Селективные циклопептиды

Селективные циклопептиды

Реферат

 

Описаны соединения формулы (I), в которой R¹ и R¹² совместно с X и Y образуют фенильное кольцо, Х обозначает С и Y обозначает С, или R¹ обозначает водородный атом или группу формулы, указанную в п.1, R¹² обозначает водородный атом, причем либо каждый из Х и Y обозначает С и связь между Х и Y является двойной связью, либо каждый из Х и Y обозначает СН, а связь между Х и Y является одинарной связью; R² обозначает алкил, содержащий от 1 до 5 углеродных атомов, алкенил, содержащий от 2 до 5 углеродных атомов, или алкинил, содержащий от 2 до 5 углеродных атомов; R¹⁴ обозначает алкил, содержащий от 1 до 5 углеродных атомов; n обозначает 0 или 1, Q обозначает группу формулы, указанную в п.1, у которой каждый из R³, R⁴ и R⁵ независимо обозначает водородный атом, гало, алкил, содержащий от 1 до 4 углеродных атомов, гидрокси или алкоксирадикал, содержащий от 1 до 4 углеродных атомов, причем когда R⁴ не обозначает водородный атом, как R³, так и R⁵ обозначают водородный атом; R⁶ обозначает водородный атом, алкил, содержащий от 1 до 3 углеродных атомов, алкоксирадикал, содержащий от 1 до 3 углеродных атомов, фенокси или гало; каждый из R¹¹ и R¹³ независимо обозначает водородный атом, алкил, содержащий 3 или 4 углеродных атома, циклоалкил, содержащий 5 или 6 углеродных атомов, или как R¹¹, так и R ¹³ обозначают фенил; R⁷ обозначает О или NH; R⁸ обозначает водородный атом или метил; R⁹ обозначает группу формулы, указанную в п.1, R¹⁰ обозначает водородный атом или метил; р обозначает 0 или 1; m обозначает 0, 1, 2 или 3; а Z обозначает группу формулы, указанную в п.1; R¹⁷ обозначает водородный атом или (низш.)алкил, и их фармацевтически приемлемые соли. Соединения по изобретению являются селективными агонистами в отношении меланокортина-4. Описаны также способ получения соединений и содержащие их фармацевтические композиции. 7 н. и 40 з.п. ф-лы, 3 табл.

В развитых странах повсеместно признано, что ожирение является серьезной проблемой для здоровья. В Соединенных Штатах этой проблеме придан эпидемический статус. Считается, что более 50% населения США обладают избыточным весом, больше 25% клинически диагностируют как страдающих ожирением и подверженных значительному риску заболевания сердца, инсулиннезависимым сахарным диабетом (NIDDM), гипертонии и определенным формам рака. Эта эпидемия оказывает значительную нагрузку на систему страховой медицины, поскольку только в США прогнозируемые ежегодные затраты на лечение ожирения должны превысить 70 миллиардов долларов. Стратегия лечения ожирения включает снижение аппетита или усиление затрат энергии.

На мышах было продемонстрировано, что когда в третий желудочек головного мозга или внутрибрюшинно вводили обладающий агонистической активностью к рецептору меланокортина-4 (MC4-R) циклический гептапептидный аналог гормона, стимулирующего образование -меланоцитов ( -MSH), наступало продолжительное подавление аппетита. Этот эффект был обратимым, когда одновременно вводили антагонист MC4-R (Fan и др., Nature (1997), 385: 165-168). Следовательно, активность агонистов MC4-R должна быть полезна при лечении или профилактике ожирения.

Известны пять рецепторов меланокортина, сходных по гомологии их последовательностей, степень которой для членов данного семейства варьируется от 35 до 60% (Cone и др., Rec. Prog. Hormone Res. (1996), 51: 287-318), но эти рецепторы различаются по своим функциям. Например, MC1-R представляет собой связанный с G-белком рецептор, регулирующий пигментацию в ответ на -MSH, являющийся сильнодействующим агонистом MC1-R (Cone и др., там же). Агонизм рецептора MC1-R приводит к стимуляции меланоцитов, которые влияют на эумеланин и увеличивают риск возникновения рака кожи. Агонизм MC1-R может также оказывать нейрологическое действие. Стимуляция активности MC2-R может приводить к карциноме тканей надпочечников. Эффекты агонизма MC3-R и MC5-R еще до сих пор не выяснены. Все рецепторы меланокортина, отвечающие на действия пептидных гормонов, классифицируются как гормоны, стимулирующие меланоциты (MSH). Эти пептиды являются производными проопиомеланокортина (РОМС), прогормона, состоящего из 131 аминокислоты, которые затем трансформируются в три класса гормонов: меланокортины ( -, - и -), адренокортикотропный гормон (АСТН) и различные эндорфины (например, липотропин) (Cone и др., там же). Из-за их различных функций одновременный агонизм активности многочисленных рецепторов меланокортина способен вызвать нежелательные побочные эффекты. Поэтому важно, чтобы агонист MC4-R был бы более селективен к MC4-R, чем к одному или нескольким рецепторам меланокортина.

