Фармацевтическая композиция (варианты), препарат и способ лечения состояния, поддающегося воздействию аналога lhrh, шприц

Фармацевтическая композиция (варианты), препарат и способ лечения состояния, поддающегося воздействию аналога lhrh, шприц

Реферат

 

Изобретение относится к медицине. Изобретение характеризует препараты для задержанной доставки, содержащие нерастворимый в воде комплекс пептидного соединения (например, пептида, полипептида, белка, пептидомиметика и т.п. ) и макромолекулу-носитель. Композиции, соответствующие изобретению, позволяют загружать небольшой объем высокой концентрацией пептидного соединения, что обеспечивает пролонгированные периоды доставки фармацевтически активного пептидного соединения, например в течение одного месяца после введения комплекса. Комплексы, соответствующие изобретению, могут быть перемолоты или раздроблены до тонкоизмельченного порошка. В порошкообразном виде комплексы образуют стабильные водные суспензии и дисперсии, пригодные для инъекции. В предпочтительном варианте осуществления пептидное соединение комплекса представлено аналогом LHRH, предпочтительно антагонистом LHRH, а макромолекула-носитель является анионным полимером, предпочтительно карбоксиметилцеллюлозой. Описаны также способы получения комплексов, соответствующих изобретению, и способы использования комплексов, содержащих аналоги LHRH, для лечения состояний, которые лечат аналогами LHRH. Изобретение обеспечивает терапевтическую эффективность фармацевтической композиции, эффективность способа и шприца. 10 с. и 44 з.п. ф-лы, 3 табл., 5 ил.

Изобретение относится к фармакологии и медицине, в частности к фармацевтическим композициям, обеспечивающим пролонгированные периоды доставки фармацевтически активного пептидного соединения.

Уровень техники Ряд заболеваний и клинических нарушений лечат введением фармацевтически активного пептида. Одним из таких примеров является рак простаты, который представляет собой рак, зависимый от полового гормона, и который можно лечить введением аналога лютеинизирующий гормон-высвобождающего гормона (LHRH), нарушающего образование лютеинизирующего гормона (LH), который регулирует синтез мужских гормонов. В частности, для снижения образования LH были использованы пептидные аналоги LHRH, действующие как суперагонисты рецептора лютеинизирующий гормон-высвобождающего гормона, такие как лейпролид и госерелин.

Во многих случаях терапевтическая эффективность фармацевтически активного пептида зависит от его непрерывного присутствия in vivo в течение пролонгированного периода времени. Для получения непрерывной доставки пептида in vivo, с целью избежания необходимости повторных введений, желательным является препарат с задержанным выходом или задержанной доставкой. Один из подходов к задержанной доставке лекарственного вещества представляет собой микроинкапсулирование, при котором активный ингредиент заключают в полимерную мембрану с целью получения микрочастиц. Например, суперагонисты LHRH, такие как лейпролид и госерелин, обычно инкапсулируют в микрочастицу, содержащую сополимер полилактида/полигликолида для приготовления препаратов, пригодных для депо-инъекции, которая обеспечивает задержанную доставку суперагонистов в течение нескольких недель или месяцев (см., например, Патенты США 4675189, 4677191, 5480656 и 4728721).

Дополнительные препараты с задержанной доставкой для введения фармацевтически активных пептидов in vivo непрерывно в течение пролонгированного периода времени являются необходимыми.

Сущность изобретения В данном изобретении представлены фармацевтические композиции, содержащие стабильный нерастворимый в воде комплекс, состоящий из пептидного соединения (например, пептида, полипептида, белка, пептидомиметика и т.п.), предпочтительно фармацевтически активного пептидного соединения, и макромолекулы-носителя, которая обеспечивает задержанную доставку пептидного соединения in vivo при введении комплекса. Соответственно комплекс, соответствующий изобретению, может обеспечить непрерывную доставку фармацевтически активного пептидного соединения субъекту в течение пролонгированных периодов времени, например, в течение одного месяца. Более того, ассоциация пептидного соединения и макромолекулы-носителя в прочном стабильном комплексе позволяет загружать в препарат высокие концентрации пептидного соединения.

