Производные d-пролина

Производные d-пролина

Реферат

 

Изобретение относится к производным D-пролина общей формулы или где R - SH, бензил или фенил, необязательно замещенный гидроксигруппой или низшей алкоксигруппой, или группа формулы R¹ - водород или галоген; Х обозначает -(СН₂)_n-; -СН(R²)(CH₂)_n-; -СН₂O(СН₂)_n-; CH₂NH-; бензил, -C(R²)=СН-; СН₂СН (ОН)- или тиазол-2,5-диил; Y обозначает -S-S-; (CH₂)_n; -О-; -NH-; -N (R²)-; -СН=СН-; -NHC(O)NH-; -N(R²)C(O)N(R²)-; -N[СН₂С₆Н₃(ОСН₃)₂]-; -N(СН₂С₆Н₅)-; -N(СН₂С₆Н₅)С(O)N(СН₂С₆Н₅)-; -N-(алкоксиалкил)-; -N-(циклоалкилметил)-; 2,6-пиридил; 2,5-фуранил; 2,5-тиенил; 1,2-циклогексил; 1,3-циклогексил; 1,4-циклогексил; 1,2-нафтил; 1,4-нафтил; 1,5-нафтил; 1,6-нафтил или дифенилен; 1,2-фенилен; 1,3-фенилен или 1,4-фенилен, где фениленовые группы необязательно замещены 1-4 заместителями, выбранными из группы, включающей галоген, низший алкил, низшую алкоксигруппу, гидроксигруппу, карбоксигруппу, -СОО-низший алкил, нитрил, 5-тетразол, (2-карбоксипирролидин-1-ил)-2-оксоэтоксигруппу, N-гидроксикарбамимидоил, 5-оксо[1,2,4]оксадиазолил, 2-оксо[1,2,3,5] оксатиадиазолил, 5-тиоксо[1,2,4]оксадиазолил и 5-трет-бутилсульфанил[1,2,4] оксадиазолил; X' обозначает -(CH₂)_n-; (CH₂)_n CH(R²)-; -(СН₂)_nОСН₂-; -NHCH₂-; бензил, -CH= C(R²)-; -CH(OH)CH₂- или тиазол-2,5-диил; R² обозначает низший алкил, низшую алкоксигруппу или бензил и n = 0-3, их фармацевтически приемлемым солям, моно- и диэфирам, за исключением (R)-1-[(R)- и (R)-1-[(S)-3-меркапто-2-метилпропионил] пирролидин-2-карбоновых кислот; лекарственному средству, обладающему амилоидозной активностью, и способу получения этих производных. 3 с. и 12 з.п.ф-лы, 2 табл.

Настоящее изобретение относится к D-пролинам формулы или где R обозначает SH, бензил или фенил, необязательно замещенный гидроксигруппой или низшей алкоксигруппой, или группу формулы R¹ обозначает водород или галоген; X обозначает -(CH₂)_n-; -CH(R²)(CH₂)_n-; -СН₂O(CH₂)_n-; -CH₂NH-; бензил, -C(R²)=CH-, -СН₂СH(ОН)- или тиазол-2,5-диил; Y обозначает -S-S-; -(CH₂)_n-; -О-; -NH-; -N(R²)-; -CH=CH-; -NHC(O)NH-; -N(R²)C(O)N(R²)-; -N[СH₂С₆H₃(ОСH₃)₂]-; -N-(CH₂C₆H₅)-; -N(СН₂С₆Н₅)С(O)N(СН₂С₆Н₅)-; -N-(алкоксиалкил)-; -N-(циклоалкилметил)-; 2,6-пиридил; 2,5-фуранил; 2,5-тиенил; 1,2-циклогексил; 1,3-циклогексил; 1,4-циклогексил; 1,2-нафтил; 1,4-нафтил; 1,5-нафтил; 1,6-нафтил; дифенилен; 1,2-фенилен; 1,3-фенилен или 1,4-фенилен, где фениленовые группы необязательно замещены 1-4 заместителями, выбранными из группы, включающей галоген, низший алкил, низшую алкоксигруппу, гидроксигруппу, карбоксигруппу, -СОО-низший алкил, нитрил, 5-тетразол, (2-карбоксипирролидин-1-ил)-2-оксоэтоксигруппу, N-гидроксикарбамимидоил, 5-оксо[1,2,4]оксадиазолил, 2-оксо[1,2,3,5] оксатиадиазолил, 5-тиоксо[1,2,4]оксадиазолил и 5-трет-бутилсульфанил[1,2,4] оксадиазолил; X' обозначает -(CH₂)_n-; -(СН₂)_nСH(R²)-; -(СН₂)ОСН₂-; -NHCH₂-; бензил, -CH=C(R²)-; -CH(OH)CH₂- или тиазол-2,5-диил; R² обозначает низший алкил, низшую алкоксигруппу или бензил и n = 0-3, к их фармацевтически приемлемым солям, моно- и диэфирам.

Соединения формул I-A и I-B являются новыми, за исключением (R)-1-[(R)- и (R)-1-[(S)-3-меркапто-2-метилпропионил]пирролидин-2-карбоновых кислот. Эти соединения описаны в WO 97/10225 как обладающие антибактериальным действием против B. fragilis. Более того, в J. Comput. -Aided Mol. Des. (1987), 1(2) 133-42, описано их использование в теоретическом исследовании ингибиторов ангиотензин-конвертирующего фермента.

