Синтетические полисахариды, способ их получения и содержащая их фармацевтическая композиция

Синтетические полисахариды, способ их получения и содержащая их фармацевтическая композиция

Реферат

 

Описываются новые синтетические полисахариды общей формулы I, где волнистая линия означает связь, расположенную либо выше, либо ниже плоскости пиранозного цикла; формула II означает полисахарид Ро, содержащий n одинаковых или разных моносахаридных единиц, связанный своим аномерным углеродом с Ре; формула III представляет собой схематическое изображение моносахаридного остатка с пиранозной структурой, выбираемого среди гексоз, причем этот остаток связан своим аномерным углеродом с другим моносахаридным остатком и гидроксильные группы этого остатка замещены одинаковыми или разными группами Х, выбираемыми среди (C₁-C₆)-алкильных групп и сульфогрупп; h = 2, n означает целое число от 10 до 25; Ре означает пентасахарид структуры IV, где R₁ означает (C₁-C₆)-алкильную группу или сульфогруппу; R₁a имеет указанное для R₁ значение, или с атомом кислорода, с которым он связан, и с атомом углерода, содержащим карбоксильную функцию в одном и том же цикле, образует группу С-СН₂-О; R означает (C₁-C₆)-алкильную группу; W означает атом кислорода или метиленовую группу, или одна из его солей, в частности фармацевтически приемлемая соль. Новые синтетические полисахариды обладают антикоагулянтной и антитромботической фармакологическими активностями гепарина. Описывается также способ их получения и содержащая их фармацевтическая композиция. 4 с. и 11 з. п. ф-лы, 4 табл.

Изобретение относится к новым синтетическим полисахаридам, обладающим ангикоагулянтной и антитромботической фармакологическими активностями гепарина. Гепарин относится к семейству гликозаминогликанов (GAGs), которые представляют собой природные гетерогенные сульфатированные полисахариды.

Гепариновые препараты представляют собой смеси цепей, включающих число моносахаридных остатков от 10 до 100 и более. К этой гетерогенности размера добавляется гетерогенность структуры на уровне природы конститутивных моносахаридов, а также на уровне имеющихся у них заместителей (L. Roden "Биохимия гликопротеинов и гликозаминогликанов", изд. Lennarz W.J., Plenum Press, Нью-Йорк и Лондон, 267-371, 1980).

Каждое семейство природных GAGs обычно обладает спектром фармакологических активностей. Все они находятся в препаратах, которые можно получать из природных продуктов. Так, например, сульфатированные гепарины и гепараны обладают антитромботической активностью, которая связана с одновременным воздействием на несколько факторов коагуляции.

Гепарин катализирует, особенно через антитромбин III (AT III), ингибирование двух ферментов, которые принимают участие в каскаде коагуляции крови, а именно фактора Ха и фактора IIa (или тромбина). Гепариновые препараты с низкой молекулярной массой (НВРМ) содержат цепи из 4-30 моносахаридов и обладают свойством более селективно воздействовать на фактор Ха, чем на тромбин.

Некоторые синтетические олигосахариды, в частности те, которые описаны в европейском патенте 84999, обладают свойством селективно ингибировать, через антитромбин III, фактор Ха без всякого воздействия на тромбин.

Известно, что ингибирование фактора Ха требует фиксации гепарина на AT III через домен связывания с антитромбином (DLA) и что ингибирование фактора IIa (тромбина) вызывает необходимость фиксации на AT (III) через DLA, а также на тромбине через менее определенный домен связывания (DLT).

Синтетические олигосахариды, соответствующие домену DLA гепарина, известны и проявляют антитромботическую активность при венозном тромбозе. Эти соединения описываются в европейских патентах 529715 и 621282 и в патенте Канады 2040905.

Эффективность этих олигосахаридов в отношении предупреждения артериального тромбоза тем не менее ограничена их неспособностью ингибировать тромбин.

