Бензоксазиноны и фармацевтическая композиция, включающая их для ингибирования обратной транскрипции вич, лечения и предотвращения aids и arc, способ ингибирования вич обратной транскриптазы, способ предотвращения инфекции вич, лечения вич и arc, комбинации, способ получения (-)-6-хлор- 4-циклопропилэтинил-4-трифторметил-1,4-дигидро-2н-3,1- бензоксаз ин-2-она

Бензоксазиноны и фармацевтическая композиция, включающая их для ингибирования обратной транскрипции вич, лечения и предотвращения aids и arc, способ ингибирования вич обратной транскриптазы, способ предотвращения инфекции вич, лечения вич и arc, комбинации, способ получения (-)-6-хлор- 4-циклопропилэтинил-4-трифторметил-1,4-дигидро-2н-3,1- бензоксаз ин-2-она

Реферат

 

Описываются новые бензоксазиноновые соединения общей формулы I, в которой Х представляет галоген, X¹ представляет тригалогенметил; Z представляет О; R представляет a) C_1-8 алкил, незамещенный или замещенный галогеном, 5-членным насыщенным моноциклическим кольцом, содержащим 1-2 гетероатома, выбранных из атомов азота и кислорода; b) С_2-4 алкенил, незамещенный или замещенный C_1-4 алкокси, или с) С_2-5 алкинил, незамещенный или замещенный С_3-6 циклоалкилом, гидрокси, ди(С_1-2 алкил)амино, C_1-4 алкокси, фенилом, незамещенным или замещенным С_1-4 алкокси, нитро, CN, 5-членным насыщенным моноциклическим кольцом, содержащим 1-2 гетероатома, выбранных из атомов азота и кислорода, или его фармацевтически приемлемая соль. Соединения I могут быть использованы в целях ингибирования обратной транскриптазы ВИЧ (включая ее резистентные разновидности), а также в целях предупреждения или лечения ВИЧ-инфекций и СПИДа. Указанные соединения могут быть использованы как таковые либо в виде их фармацевтически приемлемых солей, либо в качестве ингредиентов фармацевтических композиций, используемых как отдельно, так и в комбинации с другими противовирусными средствами, иммуномодуляторами, антибиотиками или вакцинами. Раскрываются также способы лечения СПИДа и способы предупреждения или лечения ВИЧ-инфекций, способ получения (-)-6-хлор-4-циклопропилэтинил-4-трифторметил-1,4-дигидро-2Н-3,1-бензоксазин-2-она. 10 с. и 3 з.п.ф-лы, 6 табл.

Настоящая заявка является родственной заявкам фирмы "Мерк", имеющим ссылочные 18429, I84291A и 18727. Эта заявка является частичным продолжением заявки фирмы "Мерк" 18793, поданной 7 августа 1992г., U.S.S.N 07/926607.

Предшествующий уровень техники Ретровирус, называемый вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), является этиологическим фактором, ответственным за комплексное заболевание, выражающееся прогрессирующей деструкцией иммунной системы (синдром приобретенного иммунодефицита, СПИД) и дегенерацией центральной и периферической нервной системы. Этот вирус был ранее известен как LAУ, HTLУ-III, или АRУ. Общей характерной особенностью репликации ретровирусов является обратная транскрипция РНК-генома. осуществляемая с помощью обратной транскриптазы, кодируемой вирусным геномом, в результате чего происходит синтез ДНК-копий ВИЧ-последовательностей, который является необходимой стадией для репликации вируса. Известно, что некоторые соединения являются ингибиторами обратной транскриптазы, и в качестве эффективных средств используются для лечения СПИДа и аналогичных заболеваний, например азидотимидин или AZT.

Путем секвенирования нуклеотидной последовательности ВИЧ было обнаружено, что в одной открытой рамке считывания присутствует pol-ген (Rather L. и др., Nature, 313, 277 (1985)). Нa основании гомологии аминокислотных последовательностей было обнаружено, что pol-последоватедьность кодирует обратную транскриптазу, эндонуклеазу и ВИЧ-протеазу (Тоh H. и др., ЕМВО J. 4, 1267 (1985). Power М. и др., Science 231, 1567 (1966). Pearl L. H. и др., Nаtuге 329, 351 (1987)).

Авторами настоящей заявки было продемонстрировано, что соединения настоящего изобретения являются ингибиторами обратной транскриптазы ВИЧ. Преимущество соединений настоящего изобретения заключается в том, что они ингибируют резистентную обратную транскриптазу ВИЧ.

Краткое описание изобретения В настоящей заявке раскрываются соединения формулы I, определенной ниже. Эти соединения могут быть использованы в целях ингибирования обратной транскриптазы ВИЧ (и ее резистентных разновидностей); в целях предупреждения инфицирования вирусом ВИЧ; а также в целях лечения ВИЧ-инфекций, СПИДа и/или АRС (СПИД-ассоциированный синдром); причем указанные соединения могут быть использованы как таковые или в виде фармацевтически приемлемых солей (если это целесообразно), либо в качестве ингредиентов фармацевтических композиций, используемых отдельно или в комбинации с другими противовирусными средствами, противоинфекционными средствами, иммуномодуляторами, антибиотиками или вакцинами. В настоящей заявке раскрываются также способы лечения СПИДа, способы предупреждения инфицирования вирусом ВИЧ, а также способы лечения ВИЧ-инфекций.

