Иммунотерапевтические имиды/амиды в качестве ингибиторов фдэ iv и фно

Реферат

 

Изобретение относится к новым соединениям формулы I, где R1 является фенилом, замещенным одним или более чем одним заместителем, каждым выбранным независимо от другого из алкокси от 1 до 10 атомов углерода, циклоалкокси от 3 до 10 атомов углерода; R2 является Н, алкилом от 1 до 8 атомов углерода, бензилом; R3 является циклоалкиленом от 4 до 9 атомов углерода, о-фениленом, незамещенным или замещенным одним или более чем одним заместителем, каждым выбранным независимо от другого из нитро, амино; R4 является -СО-, -СН2-; n = 2; при условии, что соединение формулы I не может представлять собой 3-фталимидо-3-(3',4'-диметоксифенил)пропан-1-ол. Эти соединения обладают ингибирующей активностью в отношении ФДЭ IV и ФНО и благодаря этому могут быть использованы в качестве иммунотерапевтических ингибиторов. 5 с. и 8 з.п. ф-лы.

Эта заявка является частичным продолжением заявки США N 08/366667, зарегистрированной 30 декабря 1994 года и находящейся на рассмотрении.

Предпосылки изобретения Настоящее изобретение относится к способу снижения уровня ФНО и ингибирования фосфодиэстеразы у млекопитающего и к соединениям и композициям, полезным для этого.

ФНО , фактор некроза опухоли , является цитокином, который высвобождается, прежде всего, мононуклеарными фагоцитами в ответ на различные иммуностимуляторы. При введении животным или людям он вызывает воспаление, лихорадку, сердечно-сосудистые эффекты, кровоизлияние, коагуляцию и реакции острой фазы, подобные тем, которые наблюдаются при острых инфекциях и шоковых состояниях.

Чрезмерное и нерегулярное продуцирование ФНО вовлечено в ряд болезненных состояний. Они включают в себя эндотоксемию и/или синдром токсического шока [Tracey et al., Nature 330, 662-664 (1987) and Hinshaw et al., Circ. Shock 30, 279-292 (1990)]; кахексию [Dezube et al., Lancet, 335 (8690), 662 (1990)] и респираторный дистресс-синдром взрослых, где в легочных аспиратах пациентов, страдающих респираторным дистресс-синдромом взрослых, была обнаружена концентрация ФНО в избытке 12000 пг/мл [Millar et al., Lancet 2 (8665), 712-714 (1989)]. Системное вливание рекомбинантного ФНО также приводило к изменениям, обычно наблюдаемым при респираторном дистресс-синдроме взрослых [Ferrai-Baliviera et al., Arch. Surg. 124(12), 1400-1405(1989)].

По-видимому, ФНО вовлечен в заболевания, связанные с резорбцией кости, в том числе артриты, где было определено, что, будучи активированными, лейкоциты продуцируют активность в отношении резорбции кости и есть данные, которые подтверждают, что ФНО вносит вклад в эту активность [Bertolini et al. , Nature 319, 516-518 (1986) and Johnson et al., Endocrinology 124 (3), 1424-1427 (1989)]. Было определено, что ФНО стимулирует резорбцию кости и ингибирует остеогенез in vitro и in vivo посредством стимуляции образования остеокласта и активации совместно с ингибированием функции остеобласта. Хотя ФНО может быть вовлечен во многие заболевания, сопровождающиеся резорбцией кости, в том числе артрит, наиболее тесная связь с заболеванием - это связь между продуцированием ФНО тканями опухоли или хозяина и злокачественностью, ассоциированной с гиперкальцемией [Calci. Tissue Int. (US) 46 (Suppl), S3-10 (1990)]. При реакции трансплантат против хозяина повышенный уровень ФНО в сыворотке связывали с главным осложнением острых аллогенных трансплантатов костного мозга [Holler et al. , Blood, 75(4), 1011- 1016 (1990)].

Церебральная малярия представляет собой летальный сверхострый неврологический синдром, связанный с высоким уровнем ФНО в крови, и является наиболее тяжелым осложнением, встречающимся у малярийных пациентов. Уровень ФНО в сыворотке коррелирует непосредственно с тяжестью заболевания и позволяет прогнозировать у пациентов острые приступы малярии [Grau et al., N.Engl.J. Med. 320 (24), 1586-1591 (1989)].

Кроме того, ФНО играет определенную роль в области хронических легочных воспалительных заболеваний. Отложение частиц кремнезема приводит к силикозу, заболеванию прогрессирующей респираторной недостаточности, вызванному фиброзной реакцией. Антитела к ФНО полностью блокировали индуцируемый кремнеземом фиброз легкого у мышей [Pignet et al., Nature, 344:245-247 (1990)] . Продуцирование высокого уровня ФНО (в сыворотке и в выделенных макрофагах) было продемонстрировано на животных моделях фиброза, индуцированного кремнеземом и асбестом [Bissonnette et al., Inflammation 13 (3), 329-339 (1989)]. Также было обнаружено, что альвеолярные макрофаги пациентов с легочным саркоидозом спонтанно высвобождают огромное количество ФНО по сравнению с макрофагами нормальных доноров [Baughman et al., J.Lab.Clin.Med. 115 (1), 36-42 (1990)].