Соединения формул I-A и I-B могут содержать по 4 или 2 асимметрических углеродных атома. Таким образом, настоящее изобретение включает все стереоизомерные формы соединений формул I-A и I-B, включая каждый из индивидуальных энантиомеров и их смеси.

Неожиданно было установлено, что D-пролины формул I-A и I-B могут быть использованы для лечения или профилактики всех форм центрального и системного амилоидоза, являющегося следствием нарушений белкового обмена, при котором растворимые в нормальном состоянии аутологические белки откладываются в тканях в форме аномально нерастворимых фибрилл, вызывающих структурные и функциональные нарушения. Самыми распространенными заболеваниями, которые обусловлены амилоидозом, являются болезнь Альцгеймера (БА), начало возрастного сахарного диабета или амилоидоз - как существенная причина неишемической сердечной недостаточности, - как осложнение при длительном гемодиализе при почечной недостаточности, - как осложнение при моноклональной гаммапатии, - как результат хронических воспалительных заболеваний, - как результат хронических инфекционных болезней, - как результат раковых заболеваний некоторых типов.

Более того, амилоидоз охватывает множество различных болезней, таких, как формы наследственного амилоидоза, чаще всего семейной амилоидной полинейропатии (СПП), чесотка и болезнь Крейцфельда- Якоба.

Общим патологическим признаком этих заболеваний является внеклеточное отложение так называемых амилоидных белков в b-структурированных волокнах и одинаковые особенности окраски.

Амилоидный компонент Р сыворотки (АР С) является обычным белком плазмы и предшественником амилоидного компонента, универсального составляющего аномальных отложений в тканях при амилоидозе. Он стоек к действию протеаз и, следовательно, играет ключевую роль в персистенции амилоида in vivo. Для лечения были найдены фармацевтически активные соединения, которые, по-видимому, предотвращают взаимодействие АРС с амилоидными фибриллами. Было показано, что это взаимодействие представляет собой скорее взаимодействие с белковым волокном, а не взаимодействие с более общими волокнистыми компонентами, такими, как гликозаминогликаны.

АРС представляет собой пентамер 5 идентичных, нековалентно связанных подзвеньев. Два пентамера могут быть нековалентно связаны в декамер посредством двух пентамерных дископодобных колец, которые взаимодействуют непосредственно между собой. АРС является кальцийзависимым лигандным связывающим белком. Он продуцируется и разлагается только в гепатоцитах и исключительно стоек вне печени.

Участие АРС в патогенезе или амилоидозе in vivo является подтверждением того, что ингибирование связи с амилоидными фибриллами представляет значительный интерес с точки зрения терапии ряда серьезных заболеваний человека.

Объектом настоящего изобретения являются вышеупомянутые соединения формул I-A и I-B, их соли и эфиры как таковые и в качестве терапевтически действующих веществ, их получение и их применение для терапевтических целей и соответственно для приготовления соответствующих лекарственных средств, а также лекарственные средства, содержащие соединения формул I-A и I-B, их соли и эфиры, и приготовление таких лекарственных средств для упомянутых целей.

Термин "низший алкил" обозначает прямоцепочечные или разветвленные насыщенные углеводородные остатки, предпочтительно с 1-4 углеродными атомами, такие, как метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, 2-бутил, изобутил и трет-бутил.

Термин "галоген" обозначает хлор, иод, фтор и бром.

Соединения формул I-A и I-B могут образовывать соли с металлами, например соли щелочных металлов, такие, как натриевые и калиевые соли, или соли щелочно-земельных металлов, такие, как соли кальция и магния, с органическими основаниями, например соли с аминами, такими, как N-этилпиперидин, прокаин и дибензиламин, или же соли с основными аминокислотами, такие, как соли с аргинином и лизином. Эти соли можно получать и выделять с использованием методов, которые в данной области техники хорошо известны.

Эти соединения могут быть также использованы в эфирной форме, причем такие эфиры могут быть алифатическими или ароматическими, например, такими, как алкильные и фенольные эфиры. Самыми предпочтительными эфирами являются алкильные эфиры, полученные из С_1-4алканолов, прежде всего метиловый и этиловый эфиры.

Соединения формул I-A и I-B могут быть также использованы в форме их пролекарств с одной или двумя карбонильными функциями. В качестве примеров можно назвать эфиры, внутренние эфиры, фосфатные эфиры, двойные эфиры, эфиры амидогликолевой кислоты, глицеридные сопряженные производные, дигидропиридиновые производные и 8-(гидроксиметил)-1-нафтилметилдисульфидные эфиры. Пролекарства способны повысить ценность предлагаемых соединений за счет абсорбции, фармакокинетики при распределении и переносе к головному мозгу (WO 95/14705; Н. Bundgaard и др., Drugs of Future, 16, 443, 1991; A.N. Saab и др. , Pharmaceutical Science, 79, 802, 1990; D.M. Lambert и др., Current Medical Chemistry 1, 376, 1995).