Подробное описание изобретения и предпочтительных вариантов его осуществления Настоящее изобретение относится к соединениям формулы I, к их комбинациям или к их фармацевтически приемлемым солям, которые могут быть использованы в целях ингибирования обратной транскриптазы ВИЧ и ее резистентных разновидностей, а также в целях лечения ВИЧ-инфекций и вызываемого этими инфекциями синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД). Соединения формулы I имеют следующую структуру: где X представляет собой галоид; X¹ представляет собой тригалоидметил или пентагалоидэтил; Z представляет собой О; R представляет собой: (а) С_1-8-алкил, незамещенный или замещенный А, где А является галоидом, С_3-6-циклоалкилом, CN, гидрокси, С_1-4-алкокси, С_2-4-алкинил-С_1-4-алокси, арилокси, С_1-4-алкилкарбонил, нитро, ди(С_1-2-алкил)амино, С_1-4-алкиламино-С_1-2-алкил, гетероциклом или арилтио, (в) С_2-4-алкенил, незамещенный или замещенный, (I) А, или (II) арилом, незамещенным или замещенным А, (с) С_2-5-алкинил, незамещенный или замещенный (I) А, или (II) арилом, незамещенным иди замещенным А, или (d) C_3-4-циклоалкил, незамещенный или замещенный (I) А, или (II) арилом, незамещенным или замещенным А, или их фармацевтически приемлемые соли.

Настоящее соединение также относится к фармацевтической композиции, предназначенной для ингибирования обратной транскрипции ВИЧ-генома и содержащей эффективное количество соединения формулы II или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемый носитель, где X представляет собой галоид, X¹ представляет собой тригалоидметил, пентагалоидэтил, С_2-5-алкил, С_2-5-алкинил, С_3-5-циклоалкил или арил, Z представляет собой O или R представляет собой: (А) С_1-8-алкил, незамещенный или замещенный А, а А представляет собой галоид, С_3-6-циклоалкил, СП, гидрокси, С_1-4-алкокси, С_2-4-алкинил-С_1-4-алкокси, арилокси, С_1-4-алкилкарбонил, нитро, ди(C_1-2-алкил)aминo, С_1-4-алкиламино-С_1-2-алкил, гетероцикл или арилтио, (в) С_2-4-алкенил, незамещенный или замещенный: (I) А, или (II) арилом, незамещенным или замещенным А, (с) С_2-5-алкинил, незамещенный или замещенный (I) А, или (II)арилом, незамещенным или замещенным, А, или (d) С_3-4-циклоалкил, незамещенный или замещенный (I) А, или (II) арилом, незамещенным или замещенным А.

Предпочтительными являются соединения 37.2, 4, 2, 5 и 24 таблицы 2 (по нисходящей степени предпочтительности).

Указанные соединения имеют следующую структуру: Соединение 37.2 (-) 6-хлор-4-циклопропилэтинил-4-трифторметил-1,4-дигидро-2H-3,1-бензоксазин-2-он (наиболее предпочтительное соединение), Соединение 4 (-) 6-хлор-4-фенилэтинил-4-трифторметил-1,4-дигидро-2Н-3,1-бензоксазин-2-он, Соединение 2 (+/-) 6-хлор-4-(2-цианофенил)этинил-4-(1,1,1-трифторметил)-1,4-дигидро-2H-3,1-бензоксазин-2-он, Соединение 5 (+/-) 4-(1-хлор-1,1-дифторметил)-4-(2-фенилэтинил)-6-хлор-1,4-дигидро-2H-3,1-бензоксазин-2-он, Соединение 24 (+/-) 4-(2-диметиламинометилэтинил)-4-трифторметил-6-хлор-1,4-дигидро-2Н-3,1-бензоксазин-2-он, или их фармацевтически приемлемые соли.

Соединения настоящего изобретения проиллюстрированы в нижеприведенных таблицах I и II.

Соединения настоящего изобретения могут иметь асимметрические центры и могут существовать (за исключением тех случаев, о которых упоминается особо) в виде рацематов, рацемических смесей или отдельных диастереомеров, или энантиомеров, при этом, следует отметить, что все изомерные формы входят в объем настоящего изобретения. Символ (+/-) означает (+)оптические изомеры, (-) оптические изомеры или их смеси.

Если какая-либо переменная (например, R) встречается более чем один раз в формуле I или в любой составной части этой формулы, то определение указанной переменной в данном конкретном случае не зависит от ее определения в любых других случаях. Кроме того, комбинации заместителей и/или переменных являются допустимыми, если только такие комбинации позволяют получить стабильные соединения.

Используемый в настоящем описании термин "алкил" (если это не оговорено особо) означает прямые иди резветвленные насыщенные алифатические углеводородные группы, имеющие определенное количество атомов углерода. Термин "алкенил" относится к прямым или разветвленным алкильным группам, имеющим, по крайней мере, одну углерод-углеродную двойную связь. Термин "алкинил" относится к прямым или разветвленным алкильным группам, имеющим, по крайней мере, одну углерод-углеродную тройную связь. Термин "галоид" или "галоин" означает фтор, хлор, бром и йод.

Используемый в настоящем описании термин "арил" (если это не оговорено особо) означает фенил, нафтил, тетрагидронафтил, бифенил, фенатрил, антрил или аценафтил.

