Способы лечения при помощи соединений, обладающих специфичной или селективной активностью по отношению к рецептору ретиновой кислоты (ppk)

Способы лечения при помощи соединений, обладающих специфичной или селективной активностью по отношению к рецептору ретиновой кислоты (ppk)

Реферат

 

Изобретение относится к области медицины. Ретиноидные соединения, которые действуют специфично или селективно более предпочтительно на подтипы PPK, чем на подтипы PPK и РРК_r, обладают желательными фармацевтическими свойствами, характерными для ретиноидов, особенно вводят млекопитающему для лечения опухолей, например острого моноцитарного лейкоза, цервикальной карциномы, миеломы, овариальных карцином и карцином на шее и голове. Предложенный способ не имеет нежелательных побочных эффектов, свойственных ретиноидам: при введении, например, потеря веса, токсичность для кожно-слизистой оболочки, раздражение кожи и терратогенность. 5 с. и 21 з.п. ф-лы, 8 ил., 5 табл.

Изобретение относится к применению соединений, обладающих специфичной или селективной активностью по отношению к (рецепторам ретиновой кислоты), для лечения болезней и состояний, подвергающихся воздействию таких ретиноидов. Более конкретно, настоящее изобретение направлено на применение специфичных или селективных агентов для PPK для лечения опухолей.

Соединения, обладающие ретиноидподобной активностью, хорошо известны и описаны в многочисленных американских и других патентах и в научных публикациях. Общеизвестно и общепризнано, что такая ретиноидная активность полезна для лечения млекопитающих, включая людей, для устранения и облегчения симптомов и состояний при многочисленных болезнях. Другими словами, общепризнано, что фармацевтические композиции, включающие в качестве активного вещества ретиноидное соединение или соединения, используются в качестве регуляторов пролиферации и дифференциации клеток и, в частности, как агенты для лечения кожных заболеваний, включая лучевые кератозы, арсениазные кератозы, воспалительные и невоспалительные угри, псориаз, ихтиозы, и другой кератинизации и гиперпролиферативных нарушений кожи, экземы, атопического дерматита, болезни Дарье, плоского лихена, предотвращения и реверсирования глюкокортикоидных повреждений (стероидной атрофии), как антимикробные агенты для местного применения, как антипигментационные агенты для кожи, и для лечения и полного устранения возрастных и световых повреждений кожи. Ретиноиды также пригодны для профилактики и лечения раковых и предраковых состояний, включая предраковые и раковые гиперпролиферативные заболевания, такие как рак груди, кожи, простаты, шейки матки, прямой кишки, мочевого пузыря, пищевода, желудка, легких, гортани, пространства рта, кровяной и лимфатической системы, метаплазии, дисплазии, неоплазии, лейкоплакии, и папиллом слизистой оболочки и для лечения саркомы Капоши. Кроме того, ретиноидные соединения могут быть использованы как активные вещества для лечения глазных болезней, включая (но не ограничивая) пролиферативную витреоретинопатию (ПВР), отслоение сетчатки, сухость глаз и другие корнеопатии, а также при лечении и профилактике различных сердечно-сосудистых болезней, включая, без ограничения, болезни, связанные с метаболизмом липидов, такие как дислипидемии, при профилактике рестеноза после ангиопластики и в качестве активного вещества для повышения концентрации активатора плазминогена тканей (АТП). Другие применения ретиноидов включают профилактику и лечение состояний и болезней, связанных с вирусом папилломы человека (ВПЧ), включая бородавки и остроконечные бородавки, различных воспалительных заболеваний, таких как легочный фиброз, илеит, колит и болезнь Крона, нервнодегенеративных болезней, таких как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, удар, нарушение функции гипофиза, включая недостаточное образование гормона роста, модуляцию аппоптоза, включая как индукцию аппоптоза, так и ингибирование активированного Т-клетками аппоптоза, восстановление роста волос, включая комбинированную терапию с применением этих соединений и других активных веществ, таких как Minoxidil^R, болезней, связанных с иммунной системой, включая применение этих соединений в качестве иммуностимуляторов, модуляции отторжения пересаженных органов, облегчения заживления ран, включая модуляцию хелоза.

