Способ комплексно-индивидуализированного воздействия на организм при медленной вирусной инфекции и способ подготовки лабораторного животного для испытания способа такого воздействия

Способ комплексно-индивидуализированного воздействия на организм при медленной вирусной инфекции и способ подготовки лабораторного животного для испытания способа такого воздействия

Реферат

 

Изобретение относится к области прикладной вирусологии и медицинской генетики и может быть использовано для воздействия на организм человека и животных при медленной вирусной инфекции (МВИ). Сущность изобретения состоит в едином биоинформационном подходе к воздействию на организм для избавления его от патогенов, представляющих собой как классические вирусы типа герпес, вирус иммунодефицита человека, вирусы гепатита В и С и т.п., так и неканонические вирусы типа прионов. Воздействие включает два этапа: устранение из организма патогена с индивидуальным учетом особенностей репликации вируса в клетках-мишенях иммуносистемы с последующим экстракорпоральным лечением, восстановление иммуноинформационных связей за счет трансплантации морфологических элементов из плацентарно-пуповинной крови. В изобретении раскрыт также способ подготовки лабораторного животного с целью использования его для испытаний такого способа воздействия на организм при МВИ. Технический результат - более точная индивидуализация подходов к лечению медленных вирусных инфекций таких, как ВИЧ, прионовая. 2 с. и 12 з.п. ф-лы, 2 табл.

Изобретение относится к области прикладной вирусологии и медицинской иммуногенетики в связи с итогами разработки иммуноспецифических воздействий на организм в его борьбе с медленной вирусной инфекцией (МВИ).

В настоящее время весьма серьезной задачей является предотвращение развития иммунодефицитных состояний (ИДС) как фона и в то же время как следствия механизма развития МВИ типа инфекции, возбудителем которой рассматривают вирус иммунного дефицита человека (ВИЧ) и терминальную стадию, которой именуют синдромом приобретенного иммунного дефицита (СПИД), а также инфекции, вызванной так называемыми неканоническими вирусами - прионами, вирусом герпеса и др.

В перечне МВИ особое место занимает ВИЧ-инфекция и СПИД. Это - первая МВИ не с локальными очагами заражения, а с реальной эпидемией, вернее, пандемией, с которой столкнулось человечество. Принадлежность ее возбудителя к лентивирусам из группы ретровирусов, легко внедряющимся в генетический аппарат клеток-мишеней для ВИЧ в иммунной системе человеческого организма-хозяина и способным длительное время в них персистировать без проявления патогенных свойств, делает разработку способов воздействия на ВИЧ весьма трудоемкой и особо сложной задачей [1].

Особенность СПИДа как инфекционного процесса - в клиническом проявлении двух латентных (инкубационных) периодов: первый - перед продромальным периодом, клинически проявляющийся гриппоподобным состоянием с картиной крови, напоминающей таковую при инфекционном мононуклеозе, и обусловленный массивной контаминацией ВИЧ и его репликацией в макрофагах, гибнущих в итоге. Последнее приводит к компенсаторному мононуклеозу. Второй скрытый период при СПИДе обусловлен ломкой иммунобиологической устойчивости организма-хозяина в результате подключения к инфекционному процессу эндогенной, ранее депрессированной, а теперь активирующейся в условиях такой ломки латентной микро- и/или ультрамикрофлоры в организме-хозяине. При этом не исключена возможность присоединения экзогенной как интеркуррентной микро- и/или ультрамикрофлоры или как разных осложнений, наслаивающихся на основной инфекционный процесс, обусловленный ассоциацией ВИЧ и активировавшихся иных вирусов и/или разных микроорганизмов эндогенного происхождения.

Наличие у пациентов индивидуальных особенностей в наборах из легко образующихся мутантов ВИЧ и сопровождающих ВИЧ ассоциантов в виде иных вирусов и/или микроорганизмов типа условно-патогенных бактерий, грибков и пр. составляет характерную особенность ВИЧ-инфекции как МВИ [2]. В своем "поединке" с иммунной системой человеческого организма ВИЧ выручает то обстоятельство, что он способен вести себя и как вирус-оппортунист, репликация которого зависит от активации клетки-мишени, ставшей клеткой-хозяином, внешними "ускоряющими" факторами и/или от дефектности ВИЧ в иммунологическом отношении. Это в любом случае порождает ассоциативно-инфекционные механизмы воздействия по "компрометированию" иммуносистемы человеческого организма, становящегося хозяином для ВИЧ.