Используемый в настоящем описании термин (если это не оговорено особо) "гетероцикл" или "гетероциклический" означает стабильное 5-7-членное моноциклическое кольцо или стабильное 8-11-членное бициклическое гетероциклическое кольцо, которое является ненасыщенным или частично насыщенным и которое состоит из атомов углерода и 1-4 гетероатомов, выбранных из N, O и S, причем гетероатомы азота и серы могут быть, но необязательно, окислены, а в любой бициклической группе любое из вышеуказанных гетероциклических колец является конденсированным с бензольным кольцом. Гетероциклическое кольцо может быть присоединено посредством любого гетероатома или атома углерода, что приводит к образованию стабильной структуры. Примерами таких гетероциклических элементов являются пиперидинил, пиперазинил, 2-оксипиперазинил, 2-оксопиперидинил, 2-оксопирролидинил, 2-оксоазецинил, азепинил, пирролил, 4-пиперидонил, пирролидинил, пиразолил, пиразолидинил, имидазолил, имидазолинил, имидазолидинил, пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, оксазолил, оксазолидинил, изоксазолил, изоксазолидинил, морфолинил, тиазолил, тиазолидинил, изотиазолил, хинуклинидил, изотиазолидинил, индолил, хинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, тиадиазолил, бензопиранил, бензотиазолил, бензоксазолил, фурил, тетрагидрофурил, бензофуранил, тетрагидропиранил, тиенил, бензотиенил, тиаморфолинил, тиаморфолинилсульфоксид, тиамофолинилсульфон и оксадиазолил.

Соединения настоящего изобретения могут быть синтезированы методами, описанными ниже.

Синтез безоксазинов настоящего изобретения может быть осуществлен общим методом, согласно которому конечная стадия представляет собой реакцию циклизации бензольного кольца, (см. схему I в конце описания). Сначала аминогруппу пара-хлоранилина защищают, например, пивалоилхлоридом, в результате чего получают соединение 2. Другими менее предпочтительными аминозащитными группами являются т-бутоксикарбонильная, ацетатная или изовалероильная группы. Затем соединение 2 подвергают реакции с алкиллитием, а предпочтительно с н-бутиллитием. В этой стадии металлирования могут быть также использованы и другие металлорганические соединения. Затем после реакции с CF₃СООЕ и последующего гашения реакции получают соединение 3.

Синтез третичного карбинола 4 осуществляют с помощью реакции присоединения Гриньяра, которой подвергают полученный кетон 3. В качестве реагента Гриньяра должна быть использована соль двухвалентного катиона, например Mg⁺⁺ или Zn⁺⁺. Многовалентные катионы, например, такие как Li⁺⁺ или Na⁺⁺, для данной реакции не подходят. Подходящими растворителями являются, но не ограничиваются ими, ТГФ или простой эфир. Температурные условия предусматривают широкий диаппазон реакционных температур, который составляет от около 0^oС и примерно до комнатной температуры.

Реакцию замыкания кольца осуществляют с использованием конденсирующих агентов, таких как 1,1-карбонилдиимидазол, фосген, диметилкарбонат или ди-(пара-нитрофенил)карбонат, и в результате этой реакции получают соединения настоящего изобретения 5. Циклизация может быть осуществлена с любым из указанных агентов, а также с другими агентами широкого ряда.

Нижеприведенная схема IA (см. в конце описания) представляет собой конкретный вариант схемы I. Эта схема иллюстрирует синтез соединения L-741.211, которое представляет cобой рацемат соединения 37.2, описанный ниже в примере 6.

Схема II (см. в конце описания) иллюстрирует один из методов дериватизации ацетиленовых заместителей в 4-положении бензоксазинового ядра. В соответствии с этой схемой соединение 6 сначала подвергают металлизации, а затем добавляют цинковую соль. Для получения соединения 7 осуществляют реакцию Хека, в которой используют катализатор, тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) в сочетании с CuI.

Схема III (см. в конце описания) иллюстрирует замещение 4-ацетиленовой группы N-содержащим гетероциклом. Реакция Манниха представляет собой реакцию конденсации формальдегида с гетероциклом, например пирролидином. Замещение на конечном атоме углерода осуществляют в присутствии СuI в качестве катализатора.

Схема IV (см. в конце описания) иллюстрирует разделение оптических изомеров соединений формулы I или формулы II. На этой схеме раздедяющим агентом является (-)камфановая кислота. При этом могут быть использованы другие разделяющие агенты широкого диаппазона, например хлорид О-метилминдальной кислоты или реагент Mosher. Впрочем, процедуры разделения таких изомеров хорошо известны любому специалисту.

Схема IVA (см. в конце описания) была специально разработана для разделения соединения L-741.211, образующегося при получении соединения L-743.726. Схема IVA и пример 6.

Циклопропилацетилен получают по схеме V в соответствии с известными процедурами, описанными, например, С. Е.Hudson и др., J.Am.Chem. Sos. 94, 1158 (1972) и W.Schoberth и др., Synthesis 703 (1972).