Комплекс, соответствующий изобретению, образуется при смешивании пептидного соединения и макромолекулы-носителя в условиях, при которых формируется практически нерастворимый в воде комплекс, например, водные растворы пептидного соединения и макромолекулы-носителя смешивают до выпадения комплекса в осадок. Комплекс может находиться в форме твердого вещества (например, в виде пасты, гранул, порошка или лиофилизата) или комплекс в форме порошка может быть подвергнут достаточно тонкому распылению с образованием стабильных жидких суспензий или полутвердых дисперсий.

В предпочтительном варианте осуществления пептидное соединение нерастворимого в воде комплекса представлено аналогом LHRH, более предпочтительно антагонистом LHRH, а макромолекула-носитель является анионным полимером, предпочтительно карбоксиметилцеллюлозой. Комплекс, соответствующий изобретению, может быть подвергнут стерилизации, например, -облучением или облучением пучком электронов, перед введением in vivo.

Предложен также способ лечения субъекта при состоянии, поддающемся воздействию аналогов LHRH, путем введения ему соответствующей изобретению композиции, содержащей аналог LHRH. В предпочтительном варианте осуществления соответствующие изобретению способы лечения используют для лечения рака простаты.

Перечень фигур чертежей На фиг.1 приведены графики, представляющие уровни тестостерона в плазме (в нг/мл; белые квадраты) и уровни РРI-149 в плазме (в нг/мл; черные квадраты) у крыс (левый график) и собак (правый график) спустя некоторое время после внутримышечной инъекции комплекса РРI-149 и карбоксиметилцеллюлозы.

На фиг. 2 приведен график, представляющий уровни тестостерона в плазме (нг/мл, белые квадраты) и уровни РРI-149 в плазме (в нг/мл, черные квадраты) у крыс спустя некоторое время после внутримышечной инъекции комплекса антагониста LHRH PPI-149 и карбоксиметилцеллюлозы в день 0 и инъекции агониста LHRH Lupron^ТМ в день 30, который демонстрирует супрессию Lupron^ТМ - индуцированного выброса тестостерона при предварительном введении PPI-149.

На фиг. 3А-3С приведена серия графиков, представляющих уровни тестостерона в плазме (в нг/мл) у самцов крыс Sprague-Dawley в течение времени после внутримышечной инъекции РРI-149-СМС (фиг.3А), PPI-258-CMC (фиг.3В) или Cetrorelix^ТМ-CMC (фиг.3С) (СМС-карбоксиметилцеллюлоза).

На фиг.4 приведен график, представляющий уровни тестостерона в плазме (в нг/мл; белые квадраты) и уровни PPI-149 в плазме (в нг/мл; черные квадраты) у собак спустя некоторое время после подкожной инъекции РРI-149-СМС в назначенных дозах с интервалами 28 дней, который демонстрирует пролонгированную супрессию уровней тестостерона в плазме.

На фиг.5 приведен график, представляющий уровни тестостерона в плазме (в нг/мл; белые квадраты) и уровни PPI-149 в плазме (в нг/мл; черные квадраты) у собак спустя некоторое время после внутримышечной инъекции РРI-149-СМС в назначенных дозах с интервалами 28 дней, который демонстрирует пролонгированную супрессию уровней тестостерона в плазме.

Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения Данное изобретение касается фармацевтических композиций, содержащих стабильный нерастворимый в воде комплекс, состоящий из пептидного соединения (например, пептида, полипептида, белка, пептидомиметика и т.п.) и макромолекулы-носителя, способов получения данных композиций и способов применения данных композиций. Преимущества фармацевтических композиций, соответствующих изобретению, включают возможность доставки фармацевтически активного пептидного соединения (систематически или местно) в течение пролонгированных периодов времени (например, нескольких недель, одного месяца или нескольких месяцев) и возможность введения высоких концентраций пептидного соединения в комплекс.

Для лучшего понимания изобретения сначала дают определения ряда терминов.

