Способ и композиция для лечения боли

Способ и композиция для лечения боли

Реферат

 

Изобретение относится к медицине, к терапии, и может быть использовано для лечения боли. Вводят уменьшающее боль эффективное количество любого соединения в соответствии со структурной формулой I и в соответствии с указанными фармацевтическими композициями. Данное изобретение способствует эффективному купированию боли, в том числе и невропатического генеза. 2 н. и 4 з.п.ф-лы, 1 табл.

Область изобретения

Настоящее изобретение относится к лечению или предупреждению боли или ноцицепции.

Уровень техники

Боль представляет собой сенсорное ощущение, отличное от восприятий прикосновения, давления, тепла и холода. Она часто описывается пострадавшими такими терминами как яркая, тупая, ноющая, колющая, режущая или обжигающая и, как обычно считают, включает в себя как первоначальное восприятие, так и реакцию на это восприятие. Этот диапазон восприятий, а также изменчивость в восприятии боли различными индивидуумами затрудняет точное определение боли, однако многие индивидуумы страдают от сильной и постоянной боли.

Боль, которая вызвана повреждением нервных структур, часто проявляется как нервная сверхчувствительность или гипералгезия и ее называют “невропатическая” боль. Боль также может быть “вызвана” стимуляцией ноцицептивных рецепторов и может передаваться через интактные нервные пути, причем такую боль называют “ноцицептивной” болью.

Уровень стимуляции, при котором боль становится заметна, называется “порог болевой чувствительности”. Аналгетики представляют собой фармацевтические агенты, которые облегчают боль путем повышения порога болевой чувствительности без потери сознания. После введения аналгезирующего лекарства для ощущения боли требуется стимул большей интенсивности или более длинной продолжительности. У индивидуума, страдающего от гипералгезии, аналгезирующее лекарство может оказывать антигипералгезирующий эффект. В отличие от аналгетиков агенты, такие как местные анестетики, блокируют передачу в периферических нервных волокнах, таким образом блокируя осознание боли. Анестетики общего действия, с другой стороны, уменьшают осознание боли путем потери сознания.

Сообщалось, что антагонисты тахикинина индуцируют антиноцицепцию у животных, которая, как считается, является аналогичной аналгезии у человека (Maggi et al, J. Auton. Pharmacol. (1993) 13, 23-93). В частности, было показано, что непептидные антагонисты NK-1 рецептора обеспечивают такую аналгезию. Например, антагонист NK-1 рецептора RP 67,580 обеспечивает аналгезию, эффективность которой сравнима с эффективностью морфина (Garret et al, Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1993) 88, 10208-10212).

Опиоидные аналгетики представляют собой прочно установившийся класс аналгезирующих агентов с морфиноподобным действием. Синтетические и полусинтетические опиоидные аналгетики представляют собой производные пяти химических классов соединений: фенантренов, фенилгептиламинов, фенилпиперидинов, морфинанов и бензоморфанов. Фармакологически эти соединения имеют различные активности, таким образом, некоторые являются сильными агонистами опиоидных рецепторов (например, морфин), другие представляют собой от умеренных до мягких агонистов (например, кодеин), еще одни проявляют смешанную активность агониста-антагониста (например, налбуфин), и еще одни являются частичными агонистами (например, налорфин). Несмотря на то, что опиоидный частичный агонист, такой как налорфин (N-алкильный аналог морфина), будет антагонизировать аналгезирующие эффекты морфина, при приеме отдельно он может быть сильнодействующим аналгетиком сам по себе.

Из всех опиоидных аналгетиков морфин остается наиболее широко используемым, но в дополнение к его терапевтическим свойствам он имеет и ряд недостатков, включая угнетение дыхания, пониженную моторику желудочно-кишечного тракта (приводящую к запору), тошноту и рвоту. Переносимость и физическая зависимость также ограничивают клинические применения опиоидных соединений.

Аспирин и другие салицилатные соединения часто используют в лечении для прерывания усиления воспалительного процесса при ревматоидных заболеваниях и артрите и временного облегчения боли. Другие лекарственные соединения, используемые для этих целей, включают в себя производные фенилпропионовой кислоты, такие как Ибупрофен и Напроксен, Сулиндак, фенилбутазон, кортикостероиды, противомалярийные средства, такие как хлорохин и гидроксихлорохина сульфат, и фенематы (J.Hosp.Pharm., 36:622 (May, 1979)). Однако эти соединения неэффективны при невропатической боли.

Доступные терапии боли также имеют недостатки. Некоторые терапевтические агенты требуют пролонгированного применения, перед тем как пациент ощутит эффект. Другие существующие лекарства вызывают серьезные побочные эффекты у некоторых пациентов, и за субъектами нужно внимательно следить, чтобы гарантировать, что какие-либо побочные эффекты не являются чрезмерно угрожающими. Большинство существующих лекарств дают только временное облегчение боли и должны приниматься последовательно на суточной или недельной основе. С развитием заболевания количество лекарственного средства, необходимого для облегчения боли, часто увеличивается, таким образом увеличивая возможность вредных побочных эффектов.