Haskell-Luevano и др. [Peptides (1996), 17(6): 995-1002] описали пептиды, которые содержат трипептид (D) Phe-Arg-Trp и проявляют меланотропную (потемнение кожи) активность в биоиспытаниях на коже лягушки (Rana pipiens). Haskell-Luevano и др. (там же) не упомянуты какие-либо соединения формулы I или II, которые представлены ниже.

Bednarek и др. [Peptides (1999), 20: 401-409] и Bednarek и др. (Biochem.Biophys.Res.Comm. (1999), 261: 209-213) описали аналоги циклических пептидов МТ-II. Какие-либо соединения формулы I или II, которые представлены ниже, ими не упомянуты.

По настоящему изобретению предлагается соединение формулы:

В соединениях формулы I R¹ и R¹² совместно с Х и Y образуют фенильное кольцо, Х обозначает С, Y обозначает С или R¹ обозначает водородный атом или группу

R¹² обозначает водородный атом, причем либо каждый из Х и Y обозначает С и связь между Х и Y является двойной связью, либо каждый из Х и Y обозначает СН, а связь между Х и Y является одинарной связью; R² обозначает алкил, содержащий от 1 до 5 углеродных атомов, алкенил, содержащий от 2 до 5 углеродных атомов, или алкинил, содержащий от 2 до 5 углеродных атомов; R¹⁴ обозначает алкил, содержащий от 1 до 5 углеродных атомов, а n обозначает 0 или 1, Q обозначает группу

у которой каждый из R³, R⁴ и R ⁵ независимо обозначает водородный атом, гало, алкил, содержащий от 1 до 4 углеродных атомов, гидрокси- или алкоксирадикал, содержащий от 1 до 4 углеродных атомов, причем когда R⁴ не обозначает водородный атом, как R³, так и R⁵ обозначают водородный атом; R⁶ обозначает водородный атом, алкил, содержащий от 1 до 3 углеродных атомов, алкоксирадикал, содержащий от 1 до 3 углеродных атомов, фенокси или гало; каждый из R ¹¹ и R¹³ независимо обозначает водородный атом, алкил, содержащий 3 или 4 углеродных атома, или циклоалкил, содержащий 5 или 6 углеродных атомов, или как R¹¹, так и R ¹³ обозначают фенил; R обозначает О или NH; R⁸ обозначает водородный атом или метил. R⁹ обозначает группу

R¹⁰ обозначает водородный атом или метил; р обозначает 0 или 1; m обозначает 0, 1, 2 или 3; Z обозначает группу

R¹⁷ обозначает водородный атом или низший алкил, соответственно (низш.)алкил, предпочтительно метил.

Предлагаются также их фармацевтически приемлемые соли.

Когда каждый из Х и Y обозначает -СН-, изображенная пунктирными линиями связь в соединении формулы I является гидрированной. С другой стороны, когда имеется изображенная пунктирными линиями связь, Y и X, взятые совместно с R¹ и R¹², фенильного кольца не образуют, и как X, так и Y обозначают четырехвалентные атомы С.

По настоящему изобретению предлагается также соединение формулы

В соединениях формулы II R¹ обозначает водородный атом или группу

или R² обозначает алкил, содержащий от 1 до 5 углеродных атомов, алкенил, содержащий от 2 до 5 углеродных атомов, или алкинил, содержащий от 2 до 5 углеродных атомов; R¹⁴ обозначает алкил, содержащий от 1 до 5 углеродных атомов; а n обозначает 0 или 1, один из R³, R ⁴, R⁵ и R⁶ обозначает водородный атом, гало, алкил, содержащий от 1 до 3 углеродных атомов, или алкоксирадикал, содержащий от 1 до 3 углеродных атомов, а каждый из остальных обозначает водородный атом. R⁷ обозначает О или NH. R⁸ обозначает водородный атом или метил. R⁹ обозначает группу

R¹⁰ обозначает водородный атом или метил; р обозначает 0 или 1; m обозначает 0, 1, 2 или 3; Z обозначает группу

R¹⁷ обозначает водородный атом или (низш.)алкил, предпочтительно метил. Предлагаются также их фармацевтически приемлемые соли.

