Замещенные липосахариды, используемые для лечения и профилактики эндотоксикоза

Замещенные липосахариды, используемые для лечения и профилактики эндотоксикоза

Реферат

 

Описывается новый замещенный липосахарид формулы I, где R¹ представляет собой группу (а), где J и K - линейный C₁-C₁₅алкил, R² представляет собой линейный C₅-C₁₅алкил; R³ представляет собой группу (b), где A и B обозначают линейный C₁-C₁₅алкил, R⁴ представляет собой группу (с), где каждый U и V обозначает линейный C₂-C₁₅алкил и W обозначает линейный C₁-C₅алкил; R_A представляет собой R⁵-O-CH₂-, где R⁵ представляет собой линейный C₁-C₅алкил; R⁶ представляет собой гидрокси; A¹ и A² обозначают группу (d), или его фармацевтически приемлемая соль. Соединения могут использоваться при профилактике и при конструктивном лечении эндотоксинного воздействия, включая сепсис, септицемию, эндотоксикоз и различные формы септического шока. 13 з. п. ф-лы, 3 ил., 2 табл.

Настоящее изобретение относится к соединениям, которые могут использоваться при профилактике и при конструктивном лечении эндотоксинного воздействия, включая сепсис, септицемию, эндотоксикоз и различные формы септического шока.

Предпосылки изобретения Настоящее изобретение относится к аналогам липида А, которые используются в качестве ингибиторов энодотоксикоза.

Установлено, что частота появления такого заболевания, как бактеремия, в Соединенных Штатах составляет приблизительно 100000-300000 случаев в год, при коэффициенте смертности 30-60%. В качестве первичной химиотерапии против этого заболевания обычно используют антибиотики; однако их бактерицидное действие может привести, в результате, к разрушению бактерий,к сопровождающему этот процесс высвобождению эндотоксина, т. е. липополисахаридного (ЛПС) фрагмента внешней мембраны бактерий. Освобожденный ЛПС вызывает ряд патофизиологических явлений у млекопитающих (которые все относят к грамотрицательному эндотоксикозу или септическому синдрому). Эти явления включают лихорадочное состояние, разлитое воспаление, диссеминированное внутрисосудистое свертывание (ДВС), гипотензию, острую почечную недостаточность, острый респираторный дистресс-синдром (ОРДС), гепатоцеллюлярную деструкцию и сердечную недостаточность.

Хотя эндотоксин и вызывает септический шок, он обладает незначительным или непрямым действием на ткани; на самом деле, он дает начало иммунобиологической реакции, ведущей к каскаду выделения цитокинов, таких как фактор некроза опухоли (ФНО), интерлейкин-1, интерлейкин-6 и интерлейкин-8, и других биологических медиаторов, таких как оксид азота, а также ряда вторичных медиаторов (например, простагландинов, лейкотриенов, интерферонов, фактора активации тромбоцитов, эндорфинов и колониестимулирующих факторов). Наработка патофизиологических концентраций этих цитокинов и медиаторов воспаления влияет на сосудистый тонус, проницаемость капилляров и агрегацию лейкоцитов и тромбоцитов, вызывая синдром, называемый синдромом системной воспалительной реакции (или ССВР), и септический шок.

Молекула бактериального липополисахарида имеет три основные области: длинноцепочечный полисахарид (О-антиген), область ядра и область липида А. Полная молекула липополисахарида, как и некоторые ее отдельные компоненты, обладает описанным выше токсическим действием. Полагают, однако, что большую часть такого токсического действия можно приписать части липида А. Структурно липид А состоит из дифосфорилированного дисахирида, ацилированного длинноцепочечными жирными кислотами.

Лечение в случае связанных с эндотоксинами заболеваний направлено, главным образом, на регулирование воспалительной реакции. Такое лечение включает кортикостероидное лечение, предлагаемое для ослабления опосредованного эндотоксином повреждения клеточной мембраны и для уменьшения продуцирования некоторых биологических медиаторов; введение антител, рассчитанное на нейтрализацию бактериального ЛПС; лечение средствами подавления гипотензии или налоксоном, который, видимо, блокирует гипотензивные эффекты, связанные с септическим синдромом; и лечение нестероидными противовоспалительными лекарственными средствами, имеющее целью блокирование циклооксигеназ и, за счет этого, уменьшение продуцирования некоторых вторичных медиаторов, таких как простагландины и тромбоксан.