Предпочтительными являются соединения формулы I-A. В рамках настоящего изобретения особенно предпочтительными соединениями формулы I-A являются те, у которых Х обозначает -CH(R²)(CH₂)_n-, где R² обозначает метил или метоксигруппу, а n=0 или 1. Их примерами являются следующие соединения: (R)-1-{ (S)-3-[(S)-3-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -2-метил-3-оксопропилдисульфанил] -2-метилпропионил} пирролидин-2-карбоновая кислота, (R)-1-{ 8-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -2,7-диметил-8-оксооктаноил} пирролидин-2-карбоновая кислота, (R)-1-{ 8-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -2,7-диметокси-8-оксооктаноил} пирролидин-2-карбоновая кислота и (R)-1-{ 6-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -2,5-диметил-6-оксогексаноил} пирролидин-2-карбоновая кислота (смесь 3 диастереоизомеров).

Особенно предпочтительны также соединения, у которых Х обозначает -(CH₂)_n-, a n=0 или 1.

К таким соединениям относятся: (R)-1-{ 7-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -7-оксогептаноил}пирролидин-2-карбоновая кислота, (R)-1-{ 6-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -6-оксогексаноил}пирролидин-2-карбоновая кислота, (R)-1-{ 5-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -5-оксопентаноил]пирроли-дин-2-карбоновая кислота, (R)-1-{ { 4-[2-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] - 2-оксоэтил} фенил} ацетил} пирролидин-2-карбоновая кислота, (R)-1-{ 3-[2-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -2-оксоэтокси] уреидо} пирролидин-2-карбоновая кислота, (R)-1-{ { бензил-[2-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -2-оксоэтил] амино} ацетил} пирролидин-2-карбоновая кислота, (R)-1-{ цис-4-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-карбонил] циклогексанкарбонил} пирролидин-2-карбоновая кислота и (R)-1-{[3-[2-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -2-оксоэтил] фенил} ацетил} пирролидин-2-карбоновая кислота.

Кроме того, предпочтительны соединения формулы I-A, у которых Х обозначает -СН₂О-.

Их примерами являются следующие соединения: (R)-1-{ { 2-[2-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] - 2-оксоэтокси] фенокси} ацетил} пирролидин-2-карбоновая кислота, (R)-1-{ { 4-[2-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] - 2-оксоэтокси] фенокси} ацетил} пирролидин-2-карбоновая кислота, (R)-1-{ { 4-[2-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] - 2-оксоэтокси]-2-метоксифенокси} ацетил} пирролидин-2-карбоновая кислота, (R)-1-{ { 3-[2-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] - 2-оксоэтокси] фенокси} ацетил} пирролидин-2-карбоновая кислота, (R)-1-{ { 3-[2-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -2-оксоэтокси] -2-метилфенокси} ацетил} пирролидин-2-карбоновая кислота и (R)-1-{ { 5-[2-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -2-оксоэтокси] нафталин-1-илокси} ацетил} пирролидин-2-карбоновая кислота.

Дополнительными предпочтительными соединениями являются те, у которых Х обозначает -CH₂NH.

Примером таких соединений является (R)-1-{{4-[2-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -2-оксоэтиламино] фениламино} ацетил} пирролидин-2-карбоновая кислота.

Предпочтительны далее соединения, у которых Х обозначает -СН₂СH(ОН)-.

Таким соединением является, например, (2Е,4Е)-(R)-1-{6-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] - 2,5 -диметил - 6 - оксогекса -2,4 -диеноил} пирролидин - 2 -карбоновая кислота.

Вышеупомянутые соединения формул I-A и I-B могут быть получены в соответствии с изобретением а) превращением соединения формулы в соединение формулы а затем в соединение формулы где R¹, Х и X' имеют указанные выше значения, a R² обозначает низший алкил или б) обработкой соединения формулы соединением формулы с получением соединения формулы 1-А посредством удаления защитной группы, где X, Y и X' имеют указанные выше значения, a R⁴ обозначает гидроксигруппу или галоген, или в) взаимодействием соединения формулы с амином формулы NH₂R⁵ и удалением защитной группы из соединения формулы где R¹ и R³ имеют указанные выше значения, а R⁵ обозначает водород, низший алкил, низшую алкоксигруппу, бензил, низший алкоксиалкил, циклоалкилметил или -СН₂С₆Н₃(ОСН₃)₂, или г) взаимодействием соединения формулы с соединением формулы и удалением защитной группы из соединения формулы где R¹, R³ и Х имеют указанные выше значения, или д) взаимодействием соединения формулы с соединением формулы и удалением защитной группы из соединения формулы где R¹, R³ и Х имеют указанные выше значения, а R⁷ обозначает галоген, низший алкил, низшую алкоксигруппу, гидроксигруппу, карбоксигруппу, -СОО-низший алкил, нитрил, 5-тетразол, (2-карбоксипирролидин-1-ил)-2-оксоэтокси, N-гидроксикарбамимидоил, 5-оксо[1,2,4] оксадиазолил, 2-оксо-[1,2,3,5]оксатиадиазолил, 5-тиоксо [1,2,4]оксадиазолил или 5-трет-бутилсульфанил[1,2,4] оксадиазолил, a m=0-4, или е) удалением защитной группы из соединений формул и где R, R¹, X, Y и X' имеют указанные выше значения, a R³ обозначает защитную группу, с получением соединений формулы IA или IB и при необходимости превращением соединений общей формулы IA или IB в фармацевтически приемлемые соли или в моно- или диэфиры.