Соединения формул I и II, а также Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Ala-Trp-Lys-NH ₂ и Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-(2S,3S)-бета-метил-Trp-Lys-NH ₂ являются агонистами MC4-R. Известно, что у мышей, на которых проводили эксперименты как на модели ожирения человека, агонисты активости MC4-R вызывали снижение аппетита. Следовательно, эти соединения полезны при лечении и профилактике ожирения.

Все соединения формул I и II, представленные ниже в примерах, также как и Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Ala-Trp-Lys-NH ₂ и Penta-цикло(Аsр-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-(2S,3S)-бета-метил-Trp-Lys-NH ₂ испытывали в опытах in vitro, описанных ниже в примере А раздела "Пример биологической активности" на агонистическую активность к MC4-R и на агонистическую активность к MC1-R. Все тестируемые соединения показывали значение ЕС₅₀ для агонистической активности к MC4-R меньше 500 нМ и все проявляли по крайней мере в 10 раз более высокую агонистическую активность к MC4-R, чем к MC1-R. В противоположность этому соединение Ac-Nle-цикло(Asp-Lys)-Asp-His-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂ проявляло примерно одинаковую агонистическую активность в отношении к MC1-R и MC4-R.

Номенклатура и аббревиатуры

Понятие "алкил" означает прямоцепочечную или разветвленную алкильную группу, а понятие "(низш.)алкил" означает алкильную группу, содержащую от 1 до 6 углеродных атомов. Понятие "алкенил" означает прямоцепочечную или разветвленную алкенильную группу. Понятие "алкинил" относится к прямоцепочечной или разветвленной алкинильной группе.

Понятие "алкокси" означает группу формулы алкил-O-, в которой, алкил является представленной выше группой. Понятие "фенокси" означает группу формулы фенил-O-. Во всех случаях, если не указано иное, понятие "фенил" относится к незамещенному фенильному кольцу, а понятие "фенокси" относится к незамещенной феноксигруппе.

Понятие "гало" означает группу, выбранную из атомов фтора, хлора, брома и иода.

Понятие "фармацевтически приемлемая соль" относится к тем солям, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства свободных оснований или свободных кислот, которые ни с биологической, ни с какой-либо другой точки зрения не являются нежелательными. Эти соли образуются неорганическими кислотами, такими, как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т.п., и органическими кислотами, такими, как уксусная кислота, пропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, оксиловая кислота, малеиновая кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, п-толуолсульфоновая кислота, салициловая кислота, N-ацетилцистеин и т.п. Кроме того, эти соли могут быть получены в результате присоединения неорганического основания или органического основания к свободной кислоте. Соли, дериватизированные из неорганического основания, включают, хотя ими их список не ограничен, натриевые, калиевые, литиевые, аммониевые, кальциевые, магниевые соли и т.п. Соли, дериватизированные из органических оснований, включают, хотя ими их список не ограничен, соли первичных, вторичных и третичных аминов, замещенных аминов, включающих встречающиеся в природе замещенные амины, циклические амины и основные ионообменные смолы, такие, как изопропиламиновая, триметиламиновая, диэтиламиновая, триэтиламиновая, трипропиламиновая, этаноламиновая, лизиновая, аргининовая, н-этилпиперидиновая, пиперидиновая, полиминовая смолы и т.п.

Соединения формулы IA представлены следующим образом:

в которой R¹, R³, R⁴, R⁵, R⁷, R⁸, R⁹, R ¹⁰, R¹², X, Y, Z, m и p имеют значения, указанные выше,

и их фармацевтически приемлемые соли.

В соединениях формулы IA R¹ и R¹² совместно с Х и Y образуют фенильное кольцо или R¹ обозначает водородный атом или группу

R¹² обозначает водородный атом, причем либо каждый из Х и Y обозначает С и связь между Х и Y является двойной связью, либо каждый из Х и Y обозначает СН, а связь между Х и Y является одинарной связью; R² обозначает алкил, содержащий от 1 до 5 углеродных атомов, алкенил, содержащий от 2 до 5 углеродных атомов, или алкинил, содержащий от 2 до 5 углеродных атомов; R¹⁴ обозначает алкил, содержащий от 1 до 5 углеродных атомов, а n обозначает 0 или 1. Каждый из R³ , R⁴ и R⁵ независимо обозначает водородный атом, гало, алкил, содержащий от 1 до 4 углеродных атомов, гидрокси или алкоксирадикал, содержащий от 1 до 4 углеродных атомов, причем когда R⁴ не обозначает водородный атом, как R ³, так и R⁵ обозначают водородный атом. R ⁷ обозначает О или NH. R⁸ обозначает водородный атом или метил. R⁹ обозначает группу

R¹⁰ обозначает водородный атом или метил; р обозначает 0 или 1; m обозначает 0, 1, 2 или 3; Z обозначает группу

R¹⁷ обозначает водородный атом или (низш.)алкил, предпочтительно метил.