Однако ни одна такая терапия на сегодняшний день не приводит к существенному снижению заболеваемости и смертности, являющихся результатом сепсиса и синдрома септического шока. Таким образом, существует давняя потребность в средствах для конструктивного лечения такого нарушения.

В заявке на патент США, рег. N 07/935050, поданной 25 августа 1992, "Anti-Endotoxin Compounds", Christ, et al., которая включена в настоящее в качестве ссылки, описываются некоторые дисахариды, такие как изображенный ниже В531, используемый при лечении эндотоксикоза.

Некоторые липополисахариды описаны в других литературных источниках, таких как Macher, et al., патент Великобритании 2179945, Meyers, et al., патент Великобритании 2220211, Shiba, et al., европейский патент 172581, Anderson, et al., патент США 4495346, и Shiba, et al., патент США 5066794.

Краткое изложение сущности изобретения Настоящее изобретение относится к лечению сепсиса, септического шока и родственных нарушений с применением новых липосахаридных аналогов. Соединения по настоящему изобретению обладают такими выгодными для фармацевтического применения свойствами, как повышенная фармакологическая селективность, эффективность и, в особенности, увеличенная устойчивость действия. Представительное соединение по настоящему изобретению - соединение 1 - изображено ниже.

Кроме того, настоящее изобретение относится к профилактике и конструктивному лечению любого опосредованного ЛПС нарушения. Такими нарушениями являются, но не ограничиваются перечисленным, сепсис, септицемия (в том числе, но не только, эндотоксикоз), эндотоксикоз, являющийся результатом грамотрицательной бактериемии (с сопровождающими ее симптомами лихорадки, разлитого воспаления, диссеминированного внутрисосудистого свертывания, гипотензии, острой почечной недостаточности, острого респираторного дистресс-синдрома, респираторного дистресс-синдрома взрослых (ARDS), гепатоцеллюлярной деструкции и/или сердечной недостаточности), и различные формы септического шока (включая, но не ограничиваясь им, эндотоксиновый шок). Соединения по настоящему изобретению также могут быть использованы при профилактике или конструктивном лечении локализованной или системной воспалительной реакции на заражение различными типами микроорганизмов, включая грамотрицательные бактерии, и при заболеваниях, связанных с транслокацией грамотрицательных бактерий или эндотоксина из пищеварительного канала.

Все вместе такие нарушения называются синдромом системной воспалительной реакции или ССВР (обсуждение этих терминов см. в Bone, et al. Chest 1992; 101: 1644-55).

Определения В соответствии с настоящим изобретением и с использованием при его описании в дальнейшем приводятся значения терминов, если нет других точных указаний.

Термин "алкил" относится к алифатическим органическим группам, которые могут быть разветвленными или линейными и которые, необязательно, могут быть замещены одним или несколькими атомами галогена в любом положении алкильной цепи. К алкильным группам относятся как группы, которые имеют одну свободную валентность, например -CH₂-CH₃, так и алкиленовые группы, которые имеют две свободные валентности, например -CH₂-CH₂-. Как очевидно для специалистов в этой области техники, одна или две свободные валентности будут использоваться в соответствующем случае для описания соединений, которые химически устойчивы.

Термин "пролекарство", как он используется здесь, относится к любому соединению, которому активность присуща меньше, чем "лекарству", но при введении в биологическую систему оно генерирует "лекарственное" вещество либо в результате спонтанной химической реакции, либо катализированной ферментами или метаболической реакции. Упоминаются различные пролекарства, такие как ацилэфиры, карбонаты, фосфаты и уретаны, включенные сюда в качестве примеров. Иллюстрирующие их группы являются примерами, но не исчерпывающими, и специалист в этой области техники может получить другие известные разновидности пролекарств. Такие пролекарства соединений формулы I входят в объем настоящего изобретения.

