Пятичленные гетероциклические амидины, обладающие свойствами ингибиторов тромбина, соединения, содержащие производные пятичленного гетероциклического амидина, в качестве составной части ингибиторов серинпротеазы и промежуточные соединения

Пятичленные гетероциклические амидины, обладающие свойствами ингибиторов тромбина, соединения, содержащие производные пятичленного гетероциклического амидина, в качестве составной части ингибиторов серинпротеазы и промежуточные соединения

Реферат

 

Описываются новые пятичленные гетероциклические амидины формулы (I), где А, В, D и Е имеют следующие значения: А формулы (II), где m = n = 0,1 или 2; R¹ - группы: гидроксил, карбоксил, С_1-6-алкил-ООС; R² = R³ - водород, алкил с 1-4 атомами углерода; В формулы (III), где R⁴ - водород, алкил с 1-4 атомами углерода или R¹ - (СН)_m - (при этом R¹ и m имеют вышеуказанные значения); Р - 0 или 1; R⁵ - водород или алкил с 1-4 атомами углерода; R⁶ - водород, алкил с 1-6 атомами углерода, циклоалкил с 3-8 атомами углерода; R⁴ и R⁶ вместе могут означать этиленовую группу; R⁷ - водород, алкил с 1-8 атомами углерода; R⁸ - водород, алкил с 1-4 атомами углерода; Е формулы (IV), где q - 0 или 1; D формул (Va), (Vb), (Cc), где R⁹ - водород, алкил с 1-3 атомами углерода; R¹⁰ = R¹¹ - водород, алкил с 1-4 атомами углерода; Х - кислород, сера, NR¹² (R¹² = водород, алкил с 1-6 атомами углерода), Y - азот = или -CR¹³= (R¹³ = водород, алкил с 1-4 атомами углерода); Z - азот = или -CR¹³=, где R¹³ имеет вышеуказанное значение,а также их соли с физиологически переносимыми кислотами. Вышеуказанные соединения обладают свойствами ингибиторов тромбина. Описываются также соединения, содержащие производные пятичленного гетероциклического амидина, в качестве составной части ингибиторов серинпротеазы и промежуточные соединения. 3 с. и 1 з. п.ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к новым ингибиторам тромбина, в частности к пятичленным гетероциклическим амидинам, соединениям, содержащим производные пятичленного гетероциклического амидина, в качестве составной части ингибиторов серинпротеазы и промежуточным соединением.

Тромбин относится к группе серинпротеаз и играет главную роль в качестве концевого фермента в системе свертывания крови. Как внутренняя, так и внешняя система свертывания крови через несколько стадий усиления приводит к образованию тромбина из протромбина. Катализируемое тромбином расщепление фибриногена до фибрина затем вызывает свертывание крови и агрегацию тромбоцитов, которые со своей стороны за счет связывания тромбоцитного фактора 3 и фактора свертывания XIII, а также целого ряда высокоактивных медиаторов усиливают образование тромбина.

Образование и действие тромбина представляют собой главные факторы при возникновении как белых артериальных, так и красных венозных тромбов и поэтому являются потенциально эффективными точками воздействия для лечения. Ингибиторы тромбина в противоположность гепарину независимо от кофакторов способны полностью подавлять одновременно действия свободного тромбина, так и также связанного с тромбоцитами тромбина. При обострении заболевания они могут предотвращать тромбоэмболию после чрезкожной внутрипросветной коронарной ангиопластики и лизис и служить в качестве антикоагулянтов при экстра-корпоральном кровообращении (аппарат "сердце - легкие", гемодиализ). Они также вообще могут служить для профилактики тромбоза, например, после хирургических вмешательств.

Известно, что синтетические производные аргинина оказывают влияние на ферментативную активность тромбина тем, что они вступают во взаимодействие с активным сериновым остатком тромбинпротеазы. Особенно пригодными оказываются пептиды на основе Phe-Pro-Arg, в которых аминокислота с концевой аминогруппой находится в D-форме. D-Phe-Pro-Arg-изопропиловый сложный эфир описывается как конкурентно действующий ингибитор тромбина (C. Mattson и др., Fo-lia Haematol, Ю9, 43 - 51, 1983).

Превращение карбоксильного конца аргинина в альдегид приводит к усилению ингибирующего действия. Так, описано много аргиналей, которые способны связывать гидроксильную группу "активного" серина с образованием полуацеталя (европейские заявки 185390, 479489,526877, 542525; международные заявки WO 93/15756, 93/18060).

Ингибирующая тромбин эффективность пептидных кетонов, фторированных алкилкетонов, а также сложных кетоэфиров, производных борной кислоты, эфиров фосфорной кислоты и амидов - кетокарбоновых кислот также объясняется с точки зрения этого взаимодействия с серином (европейские заявки 118280,195212, 362002,364344,410411,471651, 589741,293881, 503203, 504064, 530167, международные заявки WO 92/07869, 94 08941).

В случае описанных J. Oleksyszyn и др., J. Med. Chem., 37. 226 - 231 (1994) пептидных сложных 4-амидинофенил-глицинфосфонат- дифениловых эфиров речь идет о необратимых ингибиторах тромбина с недостаточной селективностью по отношению к другим серинпротеазам.