Обозначенная пунктирными линиями связь в формуле IA может быть гидрированной. Когда пунктирная линия обозначает гидрированную связь, как X, так и Y обозначают -СН-. С другой стороны, когда имеется обозначенная пунктирными линиями связь, Y и X, взятые совместно с R¹ и R ¹², не образуют фенильного кольца, как X, так и Y обозначают четырехвалентные С атомы.

В одном варианте соединения формулы IA каждый из Х и Y обозначает СН, и связь между Х и Y гидрирована до одинарной связи; Z обозначает группу

R⁷ обозначает О; R¹ обозначает группу

R² обозначает алкил, содержащий от 1 до 5 углеродных атомов; как R¹⁰, так и R¹² обозначают водородный атом.

Примеры таких соединений включают Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Cit-Trp-Lys-NH ₂.

В другом, предпочтительном варианте, соединения формулы IA Z обозначает группу

R⁷ обозначает NH; R¹ обозначает водородный атом или группу

R² обозначает алкил; как R¹⁰, так и R¹² обозначают водородный атом.

В другом варианте соединения формулы IA Z обозначает группу

R⁷ обозначает NH; R¹ обозначает группу

R² обозначает алкил, как R¹⁰, так и R¹² обозначают водородный атом.

В более конкретном варианте каждый из Х и Y обозначает СН, а связь между Х и Y гидрирована до одинарной связи; n обозначает 0; а R⁹ обозначает группу

Примеры таких соединений включают Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-(2)Nal-Lys-NH ₂ и Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-N-метил(2)Nal-Lys-NH ₂.

В другом, более конкретном варианте, соединения формулы IA Z обозначает группу

R⁷ обозначает NH; R¹ обозначает группу

R² обозначает алкил, как R¹⁰, так и R¹² обозначают водородный атом, a R⁹ обозначает группу

а R¹⁷ обозначает водородный атом или (низш.)алкил, предпочтительно метил.

Эти соединения включают те, у которых каждый из Х и Y обозначает СН, связь между Х и Y представляет собой одинарную связь, один из R³, R⁴ и R⁵ обозначает водородный атом, гало или алкил, а каждый из остальных обозначает водородный атом, например Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂, Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-4-MeApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂, Penta-цикло(Glu-Lys)-Glu-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂, Penta-цикло(Asp-Orn)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Orn-NH ₂, Penta-цикло(Asp-Dbr)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dbr-NH ₂, Penta-цикло(Asp-Dpr)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH ₂ или Ас-цикло(Asp-Dpr)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH ₂.

По еще одному конкретному варианту соединений формулы IA предлагаются те соединения, у которых каждый из Х и Y обозначает СН, связь между Х и Y представляет собой одинарную связь, а R¹ обозначает группу

один из R³, R⁴ и R⁵ обозначает алкокси, а каждый из остальных обозначает водородный атом; n обозначает 0, например Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-4-MeOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂, Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-4-EtOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂, Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-4-изо-PrOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂, Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-3-MeOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂, Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-4-OHApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂ или Penta-цикло(Аsp-Lys)-Asp-4-ClApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂.

Варианты соединений формулы IA включают те соединения, у которых каждый из R¹, R³, R⁴, R⁵, R⁸ и R¹⁰ обозначает водородный атом, R⁷ обозначает NH, R ⁹ обозначает группу

R¹⁷ обозначает водородный атом или (низш.)алкил, предпочтительно метил, а p обозначает 0, например цикло(янтарная кислота-Lys)-янтарная кислота-Арс-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂ , цикло(малеиновая кислота-Lys)-малеиновая кислота-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂, цикло(янтарная киcлoтa-Dpr)-янтapнaя кислота-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH ₂, цикло(малеиновая кислота-Dpr)-малеиновая кислота-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH ₂.

В другом варианте соединения формулы IA R ¹ и R¹² совместно с Х и Y образуют фенильное кольцо. Примеры таких соединений включают цикло(фталевая кислота-Lys)-фталевая кислота-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂, цикло(фталевая кислота-Dpr)-фталевая кислота-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH₂ и Ac-Nle-цикло(Cys-Cys)-Cys-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Cys-NH ₂.

