Производные диоксида бензотиазина, фармацевтическая композиция на их основе, обладающая ингибирующей рецептор эндотелина активностью, и способ ингибирования рецептора эндотелина

Производные диоксида бензотиазина, фармацевтическая композиция на их основе, обладающая ингибирующей рецептор эндотелина активностью, и способ ингибирования рецептора эндотелина

Реферат

 

Описываются новые производные диоксида бензотиазина общей формулы 1, где R₂ означает группу формулы 2 или алкил с 1 - 7 атомами углерода, каждый из R_a и R_c означает от одного до пяти заместителей, а R_b означает от одного до четырех заместителей, независимо друг от друга выбираемых из группы, включающей водород, хлор, метилендиоксигруппу, этилендиоксигруппу, группы OR и OCH₂OR, где R означает водород, алкил с 1 - 6 атомами углерода или фенил, R_d означает группы CO₂R, SO₃R, CONRR₁, где R имеет вышеуказанное значение, а R₁ имеет значение, приведенное для радикала R, n означает целое число от нуля до двух, --- означает простую или двойную связь; Х означает (СН₂)_n или S(O)_n, где n имеет вышеуказанное значение, или их фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты или основания. Также раскрыты фармацевтическая композиция на основе представленных соединений, обладающая активностью ингибирования эндотелина, и способ ингибирования рецептора эндотелина. Изобретение расширяет арсенал гетероциклических соединений, пригодных в качестве активного вещества фармацевтической композиции. 3 с. и 4 з.п.ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к новым гетероциклическим соединениям с ценными биологическими свойствами, в частности к производным диоксида бензотиазина, фармацевтической композиции на их основе, обладающей ингибирующей рецептор эндотелина активностью, и способу ингибирования рецептора эндотелина.

Известно применять в качестве ингибитора рецептора эндотелина производные циклопентена с приконденсированным гетероароматическим кольцом (см. патент США N 5389620, кл. A 61 K 31/435, C 07 D 221/04, 14.02.1995 г.).

Задачей изобретения является расширение арсенала гетероциклических соединений, пригодных в качестве активного вещества фармацевтической композиции, обладающей ингибирующей рецептор эндотелина активностью.

Поставленная задача решается предлагаемыми производными диоксида бензотиазина общей формулы (I) где R₂ означает или алкил с 1-7 атомами углерода, каждый из R_a и R_с означает от одного до пяти заместителей, а R_b означает от одного до четырех заместителей, независимо друг от друга выбираемых из группы, включающей водород, хлор, метилендиоксигруппу, этилендиоксигруппу, группы OR и OCH₂OR, где R означает водород, алкил с 1-6 атомами углерода или фенила, R_d означает группы CO₂R, SO₃R, CONRR₁, где R имеет вышеуказанное значение, a R₁ имеет значение, приведенное для радикала R, n означает целое число от нуля до двух; - - - означает простую или двойную связь; и X означает (CH₂)_n, или S(O)_n, где n имеет вышеуказанное значение, или их фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты или основания.

В первую группу предпочтительных производных диоксида бензотиазина вышеприведенной формулы (I) входят соединения, у которых R₂ означает или алкил с 1-5 атомами углерода, каждый из R_a и R_c означает от одного до пяти заместителей, a R_b означает от одного до четырех заместителей, независимо друг от друга выбираемых из группы, включающей водород, хлор, метилендиоксигруппу, этилендиоксигруппу, Rd означает карбоксил; n означает целое число от нуля до единицы; - - - означает двойную связь; и X означает (CH₂)_n или сульфонил.

Во вторую группу предпочтительных производных диоксида бензотиазина вышеприведенной формулы (I) входят соединения, у которых R₂ означает или алкил с 1-5 атомами углерода, каждый из R_a и R_c означает от одного до пяти заместителей, независимо друг от друга выбираемых из группы, включающей водород и хлор; R_b означают от одного до четырех заместителей, независимо друг от друга выбираемых из группы, включающей водород и хлор, R_a, R_b, R_c также, независимо друг от друга, могут означать вплоть до двух заместителей из группы, включающей метилендиоксигруппу и этилендиоксигруппу; n означает целое число, нуль или единицу; - - - означает двойную связь; и X означает (CH₂)_n или серу.