Патенты США 4740519 (Shroot и др.), 4826969 (Maignan и др.), 4326055 (Lоеligеr и др. ), 5130335 (Chandraratna и др.), 5037825 (Klaus и др.), 5231113 (Chandraratna и др.), 5324840 (Chandraratna), 5344959 (Chandraratna), 5130335 (Chandraratna и др.), Европейские заявки 0170105 (Shudo), 0 176 034 A (Wuest и дp.), 0350846 A (Klaus и др.), 0 176 032 A (Frickel и др.), 0 176 033 A (Frickel и др.), 0 253 302 A (Klaus и др.), 0 303 915 A (Bryce и др.), Заявка GB 2190378 А (Klaus и др.), Заявки DE N.N. DE 3715955 А1 (Klaus и др.), DE 3602473 Al (Wuest и дp.), и статьи в J. Amer. Acad. Derm. 15: 756-764 (1986) (Sporn и др.), Chem. Pharm. Bull. 33: 404-407 (1985) (Shudo и др.), J. Med. Chem. 1988 31, 2182-2192 (Каgесhiка и др. ). Chemistry and Biology of Synthetic Retinoids CRC Press Inc. 1990 p. 334-335, 354 (Dawson и др.), раскрывают и относятся к соединениям, которые включают тетрагидронафтильные группы и обладают ретиноидной или связанной с ней биологической активностью.

В патентах США 4980369, 5006550, 5015658, 5045551, 5089509, 5134159, 5162546, 5234926, 5248777, 5264578, 5272156, 5278318, 5324744, 5346895, 5346915, 5348972, 5348975, 5380877, 5399561, 5407937 (переуступленных тому же правопреемнику, что и данная заявка) и патентах и публикациях, приведенных выше, описаны производные хромана, тиохромана и 1,2,3,4-тетрагидрохинолина, которые обладают биологической активностью ретиноидного типа.

В патентах США 4723028 (Shudo), Европейской заявке DE 0170105 (Shuda), заявке Германии DE 3524199 Al (Shudo), PCT WO 85/04652 (Polus) и J. Med. Chem. 1988, 31, 2182-2192 (Kagechika и др.), описаны арил- и гетероарил- или диарилзамещенные олефины или амиды, которые имеют ретиноидную или связанную с ней биологическую активность.

В патентах США 4992468, 5013744, 5068252, 5175185, 5202471, 5264456, 5324840, 5326898, 5349105, 5391753, 5414007 и 5434173 (принадлежащих тому же правопреемнику, что и данная заявка) и патентах и публикациях, указанных выше, описаны соединения, имеющие биологическую активность ретиноидного типа и характеризующиеся структурой, где фенил и гетероарил или фенил и второй фенил соединены олефиновой или ацетиленовой связью. Кроме того, несколько находящихся на рассмотрении заявок и недавно выданных патентов, принадлежащих этому же правопреемнику, что и данная заявка, направлены на получение соединений с активностью ретиноидного типа.

Общеизвестно, что в организмах млекопитающих (и в других организмах) существуют два основных типа ретиноидных рецепторов. Эти два основных типа или семейства рецепторов обозначаются соответственно РРК и РХР. Внутри каждого типа есть подтипы: в семействе РРК подтипы обозначаются PPK,PPK и РРК_r, в семействе РХР существуют подтипы PXP,PXP и РХР_r. Было также установлено, что распределение двух основных типов ретиноидных рецепторов и нескольких подтипов в различных тканях и органах организмов млекопитающих не является однородным.

Известно также, что применение ретиноидов для лечения различных болезней и состояний не обходится без возникновения различных проблем и побочных эффектов. Побочные эффекты при использовании терапевтических доз включают головную боль, тератогенез, кожно-слизистую токсичность, мускульную токсичность, дислипидемию, воспаление кожи, токсичность для печени и т.д. Эти побочные эффекты ограничивают применимость и полезность ретиноидов для лечения болезней. Продолжаются исследования по определению того, какое из семейств РРК и РХР и, внутри каждого семейства, какой подтип или подтипы ответственны за один или несколько нежелательных побочных эффектов. Соответственно, для соединений, способных связываться с ретиноидными рецепторами, специфичность или селективность одного из основных типов или семейств и даже специфичность или селективность одного или нескольких подтипов внутри семейства рецепторов рассматриваются как желательное фармакологическое свойство.