Соединения формулы IB представлены формулой

В соединениях формулы IB, включая их фармацевтически приемлемые соли, R¹ обозначает водородный атом или группу

R² обозначает алкил, содержащий от 1 до 5 углеродных атомов, алкенил, содержащий от 2 до 5 углеродных атомов, или алкинил, содержащий от 2 до 5 углеродных атомов. R¹⁴ обозначает алкил, содержащий от 1 до 5 углеродных атомов. n обозначает 0 или 1; R⁶ обозначает водородный атом, алкил, содержащий от 1 до 3 углеродных атомов, алкоксирадикал, содержащий от 1 до 3 углеродных атомов, фенокси или гало; R ⁷ обозначает О или NH; R⁸ обозначает водородный атом или метил; R⁹ обозначает группу

R¹⁰ обозначает водородный атом или метил, р обозначает 0 или 1, m обозначает 0, 1, 2 или 3; Z обозначает группу

R¹⁷ обозначает водородный атом или (низш.)алкил, предпочтительно метил.

В одном из вариантов соединений формулы IB, т.е. соединений формулы IB1, Z обозначает группу

R⁷ обозначает NH, R¹ обозначает группу

R² обозначает алкил, каждый из R⁸ и R¹⁰ обозначает водородный атом, а R⁹ обозначает группу

и R¹⁷ имеет указанные выше значения.

В более конкретном варианте таких соединений формулы IB1 R ⁶ обозначает водородный атом или алкил. Примеры таких соединений включают Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-Appc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂, Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-2-MeAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂, Penta-цикло(Аsp-Lys)-Аsp-2-изо-PrАррс-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂, Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-3-MeAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂ и Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-4-MeAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂.

B другом более конкретном варианте таких соединений формулы IB1 R⁶ обозначает гало. Примеры таких соединений включают Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-4-ClAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂.

В еще одном более конкретном варианте таких соединений формулы IB1 R⁶ обозначает алкокси или фенокси. Примеры таких соединений включают Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-4-PhOAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂ и Penta-(Asp-Lys)-Asp-3-MeO-Appc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂.

Соединения формулы IC представлены следующим образом:

В соединениях формулы IC, включая их фармацевтически приемлемые соли, R¹ обозначает водородный атом или группу

R² обозначает алкил, содержащий от 1 до 5 углеродных атомов, алкенил, содержащий от 2 до 5 углеродных атомов, или алкинил, содержащий от 2 до 5 углеродных атомов; R¹⁴ обозначает алкил, содержащий от 1 до 5 углеродных атомов; n обозначает 0 или 1, каждый из R¹¹ и R¹³ независимо обозначает водородный атом, алкил, содержащий 3 или 4 углеродных атома, циклоалкил, содержащий 5 или 6 углеродных атомов, или как R¹¹, так и R¹³ обозначают фенил; R⁷ обозначает О или NH; R⁸ обозначает водородный атом или метил; R⁹ обозначает группу

R¹⁰ обозначает водородный атом или метил, p обозначает 0 или 1, m обозначает 0, 1, 2 или 3, a Z обозначает группу

R¹⁷ обозначает водородный атом или (низш.)алкил, предпочтительно метил.

В одном из вариантов соединения формулы IC, соединения формулы IC1 Z обозначает группу

R⁷ обозначает NH, R¹ обозначает группу

R² обозначает алкил, каждый из R⁸ и R¹⁰ обозначает водородный атом, а R⁹ обозначает группу

В одном более конкретном варианте таких соединений формулы IC1 один из R¹¹ и R¹³ обозначает алкил или циклоалкил, а другой обозначает водородный атом. Примеры таких соединений включают Penta-(Asp-Lys)-Asp-Achc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂ и Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-Abc-(D) Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂.

В другом более конкретном варианте таких соединений формулы IC1 один из R¹¹ и R¹³ обозначает фенил, а другой обозначает водородный атом или фенил. Примеры таких соединений включают Penta-(Asp-Lys)-Asp-4-Adpc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂.

В одном варианте соединения формулы II, соединения формулы IIА Z обозначает группу

R¹ обозначает группу

R² обозначает алкил;

R³, R ⁴, R⁵, R⁸ и R¹⁰ каждый обозначает водородный атом; R⁶ обозначает водородный атом, гало, алкил, содержащий от 1 до 3 углеродных атомов, или алкоксирадикал, содержащий от 1 до 3 углеродных атомов; R ⁹ обозначает группу

а R¹⁷ имеет указанные выше значения.