В частности, предпочитаются производные диоксида бензотиазина вышеприведенной формулы (I), которые выбраны из группы, включающей 4-бензо[1,3] диоксол-5-ил-2-метил-1,1-диоксо-1,2-дигидро-1⁶ бензо-[e] [1,2]-тиазин-3-карбоновую кислоту; 4-бензо[1,3] диоксол-5-ил-2-бензо[1,3] диоксол-5-ил-метил-1,1- диоксо-1,2-дигидро-1⁶-бензо[e][1,2]тиазин-3-карбоновую кислоту; 4-бензо[1,3] диоксол-5-ил-2-бензил-1,1-диоксо-1,2-дигидро-1⁶ бензо-[e] [1,2]-тиазин-3-карбоновую кислоту; 4-бензо[1,3] диоксол-5-ил-2-(4-метоксибензил)-1,1-диоксо-1,2- дигидро-1⁶-бензо[e][1,2]тиазин-3-карбоновую кислоту; 4-бензо[1,3] диоксол-5-ил-1,1-диоксо-2-(3,4,5- триметоксибензил)-1,2-дигидро-1⁶-бензо[e][1,2]тиазин-3-карбоновую кислоту; 4-бензо[1,3] диоксол-5-ил-2-(2-карбоксиметокси-4- метоксибензил)-1,1-диоксо-1,2-дигидро-1⁶-бензо[e][1,2]тиазин-3- карбоновую кислоту; 4-бензо[1,3] диоксол-5-ил-2-(6-хлорбензо[1,3] диоксол-5-ил- метил)-1,1-диоксо-1,2-дигидро-1⁶-бензо[e]][1,2]тиазин-3- карбоновую кислоту; 4-бензо[1,3] диоксол-5-ил-2-(7-метоксибензо[1,3] диоксол-5-ил- метил)-1,1-диоксо-1,2-дигидро-1⁶-бензо[e][1,2]тиазин-3- карбоновую кислоту; 2-бензо[1,3] диоксол-5-ил-метил-4-(3,4-диметоксифенил)-1,1- диоксо-1,2-дигидро-1⁶-бензо[e](1,2]тиазин-3-карбоновую кислоту; 2-бензо[1,3] диоксол-5-ил-метил-1,1-диоксо-4-(3,4,5- триметоксифенил)-1,2-дигидро-1⁶-бензо[e][1,2]тиазин-3- карбоновую кислоту; N-(4-бензо[1,3] диоксол-5-ил-2-бензо[1,3] диоксол-5-ил-метил- 1,1-диоксо-1,2-дигидро-1⁶-бензо[e][1,2]тиазин-3-карбонил)- бензолсульфонамид; 4-бензо[1,3] диоксол-5-ил-2-бензо[1,3] диоксол-5-ил-метил-6- метокси-1,1-диоксо-1,2-дигидро-1⁶-бензо[e][1,2]тиазин-3-карбоновую кислоту; 2,4-бис-бензо[1,3] диоксол-5-ил-6,7-диметокси-1,1-диоксо-1,2- дигидро-1⁶-бензо-[e][1,2]тиазин-3-карбоновую кислоту; 4-бензо[1,3] диоксол-5-ил-2-(2-хлорбензил)-1,1-диоксо-1,2- дигидро-1⁶-бензо-[e][1,2]тиазин-3-карбоновую кислоту; 2-бензо[1,3] диоксол-5-ил-метил-4-(бензо[1,3] диоксол-5-ил)-7- метокси-1,1-диоксо-1,2-дигидро-1⁶-бензо[e](1,2]тиазин-3- карбоновую кислоту; и 2-бензо[1,3] диоксол-5-ил-метил-4-(2,3- дигидробензо[1,4]диоксин-6-ил)-1,1-диоксо-1,2-дигидро-1⁶-бензо[e][1,2]тиазин-3-карбоновую кислоту.

4-(бензо[1,3] диоксол-5-ил-сульфанил)-2-метил-1,1-диоксо-1,2- дигидро-1⁶-бензо[e][1,2]тиазин-3-карбоновую кислоту; 2-бензо[1,3] диоксол-5-ил-метил-4-(бензо[1,3] диоксол-5-ил- сульфанил)-1,1-диоксо-1,2-дигидро-1⁶-бензо[e][1,2]тиазин-3-карбоновую кислоту; 4-(бензо[1,3] диоксол-5-ил-сульфанил)-2-(4-метоксибензил)-1,1 -диоксо-1,2-дигидро-1⁶-бензо[e][1,]тиазин-3-карбоновую кислоту; 4-(бензо[1,3] диоксол-5-ил-сульфанил)-2-(карбоксиметокси-4- метоксибензил)-1,1-диоксо-1,2-дигидро- 1⁶ -бензо[e][1,2]тиазин-3- карбоновую кислоту; 4-(бензо[1,3] диоксол-5-ил-сульфанил)-2-(7- метоксибензо[1,3]диоксол-5-ил-метил)-1,1-диоксо-1,2-дигидро- 1⁶-бензо[e][1,2]тиазин-3-карбоновую кислоту; 2-бензо[1,3] диоксол-5-ил-метил-4-(3,4-диметоксифенилсульфанил)-1,1- диоксо-1,2-дигидро-1⁶- бензо[e][1,2]тиазин-3-карбоновую кислоту; 2-бензо[1,3] диоксол-5-ил-метил-4-(3-метоксифенилсульфанил)- 1,1-диоксо-1,2-дигидро-1⁶-бензо[e][1,2]тиазин-3-карбоновую кислоту; 2-бензо[1,3] диоксол-5-ил-метил-4-(бензо[1,3] диоксол-5-ил- сульфанил)-6,7-диметокси-1,1-диоксо-1,2-дигидро-1⁶- бензо[e]][1,2]тиазин-3-карбоновую кислоту; 2-бензо[1,3] диоксол-5-ил-метил-4-(бензо[1,3] диоксол-5-ил- сульфанил)-6-метокси-1,1-диоксо-1,2-дигидро-1⁶-бензо[e][1,2]тиазин-3-карбоновую кислоту; 4-(бензо[1,3] диоксол-5-ил-сульфанил)-2-(2-хлорбензил)-1,1 - диоксо-1,2-дигидро-1⁶-бензо[e]][1,2]тиазин-3-карбоновую кислоту; 2-(2-бензо[1,3] диоксол-5-ил-метил)-4-(бензо[1,3] диоксол-5-ил- сульфанил)-1,1-диоксо-1,2-дигидро-1⁶-бензо[e][1,2]тиазин-3- карбоновую кислоту и метиловый эфир 2-бензо[1,3]диоксол-5-ил- метил-1,1-диоксо-4-(трифторметан-сульфонилокси)-1,2-дигидро- 1⁶ - бензо[e][1,2]тиазин-3-карбоновой кислоты.

Фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты соединений формулы (I) включают соли, происходящие от нетоксичных неорганических кислот, таких как соляная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота, серная кислота, бромоводородная кислота, иодоводородная кислота, фтороводородная кислота, фосфористая кислота и тому подобные, также как соли, происходящие от нетоксичных органических кислот, таких как алифатические моно- и дикарбоновые кислоты, фенилзамещенные алкановые кислоты, гидроксиалкановые кислоты, алкандиовые кислоты, ароматические кислоты, алифатические и ароматические сульфокислоты и т.д. Таким образом, такие соли включают сульфат, пиросульфат, бисульфат, сульфит, бисульфит, нитрат, фосфат, моногидрофосфат, дигидрофосфат, метафосфат, пирофосфат, хлорид, бромид, иодид, ацетат, трифторацетат, пропионат, каприлат, изобутират, оксалат, малонат, сукцинат, суберат, себацинат, фумарат, малеат, манделат, бензоат, хлорбензоат, метилбензоат, динитробензоат, фталат, бензолсульфонат, толуолсульфонат, фенилацетат, цитрат, лактат, тартрат, метансульфонат и тому подобные. Также рассматриваются соли аминокислот, такие как аргинат, глюконат, галактуронат и тому подобные (см. , например, Berge S.M. и др., "Фармацевтические соли", Journal of Pharmaceutical Science, 66,1-19 (1977)).

Соли присоединения кислоты вышеуказанных основных соединений получают обычным образом путем введения в контакт соединения в форме свободного основания с достаточным количеством желательной кислоты.

Фармацевтически приемлемые соли присоединения основания получают с помощью металлов или аминов, таких как щелочные или щелочноземельные металлы или органические амины. Примерами используемых в качестве катионов металлов являются натрий, калий, магний, кальций и тому подобные.

Примерами пригодных аминов являются N,N'-дибензилэтилендиамин, хлорпрокаин, холин, диэтаноламин, дициклогексиламин, этилендиамин, N-метилглюкамин и прокаин (см. , например, Berge S.M. и др., "Фармацевтические соли", Journal of Pharmaceutical Science, 66,1-19 (1977)).

Соли присоединения основания вышеуказанных кислых соединений получают обычным образом путем введения в контакт соединения в форме свободной кислоты с достаточным количеством желательного основания.

Некоторые из соединений согласно настоящему изобретению могут существовать в несольватированных формах, а также в сольватированных формах, включая гидратированные формы. Обычно сольватированные формы, включая гидратированные формы, эквивалентны несольватированным формам и входят в рамки настоящего изобретения.

Некоторые из соединений согласно настоящему изобретению содержат один или более хиральных центров и каждый центр может иметь конфигурацию R или S. Настоящее изобретение включает все энантиомерные и эпимерные формы, а также их соответствующие диастереомерные смеси.

Вторым объектом изобретения является фармацевтическая композиция, обладающая активностью, ингибирующей рецептор эндотелина, содержащая в качестве активного вещества производные диоксида бензотиазина вышеприведенной формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль присоединения кислоты или основания в терапевтически эффективном количестве, а также фармацевтически приемлемый носитель.

Предлагаемую фармацевтическую композицию, которая может представлять собой любой стандартный препарат, получают известными в фармацевтической промышленности приемами.

Примеры возможных препаратов Таблетки 10 мг активного вещества, например, примера 24 50 мг лактозы 35 мг кукурузного крахмала 5 мг стеарата магния.

Ингредиенты перемешивают с получением смеси, которую известными приемами переводят в таблетки весом 100 мг.

Раствор 10 мг активного вещества, например, примера 35 40 мг 70%-ного раствора сорбита 20 мг бензоата натрия 5 мг сахарина 10 мг красного красителя 20 мг вишневого аромата 100 мл дистиллированной воды.