В патенте ФРГ 3108810, международной заявке WO 93/11152 и европейской заявке 601459 описываются агматин и тем самым производные аргинина, которые не способны взаимодействовать с активным серином серинпротеаз.

К усовершенствованной разработке относятся международная заявка WO 94/29336, европейская заявка 0 601 459 и международная заявка WO 95/23609, при этом агматиновый остаток заменен ариламидиновым остатком.

Кининогеназы являются серинпротеазами, освобождающими из кининогенов вазоактивные пептиды, так называемые кинины (брадикинин, каллидин и Met-Lys-брадикинин). Кининогены представляют собой мультифункциональные протеины, которые встречаются при каскадных реакциях свертывания и воспаления. В качестве ингибиторов они защищают клетки от разрушения цистеинпротеазами (Muller Esterl, 1985. FEBS Lett. 182. 310-314). Важными кининогеназами являются калликреин плазмы, калликреин ткани и трипсин тучных клеток.

Кинины такие, как брадикинин и каллидин являются вазоактивными пептидами, влияющими на множество биологических процессов. Они при воспалительных процессах играют существенную роль. Вследствие повышения сосудистой проницаемости они приводят к гипотензии и отекам. Кроме того, они являются очень могущественными вызывающими боль антацоидами и имеют в качестве клеточных медиаторов в патофизиологии астмы, аллергического ринита и артрита большое значение (K. D. Bhoola, C.D. Figueroa, K. Worthy, Pharmakological Reviews 1992,44 (1), 1-80).

Независимо от механизмов, которые лежат в основе воспалительных процессов, из кровеносных сосудов вытекает жидкость, содержащая все протеиновые системы циркулирующей крови. Это означает, что выход плазменной жидкости из сосудов играет роль при заболеваниях таких, как астма, ринит и при вызываемых воспалительными процессами внутренних болезнях. При этом освобождается в особенности при аллергических процессах трипсин тучных клеток (Salomonsson и др., Am. Rev. Respir. Dis., 1992, 146, 1535-1542).

Хлорометилкетоны аргинина H-(D)-Pro-Phe-Arg-CH₂Cl и H-(D)- Phe-Phe-Arg-CH₂Cl Kettner и Shaw описывают как ингибитор калликреина (Biochem. 1978, 17. 4778-4784 и Meth. Enzym. 1981, 8Q, 826-842).

Разные синтетические производные бензамидинов и бензиламинов оказались ингибиторами калликреина плазмы, при этом бензамидины обладали существенно более сильным тормозящим действием (F. Markward, S. Drawert, P. Walsmann, Biochemical Pharmacology 1974, 23, 2247-2256).

Эффективным ингибитором для этих кининогеназ является также PKSI-527, т. е. гидрохлорид M-(транс-4-аминометилциклогексилкарбонил) -1-фенилаланин-4-карбоксиметил-анилида (Wanaka, Ohamoto и др., Thromb. Res. 1990, 57 (6), 889-895).

Задачей изобретения является разработка новых ингибиторов тромбина.

Поставленная задача решается предлагаемыми пятичленными гетероциклическими амидинами общей формулы (I) где A, В, D и E имеют следующие значения: A: где m - 0, 1 или 2, n - 0, 1 или 2, R¹ - группы гидроксил, карбоксил, C_1-6-алкил-OOC, R² - водород, алкилил с 1-4 атомами углерода, R³ - водород, алкил с 1-4 атомами углерода, B: где R⁴ - водород, алкил с 1-4 атомами углерода или R¹-(CH₂)_m-, где R¹ и m имеют вышеуказанные значения, p - 0 или 1, R⁵ - водород, алкил с 1-4 атомами углерода, R⁶ - водород, алкил с 1-6 атомами углерода, циклоалкил с 3-8 атомами углерода, R⁴ и R⁶ вместе могут означать этиленовую группу, R⁷ - водород, алкил с 1-8 атомами углерода, R⁸ - водород, алкил с 1-4 атомами углерода, E: где q - 0 или 1, D: где R⁹ - водород, алкил с 1-3 атомами углерода, R¹⁰ - водород, алкил с 1-4 атомами углерода, R¹¹ - водород, алкил с 1-4 атомами углерода, X - кислород, сера, NH¹², где R¹² означает водород, алкил с 1 - 6 атомами углерода, Y - азот = или -CR¹³=, где R¹³ означает водород, алкил с 1 - 4 атомами углерода, Z - азот = или -CR¹³=, где R¹³ имеет вышеуказанное значение, а также их солями с физиологически переносимыми кислотами.

Представленные В производные аминокислоты являются предпочтительно (D)-конфигурированными, в то время как 3,4- дегидропролин и 4,5-дегидропипеколиновая (L)-конфигурированы.