Как используют в данном контексте, термин "пептидное соединение" предназначен для определения соединений, состоящих, по крайней мере частично, из остатков аминокислот, связанных амидными связями (т.е. пептидными связями). Термин "пептидное соединение" охватывает пептиды, полипептиды и белки. Как правило, пептид будет состоять из менее чем приблизительно 100 остатков аминокислот, более часто из менее чем 50 остатков аминокислот и даже более часто из менее чем 25 остатков аминокислот. Термин "пептидное соединение" далее предполагает охват аналогов пептидов, производных пептидов и пептидомиметиков, которые имитируют химическую структуру пептида, состоящего из существующих в естественных условиях аминокислот. Примеры аналогов пептидов включают пептиды, содержащие одну или более неприродных аминокислот. Примеры производных пептидов включают пептиды, в которых боковая цепь аминокислот, пептидный скелет или амино- или карбокси-конец был дериватизирован (например, пептидные соединения с метилированными амидными связями). Примеры пептидомиметиков включают пептидные соединения, в которых пептидный скелет замещен одной или более бензодиазепиновыми молекулами (см., например, статью James G. L и соавт. (1993) Science, т. 260, стр. 1937-1942), "инверсо"-пептиды, в которых все L-аминокислоты замещены соответствующими D-аминокислотами, "ретро-инверсо"-пептиды (см. Патент США No 4522752, выданный Sisto), в которых последовательность аминокислот перевернута ("ретро") и все L-аминокислоты замещены соответствующими D-аминокислотами ("инверсо"), и другие изостерические соединения, такие как миметики пептидного скелета (т.е. амидной связи), включающие модификации амидного азота, -углерода, карбонила амида, полное замещение амидной связи, удлинения, делеции или перекрестные связи в скелете. Известен ряд модификаций пептидного скелета, в том числе [CH₂S], [CH₂NH], [CSNH₂], [NHCO], [COCH₂] и [(Е) или (Z) СН=СН]. В вышеиспользованной номенклатуре означает отсутствие амидной связи. Структура, замещающая амидную группу, приведена в скобках. Другие возможные модификации включают N-алкил- (или арил-)замещение ([CONR]), перекрестное связывание скелетов для создания лактамов или других циклических структур или другие производные, в том числе производные по С-концевому гидроксиметилу, О-модифицированные производные и производные, модифицированные по N-концу, включая замещенные амиды, такие как алкиламиды и гидразиды.

Как используют в данном контексте, термин "фармацевтически активное пептидное соединение" предназначен для определения пептидного соединения, которое проявляет фармакологическую активность либо в существующей до введения форме, либо после процессинга in vivo (т.е. фармацевтически активные пептидные соединения включают пептидные соединения с конститутивной фармакологической активностью и пептидные соединения в форме "пролекарства", которые должны после введения каким-либо образом метаболизироваться или процессироваться in vivo для проявления фармакологической активности).

Как используют в данном контексте, термины "многовалентное катионное пептидное соединение" и "многовалентное анионное пептидное соединение" предназначены для определения пептидных соединений, содержащих множество положительных или отрицательных зарядов, соответственно. Термины "двухвалентное катионное" или "двухвалентное анионное" пептидное соединение относятся к пептидному соединению, содержащему два положительных или отрицательных заряда, соответственно. Термины "трехвалентное катионное" или "трехвалентное анионное" пептидное соединение относятся к пептидному соединению, содержащему три положительных или отрицательных заряда, соответственно.

Как используют в данном контексте, термин "аналог LHRH" предусматривает охват пептидных соединений, которые имитируют структуру лютеинизирующий гормон-высвобождающего гормона. Аналог LHRH может быть агонистом LHRH или антагонистом LHRH.

Как используют в данном контексте, термин "агонист LHRH" предназначен для определения соединения, которое стимулирует рецептор лютеинизирующий гормон-высвобождающего гормона (LHRH-R), стимулируя таким образом высвобождение лютеинизирующего гормона, а термин "антагонист LHRH" относится к соединению, которое ингибирует LHRH-R, ингибируя таким образом высвобождение лютеинизирующего гормона. Примеры агонистов LHRH включают лейпролид (торговое название Lupron (лапрон); Abbot/TAP), госерелин (торговое название Zoladex (золадекс), Zeneca); бусерелин (Hoechst), трипторелин (известный также, как Decapeptyl (декапептил), D-Trp-6-LHRH и Debiopharm (дебиофарм); Ipsen (Beaufour), нафарелин (торговое название Synarel (синарел); Syntex), лутрелин (Wyeth), цисторелин (Hoechst), гонадорелин (Ayerst) и гистрелин (Ortho).