Ингредиенты тщательно перемешивают и наполняют ими емкости, которые стерильно закрывают.

Третьим объектом изобретения является способ ингибирования рецептора эндотелина путем введения пациенту производного диоксида бензотиазина вышеприведенной формулы (I) в терапевтически эффективном количестве в форме разовой дозы.

Проведенные испытания показывают, что соединения согласно изобретению проявляют антагонистическую по отношению к эндотелину активность. Так, соединения исследовали на их способность ингибировать связывание [¹²⁵]-ЭТ-1([¹²⁵] -эндотелин-1) при испытании с рецептором. Ряд соединений также был испытан на антагонистическую активность путем ингибирования стимулированного эндотелином-1 выделения арахидоновой кислоты и стимулированной эндотелином-1 вазоконстрикции. Были использованы нижеследующие методики испытаний (Doherty A. M. и др., "Предназначение C-концевых пептидных антагонистов эндотелина: взаимосвязь активности со структурой ЭТ-1[16-21, D-His¹⁶]", Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 3, 497-502 (1993)).

Испытание на связывание радиолиганда В экспериментах на связывание используют следующие культивированные клетки: гладкомышечные сосудистые клетки почечной артерии кролика (ERBA-A), экспрессирующие рекомбинантный человеческий рецептор эндотелин-A содержащие тирозинкиназу лейкоцитарные клетки (HERBA-A) и экспрессирующие рекомбинантный человеческий рецептор эндотелин-Б клетки K-1 яичника китайского хомячка (HERBA-B).

Мембраны получают из культивированных клеток путем лизиса клеток в холодном лизирующем буфере (5 ммоль 4-(2-гидроксиэтил)-1- пиперазин-этансульфокислоты, 2 ммоль этилендиаминтетрауксусной кислоты, значение pH составляет 7,4) и гомогенизации с помощью гомогенизатора Даунса "A". Гомогенат центрифугируют в течение двадцати минут при температуре 4^oC и с ускорением 30000 g. Осадки мембран после центрифугирования суспендируют в холодном буфере, содержащем 20 ммоль трис(гидроксиметил)аминометана, 2 ммоль этилендиаминтетрауксусной кислоты, 200 мкмоль Пефаблока, 10 мкмоль содержащего фосфор крахмала, 10 мкмоль лейпептина, 1 мкмоль пепстатина (значение pH составляет 7,4), и замораживают при температуре -80^oC до использования. Мембраны оттаивают и гомогенизируют с помощью политрона Бринкманна, затем разбавляют в буфере для ткани, содержащем 20 ммоль трис(гидроксиметил)аминометана, 2 ммоль этилендиаминтетрауксусной кислоты, 200 мкмоль Пефаблока и 100 мкмоль бацитрацина (значение pH составляет 7,4). Радиолиганд и конкурирующие лиганды получают в буфере для связывания, содержащем 20 ммоль трис(гидроксиметил)аминометана, 2 ммоль этилендиаминтетрауксусной кислоты и 0,1% бычьего сывороточного альбумина.

Испытания на конкурирующее связывание начинают с комбинирования мембран, [¹²⁵] -ЭТ-1 (40 пмоль) и конкурирующего лиганда в конечном объеме 250 мкл и инкубировании в течение двух часов при 37^oC. Испытание заканчивают фильтрацией через фильтры Ватман GF/B, которые предварительно пропитывают с помощью буфера, содержащего 50 ммоль трис(гидроксиметил)аминометана, 0,2% бычьего сывороточного альбумина и 100 мкмоль бацитрацина (значение pH составляет 7,4). Неспецифическое связывание определяют как связывание в присутствии 100 нмоль эндотелина-1.

Ингибирование ин витро стимулированного эндотелином-1 выделения арахидоновой кислоты (АКБ) в культивированных сосудистых гладкомышечных клетках кролика (эндотелин-А) с помощью соединений согласно изобретению Антагонистическую активность определяют по способности добавляемых соединений уменьшать стимулированное эндотелином выделение арахидоновой кислоты в культивированных гладкомышечных сосудистых клетках. Содержащей [³H]-арахидоновую кислоту средой является 1,2-диметоксиэтан /F 12+0,5% фетальной телячьей сыворотки г 0,25 мКи/мл [³H]-арахидоновой кислоты (Амерсхам). Конфлюэнтные монослои культивированных гладкомышечных сосудистых клеток почечной артерии кролика инкубируют в 0,5 мл вышеуказанной среды в течение восемнадцати часов при температуре 37^oC в присутствии 5% диоксида углерода. Среду отсасывают и клетки промывают один раз с помощью буфера для анализа (сбалансированный раствор солей Хэнка + 10 ммоль 4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфокислоты + 1 мг/мл не содержащего жирных кислот бычьего сывороточного альбумина) и инкубируют в течение пяти минут с 1 мл предварительно нагретого буфера для анализа. Этот раствор отсасывают, после чего добавляют 1 мл предварительно нагретого буфера для анализа и инкубируют далее в течение следующих пяти минут. Подобным образом проводят окончательную пятиминутную инкубацию. Повторяют ту же самую последовательность операций при включении 10 мкл испытуемого соединения (от 1 нмоль до 1 мкмоль) и 10 мкл эндотелина-1 (0,3 нмоль) и инкубацию продолжают в течение тридцати минут. Этот раствор затем собирают, добавляют 10 мл коктейля для сцинтилляционного счета и определяют количество [³H]-арахидоновой кислоты в сцинтилляционном счетчике.