Термин "фармацевтически приемлемая соль" относится к солям соединений формулы I, полученным при взаимодействии соединения настоящего изобретения и органической или неорганической кислоты или основания. Соединения формулы I могут использоваться как в неионизированном виде, так и в виде соли. На практике применение соли равнозначно применению в виде основания; оба вида входят в объем настоящего изобретения.

Термин "геометрические изомеры" относится к "транс-" или "цис-" изомерам (или "Е-изомерам", или "Z-изомерам"), как они вообще понимаются специалистами в этой области техники. Все геометрические изомеры входят в объем настоящего изобретения.

Кроме того, соединения по настоящему изобретению могут содержать асимметричные атомы углерода и, следовательно, могут существовать в виде стереоизомеров как энантиомеров, так и диастереомеров. Все стереоизомеры и их смеси рассматриваются как входящие в объем настоящего изобретения. Упомянутые здесь примеры синтеза относятся к наиболее предпочтительному изомеру. Очевидно, что кроме как в сахаристой составляющей, в соединениях формулы I могут присутствовать дополнительные асимметричные атомы углерода, например, в боковых цепях. В таком случае все получающиеся в результате диастереомеры считаются входящими в объем настоящего изобретения.

Краткое описание чертежей Фиг. 1 иллюстрирует ингибирование выделения -ФНО соединением 1 с помощью графика ингибирования опосредованной ЛПС индукции фактора нероза опухоли (ФНО) в цельной человеческой крови соединением по настоящему изобретению.

На фиг. 2 приводится общая схема, применяемая при анализе антагонистической эффективности лекарственного средства в цельной крови после инкубации в течение различного времени.

Фиг. 3 отражает зависимость способности испытываемого соединения ингибировать -ФНО от времени и показывает, что соединение 1 обладает продолжительностью действия в качестве антагониста ЛПС, превосходящей В531. Эти данные являются средними результатами 7 отдельных экспериментов, каждый из которых повторяется трижды.

Подробное описание изобретения Новые липосахариды В одном из своих аспектов настоящее изобретение относится к новому применению замещенных липосахаридов, которые включают соединения общей формулы I.

В этой формуле R¹ выбран из группы, включающей где каждый J, К и Q представляет собой, независимо, линейный или разветвленный C₁-C₁₅ алкил; L представляет собой O, NH или CH₂; М представляет собой O или NH и G представляет собой NH, О, S, SO или SO₂; R² является линейным или разветвленным C₅ - C₁₅ алкилом; R³ выбран из группы, включающей линейный или разветвленный C₅-C₁₅ алкил, где E представляет собой NH, 0, S, SO или SO₂; каждый A, B и D является, независимо, линейным или разветвленным C₁-C₁₅ алкилом; R⁴ выбран из группы, включающей линейный или разветвленный C₄-C₂₀ алкил и где каждый U и V, независимо, является линейным или разветвленным C₂-C₁₅ алкилом, и W представляет собой водород или линейный или разветвленный C₁-C₅ алкил; R_A представляет собой R⁵ или R⁵-O-CH₂-, причем R⁵ выбран из группы, состоящей из водорода, J', -J'-OH, -J'-O-K', -J'-O-K'-OH и -J'-O-PO(OH)₂, где каждый J' и К', независимо, представляет собой линейный или разветвленный C₁-C₅ алкил; R⁶ выбран из группы, состоящей из гидрокси, галогена, C₁-C₅ алкокси и C₁-C₅ ацилокси; A¹ и A², независимо, выбраны из группы, включающей OH, где Z представляет собой линейный или разветвленный C₁-C₁₀ алкил; и их фармацевтически приемлемые соли.