Так фактором, ускоряющим развитие ВИЧ-инфекции с наступлением ее острой стадии (с переходом латентной стадии ВИЧ-инфекции в манифестный СПИД с соотвествующими клиническими признаками), рассматривают другие вирусы, к примеру, цитомегаловирус (ЦМВ) или иные герпетические вирусы, которые, проникая в Т₄-лимфоциты (или хелперные Т-лимфоциты), содержащие провирус ВИЧ, активируют геном клетки-хозяина, что в итоге приводит к активации провируса и к репликации ВИЧ. При этом различают коинфекцию разных вирусов в одной и той же клетке-хозяине и инфекцию разных вирусов в разных клетках одного и того же организма-хозяина. Есть указания, что ко-инфекция ВИЧ герпетическими вирусами проявляется либо в виде латентного состояния ВИЧ, либо усилением его продуктивности, в сравнении с моноинфекцией ВИЧ в одноименных клетках [3].

При поражении клеток-мишеней, инфицированных сопутствующим ЦМВ, вирусом простого герпеса (ВПГ) или вирусом герпес зостер (ВГЗ), т.е. вирусом опоясывающего лишая, - все эти сопутствующие вирусы менее контролируются иммуносистемой у ВИЧ-инфицированного организма и проявляют себя в нем гораздо злокачественнее. Аналогичным образом, в соответствии со своей генетической программой бактерии, грибки и простейшие, как возбудители сопутствующих инфекций, поражают гораздо сильнее организм на фоне его иммунодефицитности, индуцированной ВИЧ. Вместе с тем они стимулируют его репликацию выделяемыми мукополисахаридами и другими метаболитами, усиливая тем самым процессы патогенеза ВИЧ-инфекции в организме человека. В таких условиях ассоцианты ВИЧ как в виде разных микроорганизмов, так и в виде иных вирусов способны стать причиной развития оппортунистичеких инфекций, гибельных для ВИЧ-инфицированных лиц. Однако и на первоначальном этапе развития ВИЧ-инфекции ЦМВ как ускоряющий фактор приводит к формированию приобретенной иммунодепрессии, на фоне которой ВИЧ более интенсивно оседает в организме человека [4].

Своевременное принятие мер против подобных ассоциантов ВИЧ предопределяет успешное предотвращение развития на завершающих стадиях СПИДа оппортунистических инфекций как причины гибели ВИЧ-инфицированных лиц. Активация латентного состояния и усиление продуктивности ВИЧ, спровоцированное ассоциантами, могут приводить к амплификации провируса - к появлению довольно многочисленных реплик провируса ВИЧ и к новому обсеменению ВИЧ-инфицированного организма этими репликами в виде, возможно, подвижных внеклеточных ДНК-вектор-подобных нуклеотидных последовательностей, ДНК-ВПНП, генерированных при их отделении из генома клетки-хозяина на участке интегрированного в нем провируса.

Целый ряд исследований, проведенных в нашей стране и зарубежом, показывают, что в борьбе с МВИ типа ВИЧ-инфекции и СПИДа достигнуты некоторые успехи. В частности, довольно подробно изучена структура вируса ВИЧ и серология ВИЧ-инфекции и СПИДа как основа иммуноспецифической серодиагностики СПИДа, намечен поиск путей лечения СПИДа [5]. Исследована репродукция ВИЧ и установлены возможные при этом мишени для химиотерапевтических препаратов [6]. В литературе описаны также патогенные свойства ВИЧ и возможная зависимость развития ВИЧ-инфекции от особенностей состояния иммунорегуляции у организма-хозяина [7, 8].

Изучение патентной информации последнего времени показало, что проблема лечения от МВИ, в особенности от ВИЧ- и ряда других инфекций занимает важное место среди исследований в области молекулярной биологии и генетики. На территории Российской Федерации действуют ряд патентов, где указаны подходы и средства лечения при ретровирусных заболеваниях и при других МВИ. Например, средство для лечения и профилактики при вирусных инфекциях, в особенности, при ВИЧ-инфекции и гепатитах (RU 2145324, 10.02.2000), средство для лечения от нейро-СПИДа (RU 2157205, 10.10.2000), иммуномодулирующие и противовирусные агенты (RU 2154068, 10.08.2000).

В последние годы в мире обращено внимание на подробное изучение структурной организации генома у ВИЧ, описаны фрагменты нуклеотидной последовательности, выделенные из ВИЧ-1, от которых зависит риск интрафектальной трансмиссии данного вируса (US 5919462, 06.07.1999). Выделены белковопептидные комплексы для профилактики и терапии против внутриклеточных патогенов (US 6048530, 11.04.2000).

