Пирамидо[5,4-d]пиримидины и лекарственные средства со свойствами ингибитора тирозинкиназы семейства рецепторов эпидермального фактора роста на их основе

Пирамидо[5,4-d]пиримидины и лекарственные средства со свойствами ингибитора тирозинкиназы семейства рецепторов эпидермального фактора роста на их основе

Реферат

 

Изобретение относится к новым пиримидо[5,4-d]пиримидинам общей формулы I и лекарственным средствам со свойствами ингибитора тирозинкиназы семейства рецепторов эпидермального фактора роста на их основе. В соединениях общей формулы I Ra означает атом водорода, Rb означает 3-хлорфенильную, 3-хлор-4-фторфенильную, 3-(1,1,2,2-тетрафторэтокси)фенильную, 4-амино-3,5-дихлорфенильную, 4-(бензил)фенильную, 3-(бензилокси)фенильную, 4-(бензилокси)фенильную, 3-гидроксиметилфенильную, бифенил-4-ильную, 3-феноксифенильную, 4-феноксифенильную, 3-трифторметоксифенильную, 4-(бензилокси)-3-хлорфенильную, 3-хлор-4-феноксифенильную, 3-хлор-4-цианофенильную или 4-хлор-3-цианофенильную группу, или Ra и Rb вместе с находящимся между ними атомом азота означают индолин-1-ильную или 1,2,3,4-тетрахинолин-1-ильную группу и т.д. Изобретение также относится к лекарственному средству, содержащему соединение или физиологически приемлемую соль соединений формулы I и при необходимости один или несколько инертных носителей и/или разбавителей. 2 с. и 3 з.п. ф-лы. 1 табл.

Изобретение относится к новым бициклическим гетероциклическим соединениям, обладающим свойствами ингибитора обосредованной тирозинкиназ сигнальной трансдукции, в частности к пиримидино[5,4-d]пиримидинам и к лекарственному средству на их основе.

Из международной заявки WO 95/19774, А 61 К, опубл. 27.07.1995, известны пиримидо[5,4-d] пиримидины, обладающие свойствами ингибитора тирокилазы семейства рецепторов эпидермального фактора роста.

Задачей данного изобретения является расширение ассортимента производных пиримидино[5,4-d]пиримидина, обладающих свойствами ингибитора тирокиназы семейства рецепторов эпидермального фактора роста.

