Способ экспресс-диагностики хронического панкреатита

Способ экспресс-диагностики хронического панкреатита

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Предлагаемое изобретение относится к медицине, гастроэнтерологии, физиологии и может быть использовано для диагностики хронического панкреатита (ХП).

Среди патологии органов пищеварения ХП составляет 5-9% (Я.С.Циммерман, Хронический панкреатит. // Клин. мед. 1991, т.69, №2, с.99-107).

Заболевание сопровождается структурными и морфологическими изменениями поджелудочной железы, что приводит к изменению функции органа (отек, геморрагия, некроз, кисты, кальциноз, фиброз, атрофия) (Григорьев П.Я., Яковенко Э.П., Диагностика и лечение болезней органов пищеварения. М., 1996).

Большинство ХП развивается на фоне других заболеваний органов пищеварения (заболевания желчного пузыря, желчевыводящих путей; заболевания ДПК, большого дуоденального сосочка; заболевания печени, кишечника). С другой стороны, ХП может стать причиной развития ряда серьезных нарушений со стороны пищеварительной системы (рак ПЖ, холестаз, сахарный диабет и т.д.).

Особую актуальность представляет ранняя диагностика ХП. Известны способы определения экзокринной функции ПЖ по количественному измерению уровня ее ферментов (липазы, амилазы, трипсина). Нарастание болевого синдрома при ХП (его обострение) сопровождается повышением содержания ферментов в крови (Я.С.Циммерман, Хронический панкреатит. Метод. рекомендации. Пермь, 1990; А.С.Логинов, М.Д.Сперанский, К.Ю.Асташенкова, Скрининговые методы экспресс-диагностики заболеваний печени и поджелудочной железы. Метод. рекомендации. М., 1987).

Аналог. Способ определения липазы. Липаза катализирует расщепление глицеридов, высших жирных кислот.

Активность липазы определяется в большинстве способов на основании титрометрического определения количества освободившихся под действием фермента жирных кислот. Эти способы отличаются используемым субстратом: оливковое масло, твин, тербутирин (Биохимические методы исследования в клинике. Справочник. М., 1969, с.186-191).

Недостатком этих способов является их невысокая специфичность, т.к. эти субстраты гидролизируются не только липазой, но и другими эстеразами печеночного происхождения.

Титрометрический способ определения липазы основан на титровании жирных кислот, освобождающихся в результате ферментативного гидролиза, фотометрический - связан с введением в реакционную смесь особых реактивов. В качестве унифицированного способа используют турбидиметрический, в котором в качестве субстрата используют оливковое масло (Справочник. Медицинские лабораторные технологии. Т.2. С.-Петербург, 1999, с.39-41).

Принцип: спектрофотометрическое определение изменения мутности суспензии оливкового масла под действием липазы.

Реактивы: оливковое масло, оксид алюминия, сульфат меди, этиловый спирт, натриевая соль дезоксихолевой кислоты, соляная кислота.

Специальное оборудование: спектрофотометр с термостатируемой кюветой.

Ход определения: перед определением исследуемую сыворотку крови и реактивы прогревают до температуры измерения. В кювету приливают 3 мл рабочей эмульсии оливкового масла, добавляют 0,1 мл сыворотки крови, смешивают (без встряхивания) и ставят в термостат при 30°С или 37°С, через 2 минуты измеряют экстинкцию (Е1) против дистиллированной воды или воздуха при длине волны 340 нм в кювете с длиной оптического пути 10 мм, затем кювету снова помещают в термостат при той же температуре и через 5 минут измеряют экстинкцию (Е2), рассчитывая АЕ за 1 мин. Расчет активности липазы производят по формуле

Недостатки способа:

- нарушение нативности СК (подогревание, соединение с реактивом);

- использование реактивов, требующих дополнительной обработки;

- применение дорогостоящей аппаратуры;

- косвенное определение наличия липазы.

Прототип: УЗИ поджелудочной железы с помощью датчика с частотой 3,5-5 МГц (В.В.Митьков, Клиническое руководство по ультразвуковой диагностике. М., 1996,т.1, с.140-160, 166-173).