Таким образом, за последнее время выделены и открыты целый ряд средств, которые позволяют проводить более эффективно борьбу против ВИЧ, вируса герпеса, нейровирусов и др. возбудителей МВИ.

Однако ранее найденные и вновь открытые противовирусные средства не могут быть использованы с максимальной эффективностью. По нашему мнению, главным в лечении от МВИ является создание условий для возможности комплексно-индивидуализированного подхода с учетом не только биологических и физиологических особенностей инфекционного процесса, вызванного тем или иным вирусом-возбудителем и обусловленного особенностями его репликационного цикла, что позволяет своевременно и эффективно блокировать его репликацию и пресечь тем самым возможность его размножения в новых, еще незанятых им клетках-мишенях иммуносистемы организма-хозяина. Относительно ВИЧ некоторые попытки подобного рода сделаны, судя по международным публикациям WO 94/16737, 04.08.94, и WО 97/27480, 31.07.97. В упоминаемой последней международной публикации, исходящей от фирмы "Вирко" (Бельгия), подробно описан "Способ определения оптимальной химиотерапии ВИЧ-пациентов, серопозитивных по ВИЧ"; разработку способа в этой публикации считаем наиболее близкой по своему замыслу к нашей работе по поставленной проблеме. Однако, если в такой разработке способа был сделан упор на подбор наиболее оптимальных средств воздействия на штамм вируса, которым поражен пациент, то в наших условиях основная задача состоит не в выборе средства, а в определении момента "нанесения удара" в связи с необходимостью блокирования репликации вируса-возбудителя и предотвращения его дальнейшей репликации в новых, еще незаселенных им, клетках-мишенях иммуносистемы организма-хозяина при обязательном сочетании с восстановлением поврежденной системы иммунозащиты организма.

Обоснование изобретения Сущность изобретения состоит в разработке единого подхода к воздействию на организм при разных по этиологии МВИ, основанному на предотвращении вовлечения в инфекционный процесс новых клеток-мишеней в условиях блокирования репликационных циклов в них вируса-возбудителя МВИ и прекращения дальнейшего развития иммунодефицитного состояния у организма хозяина в связи с происходившим развитием инфекционного процесса при данной МВИ. Воздействие на организм, пострадавший от развития МВИ, включает в себя два обязательно последовательных этапа: (1) устранение активности патогенного фактора как комплекса из вирионов возбудителя МВИ, их возможных мутантов и ассоциантов - иных вирусов и/или разных микроорганизмов эндо- и/или экзогенной природы (латентные вирусы и условнопатогенные бактерии, грибки и пр.); (2) восстановление поврежденных функций пострадавшего иммунопотенциала из-за нарушений механизма клеточного иммунитета реплицирующимся вирусом-возбудителем МВИ в клетках-мишенях иммуносистемы организма-хозяина.

Применительно к МВИ в виде ВИЧ-инфекции и СПИДа разработанный и апробированный нами способ воздействия на организм-хозяин исходит из стратегической задачи, решение которой определяется активным противодействием репликационных циклов ВИЧ как узлового механизма в инфекционном процессе с его особенностями при данной МВИ. В числе этих особенностей - это, во-первых, трансформация исходных (инфицирующих) РНК-форм ВИЧ в их ДНК-копию (провирус) перед предстоящей интеграцией (внедрением) в состав ДНК клеточного генома (генетического аппарата в ядре клетки-мишени для ВИЧ). Во-вторых, - это асинхронно происходящая репликация ВИЧ в разных для него клетках-мишенях иммуносистемы инфицированного организма человека (в макрофагах и отчасти в их предшественниках - моноцитах, а также (и главным образом) в хелперных Т-лимфоцитах) в связи с разной затратой времени в связи с поиском свободных клеток-мишеней, еще незанятых другими ВИЧ-вирионами, в связи с проявлением нестерильного антивирусного иммунитета (о чем свидетельствует наличие на мембранной поверхности клеток-мишеней рецептора CD₄ (Т₄) еще свободного от вирусного лигандного (капсидного или оболочечного) белка в результате лигандно-рецепторного взаимодействия по ходу "раздевания" ВИЧ перед вторжением его генома в цитоплазму и затем в ядро клетки-мишени, когда капсидный белок ВИЧ-вириона остается связанным клеточным рецептором CD₄ на мембранной поверхности клетки-мишени). В-третьих, это - недоступность провируса как ДНК-копии генома ВИЧ при его нахождении в цитоплазме, а затем при внутригеномном нахождении в клетке-мишени и образующихся, правда, с существенным запаздыванием по ходу инфекционного процесса, т.е. репликационных циклов ВИЧ с образованием мутантов в ответ на синтез этих Ат; недоступен вирусный геном и для воздействия на него лечебных средств, в частности, поремененного первым в лечебной практике против ВИЧ-инфекции и СПИДа и широко применяемого поныне (несмотря на его токсичность и возможность проявления у ВИЧ привыкания или резистентности к нему) азидотимидина, АЗТ, как ингибитора обратной транскриптазы или РНК-зависимой ДНК-полимеразы, или ревертазы [2.7.7.48], катализирующей трансформацию РНК-формы ВИЧ-вирионов и их ДНК-копию или провирус и интеграцию этой ДНК-копии или провируса в состав клеточного генома.