В одном варианте соединений формулы IIA, как это изложено в предыдущем абзаце, R⁷ обозначает NH. В более конкретном варианте R⁷ обозначает NH, a R⁶ обозначает водородный атом или алкил. Примеры таких соединений включают Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-(D,L)-Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂, Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-Me-(D,L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂, Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-Et-(D,L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂ и Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-изо-Pr-(D,L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂.

B другом конкретном варианте соединения формулы IIA R⁷ обозначает NH, а R⁶ обозначает гало. Примеры таких соединений включают Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-BrAtc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂ и Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-ClAtc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂.

В еще одном конкретном варианте соединения формулы IIA R⁷ обозначает NH, a R⁶ обозначает алкокси. Примерами служат Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-MeO-(D,L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂, Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-EtO-(D,L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂, Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-изо-PrO-(D,L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH ₂.

Другой вариант соединений формулы II составляют соединения формулы II, в которой Z, R¹-R⁵ и R⁸-R¹⁰ имеют значения, указанные выше, R⁷ обозначает О, а R⁶ обозначает гало. Примеры таких соединений включают Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-BrAtc-(D)Phe-Cit-Trp-Lys-NH ₂ и Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-ClAtc-(D)Phe-Cit-Trp-Lys-NH ₂.

В другом варианте соединений формулы II соединения формулы IIB представляют собой те соединения, у которых Z обозначает -S-S-, R¹ обозначает группу

R³, R⁴, R⁵, R⁸ и R¹⁰ каждый обозначает водородный атом, R⁶ обозначает водородный атом или гало; R⁷ обозначает NH, R⁹ обозначает группу

а R¹⁷ имеет указанные выше значения.

Примеры таких соединений формулы IIВ включают Ac-Nle-цикло(Cys-Cys)-Cys-(D,L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Cys-NH ₂ и Penta-цикло(Cys-Cys)-Cys-5-Br(D,L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Cys-NH ₂.

По настоящему изобретению предлагаются также следующие соединения:

Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Ala-Trp-Lys-NH ₂ и Penta-цикло(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-(2S,3S)-бета-метил-Trp-Lys-NH ₂.

Для определения таких пептидов используют ту номенклатуру, которую, как правило, применяют в данной области техники, в соответствии с которой аминогруппа на N-конце находится слева, а карбоксильная группа на С-конце находится справа. Под природными аминокислотами подразумевают встречающиеся в природе аминокислоты, которые содержатся в белках, т.е. Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Ser, Thr, Lys, Arg, Asp, Asn, Glu, Gln, Cys, Met, Phe, Tyr, Pro, Trp и His. Когда у аминокислоты имеются изомерные формы, во всех случаях, если не указано иное, представлена именно L-форма аминокислоты.

Для обозначения аминокислот, защитных групп, растворителей, реагентов и т.п. использованы следующие аббревиатуры или символы.