Варианты воплощения приведенной выше формулы включают приведенные ниже значения или их комбинации: R² представляет собой линейный или разветвленный C₈-C₁₅ алкил; R² представляет собой линейный или разветвленный C₉-C₁₂ алкил; R² представляет собой линейный или разветвленный C₁₀-алкил; A¹ и A², независимо, являются ОН или -O-РО(ОН)₂; R⁶ представляет собой гидрокси; R⁵ является линейным или разветвленным C₁-C₅ алкилом; R¹ выбран из группы, включающей где каждый J, K и Q, независимо, является линейным или разветвленным C₁-C₁₅ алкилом; R³ выбран из группы, включающей где каждый A, B и D, независимо, является линейным или разветвленным C₁-C₁₅ алкилом; двойные связи R³ являются цис- или Z-; двойные связи R³ являются транс- или E-; R⁴ выбран из группы, включающей линейный или разветвленный C₄-C₂₀ алкил и где U является линейным или разветвленным C₂-C₅ алкилом, V является линейным или разветвленным C₅-C₁₂ алкилом и W представляет собой водород или линейный или разветвленный C₁-C₅ алкил; R_A представляет собой R⁵; и R_A представляет собой R⁵-O-CH₂-.

В других вариантах осуществления изобретения каждый из A¹ и A², независимо, выбраны из группы, состоящей из ОН и -O-PO (ОН)₂; R¹ выбран из группы, включающей где каждый J, K и Q, независимо, представляет собой линейный или разветвленный C₁-C₁₅ алкил; R² представляет собой линейный или разветвленный C₈-C₁₅ алкил; R³ выбран из группы, включающей где каждый A, В и D, независимо, является линейным или разветвленным C₁-C₁₅ алкилом; R⁴ представляет собой где U является линейным или разветвленным C₂-C₅ алкилом, V является линейным или разветвленным C₅-C₁₂ алкилом и W представляет собой водород или линейный или разветвленный C₁-C₅ алкил; и R⁵ является линейным или разветвленным C₁-C₅ алкилом; и R⁶ представляет собой гидрокси.

В другом варианте осуществления изобретения A¹ и A² представляют собой -O-PO(ОН)₂; R¹ выбран из группы, включающей где каждый J и Q, независимо, представляет собой линейный или разветвленный C₁-C₅ алкил и К представляет собой линейный или разветвленный C₈-C₁₅ алкил; R² представляет собой линейный или разветвленный C₈-C₁₅ алкил; R³ представляет собой где A является линейным или разветвленным C₅-C₁₂ алкилом, а B представляет собой линейный или разветвленный ₆-C₁₂ алкил; R⁴ представляет собой где U является линейным или разветвленным C₂-C₅ алкилом, V является линейным или разветвленным C₅-C₁₂ алкилом и W представляет собой водород или линейный или разветвленный C₁-C₅ алкил; R⁵ является линейным или разветвленным C₁-C₅ алкилом; и R⁶ представляет собой гидрокси.

Еще в одном варианте осуществления изобретения A¹ и A² представляют собой -O-PO(ОН)₂; R⁴ выбран из группы, включающей где каждый J и Q, независимо, представляет собой линейный или разветвленный C₁-C₃ алкил и К представляет собой линейный или разветвленный C₁₀-C₁₂ алкил; R² представляет собой линейный или разветвленный C₉-C₁₂ алкил; R³ представляет собой где A является линейным или разветвленным C₈-C₁₂ алкилом, а B представляет собой линейный или разветвленный ₆-C₁₀ алкил; R⁴ представляет собой где U является линейным или разветвленным C₂-C₄ алкилом, V является линейным или разветвленным C₅-C₁₀ алкилом и W представляет собой водород или линейный или разветвленный C₁-C₃ алкил; и R⁵ является линейным или разветвленным C₁-C₃ алкилом; и R⁶ представляет собой гидрокси.

Еще в одном варианте осуществления изобретения A¹ и A² представляют собой -O-PO(ОН)₂; R¹ представляет собой R² представляет собой (CH₂)₉CH₃; R³ представляет собой R⁴ представляет собой R⁵ является -CH₃; и R⁶ представляет собой гидрокси.