Поскольку репликационный цикл ВИЧ характеризуется проявлениями известной (и прохронометрированной) фазовостью перехода из РНК-форм исходных ВИЧ-вирионов в их ДНК-копии (провирус) в условиях катализа ревертазой и обратно в РНК-формы при кодировании синтеза и сборки отдельных их компонентов генами вирусного генома, т. е. провируса (наличие пяти фаз при длительности цикла репликации от трех до 72 часов) [2, 9], то эффективное противодействие репликативным процессам ВИЧ с применением ингибиторов и блокаторов репликации ВИЧ возможно только в том случае, если оно приурочено к той фазе репликации ВИЧ, когда синтезированные ВИЧ-вирионы находятся вне клеток - своих хозяев и становятся доступными для воздействия специфических Ат и химиотерапевтических средств типа, например, АЗТ. Такой фазой репликационного цикла ВИЧ является фаза выхода ВИЧ-вирионов в РНК-форме новой генерации их клеток-хозяев.

Однако подобная приуроченность к определенной фазе репликации ВИЧ реальна лишь только в том случае, если наблюдаемая асинхронность репликации ВИЧ в разных клетках-мишенях иммуносистемы окажется приведенной к синхроннности этой репликации хотя бы в большинстве таких клеток. Как мы убедились, подобную синхронизацию оказалось возможным проводить с помощью попеременного, по крайней мере, трехкратного чередования для воздействия активатором и затем (спустя три часа) ингибитором репликации на ВИЧ-вирионы новой генерации при их нахождении вне клеток, в плазме крови (наподобие той синхронизации, к которой прибегают в лабораторной практике для получения гомогенных по свойствам тканевых культур). Этим реализуется возможность успешного применения блокатора репликации (в виде, например, актиномицина Д [10]), ВИЧ с целью предотвращения вторжения ВИЧ-вирионов новой генерации в новые клетки-мишени иммуносистемы ВИЧ-инфицированного организма человека. Этим (в ходе обязательно проводимой предварительно процедуры, названной нами "провокация провируса") достигается постепенное (в условиях повторно и последовательно проводившегося циклами комплекса разработанных и успешно апробированных нами лечебных процедур) очищение организма от элементов патогенного фактора, т.е. ВИЧ-вирионов, их мутантов, их ассоциантов и ВИЧ-инфицированных клеток, содержащих провирус, с их CD₄-рецептором, связавшим на их мембране вирусный лиганд-капсид, путем их устранения с помощью предложенных, успешно апробированных нами приемов, составляющих необходимый в условиях МВИ комплексно-индивидуализированный подход к воздействию на ВИЧ-инфицированный организм человека.

Таким образом, вышеописанная провокация провируса составляет весьма существенную часть нашего изобретения. Активность возможного в ходе синхронизации репликации ВИЧ при провокации провируса распространения в крови продукта амплификации провируса в виде мобильных ДНК-ВПНП после применения активатора репликации ВИЧ (в виде, например, бактериального мукополисахарида, БМПС) пресекается применением препарата дезоксирибонуклеазы (дорназы), разрушающей ДНК-ВПНП как возможный иной канал для распространения инфекционного процесса "с поставкой готового провируса", препарат ДНКазы вводится пациенту каждый раз после введения активатора репликации и перед введением ингибитора репликации (например, АЗТ).

Применительно к ВИЧ-инфекции и СПИДу как МВИ, разработанный и апробированный нами способ воздействия исходит из стратегической задачи, определяемой не только активным противодействием закономерностям репликационных циклов вируса как узлового механизма инфекционного процесса. Той же стратегической задачей определяется параллельное восстановление нарушенных иммуноинформационных связей в механизме клеточного иммунитета в связи с превращением макрофагов и, главное, хелперных Т-лимфоцитов в места репликации и депо ВИЧ и, следовательно, в связи с повреждением механизма иммунологического процессинга информации о Аг, поступающей от антиген-представляющей клетки, какой является макрофаг, в хелперный Т-лимфоцит, переводящий информацию об особенностях чужеродного Аг "с языка" макрофага "на язык" В-лимфоцита, трансформирующийся в плазмоцит-продуцент специфических Ат на основе поступившей информации о чужеродном Аг в условиях соответствующих когнатных контактов между названными клетками иммуносистемы организма человека с обменом между ними фрагментами нуклеиновых кислот [11].