-Ala - бета-Alanine,

(2)-Nal - (2)-нафтилаланин,

Atс-2 - аминотетралин-2-карбоновая кислота,

5-BrAtc - 5-бром-2-аминотетралин-2-карбоновая кислота,

5-ClAtc - 5-хлор-2-аминотетралин-2-карбоновая кислота,

5-MeOAtc - 5-метокси-2-аминотетралин-2-карбоновая кислота,

5-EtOAtc - 5-этокси-2-аминотетралин-2-карбоновая кислота,

5-изо-Рr - 5-изопропокси-2-аминотетралин-2-карбоновая кислота,

5-MeAtc - 5-метил-2-аминотетралин-2-карбоновая кислота,

5-EtAtc - 5-этил-2-аминотетралин-2-карбоновая кислота,

5-изо-Рr - 5-изопропил-2-аминотетралин-2-карбоновая кислота,

5-DmaAtc - 5-диметиламино-2-аминотетралин-2-карбоновая кислота,

DBr - D-2,4-диаминомасляная кислота,

DPr - D-2,3-диаминопропионовая кислота,

Sar - саркозин (N-метилглицин),

Cit - цитрулин,

Арс - 1-амино-4-фенилциклогексан-1-карбоновая кислота,

4-НОАрс - 1-амино-4-(4-гидроксифенил)циклогексан-1-карбоновая кислота,

4-МеОАрс - 1-амино-4-(4-метоксифенил)циклогексан-1-карбоновая кислота,

3-МеОАрс - 1-амино-4-(3-метоксифенил)циклогексан-1-карбоновая кислота,

4-ЕtOАрс - 1-амино-4-(4-этоксифенил)циклогексан-1-карбоновая кислота,

4-изо-Рr - 1-амино-4-(4-изопропоксифенил)циклогексан-1-карбоновая кислота,

4-МеАрс - 1-амино-4-(4-метилфенил)циклогексан-1-карбоновая кислота,

4-ClApc - 1-амино-4-(4-хлорфенил)циклогексан-1-карбоновая кислота,

Аррс - 4-амино-1-фенилпиперидин-4-карбоновая кислота,

2-МеАррс - 4-амино-1-(2-метилфенил)пиперидин-4-карбоновая кислота,

2-изо-ProAppc - 4-амино-1 -(2-изопропоксифенил)пиперидин-4-карбоновая кислота,

3-МеАррс - 4-амино-1-(3-метилфенил)пиперидин-4-карбоновая кислота,

3-МеОАррс - 4-амино-1-(3-метоксифенил)пиперидин-4-карбоновая кислота,

4-МеАррс - 4-амино-1-(4-метилфенил)пиперидин-4-карбоновая кислота,

4-ClAppc - 4-амино-1-(4-хлорфенил)пиперидин-4-карбоновая кислота,

4-PhOAppc - 4-амино-1-(4-феноксифенил)пиперидин-4-карбоновая кислота,

Ache - 1-амино-4-циклогексилциклогексан-1-карбоновая кислота,

Adpc - 1-амино-4-дифенилциклогексан-1-карбоновая кислота,

Abс - 1-амино-4-трет-бутилциклогексан-1-карбоновая кислота,

3-Amb - 3-аминометилбензойная кислота,

4-Amb - 4-аминометилбензойная кислота,

2-Аbа - 2-аминобензойная кислота,

Вu - бутил,

Penta - пентаноил,

ФМОК - 9-флуоренилметоксикарбонил,

Пмх - 2,2,5,7,8-пентаметилхроман-6-сульфонил,

Trt - тритил (трифенилметил),

CH₂Cl ₂ - метиленхлорид,

CH₃CN - ацетонитрил,

ДМФ - диметилформамид,

ДИПЭА - N,N-диизопропилэтиламин,

ТФК - трифторуксусная кислота,

ГОБТ - N-гидроксибензотриазол,

ДИК - N,N’-диизопропилкарбодиимид,

БОФ - бензотриазол-1-илокси-трис-(диметиламино)фосфонийгексафторфосфат,

ПиБроФ - бром-трис-пирролидинофосфонийгексафторфосфат,

БТУГ - 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилуронийгексафторфосфат,

МС-БУА - масс-спектроскопия с бомбардировкой ускоренными атомами,

МС-ПЭ - масс-спектроскопия с ионизацией пучком электронов.

Замещенные аминокислоты, расположенные в круглых скобках, указывают на аналоги в пептидной последовательности. Замещение N-концевой аминогруппы указывают слева от N-концевого остатка, отделяя его разделительной черточкой. Другими словами, например, формула Ac-His-(D)Phe-Arg-Trp-Gly-NH₂ означает пептид, в аминокислотной последовательности которого на N-конце ацетильная группа замещает водородный атом. Суффиксами "-ОН" и "-NH₂", которые следуют за разделительными черточками или скобками, обозначают соответственно свободную кислотную и амидную группы полипептида.

Линейные пептиды, используемые в качестве предшественников для типичных предлагаемых соединений, могут быть легко синтезированы по любому обычному из известных методов формирования пептидной связи между аминокислотами. Такие обычные методы включают, например, любой метод в растворе, осуществление которого позволяет проводить реакцию конденсации между свободной альфа-аминогруппой аминокислоты или ее остатком, у которого карбоксильная группа или другие реакционноспособные группы защищены, и свободной первичной карбоксильной группой другой аминокислоты или ее остатка, у которого ее аминогруппа или другие реакционноспособные группы защищены.

Процесс синтеза линейных пептидов можно проводить по методу, при осуществлении которого каждую аминокислоту по одной последовательно присоединяют к другой аминокислоте или ее остатку, или по методу, при осуществлении которого вначале обычным путем синтезируют пептидные фрагменты, а затем проводят реакцию их конденсации с получением целевого пептида.

Такие обычные методы синтеза линейных пептидов-предшественников включают, например, любой твердофазный метод синтеза пептидов. В таком методе синтез новых соединений можно проводить последовательно поочередным введением в растущую пептидную цепь целевых остатков аминокислот в соответствии с основными принципами твердофазных методов синтеза [Merrifield R.B., J. Amer.Chem.Soc., 1963, 85, 2149-2154; Ваrаnу и др. The peptides, Analysis, Synthesis and Biology, том 2, Gross E. и Meienhofer J., Eds.Academic Press, 1-284 (1980)].