Также в объем настоящего изобретения входят соединения, в которых R¹ и R³ являются сульфонилами, т.е. соединения, в которых карбонил на этих боковых цепях заменен на SO₂. Эти соединения можно получить путем обработки соответствующим образом замещенного спиртового сахара соответствующим алкилсульфонилхлоридом. Таким образом, R¹ и R³ также можно выбирать среди следующих групп, в которых A, B, D, E, J, K, L, Q и М имеют установленные выше значения: Кроме того, в объем настоящего изобретения входят соединения, в которых ненасыщенной связью в боковой цепи R³ не является двойная или тройная углерод-углеродная связь, а необязательно замещенная ароматическая группа, т. е. соединения, в которых R³ может иметь следующее строение: где E представляет собой NH, О, S, SO или SO₂; каждый A является линейным или разветвленным C₁-C₁₅ алкиленом; D представляет собой линейный или разветвленный ₁-C₁₅ алкил; F представляет собой H, -OT, NT¹T², -CO₂T или фенил, где каждый из T, T¹ и T² выбраны, независимо, среди водорода или C₁-C₅ алкила; B представляет собой линейный или разветвленный C₁-C₁₅ алкил; Вообще, предпочтительными являются соединения, в которых R¹ выбран из группы, включающей где каждый J, K и Q, независимо, является линейным или разветвленным C₁-C₁₅ алкилом; R² представляет собой линейный или разветвленный C₈-C₁₂ алкил; R³ выбран из группы, включающей где каждый A, B и D, независимо, является линейным или разветвленным C₁-C₁₅ алкилом; R⁴ представляет собой где U является линейным или разветвленным C₂-C₅ алкилом, V является линейным или разветвленным C₄-C₁₀ алкилом, и W представляет собой водород или линейный или разветвленный C₁-C₅ алкил; R⁵ выбран из группы, состоящей из водорода, -J' и -J'-ОН, где J' является линейным или разветвленным C₁-C₅ алкилом; R⁶ выбран из группы, состоящей из гидрокси, галогена и C₁-C₅ ацилокси; каждый A¹ и A², независимо, выбраны из группы, включающей OH и и их фармацевтически приемлемые соли.

Наиболее предпочтительными являются соединения формулы I, в которых R¹ выбран из группы, включающей где J представляет собой линейный или разветвленный C₁-C₅ алкил и K является линейным или разветвленным C₉-C₁₄ алкилом; R² представляет собой линейный или разветвленный C₈-C₁₂ алкил; R³ представляет собой где A представляет собой линейный или разветвленный C₆-C₁₂ алкил и B является линейным или разветвленным C₄-C₈ алкилом; R⁴ представляет собой где U является линейным или разветвленным C₂-C₄ алкилом, V является линейным или разветвленным C₅-C₉ алкилом и W представляет собой водород или линейный или разветвленный C₁-C₃ алкил; R₅ является линейным или разветвленным C₁-C₃ алкилом; R⁶ представляет собой гидрокси; A¹ и A² являются их фармацевтически приемлемые соли.

Общие способы синтеза Настоящее изобретение также относится к способам получения соединений формулы I. Здесь описываются общие пути синтеза с целью получения различным образом замещенных соединений по настоящему изобретению. Синтез соединения по настоящему изобретению - соединения 1 - описывается ниже.

Большинство реагентов и исходных веществ хорошо известно специалистам в этой области техники. Некоторые реагенты и исходные вещества описаны подробно в заявке на патент США 07/935050, Chist, et al., которая будет опубликована как патент США N 5530113, который включен в настоящее в качестве ссылки.

Один из способов синтеза соединений по настоящему изобретению описан ниже. Хотя в этом примере описывается получение соединения 1, применение других исходных соединений позволит получить другие аналоги настоящего изобретения. Таким образом, этот синтез действительно является общим по характеру.

Например, использование иных алкилирующих агентов на стадии синтеза 22 даст аналоги с заместителями R¹, отличающимися по строению.

Характер замещения в R² регулируется путем применения подходящего алкилирующего агента на стадии 15.

Кроме того, замещение подходящих иных соединений на 25 стадии синтеза даст аналоги, которые отличаются по R³.