ФНО также вовлечен в воспалительную реакцию, которая является следствием реперфузии, так называемой реперфузионной травмы, и является основной причиной повреждения ткани в результате потери кровопотока [Vedder et al. , PNAS 87, 2643-2646 (1990)]. ФНО также изменяет свойства клеток эндотелия и обладает прокоагулянтной активностью, такой как продуцирование увеличения прокоагулянтной активности тканевого фактора и супрессия метаболизма антикоагулянтного белка C, а также подавление экспрессии тромбомодулина [Sherry et al., J.Cell Biol. 107, 1269-1277 (1988)]. ФНО обладает провоспалительной активностью, которая наряду с ранним продуцированием (на начальной стадии воспалительного процесса) делает его вероятным медиатором повреждения ткани при нескольких важных заболеваниях, включая, но не ограничиваясь ими, инфаркт миокарда, инсульт и циркуляторный шок. Особое значение может иметь ФНО -индуцированная экспрессия адгезионных молекул, таких как фактор межклеточной адгезии (ICAM) или фактор адгезии эндотелиальных лейкоцитов (ELAM) на эндотелиальных клетках [Munro et al., Am.J.Path. 135(1), 121-132 (1989)].

Более того, в настоящее время известно, что ФНО является сильным активатором репликации ретровирусов, включая активацию ВИЧ-1 [Duh et al., Proc. Nat. Acad. Sci. 86, 5974-5978 (1989); Poll et al., Proc. Nat. Acad. Sci. 87, 782-785 (1990); Monto et al., Blood 79, 2670 (1990); Clouse et al., Immunol. 142, 421-438 (1989); Poll et al., AIDS Res. Hum. Retrovirus, 191-197 (1992)] . СПИД является результатом инфицирования вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ). Идентифицировано по меньшей мере три типа или штамма ВИЧ, т.е. ВИЧ-1, ВИЧ-2 или ВИЧ-3. Как следствие ВИЧ-инфекции, Т-клетки, ответственные за иммунитет, ослаблены, и на этом фоне у инфицированных ВИЧ-больных наблюдаются тяжелые условно-патогенные инфекции и/или необычные новообразования. Проникание ВИЧ в Т-лимфоциты требует активации Т-лимфоцитов. Другие вирусы, такие как ВИЧ-1, ВИЧ-2, инфицируют Т-лимфоциты после активации Т-клеток, и такая экспрессия белка вируса и/или репликация опосредованы или поддерживаются такой активацией Т-клеток. Как только активированный Т-лимфоцит инфицируется ВИЧ, этот Т-лимфоцит должен продолжать оставаться в активированном состоянии, чтобы дать возможность для экспрессии гена ВИЧ и/или репликации ВИЧ. Цитокины, конкретно ФНО , вовлечены в экспрессию белка ВИЧ и/или репликацию вируса, опосредованным активированными Т-клетками, через участие в процессе поддержания активации Т-лимфоцитов. Следовательно, устранение активности цитокинов, такое как предотвращение или ингибирование продуцирования цитокинов, особенно ФНО , у ВИЧ инфицированного лица способствует ограничению поддержания Т-лимфоцита, вызванного ВИЧ-инфекцией.

Моноциты, макрофаги и другие родственные клетки, такие как купферовские клетки и глиальные клетки, также вовлечены в поддержание ВИЧ-инфекции. Эти клетки подобно Т-клеткам являются мишенями для вирусной репликации, и уровень вирусной репликации зависит от состояния активации этих клеток [Rosenberg et al., The Immunopathogenesis of HIV Infection, Advances in Immunology, 57 (1989)] . Показано, что цитокины, такие как ФНО , активируют репликацию ВИЧ в моноцитах и/или макрофагах [Poli et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 87, 782-784 (1990)] , поэтому предотвращение или ингибирование продуцирования активности цитокина способствует ограничению развития ВИЧ, как это было изложено выше в отношении Т-клеток. В результате дополнительных исследований ФНО был идентифицирован как общий фактор в активации ВИЧ in vitro, и был предложен четкий механизм воздействия через ядерный регуляторный белок, обнаруженный в цитоплазме клеток [Osborn, et al., PNAS 86, 2336-2340]. Это доказательство предполагает, что снижение синтеза ФНО может иметь противовирусный эффект при ВИЧ-инфекциях путем снижения транскрипции и, тем самым, продуцирования вируса.

Репликация латентного ВИЧ в Т-клетках и линиях макрофагов может быть индуцирована ФНО [Folks et al., PNAS 86, 2365-2368 (1989)]. Предложен молекулярный механизм для индуцирующей вирус активности посредством способности ФНО активировать ген-регуляторный белок (NFkB), обнаруженный в цитоплазме клеток, который стимулирует ВИЧ-репликацию посредством связывания с вирусной ген-регуляторной последовательностью (LTR) [Osborn et al., PNAS 86, 2336-2340 (1989)] . При кахексии, ассоциированной со СПИДом или раком, предполагается повышенный уровень ФНО в сыворотке и высокий уровень спонтанного продуцирования ФНО в моноцитах периферической крови пациентов [Wright et al. , J.lmmunol. 141 (1), 99-104 (1988); Eur J. Gastroen Hepat, 6 (9), 821-829 (1994); J.Exp. Med., 1121-1227 (1988)].

ФНО , играя различные роли, вовлечен в другие вирусные инфекции, такие как вирус цитомегалии, вирус гриппа, аденовирус, семейство вирусов герпеса, по причинам, аналогичным отмеченным выше.