Общим для химических синтезов пептидов является защита реакционноспособных групп боковых цепей аминокислотных остатков приемлемыми защитными группами, которые обычно препятствуют химическому взаимодействию на данных центрах до тех пор, пока защитная группа не будет удалена. Обычно также общей является защита альфа-аминогруппы аминокислоты или ее фрагмента до завершения реакции по карбоксильной группе, после чего селективно удаляют защитную группу альфа-аминогруппы и тем самым создают возможность протекания дальнейшей реакции на данном центре. Несмотря на то, что эти конкретные защитные группы представлены применительно к твердофазному методу синтеза, необходимо отметить, что любая аминокислота может быть защищена защитной группой, которую обычно используют для соответствующей аминокислоты при синтезе в растворе.

Альфа-аминогруппы можно защищать приемлемой защитной группой, выбранной из ароматических защитных групп уретанового типа, таких, как бензилоксикарбонил (Z) и замещенный бензилоксикарбонил, в частности п-хлорбензилоксикарбонил, п-нитробензилоксикарбонил, п-бромбензилоксикарбонил, п-дифенилизопропоксикарбонил, 9-флуоренилметоксикарбонил (ФМОК) и п-метоксибензилоксикарбонил (МОБ); алифатических защитных групп уретанового типа, таких, как трет-бутилоксикарбонил (БОК), диизопропилметоксикарбонил, изопропоксикарбонил и аллилоксикарбонил. При этом для защиты альфа-аминогруппы наиболее предпочтительна группа ФМОК.

Гуанидиновые группы могут быть защищены приемлемой защитной группой, выбранной из нитрогруппы, п-толуолсульфонила (Toc), Z, пентаметилхромансульфонила (Пмх), адамантилоксикарбонила и БОК. Самой предпочтительной для аргинина (Arg) является группа Пмх.

Все растворители, изопропанол (изо-РrОН), метиленхлорид (CH₂Cl₂), диметилформамид (ДМФ) и N-метилпирролидинон (N-МПН) приобретали на фирме Fisher или Burdick & Jackson и использовали без дополнительной перегонки. Трифторуксусную кислоту приобретали на фирме Halocarbon или Fluka и использовали без дополнительной очистки. Диизопропилкарбодиимид (ДИК) и диизопропилэтиламин (ДИПЭА) приобретали на фирме Fluka или Aldrich и использовали без дополнительной очистки. Гидроксибензотриазол (ГОБТ), диметилсульфид (ДМС) и 1,2-этандитиол (ЭДТ) приобретали на фирме Sigma Chemical Co. и использовали без дополнительной очистки. Обычно использовали защищенные аминокислоты L-конфигурации, которые получали промышленным путем на фирме Bachem, Advanced ChemTech или Neosystem. Степень чистоты этих реагентов перед применением проверяли тонкослойной хроматографией, ЯМР-анализом и по температуре плавления. Бензгидриламиновая смола (БГА) представляла собой сополимер стирола и 1% дивинилбензола (частицы размером от 100 до 200 или от 200 до 400 меш), полученный на фирме Bachem или Advanced ChemTech. Общее содержание азота в этих смолах обычно находилось в пределах от 0,3 до 1,2 мэкв/г.

Высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ) осуществляли в приборе LDC, включавшем насосы Constametric I и III, программатор Gradient Master для растворителя и смеситель, а также УФ-детектор с варьируемой длиной волны устройства Spectromonitor III. Процедуры ВЭЖХ анализа проводили по методу с обращенной фазой с применением колонок Vydac C₁₈ (0,4× 30 см). Процессы разделения препаративной ВЭЖХ проводили в колонках Vydac (2× 25 см).

В предпочтительном варианте линейные пептиды получали с использованием твердофазного синтеза по методу, который в общем описан в работе Merrifield [J. Amer.Chem.Soc., 1963, 85, 2149], хотя, как упомянуто выше, можно было бы использовать и другой эквивалентный химический синтез, известный в данной области техники. Твердофазный синтез начинают с С-концевого фрагмента пептида реакцией конденсации защищенной альфа-аминокислоты с приемлемой смолой. Такой исходный материал может быть приготовлен присоединением аминокислоты с защищенной альфа-аминогруппой с помощью сложноэфирной связи к смоле п-бензилоксибензилового спирта (по Wang) или посредством амидной связи между ФМОК-мостиком, таким, как п-[(R,S)- -[1-(9Н-флуорен-9-ил)метоксиформамидо]-2,4-диметилоксибензил]феноксиуксусная кислота (мостик Rink), и бензгидриламиновой (БГА) смол