Сущность способа основана на исследовании ЭХО-структуры поджелудочной железы с использованием ультразвукового сканера.

Способ осуществляют следующим образом.

1. Пациента укладывают на спину.

2. Датчик устанавливают под мечевидным отростком и постепенно смещают в каудальном направлении.

3. Структура поджелудочной железы оценивается по состоянию ее контура, размеров эхогенности и однородности.

Недостатки способа:

- применение ультразвукового сканера, который влияет на физиологическое состояние исследуемого;

- взаимовлияние на изображение ПЖ окружающих органов и тканей (желудок, ДПК, тонкий и толстый кишечник, селезенка, левая почка);

- возникновение артефактов во время сканирования;

- помехи от содержимого органов ЖКТ;

- стимуляция некоторых процессов в ПЖ (киста, опухоль).

Задачи предлагаемого изобретения

1. Повышение эффективности диагностики хронического панкреатита в зависимости от степени выраженности патологического процесса.

2. Повышение информативности.

3. Наличие контроля за эффективностью проводимого лечения.

4. Экспресс-регистрация биоэнергии, излучаемой ПЖ.

Технической сущностью предложения является повышение эффективности диагностики, достоверности верификации глубины структурных нарушений в поджелудочной железе путем изучения ее излучения, для чего в отличие от известного приема (УЗИ поджелудочной железы) предварительно готовят биологический индикатор для регистрации излучения поджелудочной железы (смесь 0,1% водного раствора аминокислот - аспарагиновая, глицин, триптофан, лейцин, валин, серин, фенилаланин, треонин; 0,5% водный раствор нейромедиатора дофамина и 12% водный раствор сернокислой магнезии в соотношении 3:1:6), наносят его на стеклянную пластину, помещают ее на болевую зону Мэйо-Робсона левого реберно-позвоночного угла, выдерживают ее на протяжении 1-2 минут, сушат при Т=+18-20°С, исследуют в поляризованном свете с кварцевым компенсатором и при наличии в препарате деградированных сферолитов пестрой окраски: отросчатых со слабовыраженной радиально-лучевой ориентацией, размытых и разрушенных, диагностируют хронический панкреатит.

Способ осуществляют следующим образом.

1. Готовят биологический индикатор (БИ) - энергоинформационную модель для регистрации излучения поджелудочной железы, для чего используют смесь, состоящую из 0,1% водного раствора 8 жизненно важных аминокислот (аспарагиновая, глицин, триптофан, лейцин, валин, серин, фенилаланин, треонин), 0,5% водного раствора нейромедиатора дофамина, 12% водного раствора сернокислой магнезии. Соотношение аминокислот, нейромедиатора и сернокислой магнезии 3:1:6.

2. Тарированной пипеткой БИ объемом 0,01-0,02 мл наносят на предметное стекло в виде дорожки.

3. Предметное стекло (стеклянная пластинка) с нанесенным на него БИ, помещают в зону проекции поджелудочной железы (болевая зона Мэйо-Робсона, левый реберно-позвоночный угол), выдерживают 1-2 минуты, сушат в термостате при Т=+18-20°С на протяжении 2-3 мин.

4. Полученный препарат исследуют в поляризованном свете с кварцевым компенсатором и при наличии в препарате деградированных сферолитов пестрой окраски: отросчатых со слабо выраженной радиально-лучевой ориентацией, размытых и разрушенных диагностируют хронический панкреатит.

Приводим данные о БИ (энергоинформационной модели энергетического излучения биообъекта) - варианте биологического жидкого кристалла, реагирующего на излучение появлением специфической структуры.

Информационные излучения от различных объектов (живых, биокосных, косных) - один из общих принципов энергоинформационного взаимодействия в природе.

Под информационным воздействием понимается специфическая реакция систем на слабый вещественно-энергетический стимул, воспринимаемый как сигнал в форме кода (Н.Ф.Раймес. Системный подход к решению проблемы взаимодействия среды с биологическим объектом. В кн.: Электромагнитные поля в биосфере, т.1, с.294-300, М., 1984).