В соответствии с вариантом а) способа соединение формулы I-A-1 получают превращением соединения формулы II, например 1-[(S)-3-ацетилсульфанил-2-метилпропионил] -(R)-пирролидин-2-карбоновой кислоты, в соединение формулы I-B-1, а затем в соединение формулы I-A-1. Эту реакцию целесообразно проводить в инертной атмосфере при комнатной температуре в присутствии аммиака в растворителе, таком, как метанол. После перемешивания в течение приблизительно 2 ч соединение выделяют и в дальнейшем продукт реакции можно обрабатывать до требуемой степени чистоты в соответствии с общеизвестными методами.

Соединения формулы I-A-1 получают перемешиванием упомянутого выше соединения при комнатной температуре в растворе CuSO₄ в воде. Конкретные условия проведения реакции более подробно описаны в примерах.

В соответствии с реакционной стадией б) D-пролин с защитной группой обрабатывают соответствующей дикарбоновой кислотой или соответствующим ацетилгалогенидом при 0^oС. Предпочтительны следующие дикарбоновые кислоты: 2,4-диметилглутаровая кислота, 2,3-диметилянтарная кислота, циклогексан-1,4-дикарбоновая кислота, циклогексан-1,3-дикарбоновая кислота, циклогексан-1,2-дикарбоновая кислота, 1,4-фенилендиуксусная кислота, 1,3-фенилендиуксусная кислота, бензол-1,4-дикарбоновая кислота, бензол-1,3-дикарбоновая кислота, пиридин-2,6-дикарбоновая кислота, тиофен-2,5-дикарбоновая кислота, фуран-2,5-дикарбоновая кислота, адипиновая кислота, 1,4-фенилендиуксусная кислота, 1,2-фенилендиуксусная кислота, (4- карбоксиметилнафталин-1 -ил) уксусная кислота, (6-карбоксиметилпиридин- 2-ил) уксусная кислота, (5-карбоксиметилтиофен-2-ил)уксусная кислота, 2,5-диметоксигександикислота, 2,5-дибензилгекс-3-ендикислота и 2,5-диизопропилгек-3-ендикислота. Подробная методика описана в примерах раздела "Общая методика А".

На реакционной стадии в) предусмотрена обработка амина, например пропиламина, циклопропилметиламина, метоксиэтиламина, бензиламина или вератриламина, соединением формулы IX. Эту реакцию проводят при температуре в пределах 20-80^oС в растворителе, таком, как ацетонитрил.

В соответствии с вариантом г) получают соединение формулы I-B. К соединению формулы XV в дихлорметане при 0^oС добавляют соответствующее бромацетиловое производное, такое, как бромацетилбромид, и соединение формулы V. Удаление защитной группы можно осуществлять по методам, которые известны в данной области техники.

Соединения, у которых Y обозначает необязательно замещенную 1,2-, 1,3- или 1,4-фениленовую группу, могут быть получены в соответствии с вариантом д). К соединению формулы XV добавляют соответствующее дигидроксипроизводное формулы XVII. Реакцию ведут в диметилформамиде при комнатной температуре. Предпочтительны следующие дигидроксипроизводные: гидрохинон, тетрафторгидрохинон, хлоргидрохинон, метоксигидрохинон, резорцин, 2,6-дигидрокситолуол, 5-метоксирезорцин, 3,5-дигидроксибензоат, 3,5-дигидросибензонитрил, флороглюцин, пирогаллол-1-метиловый эфир, 3-метилкатехин, тетрахлоркатехин, 2,6-дигидроксинафталин, 1,5-дигидроксинафталин, 2,3-дигидроксинафталин, 2,2'-дигидроксидифенил, 1,4-нафтохинон и 2,7-дигидроксинафталин.

В соответствии с вариантом е) способа у соединения формулы III или IV удаляют защитную группу, получая соединение общей формулы I-A или I-B. Приемлемые защитные группы и методы их удаления известны в данной области техники, хотя, что очевидно, можно использовать только те защитные группы, которые могут быть удалены с помощью методов, при осуществлении которых другие структурные элементы остаются незатронутыми. Предпочтительными O-защитными группами являются трет-бутильная группа и бензильная группа. Процесс проводят обычным путем. Так, например, соединение формулы III растворяют в приемлемом растворителе или смеси растворителей, таких, как этанол и этилацетат, и при комнатной температуре и под атмосферным давлением гидрогенизуют в присутствии Pd на угле.

Фармацевтически приемлемые соли и эфиры могут быть получены в соответствии с методами, которые известны в данной области техники.

На схемах 1-9 отражены процессы получения соединений формул I-A и I-В исходя из известных соединений или из соединений, которые могут быть получены по известным методам.

Исходные соединения формул V, VI, VIII, IX, X, XII, XIV, XVII, XX и XXIV представляют собой имеющиеся в продаже продукты или могут быть получены по известным методам.