Поставленная задача решается в новых пиримидо[5,4-d]-пиримидинах общей формулы (I) где R_a означает атом водорода; R_b означает 3-хлорфенильную, 3-хлор-4-фторфенильную, 3-(1,1,2,2-тетрафторэтокси)фенильную, 4-амино-3,5-дибромфенильную, 4-амино-3,5-дихлорфенильную, 4-(бензил)фенильную, 3-(бензилокси)фенильную, 4-(бензилокси)фенильную, 3-(гидроксиметил)фенильную, бифенил-4-ильную, 3-феноксифенильную, 4-феноксифенильную, 3-трифторметоксифенильную, 4-(бензилокси)-3-хлорфенильную, 3-хлор-4-феноксифенильную, 3-хлор-4-цианофенильную или 4-хлор-3-цианофенильную группу; или R_a и R_b вместе с находящимся между ними атомом азота означают индолин-1-ильную или 1,2,3,4-тетрагидрохинолин-1-ильную группу; R_c означает замещенную в положении 4 4-гидроксифенильной группой и дополнительно в положении 2 метильной группой пирролидин-1-ильную группу; пиперидин-1-ильную группу, незамещенную или замещенную в положении 4 амино-, метиламино-, гидроксильной, формиламино-, метоксикарбониламино-, N-метил-N-метилсульфониламино-, аминометильной, морфолино, пирролидин-1-ильной, пиперазин-1-ильной, 4-диметиламинопиперидин-1-ильной, пиперидин-4-ильной или 1-метилпиперидин-4-ильной группой; 4-амино-3-метилпиперидин-1-ильную группу; 4-амино-4-метилпиперидин-1-ильную группу; пиперидин-1-ильную группу, замещенную в положении 3 аминометильной, аминокарбонильной или аминокарбонилметильной группой; 1-азациклогептильную или 4-амино-1-азациклогептильную группу; морфолиногруппу; пиперазин-1-ильную группу, замещенную в положении 4 2-метоксифенильной, 3-метоксифенильной или 4-метоксифенильной группой; гомопиперазин-1-ильную или 4-метилгомопиперазин-1-ильную группу; замещенную в положении 3 амино- или ацетиламиногруппой 8-аза-бицикло[3.2.1]окт-8-ильную группу; или группу (R₄NR₅), в которой R₄ означает атом водорода, R₅ означает метильную группу, замещенную пиперидин-4-ильной, 1-метилпиперидин-4-ильной, 1-трет.-бутилоксикарбонилпиперидин-4-ильной или хинуклидин-4-ильной группой; этильную группу, замещенную в положении 2 4-трет.-бутилоксикарбонилпиперазин-1-ильной или 4-(морфолинокарбонил)пиперазин-1-ильной группой; 2,2-диметоксиэтильную группу; проп-2-ильную группу, замещенную в положении 1 феноксигруппой или 4-аминофенильной группой, 5-аминопентильную группу; циклогексильную группу, замещенную в положении 4 гидроксильной, диметиламино-, 1-метилпиперазин-4-ильной, пиперазин-1-ил-карбонильной, 1-метилпиперазин-4-ил-карбонильной, 4-диметиламинопиперидин-1-ильной, карбоксильной, морфолинокарбонильной, (пирролидин-1-ил)карбонильной, метоксикарбонильной, аминометильной, метиламино-, метоксикарбониламино-, 2-(морфолинокарбонил)-этильной или 2-(пирролидин-1-илкарбонил)этильной группой; циклогексилметильную группу, в циклогексильной части замещенную в положении 4 амино-, аминометильной или бензилоксикарбониламиногруппой или в положении 3 аминометильной группой; 1-метилпиперидин-3-ильную группу; пиперидин-4-ильную группу, замещенную в положении 1 циано-, метильной, трет. -бутилоксикарбонильной, (N, N-диметиламино)-карбонильной или метоксикарбонильной группой; 4-аминобензильную группу; хинуклидин-3-ильную, 1-бензил-4-(азациклогептил)-, 1-трет. -бутилоксикарбонил-4-(азациклогептил)- или 4-(азациклогептил)группу; за исключением следующих соединений: 4-[(4-амино-3,5-дибромфенил)амино] -6-[(транс-4-гидроксициклогексил)амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(4-амино-3,5-дихлорфенил)амино] -6-[(транс-4-гидроксициклогексил)амино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(4-амино-3-нитрофенил)амино] -6-[(транс-4-гидроксициклогексил)амино] пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(4-амино-3-нитрофенил)амино]-6-(морфолино)пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(4-хлор-3-нитрофенил)амино] -6-[(транс-4-гидроксициклогексил)амино] пиримидо[5,4-d]пиримидин; а также соединений, в которых группа R_aNR_b означает (3-хлорфенил)амино-, (3-нитрофенил)амино- или (3-этинилфенил)аминогруппу, если R_c одновременно означает тетрагидрофурфуриламино-, морфолино-, 1-метилпиперидин-4-иламино-, N-(4-гидроксициклогексил)-N-метиламино-, 4-гидроксициклогексиламино-, 4-диметиламиноциклогексиламино-, транс-4-карбоксициклогексиламино-, транс-4-(пирролидин-1-ил)карбонилциклогексиламино- или транс-4-морфолинокарбонилциклогексиламиногруппу; и соединений, в которых группа R_aNR_b означает (3-хлор-4-фторфенил)аминогруппу, если R_c одновременно означает 1-метилпиперидин-3-иламино-, тетрагидрофупфуриламино-, 3-(метоксикарбониламино)проп-1-иламино-, N-метил-N-(2-гидроксиэтил)-амино-, 4-аминопиперидин-1-ильную, морфолино-, 1-метилпиперидин-4-иламино-, 4-гидроксициклогексиламино-, 4-диметиламиноциклогексиламино-, N-(4-гидроксициклогексил)-N-метиламино-, транс-4-карбоксициклогексиламино-, транс-4-(2-(морфолинокарбонил)этил)циклогексиламино-, транс-4-(пирролидин-1-ил)карбонилциклогексиламино- или транс-4-морфолинокарбонилциклогексиламиногруппу; их таутомеры, стереоизомеры и соли.