Такая селективность или специфичность полезна как инструмент для исследований при установлении ролей нескольких типов рецепторов и подтипов в вызывании различных эффектов ретиноидов в биологических системах, а также как средство для создания ретиноидных лекарственных средств со специфичными терапевтическими эффектами и/или с уменьшенными побочными эффектами и токсичностью. В этом аспекте в патенте США N 5324840 описывается класс соединений, у которых активность ретиноидного типа сопровождается пониженной токсичностью для кожи и пониженными тератогенными эффектами. В патенте США N 5455265 описаны способы лечения млекопитающих с применением соединений, обладающих агонистической активностью по отношению к рецепторам РХР. Опубликованная Заявка WO 93/11755 также посвящена применению соединений, являющихся селективными агонистами рецепторов РХР.

Данное изобретение предусматривает способы лечения опухолей при помощи соединений, которые являются специфичными или селективными по отношению к PPK. Согласно данному изобретению было обнаружено, что соединения ретиноидного типа, которые действуют селективно или, предпочтительно даже специфично, на подтипы рецептора PPK скорее, чем на подтипы рецепторов PPK и РРК_r, обладают желательными фармацевтическими свойствами, связанными с ретиноидами, и особенно пригодны для лечения новообразований, таких как острый моноцитарный лейкоз, цервикальная карцинома, миеломы, овариальные карциномы, карциномы головы и шеи, без одного или нескольких побочных эффектов, вызываемых ретиноидами, таких как потеря веса, токсичность для кожно-слизистой оболочки, кожные воспаления и тератогенность.

Соответственно настоящее изобретение относится к применению специфичных или селективных по отношению к PPK ретиноидов для лечения болезней и состояний, которые поддаются такому лечению, и особенно для лечения новообразований, прежде всего острого моноцитарного лейкоза, цервикальной карциномы, миеломы, овариальной карциномы, карциномы шеи и головы при помощи ретиноидов, специфичных или селективных по отношению к PPK. В соответствии с данным изобретением селективные по отношению к PPK соединения также используют для лечения пролиферативной витреоретинопатии (ПРР) и возрастной пятнистой дегенерации (ВДП).

Для целей данного описания соединение рассматривается как специфичное или селективное по отношению к PPK, если в процессе трансактивационного анализа (описанного ниже) соединение трансактивирует рецепторы PPK при значительно более низких концентрациях, чем PPK и РРК_r. Вместо измерения трансактивации можно также определить связывание соединения с тремя подтипами РРК рецептора соответственно. Данные, выраженные в величинах Kd, полученные при реакции связывания (описано ниже), также свидетельствуют о способности соединения действовать специфично или селективно на рецепторы PPK в большей степени, чем на PPK и РРК_r рецепторы. Соединение считается специфичным или селективным в отношении PPK для целей данного изобретения, если величина Kd его связывания с рецепторами PPK приблизительно в 500 раз меньше, чем Kd его сродства к рецепторам PPK и РРК_r.

На фиг.1 показан график, показывающий результаты анализа клеточных культур клеток RPMI 8226, осуществленного со всеми селективными соединениями - транс-ретиновой кислотой (АТРК) и двумя PPK в соответствии с данным изобретением.

На фиг. 2 представлен другой график, показывающий результаты анализа клеточных культур AML 193, осуществленного с двумя селективными соединениями к PPK в соответствии с данным изобретением и с двумя соединениями, которые не являются селективными к PPK. На фиг. 3 представлен еще один график, показывающий результаты анализа клеточных культур AML 193, осуществленного с тремя селективными к PPK соединениями в соответствии с настоящим изобретением и со всеми транс-ретиновыми кислотами (АТРК).

На фиг. 4 приведен график, показывающий пролиферацию клеток овариальной опухоли при анализе клеточной культуры (метод EDR) в присутствии различных концентраций Соединения 2 согласно данному изобретению.

На фиг. 5 показан график, показывающий пролиферацию клеток RPE в присутствии всех транс-форм ретиновой кислоты или Соединения 42 в культуральной среде.

На фиг. 6 показан график, показывающий величины веса группы подопытных крыс, которым вводили в течение 3 дней различные дозы селективного к PPK соединения согласно данному изобретению.