Рецепторы NMDA определяют путем связывания N-метил-D-аспартат (NMDA) содержащего комплекса рецептора/ионного канала с несколькими различными идентифицированными доменами связывания. NMDA сам по себе представляет собой молекулу, структурно сходную с глутаматом (Glu), которая связывается на глутамат-связывающем сайте и является высокоселективной и сильнодействующей в активации рецептора NMDA (Watkins (1987); Olney (1989)).

Известны многие соединения, которые связываются на NMDA/Glu связывающем сайте (например, СРР, DCPP-ene, CGP 40116, CGP 37849, CGS 19755, NPC 12626, NPC 17742, D-AP5, D-AP7, CGP 39551, CGP-43487, MDL-100,452, LY-274614, LY-233536 и LY-233053). Другие соединения, которые называют неконкурентными антагонистами NMDA, связываются на других сайтах в NMDA рецепторном комплексе (примерами являются фенциклидин, дизоцилпин, кетамин, тилетамин, CNS 1102, декстрометорфан, мемантин, кинуреновая кислота, CNQX, DNQX, 6,7-DCQX, 6,7-DCHQC, R(+)-HA-966, 7-хлор-кинуреновая кислота, 5,7-DCKA, 5-иод-7-хлор-кинуреновая кислота, MDL-28,469, MDL-100,748, MDL-29,951, L-689,560, L-687,414, ACPC, ACPCM, ACPCE, аркаин, диэтилентриамин, 1,10-диаминодекан, 1,12-диаминододекан, ифенпродил и SL-82.0715). Эти соединения подробно рассмотрены Rogawski (1992) и Massieu et al., (1993) и в статьях, перечисленных там.

В дополнение к его физиологической функции глутамат (Glu) может быть нейротоксичным. Нейротоксичность Glu называют “эксайтотоксичностью”, поскольку нейротоксическое действие Glu, подобно его полезным свойствам, опосредовано процессом возбуждения (Olney (1990); Choi (1992)). В норме, когда Glu высвобождается у синаптического рецептора, он связывается только временно, а затем быстро удаляется от рецептора с помощью процесса, который транспортирует его обратно в клетку. В некоторых аномальных условиях, включая удар, эпилепсию и травму ЦНС, захвата Glu не происходит, и Glu накапливается около рецептора, приводя к устойчивому возбуждению электрохимической активности, что приводит к гибели нейронов, которые имеют рецепторы Glu. Многие нейроны в ЦНС имеют рецепторы Glu, таким образом эксайтотоксичность может вызывать огромное количество повреждений ЦНС.

Острое эксайтотоксическое повреждение может происходить как результат ишемических событий, гипоксических событий, травмы головного или спинного мозга, некоторых типов пищевого отравления, в которое вовлечен эксайтотоксический яд, такой как домоевая кислота, и опосредованной припадком нейрональной дегенерации, которая может являться результатом устойчивой эпилептической активности (эпилептический статус). Большое количество доказательств указывает на рецептор NMDA как на один из подтипов рецепторов, через которые Glu опосредует существенное количество повреждений ЦНС, и хорошо установлено, что антагонисты NMDA эффективны в защите нейронов ЦНС от эксайтотоксической дегенерации при этих синдромах острого повреждения ЦНС (Choi (1988); Olney (1990)).

В дополнение к нейрональному повреждению, вызванному острыми инсультами, избыточная активация рецепторов Glu может также вносить вклад в постепенно развивающиеся нейродегенеративные процессы, приводящие к гибели клеток при различных хронических нейродегенеративных заболеваниях, включая болезнь Альцгеймера, боковой амиотрофический склероз, деменцию, связанную со СПИДом, болезнь Паркинсона и болезнь Хантигтона (Olney (1990)). Обычно считают, что антагонисты NMDA могут быть полезны при терапевтическом лечении таких хронических заболеваний.

В 1980-е гг. обнаружили, что РСР (фенциклидин) (также известный как “ангельская пыль”) действует как “сайт распознавания РСР” в ионном канале NMDA Glu рецептора. РСР действует как неконкурентный антагонист, который блокирует поток ионов через ионный канал NMDA. Совсем недавно стало очевидно, что лекарства, которые действуют на РСР сайт в качестве неконкуретных антагонистов NMDA, вероятно, обладают психотомиметическими побочными эффектами. Более того, в настоящее время известно, что некоторые конкурентные и неконкуретные антагонисты NMDA могут вызывать подобные патоморфологические эффекты в головном мозге крыс (Olney et al., (1991); Hargreaves et al., (1993)). Такие соединения также обладают психотомиметическими эффектами у людей (Kristensen et al., (1992); Herreng (1994); Grotta (1994)).

