксперимента. Однако можно ожидать, например, что при терапии угрей или подобных кожных заболеваний, препарат, содержащий от 0.01 до 1.0 миллиграмма на миллилитр соединения, является терапевтически эффективным во всех случаях. Можно ожидать, что при общем (системном) применении количество от 0.01 до 5 мг на кг веса тела в день окажет терапевтическое действие при лечении многих заболеваний с применением этих веществ.

Исследование ретиноидоподобной биологической активности Ретиноидоподобную активность соединений по данному изобретению можно установить путем анализа, при котором измеряется способность соединения связываться с рецепторами ретиноидов. Как отмечено в вводной части данной патентной заявки, у млекопитающих (и других организмов) имеется два основных типа рецепторов ретиновой кислоты (RAR и RXR). Внутри каждого типа существуют подтипы (RAR, RAR, RAR, RXR, RXR и RXR), распределение которых в различных тканях и органах организмов млекопитающих не является однородным. Селективное связывание только одного или двух подтипов из семейства рецепторов ретиноидов может привести к полезным фармакологическим свойствам вследствие изменения распределения подтипов в некоторых тканях или органах млекопитающего. В силу вышеприведенных причин связывание любого или всех рецепторов ретиноидов, а также специфическая или селективная активность семейства рецепторов, или селективная или специфическая активность любого из подтипов рецепторов рассматриваются как желательные фармакологические свойства.

В свете вышеизложенного известны аналитические способы (тестирования) определения агонистоподобной активности соединений в подтипах рецепторов RAR, RAR, RAR, RXR, RXR и RXR. Например, анализ трансактивации химерного рецептора, который проверяет подтипы рецепторов RAR, RAR, RAR и RXR агонистоподобную активность и который основан на работе, опубликованной Feigner P.L. and Holm M. (1989) Focus, 11 2, подробно описанной в Патенте США N 5,455,265.

Анализ трансактивации галорецептора и анализ (реакция) связывания лиганда, которые измеряют (определяют) способность соединений по данному изобретению связываться с несколькими подтипами рецепторов ретиноидов, соответственно, описаны в заявке PCT N WO 93/11755 (конкретно на стр. 30-33 и 37-41), опубликованной 24 июня 1993 г. Описание анализа связывания лиганда также приведено ниже.

АНАЛИЗ (РЕАКЦИЯ) СВЯЗЫВАНИЯ ЛИГАНДА Все анализы (эксперименты) по определению связывания осуществляют аналогично. Все шесть типов рецепторов получают из типа рецептора (RAR , , и RXR , , ), экспрессируемого Baculovirus (бакуловирусом). Исходные растворы всех соединений готовят в виде 10 мМ раствора в этаноле и разбавление в серии проводят ДМСО:этанолом = 1:1. Буферы для анализа в случае всех шести рецепторов содержат следующее: 8% глицерина, 120 мМ KCl, 8 мМ трис, 5 мМ CHAPS, 4 мМ DTT и 0.24 мМ PMSF, pH 7.4 при комнатной температуре.

Все анализы связывания рецептора (рецепторного связывания) проводят одинаково. Конечный объем при анализе составляет 250 мкл и содержит, в зависимости от анализируемого рецептора, от 20 до 40 мкг белкового экстракта, 5 нМ [³H]-полностью транс-ретиновой кислоты или 10 нМ [³H]-9-цис-ретиновой кислоты и меняющиеся в интервале от 0 до 10^-5 М концентрации конкурирующих лигандов. Анализы проводят в 96-луночном планшете. Термостатирование осуществляют при 4^oC до достижения равновесия. Неспецифическое связывание определяют как такое связывание, которое остается (сохраняется) в присутствии 1000 нМ изомера соответствующей немеченой ретиновой кислоты. В конце периода термостатирования добавляют 50 мкл 6.25% гидроксиапитита в соответствующем водном буферном растворе. Водный буферный раствор содержит 100 мМ KCl, 10 мМ трис и или 5 мМ CHAPS (RXR , , ), или 0.5% Triton X-100 (RAR ,,). Смесь встряхивают и термостатируют в течение 10 минут при 4^oC, центрифугируют и надосадочную жидкость отделяют. Гидроксиапитит еще трижды промывают соответствующим водным буферным раствором. Комплекс рецептор-лиганд адсорбируют гидроксиапититом. Количество комплекса рецептор-лиганд определяют в осадке гидроксиапитита с помощью жидкостного сцинтилляционного счетчика.

После поправки на неспецифическое связывание определяют значение IC₅₀. Величина IC₅₀ представляет собой концентрацию конкурирующего лиганда, необходимую для уменьшения специфического связывания на 50%. Величину IC₅₀ определяют графически по логистической кривой. Величины K_d определяют, применяя уравнение Ченга-Пруссова для значений IC₅₀, концентрации меченого лиганда и K_d меченого лиганда. Результаты реакции связывания лиганда выражены в величинах K_d. (См. Cheng et al. Biochemical Pharmacology Vol. 22 pp 3099-3108, специально введено в данное описание в виде ссылки).