Предпочтительными являются соединения формулы (I), где группы A - E имеют следующие значения: A: HOOC-(CH₂)_t)-(t=1,2 или 3), HOOC-(CH₂)₂-CH-, HOOC-CH(алкил с 1-4 атомами углерода)-, HOOC-C(алкил с 1-4 атомами углерода)₂-, B: где p - 0,1 R⁴ - водород, алкил с 1-4 атомами углерода, R⁵ - водород, метил, R⁶ - водород, алкил с 1-4 атомами углерода, циклоалкил с 3-8 атомами углерода, R⁷ - водород, алкил с 1-8 атомами углерода, R⁸ - водород, алкил с 1-4 атомами углерода, (структурный элемент В является предпочтительно D-конфигурированным), E: где q - 0, 1, D: где X = сера, кислород, NH, NCH₃, NC₂H₅, Y = CH, C-CH₃, и Z = CH, C-CH₃ или X = сера, кислород, NH, N-CH₃, Y = азот Z=CH, C-CH₃, или X = сера, кислород, NH, N-CH₃, Y = CH, C-CH₃, Z=азот или X = сера, кислород, NH, N-CH₃, Y = азот, Z = азот или где X = сера, кислород, NH, NCH₃, NC₂H₅, Y = CH, C-CH₃, и Z = CH, C-CH₃, или X = кислород, NH, NCH₃, Y = азот Z=CH, C-CH₃, или X = кислород, сера, NH, NCH₃, Y = CH, C-CH₃, Z=азот или X = кислород, сера, NH, NCH₃, Y = Z = азот, или где X = сера, кислород, NH, NCH₃, NC₂H₅, Y = CH, C-CH₃, и Z = CH, C-CH₃, или X = кислород, NH, NCH₃, Y=азот Z=CH, C-CH₃, или X = кислород, сера, NH, NCH₃, Y=CH, C-CH₃, Z=азот или X = кислород, NH, NCH₃, Y = Z = азот.

Особенно предпочтительными являются соединения формулы (I), в которых A, В, D и E имеют следующие значения.

A - HOOC-CH₂, HOOC-CH₂-CH₂, HOOC-CH(CH₃), HOOC-CH(C₂H₅) B: где p - 0, 1 R⁴ - водород, метил, R⁵ - водород, метил, R⁶ - алкил с 1-6 атомами углерода, циклоалкил с 5-8 атомами углерода, R⁷ - водород, метил, R⁸ - водород, метил, E: где q - 0 или 1.

D: где R¹⁴ - водород, метил, предпочтительно водород, R¹⁵ - водород, метил, этил, предпочтительно метил, R¹⁶ - водород, метил.