Синтез гликозаминогликанов гепаринового типа, способных ингибировать тромбин через активатор AT (III), связан с большими трудностями и, фактически, он никогда не был осуществлен.

С целью выявления активности продуктов, являющихся ингибиторами тромбина и фактора Ха, было предложено связывать два олигосахарида маленького размера (DLA и DLT) с помощью остатка ("спейсера"), не участвующего в биологической активности.

В настоящее время найдено, что новые полисахаридные производные могут быть синтезированы относительно простым образом и при этом они являются биологически активными. В частности, они обладают антикоагулянтными и антитромботическими свойствами. Более того, в связи с получением синтетическим путем этих полисахаридов, можно селективно модифицировать их структуру и, в особенности, удалять нежелательные сульфатные заместители, принимающие участие во взаимодействии с некоторыми протеинами. Таким образом, можно получать полисахариды, которые являются эффективными антитромботическими и антикоагулянтными агентами и, кроме того, могут ин виво не подвергаться воздействию протеинов, таких как тромбоцитарный фактор 4 (FP4), которые нейтрализуют воздействие гепарина, в частности, на тромбин.

Таким образом, неожиданно найдено, что сульфатированные и алкилированные полисахариды могут быть эффективными антитромботическими агентами и антикоагулянтами в зависимости от положения алкильных групп и сульфатных групп, имеющихся в глицидном скелете.

Таким образом, найдено, что с помощью синтеза полисахаридных последовательностей можно с точностью модулировать активности типа GAGs и получать очень активные продукты, обладающие свойствами гепарина.

Таким образом, согласно одному из его аспектов, настоящее изобретение относится к новому синтетическому полисахариду, включающему домен связывания с антитромбином III, образованный последовательностью из пяти моносахаридов, содержащих в целом две карбоксильные функции и по крайней мере четыре сульфатные группы, причем этот домен своим невосстанавливающим концом непосредственно связан с доменом связывания с тромбином, включающим последовательность из 10-25 моносахаридных остатков, выбираемых среди гексоз, пентоз и дезоксисахаров, все гидроксильные группы которых, независимо друг от друга, превращены в простые эфирные группы с помощью (C₁-C₆)-алкильной группы или этерифицированы до сложноэфирных групп в сульфатной форме; а также к его солям, в частности фармацевтически приемлемым солям.

Предпочтительно изобретение относится к полисахариду, указанному выше, отличающемуся тем, что все его гидроксильные группы метилированы или этерифицированы до сложноэфирных групп в сульфатной форме, и его солям, в частности к фармацевтически приемлемым солям.

Продуктами настоящего изобретения являются, в частности, полисахариды, представленные следующей формулой (I): в которой - волнистая линия - означает связь, расположенную либо выше, либо ниже плоскости пиранозного цикла, означает полисахарид Po, содержащий n одинаковых или разных моносахаридных остатков, связанный своим аномерным углеродом с Pe; представляет собой схематическое изображение моносахаридного остатка с пиранозной структурой, выбираемого среди гексоз, причем этот остаток связан своим аномерным углеродом с другим моносахаридным остатком и гидроксильные группы этого остатка замещены одинаковыми или разными группами X, выбираемыми среди (C₁-C₆)-алкильных групп и сульфогрупп; h равно 2, - n означает целое число от 10 до 25; - Ре означает пентасахарид структуры: где R₁ означает (C₁-C₆)-алкильную группу или сульфогруппу; R₁a имеет указанное для R₁ значение или с атомом кислорода, с которым он связан, и атомом углерода, содержащим карбоксильную функцию, в одном и том же цикле образует группу C-CH₂-O; - R означает (C₁-C₆) -алкильную группу; - W означает атом кислорода или метиленовую группу; или одна из их солей, в частности фармацевтически приемлемая соль.

Следует заметить, что в настоящем описании волнистая линия означает обычно связь, расположенную либо ниже, либо выше плоскости пиранозного цикла.