Таким образом, предсказывают, что предотвращение или ингибирование продуцирования или воздействия ФНО является сильной терапевтической стратегией для многих воспалительных, инфекционных, иммунологических или злокачественных заболеваний. Они включают в себя, но не ограничиваются ими, септический шок, сепсис, эндотоксический шок, гемодинамический шок и синдром сепсиса, постишемическое реперфузионное повреждение, микобактериальную инфекцию, менингиты, псориаз, застойную сердечную недостаточность, фиброзное заболевание, кахексию, отторжение трансплантата, рак, аутоиммунное заболевание, условно-патогенные инфекции при СПИДе, ревматоидный артрит, ревматоидный спондилит, остеоартрит, другие артритные состояния, воспалительные кишечные заболевания, болезнь Крона, язвенный колит, множественный склероз, системную красную волчанку, узловую эритему при лепре (ENL), астму, радиационное повреждение, гипероксическое альвеолярное повреждение. Усилия, направленные на подавление влияния ФНО , имеют диапазон от использования стероидов, таких как дексаметазон и преднизолон, до использования как моноклональных, так и поликлональных антител [Beutler et al., Science 234, 470-474 (1985); WO 92/11383; Clinical and Experimental Rheumatology 1993, 11 (Suppl. 8), 5173-5175; PNAS 1992, 89, 9784-88; Annals of the Rheumatic Diseases 1990, 49, 480-486].

Ядерный фактор kB (NFkB) является плейотропическим транскрипционным активатором [Lenardo, et al., Cell 1989,58,227-29]. NFkB как транскрипционный активатор вовлечен в различные заболевания и воспалительные состояния, и, как полагают, регулирует уровень цитокинов, включая, но не ограничиваясь им, ФНО , а также активирует транскрипцию ВИЧ [Dbaibo, et al., J. Biol.Chem. 1993, 17762-66; Duh et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 1989, 86, 5974-78; Bachelerie et al. , Nature 1991, 350, 709-12; Boswas et al. J. Acquired Immune Deficiency Syndrome 1993, 6, 778-786; Suzuki et al. Biochem. and Biophys. Res. Comm. 1993, 193, 277-83; Suzuki et al., Biochem and Biophys. Res. Comm. 1992, 189, 1709-15; Suzuki et al., Biochem. Mol. Bio. Int, 1993, 31 (4), 693-700; Shakhov et al. 1990, 171, 35-47; and Staal et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1990, 87, 9943-47]. Таким образом, ингибирование связывания NFkB может регулировать транскрипцию гена(ов) цитокина и посредством этого модулирования и других механизмов является полезным для подавления множества болезненных состояний. Соединения по изобретению способны ингибировать действие NFkB в ядрах и, таким образом, полезны при лечении различных заболеваний, включая, но не ограничиваясь ими, ревматоидный артрит, ревматоидный спондилит, остеоартрит, другие артритные состояния, септический шок, сепсис, эндотоксический шок, заболевание трансплантат против хозяина, истощение, болезнь Крона, язвенный колит, множественный склероз, системную красную волчанку, ENL при лепре, ВИЧ, СПИД, условно-патогенные инфекции при СПИДе.

Уровни ФНО и NFkB находятся под влиянием взаимной обратной связи. Как отмечено выше, соединения по изобретению воздействуют на уровень как ФНО , так и NFkB. В настоящее время, однако, не известно, как соединения по изобретению регулируют уровни ФНО и NFkB или обоих.

Многие клеточные функции могут быть опосредованы уровнем аденозина 3', 5'-циклического монофосфата (цАМФ). Такие клеточные функции могут вносить вклад в воспалительные состояния и заболевания, включая астму, воспаление и другие состояния [Lowe and Cheng, Drugs of the Future, 17(9), 799-807, 1992] . Было показано, что повышение уровня цАМФ в воспалительных лейкоцитах ингибирует их активацию и, после этого, высвобождение воспалительных медиаторов. Повышенный уровень цАМФ также ведет к релаксации гладкой мышцы дыхательных путей.

Первичный клеточный механизм инактивации цАМФ состоит в расщеплении цАМФ семейством изоферментов, именуемых циклическими нуклеотидными фосфодиэстеразами (ФДЭ) [Beavo and Reitsnyder, Trends in Pharm., 11, 150-155, 1990]. Известно семь членов семейства ФДЭ. Признано, например, что ингибирование ФДЭ типа IV особенно эффективно как для ингибирования высвобождения воспалительного медиатора, так и для релаксации гладкой мышцы дыхательных путей [Verghese, et al. , Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 272 (3), 1313-1320, 1995]. Так, соединения, которые специфично ингибируют ФДЭ IV, смогут проявлять желаемое ингибирование воспаления и релаксации гладкой мышцы дыхательных путей с минимумом побочных эффектов, таких как сердечно-сосудистые или антитромбоцитарные эффекты. Ингибиторы ФДЭ IV, используемые в настоящее время, не обладают избирательным действием в приемлемых терапевтических дозах.

Соединения по настоящему изобретению полезны для ингибирования фосфодиэстераз, в частности ФДЭ III и ФДЭ IV, и для лечения болезненных состояний, опосредованных ими.