Следующие соединения являются особенно предпочтительными: tBuOOC-CH₂-(D)Chg-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D)Chg-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph tBuOOC-CH₂-(D)Chg-Dep-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D)Chg-Dep-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,L)Cpg-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,L)Cheg-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,L)Cog-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,L)Nog-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,L)Adaala-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,L)4-MeCha-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,L)-MeCha-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,L)4-MeChg-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,L)3,3-Me₂Chg-Pyr-NH-CH₂-5- (2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,L)3,3-Me₂Cha-Pvr-NH-CH₂-5- (2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,L)4-iPrChg-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,1)3,4,5(MeO)₃Phe-Pyr-NH-CH₂-5- (2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,L)Chea-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D)Diphe-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,L) -Me₂Cha-Pyr-NH-CH₂- 5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,L)Adagly-Pyr-NH-CH₂-5- (2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,L)-1-Tic-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,L)Dch-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,L)4-iPrCha-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,L)-MeCha-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D,L)a-MeCha-Dep-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(N-Me)(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D)Cha-Dep-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-4-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D)Cha-Dep-NH-CH₂-4-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(3-am)-thioph HOOC-CH₂-(D)Cha-Dep-NH-CH₂-5-(3-am)-thioph HOOC-CH₂-(D)Chg-Pyr-NH-CH₂-5-(3-am)-thioph HOOC-CH₂-(D)Chg-Pyr-NH-CH₂-4-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH- CH₂-5-(2-am)-fur HOOC-CH₂-(D)Cha-Dep-NH-CH₂-5-(2-am)-fur HOOC-CH₂- (D)Cha-Pyr-NH-CH₂-4-(2-am)-fur HOOC-CH₂-(D)Cha-Dep-NH-CH₂-4-(2-am)-fur HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(3-am)-fur HOOC-CH₂-(D)Cha-Dep-NH-CH₂-5-(3-am)-fur HOOC-CH₂-(D)Chg-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-fur HOOC-CH₂-(D)Chg-Pyr-NH-CH₂-5-(3-am)-fur HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(1-Me-2-am)-pyrr HOOC-CH₂-(D)Chg-Pyr-NH- CH₂-5-(1-Me-2-am)-pyrr HOOC-CH₂-(D)Cha-Dep-NH-CH₂-5-(1-Me-2-am)- pyrr HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-4-(1-Me-2-am)-pyrr HOOC-CH₂- (D)Cha-Dep-NH-CH₂-4-(1-Me-2-am)-pyrr HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(1-Me-3-am)-pyrr HOOC-CH₂-(D)Cha-Dep-NH-CH₂-5-(1-Me-3-am)-pyrr HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am-3,4- Me₂)-thioph HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am-3-Me)-thioph HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am-4-Me)- thioph HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am-3-Me)-fur HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am-4-Me)-fur HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(3-am-2-Me)-fur HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-2-(5-am)-thiaz HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-2-(4-am)-thiaz HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-4-(2-am)-thiaz HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thiaz HOOC-CH₂-(D)Chg-Pyr-NH-CH₂-2-(5-am)-thiaz HOOC-CH₂-(D)Chg-Pyr-NH-CH₂-2-(4-am)-thiaz HOOC-CH₂-(D)Chg-Pyr-NH-CH₂-4-(2-am)-thiaz HOOC-CH₂-(D)Chg-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thiaz HOOC-CH₂-(D)Cha-Dep-NH-CH₂-2-(5-am)-thiaz HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-2-(4-am)-oxaz HOOC-CH₂-(D)Chg-Pyr-NH-CH₂-2-(4-am)-oxaz HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(3-am-1-Me)-pyraz HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-3-(5-am)-1,2,4-oxadiaz HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(3-am)-1,2,4-oxadiaz HOOC-CH₂-(D)Chg-Pyr-NH-CH₂-5-(3-am)-1,2,4-oxadiaz HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(3-am-1-Me)-1,2,4-triiaz HOOC-CH₂-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-fur HOOC-CH₂-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(1-Me-2-am)-pyrr (HOOC-CH₂)₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(2- am)-thioph (HOOC-CH₂)₂CH-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-thioph HOOC-CH₂-(D)Chg-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-1,3,4-thiadaz HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-1,3,4-thiadaz HOOC-CH₂-(D)Chg-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-1,3,4-oxadiaz HOOC-CH₂-(D)Cha-Pyr-NH-CH₂-5-(2-am)-1,3,4-oxadiaz Перечень условных сокращений, используемых в данной заявке: Adaala адамантилаланин Adagly адамантилглицин AIBN/АИБН азобисизобутиронитрил Ac ацетил Ala аланин am амидино Asp аспарагиновая кислота Aze азетидинкарбоновая кислота Bn бензил Boc трет.-бутоксикарбонил Bu бутил Cbz бензилоксикарбонил Cha циклогексилаланин Chea циклогептилаланин Cheng циклогептилглицин Chg циклогексилглицин Cog циклооктилглицин Cpa циклопентилаланин Cpg циклопентилглицин DC/TCX тонкослойная хроматография DCC/ДЦГК дициклогексилкарбодиимид Dch дициклогексилаланин Dcha дициклогексиламин DCM дихлорметан Dep 4,5-дегидропипеколиновая кислота DMF/ДМФА диметилформамид DIPEA диизопропилэтиламин Dpa дифенилаланин Diphe 2,5-дигидрофенилаланин Et этил Eq/экв эквивалент Gly глицин fur фуран ham гидроксиамидо HOSucc гидроксисукцинимид HPLC/ВЭЖХ высокоэффективная жидкостная хроматография Hyp гидроксипролин imi имидазол 2-lnd дигидроиндолкарбоновая кислота i-Pr изопропил Leu лейцин Lsg раствор Me метил -MeCha -метилциклогексилаланин -Me₂Cha 2-амино-3-циклогексил-3-метил-масляная кислота или- -диметилциклогексилаланин 4-MeCha (4-метилциклогекс-1-ил)аланин -MeCha (1-метилциклогекс-1-ил)аланин 3,3-Me₂Cha (3.3-диметилциклогекс-1-ил)аланин 4-MeChg (4-метилциклогексил-1-ил)глицин 3,3-Me₂Chg (3,3-диметилциклогекс-1-ил)глицин MPLC/СЭЖХ среднеэффективная жидкостная хроматография MTBE простой метил-трет.бутиловый эфир NBS/БСИ N-бромсукцинимид Nog норборнилглицин Oxadias 1,2,4 оксадиазол Oxas оксазол Ph фенил Phe фенилаланин 2Phi 2-пергидроиндолкарбоновая кислота Pic пипеколиновая кислота pico пиколил pim пиперидинилметил PPA ангидрид пропилфосфоновой кислоты Pro пролин Py пиридин Pyr 3,4-дегидропролин pyraz пиразол pyrr пиррол RT/KT комнатная температура RP-18 обратная фаза C-18 t/tret./tret. третичный tBu трет.-бутил ТВАВ/ТБАБ тетрабутиламмонийбромид TEA триэтиламин TFA/ФУК трифторуксусная кислота TFFA ангидрид трифторуксусной кислоты thiaz тиазол thioph тиофен THP тетрагидропиранил 1Tic 1-тетрагидроизохинолинкарбоновая кислота 3Tic 3-тетрагидроизохинолинкарбоновая кислота TOTU O-(циан-этоксикарбонилметилен)-амино-1-N, N, N'N',- тетраметилуронийтетрафтороборат triaz 1,2,3-триазол Z бензилоксикарбонил Дальнейшими объектами изобретения являются соединения, содержащие структурный элемент где E и D имеют вышеуказанное значение, а у атома азота структурного элемента E находятся атом водорода, защитная группа, или незамещенный алкильный остаток, в качестве составной части ингибиторов серинпротеазы и в особенности ингибиторов тромбина и калликреина, а также промежуточные соединения формул (IIа) и (IIб) A-B-E-D-CN (IIа) A-B-E-D-CSNH₂ (IIб) где A, B, E и D имеют вышеуказанное значение.