и Получение соединений формул I-A и I-B, приведенных в табл. 1, более подробно описано в примерах 1-104.

Как сказано выше, соединения общих формул I-A и I-B, предлагаемые в соответствии с изобретением, обладают ценными фармакологическими свойствами. Их можно применять против всех форм центрального и системного амилоидоза, который является следствием нарушений белкового обмена, при котором растворимые в нормальном состоянии аутологические белки откладываются в тканях в форме аномально нерастворимых фибрилл, вызывающих структурные и функциональные нарушения.

Соединения общих формул I-A и I-B испытывали по следующей методике.

Методика испытаний Связывание АРС (амилоидного компонента Р сыворотки) с амилоидными фибриллами А (1-42) 96-луночные планшеты Nunc Fluoro Polysorp покрывали 0,5 мкг/лунку А (1-42), которые выдерживали в течение 7 дней при 37^oС. Планшеты сушили в течение 3 дней при 37^oС, промывали 2 порциями по 150 мкл ТС (10 мМ трис, 138 мМ NaCl, 6 мМ CaCl₂, 0,05% NаN₃ с рН 8,0) с 1% коровьего сывороточного альбумина. Затем в каждую лунку добавляли по 50 мкл ТС, содержавшего 8% коровьего сывороточного альбумина, 25 мкл соединения в ТС и 25 мкл 40 нМ сывороточного амилоидного белка [¹²⁵I] в ТЕ (10 мМ этиленгликольтетрауксусной кислоты (ЭГТК) вместо Са). Инкубацию проводили в течение ночи при комнатной температуре и лунки дважды промывали 180 мкл ТС, содержавшего 1% коровьего сывороточного альбумина. Для определения радиоактивности в каждую лунку добавляли по 100 мкл продукта Microscint 40 и в приборе TopCount (фирмы Packard) измеряли радиоактивность. ИК₅₀ (в мкМ) предпочтительных соединений формул I-A и I-B находилась в интервале приблизительно 0,2-2,0.

Способность соединений согласно изобретению связывать АРС (амилоидный компонент Р сыворотки) с амилоидными фибриллами (1-42). Ниже представлены доказательства связи между этой способностью и пригодностью терапевтических агентов для лечения амилоидозов. Амилоидоз является следствием нарушений белкового метаболизма, при котором растворимые в нормальном состоянии аутологические белки откладываются в тканях в форме аномально нерастворимых фибрилл, что приводит к структурным и функциональным нарушениям. Сердцевинная структура фибрилл всегда одинаковая и представляет собой упорядоченные полипептидные цепи (перекрестная укладка --волокон). Другим общим признаком для всех типов амилоидозов является взаимодействие обычных белков плазмы, в частности амилоидного компонента Р сыворотки (АРС), с фибриллами. Участие АРС в патогенезах амилоидозов подтверждает, что ингибирование взаимодействия АРС с амилоидными фибриллами является привлекающей внимание терапевтической мишенью для лечения болезней человека, таких, как болезнь Альцгеймера, т.к. амилоидоз, локализованный в головном мозгe, связан с болезнью Альцгеймера. Целью данного изобретения является обнаружение терапевтических агентов для амилоидозов, которые ингибируют взаимодействие амилоидного компонента Р сыворотки с амилоидными фибриллами. Соответствующие методы тестирования описаны в описании. В табл. 2, представленной в конце описания, даны некоторые специфические данные по связыванию АРС.

Соединения формул I-A и I-B, их фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли, их моно- и диэфиры и их циклические имиды могут быть использованы в качестве лекарственных средств, например в виде фармацевтических препаратов. Эти фармацевтические препараты можно вводить перорально, например в форме таблеток, таблеток с покрытием, драже, твердых и мягких желатиновых капсул, растворов, эмульсий и суспензий. Однако также эффективно их можно вводить ректально, например, в форме суппозиториев, парентерально, например, в форме растворов для инъекций, или интраназально.

При приготовлении фармацевтических препаратов соединения формул I-A и I-B, а также их фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли и эфиры можно объединять с фармацевтически инертными неорганическими или органическими носителями. В качестве таких носителей для таблеток, таблеток с покрытием, драже и твердых желатиновых капсул могут быть использованы, например, лактоза, кукурузный крахмал и его производные, тальк, стеариновая кислота и ее соли и т.п. Пригодными носителями для мягких желатиновых капсул служат, например, растительные масла, воски, твердые жиры, полутвердые и жидкие полиолы и т.п. Однако в случае мягких желатиновых капсул в зависимости от природы действующего вещества носители обычно не требуются. Пригодными носителями для приготовления растворов и сиропов являются, например, вода, полиолы, глицерин, растительные масла и т.п. Подходящие носители для суппозиториев представляют собой, например, природные и отвержденные масла, воски, твердые жиры, полужидкие и жидкие полиолы и т.п.

Более того, фармацевтические препараты могут включать некоторые консерванты, солюбилизаторы, стабилизаторы, смачивающие вещества, эмульгаторы, подслащивающие вещества, красители, корригенты, соли для варьирования осмотического давления, буферные добавки, материалы для покрытий и антиоксиданты. Они могут также содержать другие терапевтически действующие вещества.