Согласно выдвинутой нами концепции обратной информационной связи (ОИС) при биосинтезе макромолекул такая информация отражена в нуклеотидной последовательности либо мессенжерной (матричной или информационной) РНК (мРНК), несущей в макрофаге заключенную в ней информацию о специфике Аг и превращающуюся в так называемую "реверсионную РНК" (реРНК) в условиях обратной трансляции на транслировавшуюся мРНК, в связи с передачей информации с синтезирующейся полипептидной цепи с измененной аминокислотной последовательностью, отражающей специфику Аг как чрезвычайного средового фактора (ЧСФ), для белка-клеточного рецептора. Последний должен был быть гомологом белка-клеточного рецептора, который связал Аг и тем самым подвергся локальному перенапряжению полипептидной цепи в зоне некоторых пептидных связей под действием данного Аг как чрезвычайный средовой фактор, специфика структуры которого еще не находила себе отражение в генетической памяти макрофага. Либо эта информация о специфике Аг оказалась заключенной в нуклеотидной последовательности ДНК хелперного Т-лимфоцита в результате обмена ДНК с заключенной в ней информацией о специфике структуры Аг при когнатном контакте с В-лимфоцитом в геном последнего, трансформирующегося при этом в плазмоцит-продупент специфических Ат на основании полученной им в итоге информации о специфике Аг.

Восстановление иммунопотенциала у ВИЧ-инфицированного лица на любой стадии заболевания посредством компенсаторной интрастернальной трансплантации фракции лейкоцитов с их предшественниками по лейкопоэзу, среди которых преобладают, что важно, юные формы, из "свежей" плацентарно-пуповинной крови и посредством последующего введения аутовакцины, активирующей трансплантат, оказывается в единой связке с активным противодействием закономерностям репликационных циклов ВИЧ как узлового механизма основного инфекционного процесса при МВИ типа ВИЧ-инфицированных клеток иммуносистемы. Таким образом, формируется своего рода биологический заслон, защищающий новые, незаселенные клетки-мишени иммуносистемы от контаминации вирионами ВИЧ и мобильных ДНК-ВПНП как продукта амплификации активированного провируса. Тем самым повышается эффективность последующего (после процедуры провокации провируса) применения приемов и средств устранения ВИЧ-вирионов и их мутантов из плазмы крови и организма ВИЧ-инфицированного лица.

С учетом недостаточной изученности механизмов индивидуальной иммунорегуляции разработаны и апробированы в опытах на лабораторных животных и затем применены для воздействия на ВИЧ-инфицированных пациентов средства и приемы на принципе индивидуализированного подхода к устранению элементов патогенного начала в виде исходных и реплицирующихся ВИЧ-вирионов, их легкообразующихся мутантов, способных к обратной мутации, сопровождающих всех их ассоциантов, представленных иными вирусами и/или разными микроорганизмами, поддерживающими основной инфекционный процесс, вызванный ВИЧ. Последний в подобной ситуации способен повести себя и как типичный оппортунист (в условиях заражения и дальнейшего развития ВИЧ-инфекции при так называемой "компрометации" иммунной системы этими ассоциантами) [2].

Учет фазовости в репликационных циклах ВИЧ с целью контроля активности провируса в ходе ее синхронизации в разных клетках-мишенях иммуносистемы на этапе провокации провируса вместе с проводимым в последующем комплексно-индивидуализированным подходом при иммуновоздействии на ВИЧ-инфицированный организм обеспечивает не продление его выживаемости при практикуемом лечении, а его излечение, согласно результатам лечения по нашему способу, исключающим возможность рецидивов в течение длительных за ним периодов наблюдения.

По нашему мнению, при развитии иммунодефицита (или иммунодепрессии, как менее тяжкого и временного повреждения функции иммуносистемы) разной природы, обусловленного повреждением иммуноинформационных связей при взаимодействии клеток иммуносистемы не ограничивается экспрессией биосинтеза специфических Ат к данному Аг по имевшейся уже генетической программе.