Подробное описание изобретения Настоящее изобретение основано на открытии того, что класс неполипептидных имидов/амидов, более полное описание которых приведено в этом документе, вероятней всего ингибирует действие ФНО .

Настоящее изобретение относится к соединениям общей формулы: в которой R1 является (1) нормальным, разветвленным или циклическим замещенным или незамещенным алкилом от 1 до 12 атомов углерода; (2) фенилом или фенилом, замещенным одним или более чем одним заместителем, где каждый заместитель выбран независимо от другого из нитро, циано, трифторметила, карбэтокси, карбометокси, карбопропокси, ацетила, карбамоила, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, замещенного амино, ациламино, алкил(диалкил)амино, алкила от 1 до 10 атомов углерода, циклоалкила от 3 до 10 атомов углерода, бициклоалкила от 5 до 12 атомов углерода, алкокси от 1 до 10 атомов углерода, циклоалкокси от 3 до 10 атомов углерода, бициклоалкокси от 5 до 12 атомов углерода, или галогена-; R2 является -H, алкилом от 1 до 8 атомов углерода, бензилом, пиридилметилом или алкоксиметилом; R3 является (1) этиленом; (2) виниленом; (3) разветвленным алкиленом от 3 до 10 атомов углерода; (4) разветвленным алкениленом от 3 до 10 атомов углерода; (5) циклоалкиленом от 4 до 9 атомов углерода, незамещенным или замещенным одним или более чем одним заместителем, каждым выбранным независимо от другого из нитро, циано, трифторметила, карбэтокси, карбометокси, карбопропокси, ацетила, карбамоила, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, замещенного аминоалкила от 1 до 6 атомов углерода; замещенного аминоацила от 1 до 6 атомов углерода; алкила от 1 до 10 атомов углерода, алкокси от 1 до 12 атомов углерода, или галогена-; (6) циклоалкениленом от 4 до 9 атомов углерода, незамещенным или замещенным одним или более чем одним заместителем, каждым выбранным независимо от другого из нитро, циано, трифторметила, карбэтокси, карбометокси, карбопропокси, ацетила, карбамоила, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, замещенного аминоалкила от 1 до 6 атомов углерода; замещенного аминоацила от 1 до 6 атомов углерода; алкила от 1 до 10 атомов углерода, алкокси от 1 до 12 атомов углерода, или галогена-; (7) о-фениленом, незамещенным или замещенным одним или более чем одним заместителем, каждым выбранным независимо от другого из нитро, циано, трифторметила, карбэтокси, карбометокси, карбопропокси, ацетила, карбамоила, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, замещенного аминоалкила от 1 до 6 атомов углерода; замещенного аминоацила от 1 до 6 атомов углерода; алкила от 1 до 10 атомов углерода, алкокси от 1 до 12 атомов углерода, или галогена-; (8) нафтилом; или (9) пиридилом; R4 является -CX-, -GH2- или -CH2CX-; X является O или S; и n равно 0, 1, 2 или 3.

Первый предпочтительный подкласс формулы II относится к соединениям, в которых R3 является о-фениленом, где: R1 является 3,4-диэтоксифенилом или 3-этокси-4-метоксифенилом, а R4 является -СО-, -CH2- или -CH2CO-.