На фиг.7 показана диаграмма, демонстрирующая вес группы подопытных крыс в конце 4-дневного периода, когда в течение 3 дней крысам вводили различные дозы Соединения 18 согласно данному изобретению.

На фиг. 8 представлен график, показывающий вес морских свинок, которых лечили различными дозами Соединения 42 в течение 15 дней.

Определения, касающиеся химических соединений, используемых согласно данному изобретению Термин алкил относится к любой и всем группам, известным как нормальный алкнл, разветвленный алкил и циклоалкил. Термин алкенил охватывает нормальный алкенил, разветвленный алкенил и циклоалкенил, имеющие одну или несколько ненасыщенных связей. Точно так же термин алкинил относится к нормальному алкинилу и разветвленному алкинилу, содержащим одну или несколько тройных связей.

Низший алкил означает алкильные группы, содержащие 1-6 атомов углерода в случае нормального низшего алкила и 3-6 атомов углерода в случае разветвленного и циклоалкильного радикалов. Низший алкенил означает группу, содержащую 2-6 атомов углерода в случае нормального низшего алкенила и 3-6 атомов углерода в случае разветвленного и циклоалкенила. Низший алкинил означает также группу, содержащую 2-6 атомов углерода для нормальных низших алкинилов и 4-6 атомов углерода для разветвленных низших алкинилов.

Термин сложный эфир охватывает любое соединение, охватываемое значением этого термина, используемым в классической органической химии. Он относится к органическим и неорганическим сложным эфирам. Когда В в общей формуле предпочтительных соединений по изобретению обозначает -СООН, этот термин охватывает продукты, полученные при обработке этой функциональной группы спиртами или тиоспиртами, предпочтительно алифатическими, содержащими 1-6 атомов углерода. Если сложный эфир является производным соединений, в которых В обозначает -СН₂ОН, этот термин охватывает соединения, полученные из органических кислот, способных образовывать сложные эфиры, включая фосфор- и серусодержащие кислоты, или соединения формулы -CH₂OCOR₁₁, где R₁₁ обозначает любую замещенную или незамещенную алифатическую, ароматическую, гетероароматическую или аралифатическую группу, содержащую предпочтительно 1-6 атомов углерода в алифатических фрагментах.

Если не указано иное, предпочтительные эфиры получают из насыщенных алифатических спиртов или кислот, содержащих 10 или менее атомов углерода или циклических или насыщенных алифатических циклических спиртов и кислот, содержащих 5-10 атомов углерода. Особенно предпочтительны алифатические сложные эфиры, полученные из кислот и спиртов, содержащих низшие алкилы. Также предпочтительными являются фениловые или фениловые, содержащие низшие алкилы, сложные эфиры.

Амиды означают соединения, охватываемые классическим в органической химии определением. В этом случае этот термин включает незамещенные амиды и все алифатические и ароматические моно- или дизамещенные амиды. Если не указано иное, предпочтительны моно- и дизамещенные амиды, содержащие насыщенные алифатические радикалы, с 10 или менее атомами углерода или циклические или насыщенные алифатические циклические радикалы с 5-10 атомами углерода. Особенно предпочтительными амидами являются амиды, полученные из замещенных и незамещенных низших алкиламинов. Также предпочтительны моно- и дизамещенные фениламиды, полученные из замещенных и незамещенных фенил- или низших алкилфениламинов. Предпочтительны также незамещенные амиды.

Ацетали и кетали включают радикалы формулы -СК, где К означает (-OR)₂. В этом случае R обозначает низший алкил. Кроме того К может обозначать -OR₇O-, где R₇ является низшим С_2-5-алкилом, с прямой или разветвленной цепью.

Фармацевтически приемлемая соль может быть получена из любого соединения, используемого согласно данному изобретению и имеющего функциональную группу, способную образовать такую соль, например, кислотную группу. Фармацевтически приемлемая соль является любой солью, которая сохраняет активность родительского соединения и не оказывает вредного или нецеленаправленного воздействия на субъект, которому она вводится и в условиях, в которых она вводится. Фармацевтически приемлемые соли могут быть получены при помощи органических или неорганических оснований. Соль может содержать одно- или поливалентный ион. Особенный интерес представляют собой неорганические ионы натрия, калия, кальция и магния. Органические соли можно получить из аминов, особенно аммониевые соли из моно-, ди- и триалкиламинов или этаноламинов. Соли можно также получить на основе кофеина, трометамина и подобных соединений. Если в молекуле есть азот с достаточной для образования солей с кислотой основностью, такие соли могут быть получены с неорганическими или органическими кислотами или алкилирующим агентом, таким как метилиодид. Предпочтительны соли, полученные из неорганических кислот, таких как соляная, серная или фосфорная. Можно использовать любую из простых органических кислот с одной, двумя или тремя карбоксильными группами.