Как используют в данном контексте, термин "антагонист LHRH" предназначен для определения соединения, которое ингибирует рецептор лютеинизирующий гормон-высвобождающего гормона, ингибируя таким образом высвобождение лютеинизирующего гормона. Примеры антагонистов LHRH включают Antide (антид), Cetrorelix (цетрореликс), соединения, описанные в Патенте США 5470947, выданном Folkers и соавт.; Публикации РСТ No WO 89/01944 Folkers и соавт.; Патенте США 5413990, выданном Haviv; Патенте США 5300492, выданном Haviv; Патенте США 5371070, выданном Koerber и соавт.; Патенте США 5296468, выданном Hoeger и соавт.; Патенте США 5171835, выданном Janaky и соавт.; Патенте США 5003011, выданном Coy и соавт.; Патенте США 4431635, выданном Coy и соавт.; Патенте США 4992421, выданном De и соавт.; Патенте США 4851385, выданном Roeske и соавт. ; Патенте США 4801577, выданном Nestor Jr. соавт., и Патенте США 4689396, выданном Roeske и соавт., а также соединения, описанные в Патентной заявке США No 08/480494, имеющей название "Пептиды-антагонисты LHRH", и в соответствующей международной заявке (заявка РСТ No PCT/US96/09852), также имеющей название "Пептиды-антагонисты LHRH", полное содержание обеих заявок специально введено в данное описание в виде ссылки. Особенно предпочтительный антагонист LHRH содержит структуру Ac-D-Nal¹, 4-Cl-D-Phe², D-Pal³, N-Me-Tyr⁵, D-Asn⁶, Lys(iPr)⁸, D-Ala¹⁰-LHRH, обозначаемую в данном контексте PPI-149.

Как используют в данном контексте, термин "макромолекула-носитель" предназначен для обозначения макромолекулы, которая может комплексироваться с пептидным соединением с образованием нерастворимого в воде комплекса. Перед комплексированием с пептидным соединением макромолекула-носитель обычно является растворимой в воде. Предпочтительно макромолекула имеет мол. массу по меньшей мере 5 кД, более предпочтительно 10 кД. Термин "анионная макромолекула-носитель" предусматривает включение отрицательно заряженных молекул с высокой молекулярной массой, таких как анионные полимеры. Термин "катионная макромолекула-носитель" предусматривает включение положительно заряженных молекул с высокой молекулярной массой, таких как катионные полимеры.

Как используют в данном контексте, термин "нерастворимый в воде комплекс" предназначен для определения физически и химически стабильного комплекса, который образуется при соответствующем смешивании пептидного соединения и макромолекулы-носителя согласно описанным здесь способам. Комплекс обычно представляет собой осадок, который получают при смешивании водных препаратов пептидного соединения и макромолекулы-носителя. Не предполагая ограничений по механизму, образование предпочтительных нерастворимых в воде комплексов, соответствующих изобретению, предусматривает вовлечение (т.е., по меньшей мере, частично обусловлено) ионными взаимодействиями в случаях, когда пептидное соединение является катионным, а молекула-носитель - анионной, и наоборот. Дополнительно или альтернативно образование нерастворимого в воде комплекса, соответствующего изобретению, может включать (т.е. быть, по меньшей мере, частично обусловленным) гидрофобные взаимодействия. Более того, образование нерастворимого в воде комплекса, соответствующего изобретению, может включать (т. е. быть, по меньшей мере, частично обусловленным) ковалентные взаимодействия. Описание комплекса, как "нерастворимого в воде" служит для указания на то, что комплекс не растворяется в воде практически или легко, как видно по его осаждению из водного раствора. Однако следует понимать, что "нерастворимый в воде" комплекс, соответствующий изобретению, может обладать ограниченной растворимостью (т.е. частичной растворимостью) в воде либо in vitro, либо в водной физиологической среде in vivo.

Как используют в данном контексте, термин "задержанная доставка" предназначен для определения непрерывной доставки фармацевтического агента in vivo в период времени после введения, предпочтительно в течение, по меньшей мере, нескольких дней, недели или нескольких недель. Задержанная доставка агента может быть продемонстрирована, например, непрерывным терапевтическим эффектом агента в течение периода времени (например, для аналога LHRH задержанная доставка аналога может быть продемонстрирована непрерывной супрессией синтеза тестостерона в течение периода времени). Альтернативно задержанная доставка агента может быть продемонстрирована детекцией присутствия агента in vivo спустя некоторое время.

Как используют в данном контексте, термин "субъект" предусматривает включение теплокровных животных, предпочтительно млекопитающих, более предпочтительно приматов и наиболее предпочтительно человека.