Предпочтительными согласно изобретению соединениями являются следующие соединения общей формулы (I): 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[4-метоксикарбониламинопиперидин-1-ил] -пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[(хинуклидин-3-ил)амино]пиримидо[5,4-d] -пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[4-формиламинопиперидин-1-ил]пиримидо-[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[4-(аминометил)пиперидин-1-ил] пиримидо-[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[1-метоксикарбонилпиперидин-4-ил-амино] -пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино]-6-[3-аминопропиламино]пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино]-6-[4-аминобензиламино]пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(4-амино-3,5-дихлорфенил)амино]-6-[транс-4-(морфолинокарбонил)циклогексиламино]пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(4-амино-3,5-дихлорфенил)амино]-6-[транс-4-(пирролидинокарбонил)циклогексиламино]пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино]-6-[4-(пиперидин-4-ил)пиперидин-1-ил]пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино]-6-[4-(аминометил)циклогексилметиламино]пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[хинуклидин-4-илметиламино] пиримидо-[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[2-амино-2-метилпроп-1-иламино] пиримидо-[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино]-6-[N-метил-N-(1-метилпиперидин-4-ил)амино] -пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[пиперидин-4-илметиламино] пиримидо[5,4-d]-пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[4-(морфолино)пиперидин-1-ил]пиримидо-[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино]-6-[4-(пирролидин-1-ил)пиперидин-1-ил]пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[3-(аминометил)циклогексилметиламино] пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперидин-1-ил]-пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино]-6-[4-(1-метилпиперазин-4-ил)циклогексиламино]пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[4-гидроксипиперидин-1-ил] пиримидо[5,4-d]-пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[(1-цианопиперидин-4-ил)амино] пиримидо-[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино]-6-[(1-метилпиперидин-4-ил)метиламино]пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[2-(4-(морфолинокарбонил)пиперазин-1-ил)-этиламино]пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[4-амино-1-азациклогептил] пиримидо[5,4-d]-пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино]-6-[4-(азациклогептил)амино]пиримидо[5,4-d] -пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[транс-4-аминометилциклогексиламино]пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[3-аминометилпиперидин-1-ил] пиримидо-[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперидин-1-ил]-пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[4-амино-4-метилпиперидин-1-ил] пиримидо-[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[эндо-3-ацетиламино-8-азабицикло[3.2.1] -окт-8-ил]пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино]-6-[4-(4-аминопиперидин-1-ил)метилпиперидин-1-ил]пиримидо[5,4-d]пиримидин; 4-[(4-бензилоксифенил)амино] -6-[транс-4-диметиламиноциклогексиламино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин; (3'S)-4-[3-хлорфениламино] -6-[(хинуклидин-3'-ил)амино] пиримидо[5,4-d] пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[1-диметиламинокарбонилпиперидин-4-ил-амино]пиримидо[5,4-d]пиримидин; (3'S)-4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино]-6-[(хинуклидин-3'-ил)амино]пиримидо-[5,4-d]пиримидин; (3'R)-4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино]-6-[(хинуклидин-3'-ил)амино]пиримидо-[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[1-метилпиперидин-4-иламино] пиримидо-[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино]-6-[-4-диметиламиноциклогексиламино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин и их соли.

Наиболее предпочтительными согласно изобретению соединениями являются следующие соединения общей формулы (I): 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[1-метилпиперидин-4-иламино] пиримидо-[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[4-амино-4-метилпиперидин-1-ил] пиримидо-[5,4-d]пиримидин; 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино]-6-[-4-диметиламиноциклогексиламино]-пиримидо[5,4-d]пиримидин; (3'S)-4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[(хинуклидин-3'-ил)амино] пиримидо-[5,4-d]пиримидин и их соли.

Например, следует упомянуть следующее ценное соединение общей формулы (I): 4-[(3-хлор-4-фторфенил)амино] -6-[1-метилпиперидин-4-иламино] пиримидо-[5,4-d]пиримидин и его соли.

Соединения общей формулы (I) можно получать, например, следующими способами: а) Соединение общей формулы (II): в которой R_c имеет указанное вначале значение и Z₁ означает удаляемую группу, как атом галогена, например атом хлора или брома, или метилсульфонильная или гидроксильная группа, вводят во взаимодействие с амином общей формулы (III): H-(R_aNR_b), (III) в которой R_a и R_b имеют указанные вначале значения.

Взаимодействие целесообразнее осуществляют в растворителе, таком как изопропанол, бутанол, тетрагидрофуран, диоксан, толуол, хлорбензол, диметилформамид, диметилсульфоксид, этиленгликольмонометиловый эфир, этиленгликольдиэтиловый эфир или сульфолан, в случае необходимости в присутствии неорганического основания, как, например, карбонат натрия или гидроксид калия, или третичного органического основания, как, например, триэтиламин или пиридин, причем последние одновременно также могут служить в качестве растворителя, и в случае необходимости в присутствии ускорителя реакции, как, например, соль меди, соответствующий гидрогалогенид амина или галогенид щелочного металла, при температурах от 0 до 200^oС, предпочтительно, однако, при температурах от 60 до 150^oС. Однако реакцию также можно проводить без растворителя или в избытке используемого соединения общей формулы (III).

Если Z₁ означает гидроксильную группу, то взаимодействие целесообразнее осуществляют в присутствии гексаметилдисилазана, предпочтительно без других растворителей и в случае необходимости в присутствии ускорителя реакции, как, например, органическая кислота, такая как, например, толуолсульфокислота, при температурах от 0 до 200^oС, предпочтительно, однако, при температурах от 60 до 180^oС.

