Способ изготовления вакцины против микроспории домашних животных
Реферат
Изобретение относится к области ветеринарной микологии. Способ включает посев культур вакцины штаммов на питательную среду, выращивание, получение гомогената, контроль его на чистоту, концентрацию и жизнеспособность клеток, разведение гомогената до нужной концентрации и получение готовой вакцины. После контроля гомогената на чистоту его помещают в морозильник и хранят при температуре не выше -4oС. Способ позволяет сократить ряд технологических операций и время на изготовление вакцин.
Изобретение относится к области ветеринарной микологии и может быть использовано при изготовлении вакцин против дерматомикозов сельскохозяйственных и домашних животных.
Актуальность изобретения заключается в том, что при изготовлении вакцины используется новая биотехнология, ускоряющая процесс выпуска вакцины в несколько раз, создается такой технологический цикл, который позволяет готовить вакцину многократно в течение года в количествах, необходимых потребителю, избегая каждый раз 60-дневного технологического цикла, сводя его к 1 дню. Известен способ изготовления вакцины против трихофитии КРС - ТФ-130, технологический процесс, который состоит из 7 циклов: подготовка помещения и оборудования (2-3 дня), мойка и стерилизация посуды (3 дня), приготовление питательной среды (6 дней), приготовление матричной культуры (20-25 дней), выращивание культуры (18 дней), съем и гомогенизация грибной массы и цеховой контроль грибной суспензии (15 дней), после чего гомогенат разводят физиологическим раствором до рабочей концентрации вакцины, фасуют по 200 мл во флаконы и закатывают алюминиевыми колпачками. Цикл составляет 60-64 дня. Срок хранения 3 месяца (1). Известен также способ изготовления вакцины МИККАНИС против микроспории кошек и других восприимчивых животных, состоящий из 6 циклов: подготовка помещения и оборудования (2-3 дня), приготовление питательной среды (6 дней), выращивание культуры (20-25 дней) проводят на сусло-агаре, съем, гомогенизация и контроль качества грибной суспензии (качество гомогената проверяют путем высева его на МПБ и МПА). Гомогенат разводят 2-3% раствором NаСl, добавляют 1-2 мл геля гидроокиси алюминия на 100 г разведенной солевым раствором вакцины и фасуют по 2 мл в ампулы и запаивают. Срок хранения 1 год. Цикл 35-40 дней (2). В задачу наших исследований входило разработать способ получения вакцин против микроспории животного, создать такой технологический цикл, который позволяет готовить вакцину многократно в течение года в необходимых количествах, необходимых потребителю, избегая каждый раз длительного технологического цикла, сводя его к 1 дню. Это удалось нам достичь благодаря тому, что при изготовлении вакцины после посева гомогената на чистоту его разливают по 15-20 мл во флаконы и помещают в морозильную камеру холодильника при температуре не выше -4oC и используют в течение длительного времени (1 год - срок наблюдения). Предложенный способ изготовления заключается в следующем. Вариант 1. Для изготовления вакцины против микроспории животных на 6 тыс. доз выращивают культуру Microsp. canis 473 на сусло-агаре, производят съем и гомогенизацию грибной массы (приготовление гомогената, проверка, качества его путем высева на МПБ и МПА), разливают по 15-20 мл во флаконы и замораживают при температуре -4oС. По мере необходимости достают флакон замороженного гомогената, разводят 2-3% раствором поваренной соли до 300 мл на 1 флакон размороженного гомогената, добавляют 1 мл геля на 100 мл разведенного гомогената до концентрации рабочего разведения вакцины, что составляет 15 мл гомогената +300 мл солевого раствора и 3 мл геля гидроокиси алюминия. Полученную суспензию разливают по 2 мл в 5 мл ампулы и запаивают. Полученную вакцину применили с положительным эффектом на 173 кошках и котятах и 83-х собаках с эффективностью 97,8% в 1999 году. Вариант 2. Для изготовления вакцины против микроспории животных из расчета на 50 тыс. доз выращивают культуру M. canis 473 на сусло-агаре, производят съем и гомогенизацию грибной массы (приготовление гомогената, контроль качества его проверяют путем высева на МПБ и МПА), разливают по 15-20 мл (получается 150-200 флаконов с гомогенатом), содержащих 50 тыс. доз. Замораживание проводят аналогично примеру 1, но при температуре минус 6 градусов. По мере необходимости гомогенат флакона разводят, как указано выше (аналогично варианту 1). Вариант 3. Из приготовленного гомогената, как в 1 и 2 вариантах, исследовали жизнеспособность иммуногенных клеток - микроконидий через: - сразу после приготовления гомогената: активных, способных к прорастанию живых клеток - 83-90%; - замораживание проводят аналогично примеру 1, но при температуре минус 8oС; - после замораживания на второй день: активных, способных к прорастанию живых клеток - 80-90%; - после замораживания через 3 месяца хранения в замороженном состоянии: 80-90%; - после замораживания через 6 месяцев - 80-85%; - через 12 месяцев после замораживания гомогената - 75-85%. Жизнеспособность иммуногенных клеток проверяют путем высева на предметные стекла с полужидким агаром во влажных камерах и просматривают под микроскопом через 2-3 дня после высева. Вакцина, изготовленная предложенным способом, при заморозке гомогената при (-4)-(-8)oС обеспечивает сохранение в количестве 75-85% жизнеспособных микроконидий, что дает напряженный иммунитет у животных. Предложенный способ чрезвычайно экономичный, позволяющий значительно ускорять технологические циклы (прототип 60 рабочих дней на приготовление гомогената за цикл) и тем самым удешевлять себестоимость вакцины. Предложенный способ найдет применение в биофабричном, опытно-промышленном, особенно в опытном (лабораторном) изготовлении вакцины, когда количественная потребность невелика (10-100 доз) при небольших партиях изготовления. Источники информации 1. A.C. СССР 268593, кл. C 12 K 5/00, 1970. 2. Патент 2084241, РФ, кл. 161 K 39/00, 1997.Формула изобретения
Способ изготовления вакцины против микроспории домашних животных, включающий посев культур вакцинных штаммов на питательную среду, выращивание, получение гомогената, контроль качества гомогената на чистоту, определение концентрации жизнеспособных клеток и разведение гомогената, отличающийся тем, что после контроля гомогената на чистоту его помещают в морозильник и хранят при температуре не выше -4oС.MM4A Досрочное прекращение действия патента из-за неуплаты в установленный срок пошлины заподдержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 06.06.2011
Дата публикации: 27.03.2012