Антагонизм ин витро стимулированной эндотелином-1 вазоконстрикции (VERA-А) в бедренной артерии кролика (эндотелин-А) и стимулированной сарафотоксином-6с вазоконстрикции в легочной артерии кролика (эндотелин-Б) Самцов новозеландских кроликов умерщвляют путем цервикального смещения и обескровливания. Бедренную и легочную артерии изолируют, очищают от соединительной ткани и разрезают на кольца по 4 мм шириной. Эндотелий денудируют путем помещения колец на гиподермическую трубку (размер 32 для бедренных колец и размер 28 для легочных колец; Смолл Парте Инк., Майями, Флорида) и осторожного их вращения. Денудированные кольца вносят в ванны для органов объемом 20 мл, содержащие бикарбонатный буфер Кребса (состав: 118,2 ммоль хлорида натрия; 24,8 ммоль гидрокарбоната натрия; 4,6 ммоль хлорида калия; 1,2 ммоль гептагидрата сульфата магния; 1,2 ммоль дигидрофосфата калия; дигидрат хлорида кальция; 0,026 ммоль динатрийкальциевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты; 10,0 ммоль декстрозы), которые поддерживают при температуре 37^oC и непрерывно насыщают кислородом с 5% диоксида углерода (значение pH составляет 7,4). Остающееся без изменений растяжение устанавливают при 3,0 г для бедренной и 4,0 г для легочной артерий; кольца оставляют в этом состоянии на 90 минут для уравновешивания. Кольца из сосудов испытывают на недостаток функционального эндотелия (то есть недостаток эндотелийзависимой релаксационной ответной реакции на карбахол (1,0 нмоль) в норэпинефрине (0,03 нмоль сжатых колец). Пептиды-агонисты, эндотелин-1 (бедренный) и S6c (легочный), совместно добавляют в десятиминутные интервалы. Антагонисты эндотелина добавляют за тридцать минут до введения агониста.

Представленные в таблице А данные демонстрируют активность в отношении связывания рецептора эндотелина характерных соединений согласно настоящему изобретению.

Соединения формулы (I) могут быть получены несколькими способами. Эти способы представлены на схемах с первой по двенадцатую и подробно иллюстрируются в относящемся к примерам разделе описания.

Схема 1 иллюстрирует методику, используемую для получения алкоксизамещенных сахаринов. 1,2-Бензизотиазол-3(2Н)-он (Burri K.F. [4 + 2] "Реакции присоединения с изотиазол-3(2Н)-он-1,1- диоксидом", Helv. Chim. Acta, 73, 69 - 80 (1990)) алкилируют с помощью алкилгалогенида, обычно пропилиодида, в присутствии основания, обычно карбоната цезия, в диполярном апротонном растворителе при комнатной температуре. В результате обработки кислотой, обычно трифторуксусной кислотой, при кипячении с обратным холодильником в течение нескольких дней получают промежуточный 6-пропилоксисахарин.

Схема 2 представляет собой методику получения соответствующим образом замещенных бензотиазиндиоксидов с помощью соответствующей о-аминобензойной кислоты. Диазотирование анилина в кислоте обычно осуществляют путем обработки водным раствором нитрита натрия. Затем добавляют диоксид серы и хлорид двухвалентной меди и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение нескольких дней, во время которых осаждается метиловый эфир о,о'-дитио-дибензойной кислоты (Meerwein, Chem. Ber., 90. 847 (1957)). Альтернативная методика получения замещенных о,о'-дитио-дибензойных кислот включает обработку диазотированной о-аминобензойной кислоты этилксантатом калия, основной гидролиз и окисление воздухом, как описано Katz L, Karger L.S., Scroeder W., Cohen M. , "Производные гидразина. I. Бензальтио- и бисбензальдитиосалицилгидразиды". J. Org. Chem., 18, 1380 - 1402 (1953). Дисульфид превращают в сульфонилхлорид путем обработки сульфурилхлоридом и нитратом калия при комнатной температуре (Park I. J., Shin Н.Н., Kim Y.H. "Пригодный одностадийный синтез сульфонилхлоридов из тиолов при использовании сульфурилхлорида и нитрата металла". Chem. Lett., 1483 - 1486 (1992)). Добавление метилового эфира аминоуксусной кислоты и основания, обычно триэтиламина, спустя несколько часов приводит к получению соответствующего сульфонамида. В результате обработки этого аддукта метилатом натрия в диметилформамиде и подкислении с помощью водного раствора хлороводорода получают целевой промежуточный бензотиазиндиоксид.