Некоторые из соединений согласно данному изобретению могут иметь транс- и цис-(Е и Z) изомеры. Кроме того, соединения по изобретению могут содержать один или несколько хиральных центров и, следовательно, могут существовать в энантиомерной и диастереомерной формах. Изобретение охватывает применение всех таких изомеров per se, а также смесей цис- и транс-изомеров, смесей диастереомеров и рацемических смесей энантиомеров (оптические изомеры).

Описание соединений, предпочтительно используемых в способах по изобретению Ретиноидные соединения, применяемые в способах лечения согласно данному изобретению, являются специфичными или селективными по отношению к PPK. Тот факт, что соединение является специфичным или селективным по отношению к PPK, может быть установлен методом трансактивационного анализа, описанным ниже, когда специфичное или селективное по отношению к PPK соединение трансактивирует PPK при значительно меньшей концентрации, чем PPK или РРК_r. При проведении связывающего анализа, когда оценивается способность соединения связывать эти подтипы рецепторов, соединение считается специфичным или селективным по отношению к PPK, если оно связывает PPK примерно в 500 раз сильнее, чем PPK или РРК_r. Кроме того, соединение считается специфичным или селективным по отношению к PPK, если в реакции связывания его величина Kd находится примерно в наномолярном интервале от 10^-1 до 510² и величина Kd для PPK или РР_rК больше 1000 нмоль. Последнее показано как 0,00 в нижеприведенных таблицах, где приведены величины связывания (величины Kd) для некоторых соединений согласно изобретению.

Примерами соединений, которые являются селективными по отношению к PPK, предпочтительно используемых согласно настоящему изобретению, являются соединения формулы 1 и формулы 2 где X₁ обозначает О или X₁ обозначает [C(R₁)₂]_n, где n - целое число от 0 до 2; R₁ независимо обозначает Н или алкил, содержащий 1-6 атомов углерода; R₂ независимо обозначает водород или низший С₁-С₆, алкил; R₃ обозначает водород, низший С₁-С₆ алкил или F; m - целое число 0-5; о - целое число 0-4; р - целое число 0-2; r - целое число 0-2; Х₂ обозначает N или СН; Y обозначает фенил или нафтил, или гетероарил, выбранный из группы, состоящей из пиридила, тиенила, фурила, пиридазинила, пиримидинила, пиразинила, тиазолила, оксазолила, имидазолила и пиразолила, причем указанные фенил, нафтил и гетероарил могут быть замещены одним или двумя R₂; W₁ обозначает заместитель, независимо выбранный из группы, состоящей из F, Br, Cl, I, фторзамещенного С_1-6 алкила, NO₂, и ОН, при условии, что: (i) когда соединение соответствует формуле 1 и Z означает О, сумма р и r равна по меньшей мере 1 и W₁ не является F в положении 3 тетрагидронафталинового кольца; (ii) когда соединение соответствует формуле 1 и r равно 0 и р равно 1 и W₁ обозначает ОН, ОН находится в -положении по отношению к группе L; W₂ обозначает заместитель, независимо выбранный из группы, состоящей из F, Br, Cl, I, фторзамещенного C_1-6 алкила, NO₂, и ОН; W₃ обозначает заместитель, независимо выбранный из группы, состоящей из F, Br, Cl, I, фторзамещенного C_1-6 алкила, NO₂, и ОН, при условии, что когда соединение соответствует формуле 2 и X₂ обозначает СН и r равен 0, р не равен 0 и, по меньшей мере, один W₃ не является алкилом; L обозначает -(C=Z)-NH- или -NH-(C=Z)- Z обозначает О или S, и В обозначает СООН или фармацевтически приемлемую соль, COOR₈, CONR₉R₁₀, -CH₂OH, CH₂OR₁₁, CH₂OCOR₁₁, CHO, CH(OR₁₂)₂, СНОR₁₃О, -COR₇, CR₇(ОR₁₂)₂, CR₇ОR₁₃О, где R₇ обозначает алкил, циклоалкил или алкенил, содержащие 1-5 атомов углерода, R₈ обозначает алкил, содержащий 1-10 атомов углерода или триметилсилилалкил, где алкильная группа содержит 1-10 атомов углерода или циклоалкил с 5-10 атомами углерода, или ₈ обозначает фенил или низший алкилфенил, R₉ и R₁₀ независимо обозначают водород, С_1-10-алкил, C_5-10-циклоалкил, или фенил или низший алкилфенил, R₁₁ обозначает низший алкил, фенил или низший алкилфенил, R₁₂ обозначает низший алкил и R₁₃ обозначает двухвалентный С_2-5-алкил.