Как используют в данном контексте, термин "введение субъекту" предназначен для определения приготовления, доставки и введения композиции (т.е. фармацевтического препарата) субъекту каким-либо приемлемым способом с целью доставки композиции в желаемый участок организма субъекта, включая доставку парентеральным или пероральным путем, внутримышечной инъекцией, подкожной/внутрикожной инъекцией, внутривенной инъекцией, защечным введением, чрескожной доставкой и ректальным, вагинальным, интраназальным введением или введением через толстую кишку или дыхательные пути.

Как используют в данном контексте, термин "состояние, поддающееся воздействию аналога LHRH" предусматривает включение заболеваний, нарушений и других состояний, при которых введение агониста LHRH или антагониста LHRH имеет желаемый эффект, например, терапевтически благоприятный эффект. Примеры состояний, которые лечат аналогом LHRH, включают гормонозависимые раки (в том числе рак простаты, рак молочной железы, рак яичников, рак матки и рак яичка), доброкачественную гипертрофию простаты, преждевременное половое созревание, эндометриоз, фиброму матки, бесплодие (посредством оплодотворения in vitro) и оплодотворяющую способность (т.е. использование в контрацепции).

Один из аспектов данного изобретения касается фармацевтической композиции, содержащей нерастворимый в воде комплекс фармацевтически активного пептидного соединения и макромолекулы-носителя. В предпочтительном варианте осуществления образование нерастворимого в воде комплекса обусловлено, по меньшей мере частично, ионными взаимодействиями между фармацевтически активным пептидным соединением и макромолекулой-носителем. В данных вариантах осуществления либо фармацевтически активное пептидное соединение является катионным, а макромолекула-носитель - анионной, либо фармацевтически активное пептидное соединение является анионным, а макромолекула-носитель - катионной. В другом варианте осуществления образование нерастворимого в воде комплекса обусловлено, по меньшей мере частично, гидрофобными взаимодействиями между фармацевтически активным пептидным соединением и макромолекулой-носителем. В предпочтительном варианте осуществления пептидное соединение, используемое в комплексе, представляет собой многовалентное катионное пептидное соединение, а макромолекула-носитель является анионной макромолекулой.

Фармацевтические композиции, соответствующие изобретению, обеспечивают задержанную доставку пептидного соединения субъекту in vivo после введения субъекту композиции. При этом продолжительность задержанной доставки может варьировать в зависимости от концентрации пептидного соединения и от макромолекулы-носителя, использованной для получения комплекса. Например, в одном варианте осуществления одна доза нерастворимого в воде комплекса обеспечивает задержанную доставку пептидного соединения субъекту в течение, по меньшей мере, одной недели после введения фармацевтической композиции субъекту. В другом варианте осуществления одна доза нерастворимого в воде комплекса обеспечивает задержанную доставку пептидного соединения субъекту в течение, по меньшей мере, двух недель после введения фармацевтической композиции субъекту. В еще одном варианте осуществления одна доза нерастворимого в воде комплекса обеспечивает задержанную доставку пептидного соединения субъекту в течение, по меньшей мере, трех недель после введения фармацевтической композиции субъекту. В другом варианте осуществления одна доза нерастворимого в воде комплекса обеспечивает задержанную доставку пептидного соединения субъекту в течение, по меньшей мере, четырех недель после введения фармацевтической композиции субъекту. Препараты, которые обеспечивают задержанную доставку в течение более длительных или более коротких периодов времени, также охватываются изобретением, например, препараты, которые обеспечивают непрерывную доставку в течение 1 дня, 1-7 дней, одного месяца, двух месяцев, трех месяцев и т. п. Непрерывная доставка пептидного соединения в течение нескольких месяцев может быть осуществлена, например, путем повторного введения месячных доз, каждая из которых обеспечивает задержанную доставку пептидного соединения в течение приблизительно одного месяца (см., например, пример 14).

Пептидное соединение любого размера может быть пригодным для использования в комплексе, пока пептидное соединение обладает способностью образовывать нерастворимый в воде нековалентный комплекс с макромолекулой-носителем при смешивании пептидного соединения и макромолекулы-носителя. Однако в некоторых предпочтительных вариантах осуществления пептидное соединение представляет собой пептид длиной приблизительно от 5 до приблизительно 20 аминокислот, длиной приблизительно от 8 до приблизительно 15 аминокислот или длиной приблизительно от 8 до приблизительно 12 аминокислот. В препаратах может быть использован ряд фармацевтически активных пептидов, неограничивающие примеры которых включают аналоги LHRH (обсуждаются ниже), аналоги брадикинина, гормон паращитовидной железы, адренокортикотропный гормон (АСТН), кальцитонин и аналоги вазопрессина (например, 1-дезамино-8-D-аргинин-вазопрессин (DDAVP)).