Аналоги без окисленной боковой цепи R_A можно получить с помощью небольших изменений в схеме синтеза, приведенной ниже, что хорошо известно специалистам в этой области техники. В случае соединения, в котором R_A представляет собой метил, например продукт синтеза на стадии 8 - тозилат - может иметь отщепляющуюся группу, замещаемую йодом при реакции Финкельштейна. Иодосодержащие соединения можно дегалогенировать путем обработки металлическим цинком с образованием метильной группы в положении R_A.

Характерный синтез боковой цепи R_A описан ниже. Получение изменений в этой боковой цепи можно осуществить путем замены исходного вещества на другие подходящие исходные вещества. Например, эту боковую цепь можно получить линейной или разветвленной, исходя из соответствующего исходного вещества. Так, использование различных тозилатов на стадии 6 будет приводить к изменению в R⁴ (см. схему 1).

Таким образом, коротко описанный ниже синтез обеспечивает универсальный подход к соединениям по настоящему изобретению. (Подробности синтеза см. в приведенных далее экспериментальных примерах, см. схему 2).

Заявители полагают, что показанный выше маршрут - маршрут 1 - является превосходным способом получения соединений по настоящему изобретению благодаря множеству факторов, таких как применение более дешевых исходных веществ, более высокий выход и использование менее токсичных химических агентов, описанный ниже маршрут - маршрут 2 - может быть использован для получения соединений по настоящему изобретению.

Большинство реагентов и исходных веществ хорошо известно специалистам в этой области техники. Некоторые реагенты и исходные вещества для их получения описаны подробно в заявке на патент США 07/935050, Christ, et al., которая включена в настоящее в качестве ссылки. Хотя в этом примере описывается получение соединения 1, использование иных исходных веществ приведет к другим аналогам по настоящему изобретению. Таким образом, указанный синтез действительно является общим.

Например, использование иных алкилирующих агентов при получении промежуточного соединения U даст аналоги с различными по строению заместителями R¹.

Картина замещения в R² регулируется путем использования соответствующего алкилирующего агента при получении промежуточного соединения O.

Кроме того, замещение подходящих иных соединений для промежуточного соединения E при получении промежуточного соединения G будет давать аналоги, которые отличаются в отношении R³.

Пример синтеза боковой цепи R⁴ описывается ниже. Получение вариаций боковой цепи может достигаться путем замены исходного вещества на другие подходящие исходные вещества. (Подробности синтеза см. в приведенных в схеме 3 экспериментальных примерах).

Характерный пример получения "левой" части описывается в схеме 4.

Характерный пример получения "правой" части соединения 1 описывается в схеме 5.

Две "половинки" молекулы затем соединяют, как описано в схемах 6 и 7, и затем тщательно обрабатывают для получения соединения 1.

Композиции Аналоги липида A вводят при дозировке, которая обеспечивает соответствующее ингибирование ЛПС-активации клеток-мишеней; как правило, эти дозировки составляют 0,01-50 мг на пациента, предпочтительнее 0,05-25 мг на пациента и наиболее предпочтительно 1-12 мг на пациента. Наиболее предпочтительно вводить дозировки в течение 3 суток в виде непрерывного вливания.

Используемый здесь термин "парентеральный" включает подкожные, внутривенные, внутримышечные и внутриартериальные инъекции с различными методами вливания. Внутриартериальная и внутривенная инъекция здесь включает введение через катетеры. При некоторых показаниях предпочтительными являются способы введения, которые дают возможность быстрого доступа к ткани или органу, которые лечат, например, в случае лечения эндотоксикоза, внутривенные инъекции.

Фармацевтические композиции, содержащие активный ингредиент, могут находиться в любой форме, подходящей для предполагаемого способа введения.