Структура - мгновенный снимок внутренних взаимодействий в системе (А.А.Малиновский. Теория структуры и ее место в системном подходе. В кн.: Системные исследования. Ежегодник. М., 1970, с.10-31).

Нами разработан БИ (вариант биологического жидкого кристалла, энергоинформационная матрица), в состав которого входят аминокислоты, нейромедиатор и сернокислая магнезия. Применение БИ основано на его способности регистрировать биологическое излучение исследуемого органа, в данном случае поджелудочной железы. Известно, что от человека (его органов) во все стороны излучаются модулированные биоэлектромагнитные излучения. Возникают сложные информационно-закодированные многочастотные паттерны колебаний, волновое излучение, формирующее индивидуальные информационно-энергетические коды (В.Л.Введенский, В.И.Ожогин. Сверхчувствительная магнитометрия и биомагнетизм. М., 1986; Ш.М.Коган, Физическая природа биополя человека. В кн.: Аномальные явления, факты, исследования, гипотезы. М., 1991., Вып.1, с.24-37).

Белково-нуклеиновые структуры (аналоги клеточных ассоциаций) обладают высокой способностью “считывать” информационный энергетический код биологического излучения, следствием чего является возникновение определенной структуры (В.П.Казначеев, Л.П.Михайлова, Биоинформационная функция естественных электромагнитных полей. Новосибирск, 1985).

На фиг.1а приведена исходная структура 0,1% водного раствора аспарагиновой аминокислоты, входящей в состав разработанного нами БИ, видны отдельные зерна. При помещении стеклянной пластины с нанесенным на нее 0,1% раствором аспарагиновой кислоты в зону Мэйо-Робсона здорового человека (левый реберно-позвоночный угол) появилась новая структура, фиг.1б, видна ориентированная цепь из отдельных, сливающихся между собой, зерен.

На фиг.2 приведена исходная структура БИ, в которую вошли аминокислоты, нейромедиатор и MgSО₄, присутствуют разноориентированные зерна пестрой окраски.

На фиг.3а,б приведена структура БИ, полученная при помещении стеклянной пластины с нанесенным на нее БИ на зону проекции поджелудочной железы здорового человека. Пластину выдержали в зоне Мэйо-Робсона на протяжении 2 мин, высушили в термостате при Т=+18°С на протяжении 3 мин и исследовали в поляризованном свете. Присутствуют округлые сферолиты пестрой окраски с выраженной радиально-лучевой ориентацией, видны мелкие сферолиты с друзами в центре. При исследовании проведено 328 экспериментов.

Примеры.

Пример 1, фиг.4. Б-ой У. Диагноз: хронический панкреатит (ХП) в стадии ремиссии. История болезни (ИБ) №218. На фиг.4 приведена структура БИ, полученная при помещении стеклянной пластины с БИ в зону Мэйо-Робсона, присутствуют отросчатые сферолиты пестрой окраски со слабо выраженной радиально-лучевой ориентацией.

Технология. На стеклянную пластину нанесли 0,01 мл БИ и поместили ее в зону проекции ПЖ - в зону Мэйо-Робсона, выдержали 1 мин, затем высушили в термостате на протяжении 3 мин и исследовали в поляризованном свете с кварцевым компенсатором. Присутствуют отросчатые сферолиты пестрой окраски со слабо выраженной радиально-лучевой ориентацией. Одновременно произвели УЗИ ПЖ: размеры не увеличены, контуры неровные, эхогенность повышена, структура диффузно-неоднородная с зонами средней и повышенной эхогенности. Диагноз ХП подтвердился.

Пример 2, фиг.5. Б-ой А. Диагноз: хронический панкреатит (ХП) в стадии ремиссии. ИБ №209. На фиг.5 приведена структура БИ, полученная при помещении стеклянной пластины с нанесенным на нее БИ в зону Мэйо-Робсона, видны отросчатые сферолиты пестрой окраски со слабо выраженной радиально-лучевой ориентацией.