Лекарственные препараты, содержащие соединение формулы I-A или I-B или его фармацевтически приемлемую кислотно-аддитивную соль, моно- или диэфир и терапевтически инертный носитель, также составляют объект настоящего изобретения, как и способ их приготовления, который включает придание одному или нескольким соединениям формул I-A и I-B и/или их фармацевтически приемлемым кислотно-аддитивным солям и моно- и диэфирам галеновой формы для введения совместно с одним или несколькими терапевтически инертными носителями.

В соответствии с изобретением соединения общих формул I-А и I-В, а также их фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли и моно- и диэфиры могут быть использованы для лечения или профилактики центрального и системного амилоидоза. Самыми распространенными заболеваниями, которые связаны с амилоидозом, являются болезнь Альцгеймера (БА), начало возрастного сахарного диабета или амилоидоз - как существенная причина неишемической сердечной недостаточности, - как осложнение длительного гемодиализа при почечной недостаточности, - как осложнение при моноклональной гаммапатии, - как результат хронических воспалительных заболеваний, - как результат хронических инфекционных болезней, - как результат раковых заболеваний некоторых типов.

Более того, амилоидоз охватывает множество различных болезней, таких, как формы наследственного амилоидоза, чаще всего семейной амилоидной полинейропатии (СПП), чесотка и болезнь Крейцфельда-Якоба.

Кроме того, предлагаемые соединения могут быть использованы при приготовлении соответствующих лекарственных препаратов. Доза может варьироваться в широком диапазоне, и ее, что очевидно, следует выбирать в соответствии с индивидуальными потребностями в каждом конкретном случае. В случае перорального введения доза соединения формулы I-A или I-B или соответствующее количество его фармацевтически приемлемой кислотно-аддитивной соли или моно- или диэфира находится в интервале от примерно 0,1 мг для разового приема до примерно 5000 мг в день, хотя, если это показано, такой верхний предел можно превысить.

Сущность настоящего изобретения более подробно проиллюстрирована в следующих примерах, однако их не следует рассматривать как ограничивающие объем изобретения. Температура во всех случаях указана в градусах Цельсия.

Пример 1 (R)-1- { (S)-3- [(S)-3- [(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -2-метил-3-оксопродилдисульфанил] -2-метилпропионил} пирролидин-2-карбоновая кислота а) трет-Бутиловый эфир 1-[(S)-3-(ацетилсульфанил)-20-метилпропионил]-(R)-пирролидин-2-карбоновой кислоты и трет-бутиловый эфир 1-[(R) -3- (ацетилсульфанил) -20-метилпропионил] - (R) -пирролидин-2-карбоновой кислоты 18,6 мл триэтиламина при 0-5^oС вводили в перемешиваемый раствор из 23,2 г (135 ммолей) трет-бутилового эфира D-пролина в 230 мл сухого дихлорметана. При этой температуре в течение 1 ч добавляли раствор из 24,5 г (135 ммолей) эфира 8-(3-хлор-2-метил-3-оксопропил)этантиокислоты в 116 мл дихлорметана и перемешивание продолжали при комнатной температуре в течение 2 ч. Осадок удаляли фильтрованием. Раствор промывали водой и сушили сульфатом натрия. В результате выпаривания растворителя при пониженным давлением получали 41,4 г бесцветного продукта в виде масла, которое хроматографировали на 4 кг силикагеля, используя диэтиловый эфир/циклогексан в соотношении 2/1, с получением 19,6 г (46%) трет-бутилового эфира 1- [(R)-3- (ацетилсульфанил)-20-метилпропионил] -(R)-пирролидин-2-карбоновой кислоты, 18,2 г (43%) трет-бутилового эфира 1-[(S)-3-(ацетилсульфанил) -20-метилпропионил] - (R) -пирролидин-2-карбоновой кислоты и 1,6 г смеси эпимеров.

МС m/е (%)= 315 (М⁺, 3), 259 (10), 242 (10), 214 (100), 172 (10), 145 (32), 70 (22); []_D=-0,7^o (1% ЕtOН).

МС m/е (%)=315 (M⁺,4), 259 (7), 242 (9), 214 (100), 172 (9), 145 (33), 70 (33); []_D=+156,7^o (1% ЕtOН).

б) 1- [(S) -3- (Ацетилсульфанил) -2-метилпропионил] - (R) -пирролидин-2-карбоновая кислота 15,45 г (48,9 ммоля) трет-бутилового эфира 1- [(S)-3- (ацетилсульфанил) -20-метилпропионил] -(R)-пирролидин-2-карбоновой кислоты в токе аргона в течение трех часов перемешивали с 99 мл трифторуксусной кислоты и 55 мл анизола. Смесь упаривали в вакууме. Остаток растворяли в примерно 100 мл охлажденного льдом этилацетата и промывали приблизительно 200 мл охлажденного льдом водного раствора бикарбоната натрия. При охлаждении льдом концентрированную соляную кислоту добавляли до рН 1-2. Водную фазу четыре раза экстрагировали охлажденным льдом этилацетатом, сушили сульфатом натрия и упаривали. Получали 11,6 г (выход 91%) l-[(S)-3-(aцeтилсульфанил) -2-метилпропионил] - (R) -пирролидин-2-карбоновой кислоты, которую использовали без дальнейшей очистки.