Соединения настоящего изобретения могут быть использованы для получения препаратов в целях проведения анализов на поиск противовирусных соединений. Например, соединения настоящего изобретения могут быть использованы для выделения ферментов-мутантов, которые являются прекрасным средством для скрининга наиболее сильных противовирусных соединений. Кроме того, соединения настоящего изобретения могут быть использованы для установления или идентификации сайта связывания других противовирусных агентов с обратной транскриптазой ВИЧ, например, путем конкурентного ингибирования. Таким образом, соединения настоящего изобретения представляют собой коммерческие продукты, которые могут поставляться для вышеуказанных исследований.

Соединения настоящего изобретения могут быть использованы в целях ингибирования обратной транскриптазы ВИЧ, в целях предупреждения и лечения инфекций, вызванных вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), а также в целях лечения патологических состояний, обусловленных инфицированием вирусом ВИЧ, например, таких как СПИД. Однако настоящее изобретение не ограничивается лишь лечением или предупреждением СПИДа или ВИЧ-инфекций, в объем настоящего изобретения также входит лечение широкого ряда состояний, обусловленных ВИЧ-инфекциями, например, таких как СПИД, ARC (СПИД-ассоциированный комплекс или предСПИД) (как симптомные так и бессимптомные), а также фактическое или возможное заражение вирусом ВИЧ. Например, соединения настоящего изобретения могут быть использованы для лечения ВИЧ-инфекций по подозрению заражения вирусом ВИЧ, например, после переливания крови, обменного вливания физиологических жидкостей, укусов, случайных уколов иглой или хирургических операций.

Основным преимуществом соединений настоящего изобретения является их способность к высокоэффективному ингибированию обратной транскриптазы ВИЧ, которая является резистентной по отношению к другим противовирусным агентам, таким как L-697.661 (3-(/(4,7-дихлор-1,3-бензоксазол-2-ил)метил/амино)-5-этил-6-метилпиридин-2(IH)-он) или L-696.229 (3-/2-(1,3-бензоксазол-2-ил)этил/-5-этил-6-метилпиридин-2(IH)-он), или AZT.

Для этих целей соединения настоящего изобретения могут быть введены перорально, парентерально (подкожно, внутривенно, внутримышечно, внутригрудинно или путем вливаний), путем ингаляций или ректально, в виде унифицированных лекарственных препаратов, содержащих соответствующие нетоксичные фармацевтически приемлемые носители, адъюванты и наполнители.

Поэтому, в другом своем варианте, настоящее изобретение относится к способу лечения и к фармацевтическим композициям, предназначенным для лечения ВИЧ-инфекций и СПИДа. Этот способ лечения предусматривает введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, фармацевтической композиции, содержащей фармацевтический носитель и терапевтически эффективное количество соединения настоящего изобретения.

Указанные фармацевтические композиции могут быть изготовлены в виде суспензий или таблеток для перорального введения, препаратов для ингаляций через нос, стерильных растворов для инъекций, например в виде стерильных водных или масляных суспензий для инъекций, или в виде суппозиториев.

Композиция в виде пероральных суспензий могут быть получены в соответствии с хорошо известной техникой, обычно применяемой в фармацевтической практике для изготовления подобных препаратов, причем эти суспензии могут содержать микрокристаллическую целлюлозу в качестве наполнителя, альгиновую кислоту или альгинат натрия в качестве суспендирующего агента, метилцеллюлозу для повышения вязкости и подслащивающие/ароматизирующие агенты, хорошо известные специалистам. Композиции, изготовленные в виде таблеток немедленного действия, могут содержать микрокристаллическую целлюлозу, дикальцийфосфат, крахмал, стеарат магния, лактозу и/или другие наполнители, связующие, носители, дезинтеграторы, разбавители и замасливающие агенты, хорошо известные специалистам.

Композиции, предназначенные для введения через нос с помощью аэрозолей или ингаляций, могут быть получены в соответствии с традиционной фармацевтической практикой в виде растворов в физиологических растворителях с использованием бензилового спирта или других подходящих консервантов, стимуляторов абсорбции (для повышения биологической доступности), фторуглеродов и/или других солюбилизирующих или диспергирующих агентов, хорошо известных специалистам.

Инъецируемые растворы или суспензии могут быть получены традиционными методами с использованием подходящих нетоксичных парентерально приемлемых разбавителей или растворителей, таких как маннит, 1,3-бутандиол, вода, раствор Рингера или изотонический раствор хлорида натрия, либо подходящих диспергирующих или смачивающих и суспендирующих агентов, таких как стерильное мягкое жирное масло, включая синтетические моно- или диглицериды, и жирные кислоты, такие как олеиновая кислота.

Композиции в виде суппозиториев для ректального введения могут быть получены путем смешивания активного ингредиента с подходящим нераздражающим носителем, таким как какао, масло, синтетические сложные эфиры глицерина или полиэтиленликоли, которые являются твердыми при обычной температуре, но при введении в прямую кишку расплавляются и/или растворяются с высвобождением лекарственного средства.