В отношении X₁ в формуле 1 следует указать, что в способах согласно изобретению предпочтительно применять соединения, в которых ₁ обозначает [C(R₁)₂] _n и n равен 1 (производные тетрагидронафталина). В отношении ₂ в формуле 2 предпочтительны соединения, в которых Х₂ обозначает СН или N. Если Х₂ обозначает СН, бензольное кольцо предпочтительно является 1,3,5-замещенным, L находится в положении 1 и W₃ и/или R₂ находятся в положениях 3 и 5. Если Х₂ обозначает N, пиридиновое кольцо является предпочтительно 2,4,6-замещенным, L находится в положении 4 и W₃ и/или R₂ находятся в положениях 2 и 6.

R₁ в формуле 1 предпочтительно обозначает Н или СН₃R₃ в формуле 1 предпочтительно обозначает Н. В в предпочтительных соединениях обозначает СООН или фармацевтически приемлемую соль, COOR₈ или CONR₉R₁₀, где R₈, R₉ и R₁₀ указаны выше.

Что касается W₁ и W₂ в формуле 1, эти группы вообще оттягивают электроны, которые находятся в соединениях по изобретению или в ароматической части конденсированных ядер, или в виде заместителя арила или гетероарила Y. Предпочтительно W₂ находится в группе Y и W₁ также содержится в ароматической части конденсированной системы. Если Z обозначает S (тиоамиды), W₁ или W₂ необязательно должны содержаться в соединениях по изобретению в соответствии с формулой 1, хотя предпочтительно, по меньшей мере, один из W₁ или W₂ тем не менее содержится. В ариле или гетероариле Y в соединениях формулы 1 и формулы 2 W₂ предпочтительно расположен в положении, смежном с группой В; предпочтительно В находится в пара-положении в фенильном кольце относительно "амидных" фрагментов и, следовательно, ₂ предпочтительно находится в мета-положении относительно амидных фрагментов. Когда в ароматической части конденсированной системы соединений формулы 1 содержится W₁, предпочтительно, чтобы W₁ находился в положении 8 хроманового ядра и группа Z=C=NH- занимала положение 6. В тетрагидронафталинах формулы 1 группа Z=C=NH- занимает предпочтительно положение 2 и W₁ находится предпочтительно в положении 4. Однако, если W₁ обозначает ОН в соединениях формулы 1, ОН предпочтительно находится в положении 3 в тетрагидронафталиновом кольце.

Предпочтительными W₁ и W₂ группами являются F, NO₂, Br, I, СF₃, СlN₃ и ОН. Особенно предпочтительным является наличие одного или двух фтор-заместителей в Y (W₂). Если Y обозначает фенил, фторзаместители предпочтительно находятся в орто- и орто'-положениях по отношению к В, которая предпочтительно обозначает СООН или COOR₈.

Что касается группы W₃ в формуле 2, эта группа также является группой, оттягивающей электроны, или алкильной группой, наиболее предпочтительными W₃ группами являются F, NO₂, Br, I, СF₃, N₃ и ОН. Кроме того, в фенильном или пиридиновом кольце (показанном в формуле 2 в виде заместителя "(W₃)_р") W₃ является алкилом, предпочтительно разветвленным алкилом, таким как трет. -бутил, и р предпочтительно равен 2.