[]_D=-11,8^o (0,6% EtOH).

в) 1- [(S)-3-меркапто-2-метилпропионил] -(R)-пирролидин-2-карбоновая кислота 11,59 г (44,69 ммоля) 1-[(S)-3-(ацетилсульфанил) -2-метилпропионил] -(R)-пирролидин-2-карбоновой кислоты при комнатной температуре в токе аргона растворяли в 70 мл метанола, очищенного от кислорода аргоном. После добавления 70 мл 10н. раствора аммиака в метаноле перемешивание продолжали в течение двух часов при комнатной температуре. Затем в вакууме отгоняли растворитель. Остаток растворяли в 5%-ном водном растворе KHSO₄ и шесть раз экстрагировали дихлорметаном. Органические слои дважды промывали 5%-ным раствором KHSO₄, три раза 1н. соляной кислотой и сушили над сульфатом натрия. В результате выпаривания растворителя и кристаллизации из этилацетата/гексана получали 6,25 г (64%) 1-[(S)-3-меркапто-2-метилпропионил]-(R)-пирролидин-2-карбоновой кислоты с температурой плавления 99-101^oС.

[]_D=+40,7^o (1% EtOH).

г) (R)-1- {(S)-3- [(S)-3- [(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -2-метил-3-оксопропилдисульфанил] -2-метилпропионил} пирролидин-2-карбоновая кислота При комнатной температуре раствор 749 мг (3,0 ммоля) CuSO₄5H₂O в 90 мл воды вводили в раствор 651,85 мг (3,0 ммоля) 1-[(S)-3-меркапто-2-метилпропионил] -(R)-пирролидин-2-карбоновой кислоты в 90 мл дихлорметана. Смесь в течение 10 мин интенсивно перемешивали и фильтровали. Водную фазу 5 раз промывали дихлорметаном, органические фазы промывали рассолом и сушили сульфатом магния и в вакууме удаляли растворитель. Кристаллизацией из дихлорметана/гексана получали 275,3 мг (43%) (R)-1- {(S)-3-[(S)3-[(R)-2 - карбоксипирролидин -1 - ил] - 2 - метил - 3 - оксопропилдисульфанил] - 2 - метилпропионил} пирролидин-2-карбоновой кислоты с температурой плавления 142-144^oС.

[]_D=+42,8^o(1% СНСl₃).

Пример 2 (R)-1-{ (R)-3-[(R)-3-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -2-метил-3-оксопропилдисульфанил] -2-метилпропионил} пирролидин-2-карбоновая кислота а) 1- [(R)-3-(Ацетилсульфанил)-2-метилпропионил] -(R)пирролидин-2-карбоновая кислота 18,9 г (60,0 ммолей) трет-бутилового эфира 1-(3-ацетилсульфанил-2-метилпропионил)пирролидин-2-карбоновой кислоты со 120 мл трифторуксусной кислоты и 75 мл анизола перемешивали в токе аргона в течение трех часов. Смесь упаривали в вакууме. Остаток растворяли в охлажденном льдом этилацетате и промывали охлажденным льдом водным раствором бикарбоната натрия. Охлажденную льдом концентрированную соляную кислоту добавляли до рН 2-3. Водную фазу три раза экстрагировали охлажденным льдом этилацетатом, сушили сульфатом натрия и упаривали. Таким путем получали 15,3 г (98%) 1-[(R)-3-(ацетилсульфанил)-2-метилпропионил] -(R)-пирролидин-2-карбоновой кислоты, которую использовали без дальнейшей очистки.

[]_D=+127,8^o (1% EtOH).

б) 1- [(R)-3-меркапто-2-метилпропионил] -(R) -пирролидин-2-карбоновая кислота 2,98 г (11,5 ммоля) 1-[(R)-3-(ацетилсульфанил)-2-метилпропионил]- (R)-пирролидин-2-карбоновой кислоты при комнатной температуре в токе аргона растворяли в 15 мл метанола, очищенного от кислорода аргоном. После добавления 15 мл 10н. раствора аммиака в метаноле перемешивание продолжали в течение двух часов при комнатной температуре. Затем при комнатной температуре в вакууме отгоняли растворитель. Остаток растворяли в 5%-ном водном растворе KHSO₄ и шесть раз экстрагировали дихлорметаном и три раза этилацетатом. Органические слои дважды промывали 5%-ным раствором KHSO₄, три раза 1н. соляной кислотой и сушили над сульфатом натрия. После выпаривания растворителя и кристаллизации из этилацетата/гексана получали 1,59 г (64%) 1-[(R)-3-меркапто-2-метилпропионил] - (R)-пирролидин-2-карбоновой кислоты с температурой плавления 98-100^oС.

[]_D=+128,8^o (1% EtOH).

в) (R)-1-{ (R)-3-[(R)-3-[(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -2-метил-3-оксопропилдисульфанил] -2-метилпропионил} пирролидин-2-карбоновая кислота Аналогично изложенному в примере 1г).

МС m/е (%): (M⁺, 2) 217(100), 184(76), 172(67), 142(13), 70(79), 41(21).