Содержащиеся в Po моносахариды могут быть одинаковыми или разными одни по отношению к другим, межгликозидные связи могут быть типа или . Эти моносахариды предпочтительно выбирают среди D- или L-гексоз, как аллоза, альтроза, глюкоза, манноза, галоза, идоза, галактоза, талоза (в это случае h = 2), или среди D- или L-пентоз, как рибоза, арабиноза, ксилоза, ликсоза (в этом случае h = 2). Могут быть также использованы другие моносахариды, такие как, например, дезоксисахара (h = 1 и/или CH₂OX = CH₃).

Когда в пентасахаридах Pe остаток W означает атом кислорода и R₁a имеет указанное для R₁ значение, эти пентасахариды представляют собой известные соединения, описанные, в частности, в европейских патентах 300099, 529715, 621282 и 649854, а также в литературе. Их получают из синтонов, также описанных в литературе (согласно С.Van Boeckel, M.Petitou, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 32 1671- 1690 (1993)).

Когда в пентасахаридах Pe R₁a имеет отличное от R₁ значение и/или W означает атом углерода, эти пентасахариды получают с помощью новых синтонов, которые составляют дальнейший аспект изобретения.

Когда в пентасахаридах Pe остаток типа L-идуроновой кислоты заменен остатком, конформация которого блокирована мостиком, эти пентасахариды получают с помощью новых синтонов, которые составляют дальнейший аспект изобретения.

Таким образом, согласно другому из его аспектов, настоящее изобретение относится к новым промежуточным продуктам, пригодным для получения соединений формулы (I).

Полисахаридная часть Po может быть образована 10-25 алкилированными и ди- или трисульфатированными моносахаридными остатками.

Полисахаридная часть Po может быть образована 10-25 алкилированными и моно- или дисульфатированными моносахаридными остатками.

Полисахаридная часть Po может быть образована 10-25 алкилированными, незамещенными и/или частично замещенными и/или полностью замещенными моносахаридными остатками.

Замещенные или незамещенные остатки могут располагаться вдоль всей цепи или, напротив, они могут быть сгруппированы в замещенных или незамещенных сахаридных доменах.

Связи могут быть типа 1,2; 1,3; 1,4; 1,5; 1,6; и типа или . В настоящем описании дается обозначение конформаций: ¹С₄ для L-идуроновой кислоты, ⁴С₁ для D-глюкуроновой кислоты, однако следует заметить, что обычно конформация в растворе моносахаридных остатков является изменчивой.

Так, L-идуроновая кислота может иметь конформацию ¹С₄ ²S₀ или ⁴C₁.

Предпочтительными согласно изобретению соединениями являются соединения формулы (I.A): где означает особое семейство полисахаридов Po, связанных своим аномерным углеродом с Pe, указанным в формуле (I); имеет указанное для формулы (I) значение, - OX имеют указанное для формулы (I) значение и в случае одного и того же моносахарида могут быть одинаковыми или разными; - моносахариды, содержащиеся в [ ]_m, образуют повторяющийся m раз дисахарид; моносахариды, содержащиеся в [ ]_t образуют повторяющийся t раз дисахарид; - m изменяется от 1 до 8; t изменяется от 0 до 5 и p изменяется от 0 до 1 при условии, что 5 m + t 12; и их соли, в частности фармацевтически приемлемые соли.

Предпочтительными соединениями являются соли, анион которых отвечает формуле (I.1): в которой t означает 5, 6 или 7, а катионом является фармацевтически приемлемый одновалентный катион, а также соответствующие кислоты.

Также предпочтительными являются соли, анион которых отвечает формуле (I.2): в которой t означает 5, 6 или 7, а катионом является фармацевтически приемлемый одновалентный катион; а также соответствующие кислоты.

Особенно предпочтительными являются соли, анион которых отвечает формуле (I.3): в которой m означает 1, 2 или 3 и t означает 2, 3, 4 или 5, и катионом является фармацевтически приемлемый одновалентный катион; а также соответствующие кислоты.