Водные суспензии по настоящему изобретению содержат активные вещества в смеси с добавками, подходящими для изготовления водных суспензий. Такими добавками являются суспендирующий агент, такой как натрийкарбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, альгинат натрия, поливинилпирролидон, трагакантовая камедь и аравийская камедь, и диспергирующие агенты или смачиватели, такие как встречающиеся в природе фосфатиды (например, лецитин), продукты конденсации алкиленоксидов с жирными кислотами (например, полиоксиэтиленстеарат), продукты конденсации этиленоксида с длинноцепочечным алифатическим спиртом (например, гепта-dea-этиленоксицетанол), продукты конденсации этиленоксида с неполными эфирами, образованными жирными кислотами и гекситолангидридом (например, полиоксиэтиленсорбитанмоноолеат). Водная суспензия также может содержать один или несколько консервантов, таких как этил н-пропил-п-гидроксибензоат.

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению находятся, предпочтительно, в форме стерильного, приемлемого для инъекции препарата, такого как стерильная водная или масляная суспензия для инъекций. Такую суспензию можно составить известными в технике методами с использованием подходящих диспергирующих или смачивающих агентов и суспендирующих агентов, которые упоминались выше. Стерильный препарат для инъекций может также представлять собой стерильный раствор для инъекций или суспензию в нетоксичном, приемлемом парентерально разбавителе или растворителе, например раствор в 1,3-бутандиоле, или быть полученным в виде лиофилизованного порошка. В число приемлемых носителей и растворителей, которые можно использовать, входят вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, обычно можно использовать в качестве растворителя или суспендирующей среды стерильные нелетучие масла. Для этой цели можно использовать любое мягкое нелетучее масло, в том числе синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, при приготовлении композиций для инъекций можно также использовать жирные кислоты, например олеиновую кислоту.

Композиции, пригодные для парентерального введения, включают водные и неводные изотонические стерильные растворы для инъекций, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостаты и растворенные вещества, которые придают композиции изотоничность с кровью предполагаемого реципиента; и водные и неводные стерильные суспензии, которые могут включать суспендирующие агенты и загустители. Композиции могут находиться в однодозовых или многодозовых плотно закрытых емкостях, например ампулах и флаконах, и могут храниться в высушенном вымораживанием (лиофилизованном) состоянии, когда требуется только добавить стерильный жидкий носитель, например воду для инъекций, непосредственно перед применением. Приготовленные для немедленного применения растворы и суспензии можно получить из стерильных порошков, описанных ранее.

Следует, однако, иметь в виду, что конкретный уровень дозы для любого конкретного пациента будет зависеть от разных факторов, в том числе от активности конкретно используемого соединения, возраста, массы тела, общего состояния здоровья и пола индивидуума, которого лечат, времени и способа введения, скорости экскреции, других лекарственных средств, которые вводились ранее, и тяжести специфического заболевания, от которого лечат.

Примеры Далее приводятся примеры применения способа по настоящему изобретению. Соединения по настоящему изобретению и их получение можно представить также с помощью примеров, которые иллюстрируют некоторые процессы, посредством которых эти соединения получают или применяют. Эти примеры не следует истолковывать как определенно ограничивающие изобретение, и вариации изобретения, известные в настоящее время или разработанные впоследствии, считаются входящими в объем настоящего изобретения, определенный далее формулой изобретения.

Соединения по настоящему изобретению обозначаются номерами в соответствии с таблицами 1 и 2.

Химические примеры Если нет иных указаний, все реакции проводят в инертной атмосфере. При спектральном анализе (например, методом ядерного магнитного резонанса и/или масс-спектроскопии) промежуточные и конечные продукты дают результаты, совместимые с их предполагаемым строением. Протекание реакций контролируют с помощью тонкослойной хроматографии на силикагеле. Препаративную хроматографию, если нет иных указаний, осуществляют на силикагеле.

Получение соединения 1 по пути 1 Все чувствительные к окружающей среде реакции проводят в атмосфере азота и в сухом оборудовании и в качестве осушающего агента используют безводный сульфат натрия, если нет иных указаний. Все продукты дают удовлетворительные спектры ядерного магнитного резонанса.

Вещество (5 кг) хроматографируют на силикагеле и элюируют с градиентом гексаном в EtOAc (100-33% гексана). Очищенные фракции объединяют и перегоняют (97-100^oC при 0,15 мм рт.ст.). Выход очищенного вещества 4,513 г.