При развитии МВИ типа ВИЧ-инфекции и СПИДа из-за превращения макрофагов, а затем хелперных Т-лимфоцитов в депо вирионов - возбудителей инфекционного процесса в организме млекопитающего, при массовой репликации вируса, серьезно повреждаются иммуноинформационные связи для сигнализации о чужеродных Аг в виде вирусов, и образуемых ими мутантах и об активирующихся при этом ассоциантах вирусной и/или микробной природы.

В начальном периоде в организме человека оказываются пораженными макрофаги при выполнении ими функции "санитаров" тканей и органов организма. Допускается при этом существование вирусных штаммов по тропизму, т.е. адаптированных к репликации в макрофагах и в их предшественниках - моноцитах. Предполагаем также, что под действием специфических Ат макрофаготропные вирионы способны превращаться в лимфотропные, и тогда хелперные Т-лимфоциты становятся основным резервуаром реплицирующегося вируса. Тем не менее, в любом случае при ВИЧ-инфекции с превращением макрофагов или хелперных Т-лимфоцитов в депо реплицирующегося ВИЧ способность к "иммунологическому процессингу" информации о чужеродных Аг резко снижается на участках в цепи взаимодействия по типу когнатных контактов с обменом фрагментами нуклеиновых кислот, (которые весьма напоминают по своему характеру гибридизацию) между макрофагами и хелперными Т-лимфоцитами или между хелперными Т-лимфоцитами и В-лимфоцитами при передаче генетической информации об Аг.

Положение значительно ухудшается в связи с образованием мутантов ВИЧ: процесс мутации ВИЧ по своей скорости намного опережает процесс трансформации В-лимфоцитов в плазмоциты-продуценты специфических Ат по ходу иммунологического процессинга информации об антигенной структуре мутантов ВИЧ с выработкой новых генетических программ на биосинтез специфических Ат против мутантов ВИЧ. Таким образом, происходит хроническое запаздывание в синтезе специфических Ат по требованию слагающейся ситуации в связи с возникновением мутантов ВИЧ в ВИЧ-инфицированном организме пациента.

Эта информация об антигенной структуре ВИЧ-инфекции и СПИДа отражена в нуклеотидной последовательности либо мессенжерной РНК (мРНК), несущей заключенную в ней информацию с соответствующего генного локуса, но превращающейся в так называемую реверсионную РНК в условиях обратной трансляции при передаче информации с синтезирующейся полипептидной цепи на нуклеотидную последовательность мРНК в макрофаге [11].

По ходу развития МВИ типа ВИЧ-инфекции и СПИДа иммуносистема у инфицированного организма становится вообще неспособной к синтезу специфических Ат против чужеродных Аг, носителями которых являются не только мутантные формы, образуемые вирусом, но и активирующиеся вирусы или микроорганизмы, рассматриваемые в таком случае как ассоцианты эндогенного и экзогенного происхождения. На пути информационных потоков в цепях "иммунологического процессинга" информации о чужеродных Аг разной природы формируются перекресты и порочные круги в силу повреждения "переводческой функции" хелперных Т-клеток, превратившихся в депо реплицирующегося вируса [11].

Так, инфекция, вызываемая вирусом простого герпеса и часто протекающая как латентная инфекция при нормально функционирующей иммуносистеме, в условиях паралича иммуносистемы при инфекто-СПИДе принимает характер сепсиса со смертельным исходом.

В связи с изложенным эффективное воздействие при МВИ типа ВИЧ-инфекции и СПИДа должно с самого начала проводиться комплексно, т.е. должны быть предприняты меры по нейтрализации и устранению патогенного начала, одновременно должны быть предприняты усилия по восстановлению потенциала иммуносистемы с активацией ее функции.

Рассмотрим подробнее механизм действия возбудителя МВИ на примере ВИЧ-инфекции, допускающий разработку рациональной тактики иммуноспецифических воздействий на ВИЧ-инфицированный организм человека, в частности, для практического использования принципа лиганд (капсид) - рецепторного (CD₄) взаимодействия в связи с использованием нами иммуносорбентов в экстракорпоральной проточно-циркуляторной системе для очищения ВИЧ-инфицированной крови.

В структурном отношении частица ВИЧ при электронной микроскопии выглядит маковым зерном, унизанным макромолекулами вирусного белка, обозначаемого как р160. Этот белок легко распадается на два фрагмента: р120 и р41. Вирусный белок р120 обеспечивает прикрепление частицы ВИЧ к клеточному рецептору-белку Т₄, обозначаемому еще и как CD₄, на мембранной поверхности макрофага, являющегося не только "санитаром" тканей и органов, но и антиген-представляющей клеткой в условиях "иммунологического процессинга". Вирусным белком р120 наделен на своей мембранной поверхности и хелперный Т-лимфоцит, помогающий осуществить иммунный ответ на частицу ВИЧ как Аг, представленный макрофагом (12).