б) Для получения соединений общей формулы (I), в которой R_c означает один из указанных вначале для R_c остатков, связанных через атом кислорода или азота с пиримидо[5,4-d]пиримидином, соединение общей формулы (IV): в которой R_a и R_b имеют указанные вначале значения и Z₂ означает удаляемую группу, как атом галогена, замещенная гидроксильная, меркапто-, сульфинильная или сульфонильная группа, как, например, атом хлора или брома, метокси-, этокси-, фенокси-, метилсульфинильная, этилсульфинильная, метилсульфонильная или этилсульфонильная группа, вводят во взаимодействие с соединением общей формулы (V): H-R_c, (V) в которой R_c означает один из указанных вначале для R_c остатков, связанные через атом кислорода или азота с пиримидо[5,4-d]пиримидином.

Взаимодействие целесообразнее осуществляют в растворителе, таком как изопропанол, бутанол, тетрагидрофуран, диоксан, толуол, хлорбензол, диметилформамид, диметилсульфоксид, этиленгликольмонометиловый эфир, этиленгликольдиэтиловый эфир или сульфолан, в случае необходимости в присутствии неорганического основания, как, например, карбонат натрия или гидроксид калия, или третичного органического основания, как, например, триэтиламин или пиридин, причем последние одновременно также могут служить в качестве растворителя, и в случае необходимости в присутствии ускорителя реакции, как, например, соль меди, соответствующий гидрогалогенид амина или галогенид щелочного металла, при температурах от 0 до 150^oС, предпочтительно, однако, при температурах от 20 до 120^oС. Однако реакцию также можно проводить без растворителя или в избытке используемого соединения общей формулы (V).

Реакцию со спиртом общей формулы (V) предпочтительно проводят в соответствующем спирте и в случае необходимости в присутствии органического или неорганического основания, как, например, соответствующий алкоголят щелочного металла, при температурах от 0 до 100^oС.

Если получают соединение общей формулы (I), которое содержит амино-, алкиламино- или иминогруппу, то путем ацилирования или сульфонилирования его можно переводить в соответствующее ацильное или сульфонильное соединение общей формулы (I); или если получают соединение общей формулы (I), которое содержит амино-, алкиламино- или иминогруппу, то путем алкилирования или восстановительного алкилирования его можно переводить в соответствующее алкильное соединение общей формулы (I); или если получают соединение общей формулы (I), которое содержит карбоксильную группу, то путем этерификации его можно переводить в соответствующий сложный эфир общей формулы (I); или если получают соединение общей формулы (I), которое содержит карбоксильную или сложноэфирную группу, то путем амидирования его можно переводить в соответствующий амид общей формулы (I); или если получают соединение общей формулы (I), которое содержит первичную или вторичную гидроксильную группу, то путем окисления его можно переводить в соответствующее карбонильное соединение общей формулы (I).

Последующую этерификацию с образованием сложного эфира, в случае необходимости, осуществляют в растворителе или смеси растворителей, как, например, дихлорметан, диметилформамид, бензол, толуол, хлорбензол, тетрагидрофуран, смесь бензола с тетрагидрофураном или диоксан, или особенно предпочтительно в соответствующем спирте, в случае необходимости в присутствии кислоты, такой как соляная кислота, или в присутствии дегидратирующего средства, например в присутствии изобутилового эфира хлормуравьиной кислоты, тионилхлорида, триметилхлорсилана, серной кислоты, метансульфокислоты, п-толуолсульфокислоты, трихлорида фосфора, пентоксида фосфора, N,N'-дициклогексилкарбодиимида, смеси N,N'-дициклогексилкарбодиимида с N-гидроксисукцинимидом или 1-гидроксибензотриазола, и в случае необходимости дополнительно в присутствии 4-диметиламинопиридина, N, N'-карбонилдиимидазола или смеси трифенилфосфина с тетрахлоридом углерода, целесообразнее при температурах от 0 до 150^oС, предпочтительно при температурах от 0 до 80^oС.

Последующее ацилирование или сульфонилирование в случае необходимости осуществляют в растворителе или смеси растворителей, как, например, дихлорметан, диметилформамид, бензол, толуол, хлорбензол, тетрагидрофуран, смесь бензола с тетрагидрофураном или диоксан, с помощью соответствующего ацильного или сульфонильного производного, в случае необходимости в присутствии третичного органического основания или в присутствии неорганического основания или в присутствии дегидратирующего средства, например в присутствии изобутилового эфира хлормуравьиной кислоты, тионилхлорида, триметилхлорсилана, серной кислоты, метансульфокислоты, п-толуолсульфокислоты, трихлорида фосфора, пентоксида фосфора, N,N'-дициклогексилкарбодиимида, смеси N,N'-дициклогексилкарбодиимида с N-гидроксисукцинимидом или 1-гидроксибензотриазола, и в случае необходимости дополнительно в присутставии 4-диметиламинопиридина, N,N'-карбонилдиимидазола или смеси трифенилфосфина с тетрахлоридом углерода, целесообразнее при температурах от 0 до 150^oС, предпочтительно при температурах от 0 до 80^oС.