Пример 3 (R)-1- {3- [3- [(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -3-оксопропилдисульфанил] пропионил} пирролидин-2-карбоновая кислота 0,9 г (4 ммоля) 1-(3-меркаптопропионил)- (R)-пирролидин-2-карбоновой кислоты (исходного материала) растворяли в дихлорметане и экстрагировали 50 мл насыщенного водного раствора CuSO₄. Водную фазу дважды экстрагировали дихлорметаном, объединенные органические фазы фильтровали, сушили сульфатом магния и упаривали. Хроматографией с дихлорметаном/ацето-ном/муравьиной кислотой в соотношении 80/10/1 в виде бесцветного масла получали 70 мг (R)-1-{ 3-[3- [(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -3-оксопропилдисульфанил] пропионил} пирролидин-2-карбоновой кислоты.

ISN-MC: 403 (М-Н)^-.

Пример 4 (R)-1- { 9- [(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -9-оксононаноил} пирролидин-2-карбоновая кислота а) Бензиловый эфир (R)-1-{9-[(R)-2-бензилоксикарбонилпирролидин-1-ил] -9-оксононаноил} пирролидин-2-карбоновой кислоты 0,97 г (4 ммоля) гидрохлорида D-пролинбензилового эфира в 25 мл дихлорметана в токе аргона при комнатной температуре перемешивали с 450 мг (2 ммоля) азелаоилхлорида и 1,12 мл (8 ммолей) триэтиламина в течение 20 ч. Экстракцией 2н. соляной кислотой и рассолом, сушкой сульфатом натрия и упариванием в виде масла получали 1,2 г продукта, который хроматографировали с ацетоацетатом на силикагеле с получением в виде бесцветного масла 0,9 г (80%) бензилового эфира (R)-1-{9-[(R)-2-бензилоксикарбонилпирролидин-1-ил] -9-оксононаноил}пирролидин-2-карбоновой кислоты.

¹H-ЯМР (СDСl₃, част. /млн): 1,1-2,4 (m, 22H), 3,4-3,7 (m, 4H), 4,4-4,6 (m, 2H), 5,1-5,3 (2хАВ, 4H), 7,34 (m, 10Н).

б) (R)-1- {9- [(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -9-оксононаноил}пирролидин-2-карбоновая кислота 100 мг (0,18 ммоля) бензилового эфира (R)-1-{9-[(R)-2-бензилоксикарбонилпирролидин-1-ил] -9-оксононаноил} пирролидин-2-карбоновой кислоты в 20 мл этанола гидрогенизовали в течение двух часов при комнатной температуре в присутствии 20 мг 5%-ного Pd на угле. Фильтрованием и упариванием в виде бесцветного масла получали 60 мг (R)-1- {9- [(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -9-оксононаноил} пирролидин-2-карбоновой кислоты.

ISP-MC:383 (MH)⁺.

Пример 5 (R)-1- {8- [(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил] -2,7-диметил-8-оксооктаноил] пирролидин-2-карбоновая кислота 1,2 г (5,0 ммолей) 2,7-диметил-8-октандиоилхлорида растворяли в 100 мл перемешиваемого диметилформамида, добавляли 1,15 г (10 ммолей) D-пролина и 1,4 мл (10 ммолей) триэтиламина и смесь выдерживали в течение пяти минут при 50^oС. Перемешивание продолжали при комнатной температуре в течение ночи. Отгоняли растворитель и остаток растворяли в 30 мл 2н. соляной кислоты. В результате экстракции этилацетатом, сушки сульфатом натрия, упаривания и хроматографии на силикагеле с хлороформом/ацетоном/муравьиной кислотой в соотношении 80/15/5 в виде бесцветного масла получали 0,11 г (R)-1-{8-[(R)-2 - карбоксипирролидин - 1-ил] -2,7 -диметил - 8 - оксооктаноил] пирролидин- 2 -карбоновой кислоты.

ISP-MC: 397 (МН)⁺.

Пример 6 (R)-1- {8- [(R)-2-карбоксипирролидин-1-ил]-2,7-диметокси-8-оксооктаноил] пирролидин - 2 - карбоновая кислота а) Бензиловый эфир (R)-1-{8-[(R)-2-бензилоксикарбонилпирролидин-1-ил]-2,7-диметокси-8-оксооктаноил]пирролидин-2-карбоновой кислоты К 0,25 г (1,1 ммоля) 2,7-диметоксиоктандикислоты в смеси 25 мл тетрагидрофурана с 20 мл дихлорметана добавляли раствор 0,35 г (2,1 ммоля) карбонилдиимидазола в 15 мл тетрагидрофурана. После перемешивания при комнатной температуре в течение двух часов добавляли 0,52 г (2,16 ммоля) гидрохлорида D-пролинбензилового эфира в 10 мл дихлорметана и 0,54 г триэтиламина и перемешивание продолжали в течение 18 ч. После фильтрования растворитель отгоняли, остаток растворяли в этилацетате и экстрагировали 2н. соляной кислотой и водой. В результате сушки сульфатом натрия, выпаривания растворителя и хроматографии на силикагеле с этилацетатом в виде бесцветного масла получали 0,21 г бензилового эфира (R)-1- {8- [(R)-2-бензилоксикарбонилп