Сайт связывания глицина NMDA рецепторного комплекса отличается от сайтов связывания Glu и РСР. Также недавно было обнаружено, что NMDA рецепторы существуют в качестве нескольких подтипов, которые характеризуются различными свойствами глицинсвязывающего сайта рецептора. Многие соединения, которые связываются на сайте глицина NMDA рецептора, полезные для лечения удара и нейродегенеративных состояний, описаны в патентах США 5604227, 5733910, 5599814, 5593133, 5744471, 5837705 и 6103721.

Сущность изобретения

В настоящее время обнаружено, что некоторые соединения, которые проявляют свойство связывания с сайтом глицина NMDA рецептора, полезны для уменьшения боли и особенно для уменьшения невропатической боли.

Следовательно, в данном изобретении предложен способ лечения боли, при котором вводят уменьшающее боль эффективное количество любого соединения в соответствии со структурной формулой I:

где А представляет собой (СН₂)_n, где n имеет значение, выбранное из 0,1, 2, 3 или 4;

D выбран из 5- или 6-членной гетероарильной группировки или ее бензпроизводного, имеющих 1, 2 или 3 кольцевых атома, выбранных из кислорода, азота или серы; а

R₁ представляет собой галогено.

В конкретных воплощениях изобретения данный способ включает в себя введение уменьшающих боль эффективных количеств соединения в соответствии со структурной формулой I, где D выбран из пиридила, хинолила, пиразинила, пирадизинила, фуранила, бенз[b]фуранила, имидазолила, оксазолила, тиенила, бенз[b]тиенила и тиазолила.

В более конкретных воплощениях изобретения данный способ включает в себя введение уменьшающего боль эффективного количества соединения в соответствии со структурной формулой II, где

Еще более конкретные воплощения изобретения представляют собой такие, где данный способ включает в себя лечение соединением в соответствии со структурной формулой II, и D выбран из пиридила, хинолила, пиразинила, пирадизинила, фуранила, бенз[b]фуранила, имидазолила, оксазолила, тиенила, бенз[b]тиенила и тиазолила.

Еще более конкретные воплощения изобретения представляют собой такие, где данный способ включает в себя лечение примерным соединением, специально описанным здесь.

Другие аспекты изобретения представляют собой фармацевтические композиции, которые содержат соединение в соответствии со структурной формулой I; применение соединений в соответствии со структурной формулой I для изготовления лекарственных средств и фармацевтических композиций и способ, при котором соединения по изобретению связываются с сайтом глицина NMDA рецептора теплокровного животного, такого как человек, так, чтобы полезным образом ингибировать активность NMDA рецептора.

Подробное описание изобретения

Соединения по изобретению представляют собой те, которые находятся в пределах объема родового описания, и особенно те соединения, которые приведены в примерах ниже.

Подходящие фармацевтически приемлемые соли соединений по изобретению включают в себя соли присоединения кислоты, такие как метансульфонат, фумарат, гидрохлорид, гидробромид, цитрат, трис(гидроксиметил)аминометан, малеат, и соли, образованные с фосфорной и серной кислотами. В других воплощениях подходящие соли представляют собой основные соли, такие как соли щелочных металлов, например натрия, соли щелочно-земельных металлов, например кальция или магния, соли органических аминов, например триэтиламина, морфолина, N-метилпиперидина, N-этилпиперидина, прокаина, дибензиламина, холина, N,N-дибензилэтиламина, или аминокислот, таких как лизин.

Еще один аспект изобретения представляет собой способ получения соединений по изобретению, причем этот способ включает в себя следующие стадии:

а) получение Вос-защищенного гидразина в соответствии с одной из процедур, показанных на следующей схеме:

б) связывание указанного Вос-защищенного гидразина и циклизация продукта в соответствии со способом следующей схемы с образованием соединения в соответствии со структурной формулой I:

где CMC представляет собой 1-циклогексил-3-(2-морфолиноэтил)карбодиимида мето-р-толуолсульфонат;

“R/H/D” группа представляет собой “-A-D” группировку структурной схемы I;

и в вышеупомянутом способе:

R₁ такой, как определено для структурной формулы I.

Для применения соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли для терапевтического лечения, которое может включать в себя профилактическое лечение, боли у млекопитающих, которые могут являться людьми, соединение может быть изготовлено в соответствии со стандартной фармацевтической практикой, в виде фармацевтической композиции.