Последующее алкилирование в случае необходимости проводят в растворителе или смеси растворителей, как, например, дихлорметан, диметилформамид, бензол, толуол, хлорбензол, тетрагидрофуран, смесь бензола с тетрагидрофураном или диоксан, с помощью алкилирующего средства, как с помощью соответствующего галогенида или эфира сульфокислоты, как, например, с помощью метилиодида, этилбромида, диметилсульфата или бензилхлорида, в случае необходимости в присутствии третичного органического основания или в присутствии неорганического основания, целесообразнее при температурах от 0 до 150^oС, предпочтительно при температурах от 0 до 100^oС.

Последующее восстановительное алкилирование осуществляют с помощью соответствующего карбонильного соединения, такого как формальдегид, ацетальдегид, пропионовый альдегид, ацетон или бутиральдегид, в присутствии комплексного гидрида металла, как боргидрид натрия, боргидрид лития или цианоборгидрид натрия, целесообразнее при значении рН от 6 до 7 и при комнатной температуре, или в присутствии катализатора гидрирования, например с помощью водорода в присутствии палладия-на-угле, при давлении водорода от одного до пяти бар. Метилирование, однако, предпочтительно осуществляют в присутствии муравьиной кислоты в качестве восстановителя при повышенных температурах, например при температурах от 60 до 120^oС.

Последующее амидирование осуществляют путем введения во взаимодействие соответствующего реакционноспособного производного карбоновой кислоты с соответствующим амином, в случае необходимости в растворителе или смеси растворителей, как, например, дихлорметан, диметилформамид, бензол, толуол, хлорбензол, тетрагидрофуран, смесь бензола с тетрагидрофураном или диоксан, причем используемый амин одновременно может служить растворителем, в случае необходимости в присутствии третичного органического основания или в присутствии неорганического основания, или с соответствующей карбоновой кислотой в присутствии дегидратирующего средства, например в присутствии изобутилового эфира хлормуравьиной кислоты, тионилхлорида, триметилхлорсилана, серной кислоты, метансульфокислоты, п-толуолсульфокислоты, трихлорида фосфора, пентоксида фосфора, О-(бензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилуронийтетрафторбората, N, N'-дициклогексилкарбодиимида, смеси N,N'-дициклогексилкарбодиимида с N-гидроксисукцинимидом или 1-гидроксибензотриазола, и в случае необходимости дополнительно в присутствии 4-диметиламинопиридина, N, N'-карбонилдиимидазола или смеси триметилфосфина с тетрахлоридом углерода, целесообразнее при температурах от 0 до 150^oС, предпочтительно при температурах от 0 до 80^oС.

Последующее окисление осуществляют в случае необходимости в растворителе, таком как дихлорметан, вода, диметилформамид, бензол, хлорбензол, тетрагидрофуран или диоксан, с помощью окислителя, как, например, хромовая смесь, триоксид хрома и пиридин, пиридинийдихромат, пиридиний-хлорхромат, оксалилхлорид с диметилсульфоксидом и триэтиламином, тетра-н-пропилперрутенат с N-метилморфолин-N-оксидом, трихлорид рутения с метапериодатом натрия или реагент Десс-Мартина, целесообразнее при температурах от - 80 до 100^oС, предпочтительно при температурах от - 80^oС до комнатной температуры.

В случае вышеописанных превращений имеющиеся реакционноспособные группы, как гидроксильные, карбоксильные, амино-, алкиламино- или иминогруппы, во время взаимодействия в случае необходимости можно защищать с помощью обычных защитных групп, которые после реакции снова отщепляют.

Например, в качестве защитной группы для гидроксильной группы используют триметилсилильную, ацетильную, бензоильную, метильную, этильную, трет.-бутильную, трифенилметильную, бензильную или тетрагидропиранильную группу; в качестве защитных групп для карбоксильной группы используют триметилсилильную, метильную, этильную, трет.-бутильную, бензильную или тетрагидропиранильную группу; в качестве защитных групп для фосфоногруппы используют алкильную группу, как, например, метильная, этильная, изопропильная или н-бутильная группа; фенильную или бензильную группу; в качестве защитных групп для амино-, алкиламино- или иминогруппы используют формильную, ацетильную, трифторацетильную, этоксикарбонильную, трет. -бутоксикарбонильную, бензилоксикарбонильную, бензильную, метоксибензильную или 2,4-диметоксибензильную группу, а для аминогруппы дополнительно используют фталильную группу; и в качестве защитных групп для атома азота используют 1-азабициклоалкильную группу, как, например, хинуклидинильная группа, бензильная группа или боран.