Соединения формулы (I) могут иметься в свободном виде или в виде солей с физиологически переносимыми кислотами. Примерами таких кислот являются следующие: соляная кислота, лимонная кислота, винная кислота, молочная кислота, фосфорная кислота, метансульфокислота, уксусная кислота, муравьиная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, янтарная кислота, гидрокси-янтарная кислота, серная кислота, глутаровая кислота, аспарагиновая кислота, пировиноградная кислота, бензойная кислота, глюкуроновая кислота, щавелевая кислота, аскорбиновая кислота и ацетилглицин.

Новые соединения формулы (I) можно использовать при следующих показаниях: - заболевания, патомеханизм которых непосредственно или косвенно основывается на протеолитическом действии тромбина, - заболевания, патомеханизм которых основывается на тромбинозависимой активации рецепторов и сигнальных трансдукций, - заболевания, которые сопутствуются стимуляцией [например, PA1-1, тромбоцитарным фактором роста (PDGF), P-селектином, 1 CAM-1, фактором ткани] или ингибированием (например, синтезом моноокиси азота в гладкомышечных клетках) экспрессии генов в соматических клетках, - заболевания, вызываемые митогенным действием тромбина, - заболевания, вызываемые тромбинозависимым изменением сократимости и проницаемости эпителиальных клеток (например, клеток эндотелий сосудов), - тромбинозависимые тромбоэмболические заболевания, такие, как, например, глубокий венозный тромбоз, эмболия легочной артерии, инфаркт миокарда или инсульт, мерцание предсердий, обмурация байпаса, - диссеминированное внутрисосудистое коагулирование (ДВС-синдром), - для реокклюзии и в целях сокращения времени реперфузии для комбинированного лечения вместе с тромболитическими средствами, такими, как стрептокиназа, урокиназа, проурокиназа, t-Pa, активатор антитромбоцитарной иммунной сыворотки, плазминогенные активаторы из слюнных желез животных, а также рекомбинантные и мутированные формы всех этих веществ, - появление ранней реокклюзии и позднего рестеноза после чрезкожной внутрипросветной коронарной ангиопластики, - тромбинозависимая пролиферация гладкомышечных клеток, - аккумуляция активного тромбина в центральной нервной системе (например, в случае болезни Альцгеймера), - опухолевые заболевания и адгезия и метастазирование опухолевых клеток.

Новые соединения можно использовать в особенности для лечения и профилактики тромбинозависимых тромбоэмболических заболеваний, как, например, глубокий венозный тромбоз, эмболия легочной артерии, инфаркт миокарда или инсульт и нестабильная стенокардия, далее для лечения диссеминированного внутрисосудистого коагулирования (ДВС-синдром). Далее они пригодны для комбинированного лечения вместе с тромболитическими средствами, такими, как стрептокиназа, урокиназа, проурокиназа, t-Pa, активатор антитромбоцитарной иммунной сыворотки и другие плазминогенные активаторы, в целях сокращения времени ре-перфузии и удлинения реокклюзии.

Дальнейшими предпочтительными областями применения являются предотвращение тромбинозависимой ранней реокклюзии и позднего рестеноза после чрезкожной внутрипросветной коронарной ангиопластики, предотвращение индуцируемой тромбином пролиферации гладномышечных клеток, предотвращение аккумуляции активного тромбина в центральной нервной системе (например, в случае болезни Альцгеймера), лечение опухолевых заболеваний и нарушение механизмов, приводящих к адгезии и метастазированию опухолевых клеток.

Новые соединения можно также использовать для покрытия искусственных поверхностей, таких, как мембраны гемодиализа и необходимые для этого системы мягких трубок и проводящие линии, а также оксигенаторов внесосудистой циркуляции, расширяющих элементов и сердечных клапанов.

Новые соединения можно применять далее в случае аболеваний, патомеханизм которых непосредственно или косвенно основывается на протеолитическом действии кининогеназ, в особенности калликреина, например, в случае воспалительных заболеваний, таких, как астма, панкреатит, ринит, артрит, крапивная лихорадка и другие воспалительные заболевания.

Предлагаемые согласно изобретению соединения можно вводить обычным образом перорально или парентерально (подкожно, внутривенно, внутримышечно, интраперитонеально, ректально). Их также можно вводить с помощью паров или спреев через носоглотку.

Дозировка зависит от возраста, состояния и массы пациента, а также от способа введения. Как правило, суточная доза активного вещества в расчете на одного субъекта составляет от 10 до 2000 мг при введении парентерально. Эту дозу можно вводить в виде двух-четырех разовых доз или один раз в день в виде лекарственной формы продленного действия.

Новые соединения можно использовать в обычных галеновых, твердых или жидких лекарственных формах, например, как таблетки, таблетки в целлофановой упаковке, капсулы, порошки, грануляты, драже, суппозитории, растворы, мази, кремы или спреи. Их можно получать обычным образом. Активные вещества при этом можно перерабатывать вместе с обычными галеновыми вспомогательными средствами, такими, как связующие таблеток, наполнители, консерванты, порофоры для таблеток, агенты регулирования текучести, мягчители, смачиватели, диспергаторы, эмульгаторы, растворители, средства для придания лекарственной форме пролонгированного действия, антиоксиданты и/или пропелленты (см. Н. Sucker и др. Фармацевтическая технология, изд. Thieme, Штуттгарт, 1978). Таким образом полученные лекарственные формы обычно содержат активное вещество в количестве от 0,1 до 99 мас. %.