Технология. На стеклянную пластину нанесли 0,01 мл БИ и поместили ее в зону проекции ПЖ (зона Мэйо-Робсона), выдержали 2 мин, затем высушили в термостате 2 мин при Т=+20°С и исследовали в поляризованном свете с кварцевым компенсатором. Присутствуют отросчатые сферолиты пестрой окраски со слабо выраженной радиально-лучевой ориентацией. Одномоментно произвели УЗИ ПЖ: контуры неровные, эхогенность повышена, структура диффузно-неоднородная, головка ≈15 мм, хвост ≈15 мм, тело ≈9 мм. Диагноз ХП подтвердился.

Пример 3, фиг.6. Б-ная В. Диагноз: хронический панкреатит (ХП) в стадии обострения. ИБ №300. На фиг.4 присутствует деградированный пестрой окраски сферолит размытый.

Технология. На стеклянную пластину нанесли 0,2 мл БИ и поместили ее в зону Мэйо-Робсона б-ной В., выдержали на протяжении 1 мин, высушили в термостате при Т=+20°С на протяжении 2 мин и изучили в поляризованном свете с кварцевым компенсатором (КК), виден деградированный размытый сферолит пестрой окраски. Одномоментно произвели УЗИ ПЖ: головка ≈33 мм, тело ≈22 мм, хвост ≈30 мм, контуры четкие, эхогенность снижена, структура диффузно-неоднородная. Диагноз ХП подтвердили.

Пример 4, фиг.7. Б-ой С. Диагноз: ХП в фазе ремиссии. ИБ №94. На фиг.7 присутствует пестрой окраски отросчатый сферолит со слабо выраженной радиально-лучевой ориентацией.

Технология. На стеклянную пластину нанесли 0,1 мл БИ и поместили ее в зону Мэйо-Робсона б-ого. С., выдержали на протяжении 2 мин, высушили в термостате при Т=+18°С, изучили в поляризованном свете с КК, виден пестрой окраски отросчатый сферолит со слабо выраженной радиально-лучевой ориентацией. Одновременно произвели УЗИ ПЖ: головка ≈20 мм, тело ≈16 мм, хвост ≈25 мм, контуры неровные, эхогенность повышена, структура диффузно-неоднородная. Диагноз ХП подтвердился.

Пример 5, фиг.8. Б-ой Г. ИБ №94. Диагноз: ХП в фазе ремиссии. На фиг.8 присутствуют пестрой окраски отросчатые сферолиты со слабо выраженной радиально-лучевой ориентацией.

Технология. На стеклянную пластину нанесли 0,2 мл БИ, поместили ее в зону Мэйо-Робсона, выдержали на протяжении 2 мин, высушили в термостате при Т=+19°С на протяжении 2 мин и изучили в поляризованном свете с КК, видны пестрые отросчатые сферолиты со слабо выраженной радиально-лучевой ориентацией. Одновременно произвели УЗИ ПЖ: головка ≈23 мм, тело ≈17 мм, хвост ≈22 мм, контуры неровные, эхогенность повышена, структура диффузно-неоднородная с множественными мелкими, до 2-5 мм, гиперэхогенными очагами с сенусической тенью (кальцификаты). Диагноз ХП подтвердили.

Пример 6, фиг.9. Б-ная 3. Диагноз: ХП в стадии обострения. На фиг.9 присутствуют разрушенные сферолиты пестрой окраски.

Технология. На стеклянную пластину нанесли 0,1 мл БИ и поместили ее в зону Мэйо-Робсона б-ной 3., выдержали на протяжении 1 мин, высушили в термостате при Т=+19°С на протяжении 2 мин и изучили в поляризованном свете с КК, видны разрушенные сферолиты пестрой окраски. Одновременно произвели УЗИ ПЖ: головка ≈35 мм, тело ≈21 мм, хвост ≈29 мм, контуры нечеткие, эхогенность снижена, структура диффузно-неоднородная, главный панкреатический проток расширен до 5 мм. Диагноз ХП подтвердился.