В таблице 2 показаны результаты анализа (реакции) связывания лиганда для некоторых приведенных в примерах соединений по данному изобретению.

Как видно из результатов испытания, объединенных в таблице 2, указанные в ней примеры соединений по данному изобретению связываются с RAR-рецепторами специфично или селективно.

ИСПЫТАНИЯ РАКОВЫХ КЛЕТОЧНЫХ ЛИНИЙ МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Гормоны Все транс-ретиновые кислоты (t-RA) (Sigma Chemicals Co., St. Louis, MO) хранят при -70^oC. Перед каждым экспериментом соединение растворяют в 100% этаноле (концентрация 1 мМ) и разбавляют в культуральной среде непосредственно перед употреблением. Все эксперименты проводят при неярком свете. Контрольные испытания проводят, используя ту же самую концентрацию этанола, что и в экспериментальных планшетах (плашках), и эта концентрация растворителя ни в одном испытании не оказывала влияния.

Клетки и культура клеток Все клеточные линии, RPMI 8226, ME-180 и AML-193, получали от Американской Коллекции Культур Клеток (ATCC, Rockville, MD). RPMI 8226 представляет собой линию кроветворных (гемопоэтических) клеток человека, полученную из периферической кровеносной системы больного множественной миеломой (болезнью Калера). Клетки похожи на лимфобластоидные клетки других клеточных линий лимфоцитов человека и секретируют - тип легких (полипептидных) цепей иммуноглобулина. Клетки RPMI 8226 выращиваются в среде RPMI (Gibco), дополненной 10% эмбриональной телячьей сыворотки (ЭТС), глутамином и антибиотиками. Клетки выдерживают в виде суспендированных культур, выращиваемых при 37^oC во влажной атмосфере 5% CO₂ в воздухе. Клетки разбавляют до концентрации 1 Ч 10⁵/мл дважды в неделю.

ME-180 представляет собой клеточную линию плоскоклеточного (эпидермоидного) рака человека, полученного из шеи. Опухоль собой представляла высокоинвазивную карциному чешуйчатых клеток с неравномерными скоплениями клеток и без заметного ороговения. Клетки ME-180 выращивали и выдерживали в среде McCoy (Маккоя) 5a (Gibco), дополненной 10% ЭТС, глутамином и антибиотиками. Клетки хранили в виде монослойных культур, выращиваемых при 37^oC в увлажненной атмосфере 5% CO₂ в воздухе. Клетки разбавляли до концентрации 1 Ч 10⁵/мл дважды в неделю.

Линия AML-193 была получена из бластных клеток, классифицируемых как клетки M5 острого моноцитарного лейкоза. Для получения этой клеточной линии требовался фактор роста, гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (GM-CSF), и фактор роста необходим для ее непрерывной (длительной) пролиферации в питательной среде определенного химического состава. Клетки выращивали и хранили в модифицированной по Искову (Iscove) среде Дульбекко, дополненной 10% ЭТС, глутамином и антибиотиками с 5 мкг/мл инсулина (Sigma Chemical Co.) и 2 нг/мл rh GM-CSF (R и D системы). Клетки разбавляли до концентрации 3 Ч 10⁵/мл дважды в неделю.

Включение (внедрение) ³H-тимидина Способ, применяемый для определения включения меченого радиоактивным изотопом тимидина, был разработан, исходя из методики, описанной Shrivastav et al. Клетки RPMI-8226 помещают в 96-луночный (лунки круглодонные) планшет (Costar) при плотности 1,000 клеток/лунка. В соответствующие лунки добавляют испытуемые ретиноидные соединения до конечных концентраций, указанных для конечного объема 150 мкл/лунка. Планшеты термостатируют 96 часов при 37^oC в увлажненной атмосфере 5% CO₂ в воздухе. Затем в каждую лунку добавляют 1 мкCi [5-³H] -тимидина (Amersham, U.K., удельная активность 43 Ci/ммол) в 25 мкл культуральной среды и клетки термостатируют еще 6 ч. Далее культуры обрабатывают так, как описано ниже.

Клетки ME-180, собранные с помощью трипсина, помещают в 96-луночный планшет с плоскодонными лунками (плашками) (Costar) при плотности 2,000 клеток/лунка. Культуры обрабатывают, как описано выше, для RPMI 8226 за следующими исключениями. После термостатирования с тимидином надосадочную жидкость осторожно отделяют и клетки промывают 0.5 мМ раствором тимидина в буфере фосфат-физиологический раствор. Клетки ME-180 быстро обрабатывают 50 мкл 2.5% трипсина для удаления клеток из планшета.

Клетки AML-193 помещают в