Экспериментальная часть Соединения формулы (I) можно получать согласно схемам I - III.

Структурные элементы A, B, E и D предпочтительно строятся отдельно, а затем их вводят в пригодном защищенном виде (см. схемы I - III в конце описания).

Схема I описывает линейное строение молекулы (I) путем сочетания амина H-D-CN с M-защищенной аминокислотой P-E-OH с получением P-E-D-CN, отщепления N-концевой защитной группы с получением H-E-D-CN, сочетания с N-защищенной аминокислотой P-В-ОH с получением P-B-E- D-CN, отщепления защитной группы P с получением H-B-E-D-CN, последующего алкилирования с также защищенным структурным элементом (P)-A-U (U == уделяемая группа) или восстановительного алкилирования с (P)-A'-U (U = альдегид, кетон) или присоединения по Михаэлу к пригодному производному (P)-A''-C= C с получением (P)-A-B-E-D-CN. Превращение нитрильной функции в амидиногруппу осуществляется либо путем классического синтеза Пиннера (R. Boder, D.G. Neilson, Chem. Rev., 1962, 61. 179) либо путем модифицированного синтеза Пиннера, который протекает через образование соли сложного иминотиоэфира в качестве промежуточной стадии (Н. Vie-weg и др., Pharmazie, 1984, 39. 226) или прямо по методу A. Eschenmoser, Helv. Chimica Acta, 69. (1986), 1224. После этого в молекуле еще имеющиеся защитные группы отщепляют предпочтительно путем гидролиза в кислой среде.

В случае если структурный элемент D вводится в виде H-D-CONHg в синтез, то в одной из защищенных промежуточных стадий осуществляется дегидратация амидной функции до нитрильной функции или превращение до тиоамидных функций. Структурный элемент D можно альтернативно вводить в виде H-D-CSNH₂ в синтез.

Схема II описывает линейное строение молекулы 1 путем алкилирования, восстановительного аминирования или присоединения по Михаэлу H-P-В к соответственно пригодным незащищенным или защищенным структурным элементам A с получением (P)-A-В-Р, отщепления C-концевой защитной группы с получением (P)-A-В-ОH, сочетания с H-Е-Р с получением (P)-A-В-Е-Р, отщепления C-концевой защитной группы с получением (P)-A-В-Е-ОН, сочетания с H-D-CN с получением (P)-A-E-C-D-CN и превращения этого промежуточного продукта до конечного продукта аналогично схеме 1.

В случае если при соединениях (P)-A-В-P имеется еще свободная NH-функция у В, то последней еще до отщепления C-концевой защитной группы следует придавать пригодную защитную группу. Используемые в данном случае защитные группы должны быть ортогональными по отношению друг другу.

Вместо структурного элемента H-D-CN можно альтернативно использовать также H-D-CONH₂, H-D-CSNH₂, H-D-C(NH) NH₂, H-D-C(NP)NH₂, H-D-C(NP)NHP, причем в первом случае сочтенный промежуточный продукт (P-A-B-E-D-CONH₂ подвергается дегидратации до (P)-A-B-E-D-CN или же превращается прямо до (P)-A-B-E-D-CSNH₂.

Схема III описывает очень эффективный способ получения соединений 1 путем конвергентного синтеза. Соответственно защищенные структурные элементы (P)-A-В-ОН и H-E-D-CN сочетаются друг с другом, а образуемый промежуточный продукт (P)-A-B-E-D-CN превращается аналогично схеме I до конечного продукта.

Вместо H-E-D-CN можно альтернативно использовать также H-E-D-CONH₂ или H-E-D-CSNH₂, причем в первом случае сочтенный промежуточный продукт (P)-A-B-E-D-CONH₂ подвергается дегидратации до (P)-A-B-E-D-CN или же превращается до (P)-A-B-E-D-CSNH₂.

В качестве N-концевых защитных групп используют трет.- бутоксикарбонил, бензилоксикарбонил или 9-флуоренил- метоксикарбонил, предпочтительно трет. -бутоксикарбонил. C-концевыми защитными группами являются метил, трет.-бутил и бензил. В случае, если в молекуле имеются несколько защитных групп, то они должны быть ортогональными по отношению друг другу. Если промежуточные продукты содержат структурный элемент E, то бензилоксикарбонильные и бензиловые защитные группы являются непригодными.

Необходимые реакции сочетания, а также обычные реакции введения и удаления защитных групп осуществляют в стандартных условиях химии пептидов (см. М. Bodanszky, A. Bodanszky "The Practice of Peptide Synthesis", второе издание, изд. Springer, Гейдельберг, 1994 г.).