Подходящие фармацевтические композиции, которые содержат соединение по изобретению, можно вводить обычными путями, например путем перорального, местного, парентерального, трансбуккального, назального, вагинального или ректального введения или путем ингаляции. Для этих целей соединение по изобретению может быть изготовлено в форме, например, таблеток, капсул, водных или масляных растворов, суспензий, эмульсий, кремов, мазей, гелей, назальных спреев, суппозиториев, тонко измельченных порошков или аэрозолей для ингаляции и стерильных водных или масляных растворов или суспензий или стерильных эмульсий для парентерального применения (включая внутривенное, внутримышечное или инфузию) способами, известными в данной области техники. Предпочтительным путем введения является пероральный путь с помощью таблетки или капсулы.

Кроме соединения по настоящему изобретению фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может также содержать один или более чем один другой фармакологически активный агент, либо такая фармацевтическая композиция может быть одновременно или последовательно введена совместно с одним или более чем одним другим фармакологически активным агентом.

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению должны быть в норме введены так, чтобы субъект получал уменьшающую боль эффективную суточную дозу. Суточная доза может быть дана в разделенных дозах, как необходимо, при этом точное количество получаемого соединения и путь введения зависят от массы, возраста и пола пациента, которого лечат, и от конкретного заболевания, которое лечат, в соответствии с правилами, известными в данной области техники. Предпочтительный режим дозирования составляет один раз в сутки.

В дополнительном воплощении изобретения предложена фармацевтическая композиция, которая содержит соединение структурной формулы I, как определено здесь, или его фармацевтически приемлемую соль вместе с фармацевтически приемлемой добавкой, такой как эксципиент или носитель.

В еще одном воплощении изобретения предложено применение соединения структурной формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, в производстве лекарственного средства, полезного для связывания с сайтом глицина NMDA рецептора у теплокровного животного, такого как человек.

В еще одном воплощении изобретения предложен способ связывания соединения по изобретению с сайтом глицина NMDA рецептора теплокровного животного, такого как человек, нуждающегося в лечении боли, при котором указанному животному вводят эффективное количество соединения структурной формулы 1 или его фармацевтически приемлемой соли.

Определения:

Когда используется здесь, термин “алкил” включает в себя алкильные группы как с прямой, так и с разветвленной цепью, но ссылки на конкретные алкильные группы, такие как “пропил”, относятся к группировке с прямой цепью.

Когда используется здесь, термин “галогено” обозначает фторо, хлоро, бромо и йодо.

Когда используется здесь, термин “арил” обозначает ненасыщенное углеродное кольцо или его бензпроизводное. Конкретно арил обозначает фенил, нафтил или бифенил. Более конкретно арил обозначает фенил.

Когда используется здесь, термин “гетероарил” или “гетероарильное кольцо” обозначает, если не указано иначе, моноциклическое, бициклическое или трициклическое 5-14-членное кольцо, которое является ненасыщенным или частично насыщенным, с кольцевыми гетероатомами в количестве вплоть до пяти, выбранными из азота, кислорода и серы, причем -СН₂- группа, возможно, может быть заменена -С(O)-, а кольцевой атом азота может быть, возможно, окислен с образованием N-оксида. Примеры таких гетероарилов включают в себя тиенил, фурил, пиранил, пирролил, имидазолил, пиразолил, тиазолил, оксазолил, изоксазолил, пиридил, пиридил-N-оксид, оксопиридил, оксохинолил, пиримидинил, пиразинил, оксопиразинил, пиридазинил, индолинил, бензофуранил, бензимидазолил, бензотиазолил, хинолил, изохинолинил, хиназолинил, ксантенил, хиноксалинил, индазолил, бензофуранил и циннолинолил.

Когда используется здесь, термин “гетероциклил” или “гетероциклическое кольцо” обозначает, если не указано иначе, моно- или бициклическое- 5-14-членное кольцо, которое является полностью насыщенным, с кольцевыми гетероатомами, в количестве вплоть до пяти, выбранными из азота, кислорода и серы, причем -CH₂- группа, возможно, может быть заменена -С(O)-. Примеры таких гетероциклилов включают в себя морфолинил, пирролидинил, имидазолидинил, пиразолидинил, пиперидинил, пиперазинил, гомопиперидинил, гомопиперазинил и хинуклидинил.

Когда используется здесь, если возможные заместители выбраны из “одной или более чем одной” группы, следует понимать, что это определение включает в себя соединения, где все заместители выбраны из одной из указанных групп, и соединения, где заместители выбраны из более чем одной из указанных групп.