Другими предпочтительными согласно изобретению соединениями являются соединения формулы (II. A): в которых означает особое семейство полисахаридов Po, связанных своим аномерным углеродом с Pe, указанным в формуле (I); имеет указанное в формуле (I) значение; - OX имеют указанное в формуле (I) значение и в случае одного и того же моносахарида могут быть одинаковыми или разными; - моносахарид, содержащийся в [ ]_m, повторяется m' раз; мононосахарид, содержащийся в [ ]_t, повторяется t' раз; моносахарид, содержащийся в [ ]_p, повторяется p' раз; - m' изменяется от 1 до 5; t' изменяется от 0 до 24 и p' изменяется от 0 до 24 при условии, что 10 m' + t' + p' 25; и их соли, в частности фармацевтически приемлемые соли.

Предпочтительными согласно изобретению солями являются такие соли, катион которых выбирают среди катионов щелочных металлов, и еще более предпочтительны такие, катионом которых является Na⁺ или К⁺.

Особенно предпочтительными являются следующие полисахариды: -метил-O-(3-О-метил-2,4,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-[O-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)]₄-O-(2,3-ди-O-метил- 6-O-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозилуроновая кислота)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3-ди-O-метил- -L-идопиранозилуроновая кислота) -(1--->4)-2,3,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозид в виде натриевой соли; - метил-О-(3-О-метил-2,4,6- три-О-сульфо--D- глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(3-О-метил-2,6-ди- О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-[О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(3-О-метил-2,6- ди-О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)]₅-O-(2,3-ди-О-метил -6-О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3-ди-О-метил--D- глюкопиранозилуроновая кислота) -(1--->4)-O-(2,3,6-три-О-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3-ди-O-метил- -L-идопиранозилуроновая кислота) -(1--->4)-2,3,6-тpи-O-cульфo- -D-глюкoпиpaнoзид в виде натриевой соли; - метил-О-(3-О-метил-2,4,6 -три-О-сульфо--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-[О-(3-О-метил-2,6-ди-О -сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(3-О-метил-2,6 -ди-О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)]₆-O-(2,3-ди-О-метил -6-О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(2,3-ди-О- метил--D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-О-(2,3,6 -три-О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3-ди-O-метил--L- идопиранозилуроновая кислота) -(1--->4)-2,3,6-тpи-O-cульфo- -D-глюкoпиpaниoзид в виде натриевой соли; - метил-O-(2,3-ди-О-метил-4,6 -ди-О-сульфо--D- глюкопиранозил) (1--->4)-[O-(2,3-ди-О-метил -6-О-сульфо--D- глюкопиранозил)- (1--->4)]₁₁-O-(2,3-ди-О-метил- -D- глюкопиранозилуроновая кислота)- (1--->4)-О-(2,3,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3-ди-O-мeтил- -L-идoпиpaнoзилуpoнoвaя кислота) -(1--->4)-2,3,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозид в виде натриевой соли; - метил-О-(2,3-ди-О-метил-4,6- ди-О-сульфо--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-[О- (2,3-ди-О-метил-6-О-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)]₁₃-O-(2,3-ди-О-метил- -D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-О-(2,3,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3-ди-O-метил- -L-идопиранозилуроновая кислота)- (1--->4)-2,3,6-три-О-сульфо- -D-глюкопиранозид в виде натриевой соли; - метил-О-(2,3-ди-О-метил-4,6-ди- О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-[О-(2,3-ди-О-метил -6-О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)]₁₅-O-(2,3-ди-О-метил--D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-О-(2,3,6-три-О-сульфо--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3-ди-O -метил--L-идопиранозилуроновая кислота) -(1--->4)-2,3,6-три -O-сульфо--B-глюкопиранозид в виде натриевой соли; - метил-О-(3-О-метил-2,4,6-три -О-сульфо--D- глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(3-O-метил-2,6 -ди-О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-[О-(3-О-метил-2,6 -ди-О-сульфо--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-О-(3-О-метил-2,6 -ди-О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)] ₂-[О-(2,3,6-три -О-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(2,3,6-три -О-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)] ₂-O-(2,3-ди-О-метил -6-О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3-ди -O-метил--D-глюкопиранозилуроновая кислота)- (1--->4)-O-(2,3,6-тpи -O-cульфo--D-глюкoпиpaнoзил) - (1--->4)-(2,3-ди-O-метил- -L-идопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-2,3,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозид в виде натриевой соли; - метил-О-(3-О-метил-2,4,6-три -О-сульфо--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -O-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-[О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)] ₂-[O-(2,3,6-три -O-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(2,3,6-три -О-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)] ₃-О-(2,3-ди-О-метил-6 -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(2,3-ди-О-метил- -D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-О-(2,3,6-три -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-(2,3-ди-O-метил- -L-идопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-2,3,6-три -О-сульфо--D-глюкопиранозид в виде натриевой соли; - метил-О-(3-О-метил-2,4,6-три -О-сульфо--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-[О-(2,3,6-три -О-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3,6-три -О-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)]₄-O-(2,3-ди-О-метил-6 -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3-ди-О-метил- -D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-О-(2,3,6-три-О- сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-(2,3-ди-О-метил--L- идопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-2,3,6-три -O-сульфо--D-глюкопиранозид в виде натриевой соли; - метил-О-(3-О-метил-2,4,6-три -О-сульфо--D-гликопиранозил)- (1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил) - (1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-[О-(2,3,6-три-О-метил- -D-глюкопиранозил) - (1--->4)-О-(2,3,6-три-О-метил- -D-глюкопиранозил) - (1--->4)] ₃-О-(2,3-ди-О-метил-6-О-сульфо- -D-глюкопиранозил) - (1--->4)-О-(2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозилуроновая кислота) - (1--->4)-О-(2,3,6-три -О-сульфо--D-глюкопиранозил) - (1--->4)-(2,3-ди-О-метил--L- идопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-2,3,6-три -O-сульфо--D-глюкопиранозид в виде натриевой соли; - метил-О-(3-О-метил-2,4,6-три -О-сульфо--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-[О-(2,3,6-три -О-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(2,3,6-три -O-метил--D-глюкопиранозил) - (1--->4)]₄-O-(2,3-ди-О-метил-6 -O-сульфо--D-глюкопиранозил) - (1--->4)-O-(2,3-ди -O-метил--D-глюкопиранозилуроновая кислота)- (1--->4)-О-(2,3,6-три -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-(2,3-ди -О-метил--L-идопиранозилуроновая кислота) -(1--->4)-2,3,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозид в виде натриевой соли; - метил-О-(3-О-метил-2,4,6-три-О-сульфо- -D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(D-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-[О-(2,3,6-три-О-метил- -О-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)] ₅-O-(2,3-ди-O-метил-6-O-сульфо- -D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(2,3-ди-О-метил- -D-глюкопиранозилуроновая кислота) -(1--->4)-О-(2,3,6-три-О-сульфо- -D-глюкопиранозил) -(1--->4)-(2,3-ди-О-метил- -L-идопиранозилуроновая кислота) -(1--->4)-2,3,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозид в виде натриевой соли.

Настоящее изобретение также относится к способу получения соединений формулы (I), заключающемуся в том, что на первой стадии синтезируют полностью защищенный предшественник целевого полисахарида формулы (I), содержащий защищенный предшественник домена Pe (этот домен представлен в схеме 1 (см. в конце описания)), удлиненный на своем невосстанавливающем конце защищенным предшественником сульфатированного полисахарида Po, затем, во второй стадии, вводят и/или удаляют отрицательно заряженные группы.