Трет. -бутоксикарбонильные защитные группы отщепляют с помощью раствора хлороводорода в диоксане или трифторуксусной кислоты в дихлорметане, бензилоксикарбонильные защитные группы отщепляют путем гидрогенолиза или с помощью фтороводорода. Омыление сложноэфирных функций осуществляют с помощью гидроксида лития в спиртовом растворителе или в смеси диоксана с водой. Сложный трет.-бутиловый эфир отщепляют с помощью трифторуксусной кислоты или с помощью смеси диоксана с соляной кислотой.

За протеканием реакций следят с помощью тонкослойной хроматографии, причем обычно используют следующие растворители: А. Смесь дихлорметана с метанолом в соотношении 95:5.

Б. Смесь дихлорметана с метанолом в соотношении 9:1.

В. Смесь дихлорметана с метанолом в соотношении 8:2.

Г. Смесь дихлорметана с метанолом и 50%-ной уксусной кислотой в соотношении 40:10:5.

Д. Смесь дихлорметана с метанолом и 50%-ной уксусной кислотой в соотношении 35:15:5.

Когда упоминают разделения с помощью колоночной хроматографии, эти разделения осуществляют на силикагеле при использовании вышеуказанных растворителей.

Разделения с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с обращенной фазой проводят при использовании смеси ацетонитрила с водой и уксуснокислого буфера.

Исходные соединения можно получать следующими способами: В качестве структурных элементов A используют для алкилирования, например, сложный трет.-бутиловый эфир - бромуксуной кислоты, сложный трет.-бутиловый эфир - бромпропионовой кислоты, сложный трет.-бутиловый эфир - бромпропионовой кислоты, сложный трет.-бутиловый эфир -броммасляной кислоты, сложный трет. -бутиловый эфир - броммасляной кислоты, защищенный ТНР бромметанол, защищенный ТНР -бромпропанол, -бром- -бутиролактон, для восстановительного аминирования, например, дигидроксиацетон, сложный ди-трет.-бутиловый эфир ацетондикарбоновой кислоты, а для присоединения по Михаэлу, например, сложный трет.-бутиловый эфир акриловой кислоты, сложный трет.-бутиловый эфир метакриловой кислоты, сложный ди-трет. -бутиловый эфир фумаровой кислоты. Указанные сложные трет.-бутиловые эфиры, если их нельзя приобретать в торговле, получают аналогично G. Uray, W. Lindner, Tetrahedron 1988, 44 4357-4362.

Структурные элементы B: Для общего и специального синтеза аминокислот в литературе описываются разнообразные возможности (см. к этому, в частности, обзор в книге Губен-Вейл, том E 16 d, часть 1, стр. 406 и последующие).

Часто используемыми эдуктами являются этиловый эфир бензофенониминоуксусной кислоты, диэтиловый эфир ацетамидомалоновой кислоты и этиловый эфир изонитрилуксусной кислоты.

Различные производные глицина и аланина получают, например, исходя из этилового эфира изонитрилуксусной кислоты и соответствующего кетона или альдегида (см. H. - J. Pratorius, J. Ftossdorf, M.- R. Kula, Chem Ber., 108. 3079 (1975)).

Синтезы циклооктилглицина, 2-норборнилглицина, адамантилаланина, --метил-циклогексилаланина, 4- изопропилциклогекс-1-ил-аланина, 4-метилциклогекс-1-ил-аланин и 4- метилциклогекс-1-илглицин осуществляют через соответствующие этиловые эфиры 2-формиламиноакриловой кислоты (U. Schollkopf и R. Meyer, Liebigs Ann. Chem., 1174 (1977)), исходя из этилового эфира изоцианоуксусной кислоты с соответствующими карбонильными соединениями, как циклооктанон, 2-норборнанон, 1-формиладамантан, 1-формил-1-метилциклогексан и 4-метилциклогексанон, по следующим общим методикам: Общая методика синтеза этилового эфира 2-формиламиноакриловой кислоты К 100 ммоль трет.-бутилата калия в 150 мл тетрагидрофурана при температуре от 0 до -10^oC прикапывают раствор 100 ммоль этилового эфира изоциаоноуксусной кислоты в 50 мл тетрагидрофурана. Спустя 15 мин при той же температуре добавляют 100 ммоль соответствующего карбонильного соединения в 50 мл тетрагидрофурана, реакционную смесь медленно доводят до комнатной температуры и растворитель удаляют на ротационном испарителе. Остаток смешивают с 50 мл воды, 100 мл уксусной кислоты и 100 мл дихлорметана и продукт экстрагируют дихлорметаном. Дихлорметановую фазу сушат над сульфатом натрия и растворитель снимают на ротационном испарителе. Образующиеся почти в чистом состоянии продукты в случае необходимости можно очищать далее с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (растворитель: смесь диэтилового эфира с петролейным эфиром).

Общая методика синтеза гидрохлоридов аминокислот из этиловых эфиров 2-формиламиноакриловых кислот 100 ммоль этилового эфира 2-формиламиноакриловой кислоты в присутствии 10%-ного палладия-на-угле в 200 мл ледяной уксусной кислоты гидрируют с помощью водорода вплоть до полного превращения. Затем катализатор отфильтровывают, уксусную кислоту насколько возможно удаляют в ротационном испарителе и остаток в 200 мл полуконцентрированной соляной кислоты кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч. Соляную кислоту удаляют на ротационном испарителе, продукт высушивают при 50^oC в вакууме и дополнительно промывают его многократно диэтиловым эфиром. Гидрохлориды получают в виде слабоокрашенных кристаллов.