Последующее в случае необходимости отщепление используемой защитной группы осуществляют, например, гидролитически в водном растворителе, например в воде, смеси изопропанола с водой, уксусной кислоты с водой, тетрагидрофурана с водой или диоксана с водой, в присутствии кислоты, как трифторуксусная кислота, соляная кислота или серная кислота, или в присутствии основания щелочного металла, как гидроксид натрия или гидроксид калия, или апротонно, например в присутствии иодтриметилсилана, при температурах от 0 до 120^oС, предпочтительно при температурах от 10 до 100^oС.

Бензильную, метоксибензильную или бензилоксикарбонильную группу, однако, отщепляют, например, гидрогенолитически, например с помощью водорода в присутствии катализатора, как палладий-на-угле, в пригодном растворителе, как метанол, этанол, этилацетат или ледяная уксусная кислота, в случае необходимости при добавке кислоты, как соляная кислота, при температурах от 0 до 100^oС, предпочтительно, однако, при температурах от 20 до 60^oС, и при давлении водорода от одного до семи бар, предпочтительно, однако, от трех до пяти бар. 2,4-Диметоксибензильную группу, однако, предпочтительно отщепляют в трифторуксусной кислоте в присутствии анизола.

Отщепление трет. -бутильной или трет. -бутилоксикарбонильной группы предпочтительно осуществляют путем обработки с помощью кислоты, такой как трифторуксусная кислота или соляная кислота, или путем обработки с помощью иодтриметилсилана, в случае необходимости при использовании растворителя, как, например, дихлорметан, диоксан, метанол или диэтиловый эфир.

Отщепление трифторацетильной группы предпочтительно осуществляют путем обработки кислотой, как, например, соляная кислота, в случае необходимости в присутствии растворителя, такого как уксусная кислота, при температурах от 50 до 120^oС, или путем обработки раствором гидроксида натрия, в случае необходимости в присутствии растворителя, как тетрагидрофуран, при температурах от 0 до 50^oС.

Отщепление фталильной группы предпочтительно осуществляют в присутствии гидразина или первичного амина, как метиламин, этиламин или н-бутиламин, в растворителе, как метанол, этанол, изопропанол, смесь толуола с водой или диоксан, при температурах от 20 до 50^oС.

Расщепление комплекса 1-азабициклоалкильной группы, как хинуклидинильная группа, с бораном предпочтительно проводят путем обработки кислотой, такой как соляная кислота, и в случае необходимости в присутствии растворителя, как метанол, этанол, уксусная кислота или диоксан, при температурах от 0^oС до температуры кипения реакционной смеси. При этом превращении возможно имеющуюся сложноэфирную группу одновременно можно переводить в соответствующую карбоксильную группу.

Далее полученные соединения общей формулы (I), как уже упоминалось вначале, можно разделять на их энантиомеры и/или диастереомеры. Так, например, цис-/транс-смеси можно разделять на их цис- и транс-изомеры, и соединения по меньшей мере с одним оптически активным атомом углерода можно разделять на их энантиомеры.

Так, например, полученные цис-/транс-смеси можно разделять путем хроматографии на их цис- и транс-изомеры; полученные соединения общей формулы (I), которые находятся в виде рацематов, само по себе известными методами (см. Allinger N.L. и Eliel E.L. Проблемы стереохимии, том 6, Wiley Interscience, 1971 г.) можно разделять на их оптические антиподы, и соединения общей формулы (I) по меньшей мере с двумя асимметрическими атомами углерода на основании их физико-химических различий само по себе известными методами, например путем хроматографии и/или фракционной кристаллизации, можно разделять на их диастереомеры, которые, если они находятся в рацемической форме, затем можно разделять, как упомянуто выше, на энантиомеры.

Разделение энантиомеров предпочтительно осуществляют путем колоночного разделения на хиральных фазах или путем перекристаллизации из оптически активного растворителя или путем введения во взаимодействие с оптически активным веществом, образующим с рацемическим соединением соли или производные, как, например, сложные эфиры или амиды, в особенности с кислотами и их активированными производными или спиртами, и разделения полученной таким образом диастереомерной смеси солей или производных, например, на основании различных растворимостей, причем из чистых диастереомерных солей или производных можно высвобождать свободные антиподы путем воздействия пригодного средства. Особенно используемыми оптически активными кислотами являются, например, D- и L-формы винной кислоты или дибензоилвинной кислоты, ди-о-толилвинной кислоты, яблочной кислоты, миндальной кислоты, камфорсульфокислоты, глутаминовой кислоты, аспарагиновой кислоты или хинной кислоты. В качестве оптически активного спирта используют, например, (+)- или (-)-ментол и в качестве оптически активного ацильного остатка в амидах используют, например, (+)- или (-)-ментилоксикарбонил.