Что касается символа Y в формуле 1, а также в формуле 2 предпочтительные соединения, используемые в способах согласно данному изобретению, представляют собой такие соединения, в которых Y обозначает фенил, пиридил, 2-тиазолил, тиенил или фурил, более предпочтительно фенил. Что касается заместителей у Y (фенил) и Y (пиридил), то предпочтительны соединения, у которых фенильная группа является 1,4(пара)-замещенной L и В группами и пиридиновое кольцо является 2,5-замещенным L и В группами. (Замещение в 2,5-положениях по номенклатуре для "пиридинов" соответствует замещению в 6-положение по номенклатуре для "никотиновой" кислоты). В предпочтительных соединениях по изобретению нет возможного заместителя R₁ (кроме Н) у группы Y.

L в формуле 1 и в формуле 2 предпочтительно обозначает -(C=Z)-NH- и Z предпочтительно обозначает О. Другими словами, согласно изобретению предпочтительны те карбамоильные или амидные соединения, у которых -NH- присоединена к Y.

Соединения, которые наиболее предпочтительно применять в способах лечения по изобретению, указаны ниже в таблице 1 со ссылкой на формулы 3 и 4 и в таблице 2 со ссылкой на формулу 5.

Способы введения Соединения, специфичные или селективные по отношению к PPK, применяемые согласно изобретению, можно вводить системно или локально, в зависимости от таких факторов, как состояние пациента, необходимость специфичного к определенному участку лечения, количество лекарства, которое нужно ввести, и многочисленные другие факторы.

При лечении дерматозов предпочтительно вводить лекарство локально, хотя в некоторых случаях, например, при лечении острых кистозных угрей или псориаза, можно применять пероральное введение. Можно использовать любой обычный препарат для локального введения, например, раствор, суспензию, гель, мазь или т.п. Приготовление таких локальных препаратов широко известно в области лекарственных средств, как описано, например, в Remington, Pharmaceutical Science, Edition 17, Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania. Локально эти соединения могут быть также введены в виде порошка или лака, в частности, аэрозоля. Если лекарство надо вводить системно, оно может быть в виде порошка, пилюль, таблеток и т.п. или в виде сиропа или эликсира, пригодного для введения перорально. Для внутривенного или внутрибрюшинного введения соединение вводят в виде раствора или суспензии, которые можно инъецировать. В некоторых случаях полезно приготавливать на основе этих соединений суппозитории или препарат с замедленным выделением лекарства для введения под кожу или путем внутримышечной инъекции.

К таким препаратам для местного введения могут быть добавлены другие медикаменты для вторичных целей, например, для лечения сухости кожи; защиты от действия света; другие лекарства для лечения дерматозов; лекарства для предотвращения инфекции, уменьшения раздражения, воспаления и т.п.

Лечение дерматозов или других симптомов, поддающихся лечению соединениями типа ретиновой кислоты, будет эффективным при введении терапевтически эффективной дозы одного или нескольких соединений по изобретению. Терапевтической концентрацией считается такая концентрация, которая вызывает улучшение конкретного состояния или замедляет его распространение. В некоторых случаях соединение можно применять профилактически для предотвращения появления болезненного состояния.

Терапевтическая или профилактическая концентрация меняется в зависимости от состояния и в некоторых случаях будет меняться с ухудшением состояния и восприимчивости пациента к лечению. Соответственно, не является установленной какая-то определенная концентрация, но она требует изменения в зависимости от особенностей болезни. Такие концентрации определяют при рутинном эксперименте. Однако, установлено, что при лечении, например, угрей или похожих дерматозов терапевтически эффективная концентрация составляет 0,01-1,0 мг на мл препарата. Если вводить лекарство системно, то ожидается, что для получения терапевтического действия при лечении многих болезней надо применять 0,01-5,0 мг на кг веса тела в день.

Анализ селективной биологической активности в отношении PPK и ее значение, приводящее к снижению побочных эффектов и токсичности Во вводной части данного описания отмечалось, что у млекопитающих (и в других организмах) существуют два основных типа рецепторов ретиновой кислоты (РРК и РХР). Внутри каждого типа существуют подтипы (PPK,PPK, РРК_r, PXP,PXP и РХР_r), распределение которых является неоднородным в различных тканях и органах организма млекопитающих. Селективное связывание только одного или двух подтипов ретиноидных рецепторов внутри одного семейства этих рецепторов может привести к выгодным фармакологическим свойствам вследствие меняющегося распределения подтипов в нескольких тканях или органах млекопитающего. По вышеприведенным причинам связывание любого или всех ретиноидных рецепторов, а также специфичная или селективная активность к любому подтипу рецепторов являются желательными фармакологическими свойствами.