Пример 7, фиг.10. Б-ой Ф. Диагноз: ХП в стадии обострения. На фиг.10 присутствует пестрой окраски отросчатый сферолит со слабо выраженной радиально-лучевой ориентацией.

Технология. На стеклянную пластину нанесли 0,2 мл БИ, поместили ее в зону Мэйо-Робсона б.ф., выдержали на протяжении 2 мин, высушили в термостате при Т=+19°С на протяжении 3 мин и изучили в поляризованном свете с КК, виден отросчатый сферолит со слабо выраженной радиально-лучевой ориентацией. Одновременно произвели УЗИ ПЖ: головка ≈24 мм, тело ≈18 мм, хвост ≈25 мм, контуры неровные, эхогенность смешанная, структура диффузно-неоднородная, главный панкреатический проток расширен до 4 мм, пристеночно в области тела определяется группа мелких гиперэхогенных включений до 2 мм max. Диагноз ХП подтвердили.

Пример 8, фиг.11. Б-ой Ц. ИБ №198. Диагноз: ХП в стадии ремиссии. На фиг.11 присутствует отросчатый сферолит пестрой окраски со слабо выраженной радиально-лучевой ориентацией.

Технология. На стеклянную пластину нанесли 0,1 мл БИ, поместили ее в зону Мэйо-Робсона б-ого Ц., выдержали 2 мин, высушили в термостате при Т=+19°С на протяжении 2 мин и изучили в поляризованном свете с КК, виден отросчатый сферолит пестрой окраски со слабо выраженной радиально-лучевой ориентацией. Сделали УЗИ ПЖ: головка ≈22 мм, тело ≈16 мм, хвост ≈23 мм, контуры неровные, эхогенность повышена, структура диффузно-неоднородная с множественными гиперэхогенными зонами до 2-4 мм, панкреатический проток расширен до 4 мм. Диагноз ХП подтвердился.

Пример 9, фиг.12. Б-ой О. ИБ №28. Диагноз: ХП в стадии обострения. На фиг.12 приведены пестрой окраски разрушенные сферолиты.

Технология. На стеклянную пластину нанесли 0,2 мл БИ, поместили ее в зону проекции ПЖ (Мэйо-Робсона) б-ого О., высушили в термостате при T=+20°C, изучили в поляризованном свете с КК, видны пестрые разрушенные сферолиты. Одновременно произвели УЗИ ПЖ: головка ≈34 мм, тело ≈23 мм, хвост ≈32 мм, контуры четкие, эхогенность смешанная, структура диффузно-неоднородная. Диагноз ХП подтвердился.

Преимущества предложенного способа

1. Применение высокочувствительного биологического индикатора - маркера нарушенной структуры поджелудочной железы.

2. Высокая информативность и эффективность способа.

3. Нативность и физиологичность.

Технической сущностью изобретения является повышение информативности, достоверности.

Медико-биологический и социальный эффект применения способа заключается в его доступности и возможности проведения скрининговых исследований.

Способ экспресс-диагностики хронического панкреатита, включающий изучение излучения поджелудочной железы, отличающийся тем, что предварительно готовят биологический индикатор, состоящий из 0,1%-го водного раствора смеси аминокислот - аспарагиновой, глицина, триптофана, лейцина, валина, серина, фенилаланина, треонина, 0,5%-го водного раствора нейромедиатора дофамина, 12%-го водного раствора серно-кислой магнезии в соотношении 3:1:6, который наносят на стеклянную пластину, помещают на болевую зону Мэйо-Робсона левого реберно-позвоночного угла, выдерживают ее на протяжении 1-2 мин, сушат при Т=+18-20°С, исследуют в поляризованном свете с кварцевым компенсатором и при наличии в препарате деградированных сферолитов пестрой окраски - отросчатых со слабо выраженной радиально-лучевой ориентацией, размытых и разрушенных-диагностируют хронический панкреатит.