Обычно в способах, процессах и примерах, описанных здесь:

концентрирования осуществляли путем выпаривания с помощью роторного испарителя in vacuo;

операции осуществляли при температуре окружающей среды, то есть в диапазоне 18-26 С, и в атмосфере азота;

колоночную хроматографию (с помощью флэш-процедуры) осуществляли на кремнеземе Merck Kieselgel (Art. 9385), если не указано иначе;

выходы приведены только для иллюстрации и не обязательно являются максимально достижимыми;

структуру конечных продуктов формулы I обычно подтверждали с помощью ЯМР и масс-спектральных методик, спектры протонного магнитного резонанса определяли в DMSO-d₆, если не указано иначе, с использованием спектрометра Varian Gemini 2000, работающего при напряженности поля 300 МГц; химические сдвиги приведены в частях на миллион по отношению к тетраметилсилану в качестве внутреннего стандарта ( шкала), и пиковые мультиплетности показаны таким образом: s, синглет; bs, широкий синглет; d, дублет; АВ или dd, дублет дублетов; t, триплет, dt, дублет триплетов; m, мультиплет; bm, широкий мультиплет; масс-спектральные данные бомбардировки быстрыми атомами (FAB) получали, используя спектрометр Platform (снабженный Micromass), работающий в электроспрее, и, как подходит, собирали данные либо положительных ионов, либо отрицательных ионов, в данной заявке приведены (М+Н)⁺; данные ИК получали с помощью Nicolet Avatar 360 FT-IR;

промежуточные соединения обычно полностью не охарактеризовывали, и чистоту обычно оценивали масс-спектральным (МС) или ЯМР анализом.

Использовали следующие обозначения и определения, имеющие следующие значения:

CDCl₃ обозначает дейтерированный хлороформ;

CMC обозначает 1-циклогексил-3-(2-морфолиноэтил)карбодиимида мето-р-толуолсульфонат;

DCM обозначает дихлорметан

DCU обозначает дициклогексилмочевину;

DHC обозначает 1,3-дициклогексилкарбодиимид;

DMAP обозначает 4-(диметиламино)пиридин;

DMF обозначает N,N-диметилформамид

DMSO обозначает диметилсульфоксид

м/с обозначает масс-спектроскопию

NMP обозначает N-метилпирролидинон

ЯМР обозначает ядерный магнитный резонанс

р.о. обозначает per os (перорально)

THF обозначает тетрагидрофуран

t.i.d. обозначает три раза в сутки

Примеры и тесты, описанные здесь, предназначены для иллюстрации, но не для ограничения изобретения.

Примеры:

Пример 1:

7-Хлор-4-гидрокси-2-(4-пиридилметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-дионаметансульфонат (трет-Бутокси)-N-[(4-пиридилметил)амино]карбоксамид

К перемешиваемому раствору тpeт-бутилкарбазата (174 г, 1,36 моль) и безводного DMF (400 мл) в атмосфере азота добавляли триэтиламин (108 мл, 0,78 моль) с последующим добавлением 4-пиколилхлорида гидрохлорида (40,0 г, 0,243 моль). Реакционную смесь затем нагревали при 75 С в течение 5 ч и давали охладиться до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляли водой (2 л), и полученную смесь экстрагировали этилацетатом (4 500 мл). Объединенные этилацетатные экстракты концентрировали при пониженном давлении, и остаток растворяли в диэтиловом эфире (1 л). Полученный раствор промывали последовательно водой (3 400 мл) и солевым раствором (400 мл), а затем сушили над Na₂SO₄. Nа₂SO₄ отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением янтарного масла (130,4 г). Этот продукт очищали с помощью флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гексан:этилацетат (1:1) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде твердой кремовой пены (24,46 г, 45%). ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): 1.36 (s, 9H), 3.90 (d, 2H, J=4,0 Гц), 5.04 (d, 1H, J=4,0 Гц), 7.34 (d, 1 H, J=4,5 Гц), 8.48 (d, 1 H, J=4,5 Гц).

Диметил-7-хлор-4-гидроксихинолин-2,3-дикарбоксилат

Перемешиваемую смесь метил-2-амино-4-хлорбензоата (2,50 г, 13,5 ммоль) и диметилацетилендикарбоксилата (2,05 г, 14,4 ммоль) в трет-бутаноле (22 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 7 ч в атмосфере азота. После добавления дополнительного количества диметилацетилендикарбоксилата (1,16 г, 8,13 ммоль) и кипячения с обратным холодильником в течение еще 2,5 ч реакционной смеси давали охладиться до комнатной температуры и добавляли одной порцией mpem-бутоксид калия (1,56 г, 13,9 ммоль). Образовывался осадок и полученную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1,5 ч. Данную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали для отделения твердых веществ, которые промывали mpem-бутанолом и диэтиловым эфиром. Твердые вещества растворяли в воде и подкисляли 1 н. серной кислотой для образования осадка. Полученную смесь экстрагировали DCM, и объединенные экстракты промывали солевым раствором и водой, сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали с получением зеленого твердого вещества. Перекристаллизация этого материала из метанола давала соединение, указанное в заголовке (1,15 г, 47%), в виде твердого кремового вещества, т.пл.232-233 С; МС (Сl):296 (М+Н). Анализ для C₁₃H₁₀ClNO₅: вычислено: С, 52,81; Н, 3,41; N, 4,74; найдено: С, 52,75; Н, 3,47; N, 4,69.