Доза соединений настоящего изобретения, предназначенных для перорального введения человеку, составляет в диапазоне от 1 до 100 мг/кг веса тела в виде дробных доз. Предпочтительно, если диапазон доз для перорального введения составляет от 0,1 до 10 мг/кг либо от 0,1 до 20 мг/кг веса тела в дробных дозах. При комбинированной терапии с нуклеозидными аналогами предпочтительная доза соединений настоящего изобретения для перорального введения в дробных дозах составляет от 0,1 до 20 мг/кг, а предпочтительная доза нуклеозидных аналогов для перорального введения в дробных дозах составляет от 50 мг до 5 г/кг веса тела. При этом следует отметить, что конкретная доза и частота ее введения каждому конкретному пациенту могут варьироваться в зависимости от различных факторов, например, таких как активность конкретно используемого соединения, возраст, вес тела, общее состояние здоровья, пол и режим питания пациента, способ и время введения, скорость высвобождения лекарственного средства, комбинация лекарственных средств, тяжесть состояния пациента и организм-хозяин, подвергающийся терапии.

Настоящее изобретение также относится к комбинациям соединений-ингибиторов обратной транскриптазы ВИЧ с одним или несколькими агентами, используемыми для лечения СПИДа. Например, соединения настоящего изобретения могут быть с успехом введены в комбинации с эффективными количествами агентов против вируса, вызывающего СПИД, имунномодуляторов, антиинфекционных средств или вакцин, например, указанных в нижеследующей таблице III, причем соединения настоящего изобретения могут быть введены до введения и/или после введения вышеуказанных других активных агентов.

Следует отметить, что объем настоящего изобретения не ограничивается лишь комбинациями соединений настоящего изобретения со средствами против СПИДа, иммуномодуляторами, противоинфекционными средствами или вакцинами, перечисленными в вышепривиденной Таблице III. В объем настоящего изобретения могут быть включены, в принципе, любые комбинации с любой фармацевтической композицией, используемой для лечения СПИДа. Например, соединение формулы I или формулы II могут быть с успехом введены в комбинации с нуклеозидным аналогом, обладающим биологической активностью против обратной транскриптазы ВИЧ. Подходящими нуклеозидными аналогами обычно являются терминаторы цепи, например AZT, ddC, dd1, D4T, НЕРТ и 3'-фтор-2',3'-дидезокситимидин.

AZT может быть синтезирован по методам J.P.Horwitz и др., J.Org. Chem. 29, 2076 (1964); R.P.Glinski и др., J.Org. Chem. 38, 4299 (1973); C.K.Chu и др. , Tetrahedron Letters 29, 5349 (1988). Применение АZT в качестве терапевтического средства для лечения СПИДа раскрывается в патенте США 4724232.

Соединение ddC может быть синтезировано по методам J.Р.Horwitz и др., J. Org. Сhеm. 32, 817 (1967); Р.Marumoto, Chem.Pharm. Bull. 22, 128 (1974) и T. -S. Lin и др., J.Med. Chem. 30, 440 (1987).

D4T может быть синтезирован методами Herdewijn P. и др., J.Med.Chem. 30, 1270 (1987).

НЕРТ может быть синтезирован методами Miyasaka Т. и др., J.Med.Chem. 32, 2507 (1989) и A.Rosowsky, J.Med.Chem. 24, 1177 (1981).

Синтез ddC, dd1 и AZT также описан в EPO 484071.

Соединение 3'-фтор-2', 3'-дидезокситимидин может быть синтезирован в соответствии с процедурами, описанными Herdewijn P. и др., J.Med.Chem. 30, 1270 (1987). Соединение L-735524 представляет собой N-(2(R)-гидрокси-1(s)-инданил)-2(R)-фенилметил-4-(s)-гидрокси-5-(1-(4-(3-пиридилметил)-2(s)-N-(т-бутилкарбоксамидо)пиперазинил))пентанамид или его фармацевтически приемлемую соль. Соединение L-697661 или '661' представляет собой 3-([4,7-дихлор-1,3-бензоксазол-2-ил)метил] амино)-5-этил-этил-6-метилпиридин-2(1Н)-он; соединение L-696229 представляет собой 3-[2-(1,3-бензоксазол-2-ил)этил] -5-этил-6-метилпиридин-2(1Н)-он. Синтез соединений L-697661 и L-696229 описан в ЕРО 484071 и ЕРО 462800 (эти два патента вводятся в настоящее описание в виде ссылки).

Предпочтительными комбинациями являются одновременное, периодическое или поочередное введение L-743726 в сочетании с ингибитором ВИЧ-протеазы или без него. Необязательным третьим компонентом в данной комбинации является нуклеозидный ингибитор обратной транскриптазы ВИЧ, такой как АZТ, ddC или dd1. Предпочтительным ингибитором ВИЧ являются соединение L-735524. Другим предпочтительным ингибитором обратной транскрилтазы ВИЧ является L-697661. Указанные комбинации могут обладать синергическим действием, ограничивающим размножение ВИЧ. При этом предпочтительными являются следующие комбинации: (1) L-743.726 с L-735.524 и необязательно с любым из L-697.661, АZT, dd1 или ddC; (2) L-743.726 с любым из L-697.661, AZT, ddl или ddC. В объем настоящего изобретения входят также фармацевтически приемлемые соли указанных комбинаций.

ПРИМЕР I.

(+/-) 4-[1,1,1-Трифторметил)-4-(1-бутен-4-ил)-6-хлор-1,4-дигидро-2H-3,1-бензоксазин-2-oн (соединение 15).

Стадия А: N-(4-хлорфенил)-2,2-диметилпропанамид.