При взаимодействии белков Т₄ и р120 конформация у последнего изменяется таким образом, что образуется своего рода карман, в который стремительно входит участок белка Т₄ с выступающим, подобно "штеккеру", фенильным радикалом из остатка такой аминокислоты, как фенилаланин, в положении 43 и образует контакт первого рода, способствующий механическому соединению клеточного и вирусного белков. При этом клеточный белок Т₄ раздвигает внутренний и наружный фрагменты вирусного белка р120; происходящее при этом изменение конформации у вирусного белка р120 определяет тот сдвиг в пространстве его макромолекулы, в результате которого возрастает расстояние между такими важными участками, обозначаемыми как V₁, V₂ и V₃ с образованием вариабельных петель I, II и III, обеспечивающих образование контакта второго рода со сравнительно недавно открытым рецептором хемокинов, присутствующим на поверхности разных клеток, в том числе и хелперных Т-лимфоцитов и обозначенным как CCR5.

Контакты вирусного белка р41 у ВИЧ с клеточным ССR5-белком у хелперного Т-лимфоцита обеспечивают слияние вирусной и клеточной оболочек как исходное условие для пенетрации генома ВИЧ в цитоплазму клетки. Наличие рецепторов хемокинов CCR5 у клеток в ЦНС объясняет парадокс возможности развития деменции (слабоумия) при СПИДе в условиях преодоления ВИЧ гематоэнцефалического барьера в условиях диапедеза ВИЧ-инфицированных макрофагов из кровеносных сосудов в нервную ткань и в СМЖ и развития нейро-психо-ВИЧ-инфекции с параличом иммуносистемы. При этом Т₄-рецептор на поверхности нейронов не обнаруживается, но обнаруживается на поверхности глиальных клеток, обеспечивающих опору для массы нейронов с их синапсами и влияющих таким образом на нормальную функцию нейронов.

Возникновение мутантов ВИЧ можно объяснить тем, что они могут быть индуцированы с клеточной мембраны ВИЧ-инфицированных клеток лигандным капсидным белком ВИЧ с измененной конформацией под действием связавших его специфических Ат: будучи после этого связан клеточным рецептором при "раздевании" ВИЧ и его пенетрации в клетку-мишень, этот белок, в соответствии с выдвинутой концепцией ОИС при биосинтезе макромолекул [11, 13, 14, 15] перестраивает биосинтез капсидного (вирусного) белка данной клеткой, ставшей хозяином, для сборки вирионов новой генерации так, чтобы синтезируемый капсидный белок обладал той конформацией, которая появилась у прежней молекулы белка ВИЧ под действием связавших его специфических Ат.

Таким образом, Ат, обнаруживаемые при обследовании лиц, инфицированных ВИЧ, имеют скорее только диагностическое значение (в стандартных тестах на СПИД), поскольку эти Ат синтезированы на основании информации относительно лишь тех исходных форм вирионов ВИЧ, которые вызвали заражение ВИЧ-инфекцией, но не против возникающих в последующем популяций этих вирионов, в частности, их мутантных форм [11].

При описанном выше повреждении иммуноинформационных связей на уровне "иммунологического процессинга" информации о чужеродных Аг не приходится сомневаться в том, что ВИЧ-инфицированный организм испытывает определенный дефицит в биосинтезе специфических Ат против потенциальных ассоциантов ВИЧ, вносящих свой вклад в дальнейшее развитие инфекционного процесса, обусловливая, в частности, появление упомянутых выше амплифицированных форм провируса типа ДНК-ВПНП как дополнительный канал для возникновения рецидива в условиях предпринятого лечения ВИЧ-инфекции при использовании существующих способов.

В наших условиях с учетом клинической формы заболевания, особенностей ее проявления по деятельности течения и по степени тяжести процесса, присутствие ВИЧ-вирионов, их мутантов и их ассоциантов в, ВИЧ инфицированном организме устраняли постепенно повторными из цикла в цикл процедурами, назначенными для данного пациента в проводимых курсах лечения с помощью одного из трех вариантов разработанного и апробированного вначале на лабораторных животных (кроликах) и затем уже использованных для лечения пациентов-волонтеров. Варианты эти разнились между собой, будучи основанными: А) На внутривенном введении капельным способом поливакцины, индивидуализированной по изготовлению (для каждого пациента персонально на основе его биоматериала в виде высевов вирусов и микробов из крови, объединенных в единую серию вакцинирующего материала и затем подвергнутых УФ-инактивации) и по применению, адресованному только для данного пациента; способ рассчитан на активацию уцелевшего афферентного звена иммуносистемы, т.е. макрофагов как Аг-представляющих клеток с их предшественниками-моноцитами и хелперных Т-лимфоцитов в организме подвергнутого лечению пациента; пределы применения данного варианта способа лечения расширяются возможностями назначения антисептиков и антибиотиков по показаниям.