3-Карбометокси-7-хлор-4-гидроксихинолин-2-карбоновая кислота

К перемешиваемой суспензии диметил-7-хлор-4-гидроксихинолин-2,3-дикарбоксилата (1,0 г, 3,38 ммоль) в воде (20 мл) добавляли водный раствор гидроксида натрия (0,27 г, 6,75 ммоль). При добавлении суспензия растворялась. Реакционную смесь нагревали до 60 С в течение 1 ч. После этого времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и подкисляли концентрированной соляной кислотой. Продукт затем экстрагировали в диэтиловый эфир и этилацетат. Органические экстракты сушили над МgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке, в виде твердого вещества (900 мг). Этот материал очищали с помощью перекристаллизации, используя систему растворителей этилацетат/гексан, с получением соединения, указанного в заголовке (571 мг, 60%), в виде белого твердого вещества, т.пл.296 С (разлагается). МС (Cl)=238 (М+Н). Анализ для С₁₂Н₈NO₅Сl 0,45 СН₃СO₂СН₂СН₃ 0,10 Н₂O: вычислено: С, 51,30; Н, 3,68; N, 4,34; найдено: С, 51,28; Н, 3,62; N, 3,97. ¹H-ЯМР 8.22 (d, J=8,7 Гц, 1Н), 7.92 (d, J=1,8 Гц, 1H), 7.28 (dd, J=8,7; 1,8 Гц, 1Н), 3.90 (s, 3Н).

3-Карбометокси-2-пирролидинокарбамид-7-хлор-4-гидроксихиноли

К суспензии 3-карбометокси-7-хлор-4-гидроксихинолин-2-карбоновой кислоты (2,25 г, 8,0 ммоль) в THF (20 мл) при температуре окружающей среды в атмосфере азота добавляли DHC (1,65 г, 8,0 ммоль) и пирролидин (0,596 г, 8,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 ч, после этого времени побочный продукт - мочевину - удаляли фильтрованием. Желаемый продукт очищали с помощью флэш-хроматографии на колонке, используя 5% метанол в хлороформе, с получением соединения, указанного в заголовке (2,52 г, 94,3%), в виде твердого вещества рыжевато-коричневого цвета, т.пл.=215 С; МС (Cl): 335 (М+Н), 300 МГц ¹Н-ЯМР (DMSO-d₆): 8.12 (d, J=8,7 Гц, 1H), 7.60 (d, 1H, J=1,8 Гц), 7,47 (dd, 1H, J=8,8; 2,0 Гц), 3,69 (s, 3Н), 3,40-3,49 (m, 2Н), 3.27-3,33 (m, 2H), 1,80-1,96 (m, 4H).

7-Хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)гидрохинолин-3-карбоновая кислота

К суспензии 3-карбометокси-2-пирролидинокарбамид-7-хлор-4-гидроксихинолина (2,52 г, 7,5 ммоль) в деионизированной воде (40 мл) добавляли по каплям раствор (20 мл) водного гидроксида калия (882 мг, 15,75 ммоль). При завершении добавления реакционную смесь нагревали до 60 С. Через 3 ч реакционную смесь фильтровали для удаления небольшого количества нерастворимого материала. Фильтрат затем подкисляли до рН 1, при этом образовался белый осадок. Твердое вещество выделяли путем фильтрования под вакуумом, промывали водой и сушили при 30 С в вакууме в течение 16 ч. При этом получали соединение, указанное в заголовке (1,5 г, 64%), в виде белого твердого вещества, т.пл.=225-8 С; МС (Сl): 321 (М+Н). 300 МГц ¹H-ЯМР (DMSO-d₆): 8.28 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7.77 (s, 1Н), 7,64 (d, 1H, J=8,7), 3,52-3,57 (m, 2H), 3,17-3,19 (m, 2H), 1,83-1,98 (m, 4H).

N-[(трет-бутокси)карбониламино][7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)1-N-(4-пиридилметил)карбоксамид

К перемешиваемой смеси 7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)гидрохинолин-3-карбоновой кислоты (24,29 г, 75,73 ммоль) и безводного THF (1175 мл) в атмосфере азота добавляли CMC (50,55 г, 119,34 ммоль) порциями (35 г, затем 15,55 г через 10 мин). После перемешивания реакционной смеси в течение дополнительных 20 мин быстро добавляли раствор (трет-бутокси)-N-[(4-пиридилметил)амино]карбоксамида (22,0 г, 98,5 ммоль) и THF (580 мл), и данную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали, и осадок на фильтре промывали DCM (300 мл). Фильтрат и промывные воды объединяли и добавляли дополнительное количество DCM (800 мл). Полученный раствор промывали водой (2 500 мл) и затем сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 28,90 г желтой пены. Эту пену обрабатывали диэтиловым эфиром (800 мл) и полученную смесь перемешивали и затем фильтровали. Осадок на фильтре сушили при 45 С в вакууме с получением желаемого соединения (24,3 г, 61%) в виде желтого порошка.