В 5-литровую трехгорлую круглодонную колбу, снабженную головной мешалкой, добавляли 4-хлоранилин (127,57 г, I M),1200 мл CHCl₃ и 1200 мл насыщенного водного раствора Na₂CO₃. Капельную воронку подсоединяли к колбе и загружали 2,2-диметилпропаноилхлорид (129 мл, 1,05 М). После этого к энергично перемешанной смеси в течение часа по капле добавляли хлорангидрид. Затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре еще 23 часа. Некоторая часть продукта выделялась в виде белых кристаллов. Эти кристаллы собирали путем фильтрации. Фильтрат переносили в делительную воронку, а слои отделяли. После этого слой хлороформа промывали водой и солевым раствором. После осушки сульфатом магния, фильтрации и удаления растворителя в вакууме получали дополнительный продукт. Две части этого продукта объединяли и перерристаллизовывали из кипящей смеси EtOAc/гексана, в результате чего получали 185,6 г N-(4-хлорфенил)-2,2-диметилпропанамида в виде белого кристаллического вещества.

Стадия В: 1-(2-амино-5-хлорфенил)-2,2,2-трифторэтанон.

В 3-литровую трехгорлую круглодонную колбу, осушенную в сушильном шкафу и снабженную головной мешалкой и отверстием для впуска аргона, и в 500-миллилитровую капельную воронку, осушенную в сушильном шкафу, добавляли N-(4-хлорфенил)-2,2-диметилпропанамид (100 г, 472 мМ) и 1 л безводного тетрагидрофурана. Этот раствор охлаждали в ледяной бане до 0^oС, а в капельную воронку загружали н-бутиллитий (387 мл 2,5 М раствора в гексане, 968 мМ). После этого, медленно, в течение часа н-бутиллитиевый раствор по капле добавляли к амидному раствору, поддерживая при этом температуре ниже +5^oС. После этого полученный раствор хранили при 0^oС в течение часа, и в этот период времени образовывался оранжевый осадок. К полученной смеси по капле в течение 1 часа добавляли этил-1,1,1-трифторацетат (115 мл, 968 мМ). Образовавшийся прозрачный раствор выдерживали еще 30 минут. Реакционную смесь гасили 5%-ной водной соляной кислотой. После этого смесь разводили этилацетатом (1 л), а слои отделяли. Органическую фазу промывали солевым раствором, осушали сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме, в результате чего получали 160 г желтого маслообразного вещества. Это вещество суспендировали в 1 л 3 н. водного раствора соляной кислоты и раствор нагревали с обратным холодильником в течение 24 часов. Затем охлажденный раствоор разводили этилацетатом (1 л) и полученную смесь подщелачивали путем добавления концентрированной NH₄OH. Слои отделяли, а органическую фазу промывали солевым раствором и сушили сульфатом магния, после чего фильтровали, концентрировали в вакууме и хроматографировали на силикагеле (1,5 кг), элюируя 15%-ным EtOAc в гексане. Отхроматографированный материал перекристаллизовывали из кипящего гексана и получали 57 г (54%) чистого 1-(2-амино-5-хлорфенил)-2,2,2-трифторэтанола в виде ярко-желтых кристаллов, т.пл. 9I-92^oC.

^IH-ЯМР (CDCH₃): 6,46 (шир.с., 2H), 6,69 (д, IH, J=9,2 Гц), 7,32 (дд, IH, J=2,4, 9,2 Гц), 7,70 (д, IH, J=2,4 Гц).

Стадия C: (+/-) 2-(2-амино-5-хлорфенил)-1,1,1-трифтор-5-гексан-2-ол.

В 300-миллилитровую трехгорлую круглодонную колбу, осушенную в сушильном шкафу и снабженную стержнем для перемешивания, отверстием для впуска аргона, капельной воронкой и конденсатором горячего орошения, добавляли магниевую стружку (3,03 г, 125 мМ) и 75 мл безводного тетрагидрофурана. К этой тщательно перемешанной смеси добавляли 4-бром-1-бутен (12,0 мл, 118,21 мМ) таким образом, чтобы осуществлялось мягкое нагревание с обратным холодильником. После завершения добавления смесь оставляли на 30 мин, а затем охлаждали до 0^oС в ледяной бане. К тщательно перемешанному раствору в течение 30 минут по капле добавляли раствор 1-(2-амино-5-хлорфенил)-2,2,2-трифторэтанона (5,00 г, в тетрагидрофуране, 35 мл). Охлаждающую баню оставляли для испарения, а смесь перемешивали в течение 20 часов при комнатной температуре. Затем полученную реакционную смесь разводили этилацетатом и 10%-ным водным раствором лимонной кислоты. После этого смесь перемешивали в течение 4 часов. Слои отделяли, а органическую фазу промывали водным раствором гидрокарбоната натрия и солевым раствором. После осушки сульфатом магния, фильтрации, удаления растворителя в вакууме и хроматографировании на силикагеле (300 г) (элюент: 15% EtOAc в гексане) получали 4,80 г (+/-) 2-(2-амино-5-хлорфенил)-1,1,1-трифтор-5-гексан-2-ола в виде желтого твердого вещества.

Стадия D: (+/-) 4-(1,1,1-трифторметил)-4-(1-бутен-4-ил)-6-хлор-1,4-дигидро-2H-3,1-бензоксазин-2-он.