Схема 3 демонстрирует способ, используемый для превращения производного сахарина в соответствующий бензотиазиндиоксид. Производное сахарина N-алкилируют с помощью метилбромацетата в диметилформамиде при использовании гидрида натрия в качестве основания. Аддукт перегруппируют в соответствующий бензотиазиндиоксид путем обработки метилатом натрия в диметилформамиде при комнатной температуре.

В схеме 4 представлена альтернативная методика получения целевого промежуточного бензотиазиндиоксида. В этом случае обработка сульфонилхлорида с помощью соответствующим образом замещенного анилина приводит к получению сульфонамида, который после нагревания дает N-замещенный сахарин. В результате добавления метилхлорацетата и гидрида натрия получают промежуточный бензотиазиндиоксид.

Согласно схеме 5 промежуточный бензотиазиндиоксид бензилируют обычно с помощью (3,4-метилендиокси)бензилхлорида в диметилформамиде в присутствии основания, обычно гидрида натрия. N-Бензилированный аддукт обрабатывают ангидридом трифторметансульфокислоты и пиридином в дихлорметане при комнатной температуре в течение примерно одного часа. Этот промежуточный продукт прямо используют в последующих реакциях.

Схема 6 иллюстрирует методику, используемую для синтеза 4-арилсульфанилбензо-тиазиндиоксидов. Обычно к раствору винилтрифлата в диметилформамиде добавляют (3,4-метилендиокси)фенилтиолят. Аддукт выделяют путем хроматографии и омыляют с помощью водного раствора гидроксида лития.

На схеме 7 представлена методика, используемая для синтеза 4-арилбензотиазин-диоксидов. Обычно (3,4-метилендиокси)фенилборную кислоту вводят в реакцию сочетания в присутствии палладия с соответствующим винилтрифлатом. Аддукт выделяют путем хроматографии и омыляют с помощью водного раствора гидроксида лития.

На схеме 8 представлена методика дериватизации исходной бензотиазиндиоксид-3-карбоновой кислоты. Кислоту активируют с помощью карбодиимида, обычно 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид-гидрохлорида, и вводят в реакцию сочетания с сульфонамидом, получая соответствующий карбониларилсульфонамид. Подобным образом, в результате активации с помощью карбонилдиимидазола и добавления водного раствора аммиака получают соответствующий амид. Этот амид дегидратируют с помощью трихлорацетилхлорида и триэтиламина, получая соответствующий нитрил. Добавление азида натрия и хлорида аммония к нитрилу в диметилформамиде и выдерживание в течение нескольких часов при повышенной температуре, обычно при 100^oC, приводит к соответствующему тетразолу.

Схема 9 представляет собой альтернативную методику получения целевого бензотиазиндиоксида. В этом случае сахарин N-алкилируют путем добавления основания, обычно гидрида натрия, и добавления алкилирующего агента, обычно (3,4-метилендиокси)бензилхлорида. Расширение кольца путем добавления хлорметилацетата и гидрида натрия в диполярном апротонном растворителе, таком как диметилсульфоксид, приводит к N-алкилированному бензотиазиндиоксиду.

Схема 10 иллюстрирует альтернативную методику, используемую для получения замещенных сахаринов и, следовательно, соответствующего бензотиазиндиоксида. В этом случае получаемый орто-метилсульфонилхлорид выделяют после обработки исходного толуольного производного с помощью хлорсульфоновой кислоты. Окисления до соответствующей бензойной кислоты достигают с помощью водного раствора перманганата. Хлорангидрид и сульфонилхлорид кислоты получают после обработки с помощью пентахлорида фосфора. Добавление гидроксида аммония приводит к соответствующему сахарину.

В схеме 11 представлена методика, используемая для синтеза замещенного 2Н-1,2-бензотиазин-3-карбонитрил-4-гидрокси-1,1-диоксида, и последовательность стадий, необходимых для превращения в соединения формулы (I). В этом случае арилсульфонилхлорид превращают в сульфонамид цианоуксусной кислоты путем добавления аминоацетонитрила. Этот сульфонамид обрабатывают с помощью метилата натрия, получая целевой бензотиазиндиоксид после обработки кислотой (по поводу альтернативной методики см. "Производное 1,2-бензотиазина"; заявка на патент Испании 508671 авторов: Фоге Амброс, Рафаэль, Ортиз Хернандез, Жозе Альфонсо). Это промежуточное соединение бензилируют и дериватизируют, получая соответствующие 4-арильные и 4-арилсульфанильные продукты в вышеописанных условиях. Нитрил затем также гидролизуют, получая соответствующий амид и в конечном счете карбоновую кислоту. Тетразол получают путем взаимодействия с трибутилоловоазидом или хлоридом аммония и азидом натрия в диметилформамиде.