7-Хлор-4-гидрокси-2-(4-пиридилметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-диона метансульфонат

К перемешиваемой смеси N-[(трет-бутокси)карбониламино][7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)]-N-(4-пиридилметил)карбоксамида (24,0 г, 45,62 ммоль) и безводного THF (960 мл) в атмосфере азота добавляли метансульфоновую кислоту (120 мл, 177,7 г, 1,85 моль) всю сразу. Смесь перемешивали в течение ночи, а затем фильтровали для отделения твердых веществ. Собранные твердые вещества последовательно промывали THF (2 100 мл), метанолом (2 50 мл) и диэтиловым эфиром (100 мл). Осадок на фильтре (13,4 г) затем суспендировали в метаноле (250 мл), и полученную смесь обрабатывали ультразвуком в течение 20 минут, а затем фильтровали. Собранные твердые вещества промывали метанолом (2 100 мл) и диэтиловым эфиром (100 мл), а затем сушили при 45 С в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке (12,1 г, 59%), в виде желтого порошка, т.пл.>250 С. ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): 2.32 (s, 3H), 5.36 (s, 2H), 7,49 (dd, 1H, J=8,1 Гц; J=2,1 Гц), 7,86 (d, 1H, J=6,6 Гц), 8,06 (d, 1H, J=2,1 Гц), 8,12 (d, 1H, J=8,1 Гц), 8,82 (d, 1H, J=6,6 Гц), 12,6 (br s, 1H), 12,84 (br s, 1H). Вычислено для С₁₇Н₁₁СlN₄O₃ СН₃SО₃Н 0,8Н₂O: С, 46,47; Н, 3,60; N, 12,04; найдено: С, 46,39; Н, 3,65; N,11,98.

Пример 2: 7-Хлор-4-гидрокси-2-(3-пиридилметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-диона метансульфонат (трет-Бутокси)-N-[(3-пиридилметил)амино]карбоксамид

К перемешиваемому раствору mpem-бутилкарбазата (203,6 г, 1,54 моль) и безводного DMF (300 мл) в атмосфере азота добавляли триэтиламин (128 мл, 0,92 моль), а затем 3-пиколилхлорида гидрохлорид (50,0 г, 0,30 моль) в виде суспензии в DMF (300 мл). Реакционную смесь нагревали при 75 С в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой (2,4 л). Полученную смесь экстрагировали диэтиловым эфиром (3 800 мл). Водный слой насыщали солью и экстрагировали диэтиловым эфиром (3 800 мл). Объединенные экстракты промывали водой (1 1 л), солевым раствором (1 1 л), а затем сушили над Na₂SO₄ Na₂SO₄ отфильтровывали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Продукт очищали с помощью флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя диэтиловым эфиром, с получением соединения, указанного в заголовке, в виде твердого кремового вещества (23,3 г, 34%). ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): 1.36 (s, 9H), 3.88 (d, 2H, J=4,0 Гц), 4,96 (d, 1H, J=4,0 Гц), 7,33 (dd, 1H, J=7,7 Гц, J=4,8 Гц), 7,71 (d, 1H, J=7,7 Гц), 7,44 (d, 1H, J=4,7 Гц), 8,49 (s, 1H).

N-[(трет-Бутокси)карбониламино][7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)]-N-(3-пиридилметил)карбоксамид

К перемешиваемой смеси 7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)гидрохинолин-3-карбоновой кислоты, Пример 1, (20 г, 62,4 ммоль) и THF (800 мл) в атмосфере азота добавляли CMC (40,0 г, 94,4 ммоль). Быстро добавляли раствор (трет-бутокси)-N-[(3-пиридилметил)амино]карбоксамида (20,9 г, 93,6 ммоль) и THF (450 мл), и данную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали, и осадок на фильтре промывали THF, суспендировали с DCM и фильтровали. Фильтраты объединяли и упаривали при пониженном давлении. Остаток растворяли в DCM, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и упаривали при пониженном давлении с получением пены. Эту пену перемешивали с диэтиловым эфиром (200 мл) и фильтровали. Осадок на фильтре обрабатывали ультразвуком с диэтиловым эфиром (200 мл), фильтровали, промывали диэтиловым эфиром и сушили при 40 С в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке, в виде кремового порошка (32,8 г, 100%).