Далее полученные соединения формулы (I) можно переводить в их соли, в особенности для фармацевтического применения в их физиологически приемлемые соли с неорганическими или органическими кислотами. В качестве кислот для этой цели используют, например, соляную кислоту, бромоводородную кислоту, серную кислоту, фосфорную кислоту, фумаровую кислоту, янтарную кислоту, молочную кислоту, лимонную кислоту, винную кислоту или малеиновую кислоту.

Кроме того, таким образом полученные новые соединения формулы (I), в случае, если они содержат карбоксильную, фосфоновую, O-алкилфосфоновую, сульфо- или тетразол-5-ильную группу, в желательном случае затем переводят в их соли с неорганическими или органическими основаниями, в особенности для фармацевтического применения в их физиологически приемлемые соли. В качестве оснований при этом используют, например, гидроксид натрия, гидроксид калия, аргинин, циклогексиламин, этаноламин, диэтаноламин и триэтаноламин.

Используемые в качестве исходных веществ соединения общих формул от (II) до (V) частично известны из литературы или их получают само по себе известными из литературы способами (см. примеры от I до XLVIII).

Как уже упоминалось вначале, предлагаемые согласно изобретению соединения общей формулы (I) и их физиологически приемлемые соли обладают ценными фармакологическими свойствами, в особенности специфическим подавляющим воздействием на опосредованную рецептором эпидермального фактора роста (EGF-R) сигнальную трансдукцию, причем на нее можно воздействовать, например, путем ингибирования связывания лигандов, димеризации рецептора или даже тирозинкиназы. Кроме того, возможно, что сигнальная трансдукция блокируется дальнейшими, нижерасположенными компонентами.

При этом дальнейшим объектом данного изобретения является лекарственное средство, обладающее свойствами ингибитора тирозинкиназы семейства рецепторов эпидермального фактора роста.

Биологически свойства новых соединений испытывают следующим образом.

Подавление опосредованной рецептором эпидермального фактора роста сигнальной трансдукции можно обнаружить, например, с помощью клеток, которые выражают рецептор человеческого эпидермального фактора роста и выживание и пролиферация которых зависят от стимулирования эпидермальным фактором роста, соответственно, трансформирующим а-фактором роста. В данном случае используют зависимую от интерлейкина-3 (IL-3) линию клеток мышиного происхождения, которая генетически изменена таким образом, что она выражает функциональный рецептор человеческого эпидермального фактора роста. Пролиферацию этих, обозначаемых как F/L-HERc, клеток поэтому можно стимулировать либо с помощью мышиного интерлейкина-3, либо с помощью эпидермального фактора роста (см. Rbden Т. и др., ЕМВО J., 7, 2749 - 2756 (1988), и Pierce J.H. и др., Science, 239, 628-631 (1988)).

В качестве исходного материала для клеток F/L-HERc служит линия клеток FDC-P₁, получение которой описывается Dexter Т.М. и др., J. Exp. Med., 152, 1036-1047 (1980). Альтернативно, однако, также можно использовать другие, зависимые от фактора роста клетки (см., например, Pierce J.H. и др., Science, 239, 628-631 (1988); Shibuya H. и др., Cell, 70, 57-67 (1992); и Alexander W. S. и др., ЕМВО J., 10, 3683-3691 (1991)). Для экспрессии кДНК рецептора человеческого эпидермального фактора роста (см. Ullrich А. и др., Nature, 309, 418-425 (1984)) используют рекомбинантные ретровирусы, описываемые Rbden Т. и др., ЕМВО J., 7, 2749-2756 (1988), с тем различием, что для экспрессии кДНК рецептора эпидермального фактора роста используют ретровирусный вектор LXSN (см. Miller A. D. и др., BioTechniques, 7, 980-990 (1989)) и в качестве упаковывающей клетки служит линия GP+Е86 (см. Markowitz D. и дp., J. Virol, 62, 1120-1124 (1988)).

Тест осуществляют следующим образом.