Схема 12 представляет собой методику получения бензоизотиазол-3-он-диоксидов, и, следовательно, соответствующих бензотиазиндиоксидов, путем окисления соответствующих 1,2-бензоизотиазол-3-онов (см. Bambas L.L. "Химия гетероциклических соединений"; Weissburger A. Willy - Interscience: Нью-Йорк, 4, 225 - 227 (1952); и Davis M., Adv. Heterocycl. Chem., 14, 43 (1972)). Реакция диазотированных о-аминобензойных кислот с этилксантатом калия с последующим гидролизом, обычно с помощью гидроксида калия, и окисление, обычно с помощью иода, приводит к соответствующей 2,2'-дитиосалициловой кислоте. В результате добавления тионилхлорида и метилового эфира аминоуксусной кислоты получают соответствующий амид, который циклизуют до 1,2-бензотиазол-3-она. Окисление 1,2-бензоизотиазол-3-она до бензоизотиазол-3-он-1,1-диоксида осуществляют с помощью надуксусной кислоты (Giadi F. и др., Farmaco Ed. Sci., 16, 509 - 526 (1961)).

В схемах, приведенных в конце текста, используют следующие условные сокращения: Ar - арил ДМСО - диметилсульфоксид ДМФА - диметилформамид КДИ - карбонилдиимидазол КТ - комнатная температура ТГФ - тетрагидрофуран ТФУК - тетрафторуксусная кислота WSCD - 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид Соединения согласно настоящему изобретению можно получать и вводить в виде разнообразных пероральных и парентеральных готовых лекарственных форм. Так, соединения согласно настоящему изобретению можно вводить путем инъекции внутривенно, внутримышечно, внутрикожно, подкожно, интрадуоденально или интраперитонеально. Соединения согласно настоящему изобретению также можно вводить путем ингаляции, например, в нос. Дополнительно, соединения согласно настоящему изобретению можно вводить чрескожно. Специалисту в данной области известно, что нижеуказанные готовые лекарственные формы могут содержать в качестве активного компонента или соединение формулы (I) или соответствующую, фармацевтически приемлемую соль соединения формулы (I).

Используемые для получения фармацевтических композиций из соединений согласно настоящему изобретению фармацевтически приемлемые носители могут быть или твердыми или жидкими. Твердые лекарственные формы включают порошки, таблетки, пилюли, капсулы, облатки, суппозитории и диспергирующиеся гранулы. Твердый носитель может представлять собой одно или более веществ, которые также могут служить как разбавители, вкусовые добавки, связующие, консерванты, дезинтеграторы таблеток или инкапсулирующий материал.

В порошках носитель представляет собой тонко измельченное твердое вещество, которое смешано с тонко измельченным активным компонентом.

В таблетках активный компонент смешан с носителем, обладающим необходимыми связывающими свойствами, в соответствующих пропорциях и спрессован в виде желательной формы и размера.

Порошки и таблетки предпочтительно содержат примерно от пяти или десяти до примерно семидесяти процентов активного соединения.

Пригодными носителями являются карбонат магния, стеарат магния, тальк, сахар, лактоза, пектин, декстрин, крахмал, желатина, трагакант, метилцеллюлоза, натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы, низкоплавкие воски, масло какао и тому подобные. Термин "лекарственная форма" означает готовую лекарственную форму активного соединения с инкапсулирующим материалом в качестве носителя, обеспечивающим образование капсулы, в которой активный компонент, с другими носителями или без них, окружен носителем, находясь таким образом в ассоциации с ним. То же самое относится к облаткам и пастилкам. Таблетки, порошки, капсулы, пилюли, облатки и пастилки могут быть использованы в качестве твердых лекарственных форм, пригодных для перорального введения.

Для получения суппозиториев, низкоплавкий воск, такой как смесь глицеридов жирных кислот или масло какао, сначала расплавляют и путем перемешивания в этом расплаве гомогенно диспергируют активный компонент. Однородную расплавленную смесь затем разливают в формы пригодного размера, оставляют охлаждаться и таким образом отверждаться.

Жидкие лекарственные формы представляют собой растворы, суспензии и эмульсии, например, на основе воды или водных растворов пропиленгликоля. Жидкие лекарственные формы для парентеральной инъекции могут находиться в виде раствора в водном растворе полиэтиленгликоля.

Пригодными для перорального использования водные растворы можно получать путем растворения активного компонента в воде и добавления, если желательно, пригодных красителей, вкусовых ароматизирующих веществ, стабилизаторов и загустителей.

Пригодные для перорального использования водные суспензии можно получать путем диспергирования тонко измельченного активного компонента в воде с вязким веществом, таким как природные или синтетические камеди, смолы, метилцеллюлоза, натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы и другие, хорошо известные суспендирующие агенты.

Также пригодны твердые лекарственные формы, которые предназначены для превращения непосредственно перед употреблением в жидкие лекарственные формы для перорального введения. Такие жидкие формы включают растворы, суспензии и эмульсии. Эти лекарственные формы могут содержать, кроме активного компонента, красители, вкусовые ароматизирующие вещества, стабилизаторы, буферы, синтетические или природные подслащивающие вещества, диспергаторы, загустители, солюбилизирующие агенты и тому подобные.