Типичные соединения по изобретению включают в себя 3-фталимидо-3-(3',4'-диметоксифенил)пропан-1-ол; 2-фталимидо-2-(3',4'-диметоксифенил)этанол; 3-фталимидо-3-(3',4'-диэтоксифенил)пропан-1-ол; 3-фталимидо-3-(3',4'-диметоксифенил)-1-метоксипропан; 2-фталимидо-2-(3',4'-диметоксифенил)-1-метоксиэтан; 3-фталимидо-3-(3',4'-диэтоксифенил)-1-метоксипропан; 3-фталимидо-3-(3',4'-диметоксифенил)-1-этоксипропан; 3-фталимидо-3-(3',4'-диметоксифенил)-1-(3-пиридилметокси)пропан; 3-фталимидо-3-(3',4'-диэтоксифенил)-1-(3-пиридилметокси)пропан; З-фталимидо-3-нафтилпропан-1-ол; 3-фталимидо-3-(3',4'-диэтилфенил)пропан-1-ол; 3-фталимидо-3-(3',4'-дипропилфенил)пропан-1-ол; 3-фталимидо-3-(3',4'-диэтилфенил)-1-метоксипропан; 3-фталимидо-3-(3',4'-диэтилфенил)-1-этоксипропан; 3-фталимидо-3-циклогексил-1-метоксипропан; 3-фталимидо-3-(3',4'-диэтилциклогексил)-1-метоксипропан; 3-(1'-оксоизоиндолинил)-3-(3',4'-диметоксифенил)пропан-1-ол; 2-(1'-оксоизоиндолинил)-2-(3',4'-диметоксифенил)этанол; 3-(1'-оксоизоиндолинил)-3-(3',4'-диэтоксифенил)пропан-1-ол; 3-(1'-оксоизоиндолинил)-3-(3',4'-диметоксифенил)-1-метоксипропан; 2-(1'-оксоизоиндолинил)-2-(3',4'-диметоксифенил)-1-метоксиэтан; 3-(1'-оксоизоиндолинил)-3-(3',4'-диэтоксифенил)-1-метоксипропан; 3-(1'-оксоизоиндолинил)-3-(3',4'-диметоксифенил)-1-этоксипропан; 3-(1'-оксоизоиндолинил)-3-(3', 4'-диметоксифенил)-1-(3- пиридилметокси)пропан; 3-(1'-оксоизоиндолинил)-3-(3', 4'-диэтоксифенил)-1-(3-пиридилметоксил) пропан; 3-(1'-оксоизоиндолинил)-3-нафтилпропан-1-ол; 3-(1'-оксоизоиндолинил)-3-(3',4'-диэтилфенил)пропан-1-ол; 3-(1 '-оксоизоиндолинил)-3-(3',4'-дипропилфенил)пропан-1-ол; 3-(1'-оксоизоиндолинил)-3-(3',4'-диэтилфенил)-1-метоксипропан; 3-(1'-оксоизоиндолинил)-3-(3',4'-диэтоксифенил)-1-этоксипропан; 3-фталимидо-3-(3'-этокси-4'-метоксифенил)пропан-1-ол; 3-фталимидо-3-(3'-этокси-4'-метоксифенил)-1-метоксипропан; 3-фталимидо-3-(3'-пропокси-4'-метоксифенил)пропан-1-ол; 3-фталимидо-3-(3'-пропокси-4'-метоксифенил)-1-метоксипропан; 3-фталимидо-3-(3'-циклопентокси-4'-метоксифенил)пропан-1-ол; 3-фталимидо-3-(3'-циклопентокси-4'-метоксифенил)-1-метоксипропан; 3-фталимидо-3-(3'-изопропокси-4'-метоксифенил)пропан-1-ол; 3-фталимидо-3-(3'-изопропокси-4'-метоксифенил)-1-метоксипропан; 3-фталимидо-3-(3'-этокси-4'-этилфенил)пропан-1-ол; 3-фталимидо-3-(3'-этокси-4'-этилфенил)-1-метоксипропан; 3-(1'-оксоизоиндолинил)-3-(3'-этокси-4'-метоксифенил)-1-метоксипропан; 3-(1'-оксоизоиндолинил)-3-(3'-пропокси-4'-метоксифенил)пропан-1-ол; 3-(1'-оксоизоиндолинил)-3-(3'-пропокси-4'-метоксифенил)- 1-метоксипропан; 3-(1 '-оксоизоиндолинил)-3-(3'-циклопентокси-4'-метоксифенил)пропан-1-ол; 3-(1'-оксоизоиндолинил)-3-(3'-циклопентокси-4'-метоксифенил)-1- метоксипропан; 3-(1'-оксоизоиндолинил)-3-(3'-изопропокси-4'-метоксифенил)пропан-1-ол; 3-(1'-оксоизоиндолинил)-3-(3'-изопропокси-4'-метоксифенил)-1- метоксипропан; 3-(1'-оксоизоиндолинил)-3-(3'-этокси-4'-этилфенил)пропан-1-ол; 3-(1'-оксоизоиндолинил)-3-(3'-этокси-4'-этилфенил)-1-метоксипропан; 3-(3-аминофталимидо)-3-(3'-этокси-4'-метоксифенил)-1-метоксипропан; 3-(3-аминофталимидо)-3-(3'-пропокси-4'-метоксифенил)пропан-1-ол; 3-(3-аминофталимидо)-3-(3'-пропокси-4'-метоксифенил)-1-метоксипропан; 3-(3-аминофталимидо)-3-(3'-циклопентокси-4'-метоксифенил)пропан-1-ол; 3-(3-аминофталимидо)-3-(3'-циклопентокси-4'-метоксифенил)-1- метоксипропан: 3-(3-аминофталимидо)-3-(3'-изопропокси-4'-метоксифенил)пропан-1-ол; 3-(3-аминофталимидо)-3-(3'-изопропокси-4'-метоксифенил)-1-метоксипропан; 3-(3-аминофталимидо)-3-(3'-этокси-4'-этилфенил)пропан-1-ол; 3-(3-аминофталимидо)-3-(3'-этокси-4'-этилфенил)-1-метоксипропан; 3-(3-гидроксифталимидо)-3-(3'-этокси-4'-метоксифенил)-1- метоксипропан; 3-(3-гидроксифталимидо)-3-(3'-пропокси-4'-метоксифенил)пропан-1-ол; 3-(3-гидроксифталимидо)-3-(3'-пропокси-4'-метоксифенил)-1-метоксипропан; 3-(3-гидроксифталимидо)-3-(3'-циклопентокси-4'-метоксифенил)пропан-1-ол; 3-(3-гидроксифталимидо)-3-(3'-циклопентокси-4'-метоксифенил)-1- метоксипропан; 3-(3-гидроксифталимидо)-3-(3'-изопропокси-4'-метоксифенил)пропан-1-ол; 3-(3-гидроксифталимидо)-3-(3'-изопропокси-4'-метоксифенил)-1- метоксипропан; 3-(3-гидроксифталимидо)-3-(3'-этокси-4'-этилфенил)пропан-1-ол; 3-(3-гидроксифталимидо)-3-(3'-этокси-4'-этилфенил)-1-метоксипропан; 3-гомофталимидо-3-(3'-этокси-4'-метоксифенил)-1-метоксипропан; 3-гомофталимидо-3-(3'-пропокси-4'-метоксифенил)пропан-1-ол; 3-гомофталимидо-3-(3'-пропокси-4'-метоксифенил)-1-метоксипропан; 3-гомофталимидо-3-(3'-циклопентокси-4'-метоксифенил)пропан-1-ол; 3-гомофталимидо-3-(3'-циклопентокси-4'-метоксифенил)-1-метоксипропан; 3-гомофталимидо-3-(3'-изопропокси-4'-метоксифенил)пропан-1-ол; 3-гомофталимидо-3-(3'-изопропокси-4'-метоксифенил)-1-метоксипропан; 3-гомофталимидо-3-(3'-этокси-4'-этилфенил)пропан-1-ол; 3-гомофталимидо-3-(3'-этокси-4'-этилфенил)-1-метоксипропан; 3-(4-аминофталимидо)-3-(3'-этокси-4'-метоксифенил)-1-метоксипропан; 3-(4-аминофталимидо)-3-(3'-пропокси-4'-метоксифенил)пропан-1-ол; 3-(4-аминофталимидо)-3-(3'-пропокси-4'-метоксифенил)-1-метоксипропан; 3-(4-аминофталимидо)-3-(3'-циклопентокси-4'-метоксифенил)пропан-1-ол; 3-(4-аминофталимидо)-3-(3'-циклопентокси-4'-метоксифенил)-1- метоксипропан; 3-(4-аминофталимидо)-3-(3'-изопропокси-4'-метоксифенил)пропан-1-ол; 3-(4-аминофталимидо)-3-(3'-изопропокси-4'-метоксифенил)-1-метоксипропан; 3-(4-аминофталимидо)-3-(3'-этокси-4'-этилфенил)пропан-1-ол; 3-(4-аминофталимидо)-3-(3'-этокси-4'-этилфенил)-1-метоксипропан.