В 200-миллилитровую круглодонную колбу, снабженную стержнем для перемешивания, отверстием для впуска аргона и парциальным конденсатором горячего орошения, добавляли (+/-) 2-(2-амино-5-хлорфенил)-1,1,1-трифтор-5-гексан-2-ол (4,80 г, 17,16 мМ), 1,1'-карбонилдиимидазол (13,91 г, 85,81 мМ) и безводный тетрагидрофуран (75 мл). Затем эту смесь нагревали при 60^oС в течение 18 часов. Охлажденную реакционную смесь разводили этилацетатом, а затем промывали водой (3 х 200 мл) и солевым раствором (250 мл). После осушки сульфатом магния, фильтрации, удаления растворителя в вакууме и перекристаллизации из кипящего EtOAc/гексана получали 3,22 г (+/-) 4-(1,1,1-трифторметил)-4-(1-бутен-4-ил)-6-хлор-1,4-дигидро-2H-3,1-бензаксазин-2-она в виде белого кристаллического твердого вещества, т.пл. 165-166^oС.

^IH-ЯМР (CDCL₃): 1,99 (м, IH), 2,09-2,40 (м,3H), 5,00 (д, IH, J=1,4 Гц), 5,03 (дд, IH, J=1,4, 7,9), 5,78 (м, IH), 6,85 (д, IH, J=8,6 Гц), 7,21 (шир.с., IH), 7,35 (дд, J=2,2, 8,6 Гц), 9,63 (шир.с., IH).

ПРИМЕР 2.

(+/-) 6-Хлор-4-этинил-(1,1,1-трифторметил)-1,4-дигидро-2H-3,1-бензоксазин-2-он (соединение 26).

Стадия A: 2-(2-амино-5-хлорфенил)-1,1,1-трифтор-3-бутин-2-ол.

500-миллилитровую трехгорлую круглодонную колбу, снабженную капельной воронкой, отверстием для впуска аргона, стержнем для перемешивания и цифровым термометром, загружали этинилмагнийбромидом (0,5 М в гексане, 268 мл, 134 мМ), а затем охлаждали до -78^oС. Затем по капле в течение 15 минут добавляли раствор 1-(2-амино-5-хлорфенил)-2,2,2-трифторэтанона (6,0 г, 26,8 мМ) в 50 мл ТГФ, поддерживая при этом температуру -55^oС. После этого реакционную смесь перемешивали в течение 16 часов, а затем медленно нагревали до комнатной температуры. Темно-красный реакционный раствор гасили при -5^oС путем добавления по капле насыщенного водного раствора хлорида аммония (60 мл). После экстрагирования этилацетатом раствор промывали 10%-ной лимонной кислотой, насыщенным бикарбонатом натрия, водой и солевым раствором. В результате этой процедуры получали 8,5 г неочищенного продукта, который осушали сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали. После очистки с помощью флеш-хроматографии (элюент: 15-20% этилацетат/гексан) получали чистый 2-(2-амино-5-хлорфенил)-1,1,1-трифтор-3-бутин-2-ол (5 г светло-коричневого маслообразного вещества, выход 75%).

Стадия В: (+/-) 6-хлор-4-этинил-4-(1,1,1-трифторметил)-1,4-дигидро-2Н-3,1-бензоксазин-2-он.

Тетрагидрофурановый раствор 2-(2-амино-5-хлорфенил)-1,1,1-трифтор-3-бутин-2-ола (5,0 г, 20,0 мМ в 225 мМ тетрагидрофурана) обрабатывали 1,1'-карбонилдиимидазолом (13,0 г, 80,0 мМ) и нагревали в масляной бане в течение 17 часов ври 60^oС. После удаления тетрагидрофурана в вакууме остаток растворяли в этилацетате, а затем промывали 10% лимонной кислотой, бикарбонатом натрия, водой и солевым раствором. После осушки сульфатом натрия, фильтрации и выпаривания в вакууме, образовавшийся неочищенный продукт выделяли (3,6 г) и перекристаллизовывали из этилацетата/гексана. Таким образом получали (+/-) 6-хлор-4-этинил-4-(1,1,1-трифторметил)-1,4-дигидро-2Н-3,1-бензоксазин-2-он в виде белого кристаллического твердого вещества (3,22 г, выход 58,4%), т.пл. 226-227^oС.

^IH-ЯMP (CDCL₃+следовые количества ДМСО): 3,16 (с, 1Н), 6,98 (д, J=3,3 Гц, 1Н), 7,35 (м, 1Н), 7,51 (c, 1H), 10,66 (c, 1H).

ПРИМЕР 3.

(+/-) 6-Хлор-4-(1,1,1-трифторметил)-4-/(3-(1-пирролидинил))-1-пропинил/-1,4-дигидро-2Н-3,1-бензоксазин-2-он (соединение 7).