В свете сказанного были разработаны методы анализа для испытания агонистической активности соединений в отношении подтипов PPK,PPK, РРК_r, PXP,PXP и РХР_r. Например, метод анализа трансактивации химерного рецептора, который позволяет определить агонистическую активность в отношении PPK,PPK, РРК_r и PXP подтипов и который основан на работе Feigner P.L. and Holm M. (1989) Focus, 112, описан подробно в патенте США N 5 455 265, включенном в данное описание в качестве ссылки.

Способ анализа трансактивации голорецептора и метод связывания лигандов, которые основаны на измерении способности соединений связывать некоторые подтипы ретиноидных рецепторов, описаны соответственно в WO 93/11755 (в частности, на стр. 30-33 и 37-41), опубликованной 24 июня 1993, включенной в данное описание в качестве ссылки. Описание метода связывания приведено также ниже.

ИССЛЕДОВАНИЕ СВЯЗЫВАНИЯ Все исследования связывания осуществляют одинаково. Все шесть типов рецепторов были получены из экспрессионного типа рецептора (РАР ,, Г и РХР ,, Г), экспрессию осуществляли в Baculovirus. Исходные растворы всех соединений были приготовлены в виде растворов в этаноле с концентрацией 10 мМ и была приготовлена серия разбавленных растворов 1:1 ДМСО:этанолом. Буферные растворы для анализа всех шести рецепторов имели следующей состав: 8% глицерина, 120 мМ КСl, 8 мМ Трис, 5 мМ CHAPS, 4 мМ DTT и 0,24 мМ ФМСФ, рН 7,4 при комнатной температуре.

Все исследования связывания рецепторов осуществляли одинаково. Конечный объем был равен 250 мкл и раствор содержал 20-40 мкг белкового экстракта в зависимости от исследуемого рецептора вместе с 5 нМ [³Н]-полностью транс-ретиновой кислоты или 10 нМ [³Н]-9-цис-ретиновой кислоты и изменяющихся концентраций конкурентного лиганда, находящихся в интервале 0-10^-5 М. Для анализа использовали систему с 96 лунками. Инкубирование осуществляли при 4^oС до достижения равновесия. Неспецифичные связывания определяли как остаточное связывание в присутствии 1000 нМ соответствующего изомера ретиновой кислоты, не содержащего метки. В конце инкубационного периода добавляли в соответствующем отмывающем буфере 50 мкл 6,25%-ного гидроксиапатита. Отмывающий буфер состоял из 100 мМ КСl, 10 мМ Трис и/или 5 мМ CHAPS (PXP ,, r), или 0.5% Triton X-100 (PAP ,, r). Смесь перемешивали и осуществляли инкубирование в течение 10 минут при 4^oС, центрифугировали и удаляли надосадочную жидкость. Гидроксиапатит промывали еще три раза подходящим буфером. Комплекс рецептор-лиганд адсорбировался гидроксиапатитом. Количество комплекса рецептор-лиганд определялось при помощи жидкостного сцинтилляционного счетчика на гранулах гидроксиапатита.

После корректировки неспецифичного связывания определяли величины IC₅₀. Величина IC₅₀ определяется как концентрация конкурентного лиганда, необходимая для уменьшения специфичного связывания на 50%. Величина IC₅₀ была определена графически по логарифмическому графику. Величины K_d определяли с применением уравнения Ченга-Прусоффа для IC₅₀, концентрации меченого лиганда и К_d меченого лиганда. Результаты исследования связывания лиганда выражены в величинах К_d. (См. Cheng и др. Biochemical Pharmacology, Vol. 22, рр. 3099-3108, включенную в данное описание в качестве ссылки).

В таблице 3 приведены результаты исследования связывания лиганда для некоторых заявленных соединений.

Как можно видеть из вышеприведенных данных, соединения по изобретению специфично или селективно связываются с PPK