С одной стороны, можно использовать полностью защищенный предшественник тетрасахаридной части EFGH пентасахарида. Затем добавляют полисахарид Po, который содержит на своем восстанавливающем конце отсутствующий остаток D пентасахарида Pe, с целью получения, после сочетания, полной области DLA, которая таким образом восстанавливается.

С другой стороны, можно использовать полностью защищенный предшественник дисахаридной части GH пентасахарида. Затем добавляют полисахарид Po, предшественник DLT, который содержит на своем восстанавливающем конце отсутствующий остаток DEF пентасахарида Pe, с целью получения, после сочетания, полной области DLA, которая таким образом восстанавливается.

Синтез этих предшественников Pe осуществляют как указано выше, исходя из синтонов, описанных в литературе или составляющих часть настоящего изобретения. Синтез полисахаридной части предшественника Po осуществляют согласно хорошо известным специалисту реакциям, используя способы синтеза олигосахаридов (G. J. Boons, Tetrahedron, 52, 1095-1121 (1996)) или олигосахарид, когда олигосахарид, являющийся донором гликозидной связи, сочетают с олигосахаридом, являющимся акцептором гликозидной связи, с целью получения другого олигосахарида, размер которого равен сумме величин двух реакционноспособных видов олигосахаридов.

Эту последовательность повторяют вплоть до получения целевого соединения формулы (I). Природа и профиль замещения конечного целевого соединения определяются природой остатков химических соединений, используемых в различных стадиях синтеза, согласно хорошо известным специалисту правилам.

Предпочтительный способ получения предшественников Po согласно настоящему изобретению представлен в схеме 2 (см. в конце описания).

Под временным понимают заместитель, сохраняющийся в течение ограниченного числа стадий; под полупостоянным понимают заместитель, сохраняющийся в течение гораздо большего числа стадий; и под постоянным понимают заместитель, сохраняющийся вплоть до конца синтеза; постоянные заместители удаляют во время последней стадии. Некоторые постоянные группы могут составлять часть конечной молекулы.

В схеме 2 (а) означает моносахарид, являющийся донором гликозидной связи, в котором Z означает временную защитную группу гидроксильной функции и Y означает активатор аномерного углерода, Tn, одинаковые или разные, означают временные, полупостоянные или постоянные заместители всех других гидроксильных функций.

Соединение (b), содержащее незамещенную гидроксильную группу, представляет собой моносахарид, являющийся акцептором гликозидной связи, в котором Tn, одинаковые или разные, представляют собой временные, полупостоянные или постоянные заместители гидроксильных групп. T₁ означает временную, полупостоянную или постоянную защитную группу в аномерном положении, которую удаляют, когда хотят активировать аномерный углерод.

С целью получения соединений согласно изобретению донор гликозидной связи (а) вводят во взаимодействие с акцептором гликозидной связи (b) с получением дисахарида (с).

Вышеполученный дисахарид (с) специфически превращают в дисахарид (d), являющийся донором гликозидной связи, путем удаления T₁ и введения Y и/или в акцептор гликозидной связи (е) путем удаления Z. Затем донор гликозидной связи (d) вводят во взаимодействие с акцептором гликозидной связи (е) с получением тетрасахарида (f), в котором t означает 1. Повторение этой последовательности реакций приводит к олиго- или полисахариду (f), в котором t больше 1.

Используя представленный в схеме 2 способ, также можно получать большое разнообразие полностью защищенных олиго- или полисахаридов, как (g), в котором олигосахариды [ ] _m и [ ]_t представляют собой полностью защищенные предшественники различным образом замещенных доменов соединений согласно изобретению.

На следующей стадии способа соединения (f) и (g) превращают в доноры гликозидной связи и сочетают с невосстанавливающим концевым остатком полностью защищенных предшественников Pe.