Несмотря на то, что многие макромолекулы-носители могут быть использованы для образования нерастворимых в воде комплексов, соответствующих изобретению, предпочтительные макромолекулы представляют собой полимеры, предпочтительно водорастворимые полимеры. В предпочтительном варианте осуществления макромолекула-носитель является анионным полимером, таким как анионное производное многоатомного спирта, или его фрагментом и их солями (например, натриевыми солями). Анионные структуры, которыми может быть дериватизирован многоатомный спирт, включают, например, карбоксилатную, фосфатную или сульфатную группы. Особенно предпочтительный анионный многоатомный спирт представляет собой анионное производное полисахарида или его фрагмент или их соли (например, натриевые соли). Макромолекула-носитель может содержать молекулы одного вида (например, один тип полимера) или молекулы двух или более различных видов (например, смесь двух типов полимеров). Примеры специфических анионных полимеров включают карбоксиметилцеллюлозу, альгин, альгинат, анионные ацетатные полимеры, анионные акриловые полимеры, ксантановые смолы, гликолат натрия крахмала и их фрагменты, производные и фармацевтически приемлемые соли, а также анионные производные карагинана, анионные производные полигалактуроновой кислоты и сульфатированные и сульфонированные производные полистирола. Предпочтительным анионным полимером является натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы. Примеры катионных полимеров включают поли-L-лизин и другие полимеры основных аминокислот.

В особенно предпочтительном варианте осуществления изобретения пептидное соединение нерастворимого в воде комплекса является аналогом LHRH, например агонистом LHRH или, более предпочтительно, антагонистом LHRH. Данные аналоги LHRH обычно имеют длину 10 аминокислот. Предпочтительные антагонисты LHRH включают антагонисты LHRH, которые содержат пептидное соединение, в котором остаток пептидного соединения, соответствующий аминокислоте в положении 6 природного LHRH млекопитающих, содержит структуру D-аспарагина (D-Asn). Как используют в данном контексте, термин "структура D-аспарагина" предусматривает включение D-Asn и его аналогов, производных и миметиков, которые сохраняют функциональную активность D-Asn. Другие предпочтительные антагонисты LHRH включают антагонисты LHRH, которые содержат пептидное соединение, содержащее структуру A-B-C-D-E-F-G-H-I-J, где А - пиро-Glu, Ac-D-Nal, Ac-D-Qal, Ac-Sar или Ac-D-Pal; В - His или 4-Cl-D-Phe; С - Trp, D-Pal, D-Nal, L-Nal, D-Pal(N-O) или D-Trp; D - Ser; E - N-Me-Ala, Tyr, N-Me-Tyr, Ser, Lys(iPr), 4-Cl-Phe, His, Asn, Met, Ala, Arg или lle; в которой R и X независимо представлены Н или алкилом и L содержит небольшой полярный фрагмент; G - Leu или Trp; Н - Lys(iPr), Gln, Met или Arg; I - Pro и J - Gly-NH² или D-Ala-NH², или их фармацевтически приемлемые соли.

Термин "небольшой полярный фрагмент" относится к структуре, которая имеет маленький стерический объем и является относительно полярной. Полярность измеряют как гидрофильность по Р-шкале. Коэффициент распределения, Р, между 1-октанолом и водой использовали в качестве стандарта при определении гидрофильности соединения. Гидрофильность может быть выражена как logP, логарифм коэффициента распределения (см. статью Hansch и соавт. Nature (1962), т. 194, с. 178; Fujita и соавт. J. Am. Chem. Soc. (1964), т. 86, с. 5175). Были созданы стандартные таблицы гидрофильности для многих молекул и константы липофильности (гидрофобности) заместителей (обозначаемых п) для многих функциональных групп (см. , например, Hansch и Leo "Константы заместителей для корреляционного анализа в химии и биологии" ("Substituent Constants for Correlation Analysis in Chemistry and Biology", (1979) Wiley, New York, New York). Гидрофильность широкого круга проверяемых на гидрофильность структур может быть очень точно предсказана с помощью данных таблиц. Например, измеренный logP (октанол/вода) нафталина составляет 3,45. Константа заместителя р для -ОН составляет -0,67. Вследствие этого предсказанный logP для -нафтола составляет 3,45+(-0,67)=2,78. Данное значение хорошо согласуется с измеренным logP для -нафтола, который составляет 2,84. Как используют в данном контексте, термин "небольшой полярный фрагмент" относится к структурам, которые имеют logP в диапазоне между -1 и +2 и стерический объем которых не превышает стерический объем Тrp.