Термин алкил, как он использован здесь, означает одновалентную насыщенную разветвленную или нормальную углеводородную цепь. Если не оговорено особо, такие цепи могут содержать от одного до 18 атомов углерода. Представителями таких алкильных групп являются метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, изопентил, неопентил, трет-пентил, гексил, изогексил, гептил, октил, нонил, децил, монодецил, додецил, тридецил, тетрадецил, пентадецил, гексадецил, гептадецил, октодецил и т.п. Когда указано "низшая", тогда алкильная группа содержит от одного до шести атомов углерода. Такое же количество атомов углерода применяется к родовому термину "алкан" и производному термину "алкокси".

Соединения можно применять под наблюдением квалифицированных профессионалов для ингибирования нежелательных эффектов ФНО . Соединения можно вводить нуждающимся в лечении млекопитающим перорально, ректально или парентерально сами по себе или в комбинации с другими терапевтическими агентами, включающими в себя антибиотики, стероиды и т.д. Пероральные лекарственные формы включают в себя таблетки, капсулы, драже и подобные им формованные и прессованные фармацевтические формы. Для парентерального введения, которое включает в себя внутримышечный, внутриоболочковый, внутривенный и внутриартериальный способы введения, можно использовать изотонические физиологические растворы, содержащие 20-100 мг/мл. Ректальное введение может быть осуществлено посредством использования суппозиториев, в состав которых входят традиционные носители, такие как масло какао.

Режимы дозирования должны устанавливаться для конкретного показания, возраста, веса и общего физического состояния пациента и желаемой реакции, но обычно дозы будут находиться в пределах от 1 до 500 мг/день, как необходимо, при однократном или многократном введении ежедневно. Вообще первоначальный режим лечения может быть скопирован с известного режима, эффективного при вмешательстве в активность ФНО в отношении других опосредованных ФНО болезненных состояний, посредством соединений по настоящему изобретению. Пациентов, которых лечат, необходимо регулярно проверять на количество Т-клеток и соотношение Т4/Т8 и/или показатели вирусемии, такие как уровень обратной транскриптазы или вирусных белков, и/или на прогрессирование проблем, связанных с опосредованным цитокином заболеванием, таких как кахексия и мышечная дистрофия. Если при нормальном режиме лечения эффект отсутствует, количество вводимого агента, вмешивающегося в активность цитокина, увеличивают, например, на 50% в неделю.

Соединения по настоящему изобретению также можно использовать местно при лечении или профилактике местных болезненных состояний, опосредованных или обостренных избыточной продукцией ФНО , соответственно, таких как вирусные инфекции, такие как инфекции, вызванные вирусами герпеса, или вирусные конъюнктивиты и т.п.

Соединения также могут быть использованы в ветеринарии для лечения животных, нуждающихся в предотвращении или ингибировании продуцирования ФНО . У животных, нуждающихся в терапевтическом или профилактическом лечении, заболевания, опосредованные ФНО , включают в себя болезненные состояния, такие как указаны выше, но, в частности, вирусные инфекции. Примеры включают в себя кошачий вирус иммунодефицита, вирус инфекционной анемии лошадей, козлиный вирус артрита, вирус висна, вирус маеди, а также другие лентивирусы.