Б) На применении экстракорпоральной системы циркуляторно-проточного действия (ЭКСЦПД), к которой подсоединяют пациента с помощью введенных симметрично в подключичные вены игл-катетеров и которая рассчитана на УФ-инактивацию с помощью образующегося атомарного кислорода-окислителя патогенного начала при ВИЧ-инфекции и СПИДе методом УФ-облучения (УФО) кровотока в ЭКСЦПД; способ эффективен при серо-позитивном преСПИДе и ВИЧ-носительстве.

В) На применении ЭКСЦПД иных типов ЭКСЦПД, рассчитанной на иммуноочистку кровотока в ЭКСЦПД методами иммуногемофереза (ИГФ) и иммуногемосорбции (ИГС) попеременно и повторно из цикла в цикл проводимого курсового лечения в условиях аналогичного подсоединения пациента к ЭКСЦПД соответствующего типа; данный вариант способа лечения достаточно универсален благодаря своей эффективности при серо-позитивном преСПИДе и при манифестированном СПИДе, хотя и сравнительно сложен.

Схема цикла (однонедельного при одномесячном курсе лечения) для последовательности лечебных процедур-воздействий, отработанная в опытах с экспериментальной ВИЧ-инфекцией на кроликах и примененная затем к добровольцам ВИЧ инфицированным лицам и больным СПИДом на принципах комплексно-индивидуализированного подхода к лечению при МВИ типа ВИЧ-инфекции и СПИДа исходя из биоинформатики инфекционного процесса и состоит из следующих процедур: 1. Процедура предварительного "провоцирования" провируса накоплению ВИЧ-вирионов РНК-форме и их мутантов в плазме крови в условиях воздействия блокатора репликации ВИЧ - актиномицина Д и тем самым обеспечивающая устранение основных компонентов патогенного начала - вирионов ВИЧ и их мутантов, но нуждающаяся при этом в пресечении последствий возможной амплификации провируса внутривенным применением дезоксирибонуклеазы (ДНКазы, дорназы).

2. Процедура устранения патогенного начала при ВИЧ-инфекции и СПИДе повторно из цикла в цикл (см. выше) (А) методом внутривенного введения капельным способом индивидуализированной по изготовлению и применению для каждого пациента поливакцины для мобилизации эффекторных элементов иммуносистемы против патогенного начала или (Б) методом УФО кровоток в ЭКСЦПД для УФ-инактивации патогенного начала или (В) повтора из цикла в цикл и попеременно методами ИГФ и ИГС для иммуноочистки крови в ЭКСЦПД соответствующего типа (при вариантах Б и В дополнительно в комбинации с обычной гемосорбцией для освобождения жидкой среды организма пациента от вредных метаболитов небелковой природы).

3. Процедура интрастернальной (компенсаторной) трансплантации лейкоцитов и их стволовых предшественников по лейкопоэзу из плацентарно-пуповинной крови для иммунокоррекции с целью восстановления иммуноинформационных связей, восстановления и укрепления нарушенного иммунопотенциала в ВИЧ инфицированном организме.

4. Процедура специфической активации трансплантированных клеток ППК в условиях иммуностимуляции (иммуноактивации) аутовакциной при ее внутримышечном введении против патогенного начала при ВИЧ-инфекции и СПИДа с целью восстановления и усиления нарушенного иммунопотенциала.

По нашему мнению, сущность изобретения состоит в том, что способ комплексно-индивидуализированного воздействия на организм при МВИ с использованием противовирусных препаратов и экстракорпоральных методов, дополнительно содержит биоинформационный подход к названному воздействию, включающему два основных этапа: а) устранение из организма патогенного начала, составляющего заражение, с привлечением противовирусных препаратов и экстракорпоральных иммуносорбентов на основе аллогенного материала, с индивидуальным учетом для организма особенностей репликации патогенного вируса; б) восстановление нарушенных иммуноинформационных связей в организме путем компенсаторной трансплантации морфоэлементов из ППК гетерогенного происхождения с индивидуальным учетом влияния антигенных детерминант трансплантата на тканевую совместимость.

Способ отличается также тем, что - возде