В ряде вариантов осуществления L содержит небольшой полярный фрагмент при условии, что F не является D-Cit, D-Hci или производным низшего алкила D-Cit или D-Hci. Предпочтительно F выбрано из группы, состоящей из D-Asn, D-Gln и D-Thr. Более предпочтительно F является D-Asn. Предпочтительно Е представлено тирозином (Тyr) или N-метил-тирозином (N-Ме-Тyr). В особенно предпочтительном варианте осуществления антагонист LHRH имеет следующую структуру: Ac-D-Nal¹, 4-Cl-D-Phe², D-Pal³, N-Me-Tyr⁵, D-Asn⁶, Lys(iPr)⁸, D-Ala¹⁰-LHRH (обозначаемую в данном контексте РРI-149). Особенно предпочтительный комплекс, соответствующий изобретению, содержит РРI-149 и карбоксиметилцеллюлозу.

В дополнение к нерастворимому в воде комплексу фармацевтические композиции, соответствующие изобретению, могут содержать дополнительные фармацевтически приемлемые носители и/или наполнители. Как используют в данном контексте, термин "фармацевтически приемлемый носитель" включает любые и все растворители, дисперсионные среды, покрытия, антибактериальные и антигрибковые агенты, изотонические и замедляющие всасывание агенты и т.п. при их физиологической совместимости. Предпочтительно, если носитель является пригодным для внутривенного, внутримышечного, подкожного или парентерального введения (например, путем инъекции). Наполнители включают фармацевтически приемлемые стабилизаторы и дизинтеграторы.

Дополнительно к фармацевтическим композициям аналогов LHRH, комплексированных с макромолекулой-носителем, изобретение далее охватывает упакованные препараты, содержащие данные комплексы, и шприцы, содержащие данные комплексы. Например, в изобретении представлен упакованный препарат для лечения субъекта при состоянии, поддающемся воздействию аналога LHRH. Препарат, содержащий нерастворимый в воде комплекс аналога LHRH (предпочтительно РРI-149) и макромолекулы-носителя (предпочтительно карбоксиметилцеллюлозы), упакован с инструкциями по применению нерастворимого в воде комплекса для лечения субъекта при состояниях, которые лечат аналогом LHRH. В другом варианте осуществления в изобретении представляют шприц, имеющий полость, отличающийся тем, что в полость введен нерастворимый в воде комплекс аналога LHRH (предпочтительно PPI-149) и макромолекулы-носителя (предпочтительно карбоксиметилцеллюлозы).

Комплекс, соответствующий изобретению, готовят путем смешивания пептидного соединения и макромолекулы-носителя в условиях образования нерастворимого в воде комплекса пептидного соединения и макромолекулы-носителя. Соответственно, другой аспект изобретения касается способов получения фармацевтических композиций. В одном варианте осуществления способ предусматривает: получение пептидного соединения и макромолекулы-носителя; смешивание пептидного соединения и макромолекулы-носителя в условиях образования нерастворимого в воде комплекса пептидного соединения и макромолекулы-носителя и приготовление фармацевтической композиции, содержащей нерастворимый в воде комплекс.