Диоксановый раствор (+/-) 6-хлор-4-этинил-4-(1,1,1-трифторметил)-1,4-дигидро-2Н-3,1-бензокcазин-2-она (150 мг, 0,544 мМ), пирролидина (52,2 мкл, 0,626 мМ), параформальдегида (20,5 мг, 0,681 мМ), уксусной кислоты (31,1 мкл, 0,544 мМ) и хлорида меди (I) (20,5 мг, 0,207 мМ в 3,5 мл диоксана) нагревали до 50^oC в масляной бане приблизительно в течение 2 часов. Затем реакционную смесь гасили в 2 н. соляной кислоте и экстрагировали этилацетатом. После этого водный слой нейтрализовали путем добавления твердого карбоната калия и три раза экстрагировали этилацетатом. Объединенные экстракты промывали водой и солевым раствором, после чего осушали сульфатом натрия и получали 140 мг неочищенного продукта. Этот неочищенный продукт очищали с помощью хроматографии на силикагеле и перекристаллизовывали из этилацетата/гексана, в результате чего получали кристаллический (+/-) 6-хлор-4-(1,1,1-трифторметил)-4-/(3-(1-пирролидинил))-1-пропинил/-1,4-дигидро-2H-3,1-бензоксазин-2-он (89 мг, выход 46%), т.пл. 160-161^oС (при разлож.).

^IН-ЯМР (CDCL₃): 1,85-1,89 (м, 4Н), 2,68-2,71 (м, 4Н), 3,67 (с, 1H), 6,88 (д, J=8,55 Гц, 1Н), 7,40 (дд, J=2,19, 8,54 Гц, 1H), 7,55 (c, 1H), 9,45 (c, 1H).

(+/-) 6-Хлор-4-(2-цианофенил)этинил-4-(1,1,1-трифторметил)-1,4-дигидро-2H-3,1-бензоксазин-2-он (соединение 2).

Раствор 6-хлор-4-этинил-4-(1,1,1-трифторметил)-1,4-дигидро-2Н-3,1-бензоксазин-2-она (138 мг, 0,5 мМ) в 3 мл безводного тетрагидрофурана перемешивали при -78^oС. Затем к этому раствору добавляли 0,4 мл (1,0 мМ) н-бутиллития (2,5 М в гексане). Анион выдерживали в течение 10 минут при -78^oС, после чего добавляли 1 мл раствора ZnCL₂(I M в эфире). Полученную реакционную смесь оставляли для перемешивания при -78^oС на 15 минут, после чего ледяную баню удаляли и смесь медленно нагревали до 0^oС в течение 30 минут. Затем к этой реакционной смеси добавляли раствор 2-иодобензонитрила (149 мг, 0,65 мМ) в 2 мл ТГФ, после чего добавляли 56 мг (0,06 мМ) тетракис(трифенилфосфин) палладия (0). Полученную реакционную смесь оставляли для нагревания до комнатной температуры и продолжали перемешивание в течение 15 часов. Затем эту реакционную смесь гасили путем добавления 10 мл 2 н. соляной кислоты, экстрагировали этилацетатом (2 х200 мл), а объединенные экстракты промывали водой, солевым раствором и осушали сульфатом магния. Растворитель удаляли и получали 195 мг маслообразного вещества, которое очищали с помощью флеш-хроматографии на силикагеле (элюент: 20% EtOAc в гексане). В результате этой процедуры получали 60 мг непрореагировавшего исходного материала и 35 мг объединенного продукта. Этот объединенный продукт растирали с эфиром и получали 25 мг (+/-) 6-хлор-4-(2-цианофенил)этинил-4-(1,1,1-трифторметил)-1,4-дигидро-2Н-3,1-бензоксазин-2-она, т.пл. 245-246^oС. FAB-MC (М + +): 377 m/е.

^IН-ЯМР (CDCL₃): 6,82-6,85 (д, J= 8,5 Гц, 1H), 7,40-7,44 (дд, J=2,1, 8,5 Гц, 1Н), 7,56-7,79 (м, 5Н), 8,00 (с, 1Н).

ПРИМЕР 4.

(+/-) 4-(1-Хлор-1,1-дифторметил)-4-(2-фенилэтинил)-6-хлор-1,4-дигидро-2Н-3,1-бензоксазин-2-он (соединение 5).

Стадия А: 1-(2-амино-5-хлорфенил)-2-хлор-2,2-дифторэтанон.

В 300-миллилитровую трехгорлую круглодонную колбу, осушенную в сушильном шкафу и снабженную магнитным стержнем для перемешивания, отверстием для впуска азота, и в 100-миллилитровую капельную воронку, осушенную в сушильном шкафу, добавляли N-(4-хлорфенил)-2,2-диметилпропанамид (10 г, 47,2 мМ) и 100 мл безводного тетрагидрофурана. Этот раствор охлаждали в ледяной бане до 0^oС, а в капельную воронку загружали н-бутиллитий (38,7 мл 2,5 М раствора в гексане, 96,8 мМ). Затем н-бутиллитиевый раствор медленно, по капле и в течение 1 часа добавляли к амидному раствору, поддерживания при этом температуру ниже +5^oС. Полученный раствор хранили в течение часа при 0^oС. В течение этого времени образовывался оранжевый осадок. После этого к смеси, по капле в течение 15 минут добавляли этил-1-хлор-1,1-дифторацетат (10,2 мл, 96,8 мМ). Полученный прозрачный раствор выдерживали еще в течение 30 минут. Реакцию завершали путем добавления 5%-ного водного раствора соляной кислоты. Смесь разводили этилацетатом (1 л), а слои отделяли. Органическую фазу промывали солевым раствором, осушали сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 160 г желтого маслообразного вещества. Это вещество суспендировали в 200 мл 3 н. водного раствора соляной кислоты и раствор нагревали с обратным холодильником в течение 24 часов. Охлажденный раствор развод