Исходя из 18,9 г (150 ммоль) циклооктанона получают 25,0 г циклооктилглицин-гидрохлорида. Исходя из 16,5 г (150 ммоль) 2-норборнанона получают 26,6 г 2-норборнилглицин-гидрохлорида. Исходя из 19,7 г (120 ммоль) 1-формиладамантана получают 26,0 г адамантилаланин-гидрохлорида. Исходя из 12,6 г (100 ммоль) 1- формил-1-метилциклогексана получают 16,6 г -метилциклогексил- аланин-гидрохлорида. Исходя из 16,8 г (150 ммоль) 4- метилциклогексанона получают 25,9 г метилциклогексилглицин- гидрохлорида. Исходя из 15 г транс-1-формил-4-метилциклогексана получают 18 г транс-4-метилциклогекс-1-илаланин-гидрохлорида. Исходя из 9 г 3,3-диметил-1-формилциклогексана получают 10 г 3,3- диметилциклогекс-1-илаланин-гидрохлорида.

Требуемый для синтеза альдегид, 1-формил-3,3- диметилциклогексан получают по методу Moskal и Lensen (Rec. Trav. Chim. Pays-Bas, 137-141, 106. (1987)).

Раствор н. -бутиллития в н.-гексане (72 мл, 115 ммоль) прикапывают при температуре -60^oC к перемешанному раствору диэтилизоцианометилфосфоната (17 мл, 105 ммоль) в 280 мл безводного диэтилэфира в течение 10 мин. Образовавшуюся суспензию при -60^oC дополнительно перемешивают в течение 15 мин, затем к смеси прибавляют раствор 3,3-диметилциклогексанона (13 г, 105 ммоль) в 100 мл безводного диэтилового эфира в течение 10 мин, при этом температуру держат ниже -45^oC. Реакционную смесь доводят до температуры 0^oC, перемешивают при той же температуре в течение 90 мин и осторожно добавляют к смеси 150 - 200 мл 38%-ной водной соляной кислоты. Для осуществления полного гидролиза сильно перемешивают при комнатной температуре в течение 15 ч. Реакционную фазу отделяют, промывают водой, насыщенным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным раствором хлористого натрия, взятыми в количестве по 200 мл. Затем сушат над сульфатом магния, отфильтровывают и сгущают на ротационном испарителе с целью удаления растворителей. Получаемый остаток используют без дальнейшей очистки в качестве исходного материала для синтеза аминокислоты.

Трет.-бутилоксикарбонил-(D)- -метилциклогексилаланин 3,4 г (12,2 ммоль) Вос-(D)- -метил-Phe-ОH в 100 мл метанола при температуре 50^oC в присутствии 250 г 5%-ного родия на оксиде алюминия гидрируют с помощью водорода в течение 20 ч при давлении 10 бар. После отфильтровывания и удаления растворителя получают 2,8 г Вос-(D)- -метил-Cha-OH.

¹H-ЯМР-спектр (дейтерированный диметилсульфоксид, в м.д.): 12 (очень широкий сигнал, COOH): 1,7 - 0,8 (25 H (с, Вос), 1,30 (с, метил).

Boc-(3-Ph)-Pro-OH синтезируют согласно J.Y.L Chung и др. (J.Y.L Chung и др., J. Org. Chem. 55, 270 (1990)).

Получение Вос-1-тетралинилглицина Вос-1-тетралинилглицин получают из 1,2-дигидронафталина. 1,2- дигидронафталин сначала с помощью бромоводорода в 1- тетралилбромид (аналогично J. Med. Chem. 37, 1586 (1996)). Затем бромид вводят во взаимодействие с диэтиловым эфиром ацетамидомалоновой кислоты, проводят гидролитическое расщепление и полученную -аминокислоту в стандартных условиях переводят в Вос-защищенную форму. Другая возможность получения описывается E. Reimann и D. Voss, Arch. Pharm. 310, 102 (1977).

Получение Boc-1-(D,L)Tic-OH Boc-1-(D,L)Tic-OH получают по методике R.T. Shuman и др., J. Med. Chem., 36, 314 (1993).

Получение Boc-(D.L)Dch-OH Boc-(D, L)Dpa-OH (1 ммоль) в 12 мл метанола вместе с каталитическими количествами 5%-ного родия на оксиде алюминия гидрируют при давлении 5 бар. После отфильтровывания и удаления растворителя в вакууме получают с количественным выходом продукт.

Получение циклогептилглицина, циклопентилглицина, 4- изопропилциклогексилглицина и 3,3-диметилциклогексилглицина Получение этих аминокислот осуществляют путем взаимодействия циклогептанона, циклопентанона, 4-изопропилциклогексанона или 3,3-диметилциклогексанона с этиловым эфиром изонитрилуксусной кислоты согласно методике H.-J. Pratorius, J. Flossdorf, М. Kula, Chem. Ber., 108. 3079 (1985)).

Получение H-D,L-Chea-OH 4,0 г (19,39 ммоль) циклогептилметилметансульфоната, пол