Например, раствор пептидного соединения и раствор макромолекулы-носителя смешивают до тех пор, пока нерастворимый в воде комплекс пептидного соединения и макромолекулы-носителя не выпадет в осадок из раствора. В ряде вариантов осуществления растворы пептидного соединения и макромолекулы-носителя являются водными растворами. Альтернативно, если пептидная молекула или молекула-носитель (или обе) являются практически нерастворимыми в воде до их смешивания, то пептидная молекула и/или макромолекула-носитель могут быть растворены в смешивающемся с водой растворителе, таком как спирт (например, этанол) перед смешиванием двух компонентов комплекса. В другом варианте осуществления способа приготовления нерастворимого в воде комплекса раствор пептидного соединения и раствор макромолекулы-носителя смешивают и нагревают до тех пор, пока комплекс пептидного соединения и макромолекулы-носителя не выпадет в осадок из раствора. Количества пептидного соединения и макромолекулы-носителя, необходимые для получения нерастворимого в воде комплекса, могут изменяться в зависимости от определенных используемых пептидного соединения и макромолекулы-носителя, определенного растворителя(ей) и/или способа, используемого для получения комплекса. Обычно, однако, пептидное соединение будет находиться в избытке относительно макромолекулы-носителя по молярному соотношению. Часто пептидное соединение также будет находиться в избытке по массовому соотношению, как продемонстрировано в примерах. В определенных вариантах осуществления макромолекула-носитель, предпочтительно натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы, и пептидное соединение, предпочтительно РРI-149, смешивают в соотношении 0,2:1 (мас./мас.) макромолекула-носитель : пептидное соединение. В различных других вариантах осуществления соотношение макромолекулы-носителя к пептидному соединению (мас./мас.) может составлять, например, 0,5:1, 0,4:1, 0,3:1, 0,25:1, 0,15:1 или 0,1:1. Не ограничивающие примеры условий и способов получения нерастворимого в воде комплекса, соответствующего изобретению, описаны далее в примерах 1-5 и 8-9.

После осаждения комплекса пептидное соединение/макромолекула из раствора осадок может быть удален из раствора известными в уровне техники средствами, такими как фильтрация (например, через нейлоновую мембрану 0,45 мкм), центрифугирование и т. п. Затем выделенная паста может быть высушена (например, под вакуумом или в печи при 70^oС) и твердое вещество может быть перемолото или распылено с получением порошка известными в уровне техники средствами (например, размалыванием в клиновой или молотковой мельнице или растиранием пестиком в ступке). После перемалывания или распыления порошок может быть просеян через сито (предпочтительно сито с ячеей 90 мкм) для получения однородного распределения частиц. Более того, выделенная паста может быть заморожена и лиофилизирована до сухого состояния. Порошковая форма комплекса может быть диспергирована в растворе-носителе с образованием жидкой суспензии или полутвердой дисперсии, пригодной для инъекции. Соответственно в различных вариантах осуществления фармацевтическая композиция, соответствующая изобретению, представляет собой сухое твердое вещество, жидкую суспензию или полутвердую дисперсию. Примеры жидких носителей, пригодных для использования в жидких суспензиях, включают растворы солей, растворы глицерина и растворы лецитина.

В другом варианте осуществления фармацевтический препарат, соответствующий изобретению, является стерильным препаратом. Например, после образования нерастворимого в воде комплекса этот комплекс может быть простерилизован, оптимальной является стерилизация -облучением или облучением электронным пучком. Согласно этому соответствующий изобретению вышеописанный способ приготовления фармацевтической композиции может далее предусматривать стерилизацию нерастворимого в воде комплекса -облучением или облучением электронным пучком. Предпочтительно препарат стерилизуют -облучением с использованием дозы -облучения, по меньшей мере, 15 кГр (KGy). В других вариантах осуществления композицию стерилизуют -облучением с использованием дозы -облучения, по меньшей мере, 19 кГр или не менее 24 кГр. Как показано в примере 11, соответствующие изобретению препараты сохраняют приемлемый уровень стабильности при -облучении.

Альтернативно для приготовления стерильной фармацевтической композиции нерастворимый в воде комплекс может быть выделен с использованием принятых стерильных способов (например, с использованием стерильных исходных материалов и ведением процесса получения в асептических условиях). Соответственно, в другом варианте осуществления вышеописанного способа приготовления фармацевтического препарата нерастворимый в воде комплекс получают, используя асептические методы.

Способы образования нерастворимого в воде комплекса, соответствующего изобретению, описаны далее в примерах 1-5 и 8-9. Фармацевтические препараты, включая порошки, жидкие суспензии, полутвердые дисперсии, сухие твердые вещества (например, лиофилизированные твердые вещества) и их стерилизованные формы (например, с помощью -облучения), приготовленные согласно способам, соответствующим изобретению, также охватываются изобретением.

Еще один аспект изобретения касается способов использования фармацевтических препаратов, соотв