Некоторые из этих соединений обладают центрами хиральности и могут существовать как оптические изомеры. Как рацематы этих изомеров, так и сами по себе индивидуальные изомеры, а также диастереомеры при наличии двух хиральных центров входят в объем настоящего изобретения. Рацематы могут быть использованы как таковые или могут быть разделены на индивидуальные изомеры механически, например хроматографией с использованием хирального абсорбента. Альтернативно, индивидуальные изомеры могут быть получены в хиральной форме или выделены химически из смеси путем образования солей с хиральной кислотой, такой как индивидуальные энантиомеры 10-камфорсульфоновой кислоты, камфорной кислоты, альфа-бромкамфорной кислоты, метоксиуксусной кислоты, винной кислоты, диацетилвинной кислоты, оксиянтарной кислоты, пирролидон-5-карбоновой кислоты и т.п., а затем высвобождением одного или обоих разделенных оснований, возможно повторяя процесс, с тем чтобы получить любой из двух либо оба практически свободными от другого, т.е. в форме, имеющей оптическую чистоту > 95%.

Предотвращение или ингибирование продуцирования ФНО этими соединениями приемлемо можно проанализировать, используя анти-ФНО -антитела. Например, пластинки (Nunc Immunoplates, Roskilde, DK) обрабатывают 5 мкг/мл очищенных кроличьих анти-ФНО -антител при 4oC в течение от 12 до 14 часов. Затем пластинки фиксируют в течение двух часов при 25oC ФБР(фосфатно-буферный раствор)/0,05% Tween, содержащим 5 мг/мл БСА (бычий сывороточный альбумин). После промывания, на них наносят по 100 мкл тестируемых соединений, а также контролей, и пластинки инкубируют при 4oC в течение 12-14 часов. Пластинки промывают и анализируют с использованием конъюгата пироксидазы (хрена) и мышиных моноклональных анти-ФНО -антител, и проявляют с использованием о-фенилендиамина в фосфатно-цитратном буфере, содержащем 0,012% перекиси водорода, и снимают показания при 492 нм.

Соединения могут быть получены с использованием способов, которые известны вообще для получения имидов. Предпочтительная общая реакционная схема включает в себя взаимодействие замещенного амина с подходящим ангидридом. Могут быть использованы другие известные в данной области способы синтеза, например, фталимидосоединения получают взаимодействием замещенного амина с либо фталевым ангидридом, N-карбэтоксифталимидом, либо с фталевым дикарбоксальдегидом, как это проиллюстрировано формулами: Следующие примеры будут служить дальнейшему раскрытию сущности этого изобретения, но они не должны истолковываться как ограничение его объема, который определен исключительно прилагаемой формулой изобретения.

Пример 1 3-Амино-3-(3',4'-диметоксифенил)пропионовая кислота Перемешиваемую суспензию 3,4-диметоксибензальдегида (131 грамм, 788 ммоль) и ацетата аммония (121,5 грамма, 1576 ммоль) в этаноле (95%, 400 мл) нагревали до 45-50oC с получением оранжевого раствора. К этому раствору добавляли малоновую кислоту (82,0 грамма, 788 ммоль), и раствор нагревали с обратным холодильником в течение ночи. При нагревании осаждалось белое твердое вещество, взвеси давали возможность охладиться до комнатной температуры и фильтровали. Твердое вещество промывали этанолом, сушили на воздухе и сушили в вакууме (60oC, <1 мм) с получением 3- амино-3-(3',4'-диметоксифенил)пропионовой кислоты в виде белого твердого вещества (100,14 грамма, выход 56%), дальнейшую очистку не проводили: т.пл. 208,0-210,0oC; 1H ЯМР (D2O/NaOD/TSP) 7,08-6,91 (m, 3H), 4,22 (t, J=7 Гц, 1H), 3,87 (s, 3H), 3,83 (s, 3H), 2,55 (dd, J= 2,7 Гц, 2H); 13С ЯМР (D2O/NaOD/TSP) 182,9, 150,8, 149,8, 140,7, 121,6, 114,6, 112,8, 58,6, 55,4, 49,8.

Пример 2 Метиловый эфир 3-амино-3-(3',4'-диметоксифенил)пропионовой кислоты К перемешиваемой при 0oC суспензии 3-амино-3-(3', 4'-диметоксифенил)пропионовой кислоты (70,1 грамма, 312 ммоль) в метаноле добавляли по каплям ацетилхлорид (47,6 мл, 667 ммоль). По прошествии 15 минут ледяную баню удаляли. Полученный в результате прозрачный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Систему открывали, и растворитель выдували с использованием N2 в течение ночи. К твердому веществу добавляли метанол (50 мл) и эфир (300 мл). Полученную в результате суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Суспензию фильтровали и твердое вещество промывали эфиром (100 мл). Твердое вещество растворяли в смеси карбоната натрия (200 мл, насыщенный), воды (200 мл) и хлористого метилена (250 мл). Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали хлористым метиленом (3 x 250 мл): объединенные органические слои сушили над сульфатом магния. Удаление растворителя давало метиловый эфир 3-амино-3-(3', 4'- диметоксифенил)пропионовой кислоты в виде масла (60,2 грамма, выход 81%): 1H ЯМР (CDCl2) 1,77 (s, 2H, NH2, 2,65 (d, J=7 Гц, 2H, CH2), 3,68 (s, 3H, CH3), 3,87 (s, 3H, CH3), 3,89 (s, 3H, CH3), 4,39 (t, J=Гц, 1H, CH), 6,81-6,93 (m, 3H, Ar); 13C ЯМР (CDCl2) 44,00, 51,48, 52,18, 55,72, 55,76,109,20, 111,02,118,02, 137,21, 148,11, 148,93, 172,34. Анализ: Вычислено для C12H17NO40,1H2O: C, 59,19; H, 7,19: N, 5,81. Найдено: С, 59,38; H, 7,09; N, 5,9.