К охлажденному льдом раствору сложного эфира (4500 г, 22,2 моля) в 12,6 л ТГФ добавляют гидроксид натрия (27 молей) в 10,8 л воды. Смесь быстро перемешивают и добавляют 2,5 л конц. соляной кислоты. Слои разделяют и водный слой снова экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Продукт постепенно кристаллизуется с образованием 2983 г белого порошка.

К раствору кислоты (15,8 молей) в 33 л ацетонитрила добавляют дициклогексиламин (16,7 молей). Раствор нагревают до 60^oC и оставляют остывать в течение ночи. Кристаллы собирают и промывают дважды растворителем и перекристаллизовывают из ацетонитрила. К суспензии предварительно промытого метанолом амберлита IR-120 Plus (12 кг) в EtOAc (24 л) и воде (24 л) добавляют полученную выше соль. Смесь перемешивают в течение нескольких часов и отделяют органический слой. Водный слой снова экстрагируют EtOAc (12 л) и объединенные органические слои сушат (сульфат натрия) и концентрируют. Получают 2,997 г белого твердого вещества.

К горячему (~67^oC) 1 М раствору алюмогидрида лития (8 л) в ТГФ медленно добавляют раствор кислоты (1 кг) в 4 л ТГФ. Раствор оставляют охлаждаться в течение ночи. Раствор медленно добавляют к 1 М водному раствору HCl (5 л). Смесь экстрагируют толуолом (12 л). Органический слой промывают раствором бикарбоната натрия, сушат (сульфат натрия) и удаляют растворитель в вакууме. Получают сироп, который перегоняют (103^oC), и получают 914 г светло-желтого масла.

К охлажденному до 0^oC раствору диола (913,8 г) в пиридине (3 л) добавляют 3 л триэтиламина, а затем раствор тозилхлорида (1 кг) в пиридине (1,5 л) и триэтиламине (1,5 л). Смесь оставляют нагреваться в течение ночи и выливают в холодный раствор 6 М водного раствора HCl (16 л) и метиленхлорида (8 л). Органический слой отделяют, а водный слой экстрагируют дополнительным количеством метиленхлорида. Объединенные органические слои сушат (сульфат натрия) и удаляют растворитель при пониженном давлении. Остаток дважды хроматографируют на силикагеле и элюируют с градиентом гексан: EtOAc (от 9:1 до 1:6), и получают 642 г тозилата.

К суспензии 60% дисперсии гидрида натрия в масле (8,68 молей) в 1,15 л ДМФА и 1,1 л ТГФ постепенно добавляют тозилат (1,139 кг) и метилйодид (7,7 кг) в 1,15 л ДМФА и 1,1 л ТГФ. Смесь перемешивают в течение ночи, а затем разбавляют ДМФА (3 л) и постепенно добавляют к насыщенному водному раствору хлорида аммония. Смесь экстрагируют гексаном (8 л), экстракт сушат (сульфат натрия) и удаляют растворитель, и получают оранжевое/коричневое масло. Масло хроматографируют на диоксиде кремния и элюируют с градиентом (гексан: EtOAc, от 100:0 до 6:1), и получают 940 г светло-желтого масла.

К суспензии аминосахара (1019 г) в 5 л MeOH добавляют 25% раствор NaOMe в MeOH (1080 мл, 5 моль), а затем 610 мл этилтрифторацетата. Смесь перемешивают в течение ночи и удаляют растворитель при пониженном давлении, а остаток обрабатывают изопропанолом. Смесь фильтруют и остаток промывают дополнительным количеством изопропанола, и получают 1369 г продукта.

К суспензии оксисахара (1300 г) в пиридине (4 л) добавляют диметиламинопиридин (79 г), а затем уксусный ангидрид (2713 мл). Смесь перемешивают в течение ночи. Растворитель удаляют при пониженном давлении. Добавляют толуол (5х500 мл) и также удаляют при пониженном давлении, получают твердое вещество, которое хроматографируют на диоксиде кремния. Элюирование смесью гексан: EtOAc (1:1) дает 1479 г белого твердого вещества.

К раствору ацетилированного саха