Клетки F/L-HERc культивируют в среде RPMI/1640 (фирма БиоВиттакер), которая дополнена с помощью 10% фетальной телячьей сыворотки (фирма Берингер Маннхайм), 2 ммоль глутамина (фирма БиоВиттакер), стандартных антибиотиков и 20 нг/мл человеческого эпидермального фактора роста (фирма Промега), при температуре 37^oС и в атмосфере, содержащей 5% диоксида углерода. Для исследования ингибиторной активности предлагаемых согласно изобретению соединений культивируют 1,510⁴ клеток на лунку при трехкратном повторении в девяностошестилуночных планшетах в вышеуказанной среде (200 мкл), причем пролиферацию клеток стимулируют либо с помощью эпидермального фактора роста (20 нг/мл), либо мышиным интерлейкином-3. В качестве источника интерлейкина-3 служат культуральные супернатанты линии клеток Х63/0 mlL-3 (см. Karasuyama H. и др., Eur. J. Immunol., 18, 97-104 (1988)). Предлагаемые согласно изобретению соединения растворяют в 100%-ном диметилсульфоксиде и в различных разбавлениях добавляют к культурам, причем максимальная концентрация диметилсульфоксида составляет 1%. Культуры инкубируют в течение сорока восьми часов при температуре 37^oС.

Для определения ингибиторной активности предлагаемых согласно изобретению соединений измеряют относительное количество клеток с помощью прибора для определения титра клеток Cell Titer 96^ТМ Aqueous, предназначенного для исследования пролиферации нерадиоактивных клеток (фирма Промега), в единицах оптической плотности. Относительное количество клеток рассчитывают в процентах по отношению к контролю (клетки F/L-HERc без ингибитора) и определяют концентрацию биологически активного вещества, которая ингибирует пролиферацию клеток на 50% (ИK₅₀). При этом получают результаты, представленные в таблице.

Таптомерные формы соединений, подподающие под вышеприведенную общую формулу (II), обладают аналогичной активностью.

Предлагаемые согласно изобретению соединения также ингибируют стимулированную эпидермальным фактором роста пролиферацию человеческой линии опухолевых клеток KB, которая происходит от оральной эпидермоидной карциномы и сверхэкспрессирует рецептор эпидермального фактора роста (например, Aboud-Pirak Е. и др. , J. Natl. Cancer. Inst., 80, 1605-1611 (1988)). Клетки KB (полученные из Американской коллекции типовых культур) пассируют в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла (фирма БиоВиттакер) в присутствии 10% фетальной телячьей сыворотки (фирма Берингер Маннхайм), 50 мкмоль b-меркаптоэтанола и стандартных антибиотиков. В качестве показателя стимулированной с помощью эпидермального фактора роста, соответственно трансформирующего а-фактора роста, пролиферации клеток используют индуцированный эпидермальным фактором роста синтез ДНК путем определения встроения радиоактивно меченого тимидина. Для этого клетки дважды промывают и культивируют по 1500 клеток на лунку девяностошестилуночного планшета в 200 мкл среды Дульбекко, модифицированной по способу Исков (фирма БиоВиттакер), без сыворотки, в присутствии 50 мкмоль b-меркаптоэтанола, стандартных антибиотиков, 10 нг/мл трансформирующего а-фактора роста или 20 нг/мл эпидермального фактора роста и различных концентраций предлагаемых согласно изобретению веществ (трехкратное повторение; максимальная концентрация диметилсульфоксида 1%; см. тест на пролиферацию с помощью клеток F/L-HERc). Спустя шестьдесят часов добавляют за время примерно от шестнадцати до восемнадцати часов [³H] -тимидин (0,1 мкКи в 10 мкл). Последующее определение встроения тимидина для соединений 4, 7, 8, 16, 17, 18, 19, 20, 21 и 22 примера 1 дает значения ИК₅₀ от 0,01 до 1 мкмоль в отношении подавления пролиферации клеток KB, стимулированной эпидермальным фактором роста, соответственно трансформирующим а-фактором роста.

Таким образом, предлагаемые согласно изобретению соединения общей формулы (I) подавляют сигнальную трансдукцию за счет тирозинкиназ, как показано на примере рецептора человеческого эпидермального фактора роста, и поэтому полезны для терапии патофизиологических процессов, которые возникают вследствие гиперфункции тирозинкиназ, как, например, доброкачественные и злокачественные опухоли, в особенности опухоли эпителиального и нейроэпителиального происхождения, метастазирование, а также аномальная пролиферация сосудистых эндотелиальных клеток (неоангиогенез).

Кроме того, соединения общей формулы (I) и их физиологически приемлемые соли можно использовать для лечения других заболеваний, которые возникают вследствие аберрантной функции тирозинкиназ, как, например, эпидермальная гиперпролиферация (псориаз), воспалительные процессы, заболевания иммунной системы, гиперпролиферация гематопоэтических клеток и т.д.

На основании своих биологических свойств предлагаемые согласно изобретению соединения можно использовать индивидуально или в сочетании с другими фармакологически активными соединениями, например, при лечении опухолей в виде монотерапии или в сочетании с другими противоопухолевыми лечебными средствами, например в сочетании с ингибиторами топоизомеразы (как, например, этопосид), ингибиторами митоза (как, например, винбластин), взаимодействующими с нуклеиновыми кислотами соединениями (как, например, цисп