Пример 3 3-Амино-3-(3',4'-диметоксифенил)-пропан-1-ол Раствор 3-амино-3-(3', 4'-диметоксифенил)пропионата (4,12 грамма, 17,2 ммоль) в метаноле (50 мл) медленно добавляли к перемешиваемому борогидриду натрия (6,51 грамма, 17,2 ммоль). После того как первоначальное бурное выделение газа прекращалось, смесь нагревали с обратным холодильником в течение 1 часа. Протекание реакции контролировали тонкослойной хроматографией (ТСХ) (20% этилацетата/гексан, УФ) и завершали по прошествии 1 часа. Реакционной смеси позволяли охладиться, а затем добавляли 20 мл воды. Метанол удаляли в вакууме и образующуюся в результате смолу экстрагировали хлористым метиленом (3 x 20 мл). Объединенные экстракты сушили над сульфатом магния и концентрировали с получением масла, которое охлаждали. Образованное воскообразное твердое вещество сушили в вакууме (60oC, < 0,1 мм) с получением 3,3 г (86%) продукта в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (CDCl3) 6,91-6,78 (m, 3H), 4,15-4,04 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,88 (s, 3H), 3,84-3,71 (s, 2H), 3,91-2,45 (широкий m, 1H), 1,95-1,78 (m, 2H).

Пример 4 3-Амино-3-(3',4'-диметоксифенил)-1-пропанол К перемешиваемому твердому веществу борогидрида натрия (94,18 грамма, 2,49 моль) при 0oC добавляли метанол (50 мл). К этой смеси при 0oC добавляли раствор метиловый эфир 3-амино-3-(3',4'- диметоксифенил)пропионовой кислоты (59,5 грамма, 249 ммоль) в метаноле (950 мл) на протяжении 1 часа. Эту смесь перемешивали в ледяной бане пока не устанавливалась температура реакционной смеси 35oC или ниже в течение 30 минут. (Предостережение: если ледяная баня будет удалена слишком рано, может произойти сильно экзотермическая реакция). Водяную баню затем удаляли и раствор нагревали с обратным холодильником в течение 16 часов. Раствору давали возможность охладиться до комнатной температуры. К этому раствору добавляли воду с последующим добавлением хлористого метилена (250 мл) при 0oC. Полученную в результате суспензию фильтровали. Половину фильтрата удаляли в вакууме. Полученный в результате раствор растворяли в хлористом метилене (500 мл) и воде (300 мл). Органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали хлористым метиленом (3x500 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл) и сушили над сульфатом магния. Удаление растворителя давало масло. Полученное в результате масло сушили в вакууме с получением 3-амино-3-(3',4'- диметоксифенил)-1-пропанола в виде белого твердого вещества (42,15 грамма, выход 80%): т.пл. 63,5-65,5oC; 1H ЯМР (CDCl3) 6,91-6,78 (m, 3H), 4,15-4,04 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,88 (s, 3H), 3,84-3,71 (s, 2H), 2,91-2,45 (m, 1H), 1,95-1,78 (m, 2H); Анализ: Вычислено для C11H17NO3: С, 62,54; H, 8,11; N, 6,63. Найдено: С, 62,01; H, 7,80; N, 6,49.

Пример 5 3-Фталимидо-3-(3',4'-диметоксифенил)пропан-1-ол Смесь 3-амино-3-(3', 4'-диметоксифенил)-пропан-1-ола (1,11 грамма, 5 ммоль) и фталевого ангидрида (0,74 грамма, 5 ммоль) расплавляли вместе и перемешивали в течение 5 минут. После охлаждения образовавшееся зелено-желтое стекловидное полутвердое вещество перемешивали в эфире с получением 1,62 грамма (95%) неочищенного продукта в виде белого твердого вещества. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, 40% этилацетата/хлористый метилен) с получением 1,25 грамма (73%) продукта в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (CDCl3) 7,85-7,63 (m, 4H), 7,18-7,07 (m, 2H), 6,86-6,76 (m, 1H), 5,62-5,49 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,85 (s, 3H), 3,79-3,63 (m, 2H), 2,89-2,71 (m, 1H), 2,64-2,47 (m, 1H), 1,87-1,73 (широкий m, 1H). 13С ЯМР (CDCl3) 168,5, 148,8, 148,6, 133,9, 131,8, 131,7, 123,2, 120,7, 111,6, 110,8, 59,8, 55,0, 55,8, 51,4, 33,9. Анализ: Вычислено для C19H19NO5. Теоретически: С, 66,85; H, 5,61; N, 4,10. Найдено: С, 66,70: H, 5,60: N, 4,06. ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография) 100%.

Пример 6 3-Амино-3-(3'-этокси-4'-метоксифенил)пропионовая кислота Перемешиваемую смесь 3-этокси-4-метоксибензальдегида (119,5 грамма, 664 ммоль) и ацетата аммония (148,3 грамма, 1,92 моль) в этаноле (300 мл, 95%) нагревали при 45oC. К этой смеси добавляли малоновую кислоту (69 грамм, 664 ммоль) с последующим добавлением этанола (100 мл, 95%). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 18 часов. Эту смесь охлаждали до комнатной темпер