Способ культивирования мукоровых и гифальных грибов

Способ культивирования мукоровых и гифальных грибов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства ¹

Заявлено 10.Х.1966 (№ 1106997/28-13) о присоединением заявки ¹

Приоритет

Or.÷.áëèêoâàHo 01А 11.1968. Бюллетень ¹

Комитет по делам изобретений и открытий при Совете г4инистров

СССР.8,093.1

Дата опубликования описания 30.1.".1968

Авторы изобретения

H. M. Пидопличко, В. И. Билай и 3. 3. Коваль

Заявитель

СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МУКОРОВЬ!Х

И ГИФАЛЬНЫХ ГРИБОВ

Известен способ культивирования гифальных и мукоровых грибов на твердом, предварительно измельченновт парафине в присутствии водной минеральной питательной среды, содержащей источники азота, фосфора, калия и магния, при аэрации среды с последующим отделением выращенных дрожжей от культуральной жидкости.

Для улучшения условий использования парафина в процессе культивирования и интенсификации таким путем процесса по предлагасмому способу измельчение парафина ведут lo порошкообразного состояния, а процесс культивирования осуществляют при высокой температуре, предпочтительно равной 42 — 56 С, обеспечивающей плавление парафина.

Вводить измельченный парафин при глуби".ном культивировании грибов следует двумя порциями, первую из которых вносят во время посева грибов, а вторую спустя два-три дня с начала процесса культивирования.

Предлагаемый способ заключается в следующем.

Готовят питательную среду, например минеральную среду Чапека, следующего состава:

NaNO;, 2 г; КНзРО, 1 г; МАМБО, 7НО 0,5 г;

КС1 0,5 г; Fe (SO<);, 7НзО 10 тгг; дистиллированная вода 1 .г. Эту среду разливают в матрасы или колбы в зависимости от способа выращивания (глубинного или поверхностного) и стерилизуют при 0.5 ат.ть Причем в каждый матрас наливают 300 с.тгз среды, а в колбы (объе:аозт 750 с.тгз) — 500 с.тг среды. рН такой среды 5,2 — -5,5. После стерилизации в колбы или матрасы стерильно добавляют отдельно перетопленный, взвешенный и измсльчегшый до пол åíèÿ порошкообразной массы парафшt. Навсска парафина для каждой колбы 4 г, для каждого матраса 3 г.

Для обсспсчения хорошего роста грибов необходимо обеспечить равномерное распределение парафина в толще питательной среды.

Приготовленную с парафином среду разливают в пробирки, чашки Петри или чашки Коха и производят иглой посев грибов, используя при этом суспензию спор, смываемую основной жидкой стерильной средой из культуры на сусловом агаре.

Посевной материал выращивают в течение

20 двух суток при 45, 52 и 54 С в зависимости or вида культивирусзгых грибов.

Выращенный посевной материал смываюг основной жидкой стерильной средой с одного

25 косяка на пробирке ня один матрас или колбу, или с одной пленки в колбе. Подсчитывают конидии. После получения необходимой густоты содержимое разливают при глубштном спо:обе в ферментаторы или в колбы на качалке, 30 я при поветтхг остноат — в матрасы, 220917

Редактор т. В. Данилова Гскрсд А. А. I(à;, ышников J Корректор С. А, Башлыков:

Закан 2829119 т: а;и ЗЗО 11.одппс:.с

Ц11ИИП11 Комптста 1о дспгм пвоорстс;пк1 II открыт 11 при Совете 1шп,сгров (ССР п1осква, Цс тр, «р. Серова, д. 4

Типографии, вр. Сапунова, 2

При глубинном выращивании посевной материал расходу1от из расчета на 300 — 400 л.? жидкой среды смыв спор из одной пробирки со скошенным агаром. Такое же количество посевного материала расходуют и при ïoâåðõiioстпом способе.

Продолжительность культивирования зависит от принятого способа выращивания, т. е. при поверхностном пять-семь, при глубинпом-се. II b-gcBIITb gH сй.

При поверхностном культивировании парафин лучше вносить вначале, так как образующаяся во время роста грибов пленка очень легко разрушается даже при незначительном движении срсды в матрасе и затем пе восстанавливается.

При глубинном способе выращивания парафин лучше прибавлять двумя порциями: пер,у1о половину необходимого количества — во время посева, а вторую половину — спустя два-три дня.

Ферментация ведется при температурах 45, 52 и 5о С. Многие штаммы грибов на третийпятый день образуют пигменты.

После окончания ферментации полученную биомассу промывают для освобождения от оставшегося парафина петролейным эфиром или же другим растворителем парафина. Для п"",рафинового гача лучше применять метилэтилкетон или метилизобутилкетон.

Культуральную жидкость с выращенным грибом перед фильтрацией центрифугируют.

Поднявшийся на поверхность жидкости парафин отделяют (он не содержит мицелия гриба). При фильтрации мицелий промывают водой, нагретой до 50 — 60 С, и Оставшийся 1сиспользованный парафин, таким образом, переводят в н(идкое состояние, что облегчит отделение его от продуктов фермснтации. Для полного удаления парафина мицелий на фильтре промывают гексаноAI и отфильтровывают через капроновый фильтр.

13 процессе,,-срмсптацни в зависимости от требований, предъявляемых к получаемому продукту, можно регулировать pili который обычно повышается от 5,2 — 5,5 до 6,5 — 7,5.

Для этого применяют КОН, lUaOH или аммиак.

Для ускорения процесса можно использовать стимуляторы — спородрохкжевой автолизат, экстракт липидов и другие широко извсстI.û" вещества.

Для культивирования применяют грибы с высоким температурным оптимумом, вьделенныс по специальной методике из почв и рубца рогатого скота. К пим относятся Aspergillus огукас, Aspergillus fumigatus, Мпсог рц illus, Aspcrgilliis rIige!., Rhizopus orysae, Absidiu

corymbilera, Absi(1ia ramosa, Мпсог hiemalis, Мнзог raccmosus, Мпсог circiiIelloides.

20 Предмет изобретения

1. Способ культивирования мукоровых и гифальпых грибов на твсрдых, предварительно измельченных парафинах, в присутствии вод«ой минеральной питательной среды, содержащей истОчники азота, фосфОря, калия и маг«и я, и при аэрации среды, от.гичсиои1ийся тем, что, с целью улучшения условий использован Isi парафина в процессе культивирования и интенсификации таким образом процесса, измсльчснпс парафинов ведут до порошкообразного состояния, процесс культивирования осуiciecòâëIIioT при высокой температуре, обеспечивающей переход парафина из твердого в жидкое состояние.

2. Способ по п. 1, orяича>ои„ийся тем, что температура культивирования равна 42 — 56 С.

3. Способ по и. 1, or,гичсиои1ийся тем, что, «ри глубинном культивировании грибов измсль CI! Iii-III пара(рин вводят в питательную

40 среду двумя разными порциями: первую во врем I IoccUa грибов, а вторую спустя два-три дня с начала процесса культивирования,