Как было указано выше, олигосахарид концевого невосстанавливающего остатка полисахарида (g), являющегося донором гликозидной связи, может образовывать часть Pe, в случае, когда (g) соединился с концевым невосстанавливающим остатком полностью защищенного олигосахарида, который является предшественником остатка структуры Pe.

Соединения согласно изобретению получают из их полностью защищенных полисахаридных предшественников, используя следующую последовательность реакций: - спиртовые функции превращают в O-сульфогруппу и в карбоновых кислотах отщепляют защитные группы путем удаления групп Tn, используемых для защиты во время получения основной структуры, затем - вводят сульфогруппы.

Соединения согласно изобретению, естественно, могут быть получены при использовании различных, известных специалисту путей синтеза олигосахаридов.

Вышеописанный способ представляет собой предпочтительный способ согласно изобретению. Однако соединения формулы (I) могут быть получены другими, хорошо известными в химии сахаров способами, описанными, например, в книге P. M. Collins и R.J. Ferrier "Моносахариды, их химия и их роль в природных продуктах, изд. J. Wiley and Sons, 1995 г., и G.J. Boons, Tetrahedron, 52, 1095-1121 (1996).

Предшественник части пентасахарида Pe, когда W означает атом кислорода и R₁a означает R₁, получают согласно способам синтеза олигосахаридов и особенно согласно способам, описанным в европейских патентах 84999, 301618, 454220 и 529715 и в заявках на европейские патенты 9304769 и 94202470. Когда осуществляют полную защиту, то можно, используя соответствующие защитные группы, получать свободную гидроксильную группу в положении 4 невосстанавливающего концевого остатка (D). Полностью защищенный предшественник Pe тогда сочетают по этому положению, используя известные методы синтеза олигосахаридов.

Пентасахарид Pe, в котором W означает атом углерода и R₁a означает R₁, формулы (II): в которой R и R₁ имеют указанное для формулы (I) значение, получают из синтона формулы (II.1): в которой T₁ и Tn одинаковые или разные, означают временный, полупостоянный или постоянный заместитель; Z означает защитную группу гидроксильной функции, причем сам синтон получают путем синтеза, осуществляемого путем радикальной реакции между моносахаридом, являющимся генератором свободных радикалов, и моносахаридом, содержащим двойную связь, превращая затем таким образом полученный C-дисахарид в синтон формулы (II.1) классическими способами, описанными выше, согласно С. Van Boeckel, М. Petitou.

Синтон формулы (II.1), особенно пригодный для синтеза соединений формулы (II), отвечает формуле (II.1): Этот синтон получают согласно реакционной схеме 22, приведенной в конце описания.

Пентасахарид Pe, в котором фигурирует заместитель R₁a, который включает остаток L-идуроновой кислоты блокированной конфигурации формулы (III) в которой R и R₁ имеют указанные для формулы (I) значения и W означает атом кислорода, получают из синтона формулы (III.1) в которой T₁ и Tn, одинаковые или разные, означают временный, полупостоянный или постоянный заместитель; Z означает защитную группу гидроксильной функции, причем сам синтон получают путем синтеза, осуществляемого согласно способам, описанным в литературе: М.К. Gurjar и др., Tetrahedron letters, 36, 11, 1937-1940, 1933-1936 (1995), и 35, 14, 2241-2244 (1994).

Синтон формулы (III.1), особенно пригодный для синтеза соединений формулы (III), отвечает формуле (III.1) Этот синтон получают согласно реакционной схеме 34, приведенной в конце описания.

Промежуточные соединения формул (II. 1) и (III.1) представляют собой новые промежуточные продукты, особенно пригодные для получения соединений формулы (I) согласно изобретению.

Пентасахариды Pe, следовательно, могут быть получены из этих дисахаридных синтонов формулы (II.1) или (III.1) согласно способу, описанному в публикации С.A.A. Van Boeckel и М.Petitou, Angew. Chem.Int.Ed.Engl, цитированной выше.