7-Хлор-4-гидрокси-2-(3-пиридилметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-диона метансульфонат

К перемешиваемому раствору N-[(трет-бутокси)карбониламино][7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)]-N-(3-пиридилметил)карбоксамида (32,8 г, моль) и THF (1 л) в атмосфере азота добавляли метансульфоновую кислоту (150 мл, 222 г, 2,31 моль) в течение 10 мин. Данную смесь перемешивали в течение ночи, а затем фильтровали для отделения твердых веществ. Собранные твердые вещества промывали THF. Осадок на фильтре суспендировали в метаноле, обрабатывавали ультразвуком (30 мин) и фильтровали. Твердые вещества ресуспендировали в метаноле, обрабатывавали ультразвуком (30 мин) и фильтровали. Собранные твердые вещества промывали метанолом, а затем сушили при 100 С в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке (19,4 г, 66%), в виде белого твердого вещества, т.пл.>300 С. ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): 2,33 (s, 3Н), 5,29 (s, 2H), 7,46 (dd, 1H, J=9,0 Гц; J=2,1 Гц), 7.94 (dd, 1H, J=9,0 Гц, J=5,6 Гц), 8,04 (d, 1H, J=1,8 Гц), 8,16 (d, 1H, J=8,7 Гц), 8,37 (d, 1H, J=8,1 Гц), 8,82 (d, 1H, J=4,8 Гц), 8,89 (s, 1H). Вычислено для С₁₇Н₁₁СlNО₃ СН₃SО₃Н H₂О: С, 46,11; Н, 3,66; N, 11,95; найдено: С, 46,34; Н, 3,61; N, 11,94.

Пример 3:

7-Хлор-4-гидрокси-2-(2-пиридилметил)-1,2,5,10-тетрагидропиридазино[4,5-b]хинолин-1,10-диона метансульфонат (трет-Бутокси)-N-[(2-пиридилметил)амино]карбоксамид

К перемешиваемому раствору mpem-бутилкарбазата (174 г, 1,53 моль) и безводного DMF (400 мл) в атмосфере азота добавляли триэтиламин (130 мл, 0,94 моль), а затем 2-пиколилхлорида гидрохлорид (54,0 г, 0,33 моль). Реакционной смеси давали перемешиваться при температуре окружающей среды в течение 1 ч, затем нагревали при 70 С в течение 3 ч и давали охладиться до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляли смесью этилацетата и диэтилового эфира (1:1) и промывали солевым раствором и экстрагировали. За водным слоем наблюдали с помощью ТСХ (элюент: 100% диэтиловый эфир) и экстрагировали несколько раз этилацетатом (200 мл) до тех пор, пока продукт не исчез. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄ и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением янтарного масла (-100 г), которое кристаллизовалось. Материал растирали со смесью диэтиловый эфир/гексаны (1:1), фильтровали и сушили при пониженном давлении с получением соединения, указанного в заголовке, в виде твердого кремового вещества (33,4 г, 45% выход). ¹H-ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): 1,38 (s, 9H), 3,96 (d, 2H, J=4,0 Гц), 4,98 (d, 1H, J=4,0 Гц), 7,24 (dd, 1Н, J=7,8 Гц, J=7,8 Гц), 7,48 (d, 1H), 7,74 (dd, 1H, J=7,5 Гц, J=7,8 Гц), 8,32 (s, br, 1H),8,47(d,1H,J=4,8 Гц).

N-[(трет-Бутокси)карбониламино][-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)(3-гидрохинолил)1-N-(2-пиридилметил)карбоксамид

К перемешиваемой смеси 7-хлор-4-оксо-2-(пирролидинилкарбонил)гидрохинолин-3-карбоновой кислоты, Пример 1, (17,5 г, 54,7 ммоль) и безводного THF (900 мл) в атмосфере азота добавляли CMC (35,7 г, 81,2 ммоль) порциями (25,0 г, затем 10,7 г через 10 мин). После перемешивания реакционной смеси в течение дополнительного часа добавляли раствор (трет-бутокси)-N-[(2-пиридилметил)амино]карбоксамида (16,5 г, 73,9 ммоль) и THF (400 мл), и данную смесь энергично перемешивали в течение ночи. За реакцией наблюдали с помощью ТСХ (10% метанол/DCM) и определяли ее завершение. Для отделения осажденных твердых веществ реакционную смесь фильтровали, и собранные твердые вещества промывали THF. Фильтрат и промывные воды объединяли и концентрировали в вакууме. Осадок на фильтре суспендировали в водном бикарбонате и солевом растворе и экстрагировали DCM (3 300 мл). Эти экстракты объединяли с ранее концентрированными органическими экстрактами и промывали бикарбонатом, солевым раствором (3х) и сушили над Na₂SO₄ Nа₂SO₄ отфильтровывали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением остатка, который очищали с помощью флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя 5% изо