Лекарственная форма предпочтительно находится в виде разовой дозы. В таком виде лекарственная форма разделена на разовые дозы, содержащие соответствующие количества активного компонента. Разовая доза может находиться в упаковке, причем упаковка содержит отдельные количества лекарственной формы, такие как таблетки, капсулы и порошки, упакованные во флаконы или ампулы. Разовая доза также само по себе может быть капсулой, пластинкой, облаткой или пастилкой, или она может представлять собой соответствующее количество любых из них в упаковке.

Количество активного компонента в разовой дозе лекарственной формы можно изменять или устанавливать от 0,1 мг до 100 мг, предпочтительно от 0,5 мг до 100 мг, в соответствии с конкретным употреблением и эффективностью активного компонента. Если желательно, композиция также может содержать другие, терапевтически приемлемые агенты.

При применении в терапии в качестве антагонистов эндотелина, используемые в способе лечения фармацевтическим путем согласно настоящему изобретению соединения вводят в начальной дозе примерно от 0,01 мг до примерно 100 мг/кг в день. Предпочтительным является диапазон суточной дозы примерно от 0,01 мг до примерно 10 мг/кг. Однако дозы можно изменять в зависимости от потребности пациента, тяжести излечиваемого состояния и используемого соединения. Надлежащую дозу в конкретном случае определяет врач. Обычно лечение начинают с небольших доз, которые меньше, чем оптимальная доза соединения. Затем дозу увеличивают путем небольших повышений вплоть до достижения оптимального эффекта при данных обстоятельствах. Для удобства, если желательно, суточная доза может быть разделена и вводиться частями в течение дня.

Получение производных диоксида бензотиазина вышеприведенной формулы (I) иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1 Метиловый эфир 1,2-бензо-3Н-изотиазол-1,1-диоксид-3-оксо-2-уксусной кислоты К раствору 40 г (0,218 моль) сахарина в 100 мл диметилформамида при температуре 0^oC добавляют 8,73 г (0,218 моль) гидрида натрия (60%-ная дисперсия в масле). Спустя пятнадцать минут добавляют 20,7 мл (0,218 моль) метилбромацетата и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение восемнадцати часов. Затем разбавляют с помощью 250 мл дихлорметана и промывают двукратно по 180 мл насыщенным раствором гидрокарбоната натрия, 100 мл воды, двукратно по 150 мл насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органическую фазу сушат над сульфатом магния, растворитель удаляют в вакууме и продукт кристаллизуют из горячего этанола, получая 36,3 г (65%) целевого соединения.

Анализ для C₁₀H₉NO₅S: рассчитано, % C 47,06 H 3,55 N 5,49 найдено, % 47,02 3,68 5,37 Масс-спектр (химическая ионизация): м/е 256; Пример 2 Метиловый эфир 4-гидрокси-1,1-диоксо-1,2-дигидро-1⁶-бензо[e][1,2]тиазин-3-карбоновой кислоты К 100 мл метанола порциями добавляют 5,4 г (0,23 моль) натрия. После растворения всего натрия раствор концентрируют в вакууме и следовые количества метанола удаляют в высоком вакууме. Метилат натрия суспендируют в 65 мл безводного диметилформамида. 20 г (0,078 моль) Метилового эфира 1,2-бензо-3Н-изотиазол-1,1- диоксид-3-оксо-2-уксусной кислоты растворяют в 30 мл диметилформамида, охлаждают до температуры 0^oC и в течение семи минут добавляют свежеприготовленную суспензию метилата натрия. Раствор перемешивают в течение тридцати минут при температуре 0^oC, затем через воронку к реакционной смеси добавляют 430 мл 1 н. соляной кислоты, выпавший осадок отделяют и промывают водой. Осадок высушивают в вакууме при температуре 52^oC в течение ночи, получая 13,6 г (68 %) целевого соединения.

Анализ для C₁₀H₉NO₅S: рассчитано, % C 47,06 H 3,55 N 5,49 найдено, % 47,11 3,67 5,16 Масс-спектр (химическая ионизация): м/е 256; Пример 3 Метиловый эфир 2-бензо[1,3]диоксол-5-ил-метил-4- гидрокси-1,1-диоксо-1,2-дигидро-1⁶-бензо[e][1,2]тиазин-3- карбоновой кислоты К 1,48 г (5,84 ммоль) метилового эфира 4-гидрокси-1,1-диоксо- 1,2-дигидро-1⁶-бензо[e] [1,2]тиазин-3-карбоновой кислоты в 10 мл диметилформамида добавляют 0,257 г (6,4 ммоль) гидрида натрия (60%-ная дисперсия в масле) и смесь перемешивают в течение пяти минут, после чего добавляют 2,2 г (6,4 ммоль) 3,4-метилендиоксибензилхлорида в дихлорметане (концентрация 50 мас.%) и смесь перемешивают в течение восемнадцати часов при комнатной температуре. Разбавляют с помощью 100 мл этилацетата