Под используемыми выше полупостоянными группами понимают группы, удаляемые в первую очередь после реакций гликозилирования, когда глицидный скелет содержит число желаемых звеньев, без удаления или изменения других присутствующих групп, что позволяет затем вводить желаемые функциональные группы в положения, которые занимали эти полупостоянные группы.

Постоянными группами являются группы, способные сохранять защиту гидроксильных функций во время введения функциональных групп вместо полупостоянных групп.

Эти группы выбирают среди таких групп, которые совместимы с функциональными группами, введенными после удаления полупостоянных групп. Кроме того, речь идет о группах, инертных по отношению к реакциям, осуществляемым для введения этих функциональных групп, и которые легко удаляются без изменения этих функциональных групп.

Согласно изобретению постоянными группами предпочтительно являются алкильные группы с 1-6 атомами углерода.

В качестве примера полупостоянной и/или временной группы можно назвать бензильную и ацетильную, левулинильную, п-метоксибензильную и т.д. группы.

Заместители в положении 3 уроновых звеньев целевого соединения, а также заместитель R₁ могут уже присутствовать в исходных синтонах.

Защитные группы, используемые в способе получения соединений формулы (I), представляют собой группы, обычно применяемые в химии сахаров, как например описывается в книге T.W. Greene "Защитные группы в органическом синтезе", изд. John Wiley and Sons, Нью-Йорк, 1981 г.

Защитные группы предпочтительно выбирают, например, среди ацетильных, галогенметильных, бензоильных, левулинильных, бензильных, замещенных бензильных, возможно замещенных тритильных, тетрагидропиранильных, аллильных, пентенильных, трет-бутилдиметилсилильных (tBDMS) или триметилсилилэтильных групп (...).

Активирующими группами являются группы, обычно используемые в химии сахаров, например, согласно G.J. Boons, Tetrahedron, 52, 1095-1121 (1996). Эти активированные группы выбирают, например, среди имидатов, тиогликозидов, пентенилгликозидов, ксантатов, фосфитов или галогенидов.

Вышеописанный способ позволяет получать соединения согласно изобретению в форме солей. Для получения соответствующих кислот соединения согласно изобретению в форме солей вводят в контакт с катионообменной смолой в кислой форме.

Соединения согласно изобретению в форме кислот могут быть затем нейтрализованы с помощью основания для получения желаемой соли.

Для получения солей соединений формулы (I) можно использовать любое неорганическое или органическое основание, образующее с соединениями формулы (I) фармацевтически приемлемые соли.

В качестве основания предпочтительно используют гидроксид натрия, калия, кальция или магния. Натриевые и кальциевые соли соединений формулы (I) являются предпочтительными солями.

На стадии (а) способа используемыми защитными группами являются группы, обычно используемые специалистом в химии сахаров, например, согласно европейскому патенту 84999 или еще согласно T.W. Greene "Защитные группы в органическом синтезе", изд. J. Wiley and Sons, 1995 г.

Таким образом полученные соединения формулы (I) в случае необходимости могут быть превращены в соли.

Соединения вышеприведенной формулы (I) также включают такие соединения, в которых один или несколько атомов водорода или углерода заменены их радиоактивным изотопом, например, тритием или углеродом-14. Такие меченые соединения пригодны в качестве лигандов в научно-исследовательских работах, работах по изучению метаболизма или фармакокинетики, в биохимических опытах. Соединения согласно изобретению были использованы как объект биохимических и фармакологических исследований, которые показали, что они обладают очень интересными свойствами.

Соединения настоящего изобретения, которые селективно связываются с AT III со сродством, равным или выше такового гепарина, обладают антикоагулянтными и антитромботическими свойствами гепарина.

Общую антитромботическую активность продуктов формулы (I) оценивают путем введения внутривенно или подкожно крысе на модели венозного стаза и путем индукции тромбопластином согласно методу, описанному J. Reyers и др. в Thrombosis Research, 18, 669-674 (1980), та